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Genetica Basica
Genetica Basica
So Cristvo/SE
2011
Gentica Bsica
Elaborao de Contedo
Bruno Lassmar Bueno Valadares
Edilson Divino de Araujo
Silmara de Moraes Pantaleo
Presidente da Repblica
Dilma Vana Rousseff
Chefe de Gabinete
Ednalva Freire Caetano
Ministro da Educao
Fernando Haddad
Vice-coordenador da UAB/UFS
Vice-diretor do CESAD
Fbio Alves dos Santos
Vice-Reitor
Angelo Roberto Antoniolli
Diretoria Pedaggica
Clotildes Farias de Sousa (Diretora)
Coordenao de Cursos
Djalma Andrade (Coordenadora)
Assessoria de Comunicao
Edvar Freire Caetano
Guilherme Borba Gouy
Coordenadores de Tutoria
Edvan dos Santos Sousa (Fsica)
Raquel Rosrio Matos (Matemtica)
Ayslan Jorge Santos da Araujo (Administrao)
Carolina Nunes Goes (Histria)
Rafael de Jesus Santana (Qumica)
Gleise Campos Pinto Santana (Geografia)
Trcia C. P. de Santana (Cincias Biolgicas)
Vanessa Santos Ges (Letras Portugus)
Lvia Carvalho Santos (Presencial)
Sumrio
AULA 1
Bases cromossmicas da hereditariedade ............................................07
AULA 2
Leis bsicas da hereditariedade e extenses das leis de Mendel .. .......17
AULA 3
Ligao, recombinao e mapeamento gnicos ............................... 33
AULA 4
Herana ligada ao sexo e mecanismos de determinao sexual ... 51
AULA 5
Estrutura dos cidos nucleicos . ........................................................ 65
AULA 6
Replicao do DNA e transcrio ...................................................................79
AULA 7
Cdigo gentico e traduo..............................................................113
AULA 8
Mutao e reparo do DNA.... ........................................................... 133
AULA 9
Regulao da expresso gnica ...... .............................................. 151
AULA 10
Princpios de Gentica de Populaes............................................ 167
Aula
BASES CROMOSSMICAS DA
HEREDITARIEDADE
META
Demonstrar a estruturao cromossmica e a organizao do material gentico durante o ciclo celular.
OBJETIVOS
Ao final desta aula, o aluno dever:
conhecer a constituio do material de preenchimento do ncleo celular, a forma como a cromatina
se organiza durante a interfase e o processo de compactao do DNA e o comportamento dos
cromossomos durante as divises mitticas e meiticas.
PR-REQUISITO
Biologia celular.
Gentica Bsica
INTRODUO
Nesta aula iniciaremos o estudo da gentica com as bases cromossmicas da hereditariedade. Vamos discutir como os cromossomos so constitudos e sua relao com a molcula de DNA e os genes. Os conceitos aqui
estudados sero importantes para os contedos seguintes de hereditariedade.
CROMATINA
O ncleo das clulas preenchido por material gentico (DNA) associado a protenas responsveis pela compactao e organizao dos cromossomos, e RNA produzido na atividade de expresso dos genes. Esse
material que preenche o ncleo denominado cromatina.
As molculas de DNA (que sero estudadas mais detalhadamente na
aula de estrutura dos cidos nuclicos) constituem, cada uma, um cromossomo da clula. Os cromossomos so visualizados apenas durante o perodo
de diviso celular. Durante a interfase, o DNA se encontra disperso no
ncleo, no sendo possvel individualizar os cromossomos.
A cromatina apresenta diferentes nveis de compactao, dependente da
atividade gentica da regio do DNA. Regies com maior atividade (sntese
de RNA para traduo de protenas) encontram-se mais dispersas e, por
esse motivo, menos coradas nas observaes microscpicas. Essas regies
recebem o nome de eucromatina. As regies de menor atividade encontramse mais compactadas, e por isso, tambm mais coradas, recebendo o nome
de heterocromatina. Essas diferenas de compactao devido atividade
de expresso gentica podem ser visualizadas na Figura 1.
Figura 1. Eletromicrografia destacando ncleo celular interfsico com regies mais coradas de
heterocromatina e menos coradas, com eucromatina (Fonte: adaptado de: http://www.biologia.
edu.ar/cel_euca/images/01541a.jpg).
Aula
Gentica Bsica
COMPACTAO DO DNA
Durante a diviso celular, a cromatina que preenche o ncleo reduz
sua atividade de sntese e sofre um processo intensificado de compactao.
A compactao do DNA e individualizao dos cromossomos serve para
organizar o material gentico, facilitando a segregao na diviso da clula.
A compactao tem incio com o enovelamento do DNA em uma estrutura
composta por 8 protenas, um octmero de histonas (H2A, H2B, H3 e H4, cada
uma em dose dupla). O DNA d duas voltas em torno do octmero e, por fora,
acoplada a histona H1 (Figura 3). A esse complexo dado o nome de nucleossomo.
Figura 4. Aproximao dos nucleossomos pela histona H1 formando o solenide (Fonte: http://3.
bp.blogspot.com/).
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Aula
ESTRUTURA DO CROMOSSOMO
A visualizao dos cromossomos ocorre no perodo de diviso celular.
Nesta faze o cromossomo visualizado com cromtides duplicadas, pois, j
ocorreu a duplicao do DNA durante a fase S da interfase. As cromtides
de um mesmo cromossomo so chamadas cromtides irms.
As duas cromtides so unidas por um ponto de constrio primria,
denominado centrmero. O centrmero tem um papel importante na
diviso celular, pois, nessa regio onde se encontra uma estrutura de protenas denominada cinetcoro, onde se ligam as fibras do fuso. Pores de
cromossomos sem centrmero, originadas a partir de quebras, se perdem
durante a diviso celular por no sofrerem direcionamento.
O centrmero divide cada cromtide em brao curto (p) e brao longo
(q). Ainda podemos encontrar em alguns cromossomos regies de constrio secundria. Estas regies apresentam genes que sintetizam RNA
ribossomal (que ser estudado na aula de transcrio e traduo) e que, no
ncleo interfsico, correspondem regio organizadora do nuclolo. As
pores terminais, aps a constrio secundria, so denominadas de satlite.
As extremidades de cada cromtide tambm so muito importantes
para o cromossomo, pois tambm esto relacionadas manuteno de sua
estabilidade. Estas, recebem o nome de telmeros. A Figura 6 apresenta
esquematicamente essas estruturas citadas.
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Gentica Bsica
DIVISO CELULAR
Existem dois tipos de diviso celular que, conseqentemente, originam
cada um, um tipo de clula. A mitose o tipo de diviso que origina as
clulas somticas que compem o corpo de um organismo, mantendo suas
caractersticas genticas como o mesmo nmero de cromossomos (2n) da
clula me para as clulas filhas; e a meiose, por sua vez, origina as clulas
reprodutivas com metade do nmero de cromossomos da clula me (n).
MITOSE
A mitose tem grande importncia para os seres vivos por possibilitar
a multiplicao celular que leva ao crescimento, reposio de clulas perdidas e tambm na reproduo assexuada de alguns organismos. A mitose
subdividida nas seguintes fases:
Prfase condensao dos cromossomos de forma que os mesmos
possam ser Individualizados. Formao das fibras do fuso mittico e desaparecimento da membrana nuclear (carioteca).
Prometfase Organizao dos cromossomos entre as fibrilas do fuso
mittico e acentuao da compactao da cromatina.
Metfase Maior grau de condensao dos cromossomos e disposio
destes na placa equatorial da clula devido trao das fibras do fuso.
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Aula
MEIOSE
Importante na formao dos gametas para os organismos que se reproduzem sexuadamente, assim, mantendo a quantidade de material gentico
na fuso dos gametas e possibilitando diversidade entre os organismos. Este
processo se constitui por duas etapas de diviso celular:
1 Diviso Meitica - Uma clula com 2n cromossomos (diplide)
origina duas clulas com n cromossomos, devido separao dos cromossomos homlogos.
Prfase I:
Leptteno: incio da condensao da cromatina.
Zigteno: maior grau de condensao, possibilitando individualizar os
cromossomos com o incio de aproximao dos homlogos.
Paquteno: cromossomos homlogos pareados, formando as ttrades.
Diplteno: visualizao dos quiasmas onde ocorre a recombinao de
partes das cromtides homlogas.
Diacinese: desaparecimento da membrana nuclear (carioteca) e disposio dos cromossomos entre as fibrilas do fuso mittico.
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Gentica Bsica
Metfase I:
Organizao dos cromossomos na placa equatorial onde os homlogos
se encontram, desta vez, pareados.
Anfase I:
Separao dos cromossomos homlogos que migram para os plos
da clula orientados pelos centrolos.
Telfase I:
Reorganizao do ncleo nos plos e diviso do citoplasma.
2 Diviso Meitica - Das duas clulas-filhas haplides resultaro 4
clulas tambm haplides por separao, agora, das cromtides irms.
Prfase II:
Corresponde ao final da telfase I com o desaparecimento da membrana nuclear.
Metfase II:
Posicionamento dos cromossomos na regio equatorial da clula.
Anfase II:
Separao das cromtides irms e migrao para os plos da clula.
Telfase II:
Reconstituio dos ncleos e diviso citoplasmtica (citocinese), com
a formao de 4 clulas filhas haplides e geneticamente diferentes entre
si devido recombinao de partes dos cromossomos homlogos ocorridas na prfase I.
As fases da meiose esto representadas resumidamente na Figura 8.
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RECOMBINAO GNICA
Aula
Figura 9. Recombinao gentica entre cromtides de cromossomos homlogos, promovendo diversidade na formao de gametas (Fonte: http://www.accessexcellence.org/AB/GG/crossing.php).
CONCLUSO
Nesta aula importante ressaltar a idia da constituio cromossmica
e como ocorre a compactao do DNA para sua formao. Compare o que
ocorre na mitose e na meiose, veja as diferenas entre as clulas formadas
em cada um desses tipos de diviso celular.
O entendimento da hereditariedade estudada nas prximas aulas ser
mais fcil com uma boa compreenso dos conceitos aqui abordados.
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Gentica Bsica
RESUMO
Os cromossomos so resultado da compactao do DNA. Durante a
interfase, a cromatina se encontra dispersa preenchendo o ncleo da clula de
eucariontes. Durante a diviso celular, a cromatina sofre a compactao, o que
torna possvel a individualizao dos cromossomos. Na diviso mittica, o numero
cromossmico e as caractersticas genticas da clula so mantidas, enquanto na
meiose, ocorre a reduo do nmero de cromossomos para formao de gametas.
ATIVIDADES
1. Explique as etapas da compactao do DNA e relacione aos elementos
envolvidos na mesma:
2. Compare a diviso celular meitica e mittica quando ao resultado cromossmico nas cluas filhas:
AUTOAVALIAO
Aps estudar esta aula, consigo.
1. Definir eucromatina, heterocromatina constitutiva e heterocromatina
facultativa?
2. Descrever a morfologia dos cromossomos?
3. Explicar o processo de compactao do DNA?
4. Descrever as fases da mitose?
5. Descrever as fases da meiose?
6. Explicar a importncia da recombinao meitica?
PRXIMA AULA
Na prxima aula iremos falar sobre princpios bsicos da hereditariedade propostos por Mendel e as variaes de mecanismos de herana.
.
REFERNCIAS
GRIFFITHS AJF, MILLER JH, SUZUKI DT, LEWONTIN RC, GELBART WM. 2009. Introduo Gentica. 8 ed. Rio de Janeiro: Guanabara
Koogan, 794p.
PIERCE BA. 2004. Gentica: um enfoque conceitual. Rio de Janeiro:
Guanabara Koogan, 758p.
SNUSTAD DP, SIMMONS MJ. 2008. Fundamentos de Gentica. 4 ed.
Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 903p.
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Aula
2
LEIS BSICAS DA HEREDITARIEDADE
E EXTENSES DAS LEIS DE MENDEL
META
Explicitar os princpios bsicos da hereditariedade propostos por Mendel e as variaes de
mecanismos de herana.
OBJETIVOS
Ao final desta aula, o aluno dever:
compreender os princpios da segregao de alelos (1 lei) e segregao independente (2 lei);
compreender a relao de dominncia e recessividade entre alelos; definir conceitos de homozigose e
heterozigose, gentipo, fentipo e sua relao com o ambiente; interpretar as propores genotpicas
e fenotpicas de descendentes obtidos em um cruzamento; aplicar as regras de proporo e
probabilidade nos cruzamentos; conhecer um cruzamento teste; compreender casos de ausncia de
dominncia, alelos mltiplos, herana quantitativa, alelos letais e interao gnica.
PR-REQUISITO
Bases cromossmicas da hereditariedade e noes matemticas de proporo e probabilidade.
Gentica Bsica
INTRODUO
Nesta aula muitos conceitos de Gentica devero ser observados para
que voc tenha um melhor aproveitamento, como conceitos de genes,
alelos, dominncia, recessividade, gentipo e fentipo. A base desta aula a
realizao de cruzamentos onde sero observados os gentipos e fentipos
dos descendentes. Para tanto, importante que voc tenha compreendido
bem os conceitos de segregao na aula anterior sobre bases cromossmicas
da hereditariedade.
A compreenso dos diferentes mecanismos de herana vai lhe proporcionar uma interpretao matemtica da Gentica. Primeiramente importante compreender os mecanismos propostos por Mendel de segregao
dos alelos na formao dos gametas e a segregao independente de alelos
localizados em cromossomos distintos.
Os cruzamentos descritos por Mendel apresentam uma proporo
fenotpica de descendentes que caracterizam os princpios bsicos da hereditariedade. Os demais mecanismos de herana que sero estudados a
seguir (nesta e em outras aulas) podero obedecer a esses princpios, ou,
apresentar variaes nessas propores.
Figura 1. Representao dos cruzamentos realizados por Mendel, observando as propores entre
os fentipos de cor verde ou amarela das sementes.
Aula
2
Figura 2. Diagrama representando o cruzamento entre ervilhas verdes
puras e ervilhas amarelas puras, resultando em 100% de descendentes
hbridos com fentipo amarelo.
Neste caso, as ervilhas verdes (vv) e amarelas (VV) cruzadas eram puras
e, nos cruzamentos, foram produzidos os hbridos (Vv) que apresentavam
a cor amarela devido a seu fator de hereditariedade ser dominante para
esta caracterstica.
Em seguida, em um auto-cruzamento dos descendentes da primeira
gerao (F1) originou a segunda gerao de descendentes (F2) com ervilhas amarelas e verdes, respectivamente, na proporo 3:1 (Figura 3). Neste
cruzamento temos a demonstrao dos princpios da primeira lei de Mendel
que postula a segregao dos alelos na formao dos gametas.
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Gentica Bsica
CRUZAMENTO TESTE
Um individuo que apresenta fentipo dominante para uma determinada caracterstica pode ser tanto um homozigoto recessivo quanto
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Aula
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Gentica Bsica
AUSNCIA DE DOMINNCIA
Dominncia incompleta: um tipo de ausncia de dominncia onde
o indivduo heterozigoto apresenta fentipo intermedirio ao dominante
e ao recessivo.
Ex.: Flor de Mirabilis jalapa (conhecida como boca de leo) (Figura 7).
VV flor vermelha
Vv flor rsea
vv flor branca
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Aula
ALELOS MLTIPLOS
Considera-se alelos mltiplos a ocorrncia de mais de dois alelos para
um mesmo gene.
Ex.: determinao da cor da pelagem de coelhos onde existem 4 alelos
diferentes na espcie, mas, o indivduo possui apenas um par desses alelos
(Figura 9).
Nesta situao, os alelos ainda apresentam uma ordem de dominncia:
C+ > cch > ch > c
Fentipo
Gentipo
Aguti
Chinchila
Himalaia
chch, chc
Albino
Cc
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Gentica Bsica
Figura 9. Coelhos com pelagem aguti, chinchilla, himalaia e albino (Fonte: http://crv.educacao.
mg.gov.br/sistema_crv/index).
GRUPOS SANGUNEOS
Um caso de alelos mltiplos na espcie humana a herana do sistema
ABO, onde existem os genes IA, IB, i. Sendo que entre os alelos IA e IB
tambm existe uma co-dominncia, pois ambos se expressam.
As clulas apresentam mecanismos de identificao em suas membranas por meio dos antgenos que so expressos nas mesmas. Quando uma
clula em um organismo apresenta um antgeno estranho ao mesmo so
produzidos anticorpos de defesa que consideram estes elementos como
um corpo estranho.
