CURSO: BACHARELADO EM FARMCIA MICROBIOLOGIA CLNICA

EXAME MICROBIOLOGICO DE ESCARRO E CULTURA DA SECREO DO TRATO GENITAL

EXAME MICROBIOLGICO DE ESCARRO

ESCARRO
O escarro composto de plasma, gua, eletrlitos e mucina; Composio qumica: 95% de gua e 5% de slidos totais (carboidratos, PTNs, lipdios e DNA); Grande parte das infeces so de origem bacteriana; Sob estmulo, seja ele inflamatrio ou imunolgico, mastcitos, eosinfilos e as clulas plasmticas podem contribuir para a formao da secreo.

EXAME DE ESCARRO
O que ? Exame microscpico da secreo proveniente dos pulmes, dos brnquios ou da traqueia.

Para que serve? A anlise do escarro, espontneo ou induzido, possibilita investigar a presena de microorganismos (bactrias, vrus, fungos e etc) e de clulas malignas nos pulmes e brnquios.

INSTRUES COLETA E TRANSPORTE DO ESCARRO AO LABORATRIO

Com o objetivo de melhorar a qualidade das amostras, o paciente deve ser orientado sobre como realizar uma coleta ideal de escarro. A orientao sobre a coleta do escarro busca mostrar ao paciente que o material deve ser proveniente da rvore brnquica e no da orofaringe.

MATERIAL NECESSRIO
Potes plsticos, descartveis, com boca larga (50mm de dimetro), transparente, tampa de rosca (40mm), capacidade de 35 a 50 ml; Requisio de exame para TB; Rtulo (etiqueta ou fita adesiva); Papel higinico ou papel toalha; Saco plstico; Sabonete.

COLETA ORIENTAES AO PACIENTE

1. Explicar a importncia do exame para o cliente utilizando termos claros e de fcil entendimento; 2.Orientar a necessidade de seguir os passos da coleta, pois o material para exame de escarro deve ser proveniente da rvore brnquica e no da regio da orofaringe; 3.Orientar a realizar a higiene bucal na vspera.(Sem Creme dental) 4.Fornecer ao cliente a orientao e simulao da tcnica de coleta, utilizando para isto o pote, aproveitando este momento para indicar a quantidade a ser colhida. 5. Orientar o cliente a inspirar profundamente, retendo por alguns instantes o ar nos pulmes.

COLETA ORIENTAES AO PACIENTE

6. Aps inspirar profundamente, orientar o paciente a tossir e lanar o material diretamente no pote de coleta; 7. Orientar o paciente a repetir o procedimento por trs vezes para atingir a quantidade necessria (5 a 10ml).

IMPORTANTE:

A qualidade do material fornecido fundamental para o processamento e resultados confiveis do exame, deve conter a menor quantidade de saliva possvel. Informar o uso de antibiticos.

TRANSPORTE DE AMOSTRAS PARA O LABORATRIO

Para o transporte de amostras, devemos considerar duas condies importantes: Proteo contra a luz solar; Acondicionamento adequado para que no haja risco de derramamento; Colocar os potes com as tampas bem fechadas e voltadas para cima; Colocar as requisies dos exames em um envelope ou saco plstico, fora da caixa trmica ou de isopor.

EXAMES MACROSCPICOS
Se baseia em 3 importantes aspectos: - Cor

- Odor - Consistncia e aparncia Cor Normalmente, apresenta colorao incolor. A cor esverdeada A colorao amarelada Sangue o torna rseo Escarro cor de ferrugem.

Odor - Normalmente no apresenta cheiro. Dependendo da ingesto de alguma substncia qumica e/ou medicamentosa, apresenta cheiro caracterstico.

Consistncia e aparncia depende, principalmente, da sua composio: soro, pus e muco. Em situaes patolgicas como: pneumonia e infarto pulmonar muito consistente e viscoso.

