PESQUISA

FLAVONIDES

Fotos/ilustraes cedidas pelos autores

Farmacologia de flavonides no controle hiperlipidmico em animais experimentais

INTRODUO

Renato Matos Lopes

Mestrando do curso de Agroqumica

Departamento de Bioqumica e Biologia
Molecular
Universidade Federal de Viosa
renato@tdnet.com.br

Tnia Toledo de Oliveira

Doutora, Professora Adjunta do

Departamento de Bioqumica e Biologia
Molecular da Universidade Federal de
Viosa
ttoledo@mail.ufv.br

Tanus Jorge Nagem

PhD, Professor Adjunto do Departamento

de Qumica da Universidade Federal de
Ouro Preto
tjnagen.bh@zaz.com.br

Alosio da Silva Pinto

Mestre, Professor Assistente do Departamento de Veterinria da Universidade

Federal de Viosa
aloisio@mail.ufv.br
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Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento

Desordens coronarianas so uns dos problemas causados pelo acmulo de

colesterol, e tm sido causa de alta taxa de mortalidade no Brasil, Japo, Inglaterra,
Estados Unidos e outros pases (Truswell, 1984).
A aterosclerose e, em particular, a cardiopatia coronria, relaciona vrios
fatores de risco, tais como: idade, sexo, obesidade, estresse emocional, baixos
nveis de colesterol -HDL, fumo, dietas ricas em gordura saturada e ainda
problemas genticos. A importncia de todos esses fatores de risco correlacionada com o aumento dos nveis de colesterol no sangue, assim como as atividades
pr-oxidantes de radicais livres sobre as lipoprotenas de baixa densidade (LDL)
no nvel endotlio. O consumo de gorduras saturadas aumentam os valores do
colesterol na corrente sangnea, impedindo a atividade dos receptores de LDL e,
conseqentemente, dificultando a sua eliminao (Leite, 1994).
Nveis elevados de colesterol-HDL esto associados com a diminuio de risco
da cardiopatia coronariana; seu efeito oposto ao colesterol-LDL, uma vez que
este transporta o colesterol para os tecidos, enquanto o HDL atua no transporte
do colesterol em excesso para o fgado. O quociente colesterol LDL/colesterolHDL um indicativo confivel de risco aterognico. Nas populaes onde so altas
as concentraes tanto do LDL como do HDL, os indivduos com menores nveis
de HDL esto mais susceptveis a padecer de cardiopatia coronariana. Ainda que
os nveis de HDL possam estar condicionados geneticamente, a alimentao um
fator determinante (Feinleb, 1984).
As partculas de HDL facilitam o transporte de colesterol dos tecidos perifricos
ao fgado, para sua excreo. Os cidos saturados no reduzem os nveis de
colesterol-HDL, mas aumentam a concentrao de colesterol-LDL. A maioria das
investigaes epidemiolgicas mostram uma correlao positiva entre as concentraes sricas de triacialgliceris e a cardiopatia coronariana (Feinleb, 1984).
A reduo nas concentraes plasmticas de lipoprotenas LDL, VLDL podem
diminuir o risco do infarto do miocrdio (Lipid Research, 1984).
O esquema 1 apresenta a formao de uma placa aterosclertica. Partculas de
LDL e plaquetas penetram no endotlio e causam leses (1). Fatores de
crescimento liberados pelas plaquetas estimulam as clulas musculares abaixo do
endotlio, causando proliferao no stio da leso. Todo processo acompanhado
pela migrao de moncitos e outras partculas de LDL (2), conseqentemente,
ocorre a formao de clulas espumosas (3). Desenvolve-se, ento uma aglomerao na regio de fosfolipdios, colesterol e clcio e, gradualmente, ocorre o
endurecimento deste, formando salincias fibrosas e resistentes que so as placas
de ateroma.
Como preveno da doena arterial coronariana, comum o uso de frmacos
hipolipemiantes como adjuvantes da dietoterapia para pacientes com dislipoproteinemia. A busca de novos frmacos que possam atuar em uma reduo dos nveis
de colesterol tem sido motivo de novas pesquisas.

