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CAMPO GRANDE – MS
2019/1º semestre
OBJETIVOS GERAIS
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1. Noções de microscopia.
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Os elétrons passam por uma lente magnética chamada
condensadora que os dirige em feixe uniforme na direção do
objeto, após atravessar o objeto muitos elétrons são
desviados passando por nova lente que corresponde à
objetiva do microscópio óptico. Uma terceira lente projeta os
elétrons sobre uma tela fluorescente (revestida por sulfeto de
zinco substância que emite luz ao ser excitada pelos elétrons)
onde se forma uma imagem visível ou sobre um filme
fotográfico que posteriormente sofre ampliação de 2 a 4
vezes.
As diferentes estruturas da célula desviam os elétrons
aparecendo em escuro, sendo chamadas elétron densas. Se
um componente celular desvia pequena percentagem de
elétrons aparecerá em tonalidade de cinza.
Fixação
A fixação tem a finalidade de evitar a autólise (autodigestão) das células, impede a ação de
bactérias, endurece o material para o processamento, possibilita uma afinidade das estruturas das
células pelos corantes.
A fixação é realizada através de fixação física ou química. A solução de formalina neutra
tamponada a 10 % é a mais utilizada, consiste de 10 volumes de formol comercial (40%
formaldeído em água) e 90 volumes de solução-tampão fosfato. O volume do fixador deve ser 10
vezes maior do que o volume fixado, e deve ser fixado por 24 a 48 horas.
Vários outros fixadores são utilizados conforme as estruturas a ser estudadas, assim como o
álcool etílico, ácido acético, ácido pícrico (Líquido de Bouin), ácido crômico, ácido ósmico, cloreto
de mercúrio. O fixador de Bouin formado por uma mistura de ácido pícrico, formaldeído a 40% e
ácido acético glacial é melhor e tem fixação mais rápida (4 a 6 horas), entretanto, é mais caro e
mais difícil de se preparar.
O tetróxio de ósmio e o glutaraldeído são os fixadores mais usados em microscopia eletrônica
porque coagulam as proteínas, causando modificações mínimas na estrutura celular.
Após a fixação seleciona-se fragmentos de 1 a 2 cm por 2 a 3 mm.
A amostra é desidratada em concentrações crescentes de álcool até o álcool absoluto. Em
seguida o tecido é diafanizado em xilol que é solúvel no agente desidratante, substituindo-o.
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Inclusão
Microtomia
Os blocos de parafina são montados num micrótomo, aparelho capaz de realizar cortes finos
possibilitando estudar minúcias e detalhes dos tecidos e das células. Os cortes finos são
realizados a espessura de 3 a 6 m, cortes semifinos apresentam a espessura de 0,5 a 1,0 m e
os ultrafinos espessura abaixo de 0,5 m ( 0,02 a 0,1 m para a microscopia eletrônica).
Quando se deseja estudar lipídios se emprega o micrótomo de congelação onde o tecido é
endurecido por congelação, permitindo a obtenção rápida de cortes que não passam pelas outras
etapas em que o etanol e xilol atuariam como solventes de lipídios retirando-os dos tecidos.
Coloração
Montagem
Após a coloração do fragmento, o mesmo é preparado para ficar preservado entre lâmina e
lamínula, montando-se com Entelan. A lâmina assim montada poderá ser guardada por tempo
indefinido.
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2.2 Interpretação dos Cortes
O fragmento de tecido cujo comprimento é maior do que a largura, pode ser cortado nos planos:
Artefatos
Representam algum tipo de falha causado por erro de técnica. Dentre eles podem ocorrer:
degeneração pós-mortem, retração, precipitados, dentes da navalha do micrótomo, dobras e
pregas.
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3. Tecido Epitelial.
3.1 Tecido Epitelial de Revestimento
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Lâmina K3: Epidídimo–H.E.
Conteúdo: Epitélio de Revestimento Pseudoestratificado Cilíndrico com estereocílios.
Observar: Única camada de células basais arredondadas e cilíndricas com estereocílios que
são imóveis.
Identificar, desenhar e nomear:
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3.2 Tecido Epitelial Glandular.
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3.2.2 Glândulas Endócrinas
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4.Tecido Conjuntivo
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4.2 Células do tecido conjuntivo
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Lâmina G1 -Pele Espessa ou Glabra : - Derme Papilar -H.E.
Conteúdo: Tecido conjuntivo frouxo
Observar: Situado abaixo do epitélio o tecido apresenta fibras colágenas e elásticas, longas e
de trajeto tortuoso coradas em róseo, espaços lavados correspondem a Substância
Fundamental e células do tecido conjuntivo. Apresenta todos os elementos estruturais do
conjuntivo propriamente dito não havendo predominância de nenhum dos seus componentes.
Identificar, desenhar e nomear:
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Lâmina B6: Tecido Adiposo – H.E.
Conteúdo: Tecido adiposo unilocular e tecido adiposo multilocular
Observar: Célula adiposa unilocular apresenta o citoplasma lavado pela preparação histológica
com a presença de vacúolo deixado pela gotícula lipídica removida pelo álcool e xilol. São
grandes, esféricas e apresentam o núcleo achatado e deslocado para a periferia.