Na clnica, denominam-se os tipos de escarro em relao a consistncia como: Escarro seroso (muito fluido, incolor ou esbranquiado); Purulento (abscesso)

Mucopurulento; (pneumonia, broncopneumonia);

Mucoso (gripes) Hemtico (nas hemorragias) Existe, tambm, o escarro numular, oriundo das cavernas tuberculosas e cavidades bronquiectsicas;

O EXAME MICROSCPICO
feito a fresco ou aps a colorao do escarro e visa identificao de certas estruturas. ; Isola-se o material em uma lmina de Petri;

As estruturas mais comuns so: Fibras Elsticas: originadas do tecido pulmonar - aparecem no abscesso, nas neoplasias casos de tuberculose mais avanada. - Espirais de Curschmann: so filamentos espirados - caracterstico na asma brnquica; - Cristais de Charcot Leyden: so cristais incolores, pontiagudos e em forma hexagonal - caracteriza a asma brnquica.

-Clulas Pigmentadas: so encontradas no escarro de pacientes que trabalham em carvoarias, fumantes ou portadores de antracose. - Glbulos de Mielina: so incolores e com tamanhos e formas variadas; no apresentam um significado clnico. - Gros Actinomicticos: chamados tambm de gros de enxofre, Caracterstico no escarro de pacientes com actinomicose pulmonar (doena infecciosa rara, semelhante tuberculose). - Parasitos: encontrar um parasita em uma amostra de escarro extremamente raro.

EXAME BACTEROLGICO
Obter uma informao conclusiva torna-se rara - a dificuldade que se encontra em separar as pores provenientes das vias areas inferiores daquelas que se originam na cavidade oral, nasofaringe e nos seio paranasais salvo quando o germe isolado o bacilo de Koch.
Comum a contaminao com: diplococos Gram +, Neisseria catarrhalis, Streptococos sp. ou Str. Viridans, difterides, Hemophilis influenzae, staphilococos

Os principais exames: Baciloscopia; em esfregao corado do material(exame direto); Cultura em diversos meios;

BACILOSCOPIA
Lmina com esfregao corado pelo Gram orienta a teraputica antibitica contra germes Gram + ou Gram -.

Lamina corada pelo Mtodo de Ziehl-Neelsen pesquisa de BARR praticado em tres dias consecutivos ou 2 em dois dias at copletar 3 dias. Dever existir 100.000 bacilos cm3. Colorao em vermelho Classificao ( - ) negativo - ausencia ( + ) positivo - menos de 1 p/ campo ( ++ ) positivo - 1 a 10 p/ campo ( +++) + de 10 p/ campo

Laminas Coradas por outros mtodos Azul-algodo, Giensa, e PAS.

CULTURA DE ESCARRO
Demora 1 a 2 meses pelo mtodo tradicional ; Reduo do tempo pelo mtodo automatizado; A cultura um mtodo de elevada especificidade e sensibilidade no diagnstico da TB; Nos casos pulmonares com baciloscopia negativa, a cultura do escarro pode aumentar em at 30% o diagnstico bacteriolgico da doena;

CULTURA DE ESCARRO
Cultura simples provaavel. Meio agar-sangue p/ identificao do germen mais

Cultura em Sabouraud identificao de Fungos

Cultura para bacilo de Koch feito com vrios meios de culturas especiais: ( Loevenstein Jensen. Calmette, Gurrin, Petragnani A e , Petragnani B. E Exigido de 35 a 45 dias para dar resultados.

CULTURA DE ESCARRO
A cultura para micobactria indicada nos seguintes casos: Suspeita clnica e/ou radiolgica de TB com baciloscopia repetidamente negativa; Suspeitos de TB com amostras paucibacilares (poucos bacilos); Suspeitos de TB com dificuldades de obteno da amostra (por exemplo crianas); Suspeitos de TB extrapulmonar; Casos suspeitos de infeces causadas por Micobactrias no tuberculosas (MNT); (nestes casos o teste de sensibilidade pode ser feito com MIC).

O CULTIVO DAS MICOBACTRIAS

MICOBACTRIAS
Mycobacterium

Mycobacterium
Gnero de actinobactrias altamente patognicas
Cerca de 60 espcies, maioria saprfitas do solo; M. tuberculosis, M. bovis, M africanum: tuberculose; M. leprae: hansenase; nica no cultivvel em laboratrio;

PROPRIEDADES GERAIS - aerbias estritas, fracamente Gram-positivas, intracelulares - bastonetes, sem flagelos, no formam esporos - no produzem toxinas e no possuem cpsula - BAAR (bacilo alcool acido resistente ) positivos: parede celular retm fucsina bsica

Mtodo de colorao de Ziehl Neelsen

Mtodo de Colorao de Ziehi-Neelsen:

Soluo de Fucsina de Ziehi-Neelsen:

Soluo lcool cido

Soluo azul de metileno

Corante Interpretao do resultado:

Descorante

Corante

Reao Positiva = Vermelha Reao Negativa = Azul

A TUBERCULOSE

-O mal do sculo (xx)

-- Doena causada por bactrias do complexo Mycobacterium tuberculosis

- A associao tuberculose/ hiv

Bastonetes aerbios, com parede celular rica em lipdeos ( 60 % do peso seco da parede), lcool-cido resistentes ( BAAR ) , de crescimento lento ( tempo de gerao: 15h ), intracelulares.

- 1882: koch, bacilo de koch, postulado de koch

TRATAMENTO

CULTURA DA SECREO DO TRATO GENITAL

PRINCPIO DO TESTE
Isolar cepas de bactrias em meios ricos e suplementados. SIGNIFICADO CLNICO No trato genital feminino e masculino podem ocorrer diversas doenas, de etiologia bacteriana, fngicas, parasitrias e virais . A coleta adequada das amostras e seu processamento laboratorial so fundamentais para o correto diagnstico.

Coleta da amostra: Procedimento mdico especializado Tipos de amostra: Genital feminino: Vagina swab da vagina posterior ou parede vaginal. Crvix - swab do canal endocervical. Uretra swab da secreo do canal uretral. Glndula de Bartholin aspirado com seringa. Lquido Aminitico - aspirado com seringa. Endomtrio aspirado transcervical. Trompa de Falpio aspirado ou swab obtido durante procedimento cirrgico. Leso Genital swabdo lquido seroso obtido da base e das bordas da leso. DIU ( Dispositivo Intra Uterino)DIU ou secreo em tubo estril. Genital Masculino: Uretra swab da secreo da uretra anterior e/ ou urina de 1 jato (<10 mL). Prstata secreo prosttica, urina antes e aps massagem prosttica, esperma. Epiddimo esperma.

MATERIAL REQUERIDO Estufa bacteriolgica; Microscpio tico; Bico de Bunsen. Ala calibrada. Lminas. Jarra para tenso de CO2 . Mscara. culos de segurana. Luvas de procedimento. Swab. Placa. Lamnulas.

REAGENTES Placa de gar Sangue (AS) pronto para uso. Placa de Mac Conkey -pronto para uso. -Caldo Tioglicolado preparado. Soluo fisiolgica estril

Bacterioscopia:

Exame direto colocar uma gota da amostra diluda em 2 mL de soluo fisiolgica sobre a lmina, cobrir com lamnula e observar no microscpio com objetiva de 40X.
Gram deve ser realizado para toda as amostra um exame extremamente importante para o diagnstico de diversas infeces. ( realizado caso o mdico solicite).

Semeadura e Isolamento: Semeadura: Semeadura das amostras colhidas em swab- Rolar o swab em uma pequena rea das placas AS e MC e colocar no Tioglicolato (opcional); Semeadura das amostras colhidas por puno; - Colocar primeiro uma gota da amostra em meio lquido (Tioglicolato) e, a seguir, uma gota nas placas de AS e MC, por ltimo, confeccionar um esfregao para o exame microscpico.Iniciar a semeadura a partir do meio no-seletivo em trs direes diferentes retao: Ala de 1/100 1 colnia = 100 ou 1000 UFC/mL Temperatura e tempo de incubao Aps a semeadura, incubar as placas AS e MC e o meio lquido, em estufa aerbia a 35 + 1C por at 48 horas, com leitura diria.

Microorganismo a serem sempre considerados na triagem de infeces do trato genital feminino e masculino.
Microorganismo Material Clnico

Anaerbios Enterobactrias

Esperma, lquido Aspirado de glndula de Bartholin, urina de 1 jato, esperma, secreo prosttica

Gardnerella vaginalis
Haemophilus ducreyi

Secreo uretral, secreo vaginal

Leso genital

Neisseria gonorrhoeae

Qualquer material clnico genital

secreo vaginal, secreo uretral.

Streptococcus agalactiae

Resultado Negativo: microorganismos.

no

houve

crescimento

de

Resultado Positivo: reportar cada microorganismo isolado e realizar antibiograma.

OBRIGADO!!!