Escolar Documentos
Profissional Documentos
Cultura Documentos
Mic P2 S-4 Delvania Garcia
Mic P2 S-4 Delvania Garcia
ESPECTROFOTOMETRIA E FOTOMETRIA
N⁰ do Grupo:04
2⁰ Ano
Sala:11
Turma:C
Turno:Manhã
________________
Luanda-2023/2024. Prof.Luzemba
Emmanuel
Departamento de ciências da saúde
Integrantes do Grupo N⁰ 4
3.Cláudia Basílio
Luanda-2023/2024
EPÍGRAFE
5|Página
FORMULAÇÃO DO PROBLEMA
A precisão dos resultados e a variação afetam as medições de absorbância e
transmitância em fotometria e espectrofotometria. Autores renomados, como James N.
Miller em "Espectrofotometria: Instrumentação e Métodos Analíticos" (2000), destacam
que a precisão é crucial para garantir a exatidão das análises espectrofotométricas.As
condições experimentais, como temperatura, umidade e estabilidade da fonte de luz,
podem afetar a absorbância e transmitância dos resultados levantando desafios para a
obtenção de resultados precisos. Como mitigar essas influências e desenvolver
protocolos robustos para garantir a confiabilidade das medições?
6|Página
JUSTIFICATIVA
A busca pela precisão nas medições de absorbância e transmitância em fotometria e
espectrofotometria é crucial para garantir a confiabilidade dos resultados. Autores
notáveis, como James N. Miller em "Espectrofotometria: Instrumentação e Métodos
Analíticos" (2000), ressaltam a importância da precisão para assegurar a exatidão das
análises espectrofotométricas. Deste modo Este estudo contribuirá para uma
compreensão mais profunda dos desafios analíticos enfrentados em ambientes
complexos, fornecendo informações críticas para aprimorar a confiabilidade das
técnicas espectrofotométricas e fotométricas.
7|Página
OBJETIVOS
Objetivo geral
8|Página
FUNDAMENTAÇÃO TEÓRICA
Espectrofotometria e Fotometria
Princípios Básicos:
óptico (b) da amostra, através da constante de absorção molar (ε): A=ε⋅c⋅b (August
Beer (1825-1863 Johann Heinrich Lambert (1728-1777) ).
Espectrofotometria:
9|Página
curvas de calibração para análises subsequentes.( James N. Miller,200 , Douglas A.
Skoog e Donald M. West).
Vantagens da Espectofotometria
Desvantagem da Especrofotometria
10 | P á g i n a
Casos práticos de Espectofotometria e aplicações no laboratório
Fotometria:
A fotometria, por sua vez, engloba a medida da intensidade da luz emitida, transmitida
ou refletida pela amostra. Enquanto na espectrofotometria a ênfase está na absorção, a
fotometria abrange uma gama mais ampla de fenômenos, incluindo fluorescência,
luminescência e quimioluminescência. Este método é crucial em estudos que envolvem
reações químicas específicas, biomarcadores e análises qualitativas baseadas em
emissões luminosas.( Thomas L. Riedel,2010 , Jerome J. Workman Jr. e Art
Springsteen,2011 ).
11 | P á g i n a
Tipos de espectofotometeia e fotometria
Espectrofotometria de absorção
Espectrofotometria de emissão
Espectrofotometria de espalhamento
12 | P á g i n a
A concentração é calculada com base na relação entre a absorbância e a
concentração conhecida da substância em questão.
3. Avaliação da Atividade Enzimática:
Vantagens da Fotometria
13 | P á g i n a
4. Estética: A fotometria auxilia na criação de ambientes esteticamente agradáveis,
através do controle da intensidade e direção da luz.
Desvantagem da Fotometria
14 | P á g i n a
Ou seja, a absorvância é uma medida da “quantidade” de luz que é absorvida pela
amostra.( Karl Lambert e August Beer , 1850).
