UNIVERSIDADE FEDERAL FLUMINENSE
ANÁLISE INSTRUMENTAL | ESPECTROFOTOMETRIA NO VISÍVEL
ANGÉLICA SOUSA
INTRODUÇÃO
Espectrofotometria no visível é uma técnica
analítica amplamente empregada que permite
a determinação da concentração de
substâncias em solução através da medição da
absorção de luz por essas substâncias em
diferentes comprimentos de onda dentro do
espectro visível, que varia aproximadamente
de 380 a 780 nanômetros (nm)¹. Sua
simplicidade de execução, aliada a um custo
acessível, fazem dela uma ferramenta bastante
atrativa para a análise quantitativa de
compostos orgânicos e inorgânicos.
Para determinar a concentração de uma
substância baseia-se na lei de Beer-Lambert,
que estabelece uma relação linear entre a
absorvância (A), concentração da espécie
absorvente (c), comprimento do caminho
óptico (b) e a constante de absorção molar (ε),
conforme a equação:
A=ε⋅b⋅c
Nessa equação, a absorvância (A) é medida
diretamente pelo espectrofotômetro, enquanto
a concentração da amostra (c) e o
comprimento do caminho óptico (b) são
conhecidos. Já a constante de absorção (ε)
molar é uma propriedade específica do
composto analisado e varia com o
comprimento de onda da luz incidente.
Um espectrofotômetro é composto por fonte
de luz, monocromador, cubeta e detector
(Veja Figura 1).
Figura 1 - Esquema de Espectrofotômetro²
A fonte de luz emite radiação na faixa do
espectro visível (lâmpada de tungstênio). O
monocromador seleciona
um comprimento de onda específico da luz,
permitindo que apenas essa luz passe pela
amostra. A cubeta contém a solução a ser
analisada, e o detector mede a intensidade da
luz transmitida através da solução.
Os conceitos de transmitância e absorvância
regem o fundamento da técnica. Sendo
transmitância a fração de luz que atravessa a
amostra sem ser absorvida, ou seja, é a
capacidade de transmitir a luz. Já a
absorvância é a fração de luz que é absorvida
por uma amostra, ou seja, a capacidade de
absorver a luz. São grandezas
complementares de modo que quando uma
aumenta a outra diminui.
OBJETIVO
Utilizar a solução de cobalto para realizar
operações no espectrofotômetro, calibrar o
comprimento de onda e verificar a linearidade
fotométrica.
METODOLOGIA
Utilizar 4 balões volumétricos de 50mL:
➢ Colocar no 1º balão 50mL da solução
de cobalto 0,1M;
➢ No 2º colocar 25,0 mL da solução
contida no 1º balão e avolumar com
HCL 0,5M;
➢ No 3º colocar 25,0 mL da solução
contida no 2º balão e avolumar com
HCL 0,5M;
➢ No 4º colocar 25,0 mL da solução
contida no 3º balão e avolumar com
HCL 0,5M;
➢ Após homogeneização acondicionar
cada solução em um béquer de 50 mL,
separadamente;
➢ Coletar, em um béquer de 50 mL, HCl
para fazer o branco;
➢ Acondicionar separadamente cada
solução em uma cubeta para análise.

RESULTADO E DISCUSSÃO
Foram determinados alguns comprimentos de
onda na faixa entre 400 a 600 nm para avaliar
a amostra no espectrofotômetro, calibrando o
equipamento e obtendo a absorvância nesses
pontos específicos. Veja a seguir na tabela 1:
Tabela 1 - Comprimento de Onda x Absorvância
Cobalto 0,1M
`
No comprimento de onda 515 nm
(Absorvância de 0,399) tem-se o ponto
máximo onde é alcançado o comprimento de
onda que determinará a melhor absorvância
de cada amostra a ser analisada. Observe o
ponto máximo no gráfico 1 abaixo:
Gráfico 1 - Curva de Calibração | Comprimento de
Onda x Absorvância Cobalto 0,1M
Definido o melhor comprimento de onda (515
nm), analisou-se a absorvância nas demais
concentrações. O balão 1 tinha a concentração
padrão Cobalto 0,1M. Para as demais
amostras foram calculadas concentrações pela
fórmula:
C1⋅V1=C2⋅V2
Dessa forma, C1 é a concentração da amostra
do balão anterior, V1 o volume de 25,0mL
pipetados do balão anterior, V2 o volume de
50,0mL da capacidade do balão e C2 a
concentração a ser descoberta. Veja as
concentrações encontradas e absorvâncias
determinadas na a tabela 2 a seguir:
Tabela 2 - Concentração x Absorvância Cobalto
Com essas informações é possível encontrar a
linearidade fotométrica. Veja no Gráfico 2:
Gráfico 2 - Concentração x Absorvância Cobalto
O valor de R2 (coeficiente de determinação)
da reta mostra que a curva é fidedigna e os
procedimentos foram executados
corretamente, isso se confirma devido ao R²
ser 1 (quanto mais próximo de 1,0 melhor é a
curva em relação à amostra)
CONCLUSÃO
A calibração e a verificação da linearidade
fotométrica são etapas cruciais na
espectrofotometria no visível, assegurando
uma resposta precisa e confiável ao longo da
análise de diferentes concentrações da
amostra. A calibração precisa da escala de
comprimento de onda garante a seleção
correta dos comprimentos desejados,
prevenindo erros sistemáticos na análise.
Além disso, a confirmação da linearidade
fotométrica garantiu a proporção da resposta
do instrumento com a concentração da
substância de Cobalto 0,1M, em estudo,
possibilitando uma análise quantitativa
confiável em uma ampla faixa de
concentrações. Ambos os processos foram
fundamentais para garantir a exatidão e
precisão dos resultados espectrofotométricos,
fortalecendo assim a confiabilidade e validade
das conclusões obtidas nas análises
realizadas.

REFERÊNCIAS
1.SKOOG, D. A. et al. Princípios de análise
instrumental. Porto Alegre: Bookman, 2002.

2.Como funciona o Espectrofotômetro.

Disponível em:
<https://www.labnova.com.br/var/www/html/
labnova.com.br/web/var/www/html/labnova.c
om.br/web/index.php/suporte/30-espectrofoto
metro>. Acesso em: 22 mar. 2024.

3.HARRIS, D. C. Análise Química

Quantitativa. 7 ed. Tradução de Bordinhão, J.
[et al.]. Rio de Janeiro: LTC, 2008.