Microbiologia Clínica

Urocultura, cultura de secreção genital,

cultura de trato respiratório superior e de
líquidos corporais

Me. Pedro Rauel Cândido Domingos

Manaus, 2017
 Urocultura
(cultura de urina de jato médio, cultura de urina com contagem de colônias)

• Indicação: Suspeita de infecção de trato

urinário
– Infecção ou colonização do trato urinário
(uretra, bexiga, ureter e rins)
• Infecção da bexiga urinária (cistite)  mais comum
• Infecção na uretra (uretrite)  DSTs e excesso de
limpeza
• Infecção nos rins (pielonefrite)  mais grave
– Infecção caracterizada por elevação de
leucócitos (piúria) junto ao de microrganismos
(bacteriúria)
– Sintomas mais comuns:
• Dor ao urinar
• Aumento na vontade de urinar
• Coceira

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 Urocultura
• Tipos de amostra:
– Urina
• Primeira urina da manhã ou após (pelo menos) 2-3 horas
da última
– Amostra de urina de jato médio (frasco estéril)
– Higiene prévia
– Desprezar primeiro e último jato

• Urina de qualquer jato (saco coletor)

– Obtidas de crianças
– Higiene prévia e colocação de forma asséptica

• Urina de paciente com sonda vesical (não ideal para

cultura)
– Retirar, após higienização da cânula, 10 mL com o auxílio de
seringa

• Urina de primeiro jato

– Pesquisa de infecções na uretra, quando há baixa produção
de secreção

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 Urocultura
• Tipos de amostra:
– Urina
• 2 mL é suficiente para a cultura
• Para a urinálise é no mínimo 10 mL
• Critérios de rejeição:
– Frascos não estéreis
– Tratamento antimicrobiano prévio
– Assepsia inadequada
• Armazenagem por até 2 horas em T.A. e
até 24 horas sob refrigeração

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 Urocultura
• Meios de cultura:
– MacConkey
– CLED
– Meio IAL/Rugai
• Nove provas bioquímicas
– Laminocultivo
• CLED
• Citrato e MacConkey

• Coloração de Gram
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Cultura em Rugai – identificação
bioquímica
 Urocultura
• Principais causas:
– Gram-negativos:
• Escherichia coli
• Klebsiella pneumoniae
• Proteus spp
• Enterobacter spp

– Gram-positivos:
• Staphylococcus saprophyticus
• Enterococcus ssp.
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Urocultura
Processamento da amostra ocular

• Semeadura semiquantitativa:
– 0,01 mL de urina em CLED

– Cultura negativa (24h), com

presença de microrganismos ou
leucócitos (elevada), incubar por
mais 24h

– Interpretação:
• 0,01 mL (1:100)  1 colônia = 100
UFC/mL
– Dividir placa em 4 quadrantes e contar
um quadrante e depois multiplicar por
4 para estimar o número de colônias
total.
Fonte: LABclin. Procedimentos técnicos
Urocultura
Resultados
• Negativo:
– Sem crescimento após 24 horas de incubação
– Sem crescimento após 48 horas quando houver Micro. ou Leuco.
elevado na urina
– Presença de menos de 10.000 UFC/mL (considerar como contaminação)

• Positivo:
– 10.000 UFC/mL a 100.000 UFC/mL  contagem duvidosa
• Repetir amostrar ou verificar quadro clínico

– Acima de 100.000 UFC/mL  infecção

• Identificar a bactéria (p.e. Rugai)

– Realizar antibiograma quando solicitado ou dependendo do quadro

clínico ou agente isolado
 Cultura de Secreções Genitais
(cultura de secreção vaginal, cultura de secreção uretral, cultura de esperma, cultura de urina de
1º jato, cultura endocervical, cultura de líquido seminal, cultura de conteúdo vaginal)

• Indicação:
– Cervicite
– Vaginose bacteriana
– Vulvovaginite
– Doença inflamatória pélvica
– Uretrite
– Prostatite
– Lesões genitais

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 Cultura de Secreções Genitais
• Tipos de amostra:
– Swab da vagina posterior ou parede vaginal -
Vagina
– Swab do canal endocervical - Cérvix
– Swab da secreção uretral - uretra
– Aspirado com seringa
• Glândula de Bartholin
• Líquido Aminiótico
– Aspirado transcervical – endométrio
– Aspirado ou swab de procedimento cirúrgico –
Trompa de Falópio
– Swab do líquido seroso da base e das bordas da
lesão
– DIU ou secreção estéril - DIU (dispositivo intra-
uterino)
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 Cultura de Secreções Genitais
• Tipos de amostra:
– Swab da secreção uretral ou
urina de 1º jato - uretra
– Secreção prostática, urina após a
massagem prostática, esperma -
próstata
– Esperma - epidídimo

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 Cultura de Secreções Genitais
• Tipos de amostra:
– Rejeitar amostras com mais de 4
horas de coleta

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 Cultura de Secreções Genitais
• Princípio do teste
– Isolar bactérias patogênicas do
material coletado

– Meios de cultura
• Ágar sangue
• MacConkey
• Caldo Tioglicolato

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Cultura de Secreções
Genitais
Procedimento de análise

• Amostras em swab
– Rolar swab em uma pequena área das placas de AS e MC e
colocar no tioglicolato (opcional)
– Semeadura em três direções diferentes (esgotamento)
• Amostras colhidas por punção
– Uma gota em Tioglicolato (líquido), uma gota em AS e uma
gota em MC, além de esfregaço para microsc.
– Semeadura em três direções diferentes (esgotamento)
• Amostras para semeio quantitativo (esperma ou líquido
prostático)
– Homogeneizar a amostra
– Semear uma alçada (calibrada) em AS
• 0,01 mL (1:100)  1 colônia = 100 UFC/mL
Fonte: LABclin. Procedimentos técnicos
Cultura de Secreções
Genitais
Procedimento de análise

