Ultra microtomia – MEV e MET: 30 A 60nm Crio-ultra microtomia (-20 e -150°C) A histotecnologia é uma ciência centrada na detecção microscópica de anormalidades teciduais para Passo a Passo: diagnóstico e tratamento de doenças. Utilizando reagentes, produtos químicos e corantes específicos, o histotecnologista prepara espécimes cirúrgicos para etapas posteriores (ex: triagem microscópica - patologista cirúrgico). As tarefas executadas pelo histotecnologista exigem paciência, habilidade mecânica, conhecimentos básicos de biologia, imunologia, biologia molecular, anatomia e química. A histotecnologia requer seis etapas básicas, cada uma parte integrante do trabalho do histotecnologista: Luz ou fotônica; Coleta; Extração e Fixação; Incorporação; Contraste de fase; Processamento; Seccionamento; e Coloração Fluorescência; Confocal; Eletrônica Processamento de amostras histológicas (fragmento de tecido humano produto de biópsia) para análise macroscópica, imunohistoquímica, citoquímica e molecular, firmando os respectivos laudos. O poder de resolução é a menor distância entre duas partículas que permite que elas sejam vistas Técnicas auxiliares de necropsia e análises forenses, sob separadamente supervisão de profissional médico devidamente A resolução do microscópio de luz é da ordem de habilitado. 0,2 micrômetros A resolução do microscópio eletrônico é da ordem Gestão administrativa e controle de qualidade (interno e de 3 nanômetros. externo) de laboratórios histotecnológicos públicos e privados. 1000 nanômetros = 1 micrômetro = 0,001 milímetro
1665 – Robert Hooke: Observou tecidos de cortiça.
Séc. XIX – Schleiden e Schwann propuseram que todos os tecidos vegetais e animais são agregados de células individuais. “As partes elementares dos organismos são as células semelhantes dos organismos são as células semelhantes no geral, mas diferentes nas forma e função. {...} A essência da vida é a formação da célula. ” ⠀⠀⠀⠀⠀⠀⠀
Célula de rim de hamster em cultura, coradas por
alaranjado de acridina
Microscopia de contraste de fase Princípio da Microscopia Confocal
Importante para observação de células em cultivo
Microscopia eletrônica de transmissão,
Microscopia eletrônica de varredura
Esse microscópio possui uma potente luz ultravioleta e
filtros capazes de alterar o comprimento de onda da luz, fazendo com que substâncias utilizadas para tratar os espécimes exibam fluorescência. Fluorescência: Quando certas substâncias são irradiadas por luz de um determinado comprimento de onda, elas são capazes de emitir luz em um comprimento de onda mais longo.
Visualização das estruturas internas
⠀⠀⠀⠀⠀⠀⠀ Tecidos podem ser ampliados até 120.000 vezes Permite-se a observação de macromoléculas (400.000 vezes) • De maior resolução, podendo visualizar até moléculas orgânicas Elétrons são produzidos pelo aquecimento de um metal sob vácuo, depois atraídos (acelerados) pela diferença elétrica entre o cátodo (+) e o ânodo (-) e saem do canhão passando pelo condensador, chamado também de lente eletromagnética. Alguns elétrons interagem com o espécime, enquanto outros simplesmente o atravessam. Os elétrons continuam até atingir uma placa fluorescente, filme fotográfico, ou câmera, os quais podem produzir a (Espermatozoides nos tubos seminíferos) imagem.