KEY-CODE: FRI17157

80540 INNO-LIA HIV I/II Score

B30594 v4
2016-07-18
p 1/12
Português

INNO-LIA HIV I/II Score

0459

Fabricado por: Atenção às alterações realçadas

Fujirebio Europe N.V.

Technologiepark 6
9052 Gent
Belgium
Tel. +32 9 329 13 29
BTW BE 0427.550.660
RPR Gent
Distribuído por:
Fujirebio Europe N.V. Fujirebio Italia S.r.l.
Tel. +32 9 329 13 29 Tel. +39 06 965 28 700
Fax +32 9 329 19 11 Fax +39 06 965 28 765
customer.support@fujirebio-europe.com italy@fujirebio-europe.com

Fujirebio Germany GmbH Fujirebio Iberia S.L.

Tel. +49 511 857 3931 Tel. +34 93 270 53 00
Fax +49 511 857 3921 Fax +34 93 270 53 17
germany@fujirebio-europe.com spain@fujirebio-europe.com

Fujirebio France SARL

Tel. +33 1 69 07 48 34
Fax +33 1 69 07 45 00
france@fujirebio-europe.com

© Fujirebio Europe N.V.

80540 INNO-LIA HIV I/II Score / B30594 v4 / FRI17157 p 2/12

ÍNDICE
Símbolos utilizados ................................................................................................................................... 2 
Utilização recomendada ............................................................................................................................ 3 
Princípio do teste ....................................................................................................................................... 3 
Reagentes ................................................................................................................................................. 3 
Descrição, preparação de utilização e condições de armazenamento recomendadas ...................... 3 
Material necessário, mas não fornecido ................................................................................................... 4 
Segurança e ambiente .............................................................................................................................. 4 
Amostra (recolha e manuseamento)......................................................................................................... 5 
Observações e precauções ...................................................................................................................... 5 
Procedimento de teste manual ................................................................................................................. 6 
Instruções para as lavagens ................................................................................................................ 7 
Directrizes de incubação ...................................................................................................................... 7 
Procedimento automático de teste............................................................................................................ 8 
Resultados................................................................................................................................................. 8 
Leitura ................................................................................................................................................... 8 
Validação .............................................................................................................................................. 8 
Interpretação dos resultados ................................................................................................................ 9 
Software de interpretação: LiRAS para doença infecciosas.............................................................. 10 
Limites do procedimento ......................................................................................................................... 10 
Desempenho do teste ............................................................................................................................. 10 
Sensibilidade ...................................................................................................................................... 10 
Especificidade .................................................................................................................................... 11 
Reprodutibilidade................................................................................................................................ 12 
Marcas comerciais .................................................................................................................................. 12 
Símbolos utilizados

Fabricante

Dispositivo médico para diagnóstico in vitro

Código do lote
Número de catálogo

Prazo de validade

Consultar as instruções de utilização

Limites de temperatura

Riscos biológicos

Conteúdo suficiente para <n> ensaios

Conjugado
Controlo negativo
Controlo positivo
Diluente da amostra
Solução de paragem
Tiras
80540 INNO-LIA HIV I/II Score / B30594 v4 / FRI17157 p 3/12