Estes alelos IA e IB produzem antgenos que se expressam nas membranas das hemcias, enquanto o alelo i no produz esses antgenos de
membrana.
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Fentipo
Gentipos
IAIA, IAi
B B
Antgeno de
Anticorpo
Doa para
Recebe de
Anti-B
A e AB
AeO
membrana
I I ,I i
Anti-A
B e AB
BeO
AB
IAIB
AeB
AB
A, B e O
Ii
Anti-A e Anti-B
A, B e AB
Aula
Fentipo
Gentipos
Rh+
RR, Rr
Rh -
RR
Antgeno de
Anticorpo
Doa para
Recebe de
Rh
Rh+
Rh+ e Rh -
Anti-Rh
Rh+ e Rh -
Rh -
membrana
INTERAO GNICA
Existem vrios casos onde os genes se interagem, havendo mais de um
par de alelos determinando uma nica caracterstica. Um exemplo clssico
de interao gnica encontrado na determinao do formato da crista de
galinhas (Figura 10).
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Gentica Bsica
Fentipo
Gentipos
Noz
Rosa
RRee, Rree
Ervilha
rrEE, rrEe
Simples
Rree
PLEIOTROPIA
Ao contrrio da interao gnica, alguns alelos so responsveis
por mais de uma caracterstica, ocasionando assim casos de pleiotropia, que
ocorre algumas vezes devido aos genes para estas caractersticas estarem
localizados muito prximos em um mesmo cromossomo, ou ento por
uma caracterstica ser conseqncia da outra, como o caso do albinismo
(indivduos com ausncia de pigmentao na pele) que tambm determina
outras caractersticas como hipersensibilidade luz e maior predisposio
ao cncer de pele (Figura 11).
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Aula
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Gentica Bsica
HERANA QUANTITATIVA
Para uma mesma caracterstica existem dois ou mais pares de genes
situados em cromossomos de pares distintos. Cada alelo dominante apresenta um efeito aditivo sobre o fentipo.
o tipo de herana observada em caractersticas como a cor da pele
(Figura 13), altura e cor dos olhos. Nesse tipo de herana cada caracterstica apresenta mais de dois fentipos. A relao entre alelos e fentipos
expressa pela frmula a seguir:
N de fentipos = N de alelos + 1
Onde temos:
N de classes = 5
N de alelos = 4
Brancos: aabb.
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Aula
seguintes propores:
1 1
1 2 1
Negros: 1
1 3 3 1
Mulatos escuros: 4
1 4 6 4 1
Mulatos mdios: 6
1 5 10 10 5 1
Mulatos claros: 4
1 6 15 20 15 6 1
Brancos: 1
GENES LETAIS
Em alguns casos, determinados gentipos so letais para o indivduo,
alterando a freqncia esperada de descendentes para determinada caracterstica.
Ex.: foi detectado em alguns camundongos que no cruzamento entre
indivduos de pelagem preta, 100% dos descendentes eram pretos, enquanto
no cruzamento entre indivduos marrons, sempre encontravam em torno
de 33% de indivduos pretos, nunca havendo uma descendncia exclusiva
de indivduos marrons.
O gene A determina a cor marrom da pelagem nesses indivduos,
enquanto a, determina a cor preta. Os resultados observados nesses cruzamentos mostraram que no existiam indivduos marrons homozigotos
(AA), mas apenas heterozigotos (Aa).
Estudos posteriores mostraram que os indivduos de gentipo AA
morriam ainda no tero, mostrando que este gentipo era legal para os
camundongos. Assim, a freqncia esperada de descendentes nos cruzamentos entre camundongos marrons era de 1/3 de indivduos pretos para
2/3 com pelagem marrom (Figura 14).
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Gentica Bsica
CONCLUSO
Ao final desta aula podemos concluir que as interpretaes matemticas
dos resultados obtidos nos cruzamentos facilitaram a compreenso dos
diversos mecanismos de herana. Ser muito importante essa compreenso
das propores de fentipos e gentipos entre os descendentes nos cruzamentos para que o contedo das prximas aulas (Ligao gnica e mapeamento cromossmico e herana ligada ao sexo) sejam bem assimilados.
RESUMO
Com a observao de cruzamentos realizados com ervilhas, Mendel
descreveu os princpios bsicos da hereditariedade, postulados como 1 Lei
de Mendel: segregao dos alelos na formao dos gametas, e 2 Lei de
Mendel: segregao independente dos alelos. Conceitos muito importantes
para a Gentica tambm foram descritos por Mendel, como a relao de
dominncia e recessividade. Variaes das leis de Mendel podem ser observadas diversas caractersticas em diferentes organismos, que no obedecem as propores descritas por Mendel, como nos casos de ausncia de
dominncia, alelos letais, alelos mltiplos, herana quantitativa e interao
gnica. Em alguns desses outros mecanismos a proporo de descendentes
encontrada nos cruzamentos pode diferir do que foi proposto por Mendel,
como no caso dos alelos letais onde um tipo de gentipo eliminado e
na ausncia de dominncia onde um terceiro fentipo determinado pelo
indivduo hibrido.
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ATIVIDADES
Aula
AUTOAVALIAO
Aps, estudar esta aula, consigo:
1. Explicar a relao allica de dominncia e recessividade?
2. Explicar como o ambiente pode influenciar em um fentipo?
3. Conhecer a base citolgica para explicar a 1 e a 2 lei de mendel?
4. Descrever como so realizados cruzamentos testes e explique qual sua
finalidade?
5. Conhecer qual aspecto diferencia um caso de co-dominncia de outro
com dominncia incompleta?
6. Saber qual a influencia de um alelo letal dominante na proporo esperada de descendentes?
7. Conhecer no cruzamento de um casal de coelhos chinchila, no qual
foi gerado um coelho albino, qual o gentipo para esta caracterstica dos
parentais?
8. Defina o conceito de pleiotropia?
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Gentica Bsica
PRXIMA AULA
Na prxima aula, sero estudados genes localizados em um mesmo
cromossomo, diferente, do que estudamos nessa aula (genes de segregao independente). Tenha como base os conhecimentos desta aula de
cruzamentos e segregao de alelos e da aula anterior, da segregao de
cromossomos homlogos na meiose.
REFERNCIAS
GRIFFITHS AJF, MILLER JH, SUZUKI DT, LEWONTIN RC, GELBART WM. 2009. Introduo Gentica. 8 ed. Rio de Janeiro: Guanabara
Koogan, 794p.
PIERCE BA. 2004. Gentica: um enfoque conceitual. Rio de Janeiro:
Guanabara Koogan, 758p.
SNUSTAD DP, SIMMONS MJ. 2008. Fundamentos de Gentica. 4 ed.
Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 903p.
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Aula
LIGAO, RECOMBINAO E
MAPEAMENTO GNICOS
META
Discutir a importncia dos princpios que regem a origem da diversidade gentica a cada gerao
celular e a construo de mapas fsicos para a localizao de genes em cada cromossomo do
genoma.
OBJETIVOS
Ao final desta aula, o aluno dever:
compreender a importncia dos mecanismos de ligao gnica e recombinao para a origem da
diversidade gentica nas populaes naturais;
construir mapas genticos.
PR-REQUISITOS
Antes de iniciar o estudo da Recombinao Gentica, o aluno dever fazer uma leitura sobre a As
Leis de Mendel em um livro de gentica Gentica consultando a bibliografia recomendada.
Gentica Bsica
INTRODUO
A diversidade biolgica de determinada espcie o conjunto de caractersticas morfolgicas e fisiolgicas que a torna capaz de responder s
mudanas ambientais. Essa diversidade originada pelos diferentes conjuntos de alelos estocados nos diferentes indivduos de uma populao. Assim, quanto mais diversificada for esta populao, maior a variabilidade de
respostas s mudanas ambientais e, consequentemente a sua sobrevivncia.
Os mecanismos genticos que do origem a essa diversidade, a segregao independente e a recombinao gnica, ocorrem durante a diviso
celular meitica, gerando os gametas.
Na segregao independente dos cromossomos (Fig. 1), ou 2 Lei
de Mendel, os cromossomos e seus genes podem combinar-se ao acaso,
gerando gametas com diferentes arranjos, como em um sorteio. As combinaes mais freqentes so as parentais; as menos freqentes so a de
gametas recombinantes, ou seja, com novas combinaes. As propores
esperadas sero 1:1:1:1.
No entanto, nem todos os genes se comportam de maneira independente, pois quanto mais prximos estiverem no cromossomo maior a
probabilidade de serem herdados juntos. A nica maneira de separ-los por
meio do crossing-over ou recombinao gnica, que ocorre durante a prfase
da meiose I, permitindo que genes muito prximos no cromossomo possam
ser re-arrumados a cada diviso celular, gerando gametas com diferentes
combinaes. Mas, diferente da segregao independente de Mendel, na
recombinao gnica a proporo de recombinantes maior e a anlise dos
cruzamentos mostra uma proporo maior dessas combinaes.
Pode-se relacionar a freqncia de recombinantes produzida pelo
crossing over distancia entre os genes, mostrando o rearranjo de genes
ao longo de um cromossomo e permitindo construir mapas fsicos dos
cromossomos antes dos mapas moleculares, como veremos neste capitulo
34
Aula
P. exemplo, em humanos
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Gentica Bsica
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Aula
Gametas
pr. vg
Dibrido de F1
pr+/ pr . vg+/ vg
pr+ vg+
1.339
1.195
151
154
2.839
Esse desvio mostra que as 2 primeiras combinaes de genes esto ligadas. Observando-se o percentual de recombinantes na prole,
Morgan percebeu que o numero de indivduos era aproximadamente
igual (151 ~ 154), gerando um total de 305, que uma freqncia de
10,7 ou (305/2839) X 100.
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Gentica Bsica
Com esses dados Morgan postulou que os genes estavam fisicamente ligados no mesmo cromossomo e as combinaes so mantidas
juntas na prole.
Desse modo ficou comprovado que os genes que esto juntos no
mesmo cromossomo no segregam de modo independente;
Mas se os genes esto ligados como mostra a alta proporo de
combinaes parentais, como aparecem as combinaes novas, recombinantes?
Morgan sugeriu que, durante a meiose, quando h o pareamento de
homlogos, os cromossomos podem trocar pedaos, em um processo
chamado crossing-over.
Esse processo permite a recombinao gnica. O crossing-over
ocorre durante a prfase I da meiose no estgio bivalente, onde
cromtides no-irms de cromossomos homlogos trocam pedaos
de DNA. Essa troca pode ocorrer em qualquer local entre 2 molculas
complementares de DNA, mas no constante.
38
Aula
Quanto ao arranjo dos alelos dominantes e recessivos, h duas configuraes possveis: cis, quando os alelos dominantes esto no mesmo
cromossomo e trans quando em cada cromossomo localiza-se um dominante e um recessivo.
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Gentica Bsica
40
Aula
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Gentica Bsica
A deteco de classes recombinantes duplas mostra que podem ocorrer crossing-over duplos. Um crossing-over em uma determinada regio
do cromossomo afeta a probabilidade de ocorrncia de outro crossing em
uma regio adjacente, ou seja, esses fenmenos no so independentes. Essa
interao chamada de interferncia. Se os crossings em duas regies so
independentes, ento, a frequncia de recombinantes duplos seria igual ao
produto das frequncias de recombinantes nas regies adjacentes
Interferncia (I): um crossing reduz a probabilidade de outro crossing
em uma regio adjacente
Coincidncia (C): proporo de recombinantes duplos observados em
relao ao esperado
42
Assim:
I = 1 C, em que:
C = (n observado de recombinantes duplos - FRDO/ n esperado de
recombinantes duplos - FRDE)
No exemplo de Drosophila:
FRDO = 8
FRDE = 0,064 x 0,132 = 0,0084 (8% de 1448 = 12)
I = 1 8/12 = 4/12 = 1/3 = 33%
C = 0 (interferncia completa, I = 1)
Nesse caso no so observados duplo recombinantes
C = 1 (ausncia de interferncia, I = 0)
Nesse caso o nmero de duplo recombinantes observado igual ao
nmero esperado de duplos recombinantes
Aula
CONCLUSO
O mapeamento de genes atravs de analise ligao serve para estimar
a posio relativa dos genes atravs da freqncia de crossing. Mas ainda
incompleto, pois no estabelece distancias em relao ao centrmero ou
telmeros, os marcos citolgicos de um cromossmico, para associar um
dado gene a um cromossomo. No entanto a analise conjunta de um gene
ligado a determinado cromossomo e seu mapa cromossmico ampliam a
analise gentica. Com o emprego das metodologias moleculares, os mapas
de ligao so associados a dados de mapas fsicos e tem fornecido informaes valiosas sobre doenas e seus genes defeituosos. Essas associaes
permitiram construir um mapa mrbido (Figura 9))
43
Gentica Bsica
Figura 9- Mapa gentico humano representando a associao entre genes e doenas (Fonte: www.educarchile.cl).
44
Aula
RESUMO
A formulao da teoria cromossmica da herana, associando genes a
cromossomos, foi um marco na Gentica que possibilitou o grande avano
que vemos hoje nas mais diversas reas biolgicas. A construo dos mapas
genticos, atravs da freqncia de recombinantes em cruzamentos utilizando diferentes espcies, nos ajudou a associar genes a locais especficos.
Essa grande estratgia associada a metodologias citogenticas e moleculares
atuais tm revelado uma gama enorme de diversidade, tanto visvel (fentipos) quanto oculta, nos genomas de diferentes espcies.
Para a espcie humana, essa compreenso tem fornecido dados e metodologias essenciais que podem ajudar a pesquisa medica a fornecer dados
mais diretos a sociedade e impulsionado a construo de metodologias que,
em breve tempo, salvaro vidas.
EXERCCIO RESOLVIDO
Ex: Calculo de recombinao em cruzamento teste de 3 pontos (3
genes) em Drosophila:
- v: olhos vermilion.
- cv: ausncia de nervuras nas asas.
- ct: margens das asas cortadas.
P. v+v+ cvcv ctct
v v cv+cv+ ct+ct+
580
592
45
40
89
94
3
5
Total 1448
FR = (45+40+89+94)/1448
FR = 268/1448
FR = 0,1850 x 100
FR = 18,5 cM
45
Gentica Bsica
580
592
45
40
89
94
3
5
Total 1448
FR = (89+94+3+5)/1448
FR = 191/1448
FR = 0,1320 x 100
FR = 13,2 cM
580
592
45
40
89
94
3
5
Total 1448
FR = (45+40+3+5)/1448
FR = 93/1448
FR = 0,0640 x 100
FR = 6,4 cM
Concluso: Todos os locos esto ligados (situados no mesmo cromossomo), pois os valores de FR so menores que 50%.
Teste de trs pontos:
Locos FR (cM)
v e cv
18,5
v e ct
13,2
cv e ct
6,4
Observe que a soma de 13,2 e 6,4= 18,2 refere-se a soma entre os 1o
e o 2 genes e entre o 2 e o 3.
v
ct
13,2
cv
6,4
46
Aula
A deteco de classes recombinantes duplas mostra que podem ocorrer crossing-over duplos.
- Um crossing-over em uma determinada regio do cromossomo afeta a
probabilidade de ocorrncia de outro crossing em uma regio adjacente,
ou seja, esses fenmenos no so independentes. Essa interao chamada
de interferncia.
- Se os crossings em duas regies so independentes, ento, a frequncia
de recombinantes duplos seria igual ao produto das frequncias de recombinantes nas regies adjacentes.
Interferncia (I): um crossing reduz a probabilidade de outro crossing
em uma regio adjacente.
Coincidncia (C): proporo de recombinantes duplos observados em
relao ao esperado.
Assim:
- I = 1 C, em que:
- C = (n observado de recombinantes duplos - FRDO/ n esperado de
recombinantes uplos - FRDE).
- No exemplo de Drosophila:
- FRDO = 8.
- FRDE = 0,064 x 0,132 = 0,0084 (8% de 1448 = 12).
- I = 1 8/12 = 4/12 = 1/3 = 33%.
