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OBSERVAO DE CLULAS HUMANAS EM

ESFREGAO DE MUCOSA BUCAL

Organizao: Eliana Maria Beluzzo Dessen e Jorge Oyakawa


Diagramao: Regina de Siqueira Bueno

Com um
palito de
fsforo
raspar,
levemente,
a parte
interna da
bochecha.

Fazer um esfregao espalhando sobre


uma lmina de vidro o material raspado
da bochecha.

Fixar o material
mergulhando a lmina
com o esfregao
em lcool 70%.
Aguardar 2 minutos.

Retirar a lmina do alcool e


escorrer o excesso de lquido
em um pedao de papel ltro.

Com o auxlio
de uma pisseta,
remover o
excesso de azul
de metileno,
jogando sobre a
lmina um jato
de gua.

Retirar as bolhas de ar
pressionando levemente
a lamnula com a pina.

Aguardar
2 minutos

Colocar a lmina sobre a bancada e


pingar, sobre a regio do esfregao,
uma gota de azul de metileno.
Aguardar 2 minutos.
l de

Azu

no

tile

Me

ua

Colocar a preparao dentro de um


pedao de papel ltro dobrado. Pressionar
levemente para retirar o excesso de lquido.

10

Observar ao microscpio o
material, usando a objetiva
de 10x e em seguida a de
40x. Girar vagarosamente
o micromtrico para obter
o melhor foco. Fazer
um desenho das clulas
observadas.

Com o auxlio do frasco contagotas pingar uma gota de gua


sobre a regio do esfregao.
Cobrir a preparao com
uma lamnula.

Aguardar
2 minutos

Etapas preparatrias:
Se voc professor e deseja aplicar esse protocolo em sala de aula
siga as seguintes etapas preparatrias:

Antes da aula:
Familiarizar os alunos com o uso do microscpio.
Para tanto poder recorrer aula sobre microscopia,
disponvel nesta pgina.
Providenciar a soluo de azul de metileno 0,5%*.

Material suficiente para uma classe com 8 grupos de 5 estudantes.

















8 frascos com lminas de vidro para microscopia


8 frascos para o descarte das lminas de vidro usadas
8 placas de Petri com lamnulas
8 placas de Petri com palitos de fsforo
8 recipientes para descarte dos palitos usados
8 pinas de ponta fina
8 rolos de papel higinico fino e macio
8 frascos conta-gotas com azul de metileno 0,5%*
8 frascos conta-gotas com gua
8 pissetas com gua
8 recipientes com lcool 70% (tamanho suficiente para a lmina mergulhada em p)
8 pacotes de papel de filtro cortado em tiras de aproximadamente 7 cm x 25 cm.
8 pedaos de papel ( 60 x 40 cm) para cobrir a bancada
8 microscpios
8 conjuntos de protocolos para os grupos de alunos.
8 lpis e folhas de papel para desenho

*O azul de metileno um composto aromtico heterocclico solvel em gua, com a frmula


molecular C16H18CIN3S. Usado como corante e indicador, um remdio de cor azul, vendido
em farmcias comuns.

Observao: Qualquer tipo de frasco pode ser utilizado para conter as lminas e lamnulas,

como copinhos de iogurte, vidros de gelia, etc. Existem frascos apropriados, padronizados
e baratos a venda em lojas especializadas de materiais para cosmticos e para laboratrio
(Praa da S)

ANEXO 1
Sugesto de questes para serem respondidas por grupos de
estudantes aps a visualizao do esfregao de bochecha.
1. Ao raspar a parte interna da bochecha, que tipo de tecido foi coletado?
2. Sugerir uma explicao para o tratamento do esfregao com lcool 70%.
3. Se possvel, faa uma nova preparao sem colocar o azul de metileno, observe ao
microscpio e compare o resultado com o do material corado. Este procedimento poder
ajudar a responder pergunta: - Qual a funo do azul de metileno?
4. Que estruturas voc pode observar nas clulas da bochecha?
5. Por que as clulas da bochecha aparecem isoladas umas das outras e no unidas como em
outros tecidos?
6. Voc observou alguns pontos mais escuros na superfcie das clulas? provvel que
sejam algumas bactrias que existem normalmente na nossa boca e que ficam aderidas na
mucosa. O tamanho destes microrganismos em torno de 1 m de dimetro de forma que,
para observ-las temos que usar a objetiva de 100x (objetiva de imerso) usando o leo de
imerso. Se no conhece esta prtica, pea ajuda ao professor.

Respostas para as questes:


1. O epitlio de revestimento, ou seja, o tecido epitelial.
2. O lcool 70% um fixador de materiais biolgicos, isto , ele preserva os componentes estruturais
dos tecidos, preparando o material para a colorao.
3. O azul de metileno, sendo um corante bsico, auxilia na visualizao das clulas corando o
citoplasma em azul claro e o ncleo em azul escuro.
4. Apenas o citoplasma e o ncleo. No podemos observar nitidamente, mas sabemos que a
membrana citoplasmtica que est delimitando o citoplasma.
5. As clulas da bochecha aparecem isoladas, pois o processo de raspagem com o palito rompeu a
associao que existe entre elas.
6. Sim pontos mais escuros podem ser observados sobre o citoplasma e o ncleo das clulas e
tambm claro em regies da preparao que no apresentam clulas eucariticas. Ao utilizar
o aumento de 1000x (objetiva de 100x e ocular de 10x), observa-se que algumas apresentam a
forma esfrica (cocos), outras cilndricas (bacilos) e outras filamentosas que so as formas mais
comuns das bactrias.

Sugestes de atividades correlatas


1. Existem outros experimentos sobre observao de clulas humanas que podem ser encontrados
em: Temas de Biologia. Ed. Moderna. http://www.moderna.com.br/moderna/didaticos/em/biologia/temasbio/
2. Observar um esquema de clula animal (em um livro didtico ou em outra fonte) e solicitar aos
alunos que localizem, no esquema, as estruturas visualizadas na preparao. Solicitar uma
explicao para o fato de no terem visualizado as demais estruturas da clula eucaritica.
3. Aplicar, em sala de aula, o jogo Cara a cara com a clula, disponvel em:
http://www.genoma.ib.usp.br/educacao/materiais_didaticos.php

4. Solicitar aos alunos uma comparao das estruturas internas de uma clula animal (eucaritica)
com as de uma bactria (procaritica). Pedir uma lista das estruturas comuns e no comuns aos
dois tipos de clulas.
Utilizar esta aula de laboratrio para iniciar o estudo das funes das diferentes estruturas
celulares. Aps este estudo, voltar ao jogo Cara a Cara com as clulas e solicitar que as
perguntas sejam feitas apenas com relao s funes das estruturas celulares. Trata-se de um
exerccio de motivao e de avaliao do aprendizado sobre o tema clula.