Licenciatura em Qumica

Determinao de Colesterol em Ovos

Larissa L. de Araujo Prof. Mrcio Disciplina: Bioqumica

Nilpolis, 18/02/2013

Objetivo Determinar a presena de colesterol na gema de ovos de galinha

Materiais e Reagentes 4 bequeres de 50 mL; Placa de aquecimento; Pipeta de 2mL e 5mL; Papel de filtro; Funil; lcool etlico absoluto; lcool etlico 50%; ter etlico; ter petrleo; Hidrxido de potssio alcolico a 40%; Anidrido actico; Clorofrmio; Acido sulfrico concetrado.

Procedimento Acresentou-se em um bquer de 50mL aproximadamente 4mL de gema de ovo, em seguida adicionou-se 20mL de uma mistura 3:1 de lcool a 50% e ter. Em constante agitao aproximadamente 5 min, depois filtrou-se. Recolheu-se 10 mL da amostra, levou-se a aquecimento ate sua secura Adicionou-se ao resduo 6 mL de etanol e 12mL de soluo de KOH alcolica a 40%, misturou-se e aqueceu por aproximadamente 15 min. Aps o resfriamento adicionou-se em um funil de separao 10 ml de ter de petrleo. Em agitao cuidadosa eliminando todo o gs, dentou e separou a as fases liquidas, coletando apenas a fase inferior. Lavou-se a fase eterica com 10 mL de lcool a 50%, sendo eleminada a fase alcolica. Em seguida a fase eterica lavada foi levada a placa de aquecimento ate sua secura. Ao resduo foi adicionado 2 mL de cloroformiu que foi vertido em pores iguais em 2 tubos. Em seguida foram realizados os ensaios especifico de Liberman Boucharf e Salkowski.

Introduo O colesterol um tipo de lipdeo (Figura 1) encontrado naturalmente em nosso organismo, fundamental para o seu funcionamento normal. O colesterol o componente estrutural das membranas celulares em todo nosso corpo e est presente no crebro, nervos, msculos, pele, fgado, intestinos e corao. Nosso corpo usa o colesterol para produzir vrios hormnios, vitamina D e cidos biliares

que ajudam na digesto das gorduras. 70% do colesterol fabricado pelo nosso prprio organismo, no fgado, enquanto que os outros 30% vm da dieta.

Figura 1 Estrutura do colesterol

Por que importante entender o colesterol? Quando em excesso (hipercolesterolemia), o colesterol pode se depositar nas paredes das artrias, que so os vasos que levam sangue para os rgos e tecidos, determinando um processo conhecido com arteriosclerose. Se esse depsito ocorre nas artrias coronrias, pode ocorrer angina (dor no peito) e infarto do miocrdio. Se ocorre nas artrias cerebrais pode provocar acidente vascular cerebral. Portanto o colesterol alto um fator de risco para o desenvolvimento de doenas cardiovasculares. O colesterol do organismo tem duas origens: a produo endgena do seu prprio corpo e o colesterol proveniente da alimentao. O corpo produz colesterol no fgado e esse colesterol produzido capaz de suprir quase toda necessidade do organismo. O restante necessrio deve ser proveniente do que voc come. O colesterol est presente em carnes, leites e derivados, manteiga e gema de ovo. Comer muitos alimentos com colesterol pode fazer seus nveis de colesterol no corpo subirem, o que conhecido por hipercolesterolemia. Mtodo de Liebermann-Burchard A reao se processa quando o cido sulfrico concentrado adicionado uma soluo de colesterol em anidrido actico. As cores produzidas variam do vermelho ao violeta e ao azul esverdeado. A cor esverdeada devida a formao de um derivado sulfnico do colesterol (Figura 2).

Figura 2 Formao do derivado sulfnico na reao de Liebermann-Burchard

Mtodo de Salkowski semelhante ao de Liebermann-Burchard, quando o cido sulfrico concentrado adicionado a uma soluo de clorofrmio de colesterol, a fase de clorofrmio mostra uma cor azul para vermelho e a camada de cido apresenta uma fluorescncia verde.

Resultado e Discusso Devido formao de resduos durante o procedimento, foi realizada uma filtragem, durante este processo perdeu-se aproximadamente metade da amostra. Com isso os reagentes foram reduzidos a metade com o intuito de minimizar o erro do resultado. Os resultados obtidos so de carter qualitativo, visto que no se tinha a soluo padro de colesterol. Desta forma, utilizaram-se dois mtodos semelhantes a modo comparativo. Mtodo de Liebermann-Burchard Foi observado o aparecimento de uma cor azul escura indicado assim h presena de colesterol no ovo. Com relao aos nveis de colesterol, pode-se observar que o ovo branco apresentou menores concentraes deste constituinte. J o ovo escuro foi o que apresentou maior concentrao de colesterol, quando comparados. Mtodo de Salkowski No foi realizado esse teste, devido ao erro dos operadores que no realizaram a separao da amostra. Todavia o resultado do ovo branco tambm foi positivo com o aparecimento de um anel vermelho claro entre a fase liquida. Com relao ao ovo escuro esperava-se h formao de um anel, porem com colorao mais intensa que o outro, visto que no ensaio anterior confirma maior concentrao.

Concluso Portanto pode-se concluir que a maior concentrao de colesterol foi encontrada no ovo escuro. A diferena significativa, uma vez que o colesterol encontra-se intimamente relacionado com o desenvolvimento de doenas cardiovasculares, torna-se de grande importncia o consumo de alimentos com concentraes menores deste composto. Referencias LEHNINGER, A.L. Principios de Bioqumica . 3 ed. , So Paulo. 2002. 725p. http://www.biotecnologia.com.br/revista/bio19/19_5.pdf http://www.fcfar.unesp.br/alimentos/bioquimica/guia_praticas.htm