Atividade Bula II

Cellex : SARs-Cov-2

1. Descreva o princípio do método.

R: O teste rápido de cassete Cellex qSARS-CoV-2 IgG / IgM é um imunoensaio
cromatográfico de fluxo lateral baseado em um método sandwish.
Os antígenos recombinantes SARS-CoV-2 marcados por ouro coloidal
(conjugados SARS- CoV-2) na almofada de conjugado cor de vinho podem se
ligar aos anticorpos contra o vírus SARS-CoV-2, de forma que se o anti-SARS-
CoV-2 vírus IgG ou IgM ou ambos presentes na amostra, o IgG ou IgM pode ser
ligado aos conjugados para formar os conjugados IgG- SARS-Cov_2 ou o
imunocomplexo de conjugados IgM-SARS-Cov-2.
Migrando através da matriz de nitrocelulose, o imunocomplexo de conjugados
IgM- (SARSCoV-2) será então capturado pela linha IgM anti-humana,
formando uma linha GM cor de vinho. O resultado é IgM positivo ou reativo. As
informações sobre a resposta imune ao SARSCoV-2 são limitadas e ainda estão
em evolução. E o imunocomplexo de conjugados IgG- (SARS-CoV-2) será
então capturado pela linha de IgG anti-humana, formando uma linha G cor de
vinho. O resultado é IgG positivo ou reativo, consistente com uma infecção
recente ou anterior. Este teste contém um recurso de controle integrado, a linha
C. O IgG anti-coelho de cabra ligado na linha C, pode ligar-se aos conjugados de
ouro-IgG de coelho que vêm da almofada de conjugado. A linha C desenvolve-
se após a adição da amostra e do diluente da amostra. Se a linha C não se
desenvolver, o ensaio é inválido, independentemente do desenvolvimento da cor
das linhas G ou M, conforme indicado abaixo. Repita o ensaio com um novo
dispositivo.

2. Existem interferentes para o ensaio?

R: Uma amostra de soro positiva de baixo título ou amostra de soro negativa foi
enriquecida com uma das seguintes substâncias para o concentrações e testados
em duplicado. Nenhuma falsa positividade ou falsa negatividade foi encontrada:
Hemoglobina 10 mg / mL, Conjugado de bilirrubina 0,4 mg / mL, Bilirrubina
não conjugada 0,4 mg / mL, Triglicerídeos 15 mg / mL, Colesterol 4 mg / mL,
Anti-rato humano Anticorpo (HAMA) 800 ng / mL, Fator reumatoide 2.000 UI /
mL, Albumina de soro humano 60 mg / mL, Cloridrato de histamina 4 mg / L,
α-IFN 200 mg / L, Zanamivir 1 mg / L, Carboxilato de oseltamivir 1 mg / L,
Abidol 40 mg / L, Levofloxacina 200 mg / L, Ceftriaxona 400 mg / L,
Meropenem 200 mg / L, Tobramicina 10 mg / L, Ribavirina 40 mg / L, IgG
humana 8 mg / mL, IgM humana 0,4 mg / mL.
3. Como ocorre a leitura/interpretação do resultado.
R: Ensaio válido
Se apenas a Linha G e a Linha C forem desenvolvidas, o resultado é IgG
positivo ou reativo, ou seja, indica a presença do vírus IgG anti-SARS-CoV-2,
compatível com infecção recente ou prévia.
Se apenas a Linha M e a Linha C forem desenvolvidas, este é o resultado IgM

positivo ou reativo, em outras palavras, que indica a presença de vírus IgM anti-
SARS-CoV-2, consistente com um SARS-CoV- agudo ou recente 2 infecção por
vírus.
Se todas as linhas G, M e C forem desenvolvidas, este é o resultado IgG e IgM

positivo ou reativo, ou seja, que indica a presença do vírus IgG e IgM anti-
SARS-CoV-2, sugerindo atual ou recente Infecção pelo vírus SARS-CoV-2.
 Se apenas a banda C estiver presente, a ausência de qualquer cor bordô em
ambas as bandas de teste (G e M) indica que nenhum anticorpo anti-SARS-
CoV-2 foi detectado. O resultado é negativo ou não reativo.

Ensaio inválido
Se a linha C não se desenvolver, o ensaio é inválido, independentemente de
desenvolvimento de cor das linhas G ou M conforme indicado abaixo. Repita o
ensaio com um novo dispositivo.