Substrato BCIP/NBT
Solução de lavagem 5x
Perigo
Atenção
Imunoensaio em tira

Utilização recomendada
O INNO-LIA HIV I/II Score é imunoensaio em linha (LIA) para confirmar a presença de anticorpos
contra o vírus de imunodeficiência humana de tipo 1 (HIV-1), incluindo o grupo O, e de tipo 2 (HIV-2)
em plasma ou soro humano. O INNO-LIA HIV I/II Score faz também a diferenciação entre infecções
HIV-1 e HIV-2. Serve como teste suplementar para amostras reactivas a um procedimento de
despiste anti-HIV.
Princípio do teste
As proteínas recombinantes e os péptidos sintéticos de HIV-1 e HIV-2, e um péptido sintético do
grupo HIV-1 O estão impregnados em 6 bandas distintas numa tira de nylon sobre um suporte de
plástico.
São aplicados cinco antigénios HIV-1: sgp120 e gp41, que detectam anticorpos específicos para
HIV-1; p31, p24 e p17, que podem também reagir com anticorpos para HIV-2. Os péptidos do grupo
O do HIV-1 estão presentes na banda HIV-1 sgp120. Os antigénios gp36 e sgp105 são aplicados
para detectar anticorpos para HIV-2.
Além destes antigénios HIV, foram impregnadas quatro bandas de controlo em cada tira: linha de
controlo de fundo, banda de cut-off ± (IgG humana), banda de controlo positivo 1+ (IgG humana)
e uma banda de controlo positivo 3+ forte, que é também a banda de controlo de adição de amostra
(anti IgG humana). O INNO-LIA HIV I/II Score baseia-se no imunoensaio enzimático. A amostra de
teste é incubada num teste juntamente com a tira de teste impregnada de antigénio. Se existirem na
amostra, os anticorpos HIV ligam-se às bandas de antigénio de HIV individuais da tira.
Em seguida, é adicionada uma IgG anti-humana de cabra marcada com fosfatase alcalina, que se
liga a qualquer complexo de antigénio/anticorpo HIV formado previamente. A incubação com
substrato enzimático (BCIP/NBT) produz uma cor castanha escura proporcional à quantidade do
anticorpo HIV presente na amostra. O desenvolvimento da cor é parado com ácido sulfúrico.
Se a amostra não contiver anticorpos específicos HIV, o anticorpo anti-humano não se liga ao
complexo de antigénio/anticorpo pelo que se forma apenas uma pequena cor de fundo padrão.
Reagentes
Descrição, preparação de utilização e condições de armazenamento recomendadas
- Todos os reagentes, abertos ou fechados, permanecem estáveis até à data de validade, se os
mantiver a uma temperatura entre 2 - 8°C. Não congele os reagentes. Não utilizo o kit para além
do prazo de validade.
- Deve retirar todos os reagentes e o tubo de plástico com as tiras de teste da caixa e deixá-los à
temperatura ambiente (18 - 25°C) 60 minutos antes da utilização. Deve colocar todos os
reagentes e o tubo das tiras no frigorífico (2 - 8°C) imediatamente após a utilização.
- Alterações na aparência física dos reagentes do kit podem indicar instabilidade ou deterioração.
Reagentes fornecidos:
Componente Quantidade Ref. Descrição
Tiras 20 57330 20 tiras de teste INNO-LIA impregnadas de antigénio HIV.
Diluente da amostra 30 mL 57304 Tampão de fosfato com código de cores (verde) com cloreto
de sódio, detergente, estabilizadores de proteínas bovinas e
0.3% de clorocetamida (CAA) como conservante.
80540 INNO-LIA HIV I/II Score / B30594 v4 / FRI17157 p 4/12

Componente Quantidade Ref. Descrição

Controlo negativo 0.12 mL 57307 Matriz de base de origem humana com 0.01% de MIT/
<0.1% de CAA como conservante.
Controlo positivo 0.12 mL 57306 Soro humano inactivo positivo para anticorpos para HIV
com 0.01% de MIT/<0.1% de CAA como conservante.
Conjugado pronto a 45 mL 57301 Anti IgG humana de cabra com código de cores (vermelho)
utilizar marcada com fosfatase alcalina em tampão Tris com
estabilizadores de proteínas bovinas, detergente e
0.01% de MIT/<0.1% de CAA como conservante.
Substrato BCIP/NBT 45 mL 57302 BCIP/NBT em dimetilformamida com 0.01% de MIT/
pronto a utilizar <0.1% de CAA como conservante.
Solução de paragem 45 mL 57303 Ácido sulfúrico a 0.1 mol/L.
Solução de lavagem 5x 45 mL 57299 Tampão Tris com código de cores (azul) com cloreto de
sódio, detergente e 0.02% de bromonitrodioxane como
conservante, a diluir 5x em água destilada. A solução de
lavagem diluída permanece estável durante 2 semanas, se
a mantiver a uma temperatura entre 2 – 8°C.
Tabuleiro de teste 2 - Com 11 cavidades cada.
Selantes adesivos 5 -
Folha de relatório de 1 - Para guardar tiras processadas.
dados
Cartão de leitura 1 - Para identificar bandas de antigénios reactivos.