47
Gentica Bsica
ATIVIDADES
1. Analisando-se dois pares de genes em ligamento fatorial (linkage) representados pelo hbrido BR/br, uma certa espcie apresentou a seguinte
proporo de gametas:
48,5% BR
48,5% br
1,5% Br
1,5% bR
Pela anlise dos resultados, pode-se concluir que a distncia entre os
genes B e R de:
a. 48,5 cM
b. 97 cM
c. 1,5 cM
d. 3 cM.
e. 50 cM
2. O daltonismo deutan um carter determinado por gene recessivo ligado ao sexo.
A doena retinitis pigmentosum (cegueira completa ou parcial) determinada por gene
dominante parcialmente ligado ao sexo. Uma mulher no daltnica e com retinite,
cuja me daltnica e sem retinite e o pai no daltnico e com retinite, homozigoto,
casa-se com um homem daltnico e sem retinite. Considerando que a distncia
entre os dois locos, no X, de 10 unidades de mapa? Responda:
a) Qual a proporo genotpica esperada na descendncia?
b) Qual a proporo fenotpica esperada na descendncia?
c) Se o casal deseja ter dois filhos, qual a probabilidade de ocorrer um menino normal e uma menina normal, para as duas caractersticas?
48
AUTOAVALIAO
Aula
PRXIMA AULA
Trataremos da herana ligada ao sexo e dos mecanismos de determinao sexual
REFERNCIAS
GRIFFITHS AJF, MILLER JH, SUZUKI DT, LEWONTIN RC, GELBART WM. 2009. Introduo Gentica. 8 ed. Rio de Janeiro: Guanabara
Koogan, 794p.
PIERCE BA. 2004. Gentica: um enfoque conceitual. Rio de Janeiro:
Guanabara Koogan, 758p.
SNUSTAD DP, SIMMONS MJ. 2008. Fundamentos de Gentica. 4 ed.
Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 903p.
Vdeos sugeridos
http://www.youtube.com/watch?v=f18U__0nBxQ&feature=PlayList&p
=36C97B9652CDB3E9&index=32
49
Aula
HERANA LIGADA AO SEXO E
MECANISMOS DE DETERMINAO
SEXUAL
META
Apresentar o mecanismo de herana de genes localizados nos cromossomos sexuais e os diferentes
mecanismos de determinao do sexo.
OBJETIVOS
Ao final desta aula, o aluno dever:
compreender o mecanismo de herana dos genes estruturais localizados nos cromossomos
sexuais e conhecer exemplos de caractersticas determinadas por genes localizados no
cromossomo X; compreender o mecanismo de compensao de doses e explicar diferentes
mecanismos de determinao do sexo.
PR-REQUISITOS
Contedo das aulas de mecanismos de herana e bases cromossmicas da hereditariedade.
Gentica Bsica
INTRODUO
Na natureza, a maioria dos animais e muitas plantas, apresentam
diferena sexual, onde encontramos organismos masculinos e femininos.
Geralmente, essa diferenciao determinada por cromossomos especiais,
denominados cromossomos sexuais. As caractersticas determinadas pelos
genes presentes nesses cromossomos tambm tero padro de herana
diferente dos genes localizados nos demais cromossomos (autossomos).
Nesta aula vamos estudar a herana de caracteres genticos determinados por genes localizados nos cromossomos sexuais, algumas variaes
e tambm os diferentes padres de determinao gentica do sexo.
HERANA DE CARACTERSTICAS
RELACIONADAS AO SEXO
A diferena cromossmica entre machos e fmeas promove tambm
a ocorrncia de um mecanismo de herana caracterstico para os genes localizados nestes cromossomos. Havendo uma diferena morfolgica entre
os cromossomos sexuais, regies homlogas e no homlogas sero encontradas nos mesmos (Figura 1). As regies no homlogas so chamadas
de regies diferenciais, pois apresentaro genes presentes apenas naquele
tipo de cromossomo, assim, esses genes no tero homlogos no outro
cromossomo sexual.
52
Aula
DALTONISMO
A percepo de cores pelo olho humano ocorre em clulas dos cones
que revestem a retina. Estas clulas detectam trs tipos de cores especficas:
azul, verde e vermelho (as demais cores so resultado da combinao realizada em nosso crebro). O tipo mais comum de daltonismo em humanos
o que no distingue as cores vermelho e verde. Os genes que determinam a
capacidade para a percepo destas cores esto localizados no cromossomo
X. Um exemplo de teste para daltonismo est na Figura 2.
Observao: O gene para deteco da cor azul est localizado no cromossomo 7, portanto, tem padro de herana autossmica.
53
Gentica Bsica
Figura 3. Cruzamento entre um homem normal XDY e uma mulher portadora do alelo para o
daltonismo XDXd. Os descendentes
54
Nos heredogramas para caractersticas ligadas ao sexo usa-se representar o indivduo portador com um sinal diferente ao do indivduo normal.
Veja a representao deste padro de herana na Figura 4. Observe tambm
que homens que apresentam a caracterstica no a transmitem para seus
filhos do sexo masculino, mas, suas filhas sero todas portadoras do alelo
para a caracterstica.
Aula
HEMOFILIA
A hemofilia uma doena caracterizada pela deficincia na produo
de fatores de coagulao do sangue. Esta caracterstica determinada por
um gene presente no cromossomo X. Indivduos portadores do alelo XH
so capazes de produzir a protena responsvel pela coagulao do sangue,
enquanto o alelo Hh no produz essa protena.
55
Gentica Bsica
Figura 5. Indivduo normal e indivduo com plos nas bordas das orelhas.
56
Aula
4
Figura 6. Calvcie caracterstica dominante no sexo masculino e recessiva no sexo feminino.
57
Gentica Bsica
Um exemplo do mecanismo de compensao de doses pode ser observado na pelagem de gatas (fmeas). A cor preta ou marrom das manchas
determinada por um gene localizado no cromossomo X e, dependendo
de qual cromossomo foi inativado em uma fmea heterozigota, a mancha
ter a cor determinada pelo alelo presente no X que permaneceu funcional. Apenas fmeas heterozigotas apresentaro as duas cores de manchas
(Figura 8), machos, por possurem apenas um cromossomo X e fmeas
homozigotas, apresentaro manchas de apenas uma cor.
Figura 8. Gatas apresentando o padro de colocao das manchas determinado pela inativao do
X (Fonte: http://www.infoescola.com/genetica/cromatina-sexual/).
DETERMINAO DO SEXO
Existem diferentes sistemas para determinao do sexo, entre eles,
podemos citar os que sero estudados a seguir:
SISTEMAS CROMOSSMICOS
A determinao do sexo por sistemas cromossmicos baseada na
ocorrncia de variaes de morfologia ou nmero nos cromossomos sexuais,
onde podem existir machos heterogamticos ou fmeas heterogamticas.
MACHOS HETEROGAMTICOS
Nestes sistemas de determinao sexual, os machos (heterogamticos)
formam gametas distintos, por tanto, quem determina o sexo do descendente. As fmeas formam apenas um tipo de gameta.
58
- Sistema XY/XX
Os machos formam gametas que apresentam, alm do lote de autossomos, cromossomos sexuais distintos, uns contendo o cromossomo Y
que determinara o sexo masculino, outros contendo o cromossomo X, que
determina o sexo feminino.
Este sistema encontrado em humanos e outros mamferos.
Clulas somticas
Macho
2 lotes de autossomos + XY
Fmea
2 lotes de autossomos + XX
Aula
Gametas
1 lote de autossomos + X
ou 1 lote de autossomos + Y
1 lote de autossomos + X
- Sistema X0/XX
Os machos formam gametas que apresentam numero distinto de cromossomos. A presena de um cromossomo X no gameta do macho, alm
dos autossomos, determina a formao de uma fmea e, sua ausncia, a
formao de um organismo macho. Ocorre em percevejos, gafanhotos e
baratas.
Clulas somticas
Macho
2 lotes de autossomos + X
Fmea
2 lotes de autossomos + XX
Gametas
1 lote de autossomos + X
ou 1 lote de autossomos
1 lote de autossomos + X
FMEAS HETEROGAMTICAS
Agora, so as fmeas quem vo formar gametas distintos e determinar
o sexo dos descendentes. Para diferenciar dos sistemas de machos heterogamticos, os cromossomos sexuais nesta condio so denominados
como Z e W.
- Sistema ZW/ZZ
As fmeas formam gametas contendo ou o cromossomo Z, que determinar a formao de um macho, ou o cromossomo W, que determina a
formao de uma fmea. Os machos formam apenas gametas portadores
do cromossomo Z, alem do lote de autossomos. Ocorre em borboletas,
mariposas, alguns peixes e aves.
59
Gentica Bsica
Clulas somticas
Gametas
Macho
2 lotes de autossomos + ZZ
1 lote de autossomos + Z
Fmea
2 lotes de autossomos + ZW
1 lote de autossomos + Z
ou 1 lote de autossomos + W
- Sistema Z0/ZZ
Gametas das fmeas contendo o lote de autossomos mais o cromossomo Z determina a formao de um macho. Se o gameta da fmea, apresenta apenas o lote de autossomos, o organismo formado ser uma fmea.
Os gametas dos machos, todos apresentam o cromossomo Z alem do lote
de autossomos. Encontrado em galinha e alguns rpteis.
Clulas somticas
Gametas
Macho
2 lotes de autossomos + ZZ
1 lote de autossomos + Z
Fmea
2 lotes de autossomos + Z
1 lote de autossomos + Z
ou 1 lote de autossomos
SISTEMA HAPLOIDE-DIPLOIDE
o tipo de determinao de sexo comum em himenpteros (abelhas,
vespas, cupins). Nesse sistema, as fmeas so diplides, originadas de fecundao da rainha (fmea frtil da colnia) pelo macho. J, os machos, se
desenvolvem por partenognese, a partir de ovos no fertilizados, sendo
estes, haplides.
60
Aula
no. de cromossomos X
no. de conjuntos autossomicos
Sexo
< 0,5
Metamacho
0,5
Macho
(0,5 - 1,0)
Intersexo
1,0
Fmea
> 1,0
Metafmea
61
Gentica Bsica
CONCLUSO
Ao final desta aula voc deve conhecer exemplos de caractersticas
determinadas por genes localizados nos cromossomos sexuais, sabendo
explicar seu mecanismo de herana e diferenciar em que diferem da herana
autossmica mendeliana.
Tambm importante que tenha compreendido os diferentes sistemas
cromossomicos de determinao sexual.
RESUMO
Os genes localizados nos cromossomos sexuais apresentam um padro
de herana diferente dos autossomos devido ao macho apresentar apenas
um cromossomo X. Alelos recessivos no cromossomo X manifestam-se
em dose nica nos machos por no haver homologia no par sexual. Na
fmeas de mamferos a presena de dois cromossomos X compensada pela
anulao aleatria de um desses cromossomos por compactao, tornando
as fmeas mosaicos. Nos sistemas de determinao de sexo, encontramos
sistemas de machos heterogamticos (XX/XY, XX/X0) e de fmeas hetorgamticas (ZZ/ZW, ZZ/Z0).
62
ATIVIDADES
Aula
AUTOAVALIAO
Aps ter estudado esta aula, consigo:
1. Montar o heredograma de famlia cujo casal de indivduos no daltnicos
tiveram 1 filho daltnico e uma filha normal, e determinar o gentipo do casal?
2. Saber se uma filha daltnica de um pai daltnico, tem que, obrigatoriamente, ter uma me tambm daltnica?
3. Saber qual a probabilidade de um casal normal que tem um filho hemoflico ter um filho do sexo masculino normal?
4. Explicar o que so genes holndricos?
5. Explicar por qual motivo as fmeas de mamferos so consideradas
mosaicos em relao inativao do cromossomo X?
6. Definir a diferena entre os sistemas de determinao do sexo de machos
heterogamticos e fmeas heterogamticas?
7. Explicar o que diferencia os gametas nos sistemas de determinao do
sexo XX/XY e XX/X0?
63
Gentica Bsica
PRXIMA AULA
A partir da prxima aula, iniciaremos o estudo da Gentica molecular.
Ser entendida a estrutura do material gentico e todo o funcionamento
dos genes. muito importante ter a idia da estrutura cromossmica e dos
mecanismos de herana, para que esses novos conceitos venham completar
efetivamente a compreenso da Gentica.
REFERNCIAS
GRIFFITHS AJF, MILLER JH, SUZUKI DT, LEWONTIN RC, GELBART WM. 2009. Introduo Gentica. 8 ed. Rio de Janeiro: Guanabara
Koogan, 794p.
PIERCE BA. 2004. Gentica: um enfoque conceitual. Rio de Janeiro:
Guanabara Koogan, 758p.
SNUSTAD DP, SIMMONS MJ. 2008. Fundamentos de Gentica. 4 ed.
Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 903p.
64
Aula
ESTRUTURA DOS CIDOS
NUCLEICOS
META
Apresentar a estrutura molecular do DNA e RNA.
OBJETIVOS
Ao final desta aula, o aluno dever:
conhecer as estrutura de um nucleotdeo; compreender as propriedades dos cidos nuclicos
relacionadas sua constituio molecular; compreender o sentido 5-3 na estrutura dos cidos
nuclicos; conhecer as diferentes bases nitrogenadas e a forma como interagem entre si;
diferenciar estruturalmente DNA e RNA.
PR-REQUISITOS
Conceitos de biologia celular e qumica de ensino mdio.
Gentica Bsica
INTRODUO
Bem vindo ao maravilhoso mundo da Gentica Molecular. A partir
desse captulo, voc vai conhecer detalhadamente a constituio molecular
dos cidos nuclicos (DNA e RNA) e assim, poder compreender suas
propriedades, como o comportamento destas molculas, a natureza da
informao gentica e a estrutura de um gene, conhecimentos de extrema
importncia para a compreenso de todo o funcionamento gnico e tambm
para o desenvolvimento das novas tecnologias da gentica.
Ser estudada a constituio dos nucleotdeos e a forma como se
encaixam e interagem entre si para compor as molculas dos cidos
nuclicos. Em seguida, sero apresentadas as diferenas estruturais entre
DNA e RNA, estendendo s suas propriedades funcionais relacionadas
sua estruturao molecular.
As informaes desta aula so a base para a compreenso de todo
o contedo de gentica molecular que ser estudado. Assim, ser muito
importante que dedique ateno especial a essa aula e que tambm faa
revises dos conceitos aqui apresentados sempre que for necessrio nas
aulas posteriores.
CONHECENDO O NUCLEOTDEO
Os cidos nuclicos so molculas orgnicas constitudas por polmeros,
uma cadeia de subunidades determinadas nucleotdeos. Assim, para compreender os cidos nuclicos, de suma importncia conhecer antes a
estrutura desses componentes que compem estas molculas.
Os nucleotdeos so compostos por fosfato (ou cido fosfrico), um
acar do tipo pentose (constitudo por seis tomos de carbono), e uma
base nitrogenada, como mostra a Figura 1. Os diversos tipos de nucleotdeos
so determinados por variaes nos acares e nas bases nitrogenadas.
Vejamos detalhadamente cada um desses componentes dessas subunidades
dos cidos nuclicos:
66
Aula
Accar: do tipo pentose, constitudo por uma cadeia de forma cclica de 5 tomos de carbono. Estes carbonos so numerados de 1 a 5,
como mostram os exemplos na Figura 3. No carbono da posio 1 de um
nucleotdeo vamos encontrar a base nitrogenada e no carbono da posio
5, o fosfato. No carbono 2 vamos encontrar uma distino entre dois tipos
de aucares, a presena de um radical do tipo hidroxila (-OH) nos aucares
do tipo ribose, ou a ausncia desse radical na posio 2 dos aucares do
tipo desoxirribose. Esta diferena entre os aucares ribose e desoxirribose
tambm podem ser visualizados ainda na Figura 3.
Observao: a apstrofe na numerao dos carbonos do acar serve
para diferenciar da numerao dos tomos da base nitrogenada (que no
apresentam a apstrofe)
Os aucares do tipo ribose fazem parte da constituio dos cidos
ribunocleicos (RNA), enquanto os do tipo desoxirribose vo constituir os
cidos desoxirribunocleicos (DNA).
67
Gentica Bsica
68
Entre as bases pricas, encontramos na constituio dos cidos nuclicos dois tipos principais de bases nitrogenadas, adenina (A) e guanina
(G). As bases pricas apresentam maior peso molecular, constitudas por
dois anis em sua estrutura (Figura 6). As bases adenina e guanina so
constituintes tanto de DNA quanto de RNA.
Aula
69
Gentica Bsica
Figura 8. Representao da estrutura de cadeia dupla com fitas antiparalelas do DNA e da fita simples
de RNA (Fonte: adaptado de www.accessexcellence.org/AB/GG/nucleic.php).
Figura 9. James Watson e Francis Crick com o modelo de estrutura proposto para o DNA em 1953
(Fonte: http://www.reproductive-revolution.com/watson_crick.html).
70
Aula
Figura 10. Modelo tridimensional da dupla hlice de DNA (Fonte: adaptado de: http://commons.
wikimedia.org/wiki/File:A-DNA,_B-DNA_and_Z-DNA.png).
