Boas Prticas em Pipetagem

Aspectos Importantes Envolvendo Este Procedimento

NDICE
03 Introduo
04 Objetivo
05 Escolha da pipeta
10 Cuidados para com as pipetas
12 Armazenamento
13 Limpeza

14 Dicas para uma pipetagem correta

17 Erros mais comuns ao pipetar
18 Concluso

Introduo
Diariamente os laboratrios precisam garantir a qualidade dos
resultados de suas anlises, e os instrumentos de medio so fundamentais
quando se necessita de aferies exatas de volumes. Dentre os principais, as
pipetas ou tambm denominadas de micropipetas destacam-se pois so
instrumentos de alta preciso utilizados na medio e na transferncia de
lquidos.
vlido lembrar que existem fatores que podem alterar a exatido na
medio desses volumes, como por exemplo, o conhecimento e habilidade do
operador durante o manuseio, e tambm a qualidade do equipamento. A
relevncia da pipetagem na rotina laboratorial ser varivel de acordo com
cada departamento. Em uma indstria de medicamentos na qual as pipetas
podem ser utilizadas nas anlises de controle de qualidade, centenas de
pipetagens so realizadas, pois a correta execuo desses procedimentos de
controle de qualidade ir impactar diretamente na qualidade do produto
destinado ao paciente.

Objetivo

O objetivo deste material permitir ao usurio final a aquisio de conhecimento

na definio, aplicao e caractersticas que envolvem uma pipeta / micropipeta.
Alm disso, explanar sobre pontos-chave para se escolher um modelo correto,
dicas sobre cuidados, limpeza, armazenamento e diversos outros, de maneira
prtica e fcil de entender.
Ressaltamos que todo o material explanado neste E-Book relacionado aos
materiais de contedo contidos na base de dados SPLABOR.

Boa Leitura!

Escolha da pipeta
Para escolher uma pipeta, vamos abordar quais so os tipos que existem no
mercado.
MANUAIS
Pipeta Graduada: Possui graduaes ao longo de sua
estrutura que possibilita a suco de variadas
quantidades de lquido. A mesma no pode ser aquecida
e utilizada para a medio de pequenos volumes e
volumes variveis pr-determinados no so
consideradas exatas para medir amostras e padres. De
uma maneira mais detalhada, esse tipo de pipeta
consiste de um tubo de vidro graduado uniformemente
em seu comprimento. H dois tipos:

Pipeta graduada de escoamento parcial: calibrada entre duas

marcas, apresenta no topo duas linhas coloridas;
Pipeta graduada de escoamento total (sorolgica): esta graduada
at a extremidade inferior e apresenta no topo uma linha colorida.

Escolha da pipeta

Pipeta Volumtrica: Esse modelo possibilita o transporte de apenas uma

determinada quantidade de volume possui um bulbo cilndrico contendo um
tubo estreito em cada extremidade, e a marca do volume fica gravada na parte
superior do tubo. Tambm no pode ser aquecida devido a sua grande preciso de
medida.

Escolha da pipeta

Pipeta de Pasteur: Conformao bem simples geralmente produzida em plstico e

so descartveis, criada pelo mdico francs Louis Pasteur. No apresenta
abertura no topo, apenas em sua base para entrada de lquido. Possui um balo
que, quando pressionado, expele o ar para o exterior da pipeta e posteriormente o
lquido sugado para o interior.

AUTOMTICAS
Pipeta Automtica e/ou Eletrnica: Modelo avanado utilizado em ambientes que
demandam grande preciso. Possui pontas (ponteiras) descartveis para evitar
contaminaes.

Escolha da pipeta
claro que o usurio deseja uma pipeta que seja precisa, exata e de fcil
manuseio, mas h sempre dicas importantes a serem compartilhadas, que auxiliaro
na escolha da pipeta correta para determinada aplicao.
Ao selecionar um modelo, se automtica, repare se no h resistncia ao abaixar
ou levantar o pisto, ou ao dispensar a ponteira. Utilize sempre ponteiras de
qualidade e se necessrio, as que possuem filtro, pois ajuda a evitar
contaminaes de materiais durante as etapas do processo. O mercado oferece
diversos modelos e marcas, facilitando o dia a dia laboratorial.
Estabelea alguns critrios de seleo junto a sua equipe: se deve possuir faixa de
volume ampla ou mais restrita, ejetores de ponteiras eficientes, regulagens ao
longo do instrumento, etc.
Repare se a faixa de volume atender a demanda e atente-se para no confundir
as unidades de medida do volume:

L = microlitro;
mL = mililitro
1 mL = 1.000 L.

Escolha da pipeta
Exemplo:
Se voc deseja transferir 20 L, utilize uma pipeta automtica, calibrada
para esta faixa de volume. Mas se o volume a ser transferido de 10 mL, utilize uma
pipeta volumtrica, tambm devidamente calibrada. Com esse exemplo em mente,
voc garante que o volume indicado no mtodo de anlise seja transferido
quantitativamente por um instrumento devidamente calibrado para a faixa de
utilizao.

