A REFRATOMETRIA E SEU USO NA CROMATOGRAFIA LÍQUIDA DE ALTA EFICIÊNCIA

A RELAÇÃO ENTRE O REFRATÔMETRO E O DETECTOR

DE ÍNDICE DE REFRAÇÃO - IR - DO EQUIPAMENTO
DE CLAE.
ANÁLISE INSTRUMENTAL I- BACHARELADO EM QUÍMICA

Discentes:
Andre Luiz Carneiro Hoelbriegel
Giulia Lencina
Thaís Ferreira Kovac

Docente:
Andrea Almeida Mello
 ÍNDICE DE REFRAÇÃO (IR)
Quando um feixe de luz passa de um meio para outro, a velocidade e a direção
da onda mudam, a mudança de direção é chamada de refração. A relação entre
o ângulo de incidência e o ângulo de refração é o princípio de funcionamento
dos detectores de índice de refração

Figura 1. modelos de refração

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 ÍNDICE DE REFRAÇÃO (IR)

• Depende do comprimento de onda e da temperatura, assim como

também varia de acordo com a concentração do soluto.

• O índice de refração aumenta linearmente com a concentração

somente quando esta for expressa por massa por volume.

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 REFRATÔMETRO
• É um instrumento especial utilizado para medir essa mudança de direção
e, consequentemente, determinar o índice de refração da substância.

• Ele obtém e quantifica os dados, transformando os ângulos de refração em

valores de índice de refração.

Fig.2 - Modelos de Refratômetro (https://files.cercomp.ufg.br/weby/up/56/o/refratometria.pdf) 4

DETECTOR DE ÍNDICE
DE REFRAÇÃO NO
CLAE

 Os detectores de
índice de refração
em linha atualmente
são refratômetros
diferenciais, que
medem a deflexão
de um feixe de luz
devida a diferença
de índices de
refração entre dois
meios.
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 REFRATÔMETRO E DETECTOR IR (CLAE)
Tanto o refratômetro como o detector IR no CLAE utilizam do conceito
de refração da luz para seu funcionamento. Entretanto, no
refratômetro, o mesmo calcula o índice de refração da solução como
um todo. No CLAE, é possível quantificar diferentes compostos ao
mesmo tempo.

Usando como exemplo uma amostra de suco de uva concentrado,

enquanto a refratometria analisa a concentração total de açúcares na
amostra, no CLAE é possível detectar, simultaneamente, a presença de
sacarose, frutose e glicose separadamente.

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 REFRATÔMETRO E DETECTOR IR (CLAE)
O índice de refração é um importante parâmetro físico que pode ser
utilizado na cromatografia líquida de alta performance (CLAE).

O refratômetro e o detector de índice de refração do HPLC medem o

índice de refração de uma substância.

O refratômetro é um instrumento que mede a deflexão da luz que

passa através de um líquido, enquanto o Detector de Índice de
Refração (RID) do HPLC é um dispositivo que mede a redução do
índice de refração da fase móvel que ocorre quando um soluto é
eluido de uma coluna.
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Vantagens
• Não necessita de grupo
cromóforo na estrutura
do analito.
• É considerado ''detector
universal'' (versatilidade,
pois detecta todos os
tipos de soluto).
• Não é destrutivo.
x Desvantagens
• Regime isocrático para a fase
móvel.
• Alta concentração necessária
na célula do fluxo.
• Instabilidade quanto a
alteração de temperatura.
• Não é seletivo.
• Baixa sensibilidade
(necessita de concentrações
mais altas do analito).
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 REFRATÔMETRO E DETECTOR IR (CLAE)
Para a cromatografia líquida de alta performance (CLAE), o índice de
refração pode ser utilizado como um detector da presença de solutos na
fase móvel da coluna cromatográfica.

O detector de índice de refração (RID) é sensível à diferença de índice de

refração entre a fase móvel e a fase estacionária da coluna, permitindo a
detecção de solutos que apresentam um elevado contraste de índice de
refração.