71
Gentica Bsica
72
Aula
Figura 11. Estrutura molecular das bases nitrogenadas demonstrando a formao especfica de
pontes de Hidrognio (Fonte: http://www.enq.ufsc.br/.../genetica/dna042.png).
73
Gentica Bsica
Figura 12. Diferenas estruturais entre DNA e RNA (Fonte: adaptado de www.ibb.unesp.br/.../imagens/dna_rna.jpg)
CONCLUSO
Ao final desta aula, importante que voc verifique se os objetivos
propostos realmente foram atingidos em seu aprendizado, pois, estas informaes so fundamentais para a compreenso das prximas aulas.
Voc deve conhecer bem a estrutura dos nucleotdeos, especialmente
compreender a numerao dos carbonos do acar e em quais desses carbonos vamos encontrar a base nitrogenada, o cido fosfrico, onde teremos
a diferena entre uma ribose e uma desoxirribose e os pontos de ligao
entre um nucleotdeo e outro na cadeia.
74
Aula
RESUMO
A estrutura dos cidos nuclicos definida a partir da polimerizao de
nucleotdeos formando cadeias lineares. Os nucleotdeos so constitudos por
fosfato, acar e base nitrogenada. Os acares so do tipo ribose para RNA e
desoxirribose para o DNA. As bases nitrogenadas so classificadas como pricas
(adenina e guanina) e pirimdicas (citosina, timina e uracila). A base nitrogenada
timina especifica de DNA e a uracila, para RNA. O DNA uma cadeia dupla
e o RNA, uma cadeia simples. No DNA as bases nitrogenadas interagem entre
si, formando pares especficos de timina com adenina, e citosina com guanina.
Esta especificidade entre as bases dada por sua conformao estrutural e
pelas pontes de hidrognio formadas entre as mesmas. A sequncia de bases
nitrogenadas o que determina o cdigo gentico.
ATIVIDADES
1. Extrao caseira de DNA.
Uma atividade prtica de fcil realizao a extrao caseira de DNA
vegetal. Esta atividade pode ser realizada em sua prpria cozinha, utilizando
material comum do seu uso dirio, como gua, detergente, sal, lcool, frutos macios (banana, mamo ou morango), copo, funil, filtro de caf e saco
plstico e palito de churrasco.
Primeiramente, faa uma soluo em um copo de gua, com duas
colheres cheias de sal e quatro colheres de detergente. Amasse bem o
fruto dentro do saco plstico, adicione a soluo de gua, sal e detergente
e misture para homogeneizar. Com auxilio de um funil, filtre a soluo e
recolha o material liquido (filtrado) em um copo.
Adicione lentamente, deixando escorrer pela parede do copo, o lcool
(que deve ser utilizado gelado para obter melhor resultado).
Com o palito de churrasco, mecha lentamente a soluo em movimentos
circulares e ver a formao de uma nuvem esbranquiada na soluo
em torno do palito.
75
Gentica Bsica
AUTOAVALIAO
Aps estudar esta aula, consigo:
1. Descrever a estrutura comum dos nucleotdeos?
2. Explicar o motivo estrutural do DNA apresentar cargas negativas e ter
carter cido?
3. Explicar como determinado na estrutura molecular dos cidos nuclicos
o sentido 5-3?
4. Diferenciar estruturalmente os dois grupos de bases nitrogenadas?
5. Explicar o que determina a especificidade no pareamento entre as bases
nitrogenadas?
76
Aula
RNA
Tipo de cadeia
Tipo de acar
Bases pirimdicas
Bases pricas
PRXIMA AULA
Na prxima aula ser abordada a replicao do material gentico. Os
conceitos aqui estudados sobre a estrutura do DNA sero de extrema importncia para a compreenso do novo contedo, especialmente a estrutura
dos nucleotdeos, com nfase no sentido 5-3.
REFERNCIAS
GRIFFITHS AJF, MILLER JH, SUZUKI DT, LEWONTIN RC, GELBART WM. 2009. Introduo Gentica. 8 ed. Rio de Janeiro: Guanabara
Koogan, 794p.
PIERCE BA. 2004. Gentica: um enfoque conceitual. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 758p.
SNUSTAD DP, SIMMONS MJ. 2008. Fundamentos de Gentica. 4 ed.
Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 903p.
77
Aula
REPLICAO DO DNA E
TRANSCRIO
META
Apresentar os processos de replicao e transcrio do material gentico e fornecer as informaes
necessrias para o estudante compreender a base molecular da hereditariedade e da expresso
gnica.
OBJETIVOS
Ao final desta aula, o aluno dever:
saber como ocorre o processo de replicao do DNA ao nvel molecular e relacionar esse evento
aos mecanismos de reproduo e formao de organismos multicelulares;
compreender como se d a passagem da informao contida no DNA para as molculas de RNA
pelo processo de transcrio;
entender a relao entre a transcrio e a expresso gnica;
conhecer a base comum da replicao e da transcrio em procariotos e eucariotos, bem como
entender as particularidades relacionadas a esses dois grupos.
PR-REQUISITOS
Conhecimento sobre a estrutura do material gentico.
Gentica Bsica
INTRODUO
Prezado estudante, nas aulas da disciplina de Biologia Celular certamente voc deve ter estudado as caractersticas celulares, bem como a mitose
e a meiose, mecanismos de diviso celular. Tambm dever ter visto que
existe desde organismos que so formados por uma nica clula, tal como
as bactrias, at organismos multicelulares, como o prprio homem. Estimase que um homem adulto tenha cerca de 65.000.000.000.000 (sessenta e
cinco trilhes) de clulas, sendo a maior parte delas, clulas somticas que
formam juntas os diversos tecidos e rgos que compem o organismo.
Nessa aula veremos os mecanismos bsicos moleculares pelos quais uma
clula gera linhagens inteiras de clulas geneticamente idnticas, por meio
de um processo de replicao altamente preciso, ou ento como utiliza esse
mesmo mecanismo para gerar descendentes, tanto de forma assexuada
quando por mecanismos de reproduo sexuada. Entretanto, mesmo sendo
geneticamente idnticas, os nossos trilhes de clulas somticas no so
funcionalmente, nem morfologicamente, idnticas. Ento, como possvel
gerar diversidade e especificidade utilizando o mesmo material gentico
obtido por meio da replicao? Parte dessa resposta est no processo
de transcrio, que diz respeito ao modo pelo qual as clulas transmitem
s molculas de mRNA informaes especficas que sero utilizadas em
um processo posterior que dirige a produo das protenas, mecanismos
associados ao cdigo gentico e ao processo de traduo que sero abordados no prximo captulo. Em resumo, veremos como os genomas so
conservados por meio da replicao que cria novas cpias genticas e como
as informaes genticas contidas no genoma so utilizadas por meio da
transcrio do genes.
REPLICAO
A replicao do material gentico, em procariontes e eucariontes,
realizada com grande preciso e velocidade. Uma bactria consegue adicionar 30.000 nucleotdeos por minuto quando produz um novo filamento de
DNA, com uma margem mdia de um nucleotdeo adicionado errado para
cada bilho de nucleotdeos incorporados. Desse modo, quando dizemos
que gmeos univitelinos so geneticamente idnticos, de fato eles devem
ser idnticos, uma vez que a sua formao utilizou exatamente os mesmos
conjuntos haploides, paterno e materno, excetuando apenas as clulas que
podero ter mudado devido a erros de replicao ou outras mutaes (que
voc ver na aula 09).
80
Aula
6
Figura 1- Gmeos univitelinos: as gmeas idnticas Betty Richards e Jenny Pelmore numa foto de
infncia e, direita, comemorando seus 101 anos de vida em Manchester, na Inglaterra.
(Fonte: http://www.telegraph.co.uk).
81
Gentica Bsica
82
Aula
83
Gentica Bsica
ORIGENS DA REPLICAO
No ano de 1963, estudos auto-radiogrficos do cromossomo de
E.coli mostraram que o cromossomo bacteriano uma estrutura circular
e que o processo de deselicoidizao da molcula de DNA e a replicao
semi-conservativa eram processos que ocorrem de forma acoplada, quase
simultaneamente interpretao dos pesquisadores paras as auto-radiografias
indicaram tambm que a replicao tem incio em um stio especfico,
chamado de origem e ocorre de forma bidirecional ao redor do cromossomo circular, em um modelo denominado crculo rolante.
Figura 4- Auto-radiografia de um cromossomo bacteriano em processo de replicao. (a) Uma auto-radiografia do clssico
trabalho de Cairns (1963), com seu diagrama interpretativo acima direita. Os filamentos radioativos so mostrados com
linhas slidas e os filamentos novos so ilustrados como linhas tracejadas. (b) interpretao do processo de replicao
bidirecional chamado crculo rolante
(Fonte: http://schaechter.asmblog.org).
84
REPLICAO BIDIRECIONAL
Aula
85
Gentica Bsica
A origem da replicao em E.coli foi denominada de OriC. Foi observado detalhadamente que o OriC possui 245 pares de nucleotdeos em duas
diferentes seqncias conservadas repetidas. Assim uma seqncia de 13pb
est repetida trs vezes em tandem. As repeties so ricas em pares de A:T,
o que possibilita a formao da bolha de replicao, que uma regio
de separao do filamento. Uma zona de desnaturao a primeira etapa
essencial para a replicao de todo DNA bifilamentar. Outro componente
do OriC conservado que entra em ao agora uma seqncia de 9pb com
quatro repeties intercaladas por outras sequncias. Estas sequncias so
na verdade stios de ligao a uma protena, denominada dna A, que d
inicio ao processo de formao da bolha de replicao.
DNA POLIMERASES
A sntese in vitro de DNA foi realizada primeiramente em 1952 por
Arthur Kornberg, que tambm acabou por identificar o que mais tarde seria
denominada de DNA polimerase I . A enzima DNA polimerase I entra em
ao somente na presena de ons Mg+ e da fita molde de DNA. De modo
geral as DNA polimerases so enzimas que auxiliam na sntese de qualquer
fita nova de DNA, sendo os novos filamentos produzidos no sentido de
5 3. Em bactrias, tanto a enzima DNA polimerase I quanto as DNA
polimerase II e III realizam polimerizao (adio de novos nucleotdeos)
86
Aula
Polimeralizao
Exonuclease
Exonucle
Polimerase
3
5
35
ase
Principais Funes
53
I
Sim
Sim
Sim
remove e substitui
primers.
II
Sim
Sim
No
reparo do DNA:
reinicia a replicao
em DNA danificado,
parar a sntese.
III
Sim
Sim
No
alonga o DNA
REPLICAO EM EUCARIONTES
A replicao em eucariontes ainda no tem todos seus mecanismos
completamente elucidados, mas sabe-se que apresentam algumas diferenas
quando comparados replicao dos procariontes. As principais diferenas
so: origens mltiplas de replicao, maior nmero de polimerases, maior
diversidade de funes para DNA polimerases, montagem de nucleossomos
aps a replicao.
Como visto anteriormente em leveduras, algumas seqncias de DNA
(ARS) possuem a habilidade de se auto-reaplicar, o que possibilita a replicao de qualquer filamento de DNA, uma vez que estejam ligados a uma
destas ARS. O complexo de reconhecimento de origem (ORC) liga-se a
ARS desenrolando o DNA. O DNA eucaritico possui muitas origens de
replicao e cada origem possui um ORC. O genoma precisa ser replicado
de forma a no repetir nenhum gene nem deixar que algum gene no seja
replicado. Assim em clulas eucariticas o inicio da replicao se d em
duas fases para maior controle do processo de replicao.
Na primeira fase as origens so aceitas para replicao por meio de um
fator de permisso da replicao que se liga a estas origens. Na fase seguinte
as protenas iniciadoras se ligam somente s origens permitidas ou ligadas
a seu fator de permisso, a partir de ento se tem a separao dos filamen87
Gentica Bsica
Atividade de
Atividade de
polimerase
Exonuclease 35
Funes
3
5
Alfa
Sim
No
Beta
Sim
No
Reparo de DNA e
e reparo do DNA.
Recombinao de DNA
nuclear.
Gama
Sim
Sim
Replicao de DNA
mitocondrial.
Delta
Sim
Sim
Sntese de filamentos
leading e lagging,
reparo do DNA e
sntese transleso de
DNA.
psilon
Sim
Sim
Reparo e replicao de
DNA nuclear.
Zeta
Sim
No
Sntese de DNA
transleso.
Eta
Sim
No
Sntese de DNA
transleso.
88
Aula
Teta
Sim
No
Reparo do DNA.
Ioda
Sim
No
Sntese de DNA
transleso.
Kapa
Sim
No
Sntese de DNA
transleso.
Lambda
Sim
No
Reparo do DNA.
Mi
Sim
No
Reparo do DNA.
Sigma
Sim
No
Replicao do DNA
nuclear, reparo do
DNA,e coeso de
cromtides irms.
EFEITO DE OKAZAKI
do conhecimento de vocs que a molcula de DNA formada por
uma hlice dupla, constituda de duas fitas complementares que apresentam
polaridades opostas e por isso, so denominadas antiparalelas. Enquanto
uma tem sentido 35, a fita complementar encontra-se no sentido 53.
Para que um novo nucleotdeo seja adicionado durante a polimerizao a
DNA polimerase cliva o nucleotdeo trifosfatado (utilizado como matria
prima), liberando duas molculas de fsforo inorgnico, o que fornece a
energia necessria para a catlise da formao de uma ligao fosfodiester
entre a ligao livre, do nico fosfato restante no nucleotdeo, e a extremidade 3-OH livre da desoxirribose da fita nascente. Assim, cada nucleotdeo
novo deixa uma extremidade 3-OH livre para os prximos nucleotdeos,
repetindo esse passo sucessivamente, enquanto estiverem na presena
da fita molde. Como as DNA polimerases iniciam a sntese a partir do
fragmento 3OH livre fornecido pelo primer, a fita nova 53 apresenta
uma sntese contnua dando origem ao filamento denominado leading, e
a fita nova no sentido 35 apresenta sntese descontnua originando o
filamento lagging. Quando a fita molde est no sentido 53 no possvel fornecer DNA polimerase uma extremidade livre 3OH de forma
simultnea ao fornecimento da fita molde, uma vez que a extremidade livre
3OH encontra-se na extremidade oposta fita molde.
A sntese do filamento lagging tem sentido contrrio ao da deselicoidizao,
indo de encontro forquilha de replicao, o que faz a sntese desse filamento
ocorrer de forma fragmentada, j que o primer adicionado distncia de
algumas centenas de nucleotdeos da forquilha de replicao (para solucionar
a falta de fita molde) e a polimerizao se estende at voltar parte j replicada,
sendo necessrios vrios primers, sendo um para cada fragmento da fita lagging.
Assim a sntese do filamento lagging se d de forma descontnua em fragmentos curtos que so denominados de fragmentos de Okazaki. A figura a seguir
ilustra a formao das fitas lagging e leading durante o processo de replicao.
89
Gentica Bsica
O MECANISMO DE REPLICAO
O complexo de replicao pode ser resumido ao que ocorre durante
a formao de um rplicon.
90
Aula
Figura 7- Esquema representativo da abertura da fita de DNA evidenciando as funes das protenas
SSB e das helicases.
(Fonte:www.ufsm.br).
Relembrando a estrutura da molcula de DNA, estudada na aula anterior, observe que trata-se de uma dupla hlice onde cada volta completa
tem cerca de 10 pares de nucleotdeos de tamanho, isso faz com que durante a abertura da molcula o DNA precise realizar um giro de 360 (uma
volta completa) a cada 10 nucleotdeos, sendo a velocidade de replicao
em torno de 30000 nucleotdeos por minuto. Rapidamente gerada uma
superelicoidizao em funo da velocidade de cerca de 3000rpm, gerando
uma fora contrria abertura da fita. Para impedir que a fora contrria de
superelicoidizao impea a abertura da molcula a enzimas, denominadas
topoisomerases, catalisam quebras transitrias nas ligaes fosfodiester
ao longo do eixo principal da molcula de DNA. Existem duas classes de
topoisomerases: tipo I e tipo II. As topoisomerases do tipo I so caracter91
Gentica Bsica
izadas por clivar apenas uma das duas fitas de DNA. Essa quebra unifilamentar
permite que a fita clivada gire em torno do eixo da molcula, desfazendo a
superlice e, consequentemente, permitindo que a abertura da fita dupla de
DNA possa continuar. A clivagem realizada pelas topoisomerases tipo I so
energeticamente mais eficientes. As topoisomerases do tipo II apresentam como
principal diferena a clivagem bifilamentar do DNA, podendo remover ou at
mesmo introduzir superlices utilizando um mecanismo que requer energia.
