MICRONÚCLEO EM CÉLULAS DA MUCOSA ORAL /CITOGENÉTICA

Micronúcleos são núcleos pequenos que se formam por cromossomos acêntricos ou mesmo inteiros que
não migram corretamente para os polos durante a anáfase. Estes cromossomos ou fragmentos
cromossômicos são englobados por membrana formando os micronúcleos (Figura 8.1). A presença de
grande quantidade de micronúcleos nas células, de forma recorrente, pode estar associada a eventos
mutagênicos ou ser uma evidência de processo carcinogênico, onde células com erro não sofrem apoptose
e permanecem em divisão.

As células da mucosa oral podem ser usadas para observação de micronúcleos. O encontro de grande
número de micronúcleos pode ser indício de atividade mutagênica ou carcinogênica (já que agentes
mutagênicos podem ser carcinogênicos ou células cancerígenas podem levar a divisão de células com
erros cromossômicos). Apesar disso, o encontro de micronúcleos em células da mucosa pode ser
decorrente de stress ou uso de medicamentos, e para confirmar uma possível doença, outras lâminas de
micronúcleos devem ser feitas em intervalos maiores para se observar a repetitividade do evento.

Protocolo de preparo de lâmina de micronúcleo

Material e métodos

Materiais Reagentes
- cubetas para coloração de lâminas - ácido clorídrico (HCl) 1N
- espátula de madeira ou palito de picolé - água destilada
- estufa - água mineral
- lâminas e lamínulas - Etanol comum
- microscópio óptico - corante Giemsa
- Metanol.

Org an i zad o re s : In s titu to d e Bi olo gi a – U FP el

Professores: Monica L. Blauth; Fábio R. P. de Souza; Juliana Cordeiro De p art a me n to d e E co lo gia,
Acadêmicos: Daniele S. Souza, João H. F. de Oliveira, Carolina Pedriger Zool og ia e G en éti ca
Procedimentos

1. Usar lâminas preparadas adequadamente conforme o protocolo de limpeza das

lâminas.
2. Limpe a boca com água fazendo bochechos.
3. Molhar a espátula de madeira em água.
4. Coletar células da boca com leve raspagem da mucosa.
5. Espalhe o material coletado passando a espátula da borda da ponta fosca para a
extremidade da lâmina (Figura 1), até chegar ao seu final.

Figura 1: Esquema de transferência de

material da espátula para lâmina de vidro.
Na primeira linha deverá ter mais material
que nas linhas seguintes.

6. Secar à 25ºC por 1h

7. Fixar o material na lâmina usando metanol por 10 min.
8. Tratar com HCl 1N pelos seguintes tempos e temperaturas:
- 22ºC, 1 min
- 65ºC, 10 min
- Temperatura ambiente, 10 min
- 22ºC, 5 min
- água destilada, 10 min
9. Corar com solução Giemsa tamponada por 10 min.
10. Lavar as lâminas. Se ficarem muito coradas, passar em álcool e lavar com água em
seguida.