Cuidados para com as pipetas

As pipetas podem sofrer desgastes aps o uso prolongado ou uso
inadequado, pois so instrumentos de alta preciso constitudos por vrios
componentes mecnicos. Recomenda-se verificar a calibrao dos instrumentos
volumtricos nas mesmas condies em que so utilizados no laboratrio.
Quando h a meno de que as pipetas no podem ser submetidas a altas
temperaturas, porque esse fenmeno pode afetar a calibrao, j que so
instrumentos calibrados. Utilize sempre pipetas com volume total o mais prximo
possvel do volume a ser medido.
Utilize a pipeta sempre na vertical. Quando for observar o menisco marcao de
um liquido em um recipiente, contendo um determinado volume os olhos
devem estar posicionados na altura do mesmo, conforme imagem abaixo:

Cuidados para com as pipetas

Para verificar a calibrao, estabelea a relao entre o valor indicado pelo
instrumento e o valor realmente medido.
Momentos para se verificar a calibrao:

De acordo com orientaes do fabricante;

Aps manuteno e troca de alguma(s) pea(s);
Quando a pipeta sofre uma queda ou outro dano;
Mudana no controle de qualidade do sistema analtico;

A frequncia para verificao da calibrao depender de cada laboratrio o

quanto a pipeta utilizada e a qualidade e condio de uso na qual a mesma
submetida pela equipe de trabalho.
Em respeito as ponteiras, d preferncia para as que so da mesma marca da
pipeta assim haver garantias de que o encaixe perfeito entre ambas as partes
ocorrer.

Armazenamento
recomendado que a pipeta, aps uso, permanea na posio vertical. Isso
evitar o contato com superfcies contaminadas, e caso no seja feita a ejeo da
ponteira e haja uma quantidade residual de lquido em seu interior, o lquido no
escorrer para o interior do instrumento, contaminando e danificando as peas
internas.
O mercado oferece diversos modelos de suportes para pipetas, otimizando o
espao de sua bancada e facilitando o manuseio para o usurio.

Limpeza
No h uma regra quanto frequncia de limpeza. Cada laboratrio ir
adotar uma periodicidade conforme o tipo de material manuseado, rotina na qual a
pipeta submetida, quantidade de usurios para a mesma pipeta e percentual de
erros admissveis para o experimento.
No dia a dia, a superfcie externa da pipeta pode ser limpa com um papel toalha
umedecido com lcool 70% e em seguida ficar em repouso dentro do fluxo laminar
com a luz UV ligada por 15 minutos para descontaminao. A manuteno pode
ser realizada por empresas especializadas, que realizam a limpeza interna alm
da calibrao e tambm verificam se h algum dano interno.
Na dvida, consulte o fabricante da pipeta que possui e solicite orientaes
quanto a limpeza apropriada para o respectivo modelo.
Destaca-se aqui o fato do usurio sempre se atentar para a limpeza do
instrumento, e assim o material sempre estar em boas condies de uso.

Dicas para uma pipetagem correta

Muitas vezes pequenos detalhes fazem total diferena no resultado obtido.

A profundidade de imerso da ponteira, se feita de maneira correta, pode
aumentar a preciso em at 5%. Para pipetas de volume micro, a imerso da
ponteira deve ser entre 1-2mm; j para pipetas de volumes maiores, esse valor
seria de 3 a 6mm.
Quando imergir a ponteira, o ngulo deve ser o mais vertical possvel, no
desviando mais do que 20 da vertical. Um ngulo superior faz com que uma
quantidade maior de liquido seja aspirado.
Pratique um ritmo constante de pipetagem entre uma amostra e outra. Em cada
etapa da pipetagem, lembre-se sempre de ter um ritmo adequado de trabalho
tambm.
Tente dispensar at a ultima gota. Recomenda-se, em grande parte das aplicaes,
dispensar com a extremidade da ponteira contra a parede do recipiente, pois isso
reduz ou elimina a quantidade remanescente de amostra na ponteira tcnica na
qual pode aumentar a preciso em 1% ou mais.

Dicas para uma pipetagem correta

Pr-enxague a ponteira, pelo menos duas vezes com o liquido a ser usado, para
condicionar a parte interna da ponteira e assim evita deixar uma camada de
lquido na ponta da ponteira (tornando o volume expelido menor que o valor
alvo).
Padronize a pipetagem: Aperte o boto at o primeiro estgio, mergulhe a
ponteira no lquido e aspire-o, soltando o boto. Remova a pipeta do lquido e
aperte o boto at o segundo estgio, garantindo a dispensao total do
contedo. Padronizar resulta em preciso e exatido melhores.
Guarde a micropipeta enquanto no estiver utilizando-a. O calor do corpo humano
transferido durante a pipetagem altera o equilbrio de temperatura, podendo levar
a variaes de volume.
Uma m combinao de ponteira e pipeta pode ocasionar resultados imprecisos,
inexatido ou ambos. Use ponteiras de boa qualidade e de preferncia da mesma
marca da micropipeta. Somente utilize marcas alternativas se comprovada sua
compatibilidade com o modelo de micropipeta em questo.

Dicas para uma pipetagem correta

Jamais pipete com a boca utilize sempre um dispositivo para auxili-lo.

Utilize pipetas limpas e secas.
Utilize pipetas com volume total o mais prximo possvel do volume a ser medido.
O fluxo do lquido deve ser contnuo (tanto na aspirao, quanto na dispensao).

Erros mais comuns ao pipetar

No encaixar a ponteira corretamente;

Remover a ponteira antes da completa aspirao;
Trabalhar muito rpido;
Pressionar e soltar o boto de maneira rpida;
No pr-enxaguar a ponteira;
ngulo incorreto na pipetagem;

Concluso
A rotina laboratorial sempre desafiadora e muito importante para o
controle de qualidade de um produto em sua produo, diagnstico de um paciente
ou at mesmo nas etapas de um estudo de pesquisa. O interessante melhorar cada
mais vez mais as tcnicas, a padronizao dos procedimentos e tambm se atentar ao
que h de novo no mercado.
A SPLABOR espera ter contribudo para seu aprendizado, com a divulgao
deste material educativo e de orientao. Faz parte da misso corporativa,
proporcionar contedo e tambm orientar o usurio final para encontrar os materiais
e equipamentos necessrios para a correta aplicao.

Conhea os modelos de pipetas

do portflio SPLABOR!
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Dvidas

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