Universidade Federal Rural do Semi-rido - UFERSA

AULA PRTICA 11: ESPECTROFOTOMETRIA

11.1 OBJETIVOS
Esta aula prtica

tem como objetivo geral, desenvolver

habilidades e competncias referentes espectrofotometria.

Como

objetivos especficos se destacam os seguintes pontos:

- determinar a absortividade molar para o permanganato de
potssio (KMnO4) e em seguida determinar a concentrao de uma
soluo de concentrao desconhecida;
11.2 ABORDAGEM TERICA
11.2.1 Espectrofotometria
A concentrao de substncias pode ser determinada medindose

luz

absorvida

por

uma

soluo,

atravs

do

mtodo

espectrofotomtrico.
Se um raio de luz monocromtico atravessar uma soluo
contendo uma substncia capaz de absorver luz neste comprimento
de onda (), uma parte desta luz incidente (Io) ser absorvida e uma
parte ser transmitida (I). Chamamos de transmitncia (T) a razo
entre a intensidade da luz transmitida (I) e a intensidade da luz
incidente (Io).

A transmitncia de uma soluo depende dos seguintes fatores:

-

Natureza da substncia
Concentrao
Espessura da soluo

A relao entre estes trs fatores descrita quantitativamente

pela lei de Beer-Lambert, ou simplesmente lei de Beer, segundo a

Qumica Analtica

Universidade Federal Rural do Semi-rido - UFERSA

qual a transmitncia de uma soluo num determinado comprimento
de onda :

a absortividade molar e expressa nas unidades

Onde:
M-1cm-1;

c a concentrao da amostra expressa em mol/L(M);

b o caminho ptico e geralmente expresso em cm.
Como a transmitncia uma funo exponencial, aplicando-se
o logaritmo temos:

Chamando-se (-log T) de absorbncia (A) temos:

Portanto, a lei de Beer estabelece que a absorbncia de uma

substncia

em

soluo

diretamente

proporcional

sua

concentrao e a espessura que a luz atravessa.

A utilizao da lei de Beer requer o estabelecimento do
comprimento de onda absoro mxima. Conhecendo-se este
comprimento de onda, preparam-se solues com concentraes
conhecidas e determina-se a absorbncia neste comprimento de
onda. Fazendo-se um grfico da absorbncia (Eixo Y) em funo da
concentrao (Eixo X), obtm-se uma reta que chamada de curva
padro, a qual poder ser utilizada para determinar a concentrao
de solues a partir dos valores da absorbncia.
Como valores de para muitas substncias so conhecidos, ou
podem ser facilmente determinados (fazendo-se um espectro de
absoro), e tambm porque a determinao de A simples, este
mtodo bastante utilizado para determinaes de concentrao.

Qumica Analtica

Universidade Federal Rural do Semi-rido - UFERSA

11.2.2 Instrumentao
De maneira global, um espectrofotmetro tem trs partes:
-

Fonte de radiao: normalmente uma lmpada incandescente.

Existe tambm um controle de intensidade da radiao, mas

fundamental um meio de controle do comprimento da onda (por

exemplo, filtros ou monocromatizadores como prismas ou
grades de difrao). No nosso aparelho, pode-se selecionar o
comprimento de onda da luz incidente atravs de um controle
manual.
-

Amostra: deve estar contida em um recipiente apropriado do tipo

tubos

de

ensaio

ou

cubetas.

Como

normalmente

medidas

comparativas so feitas (uma medida s com solvente, outra

com solvente e soluto), as cubetas vm emparelhadas. As
cubetas so fabricadas as mais iguais possveis. Assim, no
resultado final, somente o soluto faz uma contribuio
absoro.
-

Detector: um elemento sensvel radiao e que pode nos dar uma

medida da intensidade da mesma; varia desde foto-molcula at o

prprio olho. Um indicador no aparelho converte o sinal do

elemento em um nmero. Os instrumentos em geral dispem
de dois indicadores: um deles nos d a transmitncia e o outro
d a absorbncia, evitando a necessidade de uma calculadora.

11.3 PROCEDIMENTO PRTICO

a) Preparar 1 L de uma soluo estoque de permanganato de
potssio

(KMnO4

massa

molar

158,034

g/mol)

na

concentrao de 1,58 mg/L. (Obs.: para poupar tempo esta

etapa

foi

executada

previamente

soluo

de

permanganato de potssio 1,58 mg/L j se encontra sobre a

bancada central)

Qumica Analtica

Universidade Federal Rural do Semi-rido - UFERSA

b) A partir da soluo 1,58 mg/L obtida na etapa anterior, prepare
04 (quatro) solues padres de permanganato de potssio por
diluio.

Estas

solues

devem

possuir

as

seguintes

concentraes: 0,316 mg/L, 0,632 mg/L, 0,948 mg/L e 1,265

mg/L de permanganato de potssio.
Para efetuar as diluies voc dever calcular o volume de
soluo a 1,58 mg/L que ser pipetado e transferido para um balo
volumtrico

de

volume

conhecido,

de

forma

obter-se

concentrao desejada.

