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Cultura de fezes
Swab retal
Usar swab de algodo, certificando-se de que a
ponta da haste que suporta o algodo est bem
revestida.
Umedecer o swab em salina estril (no usar gel
lubrificante) e inserir no esfncter retal, fazendo
movimentos rotatrios.
Ao retirar, certifique-se que existe colorao
fecal no algodo.
O nmero de swabs depende das investigaes
solicitadas.
Quando solicitado
Em uma cultura de fezes pesquisada a
presena de agentes bacterianos mais comuns:
Salmonella spp., Shigella spp., alguns sorotipos
de Escherichia coli, Campylobacter spp e
Staphylococcus aureus.
Outros agentes podem tambm ser pesquisados,
mas importante que sejam mencionados na
solicitao mdica, como, por exemplo, Yersinia
spp. e Vibrio spp.
Semeadura em:
MacConkey
SS
gar Sangue
Incubadas por 24 horas a 35-37C
Avaliadas e so feitas provas bioqumicas das
colnias suspeitas
Quando necessrio proceder a soroaglutinao
para confirmao do resultado.
MacConkey
SS
Urocultura
Espalhamento da amostra
Microbiota da Uretra
Cocos Gram-positivos:
Staphylococcus aureus
Staphylococcus epidermidis
Streptococcus spp.
Bacilos Gram-positivos:
Corynebacterium spp.
Bacilos Gram-negativos:
Escherichia coli
Proteus mirabilis
Microbiota da Vagina
Cocos Gram-positivos:
Staphylococcus spp.
Streptococcus spp.
Enterococcus spp.
Bacilos Gram-positivos:
Lactobacilos pH cido
Bacilos Gram-negativos:
Escherichia coli, Klebsiella spp., Corynebacterium spp.,
Proteus mirabilis, Pseudomonas aeruginosa
Staphylococcus saprophyticus
Freqncia aumentada em meninas adolescentes e em
idade escolar
MacConkey
Meio seletivo e diferencial
4) Identificao
Resultado
O resultado da urocultura deve ser sempre
quantitativo
Unidades Formadoras de Colnias p/ mililitro
(UFC/ml)
Deve-se liberar o resultado da contagem de
leuccitos
Informar ao mdico o mtodo de coleta da urina
Dvidas na interpretao (repetir a urocultura)
Quantificao:
Crescimento com ala de 0,001ml ou 1l (1:1000)
1 colnia = 1.000 ou 103 UFC/ml
Contagem
diluio:
diluio 1:10 multiplicar por 10
diluio 1:100 multiplicar por 100
diluio 1:1000 multiplicar por 1000
Fixao do Esfregao
Calor
Metanol ou Etanol
AC = gar chocolate;
AS = gar sangue;
MC = gar Mac Conkey;
TIO = caldo tioglicolato;
LJ = gar Lowenstein Jensen;
SAB = gar Sabouraud;
MYC = Mycosel;
SS = gar SalmonellaShigella;
TM = gar Thayer Martin
(opcional);
CLED = gar CLED
Shigella e Yersinia costumam crescer em gar MaC Conkey e gar SalmonellaShigella como colnias pequenas e lactose negativas.
Stenotrophomonas maltophilia, Acinetobacter spp, Enterococcus spp,
pneumococos, Streptococcus spp. Cndida spp e alguns esfafilococos coagulase
negativo tambm costumam formar colnias pequenas.
Enterobactrias e estafilococos.
Cor
A colorao depender do meio de cultura
utilizado.
Meios no diferenciais
pode-se identificar a colorao caracterstica de
alguns microrganismos
S. aureus amarelo
Micrococcus amarelo
Serratia marcescens ou rubidae avermelhado
Roseomonas rseo
Pseudomonas diferentes tons de verde e
castanho
Enterococcus casseliflavus amarelo
Cor
Meios diferenciais
a colorao da colnia sofre interferncia das reaes que
ocorrem com substratos dos meios de cultura:
Hemlise
Baseada na lise de hemcias contidas no gar Sangue
(5%).
Lise total
denominada beta-hemlise, ocorre a formao de halo de
transparncia ao redor e/ou sob a colnia
S. pyogenes, S. agalactiae, Listeria,
S. aureus, S. haemolyticcus,
Enterococcus.
Lise parcial
alfa-hemlise
Formao de halo com colorao esverdeada:
S. viridans, S. pneumoniae.
Ausncia de lise
definida como gama-hemlise, meio de cultura
inalterado
Enterococcus, Estafilococos coagulase negativo.
Forma da colnia
Redonda E. coli, Klebsiella, Serratia,
Stenotrophomonas, Acinetobacter, Estafilococos,
Estreptococos
Irregular Pseudomonas, Proteus, Providencia,
Morganella, Bacillus
Produo de vu Proteus, Comamonas,
Pseudomonas
Filamentosas fungos filamentosos
Formando pontas, como estrelas Candida albicans
Com depresso no centro Pneumococo
Cerebriforme Pseudomonas stutzeri
Elevada Klebsiella, Bacillus
Chata Enterobacter, Pseudomonas
Cheiro
Provas Bioqumicas
Prova da Catalase
Permite separar os estreptococos catalase negativa de outros cocos
Gram-positivos produtores de catalase, por exemplo, estafilococos.
Converte o perxido de hidrognio em oxignio e gua
A liberao do oxignio se observa pela formao de bolhas.
Procedimento:
Colocar sobre uma placa de Petri, ou uma lmina, uma poro do isolado
de uma cultura 18 - 24 horas, evitando tocar no meio de cultura
Repetir o procedimento com cepas controle positivo e negativo;
Adicionar uma gota de perxido de hidrognio a 3%;
Observar a formao de bolhas de ar, indicativo de teste positivo para
catalase.
Interpretao:
Oxidase (indofenoloxidase)
Produo de oxidase
Papel filtro com N-Tetrametil-p-fenileno
Procedimento
Oxidase positiva
Oxidase negativa
Staphylococcus e Enterobactrias
Aula Prtica
Contagem
Alteraes no meio de cultura
Gnero
Gs em
glicose
Lactose
Manita
Mobilidade
Indol
Citrato
H2O
Urease
Escherichia
+/-
+/-
+/-
Aerobacter
+/-
Klebsiella
+/-
Citrobacter
+/-
Salmonella
+/-
Shigella
+/-
+/-
Providence
+/-
+/-
Proteus
+/-
DA LDC