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Resposta de vacas leiteiras alimentadas com dietas de silagem de


grama a infusões abomasais de histidina isoladamente ou em
combinações
com metionina e lisina
A. VANHATALO, P. HUHTANEN, V. TOIVONEN,
e T. VARVIKKO
Pesquisa de Produção Animal, Centro de Pesquisa Agrícola da Finlândia,
FIN-31600 Jokioinen, Finlândia

RESUMO
INTRODUÇÃO
A resposta de vacas leiteiras alimentadas com dietas
à base de silagem de capim à infusão abomasal de Há um interesse cada vez maior em otimizar o
água (controle) ou 6,5 g de His isoladamente ou em fornecimento de AA ao duodeno para atender com precisão
combinação com 6,0 g de Met ou 19,0 g de Lys, ou às necessidades de AA.
ambos, foi estudada em um experimento de quadrado
latino 4 × 5 incompleto com períodos de 14 dias. Cada Recebido em 9 de novembro de 1998.
vaca recebeu uma dieta basal de 8 kg/d de concentrado Aceito em 26 de abril de 1999.
de cereais [12,1% de proteína bruta (PB)] e acesso
livre a silagem de grama (14,1% de PB) ensilada com
um aditivo à base de ácido. As infusões pós-espectrais
aumentaram as concentrações plasmáticas arteriais
dos aminoácidos (AA) infundidos, mas, em
comparação com o controle, apenas a infusão de His
(18 vs. 57 µmol/L) foi associada a aumentos
significativos na produção de leite e proteína do leite.
As infusões de His não afetaram a ingestão de matéria
seca da silagem de grama, a fermentação ruminal ou a
digestibilidade da dieta. O teor de proteína do leite
não foi alterado pelos tratamentos, mas as infusões de
His diminuíram os teores de lactose e gordura. As
combinações de AA não produziram nenhuma
resposta adicional em comparação com o His sozinho.
No entanto, a porcentagem de proteína do leite foi
ligeiramente maior, e a porcentagem de gordura do
leite tendeu a ser maior quando Met, em vez de Lys,
foi infundido com His. Concluímos que o His é o
primeiro AA limitante quando as dietas à base de
silagem de capim são suplementadas com
concentrados de cereais, enquanto nem o Met nem o
Lys são o segundo AA limitante na alimentação com
silagem de capim.
(Palavras chave: vacas leiteiras, histidina, infusões,
silagem de capim)
Legenda das abreviações: AV = arteriovenoso,
BCAA = AA de cadeia ramificada, EAA = AA
essencial, ECM = leite com correção de energia, HI =
infusão de histidina, HL = histidina e lisina, HM =
histidina e metionina, HML = histidina, metionina e
lisina, NEAA = AA não essencial, TAA = AA total.
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limitantes depois do His. O objetivo do presente
necessidades do animal ruminante. Esse
experimento foi investigar as respostas metabólicas e
fornecimento é de interesse não apenas para
lactacionais de vacas à infusão abomasal de His
aumentar a eficiência da conversão do N da
sozinho ou em combinação com Met, Lys ou ambos.
dieta em proteína do leite, reduzindo assim os
custos da ração e melhorando a composição dos
produtos lácteos, mas também para atender às
preocupações ambientais na alimentação de
vacas leiteiras para suprimir a excreção de N no
esterco. A otimização do suprimento de AA pode
ser feita, por exemplo, aumentando o conteúdo
de CP da dieta com suplementos proteicos
adequados, reduzindo a degradabilidade
ruminal da CP da ração, desde que a CP
degradável no rúmen seja suficiente na dieta,
aumentando a produção de proteína microbiana
no rúmen ou usando AA protegido no rúmen.
Em princípio, o último meio mencionado é a
abordagem mais eficaz para otimizar o
fornecimento de AA porque o AA
especificamente necessário pode ser
suplementado sem aumentar o conteúdo de AA
não necessário na dieta; ou seja, o animal não
precisa excretar o excesso de N do AA
suplementar. A maioria dos produtos
comerciais de AA protegidos pelo rúmen é
baseada em Met ou Lys, ou ambos, porque eles
têm sido frequentemente implicados como o
primeiro AA limitante na silagem de milho,
mas também em dietas baseadas em silagem de
grama (27, 31).
Em nossos experimentos anteriores (35), a
infusão de quantidades linearmente crescentes
de Met ou Lys no abomaso de vacas
alimentadas com dietas à base de silagem de
capim não teve efeitos significativos na
produção de leite ou de proteína do leite. Em
vez disso, o teor e a produção de gordura do
leite aumentaram significativamente em
resposta à Met, e o teor de ureia do leite
aumentou em resposta à Lys. Esses resultados
sugerem que nem a Met nem a Lys são os
primeiros AA limitantes em dietas à base de
silagem de capim. Entretanto, esses AA não
foram infundidos na presença um do outro.
Portanto, a possível co-limitação desses AA está
aberta para discussão. Os dados coletados, no
entanto, foram usados para calcular as
proporções de saída e entrada de AA essenciais
(EAA). Esses cálculos teóricos sugeriram que o
His era o candidato mais provável para o
primeiro AA limitante, e o Met e o Lys estavam
no grupo de AA que poderiam se tornar
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SILAGEM DE GRAMA amostras de sangue das veias mamária e caudal e as
MATERIAIS E MÉTODOS amostras de fluido ruminal foram coletadas no
Vacas e alimentação último dia de cada período experimental antes da
alimentação matinal e duas amostras de sangue e
Quatro vacas Ayrshire finlandesas (90 a 120 DIM) três amostras de fluido ruminal foram coletadas no
na terceira ou quarta lactação foram usadas no último dia de cada período experimental antes da
experimento. O peso vivo médio das vacas era de 509 alimentação matinal.
± 72 kg no início do experimento e 542 ± 64 kg no
final do experimento. As vacas foram equipadas com
cânulas ruminais e cateteres de infusão foram
introduzidos em seus abomasos, conforme descrito
anteriormente (35). As vacas foram mantidas em baias
individuais e ordenhadas duas vezes ao dia, às 7h00 e
17h00.
As vacas tiveram acesso livre à silagem de grama, de
modo que as tortas não representavam mais de 10% da
porção diária. A silagem de grama era feita de
crescimento primário de timóteo (Phleum pratense),
festuca dos prados (Festuca pratensis) e trevo vermelho
(Trifolium pratense). Ele foi cortado e ensilado com um
aditivo à base de ácido, conforme descrito anteriormente
(35). A mistura concentrada fornecida aos animais duas
vezes ao dia a uma taxa de 8 kg/d como ração consistia
em cevada (41%), aveia (41%), polpa de beterraba
moída (15%), mistura mineral comercial (2,7%) e sal
(0,3%). A mistura mineral continha 16% de Ca, 6,4% de
P, 9,0% de Na, 8,0% de Mg, 150.000 UI de vitamina
A/kg, 100.000 UI de vitamina D/kg e 500 mg de
vitamina E/kg. A mistura mineral também continha (por
quilograma) 500 mg de Cu, 10 mg de Se, 3.000 mg de
Zn, 8 mg de Mo, 1.000 mg de Mn e 100 mg de I. Os
animais eram alimentados às 6h00 e às 1 8 h 0 0 .