Ex:
-

Volume do balo volumtrico = 25 ml (V2)

Concentrao final desejada = 0,316 mg/L (C2)

Concentrao da soluo a diluir = 1,58 mg/L (C1)

Volume da soluo a diluir que deve ser pipetado = ? (V1)

Clculo:

C1V1 = C2V2

1,58 mg/L . V1 = 0,316 mg/L . 25 ml

=> V1 = 5 ml

Complete o quadro abaixo com os volumes que devem ser

pipetados para preparar cada soluo padro.
Soluo
1
2
3
4

C1
1,58 mg/L
1,58 mg/L
1,58 mg/L
1,58 mg/L

V1

C2
0,316 mg/L
0,632 mg/L
0,948 mg/L
1,265 mg/L

V2
25 mL
25 mL
25 mL
25 mL

Tendo calculado os volumes de soluo (V 1) que devem ser

usados para cada diluio, pipete o volume calculado e transfira-o
para o balo volumtrico (de volume idntico ao usado nos clculos),

Qumica Analtica

Universidade Federal Rural do Semi-rido - UFERSA

complete o volume (at o menisco) usando gua como solvente (isto
para cada soluo). Guarde cada soluo preparada em um frasco e
rotule, indicando a concentrao de permanganato de potssio (obs.:
entre a preparao de uma soluo e outra, lave o balo volumtrico
usado gua).
c) Leve

as

quatro

solues

padres

preparadas

ao

espectrofotmetro e leia a absorbncia de cada uma delas

usando um comprimento de onda o mais prximo possvel de
525 nm. Use gua como branco.
d) Preencha o quadro abaixo com as absorbncias relativas a cada
concentrao de permanganato de potssio. Calcule tambm a
concentrao molar de cada soluo.

Soluo
1
2
3
4

Concentrao
(mg/L)
0,316 mg/L
0,632 mg/L
0,948 mg/L
1,265 mg/L

Concentrao
(mol/L)

Absorbncia

e) Usando uma planilha eletrnica de clculo (o Microsoft EXCEL,

por exemplo) trace um grfico de pontos, colocando os valores
de absorbncia nas ordenadas e as concentraes molares nas
abscissas.

Ajuste a equao de uma reta passando pelos

pontos e pela origem (Y

a.X) aos dados experimentais.

Anote a equao da reta e o coeficiente de correlao (R2).

Ex:

Qumica Analtica

Universidade Federal Rural do Semi-rido - UFERSA

0,7
y = 145x
R2 = 0,9932

0,6

Abs

0,5
0,4
0,3
0,2
0,1
0
0

0,001

0,002

0,003

0,004

0,005

Concentrao molar

A tangente da reta fornece a absortividade molar do

permanganato de potssio, sabendo-se que o caminho ptico da
cubeta de 1 cm. Compare a equao da reta com a lei de BeerLambert.
A = . C. l
Y = a. X
f) Anote o valor de , ele ser necessrio para determinar a
concentrao de uma determinada soluo de permanganato
de potssio.
=

M-1cm-1

g) Leve a soluo de permanganato de potssio de concentrao

desconhecida e leia a absorbncia um comprimento de onda
prximo 525 nm. Anote a absorbncia obtida.
h) Calcule a concentrao molar da soluo usando a lei de BeerLambert

(A = .C.l) use l = 1 cm.

11.4 PS-LABORATRIO
a) Pesquisa - Faa uma pesquisa sobre espectrofotometria e:
a.1) Cite e explique quais so as limitaes da tcnica.
a.2) Quais so os tipos de desvios que podem ocorrer na
lei de Lambert-Beer? Explicar cada um deles.

Qumica Analtica

Universidade Federal Rural do Semi-rido - UFERSA

b) A absortividade molar de uma certa substncia 14.000 M-1cm-1

no comprimento de onda do seu mximo de absoro. Calcular
a molaridade dessa substncia que pode ser medida no
espectrofotmetro com clula de 1 cm, para uma absorbncia
de 0,850.
11.5 MATERIAIS E REAGENTES
MATERIAIS
REAGENTES
1 becker de 40 mL
KMnO4
1 Esptula
gua destilada
1 balo volumtrico de 1000
mL
1 balo volumtrico de 25 mL
1 Pipeta graduada de 10 mL
4 frascos com rtulo
1 Espectrofotmetro
8.6 BIBLIOGRAFIA
1 - HARRIS, Daniel C. Anlise qumica quantitativa. 5. ed. Rio de
Janeiro: LTC, 2001. 862 p.
2 - SKOOG, D.H. et al. Fundamentos de Qumica Analtica. 8. ed.
So Paulo: Thomson, 2006. 999 p.
3 - BACCAN, Nivaldo et al. Qumica analtica quantitativa e
elementar. 2. ed. rev. ampl. So Paulo: Edgard Blcher; Campinas

Qumica Analtica