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CONJUGADOS
Anticorpos
usados: policlonais ou
monoclonais
Ensaios
manuais e automatizados
TCNICAS
Alguns fluorocromos
PE: ficoeritrina
Rodamina
IMUNOFLUORESCNCIA
Lmina de imunofluorescncia
REAO DE
IMUNOFLUORESCNCIA
I - Reao de imunofluorescncia direta
(RIFD)
pesquisa do Ag em clulas ou tecidos
elevada sensibilidade e especificidade
Usa um conjugado para cada sistema
Reao de imunofluorescncia
II - Reao de imunofluorescncia
indireta (RIFI)
do sinal aumento da
sensibilidade em relao RIFD
amplificao
A - pesquisa de antgeno
mais sensvel, uso de um nico
conjugado para diferentes sistemas
Reao de imunofluorescncia
Reao de imunofluorescncia
indireta (RIFI)
B - pesquisa de anticorpo contra um agente
infeccioso
Ag do agente infeccioso (lmina) + soro do
paciente Ag-Ac
LAVAR
DETERMINAO DA CLASSE DO AC
INTERFERENTES NA PESQUISA
DE IgM POR RIFI
Desvantagens da RIFI:
Mais demorada, maior nmero de reagentes
AUTOMAO NA IMUNOFLUORESCNCIA (E
ELISA)
REAES DE
ENZIMAIMUNOENSAIO
Reao
Alta
ENSAIOS HETEROGNEOS
I - ELISA (enzyme linked immunosorbent
assay)
ETAPAS DO ELISA
sensibilizao
ETAPAS DO ELISA
adio
ETAPAS DO ELISA
o
ETAPAS DO ELISA
Interrupo da reao: adio de SDS ou H2SO4
Leitura do resultado
Leitor de ELISA: Fotmetro multicanal para tiras
ou placas
Filtros: 405, 450, 490, 630 nm
Leitura monocromtica: uso do comprimento de
onda no qual o produto da reao tem maior
absorbncia
Leitura bicromtica ou diferencial: uso de 2
filtros: o primrio e o diferencial
Leitor de ELISA
Reao de ELISA
Lavadora de
placas
Pipeta
multicanal
II - Western Blot
II - WESTERN BLOT
Western blot
Western Blot
ONDE ESTUDAR