Material necessário, mas não fornecido

- Água destilada ou desionizada.
- Luvas descartáveis.
- Pipetas de precisão com pontas descartáveis capazes de fornecerem 10 µL, 20 - 200 µL e
200 - 1000 µL, respectivamente.
- Agitador orbital ou oscilador (ver Instruções de Incubação).
- Agitador de vórtice ou equivalente.
- Provetas graduadas: 10, 25, 50 e 100 mL.
- Pinças para manipulação das tiras.
- Cronómetro.
- Opcional:
 ventoinha de ar quente (secador de cabelo) ou incubador seco a 37ºC.
 pipeta de repetição juntamente com frascos descartáveis para a adição de solução de
paragem, conjugado, substrato e solução de lavagem.
 Aspirador de vácuo com uma solução de 5% de hipoclorito de sódio numa garrafa de resíduos.

Segurança e ambiente
Ter em atenção a Folha de Dados de Segurança (FDS) e os rótulos do produto para
informações sobre componentes potencialmente perigosos. A versão mais recente da FDS
está disponível no site Web: www.fujirebio-europe.com.
atençao
Contém 2-cloroacetamida
H317 P261 P280 P302+P352 P333+P313 P362+P364
perigo
Contém N,N-dimetilformamida
H360D P280 P201 P308+P313 P303+P361+P353 P305+P351+P338
80540 INNO-LIA HIV I/II Score / B30594 v4 / FRI17157 p 5/12

Advertências de perigo
H317 Pode provocar uma reacção alérgica cutánea.
H360D Pode afectar o nascituro.
Recomendações de prudência
P201 Pedir instruções específicas antes da utilização.
P261 Evitar respirar as névoas/vapores/aerossóis.
P280 Usar luvas de protecção/vestuário de protecção/protecção ocular/ protecção
facial.
P302+P352 SE ENTRAR EM CONTACTO COM A PELE: lavar abundantemente com
água/…
P303+P361+P353 SE ENTRAR EM CONTACTO COM A PELE (ou o cabelo): retirar
imediatamente toda a roupa contaminada. Enxaguar a pele com água/tomar
um duche.
P305+P351+P338 SE ENTRAR EM CONTACTO COM OS OLHOS: enxaguar cuidadosamente
com água durante vários minutos. Se usar lentes de contacto, retire-as, se tal
lhe for possível. Continuar a enxaguar.
P308+P313 EM CASO DE exposição ou suspeita de exposição: consulte um médico.
P333+P313 Em caso de irritação ou erupção cutânea: consulte um médico.
P362+P364 Retirar a roupa contaminada e lavá-la antes de a voltar a usar.
- O procedimento de teste deve ser realizado apenas por pessoal com a formação e as
qualificações adequadas.
- As amostras e os controlos negativos e positivos deverão ser sempre manuseados como sendo
potencialmente infecciosos.
- O controlo positivo foi determinado como sendo negativo para anti-HCV e HBsAg. O controlo
negativo foi determinado como sendo negativo para anti-HIV-1/HIV-2, anti-HCV e HBsAg.
Nenhum método de teste pode no entanto assegurar que os produtos sanguíneos não poderão
transmitir agentes infecciosos. Todos os componentes sanguíneos e materiais biológicos devem
ser considerados como sendo potencialmente infecciosos e devem ser manipulados em
conformidade. Todas os componentes sanguíneos e materiais biológicos devem ser eliminados
em conformidade com os procedimentos de segurança estabelecidos.
 Realize uma autoclavagem durante pelo menos 15 minutos a 121°C.
 Incinere o material descartável.
 Misture os resíduos líquidos com hipoclorito de sódio para que a concentração final seja de
± 1% hipoclorito de sódio. Deixe em repouso durante a noite antes de eliminar.
CUIDADO: Neutralize o líquido residual que contenha ácido antes de adicionar o hipoclorito de
sódio.
- Utilize equipamento de protecção pessoal: luvas e óculos de segurança quando manipular
agentes perigosos ou infecciosos.
- Os resíduos devem ser manipulados de acordo com as directivas de eliminação de resíduos da
instituição. Deve cumprir todos os regulamentos ambientais, federais, locais e nacionais.
- Não aspire a solução de paragem de uma garrafa de resíduos, que contém hipoclorito de sódio.
Amostra (recolha e manuseamento)
- O INNO-LIA HIV I/II Score pode ser realizado em soro ou plasma humano recolhido em tubos
com citrato, heparina ou EDTA, como anticoagulantes.
- Antes da conservação, o soro ou o plasma devem ser separados do coágulo ou das células
sanguíneas por centrifugação.
- Conserve as amostras a uma temperatura entre 2 - 8°C. Para conservação superior a uma
semana, congele a -20°C ou inferior.
- Não utilize amostras tratadas pelo calor.
- As amostras congeladas e descongeladas repetidamente (mais de 3 vezes) podem produzir
resultados incorrectos.
Observações e precauções
- Não misture reagentes com números de lote diferentes.
80540 INNO-LIA HIV I/II Score / B30594 v4 / FRI17157 p 6/12

