TEMPO DE TROMBOPLASTINA PARCIAL ATIVADO 1.

Princpio: O reagente contendo ativador plasmtico desencadeia o mecanismo de coagulao da via intrnseca atravs da ativao do fator XII, que forma um complexo com o cininognio de alto peso molecular e com a pr-calicrena. O fator XII ativado atua sobre o fator XI gerando o fator XIa que na presena de fosfolpides e clcio transforma o fator XI em uma enzima ativa, que ativa o fator VIII, formando o complexo IXa-fosfolipide-VIIIa que ativa o fator X. Esse fator ativado transforma a protrombina em trombina que atua sobre o fibrinognio gerando fibrina. A formao de fibrina macroscopicamente demonstrada pelo aparecimento de um cogulo. O TTPA realizado incubando o plasma citratado com o reagente contendo ativador de fosfolpides. Aps a adio de clcio, faz-se a medio do tempo de formao do cogulo. 2. Metodologia: Coagulometria 3. Material necessrio: 3.1. Banho-maria mantido temperatura constante (37 C) 3.2. Pipetas para medir amostras e reagentes. 3.3. Cronmetro. 4. Amostra: Usar plasma colhido em citrato trissdico anidro. 4.1. Obter sangue por puno venosa e evitar garroteamento prolongado e hemlise. No realizar o teste se a puno venosa for traumtica. 4.2. Coletar a amostra com seringa de plstico e centrifugar em tubos de plstico. 4.3. Ao realizar a coleta somente para testes de coagulao, coletar duas amostras. A primeira em um tubo sem anticoagulante ou em tubo contendo citrato que deve ser desprezada. 4.4. Misturar 9 partes de sangue com 1 parte de citrato. 4.5. Centrifugar at 1 hora aps a coleta a 3000 rpm durante 15 minutos. Manter o tubo tampado at a execuo do teste para evitar mudana do ph da amostra, que pode interferir nos resultados. 4.6. Manter as amostras entre 2-24 C e realizar o TTPA at 4 horas aps a coleta. 4.7. A presena de cogulos implica na rejeio da amostra. 5. Interferncias: Amostras ictricas, lipmicas e hemolisadas podem modificar os resultados de modo imprevisvel. 6. Procedimento:

6.1. Realizar o teste utilizando tubos rigorosamente limpos. 6.2. A temperatura do banho-maria deve estar entre 36-38 C. 6.3. Pr aquecer o reagente 2 a 37 C. 6.4. Incubar a 37 C, 0,1mL do plasma a ser medido (controle ou paciente) por no mnimo 1 minuto e no mximo 10 minutos. 6.5. Adicionar 0,1mL do reagente 1, homogeneizar e incubar a 37 C por 3 a 5 minutos ( tempo de ativao). Para obter resultados reprodutveis o tempo de ativao deve ser padronizado para todas as amostras. 6.6. Adicionar 0,1mL do reagente 2 ( previamente aquecido a 37 C) e disparar simultaneamente o cronmetro. Misturar suavemente e manter no banho-maria a 37 C por 15 a 20 segundos. 6.7. Remover o tubo, inclin-lo sucessivamente em intervalos menores que 1 segundo e observar a formao de um cogulo que interrompe a movimentao do lquido. Parar imediatamente o cronmetro e registrar o tempo. 7. Intervalo de Referncia: Recomenda-se que cada laboratrio estabelea, na populao atendida, seus prpios intervalos de referncia. IDADE 2 meses 5 meses Criana a partir de 6 meses e adultos INTERVALO (SEGUNDOS) 26,3 46,9 26,1 45,9 26,7 37,6