Faculdade de Ciências Farmacêuticas ± Universidade Estadual Paulista Júlio Mesquita Filho

Relatório de Bioquímica
Quimica dos Carboidratos

Profa. Dra. Daniela Alonso Brochini Martins

Grupo: Débora Sávio Nayara Cauneto Stefane Paulo

a reação de Seliwanoff só diferencia-se da reação de Molisch nos reagentes utilizados: o ácido que causará a desidratação do carboidrato é o ácido clorídrico (HCl) e o fenol que reage como o furfural e HMF é o resorcinol. prova de iodo e de Benedict. O encontramos em três formas disponível: monossacarídeo (glicose. e os polissacarídeos (amido. Como o furfural ou hidroximetilfurfural são substâncias incolores colocamoos em presença de um composto fenólico no sistema de reação. apresentam como formula geral [C(H20)n]n. 1. caso a solução em análise seja constituída de pentoses ou hexoses. respectivamente. numa reação que segue o mesmo mecanismo da reaçãodeMolish. levando à formação de furfural ou hidroximetilfurfural.. frutose e galactose). celulose e glicogênio). e são moléculas que desempenham papel importante em nosso organismo. sendo os dois primeiros nomeados como carboidratos simples. lactose e maltose). pois é por meio deles que obtemos a energia celular para nosso metabolismo.Introdução Os carboidratos são biomoléculas mais abundantes na natureza. Teste de Molish O acido sulfúrico concentrado é capaz de romper as ligações glicosídeas e desidratar rapidamente moléculas de monossacarídeos. pois este possibilita o desenvolvimento de uma coloração. 2. O aparecimento de cor proveniente do complexo de condensação entre furfural ou hidroximetilfurfural e resorcinol é mais rápido para cetoses que . Através de alguns teste ( Teste de Molish. inversão da sacarose e Hidrolise do amido) podemos obter a caracterização quimica e a identificação dos vários compostos e grupos de compostos classificados como hidrtos de carbono (=Carboidratos). um anel de coloração violeta/lilás estável por algumas horas. de Seliwanoff. Reação de Seliwanoff O uso de acido forte diluído e outro tipo de fenol (resorcinol) podem levar à distinção entre cetoses e aldoses. dissacarídeos (sacarose. e os polissacarídeos de carboidratos complexos.

portanto incolor). 3. Prova de Iodo Os dois fatores que determinam a cor desenvolvida quando o iodo interage com os polissacarídeos são o comprimento e a ramificação da cadeia.aldoses. e a coloração menos intensa. A propriedade redutora dos açucares (açúcares que apresentam a hidroxila livre no C-1 são bons agentes redutores. Um exemplo importante é a complexação da amilose e da amilopectina com o iodo. portanto azul na presença de amido). . O amido é formado pela combinação da amilose com a amilopectina. devido à presença das ramificações. O complexo iodo -dextrina. 3I2+6NaOH NaIO3+5NaI 5NaI+NaIO3+6HCl 3I2+6NaCl+3H2O Onde por meio desta equação podemos observar que a coloração do iodo deve-se a sua forma livre. A capacidade que esses compostos apresentam de reduzir íons metálicos em soluções alcalinas é um bom método de identificação desses compostos. mas em nenhuma das equações houve prejuízo do amido com a interação do iodo com a base (iodo complexado. com formação de compostos coloridos. de açúcar redutor). Por esse motivo a extremidade que contém o -OH passa a ser chamada extremidade redutora e o açúcar. de alto peso molécular. apresenta cor avermelhada e o complexo iodo-amido apresenta cor azul. resultando em complexo azul e vermelho-violáceo. 4. Como a amilopectina não apresenta estrutura helicoidal. é dependente da existência de grupos carbonila livre. e moléculas como essas. isso porque a formação do furfural é mais fácil que a formação do hidroximetilfurfural. Prova de Benedict Teste usado para pesquisa de sacarídeos redutores. por exemplo. O aprisionamento do iodo dá-se no interior da hélice formada pela amilose. ou com o ácido ( iodo descomplexado . podem sofre reações de descomplexação. a interação com o iodo será menor. respectivamente.