- Os reagentes congelados, por exemplo, armazenados junto a elemento de arrefecimento, podem

provocar resultados errados.
- Certifique-se de que utiliza os tempos de lavagem e volume de amostra correctos para o
procedimento.
- Evite a contaminação microbiana dos reagentes.
- Certifique-se de que as amostras e os controlos são homogéneos antes da utilização.
- Não toque na membrana da tira. Manipule as tiras sempre com o suporte de plástico.
- Utilize uma nova ponta de pipeta para cada amostra.
- Certifique-se de que as tiras de teste são colocadas nas cavidades com o lado da membrana
virado para cima.
- Todos os passos da incubação devem ser realizados com um agitador orbital ou oscilador (utilize
o oscilador apenas para a incubação nocturna).
A agitação das soluções sobre as tiras é importante para a obtenção de uma coloração uniforme
das bandas e a máxima sensibilidade.
A superfície da tira deve ficar completamente submersa durante a agitação.
- Cubra as cavidades com um selante adesivo para evitar a secagem das tiras durante a incubação
da amostra.
- As tiras não utilizadas ou processadas devem ser mantidas ao abrigo de luz forte e do calor.
- Este kit só deve ser utilizado por pessoal com formação em práticas clínicas de laboratório.
- A reutilização de tiras ou cavidades conduz a resultados incorrectos.
- As tiras cortadas conduzem a interpretações de resultados incorrectas.
Procedimento de teste manual
Leia atentamente Limites e precauções antes de realizar o teste.
- incubação de amostra de 16 horas
1. Retire o número necessário de calhas de teste.
2. Para cada série de testes, pode analisar um controlo positivo e um controlo negativo para
efeitos de controlo interno.
3. Identifique as calhas de teste como amostras (e controlos) e coloque-as no tabuleiro.
4. Certifique-se de que a amostra do doente ou controlo não se derrama sobre as outras calhas.
Adicione cuidadosamente a amostra de controlo ou do doente e os reagentes durante o
procedimento de teste manual completo para evitar a contaminação cruzada.
5. Adicione 1 mL de diluente da amostra a cada cavidade de teste.
6. Adicione 10 µL da amostra ou do controlo às cavidades devidamente rotuladas.
7. Remova a quantidade necessária de tiras de teste do recipiente e coloque uma tira em cada
uma das cavidades de teste. A tira de teste é colocada com o lado da membrana virado para
cima na cavidade com uma pinça. AS TIRAS DEVEM FICAR COMPLETAMENTE
SUBMERSA.
8. Cubra as cavidades com um selante adesivo (ver “Observações e precauções”). Incube as
amostras, colocando o tabuleiro num agitador ou oscilador (ver “Directrizes de incubação”), e
agite DE UM DIA PARA O OUTRO (16 ± 2 h) à temperatura ambiente (de 18 - 25°C).
NOTA: Remova cuidadosamente os selantes adesivos para evitar contaminação cruzada.
9. Lave cada tira de teste 3 vezes (5 minutos) com 1 mL de solução de lavagem
(ver “Instruções para as lavagens”).
10. Adicione 1 mL de solução de conjugado a cada cavidade de teste.
11. Incube com o conjugado, colocando o tabuleiro de teste no agitador ou oscilador, e agite
durante 30 minutos à temperatura ambiente (de 18 - 25°C).
12. Lave cada tira de teste 3 vezes (5 minutos) com 1 mL de solução de lavagem
(ver “Instruções para as lavagens”).
13. Adicione 1 mL de solução de substrato a cada cavidade de teste.
14. Incube com o substrato, colocando o tabuleiro de teste no agitador ou oscilador, e agite
durante 30 minutos à temperatura ambiente (de 18 - 25°C).
15. Aspire o líquido. Adicione 1 mL de solução de paragem a cada cavidade.
80540 INNO-LIA HIV I/II Score / B30594 v4 / FRI17157 p 7/12

