Faculdade de Ciências Farmacêuticas ± Universidade Estadual Paulista Júlio Mesquita Filho

Relatório de Bioquímica
Quimica dos Carboidratos

Profa. Dra. Daniela Alonso Brochini Martins

Grupo: Débora Sávio Nayara Cauneto Stefane Paulo

prova de iodo e de Benedict. numa reação que segue o mesmo mecanismo da reaçãodeMolish. Reação de Seliwanoff O uso de acido forte diluído e outro tipo de fenol (resorcinol) podem levar à distinção entre cetoses e aldoses. apresentam como formula geral [C(H20)n]n. pois este possibilita o desenvolvimento de uma coloração. e são moléculas que desempenham papel importante em nosso organismo. frutose e galactose). pois é por meio deles que obtemos a energia celular para nosso metabolismo. e os polissacarídeos (amido. 2. O aparecimento de cor proveniente do complexo de condensação entre furfural ou hidroximetilfurfural e resorcinol é mais rápido para cetoses que . sendo os dois primeiros nomeados como carboidratos simples. inversão da sacarose e Hidrolise do amido) podemos obter a caracterização quimica e a identificação dos vários compostos e grupos de compostos classificados como hidrtos de carbono (=Carboidratos). celulose e glicogênio). Teste de Molish O acido sulfúrico concentrado é capaz de romper as ligações glicosídeas e desidratar rapidamente moléculas de monossacarídeos. 1. caso a solução em análise seja constituída de pentoses ou hexoses. respectivamente. um anel de coloração violeta/lilás estável por algumas horas. a reação de Seliwanoff só diferencia-se da reação de Molisch nos reagentes utilizados: o ácido que causará a desidratação do carboidrato é o ácido clorídrico (HCl) e o fenol que reage como o furfural e HMF é o resorcinol.Introdução Os carboidratos são biomoléculas mais abundantes na natureza.. dissacarídeos (sacarose. levando à formação de furfural ou hidroximetilfurfural. e os polissacarídeos de carboidratos complexos. lactose e maltose). Como o furfural ou hidroximetilfurfural são substâncias incolores colocamoos em presença de um composto fenólico no sistema de reação. O encontramos em três formas disponível: monossacarídeo (glicose. de Seliwanoff. Através de alguns teste ( Teste de Molish.

A capacidade que esses compostos apresentam de reduzir íons metálicos em soluções alcalinas é um bom método de identificação desses compostos. por exemplo. . Por esse motivo a extremidade que contém o -OH passa a ser chamada extremidade redutora e o açúcar. de alto peso molécular. mas em nenhuma das equações houve prejuízo do amido com a interação do iodo com a base (iodo complexado. respectivamente. Prova de Benedict Teste usado para pesquisa de sacarídeos redutores.aldoses. com formação de compostos coloridos. portanto incolor). O amido é formado pela combinação da amilose com a amilopectina. e moléculas como essas. isso porque a formação do furfural é mais fácil que a formação do hidroximetilfurfural. 3. 4. ou com o ácido ( iodo descomplexado . resultando em complexo azul e vermelho-violáceo. de açúcar redutor). Um exemplo importante é a complexação da amilose e da amilopectina com o iodo. 3I2+6NaOH NaIO3+5NaI 5NaI+NaIO3+6HCl 3I2+6NaCl+3H2O Onde por meio desta equação podemos observar que a coloração do iodo deve-se a sua forma livre. Como a amilopectina não apresenta estrutura helicoidal. O aprisionamento do iodo dá-se no interior da hélice formada pela amilose. Prova de Iodo Os dois fatores que determinam a cor desenvolvida quando o iodo interage com os polissacarídeos são o comprimento e a ramificação da cadeia. portanto azul na presença de amido). é dependente da existência de grupos carbonila livre. apresenta cor avermelhada e o complexo iodo-amido apresenta cor azul. O complexo iodo -dextrina. e a coloração menos intensa. a interação com o iodo será menor. podem sofre reações de descomplexação. A propriedade redutora dos açucares (açúcares que apresentam a hidroxila livre no C-1 são bons agentes redutores. devido à presença das ramificações.

