Universidade Save

Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia

Curso de Licenciatura em Medicina Veterinária

Colecta, acondicionamento e envio de amostras

destinadas ao diagnóstico microbiológico
 Estudo de amostras em Microbiologia

• A função de um laboratório de microbiologia clínica consisti

em desenvolver e aplicar técnicas úteis no diagnóstico de
agentes patogénicos

• Envolve uma série de etapas e procedimentos:

a) Colecta,
b) Acondicionamento,
c) Transporte,
d) Análise do material e
e) Interpretação médica
 Fases dos exames laboratoriais
 Fase pré-analítica: Concentra o maior número (70%) de falhas relacionadas
ao resultado final. Esta etapa inclui:
 Pedido do exame;
 Preparação do animal,
 Colecta;
 Transporte.

 Fase analítica: Envolve o laboratório, em toda sua prática:

 Análise do material;

 Fase pós-analítica: Tem grande importância, pois inclui:

 Interpretação médica;
 Tratamento.
 Tipos de amostras a analisar no laboratório de
microbiologia

• Excreções (urina, fezes, corrimentos vaginais),

• Tecido (sangue),
• Biopsias de órgãos,
• Secreções (nasais, liquido cefaloraquidiano, líquido pleural,
líquido sinovial)
 Colecta adequada de amostras,
• A colecta de material é uma das etapas de maior importância
no isolamento de microrganismos responsáveis por doenças
infecciosas,

• A colecta inadequada pode:

• Ocasionar falha no isolamento do agente etiológico e
• Favorecer o desenvolvimento da flora contaminante,
• Conduzir a uma terapia incorrecta,

• Para que o diagnóstico laboratorial seja realizado com sucesso,

é importante uma boa anamnese, suspeita clínica
fundamentada e amostra colectada correctamente.
 Antes da colecta: Recipientes estéreis
• Frascos, tubos, seringas, agulhas e demais instrumentais a
serem utilizados devem estar estéreis,
• Verificar o tipo de frasco a ser utilizado e tipo de
anticoagulante, se necessário;
 Protecção individual
• Durante a colecta de material biológico, há risco de exposição
a agentes potencialmente causadores de doenças ao ser
humano,
• Razão pela qual é altamente recomendável que o profissional
utilize avental ou macacão, luvas, botas de borracha, óculos de
protecção e máscara no momento da colecta,
 Considerações gerais sobre a colecta de amostras

• Instruir claramente o proprietário sobre o procedimento;

• Observar a anti-sepsia na colecta de todos os materiais clínicos;
• Colectar amostras antes da administração de antibióticos, sempre que
possível;
• Obter material evitando contaminação com flora normal do animal;
• Colectar do local onde o microrganismo suspeito tenha maior probabilidade
de ser isolado;
• Quantidade suficiente de material deve ser colectada para permitir uma
completa análise microbiológica.

• Aceitação ou rejeição das amostras

 Colecta de sangue- Separação de Plasma

• Colectas devem ser feitas

preferencialmente na veia jugular,

• O ideal é colectar um volume de 3 a

5 ml de sangue com anticoagulante
EDTA.

• Retirar a agulha;

• Inverter o tubo por 30 segundos,

com movimentos suaves, logo após
a colecta, para evitar a formação de
coágulos. Evitar agitação grosseira
do tubo, pois este processo pode
provocar hemólise;

• A amostra pode ser conservada em

temperatura ambiente por 12 hs ou
24 horas sob refrigeração (2 a 8 °C).
Colectas em Suínos

Veia jugular
Veia coccígea
 Soro
• Tubos que contenham vácuo (sem anticoagulante) e siliconizados, para
facilitar a retracção do coágulo,

• Para obter um soro adequado, os tubos com sangue devem ser mantidos à
temperatura ambiente por, no mínimo, 2 ou 3 horas, ao abrigo da luz, até
que ocorra a coagulação sanguínea,

• Após a separação do coágulo, transferir o soro para um frasco estéril,

• Pode ser utilizada a centrifugação,
• O soro deve ser conservado refrigerado e enviado o quanto antes ao
laboratório, evitando-se, assim, a deterioração da amostra
 Colecta de fezes
• Amostras colectadas da ampola rectal
Meio Cary-Blair
 Meios de transporte
• O Meio Cary-Blair é um meio de transporte para envio de amostras fecais.
• O Meio é excelente para transporte de amostras clínicas contendo
patógenos entéricos, inclusive dos géneros Campylobacter spp, Yersinia
spp. e Vibrio spp.
• O meio é uma modificação na formulação do meio de Stuart, onde o
Glicerolfosfato não está presente porque pode promover o super
crescimento de contaminantes,
Colecta de amostras de leite
 Colecta de urina
• A análise da urina pode ser aplicada para fins de avaliação de propriedades
físicas, químicas e microbiológicas da urina,
• Os frascos para colheita de urina devem ser estéreis e com boca larga e
tampa de rosca,
• A primeira amostra de urina da manhã é a mais indicada, devido à menor
influência da alimentação,
• Micção espontânea (desprezar os primeiros jactos, ideal = jacto médio);
• Cistocentese (ideal para cultura bacteriana),
• A amostra deve ser mantida sob refrigeração (2-8 o C) e
protegida da luz até a análise.
• A quantidade mínima de urina para exame é de 5 mL,

• A amostra de urina deve ser encaminhada o mais rápido

possível,

• A demora na realização do exame facilita a multiplicação

bacteriana com produção de amónia e alcalinização do pH.
 Secreções Diversas
• Lesões de pele, abcessos, secreção vaginal, nasal, ocular,
• Colectar a amostra com swab e enviar ao Laboratório em meio de
transporte Stuart;
 Meio de Stuart
• O meio Stuart estéril é utilizado para transportar vários materiais biológicos
como secreções, raspados e biópsias.
• O meio Stuart é utilizado para transportar amostras para análise de
Haemophilus influenzae, Streptococcus pyogenes, P. aeruginosa entre outros
patógenos.
• O princípio do meio é a carência de uma fonte de nitrogénio que impede a
multiplicação de microrganismos e a composição nutritiva garante a
sobrevivência deles.
 Identificação das amostras
• É necessário que os frascos e embalagens, contendo as
amostras, sejam correctamente identificados com etiquetas
resistentes e informações legíveis.
• A identificação deverá estar no frasco de colecta e não na
tampa.
• Todas as amostras deverão ser identificadas e acompanhadas
de requisição médica devidamente preenchida com letra
legível, com os itens a seguir:

a) Identificação do animal,
b) Idade
c) Origem/ proveniência
d) Tipo de amostra
e) Exames solicitados
f) Data e hora da colecta
g) Início dos primeiros sintomas
 Acondicionamento das amostras
• A forma de conservação depende da amostra e do tipo de
exame requerido,
• As amostras deverão ser remetidas em condições de
biossegurança desde o transporte até a chegada ao Laboratório.
Para tal, devem ser acondicionadas em um sistema de
embalagem tripla:
Transporte

O exterior das caixas isotérmicas

deve conter sinal de risco biológico,

Fichas de requisição das amostras