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“CHAVE DA MEDICINA”
Técnicas de exames
Laboratóriais
1°edição
Materiais
1. Algodão embebido
2. Lanceta
3. Lâmina microscópica
4. Giensa (corante)
Procedimento/técnica
1. Com ajuda do algodão fazer a limpeza da capilar em que se deseja realizar a coleta.
2. Colocar a gota de sangue na lâmina e homogenizar(em movimento circular)
3. Deixar secar em temperatura ambiental
4. Apois a secagem corar a lâmina com o giensa (coloração a 10 ou a 3%)
5. Deixar secar a 10% (5 a 8 minutos) a 3% (35 a 45 minutos)
6. Apois esse tempo retirar o giensa com água corrente
7. Deixar secar em temperatura ambiental
8. Colocar uma gota de óleo de emersão e observar com a objetiva de 100x
Widal
Materiais
1. Reagentes (O e H)
2. Amostra do paciente (plasma)
3. Pipeta
4. Placa
Procedimento/Técnicas
1. Com ajuda da pipeta,pipetar 5 microlitros de soro colocar na placa (colar o soro em dois
círculos da placa)
2. Colocar o reagente H no soro e o reagente O na outra gota do soro
3. Hogenizar muito bem .
4. Aguardar 3 minutos, após esse tempo erificar se a presença de aglutinação
Velocidade de hemossedimentação “VHS”
Materiais
1. Amostra de sangue
2. Pipeta de westegreen
3. Pipeta de pêra
Procedimento/Técnicas
1. Colocar 2ml de sangue em um tubo de ensaio e adicionar 0,5 ml de
nitrato de sódio
2. Homogenizar a amostra de 5 a 8 vezes
3. Fixar a pipeta de pêra na pipeta de westergreen acimá da marca 0
(zero)
4. Após isso pipetar o sangue até a marca 0 da pipeta de westergreen
5. Colacar a pipeta no suporte de westergreen
6. Aguardar 1 hora para fazer a leitura dos resultados
Valor normais
Homem:1h---15mm/2h---20mm criança:1h—3 a 13mm
Mulher:1h---20mm/2h---25mm
Leucograma
(Exame microscópico)
Materiais
1. Amostra de sangue
2. Lâmina
3. Pipeta
4. Giensa
5. Álcool (70%)
6. Óleo de emersão
Técnica/procedimento
1. Com ajuda da pipeta transferir uma gota de sangue na lâmina microscópica e realizar o
esfregaço delgado
2. Deixar secar em temperatura ambiental
3. Após a secagem fixar a lâmina com o álcool (com ajuda de uma pipeta colocar álcool na
lâmina) , deixar secar em temperatura ambiental.
4. Após a secagem corar com giensa de 10% (5minutos)
5. Fazer a lavagem da lâmina deixar e secar
6. Após a secagem colocar o óleo de emersão
Técnica para de falcização
(anemia falciforme)
• Materiais
1. Jacinto(para puncionar na capilar)
2. Lâmina
3. Lamínula
4. Amostra de sangue
• Procedimentos
1. Coletar o sangue e transferir uma gota na lâmina
2. Cobrir a lâmina com uma lamínula,sem formar bolhas
4. Vedar a lamínula com esmalte (ou verniz ou mesmo serra da vela)
5. Colar a lâmina vedada em local que não há oxigénio,ex.:em uma caixa
ou na planca de Petri durante 24h
6. Levar a lâmina ao microscópio e avaliar-la com a objetiva 40x
7. Verificar o resultado:
• Negativo- ausência de hemácias falciforme
• Positivo- presença de hemácias falciforme
Lavagem da hemácias
Materiais
1. Tubo de hemólise
2. Tubo com EDTA
3. Pipeta de Pasteur
4. Solução salina 0,9%
5. Centrífuga
1. Procedimento/Técnica
1. Adicionar 1ml de concentrado no tubo de hemólise
2. Adicionar 3ml de solução salina a 0,9%
3. Centrifugar por 3 minutos durante 1500 rpm e retirar o sobrenadante
4. Repetir este procedimento 3 vezes
Suspensão das hemácias
2. Materiais
1. Tubo de hemólise
2. Solução salina 0,9
3. Pipeta de Pasteur
3. Procedimento/técnica
1. Adicionar uma gota de concentrado de hemácias lavadas, equivalente a 50 microlitros em
um tubo de hemólise
2. Adicionar 19 gotas de solução salina a 0,9% equivalente (eq)950 microlitros
3. Diluie com a pipeta de Pasteur
Tipagem sanguínea
(Prova directa)
4. Materiais
1. Tubo de hemólise
2. Marcador
3. Pipeta micrométrica ou Pasteur
4. Amostra do paciente
5. Fundo iluminado (espelho)
6. Antissoros
7. Centrífuga
5. Procedimento/técnica
1. Rotular 3 tubos de hemólise (A,B,A’B)
2. Nos tubos adequadamente rotulados, colocar uma gota dos soros anti-A,anti-B,anti-A’B
3. A cada tubo acrescentar gota de suspensão de hemácias da amostra (50microlitro a 5%)
4. Agitar os tubos e centrífugar adequadamente (100 rpm durante 1min ou 3400 rpm
durante 15 seg.)