de grupos aldeídos ou cetonas livres dos açucares. Inclinamos o tubo e adicionamos cuidadosamente pelas paredes 1.Quando soluções de açucares são aquecidas em presença de certos ions metálicos. . soda limonada diet e destilada . Teste geral para açucares. soda limonada tradicional. Objetivo Caracterização química e identificação dos vários compostos e grupos de compostos classificados como hidratos de carbono Instrumentos y y y y y y y y y y y y y y y y y Solução de amido 1% Solução de glicose 1% Solução de sacarose 1% Solução de frutose 1% Solução concentrada de lugol (iodo) Soda limonada tradicional Soda limonada diet H2O destilada -naftol alcoólico 5% H2SO4 NaOH 1mol/L e 6mol/L HCl 1mol/L HCl concentrado Reagente de Selivanoff Reagente de Benedict Tubos de ensaio Erlenmeyer Métodos 1. colocando 1.5ml de concentrado. Misturamos bem. glicose a 1%. sacarose a 1%.0ml das soluções de amido a 1%. o grupo carbonila se oxida e o ion metálico se reduz. em solução alcalina.Teste de Molish Preparamos 6 tubos de ensaio. O teste de Benedict é baseado na redução do Cu2+ à Cu+ devido ao poder redutor. Foram adicionadas 3 gotas de -naftol alcoólico 5%. separadamente em cada um dos tubos.

Depois neutralizamos esse mesmo tubo. Colocamos em banho de água fervente até o tubo com a sacarose colorir. Pesquisa de Polissacarídeos. para as amostrar retiradas em intervalos de 2 minutos até que apenas a cor do próprio iodo ficasse perceptível. Pesquisa de sacarídeos redutores . sacarose a 1%. Foram adicionados a cada tubo 0. 3. glicose a 1% e destilada. . Inversão da sacarose Transferimos 1ml de uma solução de sacarose 1% para um tubo de ensaio e adicionamos 3 gotas de ácido sulfúrico concentrado.Prova de Benedict. Foram adicionadaos a cada tubo 2ml de reagente de Benedict. separadamente em cada um dos tubos. frutose a 1% e destilada. glicose a 1%. Adicionamos então 3ml de ácido clorídrico concentrado e misturamos. Reação de Seliwanoff Preparamos 7 tubos de ensaio. colocando 1.5ml da mistura para um tubo contendo 3 gotas de NaOH 6mol/L. Prova do iodo. que continha amido e lugol. Aquecemos em banho-maria ferventedurante 5 minutos. e resfriamos no gelo. colocando 0. adicionamos 5 gotas de NaOH 1mol/L. 5. separamente em cada um dos tubos. Adicionamos a cada tubo 5 gotas de solução concentrada de lugol. Transferimos 0. colocando 1. mas utilizando 1ml do reagente. sacarose a 1%. Retiramos os tubos do banho-maria.0ml das soluções de amido a 1%.5ml da mistura para um tubo de ensaio. separadamente em cada um dos tubos. Fervemos o tubo durante 2 minutos. glicose a 1%. 6. Colocamos o erlenmeyer em banho de aquecimento e anotamos o tempo. contendo 3 gotas de iodo. Preparamos 5 tubos de ensaio. Hidrólise do Amido Foram colocados 25ml de solução de amido a 1% em um frasco erlenmeyer de 50ml.2ml das soluções de frutose a 1%. e outros 0. Ao tubo 1. Adicionamos ao tubo 2ml de reagente de Benedict e aquecemos em banho-maria durante mais 5 minutos. de acordo com o descrito no item 4. adicionado igual número de gotas de HCl 1mol/L. soda limonada tradicional. Retiramos os tubos do banho e deixamos esfriar. soda limonada diet e destilada.8ml do regente de Seliwanoff.0ml das soluções de amido a 1%. Preparamos 4 tubos de ensaio. onde realizamos o teste de Benedict.2. sacarose a 1%. Neutralizamos a solução contendo o ácido com 6 gotas de NaOH 6mol/L. amido a 1%. Repetimos os teste de iodo e deBenedict como acima. 4.

que continha a soda limonada diet. Os tubos que continham frutose. . indicando que ela é uma aldose. indicando que estas são cetoses.Teste geral para açucares Teste de Molisch Tubo 1 2 3 4 5 6 Conteúdo Amido a 1% Glicose a 1% Sacarose a 1% Soda limonada tradicional Soda Limonada diet destilada Coloração Roxo Roxo Roxo Roxo Roxo claro Incolor O surgimento de um anel de coloração roxa estável indica que houve formação de furfurais. pois a reação para cetoses é mais rápida e mais intensa do que para aldoses. o qual contém um pouco de frutose. Reação de Seliwanoff Tubo 1 2 3 4 5 6 7 Conteúdo Frutose a 1% Coloração Avermelhado Avermelhado claro Avermelhado claro Avermelhado Incolor Incolor Incolor Glicose a 1% Amido a 1% Sacarose a 1% Soda limonada tradicional Soda Limonada diet destilada Obs: o tubo 2 coloriu após o segundo aquecimento. observamos a formação de um anel roxo claro. O tubo 6 não apresentou coloração pois só continha água. o glicose corou se fracamente. no entanto. No tubo 5. amido e sacaro se coraram-se mais rapidamente. revelando a presença de açúcares na amostra. não deveria aparecer coloração. Isso pode ter acontecido devido a fato da soda conter suco de limão. A reação positiva é caracterizada pelo aparecimento de coloração avermelhada. que indica a formação do complexo entre furfural ou HMF com o resorcinol e. conseqüentemente. 2. Após voltar ao aquecimento. indica presença de aldoses e cetoses.Resultados 1.