16. Incube com a solução de paragem, colocando a cavidade teste no agitador ou oscilador,
e agite durante 10 - 30 minutos à temperatura ambiente (de 18 - 25°C).
17. Aspire a solução de paragem.
18. Retire as tiras das cavidades de teste e coloque-as, com o lado da membrana virado para
cima, sobre papel absorvente com uma pinça. Quando as tiras secarem completamente, pode
interpretar os resultados.
Para acelerar o processo de secagem, coloque as tiras numa estufa a 37°C durante
30 minutos ou utilize um secador durante 1 minuto. As tiras processadas mantêm a cor desde
que sejam conservadas num local escuro.
- incubação de amostra de 3 horas
- O protocolo da "incubação de amostra de 3 horas" deve seguir os 18 passos do procedimento de
teste da "incubação de amostra de 16 horas", mas deve ter em conta as alterações aos passos 6,
8, 9 e 12. O volume da amostra para controlos e amostras aumenta de 10 para 20 µL (passo 6) e
o tempo de incubação de amostra muda para 3 horas (passo 8). A lavagem após a incubação de
amostra muda para o procedimento de 3 horas para 3 vezes 6 minutos (passo 9); por fim, a
segunda lavagem é 3 vezes 3 minutos para a incubação de amostra de 3 horas (passo 12).
Resumo dos procedimentos de teste com as diferenças realçadas (negrito) fornecidas na tabela
seguinte:
Incubação de amostra de 16 horas Incubação de amostra de 3 horas
Diluente da amostra 1 mL 1 mL
Amostra 10 µL 20 µL
Controlos 10 µL 20 µL
Tiras de teste LIA 16 horas ± 2 horas 3 horas
Lavagem 1 mL/3 x 5 min 1 mL/3 x 6 min
Conjugado RTU* 1 mL/30 min 1 mL/30 min
Lavagem 1 mL/3 x 5 min 1 mL/3 x 3 min
Substrato RTU* 1 mL/30 min 1 mL/30 min
Solução de paragem 1 mL/10 - 30 min 1 mL/10 - 30 min
*RTU = Ready-to-use = pronto a utilizar
Instruções para as lavagens
- Depois de uma incubação nocturna e de 3 horas, remova cuidadosamente o selante adesivo.
- O líquido é aspirado da cavidade com uma pipeta, de preferência ligada a um aspirador de vácuo,
que contém uma solução a 5% de hipoclorito de sódio, para uma garrafa de resíduos. O tabuleiro
é mantido num ângulo que permite que o líquido escorra para um lado da cavidade (para a parte
do suporte plástico não impregnada de cada tira).
- Adicione 1 mL de solução de lavagem diluída a cada cavidade e agite num agitador ou oscilador.
O tempo de agitação é indicado no procedimento do ensaio.
- Repita estes passos tantas vezes quantas as indicadas no procedimento de teste.
- NOTA:
 Não permita que as tiras sequem entre os passos de lavagem.
 Certifique-se de que não danifica a superfície das tiras de teste durante a aspiração.
 Use sempre um dispositivo de aspiração limpo com um desinfectante para evitar
contaminações cruzadas.
 Certifique-se de que a tira foi cuidadosamente lavada por submersão completa na solução de
lavagem.
 Adapte a velocidade do agitador ou oscilador, quando necessário.
 Evite salpicos de solução de lavagem sobre os limites dos poços teste.

Directrizes de incubação
- Todos os passos de incubação (amostra, conjugado, substrato e solução de paragem) e também
os passos de lavagem devem ser realizados num agitador ou oscilador (utilize o oscilador para a
incubação de amostra nocturna).
80540 INNO-LIA HIV I/II Score / B30594 v4 / FRI17157 p 8/12

- A superfície da tira deve estar completamente submersa com o lado da membrana virado para
cima durante os passos de incubação e de lavagem.
- O agitador ou oscilador deve permitir um movimento recíproco (de vaivém) das tiras na cavidade
e um movimento do líquido sobre as tiras sem transbordar da cavidade.
- As velocidades geradas por um agitador ou um oscilador são críticas para a obtenção de uma
linha de coloração homogénea e da sensibilidade máxima.
Recomendações para um agitador orbital:
 o diâmetro do movimento circular deve ser igual ou superior a 13 mm
 a velocidade recomendada para um movimento circular de 13 mm é de 160 rpm
 a velocidade recomendada para um movimento circular de 24 mm é de 90 rpm.

