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Staphylococcus
Lvia Bandeira
Doutoranda em Inovao Teraputica livbandeira@bol.com.br
Microbiota
S. aureus S. epidermidis S. saprophyticus
S. aureus
S. epidermidis
Staphylococcus aureus
O nome aureus significa dourado em latim, qualidade atribuda ao pigmento amarelado caracterstico produzido pela bactria.
Staphylococcus aureus
Toxinas
Mecanismos de Patogenicidade
Superfcie celular Cpsula: efeito anti-fagocitrio
Mecanismos de Patogenicidade
Parede Celular:
- Peptidoglicano:
cidos teicicos
Mecanismos de Patogenicidade
- Protena A 90% das cepas de S. aureus Identificao Ligao a IgG
Efeito anti-fagocitrio. Liberao de histamina. Reaes de hipersensibilidade. Leso plaquetria.
IgG
Mecanismos de Patogenicidade
Gram+ : produtores de substncias extracelulares (enzimas e toxinas que liberadas para fora da clula).
Exotoxinas:
- Leucocidinas: lise dos grnulos citoplasmticos dos neutrfilos e macrfagos com liberao do contedo enzimtico.
Mecanismos de Patogenicidade
- Hemolisinas Lisam hemcias, lesam os hepatcitos, conjuntivo, entre outros. tecido
Mecanismos de Patogenicidade
- Hemolisinas S. aureus -hemoltico
OBS: algumas amostras podem no produzir hemlise.
S. epidermidis No-hemoltico
Mecanismos de Patogenicidade
- Enterotoxinas :
Intoxicao alimentar aguda.
Mecanismos de Patogenicidade
Enzimas:
Catalase
Degrada o perxido de hidrognio.
Hialurinidase
Fibrinolisina Lipases: DNAase: Beta-lactamases
Degrada o cido hialurnico (componente tecido conjuntivo; invaso). Degradao da fibrina e invaso. Invaso Degrada o DNA Degradam anti-microbianos betalactmicos (penicilina).
Evaso
Fatores de leso
Fatores de leso
bactrias
Fase estacionria
Hemolisinas Toxinas Danos aos tecidos
Tempo (h)
Fase exponencial
Staphylococcus aureus
Infeces
Pele e tec. subcutneo
abscessos (inflamao), infeco de feridas Pneumonia, artrite, meningite, endocardite, septicemia (choque) Quadros txicos
Infeces supurativas
Impetigo (faces e membros)
Furnculo e Carbnculo
Colorao de Gram
Foliculite
Folculo piloso
Terol
Mecanismos de Patogenicidade
toxinas e enzimas S. epidermidis: Foi o primeiro coagulase negativo a ser considerado patognico. Principal fator de virulncia: formao de biofilme.
Staphylococcus epidermidis
Microbiota da pele e das mucosas. Prteses cardacas, articulares e vasculares. Endocardite. Septicemia.
Staphylococcus saprophyticus
Trato urinrio Infeco aguda
Diagnstico
Isolamento
Identificao
Catalase
PRINCPIO A catalase uma enzima que decompe o perxido de hidrognio em gua e oxignio. UTILIDADE Staphylococcus, Streptococcus, Enterococcus, entre outros. PRODUTO Perxido de Hidrognio (H2O2) 3%.
Catalase
INTERPRETAO Positivo: produo de efervescncia indica a converso do H2O2 em gua e oxignio gasoso. Evitar o uso de meios contendo sangue, pois os eritrcitos podem produzir reao fraca de catalase.
Coagulase
PRINCPIO Verificar a capacidade de microrganismos reagirem com o plasma e formarem cogulo. A coagulase uma protena com atividade similar protombrina (fibrinognio -> fibrina). UTILIDADE Separar as espcies de Staphylococcus: S. aureus -> coagulase positiva Demais espcies-> coagulase negativa
Coagulase
PRODUTO Plasma de coelho com EDTA liofilizado. A coagulase conjugada (prova em lmina) (fator de aglutinao) encontra-se unida parede celular bacteriana.
Bactria + Plasma= Cogulo
Positivo
Negativo
Coagulase
A coagulase livre secretada extracelularmente e reage com uma substncia presente no plasma denominado Fator de Reao com a Coagulase CRF (resulta na formao de cogulos). Plasma + microrganismo produtor de coagulase forma-se um cogulo visvel.
Coagulase
Colnias em caldo BHI e colocar em estufa 37C. Turbidez at 0,5 da escala de MacFarland. Tubo de ensaio: 0,5 ml de plasma e 0,5 ml do cultivo em BHI. Incubar por 4 h.
Se no houver presena de cogulo, incubar o tubo em temperatura ambiente e repetir a leitura com 18 e 24 h.
Teste da DNAse
Degradao do DNA, contido no meio de cultura, por bactrias que possuem a enzima extracelular desoxirribonuclease (DNAse). Diferenciar S. aureus de estafilococos coagulase negativo.
Quando o DNA degradado, o resultado positivo visualizado pela cor rosa ao redor da colnia produtora de DNAse. Melhor leitura; Repique da amostra positiva para o antibiograma (colnias esto bem isoladas).
No meio originalmente verde, aps o rompimento do DNA, h a formao de um halo incolor circundando a colnia.
MICRORGANISMOS
COLNIAS
Staphylococcus aureus
Amarela
MANITOL + _
Staphylococcus epidermidis
Brancas
S. aureus
S. epidermidis
Teste Rpido
Teste rpido de aglutinao em ltex para diferenciar S. aureus de outros Staphylococcus. S. aureus com resistncia a meticilina (MRSA) ou sensibilidade (MSSA). O reagente de teste formado por partculas revestidas com IgG e fibrinognio.
Meio CLED
Finalidade: meio no seletivo e diferencial, utilizado na urocultura. Resultados : Fermentadores de lactose: colnias amarelas e meio amarelo. No fermentadores de lactose: colnias azuis e meio azulado. Staphylococcus
Colnias pequenas, opacas e de cor amarela.
Identificao de cocos
Catalase
Staphylococcus
Streptococcus
Coagulase
S. aureus
Nov- S Manitol + DNase +
Tratamento
S. aureus
Resistncia penicilina pelas -lactamases. Meticilina como alternativa teraputica: no sofre ao da enzima. S. aureus resistentes meticilina (MRSA). ndices de mortalidade mais altos em pacientes que desenvolvem bacteremia por MRSA. Tratamento: glicopeptdeos (vancomicina). S. aureus resistentes vancomicina (VISA). GISA Utilizar um antibitico com outro stio de ao.