Projeto experimental e tratamentos


O projeto experimental usado foi um quadrado
latino incompleto 4 × 5 com períodos de 14 dias, dos
quais os últimos 7 dias formavam um período de
coleta. Os cinco tratamentos atribuídos às quatro
vacas foram infusões abomasais contínuas de AA
dissolvido em 6 L de água/d, como segue: 1) apenas
água foi infundida (controle); 2) 6,5 g/d de His (HI);
3) 6,5 g/d de His e 6,0 g/d de Met (HM); 4) 6,5 g/d de
His e 19,0 g/d de Lys (HL) e 5) 6,5 g/d de His, 6,0 g/d
de Met e 19,0 g/d de Lys (HML). As soluções
experimentais foram infundidas com uma bomba
peristáltica, conforme descrito anteriormente (35).

Amostragem, registros e análises químicas


O consumo de ração e a produção de leite das vacas
foram registrados diariamente durante todo o
experimento. No entanto, apenas os dados do período
de coleta foram usados nas análises estatísticas. As
amostras de ração, leite, sangue e fluido ruminal
foram descritas anteriormente (35). Resumidamente, as
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bastante baixos.
Amostras de fluido ruminal foram coletadas em Os dados sobre o consumo de ração e a fermentação
intervalos de 3 horas depois disso. ruminal são apresentados na Tabela 2. A DMI da
As amostras de sangue e de fluido ruminal foram silagem de grama não foi afetada pelas infusões de
reduzidas à média do período para cada vaca antes da His no abomaso (P > 0,05), mas a DMI total foi
análise. Para determinar a digestibilidade total das dietas
experimentais, foi realizada uma amostragem fecal de 5
dias com cinzas insolúveis em ácido como marcador
interno (34).
As rações e as fezes para composição química e o
fluido ruminal para AGV foram analisados conforme
descrito anteriormente
(35). A digestibilidade in vitro da celulase da silagem foi
analisada de acordo com Friedel (13). A glicose e o NEFA
plasmáticos foram medidos colorimetricamente com kits
comerciais de reagentes GOD-Perid e NEFA-C,
respectivamente. Os AA do plasma foram analisados com o
analisador Biochrom 20 AA. Os detalhes dos
procedimentos, bem como as análises do leite quanto ao
conteúdo de proteína, gordura, lactose e ureia, estão
descritos em nosso artigo anterior (35).

Cálculos e análises estatísticas


A extração mamária de metabólitos sanguíneos e AA
foi calculada como diferença arteriovenosa (AV) dividida
pela concentração arterial. O fluxo plasmático mamário
foi estimado com referência à produção de Phe e Tyr na
proteína do leite por meio de uma aplicação do princípio
de Fick, conforme descrito por Cant et al. (5), com a
exceção de que os valores de Phe e Tyr do leite livre
foram desprezados. A absorção de metabólitos do sangue
e de AA pela glândula mamária foi então calculada como
diferença de AV × fluxo plasmático mamário.
Os dados foram analisados pela análise de variância
para o quadrado latino: vaca (df 3), período (df 4),
tratamento (df 4) e os efeitos residuais (df 8) foram as
fontes de variação. O procedimento de modelos lineares
gerais do SAS
(28). As diferenças de tratamento foram divididas em
comparações com um único grau de liberdade por meio de
contrastes ortogonais: 1) controle versus HI + HM + HL
+ HI versus HM + HL + HML; 3) HM+HL
versus HML, e 4) HM versus HL. Os resultados foram
expressos como médias de mínimos quadrados e são
apresentados dessa forma ao longo do texto.

RESULTADOS
Consumo de ração, fermentação ruminal
e digestibilidade da dieta
A composição química das rações dadas aos animais é
apresentada na Tabela 1. A silagem de grama foi
fermentada de forma restrita e com qualidade de
fermentação razoavelmente boa. Entretanto, a
digestibilidade in vitro e o teor de N da silagem foram
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SILAGEM DE GRAMA
TABELA 1. Composição química dos alimentos para animais. mas sem qualquer significado biológico. Os coeficientes
Silagem de grama Concentrado1 de digestibilidade das dietas (em média 70,8% para MO,
pH 4.25
68,9% para N e 60,6% para FDN) não foram afetados
DM, g/kg de ração 209 898 significativamente pelos tratamentos.
(g/kg de MS)
Cinza 75 65
Total N 22.6 19.3
Produção e composição do leite
NDF 605 292
Carboidratos solúveis em água 23.2 As infusões de His aumentaram a produção de leite (P
Ácido láctico 37.5 = 0,01), mas a produção de leite com correção de
Ácido acético 22.4
Ácido butírico 2.9 energia (ECM) não foi afetada (P
Amônia N, g/kg de N 63 > 0,05) (Tabela 3). O teor de proteína do leite também
N solúvel, g/kg de N 506 não foi afetado, mas os teores de lactose e gordura
Digestibilidade in vitro da celulase,
g/kg de OM 661
diminuíram (P ≤ 0,03). No entanto, o teor de proteína
do leite foi maior (P = 0,02) e o teor de gordura
1O concentrado era uma mistura de cevada (41%), aveia (41%),

polpa de beterraba (15%) e minerais (3%).


tendeu a ser maior (P = 0,08) quando His foi
combinado com Met em vez de Lys. As infusões de
His não afetaram a produção de lactose e gordura,
ligeiramente maior (P = 0,05) com infusões de His em mas aumentaram a produção de proteína do leite (P =
comparação com o controle. Os parâmetros de 0,007) e, consequentemente, elevaram a proporção de
fermentação ruminal não foram afetados pelas proteína e gordura do leite (P = 0,007). As infusões de
infusões de His. A proporção mais baixa (P = 0,008) His não influenciaram o teor de ureia do leite.
de ácido acético e mais alta (P = 0,02) de ácido Entretanto, a ureia do leite tendeu (P = 0,07) a ser
valérico no AGV com o tratamento apenas com His menor quando os três AA foram infundidos juntos em
em comparação com o tratamento com His comparação com as combinações de dois AA.
administrado em combinação com outros AA precisa
ser explicada. Entretanto, essas diferenças, embora Metabólitos plasmáticos e AA
estatisticamente significativas, foram extremamente
pequenas, menos de 1 unidade percentual, e, portanto, Concentrações arteriais, diferenças de AV
são prováveis. calculadas, extrações e absorção de glicose e NEFA
pelo

TABELA 2. Médias dos mínimos quadrados para consumo de ração e parâmetros de fermentação ruminal.
Infusão de AA por via pós-truminal1 Contraste
(P) Controle
2 HI HM HL HML SEM 1 2
3 4

DMI, kg/d
Silagem 8.9 9.1 9.1 9.0 9.2 0.08 † NS3 † NS
Concentrado 7.2 7.2 7.2 7.2 7.2
Total 16.1 16.3 16.3 16.2 16.4 0.08 * NS † NS
Fermentação ruminal
pH 6.28 6.35 6.47 6.40 6.39 0.060 NS NS NS NS
Amônia N, mmol/L 5.68 5.50 5.26 5.06 5.37 0.423 NS NS NS NS
AGV total, mmol/L 115 112 109 111 109 2.3 NS NS NS NS
Proporção molar de VFA,
mmol/mol
Acético 700 694 699 702 705 1.9 NS ** † NS
Propiônico 144 147 144 143 142 1.8 NS † NS NS
Butírico 113 117 116 113 111 1.9 NS NS NS NS
Isobutírico 9.2 9.2 9.1 9.1 8.9 0.08 NS NS NS NS
Valérico 11.6 11.9 11.1 11.4 11.5 0.15 NS * NS NS
Isovalérico 13.8 13.5 13.7 13.5 13.4 0.40 NS NS NS NS
Caproic 7.5 7.5 7.0 7.6 7.9 0.33 NS NS NS NS
1Controle = nenhuma infusão de AA por via posterior; HI = 6,5 g de His/d infundidos por via posterior;

HM = 6,5 g de His/d e 6 g de Met/d infundidos por via posterior; HL = 6,5 g de His/d e 19 g de Lys/d
infundidos por via posterior; e HML = 6,5 g de His/d, 6,0 g de Met/d e 19 g de Lys/d infundidos por via
posterior.
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2Contrastes: 1 = Controle versus todas as outras infusões, 2 = HI versus HM, HL e HML, 3 = HM e HL

versus HML, e 4 = HM versus HL.