T=Pλ/Poλ (1)
A=log(Pλ/Poλ)=−logT=log(1/T) (2)
. A=εlc (3)
m-3, no SI), l a distância percorrida pela radiação através da solução (m, no SI) e ε o
coeficiente de absorção molar da espécie em estudo (m2 mol-1, no SI).†
O referido coeficiente é uma medida da capacidade que uma espécie química tem de
absorver a radiação, para um determinado comprimento de onda. Na figura abaixo é
apresentado um esquema do princípio em que se baseia a lei de Lambert–Beer.
15 | P á g i n a
A radiação incidente deve estar colimada (raios paralelos entre si) e deve
atravessar a mesma distância durante a qual interage com as partículas existentes
em solução;
A radiação deve ser monocromática, isto é, ser composta por apenas um
comprimento de onda selecionado (normalmente, correspondente ao
comprimento de onda para o qual a absorvância da espécie em estudo é
máxima);
O fluxo da radiação incidente não pode induzir processos que impliquem a
desestabilização dos átomos, moléculas ou iões, como por exemplo excitação
eletrónica que dê origem a fenómenos de fluorescência ou fosforescência.
Instrumentos espectrofotométricos
16 | P á g i n a
Fluorímetro: Mede a fluorescência emitida por uma amostra quando excitada por luz
de uma determinada comprimento de onda.( Gregorio Weber, Lakowicz, Joseph R,
Michael J. Pelletier).
Componentes do espectofôtometro
17 | P á g i n a
Amostra: A substância a ser analisada, que interage com a luz.
Detector: Mede a intensidade da luz transmitida pela amostra( Alexander Graham Bell,
J.J. Thomson).
18 | P á g i n a
Eletrônica de Controle: Controla o funcionamento do espectofotômetro e processa os
sinais do detector.
Fotometria de chama
Fonte de Chama: Uma chama controlada é gerada usando um gás combustível, como o
propano, e um gás oxidante, geralmente o oxigênio( Robert Bunsen 1811-1899, Gustav
Kirchhoff 1824-1887).
19 | P á g i n a
Atomização: A amostra é introduzida na chama, onde é vaporizada e posteriormente
atomizada. A temperatura da chama é crucial para a eficiente atomização dos
elementos(Alan Walsh 1916-1998, Sir George Porter 1920-2002, Jaromír Růžička 1896-
1978, Emil V. Urey 1893-1951):
Filtro Monocromático: Um filtro é usado para isolar a luz emitida pelo elemento
específico, permitindo uma medição mais precisa.( Lord Rayleigh, Max Planck XIX é
XX).
20 | P á g i n a
Determinação de transmitância e absorbância de nálito
Transmitância (T): Refere-se à fração de luz que passa através de uma amostra. É
expressa como uma porcentagem ou decimal e pode ser calculada pela seguinte
Medição da absorbância
21 | P á g i n a
Bunsen 1811-1899, Theodore Beer 1851-1915). Aqui estão os passos
básicos para realizar essa medição:
22 | P á g i n a
garantir medições precisas e reprodutíveis da absorbância, sendo
fundamentais em análises quantitativas em laboratórios.
23 | P á g i n a
Filtro de Luz: A escolha do filtro de luz apropriado é crucial. Em
diferentes condições de iluminação, a seleção inadequada do filtro pode
resultar em interferências ou em limitações na faixa espectral.
Conclusão
24 | P á g i n a
médico. Autores importantes que contribuíram para o desenvolvimento
dessas técnicas incluem Beer (1852) e Lambert (1760), cuja lei da
absorção de luz é fundamental para a espectrofotometria. Além disso,
Kubelka e Munk (1931) fizeram contribuições significativas para a
fotometria, estabelecendo fundamentos teóricos importantes. Essas
técnicas continuam a desempenhar um papel crucial na análise
quantitativa e qualitativa de substâncias, e seu impacto na ciência e na
indústria é inegável.
Bibliografia
25 | P á g i n a
3. Burns, D. T. (1999). Fotometria e espectrofotometria: uma
introdução prática. Royal Society of Chemistry.
Anexos
26 | P á g i n a
Fluorímetro para laboratório. Espectrometro de absorção atômica
Esquema de um monocromador
27 | P á g i n a
28 | P á g i n a