Recomendações para um oscilador:

 A velocidade recomendada para um ângulo de oscilação de 9° é 34 rpm.

Procedimento automático de teste

Os instrumentos e protocolos associados estão disponíveis pela Fujirebio Europe N.V.
(ver www.fujirebio-europe.com/automation).
Resultados
Leitura
A identidade e a localização dos antigénios e controlos impregnados na tira são:

Figura 1: Tira de teste INNO-LIA HIV I/II Score

A intensidade da reacção nas linhas de controlo de cada tira é utilizada para estabelecer os índices
de reactividade para cada antigénio naquela tira:
Intensidade da linha de reacção do antigénio (R) Índice
Menor que ± R<± -
Igual a ± R=± ±
Maior que ± mas menor ou igual a 1+ ± < R 1+ 1+
Maior que 1+ mas menor que 3+ 1+ < R < 3+ 2+
Igual a 3+ R = 3+ 3+
Maior que 3+ R > 3+ 4+

Tem de realizar um índice de reactividade independente para cada tira. Para uma interpretação
correcta, use o cartão de leitura. A identificação das linhas é obtida pelo alinhamento da linha de
controlo 3+ da tira em teste com a linha de controlo 3+ do cartão de leitura.
Validação
Antes de ler os resultados dos testes, deve verificar a validade dos níveis de controlo em cada tira
que devem cumprir os seguintes critérios.
Validação de uma tira individual:
1. Os níveis de controlo 1+ e ±, assim como o nível de controlo positivo forte 3+ devem ser visíveis.
80540 INNO-LIA HIV I/II Score / B30594 v4 / FRI17157 p 9/12

2. A intensidade do nível de controlo 3+ deve ser maior do que a do nível 1+ e a intensidade do nível
1+ deve ser maior do que a do nível ±.
3. A linha de controlo de fundo deve ter uma classificação negativa.
Em caso de análise dos controlos positivo e negativo, deve verificar a validade das tiras dos
controlos positivo e negativo antes de ler os resultados dos testes e cumprir os critérios seguintes.
1. A tira do controlo positivo tem de mostrar uma reacção de pelo menos 1+ em sgp120, gp41, p31,
p24 e gp36. A banda de antigénios p17 e sgp105 pode apresentar um índice negativo.
2. A tira de controlo negativo deve mostrar um índice negativo (nenhuma reacção ou, pelo menos,
reacção inferior ao nível de controlo ±) para todas as linhas de antigénio HIV.
- NOTA:
 A tira deve estar completamente seca para evitar qualquer má interpretação derivada de
bandas fracamente visíveis que aparecem depois da adição da solução de paragem.
 Não coloque papel sobre as tiras enquanto estiverem húmidas.
 As bandas de controlos fracas podem ser observadas para amostras com elevados níveis de
IgG (acima do intervalo IgG normal).
 No caso de resultados imprevistos ou quando suspeitar de um erro no procedimento de teste,
deve repetir o teste e incluir um controlo positivo e um controlo negativo numa nova série de
testes.
Interpretação dos resultados
Avaliações extensivas mostraram que os resultados podem ser interpretados da seguinte forma:
Uma linha é determinada como sendo positiva, se houver um índice mínimo de 1+.
ENV1 = linha do envelope para HIV-1: sgp120 e gp41
ENV2 = linha do envelope para HIV-2: sgp105 e gp36
NEG = NEGATIVO para anticorpos HIV
IND = INDETERMINADO para anticorpos HIV
POS = POSITIVO para anticorpos HIV
Sem linhas positivas Sem linha ± NEG
1 linha ± NEG
2 ou mais linhas ± IND
1 linha positiva ( 1+) IND
2 linhas positivas ( 1+) Sem ENV positivo IND
1 ENV1 e p24 HIV-1 (*)
2 ENV1 HIV-1 (****)
1 ENV2 e p24 HIV-2 (**)
2 ENV2 HIV-2
Outras combinações IND
3 ou mais linhas positivas ( 1+) Sem ENV positivo IND
1 ENV1 e 1 ENV2 HIV
1 ou 2 ENV1
1ENV1 HIV-1 (*)
2ENV1 HIV-1
1 ou 2 ENV2
1ENV2 HIV-2 (**)
2ENV2 HIV-2
2 ENV1 e 1 ENV2 HIV-1
1 ENV1 e 2 ENV2 HIV-2
2 ENV1 e 2 ENV 2 HIV(***)
(*) Se for obtida uma classificação de ± em ambas as linhas de antigénio ENV2, a amostra é
positiva para HIV mas não tipável.
(**) Se for obtida uma classificação de ± em ambas as linhas de antigénio ENV1, a amostra é
positiva para HIV mas não tipável.
(***) É necessária a avaliação de uma amostra de seguimento com métodos de teste alternativos
(ex. PCR) para confirmar uma infeção por HIV-1 e/ou HIV-2.
(****) Ver “Limites do procedimento”
80540 INNO-LIA HIV I/II Score / B30594 v4 / FRI17157 p 10/12