4. Como ocorre a validação do ensaio?

R: CONTROLE DE QUALIDADE
1. Controle Interno: Este teste contém um recurso de controle interno, a linha C.
A linha C se desenvolve após a adição de extrato de amostra. Se a linha C não se
desenvolver, reveja todo o procedimento e repita o teste com um novo
dispositivo. 2. Controle positive e negativo: Os controles positivos e negativos
devem ser testados para garantir o desempenho adequado do ensaio,
principalmente nas seguintes circunstâncias: 1) novos kits (novo lote ou nova
remessa); 2) novo usuário; 3) novo ambiente de teste (por exemplo, luz natural
vs. luz artificial); 4) ambiente de armazenamento anormal (fora de 230°C); 5)
ambiente de trabalho anormal (fora de 15-30°C); 6) Para investigar a causa de
resultados inválidos repetidos:
Bioclin:Dengue

1. Descreva o princípio do método.

R: AÇÃO Metodologia: Enzimaimunoensaio ou Imunoenzimático O kit
BIOLISA DENGUE NS1 é um ensaio imunoenzimático em fase sólida, baseado
no princípio “sanduíche” para a detecção qualitativa do antígeno NS1 do Vírus
da Dengue em amostras humanas de soro ou plasma. A microplaca é revestida
com anticorpos monoclonais específicos anti-NS1 para os subtipos I, II, III e IV
da Dengue. No primeiro momento, a amostra é incubada junto ao Conjugado,
constituído de anticorpos antiNS1 conjugados à peroxidase. Antígenos NS1 do
Vírus da Dengue, presentes na amostra, se ligam aos anticorpos antiDengue
específicos imobilizados na placa e nos anticorpos anti-Dengue específicos
presentes no conjugado, formando imunocomplexos. Após a incubação inicial, a
microplaca é lavada para remover os materiais não ligados. Em seguida, o
Substrato é adicionado e incubado, produzindo uma cor azul que indica a
detecção de antígenos NS1 para Dengue na amostra. A Solução de Parada é
adicionada para interromper a reação, havendo uma mudança de cor de azul para
amarelo, medido em um leitor de microplaca.

2. Existem interferentes para o ensaio?

R: Nenhuma interferência foi observada por Triglicérides 1500 mg/dL, Ácido
Acetilsalicílico 20 mg/dL, Ácido Ascórbico 2 g/dL, Creatina 200 mg/dL,
Bilirrubina 1 g/dL, Albumina 2 g/dL, Hemoglobina 1000 mg/dL, Ácido Oxálico
60 mg/dL, Fator Reumatóide 980 UI/mL, Proteína C Reativa 41,2 mg/dL e Anti-
Estreptolisina O 1023 UI/mL. Amostras de plasma armazenadas por períodos
superiores ao preconizado (30 dias) podem apresentar fibrina e precipitação de
fibronectina que podem interferir no teste. Essas amostras não devem ser
utilizadas, assim como, amostras coletadas com outros anticoagulantes
diferentes dos citados (EDTA e heparina).

3. Como ocorre a leitura/interpretação do resultado.

R: Após o cálculo do índice das amostras, considerar os índices abaixo para
determinação dos resultados.

Observação: No caso de resultado indeterminado, a amostra deve ser

reanalisada. As amostras que obtiverem resultados repetidamente
indeterminados devem ser retestadas utilizando um método alternativo. Se os
resultados permanecem indeterminados, deve-se coletar uma nova amostra em
até 9 dias após o início dos sintomas. Deve prevalecer o resultado da última
amostra coletada. Os resultados fornecidos por este kit devem ser interpretados
pelo profissional médico responsável, não sendo o único critério para a
determinação do diagnóstico e/ou tratamento do paciente.

4. Como ocorre a validação do ensaio?

R: CONTROLE INTERNO DE QUALIDADE O Laboratório Clínico deve
possuir um programa interno de controle da qualidade, onde procedimentos,
normas, limites e tolerância para variações sejam claramente estabelecidos. É
importante ressaltar que todos os sistemas de medição apresentam uma
variabilidade analítica característica, que deve ser monitorada pelos próprios
laboratórios. Para tanto, é recomendável a utilização de controles, que permitem
avaliar a precisão e a exatidão das dosagens.