A topoisomerase do tipo II mais bem caracterizada a enzima DNA girase.
Figura 8 Adio de novos nucleotdeos pela DNA polimerase na extremidade 3OH livre da fita nova.
92
Aula
93
Gentica Bsica
94
RNA MENSAGEIRO
Aula
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Gentica Bsica
96
RNA RIBOSSOMAL
Aula
97
Gentica Bsica
RIBOZIMAS
O RNA tambm pode desempenhar funo cataltica como as enzimas, ou seja, nem toda enzima uma protena como pensvamos. Esse
fato foi descoberto por Thomas Cech (1981) em um estudo envolvendo
RNA ribossomal de protozorios, desde ento, diversas ribozimas tm sido
descobertas e estudadas, com destaque para os estudos de Sidney Altman,
o que levou Cech e Altman ao prmio Nobel em 1989. A descoberta das
habilidades catalisadoras de molculas de RNA sugere que o primeiro material gentico tenha sido o RNA e no o DNA.
98
SNTESE DE RNA
Aula
AS RNA POLIMERASES
As RNA polimerases so enzimas semelhantes as DNA polimerases
da replicao. As bactrias possuem apenas um tipo de RNA polimerase.
A RNA polimerase bacteriana uma grande enzima constituda por
vrias cadeias polipeptdicas, ou seja, uma enzima multimrica. A RNA
polimerase bacteriana subdivide-se em quatro unidades (as cadeias polipeptdicas individuais, duas cpias da unidade alfa, uma cpia da unidade beta,
e uma cpia da unidade beta-primo) que compem o cerne da enzima. Ao
cerne da enzima ligam-se outras subunidades como os fatores sigma, formando uma holoenzima, possibilitando que a RNA polimerase bacteriana
atue nas diferentes etapas da transcrio.
TRANSCRIO EM PROCARIONTES
Nos procariotos uma unidade de transcrio pode conter um ou vrios
genes que so transcritos simultaneamente (transcrio policistrnica). O
processo de transcrio pode ser dividido didaticamente em trs etapas:
(1) incio, (2) elongamento e (3) trmino e liberao da molcula de RNA.
Assim como na replicao, a sntese de RNA ocorre sempre no sentido
99
Gentica Bsica
INCIO
Na iniciao primeiramente o promotor reconhecido, depois h a
formao da bolha com separao dos filamentos do DNA, o promotor
determina o trecho do molde que deve ser transcrito e a freqncia dessa
transcrio, nessas etapas o promotor tem afinidades especficas com a
RNA polimerase que varia com o tempo. O promotores bacterianos so
seqncias de DNA que so identificados pelo aparelho de transcrio e que
determinam o stio onde ter inicio a transcrio, qual dos dois filamento de
DNA so utilizados como molde, e qual o sentido da RNA polimerase. Nos
promotores so encontrados seqncias comuns que so denominadas de
seqncias de consenso, essas seqncias normalmente implicam em uma
funo importante. Alguns promotores bacterianos apresentam tambm
um elemento antecedente (upstream) que seria uma seqncia de consenso
a mais, estas geralmente catalisam o processo de transcrio.
Duas regies promotoras parecem estar conservadas em todos os
procariontes, denominada TATA box, que antecede a regio codificante
em 10 bases (-10) e outra na regio -35, ou seja, localizada a cerca de 35
pares de bases acima da regio codificante, caracterizada pelo sequncia de
consenso TTGACA e consiste numa regio relativa ao local de ligao da
RNA polimerase.
ELONGAMENTO
Aula
TRMINO E LIBERAO
O trmino ocorre quando a RNA polimerase transcreve um sinalizador
de trmino ou finalizador que antecedem o ponto de trmino. Um dos
sinalizadores de trmino so denominado alas em grampo, em funo do
dobramento do transcrito sobre si mesmo em funo de uma regio rica
em CG de cerca de 40 nucleotdeos de extenso, reconhecida pela RNA
polimerase.
101
Gentica Bsica
O PROCESSO DE TRANSCRIO EM
EUCARIOTOS
Em linhas gerais a transcrio em eucariotos segue o mesmo padro
do processo de transcrio em procariotos, mas diversos detalhes so diferentes, como o caso das sequncias promotoras e das molculas de RNA
polimerase envolvidas. As RNA polimerases eucariticas dividem-se em
trs categorias diferentes (RNA plimerases I., RNA polimerase II, e RNA
plimerase III), responsveis por transcrever categorias diferentes de RNA,
como ilustrado na tabela a seguir.
Tabela 1 Funes das RNA polimerases eucariticas (PIERCE, 2004).
RNA polimerase I
Grandes rRNA
RNA polimerase II
Aula
ELONGAMENTO
Inicialmente as RNA polimerases so liberadas de seus complexos de
iniciao e catalisam o elongamento da cadeia de RNA ao longo da regio
codificante utilizando os mesmos mecanismos j descritos para a transcrio
em procariontes. No incio do processo de elongamento dos precursores
dos mRNA eucariticos so modificadas pela adio de revestimentos de
7 metil guanosina, adicionados quando a cadei de RNA est com cerca de
30 nucleotdeos de comprimento, esse revestimento metilado e possui
uma rara ligao 55 trifosfato. Esse caput de Guanosina metilada na extremidade 5 importante para o incio do processo de traduo e como
proteo contra a degradao do RNA por nucleases.
TRMINO
As pontas 3 dos RNA transcritos pela RNA polimerase II so geradas
por clivagem endonucleoltica dos transcritos primrios e no pelo trmino
da transcrio. Os eventos de trmino de transcrio ocorre em vrios
stios que esto situados de 1000 a 2000 nucleotdeos aps o stio que ser
posteriormente ps a clivagem a ponta 3.
PROCESSAMENTO DE RNA
Os RNAs pr-mensageiro, ou RNA heterogneo nuclear, so os produtos da transcrio. Vale lembrar que as clulas de bactrias no possuem
pr-mRNA j que nestas a transcrio ocorre simultaneamente a traduo.
103
Gentica Bsica
Figura 17- RNA heterogneo nuclear o o processo de splicing para a obteno do mRNA maduro
(Fonte: http://www.emc.maricopa.edu).
104
Aula
Localizao
Tipo de recomposio
Grupo I
Auto remoo
Grupo II
Genes codificantes de
Auto remoo
protenas em mitocndrias e
cloroplastos
Pr-mRNA nuclear
Genes codificantes de
Spliceossmico
protenas no ncleo
tRNA
Genes de rRNA
Enzimtico
105
Gentica Bsica
106
Aula
A recomposio ocorre no ncleo celular antes que esse atinja o citoplasma. No ncleo mecanismos como a transcrio e recomposio ocorrem
provavelmente nos mesmos stios, de forma bastante ordenada. importante ressaltar que no spliceossomo ocorrem interaes que dependem do
pareamento de bases entre molculas diferentes de RNA, mRNA, snRNA
imprescindveis recomposio.
Tabela. Tipos de interaes que ocorrem no spliceossomo (PIERCE, 2004).
Interao
U1 + stio de corte 5
Ao
Induz ntron a remoo, sempapel direto na
recomposio.
U2 + ponto de ramificao
Formao do lao.
U2 + U6
U6 + ponto de corte 5
107
Gentica Bsica
Justape
as
pontas
do
xon
para
recomposio.
U4 + U6
CONCLUSO
A molcula de DNA passa pelo processo de replicao para garantir a
hereditariedade das clulas, possibilitando o desenvolvimento de organismos
pluricelulares e as diversas formas de reproduo, utilizando um processo
muito preciso envolvendo diversas molculas que garantem a replicao
semi-conservativa do DNA. Por outro lado, podemos concluir que no
processo de transcrio que o DNA realmente inicia a realizao de sua
funo de fornecimento de informaes genticas que determinam as caractersticas das protenas e, participando efetivamente do material gentico
na formao do organismo.
RESUMO
A estrutura do DNA proposta por Watson e Crick levou-os a propor um
modelo para a replicao do DNA. Em 1958 os pesquisadores Meselson e
Stahl conseguiram comprovar que a replicao ocorre realmente de forma
semi-conservativa. A replicao envolve sempre um stio inicial chamado
origem de replicao, sendo o produto da replicao iniciado pelo stio de
origem denominado rplicon. Bactrias possuem geralmente apenas um
stio de origem de replicao, tendo apenas um rplicon. No entanto, em
eucariotos existem diversos pontos de origem e, consequentemente, vrios
rplicons. Em termos moleculares, a abertura da fita de DNA realizada
108
por enzimas que catalisam o rompimento das pontes de hidrognio, denominadas DNA helicases. Essas enzimas iniciam, portanto, uma bolha de
replicao, que estabilizada temporariamente pela adio cooperativa de
protenas SSB nos filamentos simples, permitindo a exposio fsica das
molculas unifilamentares para o processo de replicao. medida que se
processa a abertura da fita, gerada uma grande fora contrria de toro
em funo do movimento giratrio da fita, resultando em superelicoidizao.
As topoisomerases resolvem o problema da superelicoidizao promovendo
clivagens nas molcula de DNA que passa a girar livremente e elimina a tenso de toro. Diversas molculas esto envolvidas no processo de replicao, mas as enzimas DNA-polimerases so principais molculas envolvidas,
desempenhando as funes de exonucleoltica e de polimerizao. Existem
diferentes tipos de DNA polimerases, no entanto, todas necessitam de uma
extremidade 3OH livre, de nucleotdeos trifosfatados como matria prima
e de uma fita molde unifilamentar de DNA para que possam desempenhar
a funo de polimerizao no sentido 5 3. Para o fornecimento das extremidades iniciais 3OH livre, uma enzima denominada primase produz
uma pequena molcula de RNA iniciador denominado Primer e, em funo
das fitas de DNA serem antiparalelas, uma das fitas precisa de apenas um
primer (Fita leading), enquanto a fita, cujo molde unifilamentar de DNA
est no sentido 5 3, produzida de forma fragmentada, necessitando de
diversos primers, formando os fragmentos de Okazaki (Fita Lagging). Aps
o processo de reviso da fita, os fragmentos so unidos covalentemente pela
enzima DNA ligase. Esse processo garante que as fitas de DNA repliquem
de forma semi-conservativa gerando molculas de fita dupla geneticamente
idnticas de forma muito precisa. A expresso gnica, por outro lado,
diz respeito a funo decodificador de protenas realizadas pelos genes.
Para iniciar esse processo, os genes presentes no DNA so transcritos em
molculas de RNA de diversos tipos pelas enzimas RNA polimerases. A
transcrio dirigida por regies especficas de sinalizao do DNA denominadas promotores, utilizadas pelas RNA polimerazes para delimitar
o incio da regio codificante. As etapas de transcrio so denominadas:
incio, elongamento e trmino. Nos procariontes geralmente as molculas
de RNA no so processadas e os mecanismo de transcrio e traduo
so praticamente simultneos. Nos eucariontes existe o processamento
de molculas de RNA precursoras, como o caso do RNA heterogneo
nuclear, que recebe um caput de Guanosina metilada na extremidade 5, uma
calda de poliadenina e a retirada dos introns e reunio do exons, realizada
em um complexo sistema de processamento denominado splicing.
Aula
109
Gentica Bsica
ATIVIDADES
1. A replicao do DNA um mecanismo enzimaticamente muito rigoroso,
pois um nmero muito pequeno de erros condio bsica da sobrevivncia
da espcie. Por que so adicionados erros na replicao?
a) porque a enzima incorpora bases trocadas com baixa freqncia;
b) porque as bases so quimicamente modificadas por enzimas celulares
e transformam-se assim umas nas outras logo depois do processo de replicao;
c) porque a tautomeria de bases confunde a enzima na hora da sntese;
d) porque o mecanismo de reviso induz mutaes;
e) porque radicais livres na clula modificam quimicamente as bases recmincorporadas, antes que sejam metiladas.
2. Complete: Cada aminocido levado aos ribossomos para a sntese
de polipeptdeos pelo pareamento de bases entre o __________ de uma
molcula de aminoacil-RNAt e o __________ de um RNAm.
3. Com base nos eventos ocorridos na replicao do DNA, relacione a
segunda coluna de acordo com a primeira:
DNA pol I
( ) Junta os fragmentos de Okasaki
Forquilha de replicao
( ) Curtos segmentos de RNA
5- 3
( ) Remove os primers e substitui por DNA
DNA ligase
( ) Desenrola o DNA
Primer
( ) Direo da replicao
Fragmentos de Okasaki
( ) Sintetiza DNA na fita contnua e
descontnua
Helicase
( ) regio onde est ocorrendo a replicao
DNA pol III
( ) Curtos fragmentos de DNA na
fita descontnua
AUTOAVALIAO
Aps estudar esta aula, consigo:
1. Comparar eucariotos e procariotos em relao a organizao gnica, o
transcrito primrio e o RNAm maduro.
2. Explicar porque numa famlia de genes a estrutura de introns e exons
dos genes (como o caso da globina) est preservada para todas as cpias
funcionais. Entretanto, observa-se muito mais conservao entre seqncias
de exons do que de introns ente os mesmos genes?
3. Explicar porque noventa e cinco por cento das protenas humanas tm
entre 150 e 800 aminocidos, mas seus genes tm entre 10 e 100 kb?
4. Explicar porque as molculas de RNAt devem ter, concomitantemente,
caractersticas estruturais particulares e comuns.
110
PRXIMA AULA
Aula
REFERNCIAS
EMERSON A. CASTILHO MARTINS, E.A.C., MACIEL-FILHO, P.R.
Mecanismos de expresso gnica em eucariotos, Revista da Biologia
www.ib.usp.br/revista volume 4 junho de 2010.
GRIFFITS, A. J. F. e Col Introduo gentica Editora Guanabara
Koogan, 9a edio, Rio de Janeiro, RJ, 2008.
SNUSTAD, D. P. Fudamentos Gentica - Editora Guanabara Koogan,
6a edio, Rio de Janeiro, RJ, 2008.
111
Aula
CDIGO GENTICO E TRADUO
META
Descrever o cdigo gentico envolvendo suas caractersticas gerais e mecanismos de funcionamento.
Apresentar o processo de traduo, demonstrando como as sequncias de nucleotdeos so
decodificadas em sequncias de aminocidos nos ribossomos.
OBJETIVOS
Ao final desta aula, o aluno dever:
entender como foi decifrado e qual a funo desempenhada pelo cdigo gentico no processo de
expresso gnica;
identificar as principais caractersticas do cdigo gentico;
entender o processo de traduo e sua relao com a informao gentica de um organismo.
PR-REQUISITO
Conhecimento sobre a estrutura do material gentico, noes bsicas de bioqumica.
Gentica Bsica
INTRODUO
Prezado estudante, o assunto dessa aula representa um dos mais fascinantes captulos da gentica por decifrar um dos grandes enigmas da biologia, que explica como a informao gentica armazenada no DNA, por
meio da sequncia de pares de nucleotdeos, pode determinar o fentipo de
um organismo, ou seja, nessa aula voc vai concluir a ideia da colinearidade
entre genes e protenas. Portanto, essa a continuidade da histria iniciada
nas aulas anteriores, que trataram da estrutura do material gentico e da
estratgia utilizada pela clula para produzir molculas intermedirias de
RNA por meio da transcrio. Nessa aula entenderemos o cdigo gentico, uma vez que a linguagem qumica entre cidos nucleicos e protenas
diferente. Enquanto as unidades formadoras dos cidos nucleicos so
os nucleotdeos, nas protenas tais unidades so os aminocidos. Depois
de entendermos o cdigo gentico, podemos passar para o mecanismo de
traduo propriamente dito. Nessa etapa veremos como as protenas so
formadas a partir das informaes provenientes das molculas de RNA
mensageiro, bem como se d a participao de outros tipos de RNA nesse
processo que ocorre nos ribossomos envolvendo diversas macromolculas.
114
Aula
Figura 1
ESTRUTURA PROTEICA
As sequncias de aminocidos ligadas covalentemente so denominadas
polipeptdeos. Essas estruturas so formadas por at 20 tipos diferentes de
aminocidos, que so mostrados na figura 2.
115
Gentica Bsica
Figura 2.
Como voc pode perceber nas figuras anteriores, os aminocidos diferem entre si apenas quanto aos grupos laterais (R). Essa nica diferena
bastante significativa, uma vez que as bioqumicas so completamente
alteradas a depender do tipo de grupamento R est presente em cada aminocido. Essas cadeias laterais podem ser classificadas em quatro tipos:
1- hidrofbicos ou apolares; 2- hidroflicos ou polares; 3- cidos ou negativos; e 4- bsicos ou de carga positiva. Essa diversidade estrutural explica
a enorme diversidade funcional das protenas.