Software de interpretação: LiRAS para doença infecciosas

O LiRAS para software de doenças infecciosas foi concebido para ajudar na interpretação dos
resultados da LIA. Para obter a versão actualizada mais recente, contacte o distribuidor local.
AVISO: Não utilize a interpretação automatizada sem ter em conta a limitação do procedimento
mencionados em seguida.
Limites do procedimento
- O protocolo fornecido deve ser rigorosamente seguido para obter um desempenho óptimo do
teste.
- Uma amostra que dê uma reacção positiva na linha de controlo de fundo pode dar reacções
cruzadas com outras linhas de antigénio HIV e não pode ser determinada como positiva para
anticorpos HIV.
- Se obtiver um resultado indeterminado ou não tipável, recomendamos que teste uma amostra
adicional do doente após algumas semanas.
- É necessária a análise de uma amostra de seguimento se a atribuição de positividade para HIV se
baseia na classificação positiva de apenas duas bandas de antigénio. Caso se observe
reatividade nas linhas sgp120 e gp41 (independentemente da reatividade na linha de controlo de
fundo), é possível que tenha ocorrido uma reatividade inespecífica com algum tipo de anticorpos
anti-estreptavidina. Recomenda-se teste adicional com outros métodos.
- Um resultado negativo não exclui a possibilidade de exposição ao HIV ou a infecção com o vírus.
- A utilização das amostras diluídas pode dar resultados incorrectos.
- As amostras de alguns doentes podem produzir uma reatividade com intensidade similar para
todas as linhas de antigénios (em alguns casos, juntamente com a linha de controlo de fundo) na
tira (as chamadas linhas de tampão). Quando estas reatividades têm a mesma intensidade à volta
do nível de corte (classificação ±), deve interpretar os resultados conforme indicado abaixo:
 Reatividade igual em todas as linhas de antigénios (em alguns casos juntamente com a linha
de controlo de fundo) entre o nível de corte (classificação ±) e a classificação 1+ é considerada
como INVÁLIDA e recomendamos testes adicionais com outros métodos de teste.
 Reatividade igual em todas as linhas de antigénios inferior ao nível de corte (classificação ±)
é considerada como NEGATIVA desde que a reatividade da linha de controlo de fundo também
esteja abaixo do nível de corte.
 Reatividade igual em todas as linhas de antigénios mais elevada do que o nível 1+ é
considerada como POSITIVA desde que a reatividade da linha de controlo de fundo esteja
abaixo do nível de corte.
Desempenho do teste
Sensibilidade
Painéis de seroconversão/painéis de baixo título
Foram analisados 12 painéis de seroconversão BBI (PRB 903, 904, 908, 910, 912, 916, 919, 922,
923, 924, 925, 927, incluíndo 25 amostras de seroconversão precoce) e 3 painéis de baixo título
(PRB 103 - 105, incluíndo 17 amostras de seroconversão precoce) internamente no INNO-LIA HIV
I/II Score com o procedimento de incubação de amostra de 3 horas Auto-LIA e o procedimento
manual de 16 horas. Estes resultados foram comparados com o método Western blot (Tabela 1 e
Tabela 2). Todos os paineís de seroconversão começaram com sangramento negativo e tiveram
intervalo de sangramento estritos.
80540 INNO-LIA HIV I/II Score / B30594 v4 / FRI17157 p 11/12

