Técnicas diagnósticas em Micologia

Laboratório de Micologia
 O material coletado já fornece suspeitas para identificação
 Não requer técnicas complicadas
 Lâminas de vidro, cureta, bisturi sem fio e ponta
arredondada, pinça, alça bacteriológica, tesoura e outros.
TIPOS DE COLETA
 Coleta do material

 Higiene corporal normalmente

 Não é permitido o uso de cremes, loções, pomada ou
outras substâncias gordurosas
 Coleta de material

 Lesões descamativas ou vesículas fechadas: éter sulfúrico ou

álcool etílico 70%
 Lesões abertas: Solução fisiológica ou água estéril
 Coleta – Lesões cutâneas
 Assepsia
 Raspado das bordas ativas da lesão na direção da pele sadia.
Conservar o material coletado em recipientes estéreis
 Coleta – Lesões cutâneas
Coletar solução salina estéril
Duas lâminas com fita adesiva (pelos)
 Coleta - pêlos
 Pinça
 Em caso de piedras, cortar os pelos que contenham os
nódulos.
 Coleta - unhas
 Cortar a unha
 Sem esmalte
 Remover excesso de material da parte espessada da
unha
 Raspar a pele no limite entre a unha lesada e a sadia
 Coleta - unhas
Ou perfurar com bisturi abrindo uma “janela” na unha.
Coletar pus, se houver
 Coleta - Pus
 Aspiração
 Swab
 Alça bacteriológica (semeado em meio no momento da coleta.)
 Coleta - Escarro
Expectoração
- Primeiro da manhã,
- Bochechos de água
- Em jejum
Pacientes traqueostomizados: contaminação pela flora
Processado em até duas horas
 Coleta – Sangue ou medula óssea
 Sangue: punção e colocado diretamente em meio contendo
anticoagulante
- Polianetol sulfonato de sódio (SPS).
 Medula óssea: Médico realiza punção
- Colocada diretamente em meio de cultura
 Coleta - Urina
 Punção suprapúbica ou por sonda vesical
 Jato médio, com prévia assepsia (água e sabão)
Crianças: saco plástico coletor
Processamento em até duas horas.
 Coleta – Líquidos orgânicos estéreis
 Liquor, líquidos pleural, pericárdico, peritoneal e sinovial
 Punção e conservados em frasco estéril.
 Coleta: médico.
 Coleta – Trato genital
 Secreção vaginal ou endocervical:
- Espéculo
- Swab acompanhado do meio de transporte
 Secreção uretral, masculina ou feminina
- Introduzir o swab no canal uretral,
- Movimentos de rotação
- Meio de transporte
 Coleta – Gânglios e abscessos
 Punção
 Aspiração (seringa)
 Conservar o material na própria seringa
 Abscessos abertos com pouca secreção: swab e meio de transporte
 Coleta - Fezes
 Frasco estéril
 Swab anal
 Coleta - Ouvido
 Infecções fúngicas: geralmente secas
 Exceto: infecções bacterianas.
 Raspagem
 Ou swab
 Coleta – outros materiais

 São coletados como de rotina para os procedimentos em

bacteriologia
PRINCIPAIS TÉCNICAS
 Principais técnicas para diagnóstico em
micologia
• 1. Exame micológico direto • 9. Intradermorreação
• 2. Cultura • 10. Sorologia
• 3. Cultivo em lâmina • 11. Hemocultura
• 4. Testes biológicos • 12. Viabilidade
• 5. Testes bioquímicos
• 6. Anatomopatológico
• 7. Inoculação em animais
• 8. Lâmpada de Wood
 Exame micológico - Direto
 Técnica simples, barata e muito utilizada.
 Escamas, pelos, unhas, secreção, pus, crostas, grãos,
espécime de biópsia, liquor, urina e escarro.
 A fresco, em solução fisiológica, clareado com KOH/DMSO,
corado com nanquim, Gram, Leishman, etc.
 Cultura
Ágar-Sabouraud- dextrose*
Macrocultivo
Microcultivo (cultivo em lâmina)
 Exame direto corado com calcoflúor White

Celulose e quitina
 Microscópio de fluorescência
 Diferenciação entre alguns dermatófitos
 Teste de perfuração do pelo in vitro
 Pelos estéreis em meio
 A cada 24 h um pelo é retirado
 Trichophyton mentagrophytes: perfura o pelo radialmente
 Trichophyton rubrum: não perfura
 Teste de pigmentação em ágar-batata
Prova nutricional
 T. mentagrophytes e T. rubrum
T. rubrum pigmenta o meio em vermelho
T. mentagrophytes não pigmenta
 Prova da urease
Prova bioquímica
T. mentagrophytes e T. rubrum
T. mentagrophytes deixa o meio rosa
 Anatomopatológico
 Elementos fúngicos em tecidos
 Micoses subcutâneas e sistêmicas
 Hemocultura
 Infecção sistêmica
SOLUÇÕES E MEIOS DE
CULTURA
 Soluções e meios de cultura
CLAREADORES E CORANTES
 Hidróxido de potássio (KOH) a 10-40%
- Dissolve estruturas e torna o fungo visível
 Lactofenol azul-algodão (lactofenol de Amann)
- Micélios, reprodução por brotamento
 Soluções e meios de cultura
CLAREADORES E CORANTES
Coloração com nigrosina ou tinta da China (nanquim)
- Cryptococcus neoformans em liquor
 Soluções e meios de cultura
MEIOS DE CULTURA
 Ágar Sabouraud dextrose (ASD)
- Meio pobre
 Caldo Sabouraud dextrose (CSD)
 Adiconado: cloranfenicol ou gentamicina
 Soluções e meios de cultura
MEIOS DE CULTURA
Ágar fubá
- Diferenciação de Candida
 Ágar batata dextrose (BDA)
 Bibliografia
• ZAITZ, C. Compêndio de Micologia médica. 2. ed. Rio
de Janeiro: Guanabara Koogan, 2010.
• MEZARRI, A. FUENTEFRIA, A. M. Micologia no
laboratório clínico. 1. ed. Barueri: Manole. 2012.