Em termos estruturais, quando dois ou mais aminocidos so ligados
eles formam uma estrutura denominada peptdeo. Essa ligao covalente,
denominada de ligao peptdica, ocorre por meio de uma reao de desidratao. A figura 3 ilustra a formao de uma ligao peptdica para a formao de um dipeptdeo. Estruturas envolvendo menos de 10 aminocidos
so denominadas oligopeptdeos e estruturas maiores que podem chegar a
milhares de aminocidos, com o fio da seda, so denominados polipeptdeos.
116
Aula
Ento, como observado na figura 3, as protenas so polmeros formados pela reao de condensao entre aminocidos: o grupo amino de um
dos aminocidos se liga ao carboxila do outro, havendo eliminao de uma
molcula de gua e a formao de uma ligao peptdica (grupo amida).
Considerando os 20 aminocidos, numa protena formada por um peptdeo com 50 unidades, teramos 2050 combinaes possveis. Observem
que mesmo em oligopeptdeos podemos ter bilhes de combinaes diferentes. Isso equivale mais ou menos a dizer: quantas palavras diferentes
voc pode inventar utilizando o alfabeto inteiro?
A sequncia de aminocidos representa apenas a chamada estrutura
primria das protenas. Um protena pode ter ainda outros nveis estruturais:
a estrutura secundria, diz respeito s relaes espaciais entre os aminocidos; a estrutura terciria refere-se a forma de dobramento tridimensional
das protenas, enquanto a estrutura quaternria est relacionada a juno
de dois ou mais polipeptdeos para formar uma estrutura complexa multimrica. A figura 4 ilustra os nveis estruturais das protenas.
117
Gentica Bsica
A estrutura primria de um polipeptdeo determinada geneticamente durante o processo de traduo que veremos a diante nessa aula. A
maioria das molculas de polipeptdeos se dobrar espontaneamente em
funo das caractersticas bioqumicas estabelecidas em suas estruturas
primrias, de tal modo que o pH, a temperatura, sais e outros compostos
tambm podem mudar a estrutura proteica levando a desnaturao da
protena. No o nosso objetivos aqui nos aprofundar nessas questes
estruturais das protenas, mas caso voc queira se aprofundar no tema,
voc pode utilizar o seguinte endereo da revista eletrnica do departamento de qumica da UFSC na internet:http://www.qmc.ufsc.br/
qmcweb/artigos/proteinas.html.
O CDIGO GENTICO
A simples lgica nos diz que, se os pares de nucleotdeos so letras
de um cdigo, ento a combinao das letras poderia formar palavras que
representariam os diferentes aminocidos. Desde o final da dcada de 1950
vrios pesquisadores reconheceram que, apesar de estar claro que o material
118
Aula
119
Gentica Bsica
120
Aula
O CDIGO COMPLETO
A figura a seguir mostra a relao dos 64 codons aos seus respectivos
aminocidos ou sinais de trmino.
121
Gentica Bsica
122
Aula
o RNA Transportador ou seria o prprio aminocido que reconheceria o mRNA que codifica um aminocido? Um experimento muito convincente respondeu a esta pergunta. No experimento, um aminoacil- tRNA
(AA-tRNA), o cisteinil- tRNA (tRNAcis, o tRNA especfico para cistena)
carregado com cistena foi tratado com hidreto de nquel, que converteu a
cistena (enquanto ainda ligada ao tRNACis) em outro aminocido, a alanina,
sem afetar o tRNA: Cistena-tRNACis-hidreto de nquel alanina-tRNACis.
A protena sintetizada com esta espcie hbrida sempre tinha alanina
onde espervamos cistena. Assim, o experimento demonstrou que os aminocidos no reconhecem o cdon. Eles so inseridos na posio adequada
porque os tRNA funcionam como adaptadores que conhecem os cdons
de mRNA e inserem seus aminocidos apropriadamente. Esperaramos
portanto, encontrar algum stio no tRNA que reconhecesse o cdigo do
mRNA por pareamento complementar de bases. Esse stio denominado
anticdon. A ligao do anticdon do tRNA ao cdon do mRNA segue as
regras da ligao complementar e antiparalela, ou seja, o cdon do mRNA
lido de 5' para 3' por um anticdon pareado em orientao invertida (3'-5'
). O mRNA, portanto, especifica a sequncia de aminocidos agindo por
intermediao do tRNA.
123
Gentica Bsica
Figura 7 Ligao do tRNA ao aminocido numa reao catalisada pela enzima Aminoacil tRNA
sintetase.
124
RIBOSSOMOS
Aula
Figura 8 Ligao do tRNA ao aminocido numa reao catalisada pela enzima Aminoacil tRNA sintetase.
125
Gentica Bsica
TRADUO
Diversos componentes so requeridos para a sntese de protenas mediada pelos ribossomos. Estes incluem todos os aminocidos, o mRNA a
ser traduzido, os tRNA, ribossomos, molculas fornecedoras de energia e
fatores proteicos necessrios iniciao, alongamento e trmino da cadeia
polipeptdica. A traduo o processo pelo qual o mRNA fornece um
molde para a sntese de um polipeptdeo.
Podemos separar didaticamente o processo de traduo de protenas
em trs etapas distintas. Iniciao, alongamento e trmino. Examinemos
cada uma destas etapas em detalhes, usando os procariontes como exemplo.
INICIAO
Alm do mRNA, dos ribossomos e das molculas especficas de tRNA,
o processo requer a participao de vrios fatores, chamados de fatores de
iniciao IF1, IF2 e IF3. em E. coli e na maior parte dos outros organismos
procariontes, o primeiro aminocido em qualquer novo polipeptdio sintetizado a N-formilmetionina. Ele inserido por um tRNA iniciador chamado de
tRNAfMet. Este tRNA iniciador tem o anticdon normal de metionina, mas
insere N-formilmetionina ao invs de metionina (Em eucariontes o aminocido iniciador a metionina). Em E. coli, AUG e GUG, e em raras ocasies
UUG, servem como cdons iniciadores. Quando uma destas trincas esta
presente na posio iniciadora, ela reconhecida pelo N-formilMet-tRNA,
e a metionina aparece como o primeiro aminocido da cadeia.
126
Aula
ALONGAMENTO
As etapas do alongamento so auxiliadas por trs fatores proticos:
EF-TU, EF-TS e EF-G, as etapas so as seguintes:
1.O fator do alongamento EF-TU serve de mediador da entrada do aminoacil-tRNA no stio A. Para isto, o EF-TU-GTP ativado se liga ao tRNA.
Em seguida, a hidrlise de GTP do complexo para GDP ajuda a ativar a
ligao do aminoacil-tRNA ao stio A, quando EF-TU liberado, deixando
o novo tRNA no stio A.
127
Gentica Bsica
TRMINO
Na discusso inicial do cdigo gentico, descrevemos os trs cdons de
trmino da cadeia UAG, AUU ou UGA. Curiosamente estas trs trincas no
so reconhecidas por um tRNA, mais por fatores proteicos, chamados de
fatores de liberao, que so abreviados por RF1 e RF2. O RF1 reconhece as
trincas UAA e UAG, e o RF2 reconhece UAA e o UGA. Um terceiro fator
RF3, tambm ajuda a catalisar o trmino da cadeia. Quando o peptidil-tRNA
esta no stio P, os fatores de liberao, em resposta aos cdons de trmino
de cadeia, ligam-se ao stio A. O polipeptdio ento liberado do stio P, e
os ribossomos se dissociam em duas subunidades, em uma reao ativada
pela hidrlise de uma molcula de GTP. As etapas da traduo podem ser
observadas na figura a seguir. No entanto, paara voc entender o processo
de traduo com maior facilidade, sugerimos que voc procure algumas
animaes que podem ser encontradas facilmente na internet. Uma dessas
animaes pode observada seguindo a url: http://www.brookscole.com/
chemistry_d/templates/student_resources/shared_resources/animations/
Quando entrar na pgina, escolha a guia Protein Synthesis Animation and
Exercise.
128
Aula
129
Gentica Bsica
CONCLUSO
O cdigo gentico explica como quatro nucleotdeos controlam a
informao para determinar a sequncia de aminocidos no processo de
formao das protenas. Existe uma colinearidade entre genes e protenas e
a traduo a efetivao dessa relao, quando a informao gentica levada
pelo RNA mensageiro decodificada na forma de um polipeptdeo, ou seja,
a ligao entre gentipo e fentipo uma protena: a maioria dos genes afeta
o fentipo codificando protenas. A corrida cientfica iniciada na dcada de
1950 levou a total decifrao do cdigo gentico, ao conhecimento de suas
propriedades e ao reconhecimento dos fatores envolvidos no processo de
traduo. Nessa aula foi possvel observar o papel desempenhado pelos
ribossomos, pelo mRNA, tRNA e rRNA, suas caractersticas e como essas unidades esto envolvidas com a produo de protenas. Porm, uma
importante propriedade do cdigo gentico, sua universalidade, deve ser
lembrada. Essa propriedade gera um importante registro do elo que liga
todos os seres vivos e nos remete a uma origem ancestral comum, uma
vez que no por acaso que compartilhamos um mesmo sistema, sendo o
cdigo gentico algo to especfico, deixando claro que pertencemos todos,
das bactrias s plantas e animais, mesma rvore da vida.
RESUMO
O cdigo gentico e a traduo mostram como a informao gentica
armazenada no RNA mensageiro que foi transcrito pelo DNA, pode determinar a sequncia de aminocidos de uma protena e participar na formao
do fentipo de um organismo. Cerca de 15% do peso do contedo celular
formado por protenas, que por sua vez, desempenham funes vitais
para os seres vivos. A unidade formadora das protenas o aminocido,
sua estrutura qumica formada por um carbono assimtrico, um grupo
carboxila, um grupo amino, um hidreto e um grupo lateral R, que varia de
aminocido para aminocido, conferindo a eles diferentes propriedades
bioqumicas. As sequncias de aminocidos ligadas covalentemente so
denominadas polipeptdeos. Essas estruturas so formadas por at 20
tipos diferentes de aminocidos e possuem uma enorme diversidade nos
seres vivos. O cdigo gentico o modo pelo qual a informao gentica
armazenada na sequncia de nucleotdeos de um gene. As caractersticas
do cdigo gentico podem ser resumidas em algumas propriedades: o cdigo gentico formado por trincas de nucleotdeos no mRNA , ou seja, 3
nucleotdeos decodificam um aminocido especfico; redundante porque
mais de um cdon pode especificar o mesmo aminocido e a relao entre
o cdon e o aminocido se d pelo tRNA que carrega um aminocido especfico adequado ao seu anticdon; o cdigo gentico quase universal,
130
ou seja, serve para todos os seres vivos, com exceo de alguns cdons;
no sobreposto, ou seja, possui apenas uma matriz de leitura que estabelecida pelo cdon de iniciao, que geralmente recebe a n-formil metionina
em bactrias (ou a metionina em eucariontes). O processo de traduo
compreende as fases de incio, alongamento e trmino e cada mRNA pode
ser simultaneamente traduzido por vrios ribossomos e muitas protenas
ainda no esto prontas ao final da traduo, existindo a possibilidade de
que sejam modificadas por mecanismos ps-traducionais.
Aula
ATIVIDADES
1. Baseando-se na lista de cdons e aminocidos abaixo, quais das seguintes
afirmaes so corretas?
AGU = serina AGC = serina
AAU = asparagina AAC = asparagina
AUG = metionina AUA = isoleucina
a) o cdigo gentico degenerado
b) a alterao de um nico nucleotdeo no DNA que dirige a sntese destes
cdons poderia levar substituio de uma serina por uma asparagina no
polipeptdeo.
c) a alterao de um nico nucleotdeo no DNA que dirige a sntese destes
cdons necessariamente levaria substituio de um aminocido no polipeptdeo codificado.
d) um tRNA com o anticdon ACU se ligaria a um ribossomo na presena
de um destes cdons.
2. Responda:
a) Em procariotos, a maioria da cadeias polipeptdicas so iniciadas com o
aminocido ______, cujo cdon ______.
b) Num sistema de sntese de protenas in vitro, que permita o incio e
trmino da sntese em qualquer sequncia de RNA, que peptdeo seria
produzido pelo poli-ribonucleotdeo 5'-UUUGUUUUUGUU-3' ? Indique
qual o aminocido N-terminal e o C-terminal do polipeptdeo obtido.
c) O cdon AUG funciona tanto para iniciar uma cadeia polipeptdica
quanto para dirigir a incorporao de uma metionina em posies internas
de uma protena. Quais os mecanismos de seleo do cdon AUG para a
iniciao da traduo em procariotos?
3. O antibitico Cloranfenicol se liga ao ribossomo 50S e inibe a atividade
da peptidil-transferase, enquanto o cido fusdico se liga ao fator de elongao G (EF-G) e inibe a liberao de EF-G do complexo EF-G/GDP;
as Quinolonas se ligam subunidade A da DNA girase (topoisomerase) e
impede o superenrolamento do DNA, impedindo assim a sntese de DNA.
Que efeito (s) voc esperaria em um tratamento anti-bacteriano, usando
cada um destes antibiticos?
131
Gentica Bsica
AUTOAVALIAO
Aps estudar esta aula, consigo:
Explicar
1.Como algumas aminoacil-tRNA sintetases podem atingir elevado grau de
preciso nas reaes, mesmo sem ter um mecanismo hidroltico de reviso ?
2. Explicar porque as molculas de tRNA devem ter, ao mesmo tempo,
caractersticas estruturais comuns aos outros RNAs e particulares?
PRXIMA AULA
Na prxima aula compreenderemos os mecanismos geradores de mutaes no material gentico e suas conseqncias
REFERNCIAS
GRIFFITHS AJF, MILLER JH, SUZUKI DT, LEWONTIN RC, GELBART WM. 2009. Introduo Gentica. 8 ed. Rio de Janeiro: Guanabara
Koogan, 794p.
PIERCE BA. 2004. Gentica: um enfoque conceitual. Rio de Janeiro:
Guanabara Koogan, 758p.
SNUSTAD DP, SIMMONS MJ. 2008. Fundamentos de Gentica. 4 ed.
Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 903p.
132
Aula
MUTAO E REPARO DO DNA
META
Discutir os principais mecanismos geradores de mutao e suas conseqncias, assim como o papel
dos mecanismos de reparo do DNA na manuteno da estabilidade e sobrevivncia dos organismos.
OBJETIVOS
Ao final desta aula, o aluno dever:
compreender a importncia da preciso dos processos biolgicos para a sobrevivncia dos
organismos;
compreender a funo e importncia das mutaes gnicas na gerao da variabilidade,
entender a origem e efeito das mutaes sobre o funcionamento celular;
dompreender o funcionamento dos diversos sistemas de reparo do DNA para a manuteno da
estabilidade do material gentico.
PR-REQUISITOS
Para alcanar os objetivos propostos o aluno dever recorrer aos seus conhecimentos de sobre
estrutura e funcionamento do DNA, comsultando as aulas anteriores e a bibliografia indicada.
Gentica Bsica
INTRODUO
A continuidade, preciso e fidelidade dos processos biolgicos so essenciais para a manuteno da vida. No entanto, o material biolgico est inserido
no meio ambiente onde os indivduos sobrevivem e precisam responder a ele.
As respostas geradas pelos organismos ao meio podem causar danos
ao material gentico e ao funcionamento dos processos biolgicos. No entanto, os erros no material gentico gerados sejam de maneira espontnea
ou induzida, tornam-se o motor da evoluo, uma vez que fornecem novas
combinaes ao genoma das espcies.
Mutaes so alteraes herdveis na seqncia no material gentico, que
fornecem grande variabilidade ao conjunto gnico de uma populao.
O termo mutao tem 2 significados, pois tanto o processo quanto o
efeito. Como processo descreve os mecanismos geradores de alteraes no
material gentico, como o efeito dessas alteraes no organismo afetado.
IMPORTNCIA
Durante o ciclo de vida tanto de clulas quanto de organismos, a diversidade gentica e seus fentipos so geradas por 2 mecanismos: a recombinao
gnica e a mutao. Os dois processos so essenciais para a sua sobrevivncia,
mas, cada um deles representa um papel na gerao da diversidade.
A recombinao um processo mais ou menos constante durante a
formao dos gametas (Meiose) e tem o papel de rearranjar o conjunto
gnico de um organismo, gerando novas combinaes a partir de um material pr-existente, fornecido pelos conjuntos gnicos dos genitores.