Tabela 1: Visão geral dos resultados dos painéis de seroconversão BBI

Detecção de painéis de seroconversão por Western Blot
Ensaio Mais cedo Igual Mais tarde
INNO-LIA HIV I/II Score (Procedimento 3 horas Auto-LIA)* 2 9 0
INNO-LIA HIV I/II Score (Procedimento manual 16 horas)* 2 9 0
Observação*: Um painel (PRB924) não deu resultado positivo em nenhum dos testes, não sendo
incluído nesta visão geral.
Tabela 2: Visão geral dos painéis de título baixo BBI
Numero de positives detectados amostras/painel
Ensaio PRB103 PRB104 PRB105
INNO-LIA HIV I/II Score (Procedimento 3 horas Auto-LIA)* 13 9 14
INNO-LIA HIV I/II Score (Procedimento manual 16 horas)* 13 11 14
Western Blot 14 9 12
Amostras HIV positivas
Foram analisadas 273 amostras HIV-1-positivas e 120 HIV-2-positivas com resultados positivos no
Vironostika HIV Uni-Form II Ag/Ab e no INNO-LIA HIV Confirmation internamente com o
procedimento de incubação de amostra de 3 horas Auto-LIA.
Das 273 amostras HIV-1-positivas, todas as 273 foram identificadas como positivas para anticorpos
HIV-1, resultando em uma sensibilidade e uma capacidade de diferenciação de 100% (273/273; 95%
CI [98.6%; 100.0%]).
Das 120 amostras HIV-2-positivas, 108 amostras foram corretamente identificadas como positivas
para anticorpos HIV-2, 10 amostras foram consideradas positivas para anticorpos HIV sem
tipificação e 2 amostras foram indeterminadas. Para a população da amostra de HIV-2, incluindo os
dois resultados indeterminados, foi observada uma sensibilidade de 100% (120/120; 95% IC [96.9%;
100.0%]), e uma capacidade de diferenciação de 91.5% (108/118; 95% IC [ 85.1%; 95.3%]).
Especificidade
Dadores de sangue
Foram analisadas 300 amostras de dadores de sangue negativas para anticorpos HIV internamente
com procedimento manual de incubação de amostras de 16 horas. Depois do teste inicial, 290
amostras tiveram resultados negativos, 9 amostras foram indeterminadas e 1 amostra teve resultado
positivo para anticorpos HIV-2. Depois de repetir o teste em duplicado, esta amostra de sangue
positiva inicial teve um resultado positivo para anticorpos HIV-2 na primeira vez e indeterminado na
segunda, foi positivo no INNO-LIA HIV Confirmation.
Esta amostra foi considerada negativa no Vironostika HIV Uni-Form II Ag/Ab e no Genelabs
Diagnostics HIV Blot 2.2.
A especificidade calculada neste conjunto de amostras foi de 96.7% (290/300; 95% IC [94.0%;
98.2%]).
Amostras clínicas
Foram testadas duzentas e seis amostras clínicas internamente com o procedimento manual de
incubação de amostra de 16 horas. Cento e noventa e oito amostras tiveram resultado negativo,
7 indeterminado e 1 positivo. Esta última amostra foi considerada positiva depois de repetir o teste
em duplicado e no INNO-LIA HIV Confirmation, enquanto deu resultado negativo no Vironostika HIV
Uni-Form II Ag/Ab e no Genelabs Diagnostics HIV Blot 2.2. Para este conjunto de amostras, foi
observada uma especificidade de 96.1% (198/206; 95% IC [92.5%; 98.0%]).
Amostras potencialmente interferentes
Foram testadas cento e vinte e quatro amostras potencialmente interferentes internamente com o
procedimento manual de incubação de amostra de 16 horas. Destas, 117 foram negativas e
7 indeterminadas.
A especificidade deste conjunto de amostras foi 94.4% (117/124; 95% IC [88.8%; 97.2%]).
80540 INNO-LIA HIV I/II Score / B30594 v4 / FRI17157 p 12/12

Reprodutibilidade
Um painel de 5 amostras HIV positivas, assim como um controlo positivo e um controlo negativo, foi
testado em 2 lotes diferentes por 4 técnicos com o procedimento de incubação de amostra de 3
horas Auto-LIA. A utilização de diferentes lotes de tiras e o desempenho por diferentes técnicos
resultaram no mesmo resultado do teste, excepto para um resultado indeterminado em vez de um
resultado HIV positivo foi obtido em 1 das 5 observações.
Marcas comerciais
INNO-LIA, LiRAS e Auto-LIA são marcas comerciais da Fujirebio Europe N.V. registadas nos EUA e
outros países.