3P > 0.10.
†P ≤ 0.10.
*P ≤ 0.05.
**P ≤ 0.01.

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TABELA 3. Médias dos mínimos quadrados para produção de leite e componentes do leite.
Infusão de AA por via pós-truminal1 Contraste (P)2

Controle HI HM HL HML SEM 1 2 3 4


Produção de leite, kg/d 22.9 23.6 23.7 24.2 23.7 0.25 ** NS 3 NS NS
ECM4 , kg/d 23.3 23.4 23.6 23.4 23.8 0.21 NS NS NS NS
Composição do leite, g/kg
Proteína 30.4 30.6 31.0 29.8 31.1 0.27 NS NS † *
Lactose 47.7 46.9 46.9 47.3 47.3 0.18 * NS NS †
Gordura 43.4 41.1 42.1 40.3 42.5 0.61 * NS NS †
Rendimento,
g/d Proteína 695 721 728 717 729 6.9 ** NS NS NS
Lactose 1094 1107 1110 1143 1115 11.8 † NS NS †
Gordura 988 968 986 961 994 12.3 NS NS NS NS
Proteína:gordura 0.71 0.75 0.76 0.75 0.74 0.010 ** NS NS NS
Ureia, mg/L 179 177 190 178 160 8.93 NS NS † NS

1Controle = sem infusão de AA no pós-operatório; HI = 6,5 g de His/d infundidos no pós-operatório;

HM = 6,5 g de His/d e 6 g de Met/d infundidos no pós-operatório; HL = 6,5 g de His/d e 19 g de Lys/d


infundidos no pós-operatório; e HML = 6,5 g de His/d, 6,0 g de Met/d e 19 g de Lys/d infundidos no pós-
operatório.
2Contrastes: 1 = Controle versus todas as outras infusões, 2 = HI versus HM, HL e HML, 3 = HM e HL

versus HML e 4 = HM versus HL.


3P > 0.10.
4ECM, leite com correção de energia; calculado de acordo com Sjaunja et al. (32).

†P ≤ 0.10.
*P ≤ 0.05.
**P ≤ 0.01.

glândula mamária são apresentados na Tabela 4. As (NEAA) ou concentrações totais de AA (TAA) em


infusões de His não tiveram influência sobre esses comparação com o controle, mas aumentaram His (P <
metabólitos arteriais. 0,001) e diminuíram Leu, Phe, Thr, Gly, Ser e Tyr (P
As concentrações de AA e ureia no plasma arterial, ≤ 0,07, no mínimo). As concentrações de BCAA,
as diferenças de AV e as extrações pela glândula EAA e TAA, de acordo com as de muitos AA
mamária são apresentadas nas Tabelas 5, 6 e 7, individuais, por exemplo, Lys, Met, Phe, Trp e Tau,
respectivamente. As concentrações de ureia no plasma foram menores (P ≤ 0,07) quando His foi infundido
não foram significativamente afetadas pelos sozinho e não em combinação com outros
tratamentos. As infusões de His não afetaram as AA. O mesmo ocorreu (P ≤ 0,08) com a concentração
concentrações plasmáticas de AA de cadeia plasmática de
ramificada (BCAA), EAA, AA não essencial

TABELA 4. Médias dos mínimos quadrados para metabólitos plasmáticos.


Infusão de AA por via pós-truminal1 Contraste
(P) Controle
2 HI HM HL HML SEM 1 2
3 4

Glicose, mmol/L
Arterial 3.24 3.15 3.24 3.16 3.15 0.065 NS3 NS NS NS
AV4 Diferença 0.77 0.77 0.79 0.80 0.84 0.065 NS NS NS NS
Extração, % 23.9 24.8 24.9 25.7 27.4 2.14 NS NS NS NS
Absorção, g/kg de leite 72.2 76.9 61.3 68.9 69.7 7.42 NS NS NS NS
NEFA, µmol/L
Arterial 96.2 84.8 96.5 105.8 105.4 8.11 NS † NS NS
Diferença de AV -23.8 -23.3 -8.6 -10.5 -19.2 5.91 NS NS NS NS
Extração, % -27.9 -31.6 -12.0 -12.9 -24.3 7.13 NS NS NS NS
Absorção, g/kg de leite -3.40 -3.30 -0.93 -1.64 -2.49 0.806 NS NS NS NS
1Controle = sem infusão de AA por via posterior; HI = 6,5 g/d de His infundido por via posterior; HM =

6,5 g de His/d e 6 g de Met/d infundidos por via posterior; HL = 6,5 g de His/d e 19 g de Lys/d infundidos
por via posterior; e HML = 6,5 g de His/d, 6,0 g de Met/d e 19 g de Lys/d infundidos por via posterior.
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2Contrastes: 1 = Controle versus todas as outras infusões, 2 = HI versus HM, HL e HML, 3 = HM e HL

versus HML e 4 = HM versus HL.


3P > 0.10.
4Arteriovenoso.

†P ≤ 0.10.

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de AA envolvidos no ciclo da ureia no fígado (Arg, A taxa de extração da glândula mamária de His foi
Cit, Orn). As concentrações plasmáticas de His, Thr e reduzida (P < 0,001), e as de Leu, Phe, Thr, Asn, Ser e
NEAA devido a Asp, Glu e Gly foram maiores (P < Tyr aumentaram (P ≤ 0,03) em resposta às infusões de
0,01) nos tratamentos HM e HL do que no tratamento His (Tabela 7). As taxas de extração de His, Thr, Ser e
HML. A concentração plasmática de Met foi maior (P Tau foram menores (P ≤ 0,03) quando His foi infundido
< 0,001) e a concentração de Lys foi menor (P = sozinho em vez de junto com outros AA. As extrações
0,004) no tratamento HM do que no tratamento HL. de Asp e NEAA foram maiores (P ≤ 0,07) no tratamento
As infusões de His não afetaram a AV para nenhum com HM e HL do que no tratamento com HML. As
AA individual (Tabela 6), exceto para aumentos em extrações de Lys, Asn e BCAA foram maiores (P ≤
Thr (P = 0,08) e Ser (P = 0,009). As diferenças 0,03), mas a de Met foi menor (P = 0,08) no tratamento
arteriovenosas de Ile, Leu, Lys, Phe, Thr, Ser e Tau HM do que no HL.
foram maiores (P ≤ 0,07) nos tratamentos quando His Taxas de fluxo de plasma mamário calculadas para
foi infundido em combinação com Met e Lys em vez os tratamentos de controle, HI, HM, HL e HML em
de sozinho. A diferença AV de NEAA e Asp (P ≤ termos de litros por dia (11.915, 13.218, 10.408,
0,04) foi maior nos tratamentos HM e HL do que no 12.137, 11.348);
tratamento HML, e a de Asn foi maior (P = 0,06) no SEM 975,6) ou litros por quilograma de leite (528,
tratamento HM do que no HL. 560, 445, 509, 478, SEM 41,5) não foram afetados
pelas infusões de AA aboral. No entanto, essas duas
estimativas

