FISIOLOGIA DAS PLANTAS CULTIVADAS/PPGA PRTICA DE LABORATRIO N 1 - 2016

DETERMINAO DO POTENCIAL DE GUA PELO MTODO DA CMARA DE PRESSO

(BOMBA DE SCHOLANDER)

1.0 INTRODUO:
SCHOLANDER et al. (1965) estabeleceram o uso moderno de presso para avaliar as
relaes hdricas em tecidos vegetais. Anteriormente, DIXON (1914) tentou utilizar este mtodo,
mas devido a problemas, como exploses, as experincias foram abandonadas.
Este mtodo requer a aplicao de uma presso pneumtica ao tecido, para aumentar
artificialmente seu . A presso necessria para elevar o do tecido para zero aceita como o
negativo do do tecido antes da pressurizao. Para a medio do com base na presso do
balanceamento (ou seja, a presso necessria para forar a gua do tecido para fora da superfcie
cortada do pecolo) coloca-se o rgo destacado da planta na cmara de presso, com a
extremidade onde est o xilema estendendo-se para fora da cmara, envolta pelo sistema de
vedao.
Aplica-se uma nica presso com N2 ou CO2 at o aparecimento da seiva na superfcie do
corte. A presso necessria para produzir a exsudao considerada igual ao do tecido, no
momento do corte.
Se a gua do xilema est sob presso, um corte no pecolo ou colmo ir expor esta gua a
presso atmosfrica e elevar o potencial de presso a zero. Esta presso foi alterada
grandemente, mas a cmara de presso eleva esta presso, a presso original (antes do corte).
Com a cmara de presso, a coluna de gua forada a voltar para a superfcie, atravs da
presso exercida pelo gs. Assim, a presso exercida (requerida) para o aparecimento da gota,
a mesma presso da tenso original do xilema, mas com sinal contrrio.
IMPORTANTE: A leitura no visor expressa em bar, logo, para converso em MPa, divide-se o
valor encontrado no visor por 10.

2.0 MATERIAIS NECESSRIOS:

Cmara de Presso (ou Bomba de Scholander)
Folhas ou colmos (ramos)
Lmina de barbear (de preferncia) ou estilete
3.0 CUIDADOS
No desconecte a mangueira quando estiver sob presso, sempre verifique antes, se o
manmetro no tanque de N2 est zerado. A presilha na mangueira, prxima ao tanque,
poder ser afrouxada, para avaliar a presso.
Sempre teste a vlvula de segurana antes de operar o instrumento.
No use a vlvula de controle de vazo para desligar o instrumento. Isto poder danificar a
base da mesma, impossibilitando futuras mudanas graduais no nvel de presso.
Mantenha-se afastado da abertura da cmara, onde est a amostra. Pecolos podem ser
expelidos, com violncia, devido a presso. Como dica, pode-se utilizar culos especial no
momento da realizao da leitura.

4.0 MEDIO DA TENSO NO XILEMA

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4.1 Procedimento resumido:

A. Selecione folha ou pecolo de tamanho suficiente para se ajustar a cmara e corte com lmina
afiada. Faa apenas um corte liso, para no obter valores errneos de leitura.
B. Coloca-se o pecolo ou folha na borracha presente na tampa da cmara. Aps, prende-se a
tampa na cmara.
C. Confirme se a tampa realmente est seguramente encaixada.
D. Enquanto observa o colmo ou folha cortada, libere o gs. Quando da exsudao da seiva na
superfcie do corte, feche a sada do gs.
E. Realiza a leitura no visor e anote, com sinal negativo. Cuidado com a unidade de medida
utilizada!!!
F. Se aps a liberao do gs e antes da leitura, iniciar borbulhinhas no local do corte, isto indica
que j passou o momento correto da leitura.
4.2 Ajustes preliminares na cmara de presso:
A. Desprenda a tampa. O anel de selagem poder estar muito preso inicialmente. Mova a tampa
para frente e para trs vrias vezes e ento, remova o anel. Verifique se o anel est limpo e bem
lubrificado.
B. Insira uma rolha de borracha adequada na tampa e instale-a na cmara.
C. Conecte as extremidades da mangueira cmara a ao tanque de N2 (Presso mxima de 2.200
psi)
D. Mova a vlvula de controle no instrumento para a posio de desligamento.
E. Abra a vlvula do tanque de N2. Meia volta ou uma volta geralmente suficiente.
F. Examine a vlvula de presso. Instale e gire a tampa no sentido horrio at o fim da rosca. Ato
contnuo, gire-a em 15o, no sentido anti-horrio, de maneira que a roda com salincia pressione o
mbolo da vlvula de segurana para baixo.
G. Gire a vlvula de operao para a posio de pressurizao da cmara. A vlvula de segurana
se abrir antes que a presso na cmara atinja 200 psi. A presso na cmara cair para prximo a
zero.
H. Gire a vlvula de controle para a posio de exausto, pressione o embolo da vlvula de
segurana e teste novamente. Se a vlvula de segurana no funcionar a 25 psi ou menos,
remova o parafuso de reteno e verifique se o mbolo apresenta problemas. Mantenha o anel de
vedao do mbolo sempre bem lubrificado.
I. Ajuste a vlvula de vazo. Gire a tampa no sentido horrio, at o fim. Ao mesmo tempo, o
mbolo da vlvula de segurana da tampa ser empurrado para baixo pela roda com salincia.
J. Gire a vlvula de controle para pressurizar a cmara.
K. Ajuste a vlvula de controle de vazo at que a presso na cmara aumente at a taxa
desejada. A taxa poder ser mudada a qualquer momento, mesmo durante as medies.
L. Use taxas baixas para plantas sob baixo estresse hdrico.
M. Gire a vlvula de controle para a posio de exausto e remova a rolha de borracha da tampa.
4.3 Procedimento especfico:
A. Destaque uma folha, juntamente com o pecolo, usando lmina afiada. Quanto mais lisa a
superfcie do corte, melhor.
B. Insira, imediatamente, o pecolo em uma rolha de borracha com orifcio central e pressione a
rolha na abertura da tampa da cmara, com a ponta do pecolo, ficando de fora em comprimento
suficiente para visualizao de exsudaes. Observe que:
a) A insero de tecidos frgeis ou suculentos pode ser conseguida com o uso de uma ferramenta
apropriada (disponvel comercialmente)
b) Selecione uma rolha com furo em dimetro apropriado para permitir um encaixe de frico.
C. Coloque a tampa na cmara e gire-a no sentido horrio at o fim da rosca.

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D. Gire a vlvula de controle para a posio cmara. Observe a superfcie do corte no pecolo.
Use lupa manual para rgos pequenos. Ajuste a vlvula de vazo, conforme necessrio.
E. Gire a vlvula de controle para a posio de desligamento, quando um filme de gua aparecer
na superfcie do corte. A exsudao , geralmente, acompanhada por uma mudana na cor do
corte de esbranquiado para escuro (marrom) e aparncia espelhada. Pequenos vazamentos de
gs em volta do pecolo no so objeto de alarme.
F. Anote a presso do manmetro. Ela equivale em sinal trocado, tenso existente no xilema.
G. Gire a vlvula de controle para a posio exausto. Remova a tampa da cmara e descarte a
amostra. O instrumento est pronto para a prxima medio.
4.4 Procedimentos aps as medies:
A. Feche a vlvula do tanque de N2.
B. Faa a exausto da presso remanescente na mangueira, girando a vlvula de controle para a
posio cmara, na medida em que a tampa removida. Abra a vlvula de vazo para apressar
o processo.
C. Certifique-se de que a mangueira no est pressurizada. Desconecte a rosca que prende a
mangueira ao tanque e, em seguida, o conector da mangueira cmara de presso.
4.5 Troca da pea de insero da tampa:
A pea de insero da tampa pode ser trocada, para se obter encaixe de pecolos ou
hastes de dimetro variado. Para isso:
A. Remova os quatro parafusos de reteno na tampa da cmara.
B. Certifique-se de que os quarto anis de borracha para vedao esto no lugar certo, no corpo
da tampa. Caso contrrio, haver vazamento.
C. Instale a insero de tamanho desejado.
D. Encaixe os quatro parafusos de reteno por meio da nova pea d insero e aperte bem, mas
sem excessos.

5.0 REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS

ROSS, C. W. Plant Physiology Laboratory Manual. Belmonte, Califrnia: Wadsworth Publishing
Company, Inc., 1974.
PASSOS, S. P. Mtodos analticos e laboratoriais em fisiologia vegetal. Coronel Pacheco:
EMBRAPA-CNPGL, 1996.

6.0 QUESTES:
1) Voc acha que pode haver qualquer diferena se realizarmos a medio do potencial de gua
do xilema durante diferentes horrios do dia? Explique.
2) Voc esperaria o mesmo potencial de gua para todas as folhas de uma rvore alta? Explique.
3) As clulas do parnquima de algumas folhas crescem absorvendo gua de clulas do xilema,
que apresentam um potencial de gua de -20 bars (-2 MPa) ou menos. Explique como estas
clulas podem absorver gua de uma fonte com to baixo potencial hdrico.

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