Fonte: LABclin. Procedimentos técnicos

Cultura de Secreções Genitais
• Principal causa de infecção bacteriana
genital:
– Anaeróbios
• Esperma e líquido
– Enterobactérias
• Aspirados, urina de 1º jato, esperma, secreção
prostática
– Gardnerella vaginalis
• Sec. uretral, sec. vaginal
– Haemophilus ducreyi
• Lesão genital
– Neisseria gonorrhoeae
• Qualquer material clínico genital
– Streptococcus agalactiae
• Sec. vaginal, sec. uretral

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Cultura de Secreções
Genitais

Resultados
• Negativo: não houve crescimento microrganismo
• Positivo: reportar cada microrganismo e o
antibiograma

Fonte: LABclin. Procedimentos técnicos

 Cultura de Trato Respiratório Superior
(pesquisa de estreptococos beta-hemolítico na orofaringe, cultura de orofaringe, amígdala, faringe e nasofaringe)

• Indicação:
– faringite e amigdalite, assim
como suas complicações
• Febre reumática
• Glomerulonefrite
• Endocardite reumática.

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 Cultura de Trato Respiratório Superior
• Tipos de amostra:
– Orofaringe
– Nasofaringe
– Faringe
– Amígdalas
– Secreção Nasal
– Punção de seios maxilares
– Raspado de lesão de boca

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 Cultura de Trato Respiratório Superior
• Princípio do teste
– Isolar bactérias patogênicas do
material coletado

– Meios de cultura
• Ágar sangue
• MacConkey
• BHI (Brain Heart Infusion)

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Cultura de Trato Respiratório
Superior
Procedimento de análise

• Bacterioscopia
– Classificar bactéria e diagnóstico de candidíase oral
– Observação de polimorfonucleares

• Semeadura e isolamento
– Rolar swab em uma pequena área das placas de AS e MC e
colocar no tioglicolato (opcional)
• Semeadura em três direções diferentes (esgotamento)
• Esgotamento a partir de pequena área de inóculo com swab.
– Para secreção nasal colocar swab após semeio em tubo com
BHI
Fonte: LABclin. Procedimentos técnicos
Cultura de Trato Respiratório Superior

• Gram-negativo:
– Haemophilus influenzae
– Moraxella catarrhalis
– Enterobacterias
• Gram-positivo:
– Estreptococos beta-hemolíticos do
grupo C, F e G
– Streptococcus pyogenes
– Streptococcus pneumoniae
– Staphylococcus aureus
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Cultura de Trato Respiratório
Superior

Resultados
• Negativo: sem crescimento
• Positivo: Reportar o microrganismo isolado e
antibiograma
– Com exceção da cultura de orofaringe
– Correlacionar resultados com achados microscópicos
(presença de polimorfonucleares e bactérias)
– Agentes etiológicos da pneumonia estão geralmente
presentes em altas concentrações nas secreções
pulmonares ( >105 - 106 UFC/ml)
Fonte: LABclin. Procedimentos técnicos
 Cultura de Líquidos Corporais
(cultura de Ascítico, Amniótico, Pleural, Peritoneal, Pericárdico e de Diálise)

• Indicação: Infecção nos

principais líquidos corporais
– Líquidos de diferentes tecidos, mas
que são tratados de forma
semelhantes
– A presença de qualquer patógeno
é importante, uma vez que são
líquidos estéreis.

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 Cultura de Líquidos Corporais
• Tipos de amostra:
– Líquido ascítico
– Líq. amniótico
– Líq. pleural
– Líq. peritoneal
– Líq. pericárdico
– Líq. diálise

– Volume mínimo de 1mL para bact. e

2mL para fungos e micobactérias

• Rejeitar amostras refrigeradas

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 Cultura de Líquidos Corporais
• Princípio do teste
– Isolar bactérias patogênicas do
material coletado
– Meios de cultura
• Ágar sangue
• Ágar chocolate
• MacConkey
• BHI (Brain Heart Infusion)

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Cultura de Líquidos
Corporais
Procedimento de análise

• Bacterioscopia (2 lâminas)
– Verificar presença de leucócitos e qualquer tipo de
bactéria

Fonte: LABclin. Procedimentos técnicos

Cultura de Líquidos
Corporais
Procedimento de análise

Fonte: LABclin. Procedimentos técnicos

 Cultura de Líquidos Corporais

• Gram-negativo:
– Haemophilus influenzae
– Neisseria meningitidis
– Escherichia coli
– Klebsiella sp
• Gram-positivo:
– Estreptococos beta-hemolíticos do
grupo B
• Streptococcus agalactiae
– Streptococcus pneumoniae
– Listeria monocytogenes
– Staphylococcus aureus
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Cultura de Líquidos
Corporais

Resultados
• Negativo: sem crescimento
• Positivo: Reportar o microrganismo isolado e
antibiograma

Fonte: LABclin. Procedimentos técnicos

 Atividade
• Relacionar as principais (três mais importantes)
patologias das espécies a seguir, além das
características morfo-tintoriais e características
(três) mais importantes de cada um:

– Listeria monocytogenes
– Neisseria meningitidis
– Streptococcus agalactiae
– Escherichia coli
– Klebsiella pneumoniae