TABELA 5. Médias dos mínimos quadrados para AA no plasma arterial e concentração de ureia.
AA infundido por via pós-renal (µmol/L)1 Contraste (P)2

AA3 Controle HI HM HL HML SEM 1 2 3 4


Arg 65 66 73 82 76 4.0 † * NS 4 NS
Sua 18 53 57 47 38 4.5 *** NS * NS
Ile 124 112 133 153 147 7.1 NS ** NS †
Leu 102 78 92 94 91 5.6 † † NS NS
Lys 82 77 90 120 115 5.2 ** *** NS ***
Met 21 17 33 18 30 1.4 * *** * ***
Phe 49 37 43 42 43 2.2 * † NS NS
Thr 104 91 98 96 85 4.0 * NS * NS
Trp 25 24 32 29 27 2.4 NS † NS NS
Val 201 168 186 205 189 9.2 NS * NS NS
Ala 236 218 245 239 239 8.6 NS * NS NS
Asn 52 47 55 55 51 2.8 NS † NS NS
Asp 11 10 11 12 10 0.6 NS NS * NS
Cit 69 66 74 71 74 3.2 NS † NS NS
Cys 21 26 22 24 21 4.6 NS NS NS NS
Gln 155 147 157 148 139 8.1 NS NS NS NS
Glu 151 162 181 175 153 8.0 NS NS * NS
Gly 333 308 313 313 267 12.0 * NS ** NS
Orn 41 40 45 46 46 2.0 NS * NS NS
Profissional 82 76 80 84 77 4.1 NS NS NS NS
Ser 110 95 97 103 88 4.8 * NS † NS
Tau 37 32 39 36 40 1.3 NS *** NS NS
Tyr 48 35 42 43 40 2.6 * † NS NS
BCAA 427 358 410 452 427 20.4 NS * NS NS
EAA 790 722 837 886 840 37.0 NS ** NS NS
NEAA 1198 1124 1204 1197 1087 29.1 NS NS ** NS
TAA 1988 1846 2041 2084 1927 59.7 NS * † NS
Ureia 3288 3273 3446 3272 2867 261.7 NS NS NS NS
1Controle = sem infusão de AA no pós-operatório; HI = 6,5 g de His/d infundidos no pós-operatório;

HM = 6,5 g de His/d e 6 g de Met/d infundidos no pós-operatório; HL = 6,5 g de His/d e 19 g de Lys/d


infundidos no pós-operatório; e HML = 6,5 g de His/d, 6,0 g de Met/d e 19 g de Lys/d infundidos no pós-
operatório.
2Contrastes: 1 = Controle versus todas as outras infusões, 2 = HI versus HM, HL e HML, 3 = HM e HL

versus HML e 4 = HM versus HL.


†P ≤ 0.10.
*P ≤ 0.05.
**P ≤ 0.01.
***P ≤ 0.001.

Journal of Dairy Science Vol. 82, No. 12, 1999


PRIMEIROS AMINOÁCIDOS LIMITANTES NA DIETA DE 2679
SILAGEM DE GRAMA
TABELA 2679. Médias dos mínimos quadrados para 2679diferença arteriovenosa
3BCAA = AA de cadeia ramificada (Ile, Leu e Val), EAA = AA essencial (Arg, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe,
média de AA plasmático.
Thr, Trp e Val), NEAA = AA não essencial (Ala, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, Pro, Ser e Tyr) e TAA = EAA
+ NEAA.
4P > 0.10.

Journal of Dairy Science Vol. 82, No. 12, 1999


2680 VANHATALO ET AL.

AA infundido por via pós-renal (µmol/L)1 Contraste (P)2

AA3 Controle HI HM HL HML SEM 1 2 3 4


Arg 30.5 37.9 39.1 40.2 33.0 4.61 NS 4 NS NS NS
Sua 11.2 10.1 13.4 16.1 11.7 1.76 NS NS NS NS
Ile 38.2 31.1 43.9 38.9 36.6 3.49 NS † NS NS
Leu 49.6 45.7 56.9 53.8 54.3 3.48 NS * NS NS
Lys 44.4 42.3 49.2 55.9 55.3 4.31 NS † NS NS
Met 10.2 10.3 12.0 11.7 12.8 0.98 NS NS NS NS
Phe 19.5 17.3 22.3 19.0 20.5 1.37 NS † NS NS
Thr 24.4 24.8 32.9 30.4 28.8 2.17 † * NS NS
Trp 1.3 3.0 3.3 3.4 4.5 1.45 NS NS NS NS
Val 47.7 41.6 55.0 50.9 49.4 5.38 NS NS NS NS
Ala 20.4 20.0 26.8 27.1 15.3 7.18 NS NS NS NS
Asn 12.2 12.9 18.8 14.1 14.8 1.52 NS NS NS †
Asp 4.1 3.9 4.9 5.4 3.6 0.43 NS NS * NS
Cit 4.0 -0.6 4.6 3.8 2.1 1.67 NS † NS NS
Cys 1.3 1.0 1.4 5.1 1.0 0.48 NS NS NS NS
Gln 30.6 30.0 36.9 35.2 22.3 5.59 NS NS † NS
Glu 9.5 4.0 18.9 22.2 10.1 7.42 NS NS NS NS
Gly 9.5 4.0 18.8 22.2 10.1 7.42 NS NS NS NS
Orn 19.0 17.5 20.1 19.2 19.1 1.11 NS NS NS NS
Profissional 14.1 4.9 13.9 8.4 4.6 3.82 NS NS NS NS
Ser 6.1 10.7 24.0 18.5 15.2 2.84 ** * NS NS
Tau 2.3 -1.8 3.0 4.3 2.2 1.79 NS * NS NS
Tyr 16.9 16.1 21.6 19.5 19.8 2.10 NS NS NS NS
BCAA 135.5 118.4 155.7 143.4 140.1 11.86 NS † NS NS
EAA 277.1 264.1 327.8 320.0 306.7 26.19 NS NS NS NS
NEAA 176.8 167.8 237.9 229.4 166.9 21.43 NS NS * NS
TAA 453.9 431.9 565.7 549.3 473.6 41.53 NS † NS NS
1Controle = sem infusão de AA no pós-operatório; HI = 6,5 g de His/d infundidos no pós-operatório;

HM = 6,5 g de His/d e 6 g de Met/d infundidos no pós-operatório; HL = 6,5 g de His/d e 19 g de Lys/d


infundidos no pós-operatório; e HML = 6,5 g de His/d, 6,0 g de Met/d e 19 g de Lys/d infundidos no pós-
operatório.
2Contrastes: 1 = Controle versus todas as outras infusões, 2 = HI versus HM, HL e HML, 3 = HM e HL

versus HML e 4 = HM versus HL.