FLAVONIDES
Os flavonides compem uma
ampla classe de substncias de origem natural, cuja sntese no ocorre na espcie humana. Entretanto,
tais compostos possuem uma srie
de propriedades farmacolgicas que
os fazem atuar sobre sistemas biolgicos. Conseqentemente, muitas dessas propriedades atuam de
forma benfica para a sade humana. Atualmente, j foram
identificadas mais de quatro mil
substncias pertencentes ao grupo
dos flavonides (Peterson & Dwyer,
1998).
Estruturalmente, os flavonides
constituem substncias aromticas
com 15 tomos de carbono (C15) no
seu esqueleto bsico, sendo compostos fenlicos, que possuem nessa estrutura anis aromticos C6-C3C6. O esqueleto C15 dos flavonides
biogeneticamente derivado do
fenilpropano (C6-C3) e trs unidades de acetato (C 6). Portanto,
flavonides so derivados de benzo-gama-pirona de origem vegetal
(Yokozawa et al, 1997), podendo
haver facilmente interconverso
entre eles (vide figura 1).
A explicao para a existncia
de uma grande diversidade estrutural dos flavonides explicada pelas
modificaes que tais compostos
podem sofrer, tais como:
hidroxilao, metilao, acilao,
glicosilao, entre outras (Koes et
al, 1994).
Consumidos em grandes propores dentro de uma dieta humana regular, os flavonides so encontrados em vegetais, legumes,
frutas, chs de ervas, mel, entre
outros produtos de consumo cotidiano.
Apesar do termo flavonide
derivar do latim flavus, que significa amarelo, observa-se que os grupos flavonis e flavonas so incolores e que a classe das antocianinas
possuem substncias que variam
no seu espectro de colorao do
verde ao azul. A tabela 1 apresenta
algumas das principais classes de
flavonides, assim como alguns dos
seus principais representantes e
caractersticas.

Esquema 1: Formao da
placa aterosclertica

Propriedades farmacolgicas
dos flavonides
Diversos ensaios in vivo e in
vitro vm comprovando e determinando a ampla variedade das atividades biolgicas dos compostos flavonodicos. Segundo Ratty & Das (1998),
algumas dessas propriedades farmacolgicas j foram observadas por
Szent-Gyorgi em 1936. Destacam-se,
dentre outros, os seguintes efeitos
dos flavonides sobre os sistemas
biolgicos: capacidade antioxidativa
(esta constitui a atividade mais elucidada pelos estudos at agora desenvolvidos); atividades antiinflamatria
e de efeito vasodilatador; ao antialrgica; atividade contra o desenvolvimento de tumores, anti - hepatotxica, antiulcerognica; atuao antiplaquetria, bem como aes antimicrobianas e antivirais. Pesquisas recentes demonstraram que alguns flavonides atuam na inibio da replicao viral do agente causador da
Sndrome da Imunodeficincia Hu-

mana HIV (Lin et al. 1997).

Sabe-se que os flavonides podem inibir vrios estgios dos processos que esto diretamente relacionados com o incio da aterosclerose,
como ativao de leuccitos, adeso,
agregao e secreo de plaquetas
(Hladovec, 1986b), alm de atividades hipolipidmicas (Lin et al, 1986)
e aumento de atividades de receptores de LDL (Kirk et al, 1998).
Segundo Anton & Beretz (1990),
as propriedades farmacolgicas dos
flavonides ainda no haviam sido
totalmente avaliadas. Aps uma dcada de avanos nessa linha de pesquisa, pode-se afirmar que novos
estudos toxicolgicos e farmacolgicos devem ser realizados, uma vez
que a ampla diversidade estrutural
desses compostos - bem como a
capacidade de interao com outras
substncias - nos reporta a imaginar
que novas descobertas ainda podem
e devem ser realizadas.
Com o objetivo de se avaliar a
ao hipolipidmica de flavonides e
de corantes naturais em animais experimentais com hiperlipidemia induzida, o laboratrio de Biofrmacos
da Universidade Federal de Viosa
vem desenvolvendo uma srie de
estudos para conhecer o potencial
farmacolgico desses compostos.
A seguir, so descritas algumas
metodologias empregadas pelo laboratrio de Biofrmacos da Universidade Federal de Viosa, utilizando-se
coelhos com hiperlipidemia induzida a partir de uma dieta rica em cido
clico e colesterol ou aplicao de
Triton:
METODOLOGIA GERAL.
Considerando-se um nmero determinado de coelhos machos, albinos, adultos, da Raa Nova Zelndia
(com peso mdio de 2500 200g),
dispostos em gaiolas individuais com
temperatura local que varia entre 22
3 0 C, e taxa de umidade relativa do
ar situada na faixa de 70%. Esses
animais so submetidos a uma dieta
com rao comercial SOCIL, na proporo de 130 g ao dia e gua potvel
ad libitum ( figura 2).
Aps o perodo de adaptao s
condies locais, os animais so orBiotecnologia Cincia & Desenvolvimento