Teste geral para açucares.5ml de concentrado.0ml das soluções de amido a 1%. o grupo carbonila se oxida e o ion metálico se reduz.Teste de Molish Preparamos 6 tubos de ensaio. colocando 1. glicose a 1%. Misturamos bem. Foram adicionadas 3 gotas de -naftol alcoólico 5%. separadamente em cada um dos tubos. em solução alcalina. sacarose a 1%. Inclinamos o tubo e adicionamos cuidadosamente pelas paredes 1. .Quando soluções de açucares são aquecidas em presença de certos ions metálicos. soda limonada tradicional. soda limonada diet e destilada . Objetivo Caracterização química e identificação dos vários compostos e grupos de compostos classificados como hidratos de carbono Instrumentos y y y y y y y y y y y y y y y y y Solução de amido 1% Solução de glicose 1% Solução de sacarose 1% Solução de frutose 1% Solução concentrada de lugol (iodo) Soda limonada tradicional Soda limonada diet H2O destilada -naftol alcoólico 5% H2SO4 NaOH 1mol/L e 6mol/L HCl 1mol/L HCl concentrado Reagente de Selivanoff Reagente de Benedict Tubos de ensaio Erlenmeyer Métodos 1. de grupos aldeídos ou cetonas livres dos açucares. O teste de Benedict é baseado na redução do Cu2+ à Cu+ devido ao poder redutor.

0ml das soluções de amido a 1%. e outros 0. sacarose a 1%. frutose a 1% e destilada. onde realizamos o teste de Benedict. Pesquisa de sacarídeos redutores . Hidrólise do Amido Foram colocados 25ml de solução de amido a 1% em um frasco erlenmeyer de 50ml. Preparamos 4 tubos de ensaio. Pesquisa de Polissacarídeos. Depois neutralizamos esse mesmo tubo. Retiramos os tubos do banho e deixamos esfriar. glicose a 1% e destilada. Prova do iodo.5ml da mistura para um tubo contendo 3 gotas de NaOH 6mol/L. glicose a 1%. separadamente em cada um dos tubos. 6. Retiramos os tubos do banho-maria. e resfriamos no gelo. Reação de Seliwanoff Preparamos 7 tubos de ensaio. Foram adicionadaos a cada tubo 2ml de reagente de Benedict. Transferimos 0.8ml do regente de Seliwanoff. amido a 1%.Prova de Benedict. 5. que continha amido e lugol. Repetimos os teste de iodo e deBenedict como acima. Fervemos o tubo durante 2 minutos. mas utilizando 1ml do reagente. colocando 1. soda limonada diet e destilada. Adicionamos ao tubo 2ml de reagente de Benedict e aquecemos em banho-maria durante mais 5 minutos. Foram adicionados a cada tubo 0. adicionamos 5 gotas de NaOH 1mol/L.5ml da mistura para um tubo de ensaio. sacarose a 1%. Ao tubo 1. Inversão da sacarose Transferimos 1ml de uma solução de sacarose 1% para um tubo de ensaio e adicionamos 3 gotas de ácido sulfúrico concentrado. Aquecemos em banho-maria ferventedurante 5 minutos. 3. Colocamos em banho de água fervente até o tubo com a sacarose colorir. separadamente em cada um dos tubos.2. Neutralizamos a solução contendo o ácido com 6 gotas de NaOH 6mol/L.0ml das soluções de amido a 1%. Preparamos 5 tubos de ensaio. adicionado igual número de gotas de HCl 1mol/L. de acordo com o descrito no item 4. soda limonada tradicional. separamente em cada um dos tubos. Colocamos o erlenmeyer em banho de aquecimento e anotamos o tempo. . para as amostrar retiradas em intervalos de 2 minutos até que apenas a cor do próprio iodo ficasse perceptível. colocando 0. sacarose a 1%. 4.2ml das soluções de frutose a 1%. contendo 3 gotas de iodo. Adicionamos a cada tubo 5 gotas de solução concentrada de lugol. Adicionamos então 3ml de ácido clorídrico concentrado e misturamos. glicose a 1%. colocando 1.

amido e sacaro se coraram-se mais rapidamente. que continha a soda limonada diet. o qual contém um pouco de frutose. Após voltar ao aquecimento. revelando a presença de açúcares na amostra. no entanto. Os tubos que continham frutose. o glicose corou se fracamente.Resultados 1. pois a reação para cetoses é mais rápida e mais intensa do que para aldoses. A reação positiva é caracterizada pelo aparecimento de coloração avermelhada. O tubo 6 não apresentou coloração pois só continha água.Teste geral para açucares Teste de Molisch Tubo 1 2 3 4 5 6 Conteúdo Amido a 1% Glicose a 1% Sacarose a 1% Soda limonada tradicional Soda Limonada diet destilada Coloração Roxo Roxo Roxo Roxo Roxo claro Incolor O surgimento de um anel de coloração roxa estável indica que houve formação de furfurais. que indica a formação do complexo entre furfural ou HMF com o resorcinol e. conseqüentemente. . indicando que ela é uma aldose. No tubo 5. não deveria aparecer coloração. Reação de Seliwanoff Tubo 1 2 3 4 5 6 7 Conteúdo Frutose a 1% Coloração Avermelhado Avermelhado claro Avermelhado claro Avermelhado Incolor Incolor Incolor Glicose a 1% Amido a 1% Sacarose a 1% Soda limonada tradicional Soda Limonada diet destilada Obs: o tubo 2 coloriu após o segundo aquecimento. observamos a formação de um anel roxo claro. indicando que estas são cetoses. Isso pode ter acontecido devido a fato da soda conter suco de limão. 2. indica presença de aldoses e cetoses.