3BCAA = AA de cadeia ramificada (Ile, Leu e Val), EAA = AA essencial (Arg, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe,

Thr, Trp e Val), NEAA = AA não essencial (Ala, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, Pro, Ser e Tyr) e TAA = EAA
+ NEAA.
4P > 0.10.
†P ≤ 0.10.
*P ≤ 0.05.
**P ≤ 0.01.

infusões de AA geralmente não tiveram efeito


tendeu (P ≤ 0,13) a diminuir quando His foi infundido
sobre a fermentação ruminal ou a dieta
em combinações com Met ou Lys ou ambos, em vez de
sozinho. A absorção (gramas por quilograma de leite)
de EAA, NEAA ou TAA pela glândula mamária
geralmente não foi afetada pelas infusões de AA
(Tabela 8). No entanto, a absorção de Ser foi maior (P
= 0,01) nos tratamentos contendo His em comparação
com o controle. A captação de Arg foi maior (P =
0,04) e a de Cit e Tau foi menor (P ≤ 0,06) quando o
His foi infundido sozinho em vez de junto com outros
AA. A absorção de NEAA e Asp tendeu a ser (P ≤
0,11) maior nos tratamentos HM e HL do que no
HML. A absorção de Lys foi maior (P = 0,06) no
tratamento HL do que no HM.
†P ≤ 0.10.
*P ≤ 0.05. DISCUSSÃO
**P ≤ 0.01.
Características da dieta basal
***P ≤ 0.001.
Como em nossos experimentos anteriores (35), as
Journal of Dairy Science Vol. 82, No. 12, 1999
PRIMEIROS AMINOÁCIDOS LIMITANTES NA DIETA DE 2681
SILAGEM DE GRAMA
TABELA 2681. Médias dos mínimos quadrados para 2681diferença arteriovenosa
digestibilidade, média de AAque
indicando plasmático.
as infusões não tiveram
efeito sobre o suprimento de nutrientes da dieta basal.
Assumindo a concentração de energia metabolizável da
dieta experimental (11,0 MJ/kg de MS) com base na
digestibilidade da MO medida, as vacas consumiram
energia metabolizável ligeiramente acima das
necessidades. Entretanto, como as dietas experimentais
não foram suplementadas com proteína para evitar a
influência mascaradora da suplementação de AA, o
suprimento calculado de AA em termos de AAT (AA
absorvido do intestino delgado; 21) foi ligeiramente
insuficiente para atender às exigências. Com dietas de
silagem de grama, os suplementos proteicos, por
exemplo, farelo de colza e caseína infundida pós-escolar,
aumentaram consistentemente a produção de leite em
vacas de alta produção (18, 33), mas também em vacas de
baixa produção, mesmo quando suas necessidades de
AAT foram atendidas (16).
Caracterização dos padrões de fermentação ruminal de
dietas baseadas em silagem de grama fermentada
restritivamente

Journal of Dairy Science Vol. 82, No. 12, 1999


2682 VANHATALO ET AL.

com uma pequena proporção de propionato e altas A suplementação de ureia em condições dietéticas
proporções de AGVs lipogênicos (16), o que, por sua semelhantes (1) apóia ainda mais esse achado.
vez, pode ser uma razão para o suprimento limitado
de glicose das dietas de silagem de grama (23). No Metabolitos plasmáticos
presente estudo, o valor médio de 144 mmol/mol para
a proporção molar de propionato foi ainda mais baixo Suprimento de aminoácidos. A concentração
do que o normalmente encontrado para esse tipo de arterial e o fluxo sanguíneo são os principais
dieta (16). A concentração média de N de amônia no determinantes do suprimento de AA para a glândula
licor ruminal foi de 5,4 mmol/L, excedendo em muito a mamária (2). As concentrações plasmáticas arteriais
quantidade mínima para as necessidades bacterianas aumentadas de His, Met e Lys indicam que o AA
(30). A quantidade de N degradável no rúmen infundido abso- masalmente nesse experimento
disponível foi, portanto, obviamente adequada, apesar aumentou o suprimento de His, Met e Lys
do baixo teor de PB da dieta (13,2%). O fato de a potencialmente absorvíveis. Entretanto, o aumento da
produção de proteína microbiana não ter respondido à produção de leite e de proteína do leite

TABELA 7. Médias dos mínimos quadrados para extração (AV1 Diferença/concentração arterial) de AA
p l a s m á t i c o pela glândula mamária.

AA Infundido por via pós-truminal (%)2 Contraste (P)3

AA4 Controle HI HM HL HML SEM 1 2 3 4


Arg 47.5 58.3 53.8 47.8 43.1 5.14 NS5 NS NS NS
Sua 62.2 18.8 24.5 33.4 34.0 4.04 *** * NS NS
Ile 30.8 27.9 33.2 25.0 24.8 2.21 NS NS NS *
Leu 48.1 59.1 61.9 57.2 59.2 1.80 *** NS NS NS
Lys 53.7 55.0 55.4 46.2 47.7 2.54 NS NS NS *
Met 49.1 59.7 35.7 63.6 42.8 2.78 NS ** † ***
Phe 39.4 47.8 50.5 45.2 47.7 2.86 * NS NS NS
Thr 23.7 27.3 33.1 31.2 34.0 1.42 *** ** NS NS
Trp 5.7 13.5 10.4 12.3 16.1 4.50 NS NS NS NS
Val 23.8 24.6 29.5 24.4 26.0 2.04 NS NS NS NS
Ala 8.6 8.6 11.0 12.1 6.3 3.00 NS NS NS NS
Asn 23.3 27.1 34.2 25.1 28.8 1.82 * NS NS **
Asp 37.6 38.4 43.6 43.8 35.5 2.35 NS NS * NS
Cit 5.4 -1.1 6.1 5.5 2.5 2.20 NS * NS NS
Cys6 6.1 3.9 6.2 8.3 3.7 1.97 NS NS NS NS
Gln 21.1 19.5 23.8 24.0 17.6 3.62 NS NS NS NS
Glu 40.8 40.5 41.3 43.3 38.1 4.15 NS NS NS NS
Gly 2.8 0.9 6.0 6.9 3.9 2.40 NS NS NS NS
Orn 46.9 44.2 45.4 41.6 41.4 2.39 NS NS NS NS
Profissional 17.6 6.4 16.8 9.4 5.3 4.59 NS NS NS NS
Ser 5.8 12.2 25.3 18.5 18.2 2.77 *** * NS NS
Tau 5.8 -6.3 7.2 11.2 4.9 4.87 NS * NS NS
Tyr 35.3 46.4 51.0 44.9 49.5 3.87 * NS NS NS
BCAA 31.7 32.9 37.9 31.4 32.6 1.91 NS NS NS *
EAA 49.8 51.1 58.9 54.4 51.5 3.07 NS NS NS NS
NEAA 14.9 14.6 19.8 18.9 15.4 1.55 NS † † NS
TAA 22.8 23.1 27.7 26.0 24.5 1.57 NS NS NS NS

Arteriovenoso.
1

Controle = sem infusão de AA no pós-operatório; HI = 6,5 g de His/d infundidos no pós-operatório;


2

HM = 6,5 g de His/d e 6 g de Met/d infundidos no pós-operatório; HL = 6,5 g de His/d e 19 g de Lys/d


infundidos no pós-operatório; e HML = 6,5 g de His/d, 6,0 g de Met/d e 19 g de Lys/d infundidos no pós-
operatório.
3Contrastes: 1 = Controle versus todas as outras infusões, 2 = HI versus HM, HL e HML, 3 = HM e HL

versus HML e 4 = HM versus HL.


