PREPARAÇÃO DO

ESFREGAÇO DE
SANGUE PERIFÉRICO E
DA GOTA ESPESSA
ESFREGAÇO DE SANGUE PERIFÉRICO

• O esfregaço de sangue, também

conhecido como distensão sanguínea ou
ainda extensão sanguínea, é um teste
realizado em hematologia para a
contagem e a identificação de
anormalidades nas células sangineas e
eventualmente parasitas
 PRINCIPIO
• O teste consiste na extensão de uma
camada fina de sangue sobre uma lâmina
de microscopia que, após corada, é
analisada ao microscópio
• O primeiro passo para se obter resultados
confiáveis é a preparação de um
esfregaço de boa qualidade sendo
necessário empregar as técnicas
correctamente.
 PREPARAÇÃO DO ESFREGAÇO DE
SANGUE PERIFÉRICO
Antes de se efectuar qualquer procedimento que
envolve manipulação de material biológico o
uso de EPI é indispensável
1) Colocar uma pequena gota de sangue, colhida
por punção digital ou venosa, na
extremidade da lâmina.
2) Tocar a gota de sangue com a borda estreita
da lâmina sem canto (lâmina extensora),
formando um ângulo de 45º com a face
superior da lâmina;
3) Fazer com a lâmina extensora um ligeiro
movimento para trás, até encostar na gota
de sangue. Deixar que a gota se difunda
uniformemente, ao longo da borda da lâmina
extensora;
4) Levar a lâmina para frente, de forma que ela
carregue a gota de sangue que se quer
estender numa camada delgada e uniforme.
NOTA:
• É essencial escorregar a lâmina extensora de
uma só vez, sem deter-se;
• O movimento de extensão deve ser uniforme.
• O sangue deve ser puxado pela lâmina e não
empurrado pela mesma (movimento suave).
• Deixar secar à temperatura ambiente ou em
uma estufa a 28 º C.
COLORAÇÃO PELO MÉTODO
DE GIEMSA

• Esse corante poderá ser utilizado

em separado ou em conjunto com
o corante May-Grunwald
 COLORAÇÃO DO ESFREGAÇO PELO
MÉTODO DE GIEMSA
1) Fixar as lâminas com álcool metílico livre de
acetona durante 1 a 2 min
2) Corar os esfregaços com solução de
Giemsa, preparada no momento da
coloração na concentração de 1 volume de
Giemsa para 9 volumes de água tamponada
(pH 6,8) ;
3) Colocar o corante sobre a lâmina ou imergir
em frasco de vidro tipo Coplin, deixando
por cerca de 5 a 10 minutos;
4) Lavar a lâmina em água da corrente (fluxo
leve);
5) Escorrer a água , deixar secar e observar
com objectiva de imersão;
NOTA:
Quando se usa corante Giemsa associado com
o May-Grunwald despensa se a prévia
fixação do esfregaço devido ao maior teor
alcoólico presente na composição do corante
 PREPARAÇÃO DA GOTA ESPESSA

1) Colher o sangue por punção digital ou

venosa,
2) Colocar 3-4 gotas de amostra na parte
central da lâmina, próximas umas das
outras
3) Usando ponta de uma outra lâmina unir
as gotas para formar “uma mancha”
circular de um centímetro de diâmetro ou
quadrada;
3) Secar a lȃmina;
4) Desemoglobinar a gota colocando a
lâmina em posição vertical e mergulhada
em um frasco contendo água destilada
morna durante 10 min;
5) Retirar a lâmina da água ( o sangue perde
sua cor, tornando-se esbranquiçado);
6) Após a desemoglobinização, sem fixar a
preparação, empregar o método comum de
coloração pelo Giemsa;
 ERROS MAIS FREQUENTES NA
PREPARAÇÃO DE ESFREGAÇOS
• Mau posicionamento das amostras na
lamina;
• Quantidade de amostras excessive ou
excassa ;
• Esfregaços feitos em laminas
engorduradas ;
• Laminas extensoras com bordas
irregulares;
 Resultados:
• Gota espessa
Na Hematologia a gota espessa é um
metodo de concentração de
hemoparasitas
• Gota estendida ou esfregaço
Permite a realização de estudo quantativo,
qualitativo e das alterações de todas
series celulares para além de ser ideal
para observação da morfologia dos
parasitas sanguineos
Observação: microscópica do esfregaço
OBRIGADA PELA ATENÇÃO