Célula adiposa multilocular que é menor, com forma poligonal, o citoplasma apresenta gotículas
lipídicas de vários tamanhos, o núcleo é arredondado geralmente situado no centro da célula.
Identificar, desenhar e nomear:
5. Tecido Cartilaginoso
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Lâmina I 5: Epiglote – H.E.
Conteúdo: Cartilagem Elástica
Observar: Apresenta aspecto semelhante à cartilagem hialina, apresentando todos os seus
componentes, com fibras elásticas contínuas com a do pericôndrio, coradas em róseo.
Identificar, desenhar e nomear:
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6. Tecido Ósseo
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Lâmina A3 : Ossificação intramembranosa – H.E.
Conteúdo: Ossificação intramembranosa
Observar: Diferenciação de células mesenquimais da membrana conjuntiva em osteoblastos, no
centro de ossificação primária ou blastema ósseo. As células mesenquimais fusiformes tornam-
se globosas, com citoplasma basófilo, originando osteoblastos que sintetizam matriz óssea. Os
osteoblastos em intensa atividade são cubóides e tornam-se achatados, com menor basofilia
citoplasmática. Os osteoblastos englobados pela matriz óssea passam a ser denominados
osteócito, observados nas trabéculas ósseas formadas. A parte da membrana conjuntiva que
não sofre ossificação forma o periósteo que recobre o tecido ósseo.
Identificar, desenhar e nomear:
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7. Tecido Muscular
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Lâmina : Esôfago Ave – H.E.
Conteúdo: Músculo liso.
Observar: Camada muscular em corte longitudinal, formada por células longas fusiformes, sem
estriações transversais, com um único núcleo de forma alongada, localizado no centro da célula.
Em corte transversal os núcleos são esféricos e escuros localizados no centro da célula.
Identificar, desenhar e nomear:
8.Tecido Nervoso
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Lâmina D3 : Medula espinhal – H.E.
Conteúdo: Sistema Nervoso Central
Observar :
• Medula espinhal: em corte transversal, a substância branca formada por fibras mielínicas
se localiza externamente e a substância cinzenta, internamente, em forma de letra H ou
borboleta.
O H apresenta um corno anterior ou ventral, mais volumoso, onde observa-se os neurônios
motores e núcleos de células da neuroglia. No corno motor pode-se visualizar os neurônios
motores multipolares, em cujos corpos celulares apresentam os Corpúsculos de Nissl com
aspecto granular e coloração basofílica.
O corno mais afilado é denominado dorsal ou posterior e corresponde a porção sensitiva.
No centro da substância cinzenta encontra-se o canal central da medula revestido pelas células
ependimárias cilíndricas que representa a luz do tubo neural embrionário.
• Envolvendo a medula encontram-se as meninges, de tecido conjuntivo: pia-máter,
membrana conjuntiva vascularizada, em contato com a substância branca; aracnóide,
membrana conjuntiva fina com revestimento de epitélio simples pavimentoso entre a pia-
máter e dura-máter que é a mais externa formada por tecido conjuntivo denso modelado.
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Lâmina D2 : Cerebelo – H.E.
Conteúdo: Sistema Nervoso Central
Observar: As dobras existentes nos lóbulos do cerebelo com uma parte superficial de
substância cinzenta, o córtex cerebelar.
O córtex apresenta três camadas:
• Camada molecular: mais externa, com poucos neurônios e muitas fibras amielínicas.
• Camada das células de Purkinje: única fileira de células grandes com dendritos bastante
ramificados na direção da camada molecular, neurônio piriforme.
• Camada granulosa: grande quantidade de pequenos neurônios, apenas os núcleos são
bem observados.
Região Medular : Eixo central de substância branca, a medula composta por fibras mielínicas e
núcleos das células da glia.
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Lâmina D5 : Gânglio Nervoso Sensitivo - H.E.
Conteúdo: Sistema Nervoso Periférico
Observar:: Apresenta neurônios esferoidais, com núcleo grande, nucléolo evidente e citoplasma
basófilo. Envolvendo os neurônios estão núcleos de células satélites. Presença de fibras
nervosas e tecido conjuntivo.
Identificar, desenhar e nomear:
9 Sistema Cardiovascular
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Lâmina E1 Coração: Vasos Sanguíneos – H.E.
Conteúdo: Artérias e Veias
Observar:
• Artérias musculares ou de médio calibre: limitante elástica interna bem desenvolvida,
túnica íntima pregueada formada por endotélio e conjuntivo subendotelial, camada média
com células musculares lisas dispostas concentricamente e a adventícia com vasa
vasorum.
• Arteríolas: endotélio e conjuntivo na túnica íntima, camada média com até 5 camadas de
células musculares lisas, e túnica adventícia sem vasa vasorum.
• Veias de pequeno e médio calibre: apresentam válvulas como pares de dobras da
camada íntima, em forma de semilua que fazem saliência para a luz do vaso, túnica
média delgada com poucas células musculares lisas, túnica adventícia moderadamente
espessa com fibras colágenas e elásticas.
Identificar, desenhar e nomear:
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10. Tecido Sanguíneo e Hemocitopoese
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BIBLIOGRAFIA BÁSICA
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