4BCAA = AA de cadeia ramificada (Ile, Leu e Val), EAA = AA essencial (Arg, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe,

Thr, Trp e Val), NEAA = AA não essencial (Ala, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, Pro, Ser e Tyr) e TAA = EAA
+ NEAA.
†P ≤ 0.10.
*P ≤ 0.05.
**P ≤ 0.01.
***P ≤ 0.001.

Journal of Dairy Science Vol. 82, No. 12, 1999


PRIMEIROS AMINOÁCIDOS LIMITANTES NA DIETA DE 2683
SILAGEM DE GRAMA
TABELA 2683. Médias dos mínimos quadrados para 2683diferença arteriovenosa
5P >média
0.10. de AA plasmático.
6N = 18, porque a concentração arterial e a diferença de AV em dois casos foram 0; portanto, não foi

possível incluir esses valores na análise; o SEM nesses casos foi de 0,0249.

Journal of Dairy Science Vol. 82, No. 12, 1999


PRIMEIROS AMINOÁCIDOS LIMITANTES NA DIETA DE 2681
SILAGEM DE GRAMA
TABELA 8. Médias dos mínimos quadrados para absorção mamária de AA do plasma.
AA Infundido por via pós-renal (g/kg de leite)1 Contraste (P)2

AA3 Controle HI HM HL HML SEM 1 2 3 4


Arg 2.75 3.76 3.00 3.22 2.65 0.278 NS 4 * NS NS
Sua 0.86 0.87 0.92 1.14 0.85 0.095 NS NS NS NS
Ile 2.56 2.30 2.47 2.44 2.21 0.157 NS NS NS NS
Leu 3.34 3.33 3.23 3.39 3.30 0.211 NS NS NS NS
Lys 3.32 3.45 3.13 3.84 3.76 0.232 NS NS NS †
Met 0.78 0.85 0.78 0.82 0.88 0.042 NS NS NS NS
Phe 1.62 1.60 1.57 1.50 1.57 0.076 NS NS NS NS
Thr 1.48 1.64 1.71 1.72 1.60 0.120 NS NS NS NS
Trp 0.13 0.44 0.32 0.25 0.53 0.171 NS NS NS NS
Val 2.85 2.72 2.76 2.77 2.69 0.161 NS NS NS NS
Ala 0.91 0.91 0.97 1.12 0.69 0.257 NS NS NS NS
Asn 0.94 1.08 1.23 1.01 1.02 0.125 NS NS NS NS
Asp 0.28 0.29 0.29 0.36 0.22 0.041 NS NS † NS
Cit 0.35 -0.06 0.33 0.31 0.19 0.133 NS † NS NS
Cys 0.08 0.07 0.07 0.12 0.05 0.033 NS NS NS NS
Gln 2.28 2.40 2.31 2.11 1.61 0.453 NS NS NS NS
Glu 6.00 6.75 5.90 7.39 5.29 1.039 NS NS NS NS
Gly 0.32 0.16 0.59 0.76 0.36 0.243 NS NS NS NS
Orn 1.27 1.28 1.14 1.18 1.16 0.078 NS NS NS NS
Profissional 0.83 0.32 0.69 0.37 0.27 0.236 NS NS NS NS
Ser 0.34 0.67 1.16 0.98 0.79 0.147 ** NS NS NS
Tau 0.18 -0.15 0.19 0.28 0.15 0.096 NS ** NS NS
Tyr 1.55 1.60 1.68 1.62 1.69 0.085 NS NS NS NS
BCAA 8.75 8.35 8.46 8.60 8.20 0.459 NS NS NS NS
EAA 19.7 20.9 19.9 21.1 20.0 1.13 NS NS NS NS
NEAA 15.3 15.3 16.5 17.6 13.5 1.64 NS NS NS NS
TAA 35.0 36.3 36.5 38.7 33.5 2.53 NS NS NS NS
1Controle = sem infusão de AA no pós-operatório; HI = 6,5 g de His/d infundidos no pós-operatório;

HM = 6,5 g de His/d e 6 g de Met/d infundidos no pós-operatório; HL = 6,5 g de His/d e 19 g de Lys/d


infundidos no pós-operatório; e HML = 6,5 g de His/d, 6,0 g de Met/d e 19 g de Lys/d infundidos no pós-
operatório.
2Contrastes: 1 = Controle versus todas as outras infusões, 2 = HI versus HM, HL e HML, 3 = HM e HL

versus HML e 4 = HM versus HL.


3BCAA = AA de cadeia ramificada (Ile, Leu e Val), EAA = AA essencial (Arg, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe,

Thr, Trp e Val), NEAA = AA não essencial (Ala, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, Pro, Ser e Tyr) e TAA = EAA
+ NEAA.
4P > 0.10.
†P ≤ 0.10.
*P ≤ 0.05.
**P ≤ 0.01.

podem ter indicado um efeito adverso do excesso


(Tabela 3) foram associados apenas ao aumento do
de AA (29). Em nosso estudo, a infusão de apenas
suprimento de His. A baixa concentração de His no
6,5 g/d de His em uma dieta de silagem de grama
plasma arterial quando as vacas foram alimentadas
foi uma quantidade alta o suficiente para
com a dieta de controle (Tabela 5), juntamente com a
maior taxa de extração (62%) de todos os AA pela
glândula mamária (Tabela 7), sustentam que o His é o
AA mais crítico nessa dieta específica. Observe que a
concentração plasmática de His com a dieta de
controle no presente estudo foi mais de quatro vezes
menor do que com a dieta de controle à base de milho
(18 vs. 76 µmol/L) no estudo de infusão de Fisher
(11), sugerindo que o His é deficiente em uma dieta à
base de silagem de capim, mas não em uma dieta à
base de milho. A concentração plasmática
extremamente alta de His (135 µmol/L) e a redução
da ingestão causada pelo nível mais alto de infusão
intravenosa de His (50 g/d) no estudo de Fisher
Journal of Dairy Science Vol. 82, No. 12, 1999
2682 VANHATALO ET AL.

elevam a concentração de His no plasma arterial de 18 a


57 µmol/L. Essa última estimativa representa a
concentração plasmática de His frequentemente encontrada
em dietas à base de milho (por exemplo, 11, 25). No
entanto, a baixa concentração de His no plasma arterial
encontrada na dieta de controle no presente estudo parece
ser típica de dietas de silagem de grama, seja ela
extensivamente (7, 10, 23) ou restritivamente fermentada
(23, 36). Essas concentrações plasmáticas de His são
quase tão baixas quanto as encontradas em cabras em
lactação com deficiência induzida de His (2). Por outro
lado, em alguns experimentos, foram encontradas
concentrações plasmáticas de His de até 40 µmol/L na
alimentação com silagem de capim (22, 35). Em
comparação com nossos estudos anteriores de infusão
com Met e Lys (35), parece que a concentração de His no
plasma arterial é mais sensível do que a de Met ou Lys às
mudanças no suprimento.