tubo 1 2 3 4 conteúdo Amido a 1% Sacarose a 1% Glicose a 1% coloração Azul escuro intenso Laranja Laranja Laranja destilada Neste teste. indicando a presença do polissacarídeo. Pesquisa de Polissacarídeos. todos ficaram da cor do próprio lugol (laranja). com execeção do tubo que continha o amido. Prova do iodo. ficou na forma de iodeto e iodato: . Ao adicionarmos 5 gotas de NaOH neste tubo. e era o responsável pela coloração azul. Isso aconteceu pois com a adição da base. o complexo iodo-amido que antes estava livre. Já no tubo que continha o amido. foi possível identificar uma coloração azul bem intensa. indicando que não houve reação nos mesmos. pois houve a complexação da amilose e da amilopectina com o iodo. a solução ficou transparente.3.

ƒ  ƒ.

 ƒ.

ƒ. Quando neutralizamos a solução adicionando mais 5 gotas de HCl ao tubo. este hidrolisa a solução iodeto+iodato e a coloração volta a ficar azul. indicando que o complexo iodo-amido voltou a forma livre novamente.

ƒ.

 Ž .

Os tubos 2 e 5. açucares redutores. pois a sacarose possui ligação glicosídica no carbono ou seja. O que ocorreu neste teste foi que com a adição de ácido sufúricoconcentrado . portanto. Neste teste. que pode ter ocorrido devido a algum tipo de contaminação. já neste item. tubo 1 2 3 4 5 conteúdo Amido a 1% Sacarose a 1% Glicose a 1% Frutose a 1% destilada coloração Azul-esverdeado Azul Vermelho-tijolo Vermelho-tijolo Azul O desenvolvimento de um precipitado de coloração vermelho-tijolo indica que os íons Cu2+ do reagente de Benedict foram reduzidos a Cu+. indicando presença de açúcar redutor. indicando que estas soluções possuem hidroxila livre no carbono anomérico e são. possui hidroxila livre. a coloração obtida foi a vermelho-tijolo. 5. que continha amido apresentou coloração azul-esverdeada. indicando que não houve reação. que ocorre somente na presença de açucar redutor. Pesquisa de sacarídeos redutores . caracteristica do reagente de Benedict. apresentaram coloração azul. O tubo 1. apenas nos tubos que continham glicose e frutose foi possível observ a ar coloração vermelho-tijolo. não -1. ƒŽ  4. Inversão da sacarose No tubo 2 do item 4 obteve-se a coloração azul caracteristica do reagente de Benedict.Prova de Benedict. No outro tubo havia apenas água.

a cor vai sendo perdida gradativamente. Isso aconteceu pois quando o amido é tratado com ácido. e responsáveis pela coloração desenvolvida.a solução. e compostos intermediários menores (dextrinas) vão sendo formados. e são açucares redutores. quando feito o teste de Benedict. as ligações glicosídicas da sacarose foram quebradas. restaria no tubo uma solução de glicose. têm hidroxila livre no carbono-1. Hidrólise do Amido Neste teste foi observado que com o passar dos minutos. e as moléculas de glicose e frutose. a coloração azul foi escurecendo. Isso aconteceria pois a medida que o amido fosse degradado. Se a solução de amido ficasse mais tempo sob aquecimento. a escurecimento da cor azul nos tubos para este teste. Ou seja. que é um açucar redutor. 6. sob aquecimento. também comprovam que o amido estava sendo hidrolisado a glicose. partindo do azul escuro bem intenso (que indica formação do complexo amido-iodo) até um laranja. . positivo para o teste de Benedict. reduzindo o — a — . até chegar no seu monômero básico. a solução provavelmente ficaria vermelho-tijolo. que é a cor do próprio lugol. e dessa forma. Devido a diminuição da quantidade de amido em solução. Já nos tubos que continham o reagente de Benedict. agora separadas. sofre uma sucessão de hidrólises. a coloração dos tubos que continham o iodo foram ficando cada vez mais claros.