Com a mutao, o repertrio de genes pode ser alterado, gerando
novas verses do material pr-existente. Do ponto de vista evolutivo, novas
verses gnicas geram novos fentipos (ou opes), e , consequentemente,
no numero de respostas que um organismo possa dar ao seu meio. Por isso
as mutaes so o motor da evoluo!
importante lembrar que as mutaes so raras e o so por um bom
motivo: os processos biolgicos, especialmente o funcionamento do material gentico, deve ser preciso. Seus efeitos vo depender do perodo de
desenvolvimento, do tipo de clula e de sua dominncia.
As mutaes podem ocorrer em qualquer clula, somtica ou germinativa; a diferena, no entanto, est no efeito a longo prazo. As mutaes
somticas ocorrem em clulas somticas e o efeito vai depender do perodo
de desenvolvimento: quanto mais cedo, mais divises essas clulas sofrero,
levando o defeito para um numero maior de clulas. Se o defeito ocorre em
uma clula germinativa, seus efeitos refletem diretamente na prole.
134
Aula
Figura 2- Deleo
135
Gentica Bsica
Figura 3- Insero
136
Aula
Figura 5 - Tautomerizao
137
Gentica Bsica
2. Desaminao das bases, so alteraes nas bases do DNA por substituir um grupamento amina (- NH2) por uma hidroxila (-OH). Da mesma
forma que na tautomerizao, as bases desaminadas comportam-se como
bases no usuais e fazem pareamentos errneos (ex: H C), como mostra
a figura 8 ao lado:
138
Aula
Figura 9 - depurinao
139
Gentica Bsica
MUTAES INDUZIDAS
O efeito do meio ambiente sobre os organismos pode ser avaliado
por aumentos nas taxas de mutaes em organismos expostos a agentes
mutagnicos ambientais, tanto fsicos (Raios X e radiao UV) quanto
qumicos (drogas, poluentes ambientais, xenobiticos etc).
Sua ao se d geralmente por mimetizar a estrutura de bases nitrogenadas, gerando delees ou inseres, por alterao na estrutura tridimensional do DNA ou por transposio de elementos moveis (Transposons)
para diferentes locais no DNA.
Figura 11
140
Aula
Figura 12
Figura 13
141
Gentica Bsica
Figura 14
Figura 15
142
Aula
Figura 16
143
Gentica Bsica
AO DE ELEMENTOS GENTICOS DE
TRANSPOSIO (TRANSPOSONS)
Transposons so seqncias de DNA que tem a propriedade de moverse de um local para outro dentro do genoma, e so por isso denominados
Elementos geneticos moveis. Sua insero na estrutura de um gene pode
causar deleo ou perda de bases. Se o transposons se retira do interior de
um gene, este pode recuperar sua funo. Do mesmo modo, se ele insere
em um gene, nucleotdeos so adicionados a ele tendo como conseqncia
a perda de funo. Devido a esse modo de ao, os transposons so considerados agentes mutagnicos.
J foram descritos em bactrias, plantas e em mamferos. Sua origem,
no entanto, ainda objeto de discusso.
144
Aula
Figura 19.
145
Gentica Bsica
Aula
8
Figura 21.
147
Gentica Bsica
REPARO PS-REPLICAO
Aqui o reparo de pareamentos incorretos se d depois da replicao e requer
a existncia de um sistema que seja capaz de reconhecer as bases mal pareadas,
determinar quais das bases a incorreta e, por fim, eliminar a base incorreta e
sintetizar o novo segmento sem erro. As enzimas responsveis por esse tipo
de reparo so produtos dos genes mutH, mutL, mutS e mutU. Pra distinguir
a hlice com erro da integra o sistema reconhece a Adenina (A) da seqncia
GATC da fita integra pela presena de metilao (Metilase de Adenina).
Figura 23.
148
Aula
CONCLUSO
As respostas geradas pelos organismos ao meio podem causar danos
ao material gentico e ao funcionamento dos processos biolgicos. No entanto, os erros no material gentico gerados sejam de maneira espontnea
ou induzida, tornam-se o motor da evoluo, uma vez que fornecem novas
combinaes ao genoma das espcies.
RESUMO
Mutaes so alteraes herdveis na seqncia no material gentico,
que fornecem grande variabilidade ao conjunto gnico de uma populao.
O termo mutao tem 2 significados, pois tanto o processo quanto o
efeito. Como processo descreve os mecanismos geradores de alteraes no
material gentico, como efeito mostra as alteraes no organismo afetado.
A sobrevivncia dos organismos depende da estabilidade do seu material gentico. Estando os organismos mergulhados em seu meio ambiente, as
respostas a ele dependero de mecanismos que os proteja de danos irreversveis. Nesse contexto, os mecanismos de reparo tm a funo de reparar
danos espontneos ou induzidos, sofridos pelo DNA para que a informao
gentica seja passada para as prximas geraes de clulas e de organismos.
ATIVIDADES
1. Use a tabela do cdigo gentico para encontrar a seqncia do pequeno
polipeptdio codificado nesta mensagem:
5'- AUGUUCAAGAUGGUGACUUGGUAAAUC-3'
a) Qual a seqencia aminocidos resultante se o 1G nesta mensagem
mudar para A?
b) Qual seria a seqncia aminocidos se o 1 C fosse mudado para U ?
c) E se o 1 C fosse mudado para G?
d) E se o ltimo G fosse mudado para A ?
2. Assinale a alternativa correta, levando em conta os cidos nuclicos, a ocorrncia de mutaes e as conseqentes mudanas do ciclo de vida da clula.
a) O DNA constitudo por cdons, que determinam a seqncia de bases
149
Gentica Bsica
AUTOAVALIAO
Aps estudar esta aula, consigo:
Definir
1. O que mutao?
2. Diferenciar a transio e a transverso de bases nitrogenadas.
3. Distinguir as atividades mutagnicas dos seguintes agentes: 5-bromouracila brometo de etdio, calor, e radiao ultravioleta.
4. Descrever as diferenas e as semelhanas entre o reparo por exciso de
bases e o mecanismo de fotoreativao.
5. Explicar por que a mutao um importante mecanismo evolutivo.
PRXIMA AULA
Na prxima aula, o aluno compreender os mecanismos que controlam
a expresso gnica em eucariotos e procariotos.
REFERNCIAS
ALBERTS B, JOHNSON A, LEWIS J, et al - Molecular Biology of the
Cell. 4th edition. New York: Garland Science; 2002.
GRIFFITS, A. J. F. e Col Introduo gentica Editora Guanabara
Koogan, 9a edio, Rio de Janeiro, RJ, 2008.
SNUSTAD, D. P. Fundamentos de Gentica - Editora Guanabara Koogan,
6a edio, Rio de Janeiro, RJ, 2008.
Mutaes Gnicas- Eduardo Dias. http://genetica.ufcspa.edu.br/biomedic/
conteudo/genetica_molecular/mutacgen.PDF. Texto acessado em 23/01/2010
150
Aula
REGULAO DA EXPRESSO
GNICA
META
Apresentar dos principais mecanismos reguladores da expresso gnica em Eucariotos e Procariotos.
OBJETIVOS
Ao final desta aula, o aluno dever:
conhecer os mecanismos gerais de regulao utilizados por Procariotos e Eucariotos;
relacionar as diferenas entre os mecanismos utilizados pelas duas categorias de organismos;
entender a importncia dos mecanismos apresentados para a sobrevivncia dos organismos.
PR-REQUISITOS
Para alcanar os objetivos propostos o aluno dever rever as aulas de estrutura e funcionamento
do DNA (Transcrio e traduo), como tambm utilizar a bibliografia indicada para aprofundar seus
conhecimentos.
Gentica Bsica
INTRODUO
Cada clula que compe nossos rgos e tecidos contm o mesmo
complemento de DNA conhecido como genoma pessoal. Para nossas
clulas tornarem-se clula da pele ao invs de clula capilar, certos genes
tem que ser ligados ou desligados. Este processo de comutao da expresso
gnica denominado regulao gnica. Alguns genes, como os das protenas
ribossomiais, devem ser continuamente expressos em todas as clulas para
manter a produo de protenas. Outros genes, no entanto, esto ativos
somente em clulas ou tecidos especficos. P. ex. o gene da opcina, o qual
codifica a protena que ajuda a recepo de cor no olho, s est expresso
nas clulas da retina do olho.
Todos esses processos so precisamente regulados separadamente e
em conjunto para que os organismos se desenvolvam obedecendo suas
necessidades dirias e temporais.
O controle da expresso gnica em organismos cujo material gentico
o DNA um processo coordenado e muito preciso. O metabolismo
celular, as respostas dos indivduos ao ambiente, a expresso dos genes
responsveis por cada perodo do desenvolvimento, todos dependem de
uma regulao conjunta e orquestrada.
Cada organismo vivo tem a capacidade de ligar e desligar seus genes
em momentos diferentes do seu ciclo de vida e sob certas condies. Isto
ocorre continuamente em nossos corpos sem a nossa interferncia e,
mesmo, conscincia. Este processo de regulao gnica similar em todos
os organismos, aumentando em complexidade medida que subimos na
cadeia evolutiva. Na maioria dos organismos esta regulao ocorre no nvel
da transcrio do DNA, durante a sntese do RNAm.
Para compreender a regulao precisamos primeiro entender a estrutura
dos genes em Procariotos e Eucariotos.
ESTRUTURA DO GENE
A estrutura geral dos genes de Procariotos e Eucariotos muito semelhante, uma vez que nos dois casos h seqncias reguladoras que antecedem
a regio codificante e seqncias terminadoras que delimitam o final do
gene. Assim um gene, seja qual for sua origem, tem inicio e fim (figura1).
152
Aula
Figura1.
Nos Procariotos, a estrutura mais simples e contm uma regio codificante inteira, sem interrupo. Evolutivamente, essa estrutura mostrou-se
a mais eficiente para um grupo de organismos que no tem diviso entre
ncleo e citoplasma, e seu DNA est mergulhado em seu citoplasma, em
um local denominado Nucleide (figura 2).
Figura 2.
153
Gentica Bsica
Figura 3.
Figura 4.
Alm disso, um mesmo DNA est presente em diversos tipos celulares, tornando a expresso dos genes tecido-especifico. No se espera, em
indivduos normais, que uma protena essencial ao sistema nervoso seja
produzida no fgado! Figura 5
154
Aula
Figura 5.
Figura 6.
155
Gentica Bsica
Aula
Figura 7.
157
Gentica Bsica
O MODELO DO OPERON
Em 1961, dois cientistas, Franois Jacob e Jacques Monod propuseram
um modelo, para explicar a utilizao de lactose por E. coli: o Modelo do
Operon. Nesse modelo, um conjunto de genes reguladores e estruturais,
agindo coordenados, controla a produo de enzimas responsveis pela
degradao da Lactose.
Os genes que constituem o Operon so:
IPOZYA
I (produz uma protena repressora) na ausncia de Lactose, o operon
est desligado por tal protena. A protena repressora produzida pelo gene
I se liga ao operador, impedindo a ligao da RNA polimerase.
Obs: Lembre que, em qualquer gene, a expresso gnica comea quando
a RNA polimerase se liga ao promotor do gene e sintetiza um RNA que
contem a regio a regio codificante do gene (ver Aula de transcrio)
P (Promotor) o promotor a seqncia que reconhecida pela RNA
polimerase, onde se inicia a transcrio. Ela antecede a regio codificante
dos genes.
O (Operador) Seqncia que faz parte da regio promotora e responsvel pela ligao da protena repressora, impedindo a transcrio. Quando
o operador est desreprimido, a RNA polimerase passa por ele em direo
ao genes estruturais (ZYA).
Z - produz enzima B-galactosidase, que quebra a lactose em glicose e
galactose.
Y - produz a enzima -galactosideo Permease, transporta via membrana,
a lactose do meio externo para dentro da clula bacteriana.
A - produz a enzima -galactosideo transacetilase participa do controle
positivo do operon.
158
Aula
Figura 8.
Em procariotos, o promotor possui duas regies conservadas evolutivamente (que esto presentes em diferentes espcies e chamadas seqncias
de consenso), que precedem a regio codificante: a seqncia a cerca de 10
nucleotdeos da regio codificante (-10) chamada TATA Box e a seqncia
-35 (TTGACA). Essas seqncias podem variar de gene para gene, mas
alguns nucleotdeos se repetem em diferentes genes.
A subunidade sigma da RNA polimerase reconhece primeiro a regio
-35 e depois desliza em direo a -10.
A seqncia -10 rica em A-T e facilita o desenrolamento localizado
do DNA, necessrio para a sntese de uma nova cadeia de RNA.
No modelo operon, o indutor da transcrio de seus genes a Alolactose derivada da lactose em uma relao catalizada pela B-galactosidase,
o qual se associa ao repressor e inibe-o, deixando o promotor livre para a
interao com a RNA polimerase e conseqente transcrio do gene (Jacob
e Monod, 1961).
Veja vdeos sobre o funcionamento do Operon Lac no link indicado
nas referencias bibliograficas
159
Gentica Bsica
Figura 9.
Aula
Figura 10.
161
Gentica Bsica
162
Aula
9
Figura 11.
PROMOTOR
Como j visto em bactrias, contm seqncias de consenso (-35 e -10)
que sinalizam o inicio da transcrio para a RNA pol. Aqui, no entanto, a
seqncia -35 assume diferentes arranjos, pois mais tecido especifica, ou
seja, cada gene em cada tecido pode ter uma seqncia um pouco diferente
para identificar onde ele est (corao, pele, etc).
ENHANCER (AMPLIFICADOR)
Seqncia que est acima (upstream) do promotor, a milhares de nucleotdeos distante dele e que tem a funo de ser a regio onde os fatores de
transcrio se ligam para ampliar a produo de RNA. Por isso, os fatores
de transcrio que se ligam a ele so chamados ativadores de transcrio.
163
Gentica Bsica
SILENCIADOR
Outra seqncia de nucleotdeos que age a distancia do promotor e,
ligando-se a fatores de transcrio, silenciando genes. Os fatores de transcrio que se ligam ao silenciador so chamados repressores.
164
Aula
Figura 14
CONCLUSO
Os mecanismos apresentados nesse capitulo demonstram as diferentes
estratgias utilizadas por organismos pro e eucariotos para expressar ou
reprimir genes ou conjuntos de genes em resposta ao seu ciclo de vida e
as exigncias do ambiente.
Embora os mecanismos em cada categoria de organismo sigam os
mesmos princpios, o nvel de complexidade de cada um deles obedece as
relaes de cada organismo com seu meio, como vimos no uso da lactose
por bactrias e o papel dos hormnios em eucariotos.
RESUMO
Os mecanismos citados neste capitulo so representativos de uma gama
de outros existentes em Procariotos e Eucariotos. A compreenso desses
mecanismos tem ajudado a entender a complexidade de estratgias utilizadas
pelos organismos para responder as diferentes demandas do seu ambiente.
165
Gentica Bsica
ATIVIDADES
1. A clula muscular cardaca e a esqueltica tm a mesma origem porm
so diferentes, tanto do ponto de vista estrutural como funcional. Ao longo
do processo de diferenciao das clulas do mesmo organismo ocorre
a) duplicao de alguns genes.
b) perda dos genes no expressos.
c) expresso diferencial dos genes.
d) induo de mutaes especficas.
e) recombinao entre genes ativados.
2. No operon LAC de E. coli, qual a funo de cada um dos seguintes
genes ou stios:
a) regulador b) operador c) promotor d) gene estrutural Z e )
gene estrutural Y?
AUTOAVALIAO
Aps estudar esta aula, consigo:
1. Explicar qual (is) as diferena(s) entre a regulao gnica de procariotos
e eucariotos?
2. Em relao ao Operon LAC, responda:
a) Qual a diferena repressores e indutores;
b) Como se diferencia controle positivo e controle negativo na regulao
gnica?;
3. Foi demonstrado experimentalmente que a maioria das sequncias altamente repetitivas de DNA de cromossomos eucariotos no so transcritas.
O que isto indica a respeito da funo deste tipo de DNA?
REFERNCIAS
ALBERTS B, JOHNSON A, LEWIS J, et al - Molecular Biology of the
Cell. 4th edition. New York: Garland Science; 2002.
GRIFFITS, A. J. F. e Col Introduo gentica Editora Guanabara
Koogan, 9a edio, Rio de Janeiro, RJ, 2008.
SNUSTAD, D. P. Fundamentos de Gentica - Editora Guanabara
Koogan, 6a edio, Rio de Janeiro, RJ, 2008.