5. Fazer a leitura da aglutinação contra um fundo iluminado,resuspendedo gentilmente o
botão de aglutinação
Tipagem sanguínea
(Prova reversa)
6. Materiais
1. Tubo de hemólise
2. Pipeta micrométrica ou Pasteur
3. Amostra (plasma ou soro)
4. Marcador
5. Hemácias A a 5% e B a 5%
6. Fundo iluminado (espelho)
7. Procedimento/técnica
1. Rotular e tubos de hemólise a e b
2. Colocar 2 gotas do soro da amostra (100 microlitros) a cada um dos tubos a ser testado
3. Adicionar ao tubo a uma gota de hemácias A a 5% e ao tubo b uma gota de hemácias B a
5%
4. Agitar e centrifugar os tubos a 100 rpm durante 1 min.
5. Fazer a leitura da aglutinação contra um fundo iluminado, resuspendedo gentilmente o
botão
Exame de Fezes
( Técnica a fresco)
8. Materiais
1. Lâmina
2. Lamínula
3. Solução salina (ou soro fisiológico)
4. Bastão de vidro ou palito
5. Lugol(corante que permite melhor visualização dos ovos)
6. Pipeta de Pasteur
7. Microscópio
9. Procedimento/técnicas
1. Diluir uma porção de fezes (deve ficar pastosa)
2. Colocar uma gota de solução salina no centro da metade esquerda da lâmina e uma gota
de lugol na metade direita da lâmina
3. Com auxílio de um palito transferir uma pequena porção de fezes na solução salina, da
mesma forma colocar uma porção de fezes no lugol
4. Colocar uma lamínula sobre cada uma das gotas cuidado para não formar bolhas de ar.
5. Examinar a lâmina com uma objetiva de 10x e posteriormente mudar para objetiva 40x
6. Percorrer todos os campos da lâmina.
Exame de fezes
(Flutuação espontânea)
Materiais
1. Lâmina
2. Lamínula
3. Solução salina
4. Frasco
5. Frasco borrel
6. Gaze
7. Coador
Procedimento/Técnica
1. Colocar 10 g de fezes em um frasco borrel (pode ser usado próprio frasco na qual as fezes
foram enviadas)
2. Diluir as fezes com solução salina e coar usando o coador de chá e gaze dobrado e 4 partes
3. Acrescentar a solução salina no frasco borrel onde se encontra as fezes.
4. Encher um tubo de ensaio até a borda e colocar uma lâmina por cima
5. Deixar em repouso 5min
6. Ao final desse tempo retirar rapidamente a lâmina, voltando a parte molhada para cima
7. Levar para o microscópio e examinar com a objetiva de 10x ou 40x.O uso de lamínula é
facultativo
Exame de fezes
(sedimentação espontânea)
Materiais
1. Amostra fecal
2. Copo descartável
3. Bastão de vidro ou palito
4. Coador de chá de malha fina
5. Cálice de vidro de fundo cônico
6. Pipeta de Pasteur
7. Lâmina
8. Lamínula
9. Solução salina
10. Gaze
Procedimento/Tecnica
1. Separar 2 a 5g de fezes transferir em um frasco de borrel ou copo descartável com o
auxílio de um bastão de vidro ou palito.
2. Adicionar solução salina e diluir
3. Coar as fezes por meio do coador de chá e do gaze dobrado em 4 parte dentro de um
cálice de sedimentação cônico
4. Encher o volume do cálice
5. Deixar sedimentar por 2h a 24h
6. Com ajuda de uma pipeta de Pasteur, retirar pequena amostra de sedimentada no fundo
do cálice, coloca-la na a lâmina e cobrir com lamínula.O uso de lugol e facultativo
Exame físico de urina
Materiais
1. Amostra de urina
2. Tubo limpo
Procedimento
1. Homogenizar suavemente amostra por inversão
2. Transferir uma porção de urina para um tubo limpo
3. Observar quando a cor e transparência (aspecto)
4. O odor e avaliado ao abrir o frasco
Exame química de urina
Materiais
1. Amostra de urina
2. Tiras reagentes
Procedimento/técnica
1. Hogenizar bem amostra
2. Transferir uma porção de urina em um tubo
3. Retirar uma tira reagente e mergulhar na urina
4. Retirar as tiras reagentes da urina,limpar o excesso
5. Esperar reagir e fazer a leitura dos resultados apartir frasco das tiras reagentes(fazer a
leitura somente com o frasco onde saio a tira reagente
Exame microscópico de urina
Materiais
1. Amostra de urina
2. Lâmina
3. Lamínula
4. Tubo de ensaio
5. Centrífuga
6. Microscópio
Procedimento/técnica
1. Homogenizar muito bem amostra
2. Retirar um porção e transferir no tubo
3. Levar para centrífuga, encher outro tubo para que a centrífuga esteja equilibrada
4. Decantar o sobrenadante
5. Retirar uma porção da sedimentação e transferir em uma lâmina
6. Colocar lamínula e observar com a objetiva de 10x e posteriormente mudar para 40x
Tubos de ensaio
Cor-Azul
Amostra- plasma
Cor- Preto
Amostra- Soro
Cor- Amarelo
Cor- Roxo
Amostra- plasma