o complexo iodo-amido que antes estava livre. foi possível identificar uma coloração azul bem intensa. Ao adicionarmos 5 gotas de NaOH neste tubo. Isso aconteceu pois com a adição da base. Já no tubo que continha o amido. Prova do iodo. ficou na forma de iodeto e iodato: .3. tubo 1 2 3 4 conteúdo Amido a 1% Sacarose a 1% Glicose a 1% coloração Azul escuro intenso Laranja Laranja Laranja destilada Neste teste. com execeção do tubo que continha o amido. e era o responsável pela coloração azul. indicando que não houve reação nos mesmos. Pesquisa de Polissacarídeos. todos ficaram da cor do próprio lugol (laranja). pois houve a complexação da amilose e da amilopectina com o iodo. a solução ficou transparente. indicando a presença do polissacarídeo.

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este hidrolisa a solução iodeto+iodato e a coloração volta a ficar azul. ƒ. indicando que o complexo iodo-amido voltou a forma livre novamente. Quando neutralizamos a solução adicionando mais 5 gotas de HCl ao tubo.

ƒ.

 Ž .

5. O tubo 1. apenas nos tubos que continham glicose e frutose foi possível observ a ar coloração vermelho-tijolo. que ocorre somente na presença de açucar redutor. Inversão da sacarose No tubo 2 do item 4 obteve-se a coloração azul caracteristica do reagente de Benedict. açucares redutores. não -1. Pesquisa de sacarídeos redutores . indicando presença de açúcar redutor. apresentaram coloração azul. Neste teste. indicando que estas soluções possuem hidroxila livre no carbono anomérico e são. No outro tubo havia apenas água. que continha amido apresentou coloração azul-esverdeada. indicando que não houve reação. a coloração obtida foi a vermelho-tijolo. tubo 1 2 3 4 5 conteúdo Amido a 1% Sacarose a 1% Glicose a 1% Frutose a 1% destilada coloração Azul-esverdeado Azul Vermelho-tijolo Vermelho-tijolo Azul O desenvolvimento de um precipitado de coloração vermelho-tijolo indica que os íons Cu2+ do reagente de Benedict foram reduzidos a Cu+. caracteristica do reagente de Benedict. Os tubos 2 e 5. ƒŽ  4. possui hidroxila livre.Prova de Benedict. já neste item. pois a sacarose possui ligação glicosídica no carbono ou seja. que pode ter ocorrido devido a algum tipo de contaminação. portanto. O que ocorreu neste teste foi que com a adição de ácido sufúricoconcentrado .

e responsáveis pela coloração desenvolvida. Se a solução de amido ficasse mais tempo sob aquecimento. reduzindo o — a — . 6. sob aquecimento. positivo para o teste de Benedict. Isso aconteceu pois quando o amido é tratado com ácido. a solução provavelmente ficaria vermelho-tijolo. até chegar no seu monômero básico. Isso aconteceria pois a medida que o amido fosse degradado. e dessa forma. também comprovam que o amido estava sendo hidrolisado a glicose. Devido a diminuição da quantidade de amido em solução. e as moléculas de glicose e frutose. restaria no tubo uma solução de glicose. partindo do azul escuro bem intenso (que indica formação do complexo amido-iodo) até um laranja. a coloração azul foi escurecendo. que é a cor do próprio lugol. que é um açucar redutor. Já nos tubos que continham o reagente de Benedict. Hidrólise do Amido Neste teste foi observado que com o passar dos minutos. têm hidroxila livre no carbono-1. sofre uma sucessão de hidrólises. agora separadas. a cor vai sendo perdida gradativamente. a coloração dos tubos que continham o iodo foram ficando cada vez mais claros.a solução. quando feito o teste de Benedict. as ligações glicosídicas da sacarose foram quebradas. a escurecimento da cor azul nos tubos para este teste. Ou seja. e compostos intermediários menores (dextrinas) vão sendo formados. e são açucares redutores. .

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