166
Aula
PRINCPIOS DE GENTICA DE
POPULAES
10
META
Mostrar ao aluno que a dinmica dos genes nas populaes pode ser compreendida por meio do
estudo das suas frequncias gnicas e genotpicas. Pretende-se fornecer os requisitos bsicos
para que o aluno possa entender os mecanismos relacionados a variao gentica das populaes
biolgicas ao longo do espao e do tempo. Discutiremos os mecanismos bsicos sobre os quais agem
os fatores evolutivos.
OBJETIVOS
Ao final desta aula, o aluno dever:
saber identificar os principais mecanismos que afetam as frequncias gnicas das populaes
no espao e no tempo. Dever saber calcular as frequncias gnicas e genotpicas e entender a
dinmica dessas frequncias e suas implicaes numa populao biolgica.
PR-REQUISITOS
Noes de gentica mendeliana, Binmio de Newton e noes de lgebra.
Gentica Bsica
INTRODUO
Prezado aluno, at agora os assuntos tratados em gentica diziam
respeito s caractersticas individuais e familiares e as anlises utilizavam
heredogramas e cruzamentos entre indivduos. Nesse momento temos
um novo desafio, como estudar uma populao? Seria possvel entender
a dinmica dos genes e dos gentipos em escala populacional? A resposta
positiva, mas muitos estudantes de biologia tm imensa dificuldade em
entender os princpios bsicos de gentica de populaes, principalmente
em funo dos clculos envolvidos e por ser uma rea da gentica pouco
trabalhada no ensino mdio. No entanto, possvel contornar essa dificuldade inicial por meio de ilustraes e simulaes disponveis na internet.
Nesse ponto o ensino a distncia facilitado pelo desenvolvimento da
informtica e da disponibilidade de softwares e sites especializados nessa
rea que sero comentados ao longo desse captulo.
Uma populao natural formada por um conjunto de indivduos de
uma espcie contendo diversas famlias com muitos gentipos diferentes.
Desse modo, a estrutura da populao definida pela frequncia dos
alelos que compem os diferentes gentipos das diferentes famlias. Uma
populao natural formada por todos os indivduos que, ao se reproduzir
uns com os outros, compartilham de um pool gnico, que formado pelo
conjunto total de informaes genticas compartilhadas pelos membros
reprodutivos da populao.
Iniciaremos a aula descrevendo a variao gentica populacional, o que
determina essa variao gentica e quais suas implicaes. Depois iremos
entender como seria a dinmica dos genes e dos gentipos numa populao
ideal Populao em equilbrio de Hardy& Weinberg Tal qual o zero na
matemtica, ou um ponto de referncia na fsica, essa populao ideal fornece um parmetro bsico para que possamos entender o perfil gentico das
populaes e verificar como cada fator evolutivo pode interferir na variao
populacional ao longo do tempo.A gentica de populaes estuda a origem
da variao, a transmisso dos genes ao longo das geraes e a dinmica da
mudana na composio gentica das populaes ao longo do tempo por ao
das foras evolutivas sistemticas (determinsticas) e aleatrias (estocsticas).
DEFINIO DE POPULAO
A populao formada por um grupo de indivduos pertencentes a
uma mesma espcie biolgica. Em gentica de populaes, entretanto,
preciso especificar melhor este conceito. A palavra populao no se refere
a espcie como um todo, mas apenas a um grupo de organismos de uma
mesma espcie que vive em uma determinada rea geogrfica suficientemente restrita para que qualquer membro possa se casalar com qualquer
outro do sexo oposto.
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Dizer 0,5 ou ou 50% exatamente a mesma coisa, sendo
apenas a escala diferente. 0,5 representa a metade do conjunto inteiro igual a 1, enquanto o mesmo que a metade
de um conjunto inteiro de 2, ou seja, uma parte num total
de duas partes. Do mesmo modo, utilizando uma escala de
100 partes (percentagem), 50% representa a metade de 100.
, portanto, apenas uma questo de escala.
Quando estamos falando de uma populao de 100 indivduos e verificamos que a metade deles heterozigota para o locus A, ou seja, que
50 indivduos sejam Aa, podemos dizer que a frequncia genotpica dos
heterozigotos :
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Considerando as frequncias genotpicas exemplificadas acima
(AA=0,25; Aa=0,5; aa=0,25), podemos dizer que a frequncia allica de A
nessa populao igual ao total dos homozigotos somado metade dos
heterozigotos, logo:
Utilizando o nmero de indivduos, temos:
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O PRINCPIO DE HARDY-WEINBERG
H mais de 100 anos atrs, em 1908, G. H. Hardy, um matemtico
ingls e W. Weinberg, um mdico alemo, desenvolveram independentemente um conceito matemtico relativamente simples, hoje denominado
princpio de Hardy-Weinberg, considerado o fundamento bsico da gentica de populaes. Esse princpio diz que numa populao panmtica (de
reproduo ao acaso), infinita e na ausncia de fatores evolutivos, como
o fluxo gnico, mutao, seleo e deriva gentica, as frequncias allicas
e genotpicas permanecem constantes ao longo do tempo. O princpio de
Hardy-Weinberg pode ser utilizado para determinar a frequncia de cada
alelo de um par ou de uma srie, bem como frequncias genotpicas de
homozigotos e heterozigotos na populao.
Vamos considerar novamente o nosso conhecido locus A, com os
gentipos AA, Aa e aa, que sero aqui tratados como, respectivamente D, H
e R, uma aluso para gentipo dominante, heterozigoto e recessivo, mesmo
considerando que nem todos os loci apresentam essa forma de dominncia.
Do mesmo modo, as frequncias allicas de A e a sero tratadas como p e
q. Essas letras (D, H e R para gentipos e p e q para alelos) so utilizadas
pelos livros convencionalmente para que seja possvel desenvolver frmulas
gerais que possam ser utilizadas para qualquer locus com dois alelos.
Hardy& Weinberg perceberam que a distribuio dos alelos numa
populao, considerando um locus uma populao mendeliana, pode ser
ajustada perfeitamente ao binmio de Newton, estudado por todos ns
ainda no ensino fundamental, quem se lembra de (p+q)2 ? Ento, pelos
produtos notveis sabemos que o clculo fica simples, apenas relembrando
o quadrado do primeiro mais duas vezes o primeiro pelo segundo mais o
quadrado do segundo = (p+q)2=p2 +2pq+q2 , mas como reunir isso que
eu aprendi em matemtica gentica de populaes?
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surpreendente o quanto essa distribuio binomial se ajusta perfeitamente distribuio dos alelos e dos gentipos numa populao, vejamos:
um locus autossmico eu um indivduo diploide apresenta dois alelos, que
podem ser iguais (quando o indivduo homozigoto) ou diferentes (nos
heterozigotos). De qualquer modo, eles esto aos pares e durante a formao dos gametas eles se separam e so distribudos de forma independente
para os descendentes, ento voltando ao nosso velho exemplo, o locus A,
numa populao onde esse locus apresenta dois alelos (A+a). A distribuio
desses alelos se d aos pares, uma vez que os indivduos so diploides, logo
(A+a)2; Os indivduos, por sua vez, podem ser homozigotos dominantes
(AA), heterozigotos (Aa) e homozigotos recessivos (aa), os quais podemos
chamar, respectivamente de D, H e R.
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Considerando que so 1000 indivduos e que 0,16 so do tipo M (homozigotos, D), ento basta multiplicar o nmero total de indivduos pela
sua frequncia:
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D=f(LmLn)=0,48x1000=480 indivduos
Finalmente, para calcular o nmero esperado de indivduos homozigotos do tipo N, basta calcular:
R= f(LmLn)=q2
R= f(LmLn)=0,62=0,36
Considerando que so 1000 indivduos e que 0,48 so do tipo MN
(heterozigotos, H), ento basta multiplicar o nmero total de indivduos
pela respectiva frequncia:
R=f(LmLn)=0,36x1000=360 indivduos
Portanto:
p2+2pq+q2=1, assim como D+H+R=1
Nesse exemplo:
160M+ 480MN+360N=1000 indivduos
Tambm podemos calcular as frequncias gnicas quando temos apenas as frequncias genotpicas, utilizando o inverso do raciocnio anterior.
Utilizando os resultados da questo anterior, vejamos como conseguimos
chegar s frequncias allicas:
Se considerarmos a frequncia do alelo Lm como p e a frequncia de Ln
como q, ento podemos estimar as frequncias allicas da seguinte forma:
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Agora basta seguir o mesmo princpio utilizado anteriormente:
Se
q=001
Ento
Sabendo as frequncias allicas podemos calcular facilmente as frequncias genotpicas esperadas pelo equilbrio de Hardy-Weinberg:
Esses resultados indicam que se essa populao tivesse 10.000 indivduos, poderamos estimar, multiplicando as frequncias genotpicas
calculadas pelo total de indivduos, que de um indivduo seria albino (aa),
198 indivduos seriam heterozigotos para albinismo (Aa) e 9801 indivduos
seriam homozigotos normais (AA).
A figura a seguir ilustra a relao entre frequncias gnicas e genotpicas para um locus autossmico com dois alelos em populaes diploides;
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Caso todos os pressupostos mencionados anteriormente sejam atendidos, as frequncias gnicas e genotpicas populacionais permanecero
constantes ao longo do tempo, como afirma o princpio de Hardy-Weinberg.
Imagino que voc deva estar pensando a essa altura que esse princpio
de Hardy-Weinberg extremamente terico e no possui qualquer aplicao prtica. Entretanto, esse princpio verdadeiramente o principal
alicerce para o estudo da gentica de populaes. Isso possvel porque o
princpio de Hardy-Weinberg permite gerar parmetros genticos bsicos
de uma populao. Numa populao ideal que atenda a todos os pressupostos mencionados no existe qualquer influncia da evoluo e, por isso,
as condies genticas da populao continuariam constantes ao longo do
tempo. Por se tratar de uma super simplificao da realidade, o Principio
de Hardy-Weinberg pode ser considerado como um modelo de referencia
para uma populao ideal e quando verificamos se uma populao biolgica
encontra-se ou no em equilbrio, isso nos d uma idia clara sobre o grau de
influncia do processo evolutivo sobre essa populao. Portanto, a distncia
de uma populao ideal em relao a uma populao biolgica formada
pelos ingredientes da evoluo. importante ressaltar que as suposies
do equilbrio de Hardy-Weinberg se aplicam a apenas um locus. Nenhuma
populao natural se reproduz aleatoriamente para todas as caractersticas;
nem a populao est livre dos fatores evolutivos para todas as caractersticas. O princpio de Hardy-Weinberg, portanto no exige que a populao
seja panmtica, ausncia de seleo, migrao, deriva gentica e mutaes
para todos os loci. Ela exige essa condio apenas para o locus que est
sendo considerado na anlise. Uma populao pode estar em equilbrio
para um locus e no para outros.
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Frequncias
genotpicas esperadas
m m
L L
298
D=p2
MN
LmLn
489
H=2pq
n n
213
R=q2
LL
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Logo:
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CRUZAMENTOS NO ALEATRIOS
Existem diversos motivos pelos quais o princpio de HW pode ser
afetado em uma populao em particular. A no ateno a qualquer um dos
pressupostos mencionados anteriormente podem influenciar na variao
das frequncias gnicas e genotpicas ao longo do tempo, como o caso
dos cruzamentos no aleatrios.
A relao entre as frequncias allicas e genotpicas se desfaz se o cruzamento entre os indivduos da populao no ocorre ao acaso. Portanto, um
dos principais fatores que pode afetar o equilbrio de HW ocorre quando a
populao no panmtica. A endogamia e a reproduo preferencial so
os principais fatores associados aos cruzamentos no aleatrios. A endogamia ocorre quando temos acasalamento entre indivduos aparentados, o
que aumenta a probabilidade de que os descendentes tenham dois alelos
idnticos por descendncia. A endogamia resulta no aumento da frequncia de gentipos homozigotos e reduo no nmero de heterozigotos em
relao ao que seria esperado por acasalamentos aleatrios. O efeito da
endogamia tanto maior quando mais prximos geneticamente forem os
indivduos acasalados. Se em uma determinada populao o acasalamento
entre indivduos aparentados for comum, isso resultar na probabilidade de
encontrar um indivduo que tenha dois alelos idnticos por descendncia
quando fazemos uma amostragem aleatria da populao. Esta probabilidade chamada de F, ou coeficiente de endogamia. Se voltarmos o suficiente
no tempo, muitos alelos provavelmente sero idnticos por descendncia,
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CONCLUSO
Conforme afirmado anteriormente, a evoluo pode ser definida de
forma simplificada como a alterao nas frequncias genticas em uma
populao ao longo do tempo. Para compreender um cenrio onde as
frequncias gnicas mudam, imprescindvel que o estudante de biologia
entenda um cenrio um pouco mais simples, no qual as frequncias genticas
simplesmente no mudam, sendo essa compreenso a principal contribuio
dessa aula. A gentica de populaes forma o alicerce bsico para o estudo
da evoluo e tambm vem sendo muitssimo utilizada na rea de ecologia
e no estudo de populaes humanas e estudos epidemiolgicos. Diante do
que foi visto nessa aula, voc pode concluir que uma populao pode ser
caracterizada geneticamente por suas frequncias gnicas e genotpicas e
que tais frequncias se ajustam bem ao modelo matemtico do binmio de
Newton por meio do princpio de Hardy-Weinberg, que por sua vez nos
fornece um parmetro bsico para reconhecer o grau de influncia dos
fatores evolutivos numa populao biolgica.
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RESUMO
A gentica de populaes estuda a origem da variao, a transmisso
dos genes ao longo das geraes e a dinmica da mudana na composio
gentica das populaes ao longo do tempo por ao das foras evolutivas.
A variao uma propriedade natural das populaes biolgicas. O reconhecimento da amplitude da variao fenotpica e de sua base hereditria levou
Darwin idia da evoluo por meio da Seleo Natural.A nossa observao
das espcies em nvel fenotpico d uma dimenso prtica da existncia
de variao. No entanto, a variao gentica ainda maior que aquela que
pode ser observada na comparao dos fentipos. Ao nvel molecular a
variao existente ainda maior.A quantidade de variao gentica dentro
de populaes naturais e a dinmica das foras limitantes e/ou moldadoras
ao longo do tempo e do espao formam a base de interesse do geneticista
de populaes. A variabilidade gentica, portanto, est diretamente relacionada evoluo das espcies e o grau de variabilidade dentro da espcie
afeta diretamente o seu potencial de se adaptar a mudanas ambientais. As
frequncias genotpicas populacionais esto relacionadas forma em que
os alelos esto distribudos aos pares nos indivduos que formam a populao, enquanto a frequncia allica est relacionada proporo de cpias
gnicas de um determinado tipo allico numa determinada populao. em
1908, Hardy e Weinberg desenvolveram,independentemente, um conceito
matemtico relativamente simples, hoje denominado princpio de HardyWeinberg, considerado o fundamento bsico da gentica de populaes.
Esse princpio diz que numa populao de reproduo ao acaso, infinita e
na ausncia de fatores evolutivos, as frequncias allicas e genotpicas permanecem constantes ao longo do tempo. O princpio de Hardy-Weinberg
pode ser utilizado para determinar a frequncia de cada alelo de um par
ou de uma srie, bem como frequncias genotpicas de homozigotos e
heterozigotos na populao.
ATIVIDADES
1. Considere essas 5 populaes. Calcule as frequncias allicas de cada uma
delas e verifique quais esto em equilbrio de Hardy-Weinberg utilizando
um teste de qui-quadrado.
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AA Aa
aa
a. Populao 1
b. Populao 2
c. Populao 3
45
d. Populao 4
e. Populao 5
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AUTOAVALIAO
Aps estudar esta aula, consigo:
1. Definir o que so frequncias allicas?
2. Definir o que so frequncias genotpicas?
3. Definir quais so os pressupostos para que uma populao esteja em
equilbrio de Hardy-Weinberg?
4. Explicar e Justificar ma populao em equilbrio pode ter uma frequncia
de heterozigotos maior que 50% no locus analisado? Justifique.
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REFERNCIAS
GRIFFITS, A. J. F. e Col Introduo gentica Editora Guanabara
Koogan, 9a edio, Rio de Janeiro, RJ, 2008.
SNUSTAD, D. P. Fundamentos Gentica - Editora Guanabara
Koogan, 6a edio, Rio de Janeiro, RJ, 2008.
FUTUYMA, D. Biologia evolutiva Editora Funpec, 3 edio, Ribeiro
Preto, SP, 2009
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