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denados em grupos, de acordo com

o tratamento a ser aplicado: a) Grupo
controle; b) Controle + substncias
indutoras de hipercolesterolemia; c)
Controle + substncias indutoras de
hipercolesterolemia + substncias
teste (flavonides ou medicamentos). Os tratamentos so efetuados
durante perodos predeterminados
de tempo e, normalmente o tratamento dos animais realizado por
via oral atravs de cpsulas (figura 3).
Amostras de sangue so retiradas
antes, durante e aps o tratamento
desses animais para verificao e
acompanhamento dos efeitos dos tratamentos sobre os constituintes lipdicos, o sangue retirado centrifugado a 7100 G por 15, para obteno do
soro. As dosagens sorolgicas so
realizadas e os resultados do colesterol, do colesterol-HDL e dos triacilgliceris so obtidos por meio de Kits
Biolab no equipamento multiparamtrico Aliz (figura 4).
As substncias utilizadas como
indutores das hiperlipidemias so:
colesterol a 1% e cido clico 0,1%
misturados rao, assim como a
aplicao intraperitonial de Triton
WR 1339 na dose de 300mg/kg de
peso corporal do animal, utilizando
como veculo NaCl 0,9%.
Triton tambm conhecido como
tyloxapol, um detergente no aninico de estrutura polimrica da Sigma,
cuja utilizao vem sendo amplamente empregada para promover hiperlipidemia em cobaias (Mathur et
al., 1964; Sharma, 1979; Choi et al.,
1991).

Figura 1: Interconverso dos principais grupos de flavonides.

Adaptado de Domingues (1973)

O flavonide Naringina associado

antocianina e ao carmim (corantes
naturais utilizados na indstria de
alimentos) reduziram em at 70,21%
os triacilgliceris e em 63,01% os
nveis de colesterol em ratos hiperli-

RESULTADOS OBTIDOS
Nossos trabalhos demonstram que
naringenina e chitosan tm efeitos
sobre lipdios no soro de coelhos
com hiperlipidemia induzida por Triton. Certificou-se, inclusive, que a
associao entre naringenina e chistosan foram mais eficazes no controle
do metabolismo lipdico. Os resultados obtidos demonstram que, em um
efeito sinrgico das duas substnciasteste, promovem uma reduo de
71,42% de triacilgliceris, em comparao com o grupo de animais que
apresentaram hiperlipidemia induzida pelo Triton ( Lopes, 2000).
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Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento

FIGURA 2: Coelho da Raa Nova

Zelndia confinado em gaiola
individual durante o tratamento
com a substncia-teste
pidmicos, atravs de Triton. Naringina e antocianinas foram tambm as
responsveis pelo acrscimo de
15,27% de colesterol HDL, quando
comparado aos animais tratados apenas com a rao e o indutor ( Nagem

et al., 1999). Dessa forma, a associaes entre naringina/antocianina e

naringina/carmim demonstraram alta
eficincia na reduo dos nveis de
colesterol e triacilglicerol.
Os flavonides quercetina, morina e o medicamento cido nicotnico,
empregados de forma isolada e associada, apresentaram ao no metabolismo lipdico em ratos machos hiperlipidmicos (Santos et al. 1999a). Os
resultados mostraram uma reduo
de 83,77% de triacilgliceris e 76,89%
de colesterol, quando se empregou
um tratamento conjunto de morina e
cido nicotnico. Quercetina e cido
nicotnico promoveram uma variao positiva em 21,96% para o colesterol-HDL.
O cido nicotnico um medicamento empregado de forma usual no
controle de nveis de lipdios no
organismo. Aes hipolipidmicas
desse medicamento decorrem da inibio da liplise do tecido adiposo,
mobilizao dos cidos graxos, reduo da esterificao dos triacilgliceris no fgado e aumento da lipase

Tabela 1: Principais classes de flavonides e descrio de suas caractersticas bsicas

CLASSES

COLORAO

EXEMPLOS

COMENTRIOS

Antocianinas

Azul, vermelha e
violeta

Cianidina;
Delfinidina;
Peonidina.