Journal of Dairy Science Vol. 82, No. 12, 1999


PRIMEIROS AMINOÁCIDOS LIMITANTES NA DIETA DE 2683
SILAGEM DE GRAMA encontrada para vacas alimentadas com dietas de silagem de
A diminuição das concentrações arteriais de Leu, grama fermentada restritivamente (23). No presente estudo,
Phe, Thr, Gly, Ser e Tyr (Tabela 5) pode ser a baixa proporção de propionato no AGV do rúmen e a
interpretada como uma indicação do aumento da redução significativa do teor de lactose do leite em
absorção de AA usado para a síntese de proteína do tratamentos com His sugerem que um suprimento
leite em tratamentos contendo His. A concentração insuficiente de glicose limitou a produção de leite em dietas
especialmente reduzida de Gly reflete o status de suplementadas com His. Em outros estudos com dietas
proteína comprovado das vacas (3), como também é baseadas em fertilizantes restritivos, o
encontrado em resposta a infusões de caseína
abomasal (23). A oxidação de Leu, Phe, Thr e Tyr é
limitada (4) e, portanto, esses AA provavelmente
foram usados como precursores para a síntese de
proteínas. Dos AA mencionados acima, sabe-se que o
Gly e o Ser também são glicogênicos (3), embora não
na mesma proporção encontrada para os AA
altamente glicogênicos, como Gln, Asp, Ala e Glu
(4). No presente estudo, as concentrações plasmáticas
de Gln e Glu foram encontradas, obviamente devido à
degradação durante o armazenamento das amostras. A
diferença de AV mamária, a ex tração ou a captação de
EAA, NEAA, TAA ou BCAA não foram afetadas pelas
infusões de His. O aumento da captação de Ser pela
glândula mamária com infusões de AA foi encontrado
anteriormente e foi associado a um possível
metabolismo entre Ser e lactato ou à capacidade de
Ser ser sintetizado a partir da glicose na glândula
mamária (22). Com base na concentração reduzida no
plasma arterial e na alta taxa de extração em
tratamentos contendo His (Tabela 7), o Leu foi
provavelmente o segundo AA limitante no presente
estudo.
A variação na produção de leite geralmente é
acompanhada por uma variação semelhante no fluxo
sanguíneo mamário, embora essa relação estreita nem
sempre se mantenha (26). Foi sugerido que o AA
pode influenciar a taxa de fluxo sanguíneo em
ruminantes (15). No presente estudo, apesar de
aumentar a produção de leite, a infusão de His não
afetou o fluxo plasmático mamário. No entanto, a
infusão de Met pareceu estar associada à diminuição do
fluxo plasmático mamário, como também observado
anteriormente (15). Essa associação pode estar
relacionada ao aumento da concentração arterial de
Tau resultante das infusões de Met no abomaso. A
taurina é um intermediário do metabolismo da Met e
foi descoberto que ela afeta o fluxo sanguíneo ao
suprimir os vasos sanguíneos (37).
NEFA e glicose. Dos metabólitos de produção de
energia examinados, nem o NEFA arterial nem a
glicose foram afetados pelos tratamentos. A
concentração arterial de NEFA, em média 98
µmol/L, foi típica de vacas alimentadas com silagem
de capim no meio da lactação e com balanço
energético positivo. A concentração média de glicose
de
3,19 mmol/L foi bastante baixa, mas estava na faixa
Journal of Dairy Science Vol. 82, No. 12, 1999
2684 VANHATALO ET AL.
síntese de caseína estimulada. Os aumentos na
A silagem de gramíneas, que aumenta o produção de proteína do leite obtidos por infusões
suprimento de precursores de glicose, pós-espectrais de AA foram repetidamente associados
aumentou os teores de glicose plasmática e de ao aumento da produção de caseína, enquanto as
lactose no leite, conforme analisado por frações de soro de leite e NPN não foram afetadas
Huhtanen (16). Nessas dietas, alguns dos AA (31). Os aumentos na produção de proteína do leite
são catabolizados para produzir glicose para a com Met e Lys em dietas à base de milho geralmente
síntese de lactose em vez de serem usados na resultam de aumentos no conteúdo de proteína do
síntese de proteína do leite, como sugere o leite (25, 31) e não de aumentos na produção de leite,
aumento da produção de proteína do leite com como foi encontrado em resposta ao His em uma dieta
o aumento do fornecimento de precursores de à base de silagem de grama no presente estudo.
glicose (16, 17). Tem sido difícil aumentar a São escassos os resultados publicados de estudos de
proporção molar de propionato no AGV ruminal infusão, quando o His como único AA foi infundido
alterando a quantidade de concentrado nas dietas por via pós-renal.
de silagem de grama (16). Por exemplo, o
aumento da proporção de cevada para 75% da
MS da dieta levou a uma redução na proporção
de acetato e a um aumento na proporção de
butirato, mas a porção de propionato permaneceu
inalterada (20). Portanto, em estudos de infusão
de AA, parece essencial garantir o
fornecimento adequado de glicose às vacas para
identificar especificamente as respostas de
produção ao AA em estudo, independentemente
do efeito da glicose. Os resultados atuais
claramente justificam mais investigações sobre
a possível interação entre His e glicose.