O detector RID mede a mudança no índice de refração à medida que

os componentes da amostra eluem da coluna, permitindo traçar um cromatograma
que mostra a eluição dos diferentes componentes da amostra.

Esse método de detecção é útil para solutos que não absorvem luz na
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faixa do ultravioleta, como açúcares e polímeros.
DETECTOR DE IR
(CLAE)

Figs: 4 e 5– Detector de Índice de

Refração(https://slideplayer.com.br/slide/11118714/40/images/30/Detector+de+%C3%ADndice+de+refra%C3%A7%C3%A3o.jpg
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 MINIATURIZAÇÃO E A CLAE

A miniaturização tem tido um papel importante na evolução da cromatografia

líquida de alta performance (CLAE) e tem sido amplamente utilizada em
CLAE para reduzir os tempos de análise, aumentar a eficiência da
separação e economizar amostras.

Também tem sido usada para a análise simultânea de múltiplas amostras,

o que é importante em estudos de alta produção e alto rendimento.

A miniaturização permite reduzir o volume da fase móvel e de amostra,

o que leva a uma redução significativa do tempo de separação e
consumo de solventes, resultando em análises mais rápidas e
econômicas.
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 MINIATURIZAÇÃO E A CLAE
Além disso, a miniaturização permite uma melhor resolução, pois as
bandas cromatográficas são mais estreitas e o número de placas
teóricas por unidade de comprimento da coluna é maior.

No que se refere ao detector RID acoplado, a miniaturização pode permitir

o uso de células de fluxo menores e a integração do detector em sistemas
cromatográficos menores e mais compactos. Isso pode resultar em
melhorias significativas no desempenho, como maior sensibilidade, menor
consumo de solvente e menor tempo de análise.

A miniaturização é utilizada na CLAE para melhorar seu desempenho e

eficiência, e pode ser combinada com o detector RID acoplado para
criar sistemas cromatográficos mais compactos e sensíveis.
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 CONCLUSÃO
O detector de índice de refração (RID) é baseado na diferença da refração de
determinado analito em relação a fase móvel.

Para seu uso, deve-se levar em conta que variações de parâmetros como
densidade, temperatura, pressão e composição da fase móvel interferem em
seu resultado. Portanto, é uma análise que deve ter seus parâmetros bem
definidos e controlados.

Por apresentar resposta a todos os solutos, é considerado um detector universal e,

ainda como vantagem, não destrói os compostos analisados.

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MUITO OBRIGADO!

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 REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
LANÇAS, F. M.; Vantagens e Limitações da Miniaturização em Cromatografia
Líquida. Disponível em:
<https://www.iicweb.org/scientiachromatographica.com/files/v1n3a5.pdf>

ARGENTON, A.; Conceitos fundamentais de Cromatografia a líquido de Alto

Desempenho (HPLC). Disponível em:
<https://www.crq4.org.br/sms/files/file/conceitos_hplc_2010.pdf>

SIQUEIRA, G.; Fundamentos de Cromatografia Líquida (HPLC) – 2019. Disponível em:

<https://www.linkedin.com/pulse/fundamentos-de-cromatografia-l%C3%ADquida-hplc-2019-
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DE OLIVEIRA, A. E.; Refratometria. Disponível

em: <https://files.cercomp.ufg.br/weby/up/56/o/refratometria.pdf>
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 REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
MARTINS, G.; Onde e como usar os detectores de Índice de Refração (RID).
Disponível em: <https://www.linkedin.com/pulse/onde-e-como-usar-os-detectores-de-
%C3%ADndice-refra%C3%A7%C3%A3o-rid-gabriel-martins/?originalSubdomain=pt>

LEITE, F.; Validação em análise química. 5. ed. Campinas, SP: Editora Átomo, 2008.

COLLINS, C. H.; BRAGA, G. L; BONATO, P. S. (org.); Fundamentos

de Cromatografia. s. ed. Campinas, SP: Editora Unicamp, 2006.

CIENFUEGOS, F.; VAITSMAN, D.; Análise instrumental. s. ed. Rio de Janeiro: Interciência, 2000.

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