Antocianinas esto predominantemente em frutas e flores

e provavelmente foram os primeiros flavonides a serem
isolados provenientes de pigmentos florais, conforme
indicam seus prprios nomes. So usadas como corantes.

Flavanas (mono, Incolor

bi e triflavans)

Catequina;
Epicatequina
Luteoforol;
Procianidina.
Theaflavina

Flavanas so encontradas em frutas e chs (verdes ou

pretos). Biflavanas so encontradas em frutas, lpulo,
nozes e bebidas como chs e gua de coco. O sabor
peculiar de algumas bebidas, frutas, chs e vinhos
devido, principalmente, presena das biflavanas.

Flavanonas

Incolor para um
amarelo plido.

Hesperidina;
Naringenina.

Flavanonas so encontradas quase que exclusivamente em

frutas ctricas.

Flavonas

Amarelo plido

Flavonas so encontradas quase que exclusivamente em

frutas ctricas. Mas tambm em cereais, frutas, ervas e
vegetais. Conferem o pigmento amarelo em flores. Os
compostos mais comuns so a apigenina e a luteolina.

Flavonis

Amarelo plido

Isoflavonides

Incolor

Apigenina;
Luteolina;
Diosmetina;
Tangeretina;
Nobiletina
Quercetina;
Rutina;
Mircetina;
Kaempherol
Daidzena;
Genistena.

Os flavonis esto presentes em diversas fontes, sendo

predominantes em vegetais e frutas. A quercetina o
principal representante da classe.
Isoflavonides so encontrados quase que exclusivamente
em legumes, particularmente na soja.
Fonte: Adaptado de Peterson & Dwyer, 1998

Nagem et al, 1995; Santos et al,

1999c).
CONCLUSES

FIGURA 3: Recipiente lacrado

e identificado contendo as
cpsulas com a substncia-teste
a ser utilizada durante o ensaio
biolgico
lipoprotica ( Goodman & Gilmans,
1996).
Diversos compostos flavonodicos de diferentes plantas, que foram
extrados, isolados, identificados e
quantificados, foram transformados
quimicamente e empregados em ensaios biolgicos para avaliaes dos
seus potenciais farmacolgicos sobre
lipdios em ratos (Santos et al, 1999b;

Os resultados obtidos demonstram redues estatisticamente significativas para os nveis de colesterol e de triacilgliceris, assim
como aumento dos valores de colesterol-HDL, destacando-se, inclusive, efeitos sinrgicos dos compostos flavonodicos testados.
Dessa forma, fundamental o desenvolvimento de novas pesquisas sobre o potencial dos flavonides no tratamento e na preveno
das hiperlipidemias, uma vez que
a obteno de novos resultados
serviro de instrumentos para a
utilizao desses produtos na preveno de doenas cardiovasculares.
As interaes com outros ncleos de pesquisas para o desenvolvimento de novas metodologias de anlises permitiro aprofundar os conhecimentos sobre os

FIGURA 4: Equipamento
Aliz (Analisador Automtico
de Bioqumica), capaz de
realizar anlises de concentraes de constituintes
sangneos, aproximadamente 180 testes/hora
mecanismos de aes desses compostos naturais, assim como obter
novas avaliaes de suas propriedades farmacolgicas.
Evidencia-se tambm a importncia e a aplicabilidade de avaliaes
de toxicidade de flavonides sobre
sistemas biolgicos. Essa afirmao
reside no fato de que ensaios toxicolgicos permitiro o emprego de doses
Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento

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seguras dos flavonides como frmacos.

O laboratrio de biofrmacos da
Universidade Federal de Viosa possui interesse em interagir com outros ncleos de pesquisa, que, porventura, tenha como objetivo estudos farmacolgicos e toxicolgicos
de flavonides, corantes naturais ou
outros produtos de origem natural.

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