Respostas de produção para Infusões de AA


Efeito do His. Os aumentos significativos na
produção de leite e proteína do leite (em média
0,9 kg e 29 g, respectivamente) causados por
infusões de 6,5 g de His no abomaso das vacas
confirmam nossa hipótese (35) de que o His é o
primeiro AA limitante em dietas à base de
silagem de capim. Essa descoberta foi
confirmada em nossos estudos posteriores [(19)
M. Korhonen, A. Vanhatalo, T. Varvikko e P.
Huhtknen, 1996, não publicado]. Assim, com a
produção de leite e a produção de proteína do
leite como critérios de resposta primários,
nossos resultados sugerem que a alegação geral
de que a Met e a Lys são os primeiros AA
limitantes para a produção em ruminantes (27,
31) não se aplica a dietas à base de silagem de
grama. As infusões de His não afetaram o teor
de proteína do leite, e a diminuição
significativa (P < 0,03) no teor de gordura do
leite foi devido à diluição da gordura na maior
quantidade de leite produzida com as infusões
de His, resultando em um aumento significativo
na proporção de proteína e gordura do leite.
Como o teor de ureia do leite não foi afetado
pelas infusões de His, o aumento na produção
de proteína foi obviamente resultado de uma
Journal of Dairy Science Vol. 82, No. 12, 1999
PRIMEIROS AMINOÁCIDOS LIMITANTES NA DIETA DE 2685
SILAGEM DE GRAMA experimentais (35)
e os dados experimentais atuais
Fisher (11) observou que quantidades crescentes de sobre o His justificam e confirmam essas
infusão intravenosa de His aumentaram a DMI das observações e sugestões anteriores.
vacas em quantidades baixas de His (20 g/d), mas a Os estudos de infusão de aminoácidos têm se
reduziram em níveis altos de His (50 g/d), em concentrado principalmente na ideia de identificar
comparação com o controle salino. Em contraste com o primeiro AA limitante em termos de resposta de
nossos estudos, o conteúdo de proteína do leite produção à infusão do AA específico em questão.
diminuiu em ambos os níveis de infusão de His. A falta Menos atenção foi dada ao efeito da dieta em si,
de resposta positiva ao His estava obviamente o u seja, se o
relacionada à quantidade suficiente de His na dieta
basal, que consistia em milho e silagem de milho,
como será discutido mais adiante. Apesar da falta de
dados reais de produção, outras referências na
literatura especulam sobre o papel do His como
candidato ao primeiro AA limitante. Virtanen (36)
descobriu que o His e o Trp na proteína do leite eram
mais fracamente marcados do que outros EAA depois
que as vacas recebiam uma dose única de sulfato de
amônio marcado com15 N. Esse resultado foi
verdadeiro para vacas alimentadas com dietas
purificadas e dietas de silagem de grama
suplementadas com aveia. Com base nesses
resultados, ele sugeriu que a síntese desses AA,
especialmente de His, pode formar um gargalo na
síntese de proteínas. Mais tarde, Fraser et al. (12) e
Chen et al. (9) sugeriram que o His na proteína
microbiana é o único AA limitante para a produção de
leite. Fraser et al. (12) também relataram reduções
significativas na produção de leite e proteína do leite
devido à remoção de Lys e His, mas não de Met, da
infusão abomasal da mistura de EAA em vacas que
foram mantidas por infusão intragástrica total de
nutrientes. Chen et al. (9) e Cant et al. (6)
demonstraram de forma semelhante que a remoção de
His das misturas de AA infundidas no abomaso
causou redução na produção de proteína do leite.
Informações detalhadas sobre as dietas, quantidades
de AA infundidas ou outros parâmetros de produção
medidos não foram, entretanto, fornecidas nos
relatórios acima. Choung e Chamberlain (10)
relataram um aumento de 26% na produção de proteína
de vacas alimentadas com dieta de silagem de grama
em resposta à infusão intravenosa de uma mistura de
AA que incluía His, Lys, Met e Trp. A remoção de Met
da mistura não afetou o rendimento proteico. A partir
da comparação das concentrações de AA na digesta
microbiana e total e nos alimentos usados no
experimento em relação à proteína do leite, eles
concluíram que o His é o primeiro AA limitante na
mistura dos três principais AA infundidos por via
abomasal em seu experimento. Da mesma forma, ao
comparar a composição de AA bacteriano em relação
à proteína do leite, Oldham (26) sugeriu que o His
poderia ser o primeiro AA limitante em ruminantes.
Nosso cálculo teórico com base nas proporções reais
de entrada e saída de EAA a partir de dados
Journal of Dairy Science Vol. 82, No. 12, 1999
2686 VANHATALO ET AL.
Deve-se observar, no entanto, que os aumentos nos
A variação no fornecimento de AA da dieta basal tem teores de gordura e proteína do leite no presente
qualquer influência sobre o AA limitante. Nossos experimento foram associados a infusões contendo
resultados - que diferem do conceito geral de que a Met e Met somente quando não houve resposta
a Lys são os primeiros AA limitantes - sugerem que o correspondente ao tratamento com HL. Essa
AA que primeiro limita a produção de leite pode variar de associação sugere que a Met, e não a Lys, é
acordo com as dietas. Assim, o papel da alimentação responsável pela síntese de gordura.
basal é um importante determinante do primeiro AA
limitante na produção de leite. Como o fluxo de AA para
o trato inferior se origina principalmente de proteína
microbiana e dietética, o fornecimento de AA ao animal
hospedeiro depende da composição de AA e das
quantidades proporcionais dessas frações de proteína na
proteína total que entra no trato inferior. Assim, a
variação no primeiro AA limitante avaliado para
diferentes dietas, por exemplo, para dietas à base de
grama e milho, pode ser explicada por proporções
variáveis de proteína microbiana na digesta que entra no
duodeno. A proteína microbiana é uma fonte de AA mais
importante na silagem de grama do que na alimentação à
base de milho. Essa diferença enfatiza o papel do His como
primeiro AA limitante na alimentação com silagem de
grama, já que o His é provavelmente o primeiro AA
limitante na proteína microbiana (9, 12). Por outro lado,
em dietas à base de milho, a RUP pode ser uma fonte de
AA mais importante. O milho, rico em His, mas
deficiente em Lys, é frequentemente suplementado com
farelo de soja, que, por sua vez, é deficiente em Met.
Portanto, as dietas à base de milho podem ser adequadas em
His, mas deficientes em Met e Lys.
Efeitos da Met e Lys. Não foi observada nenhuma
função da Met ou da Lys no aumento da produção de
leite ou de proteína do leite nesse experimento. Nossos
resultados anteriores (35) demonstraram que nem a Met
nem a Lys são o primeiro AA limitante na dieta de
silagem de capim. No entanto, a Met e a Lys são
frequentemente consideradas como AA co-limitantes. No
entanto, os resultados atuais não confirmam que eles
sejam, separadamente ou em conjunto, o segundo AA
limitante em dietas de silagem de grama. Em vez disso, a
Met pareceu aumentar o teor de gordura do leite (+1,8
g/kg), conforme encontrado e discutido anteriormente
(35), embora um leve aumento associado à Met no teor
de proteína do leite (+1,2 g/kg) tenha contrastado com
nossas descobertas anteriores. Além disso, Chamberlain
et al. (7) relataram que as respostas da produção de leite à
Met e à Lys em uma dieta de silagem de grama foram
frequentemente limitadas a respostas inconsistentes no
teor de gordura do leite. Por exemplo, apesar de um
aumento significativo na produção de leite em resposta à
infusão de proteína ou de mistura completa de AA na
alimentação de silagem de capim, uma infusão de Met e
Lys em uma dieta semelhante tendeu a aumentar o teor de
gordura do leite sem afetar a produção de leite (14).
Journal of Dairy Science Vol. 82, No. 12, 1999
PRIMEIROS AMINOÁCIDOS LIMITANTES NA DIETA DE 2687
SILAGEM DE GRAMA 76:762-774.
CONCLUSÕES 6 Cant, J. P., D. R. Trout, F. Qiao e B. W. McBride. 1997. Respostas da
composição do leite à infusão arterial unilateral de misturas de
A infusão de His aumentou significativamente a aminoácidos. J. Dairy Sci. 80 (Suppl. 1):153. (Abstr.)
7 Chamberlain, D. G., J.-J. Choung e S. Robertson. 1992. Protein
produção de leite e proteína, o que indica que o His é nutrition of dairy cows receiving grass silage diets: effects of feeding a
o primeiro AA limitante na produção de leite de vacas protein supplement of unbalanced amino acid composition. J. Sci. Food
alimentadas com dietas de silagem de grama Agric. 60:425-430.
8 Chamberlain, D. G., P. A. Martin e S. Robertson. 1989. Opti-
suplementadas com concentrados de cereais. O His
adicional diminui os teores de gordura e lactose do
leite. A redução do teor de lactose do leite com His
sugere que a glicose é o próximo fator que limita a
produção de leite em dietas de silagem de grama.
Portanto, a deficiência no suprimento de glicose de
vacas alimentadas com silagem de grama precisa ser
levada em consideração em pesquisas futuras sobre
AA, e a possível interação entre His e glicose deve ser
estudada. A falta de respostas de produção de leite
para Met ou Lys ou ambos em combinações com His
sugere que nenhum desses dois AA é o segundo AA
limitante em dietas à base de silagem de grama. Em
vez disso, o papel do Leu nessa resposta merece mais
pesquisas. Também são necessárias mais pesquisas
para quantificar as respostas metabólicas e
lactacionais em função da concentração gradual de
His adicional na dieta. Nossos resultados - que
diferem do conceito geral de que a Met e a Lys são os
primeiros AA limitantes - ilustram que os AA que
limitam a produção de leite variam de acordo com as
situações da dieta. Assim, o papel da alimentação
basal é um determinante importante do primeiro AA
limitante na produção de leite.

AGRADECIMENTOS
Agradecemos a Aino Matilainen e sua equipe pela
assistência técnica qualificada e pelo cuidado com os
animais de experimentação. Este trabalho recebeu apoio
financeiro da Rehuraisio Ltd., 21201 Raisio, Finlândia.

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