ASPECTOS GERAIS DA VACINA DE TERCEIRA GERAO

Joleandro Silva Santos; Ana Julia Thomazini Lobeiro; Bruno Maziero Vieira;
Jssica Andrade; Adriana Piccinin

Discentes da Faculdade de Biomedicina FSP Avar/SP; Docente da Faculdade de Biomedicina

FSP Avar/SP

Email: joleandro.ssantos@gmail.com

INTRODUO
Um dos impactos causados pela revoluo biotecnolgica moderna foi uma
mudana significativa na maneira como pensamos e desenvolvemos novas vacinas. Tais
mudanas refletem avanos na descoberta de novos antgenos, adjuvantes, vetores ou
sistemas de entrega (DINIZ; FERREIRA; 2010).
Nas ltimas dcadas, os avanos na tecnologia de vacinas permitiram a
introduo de novas estratgias para a obteno e produo de antgenos, assim como
foram otimizadas novas maneiras de se administrar e apresentar esses antgenos para as
clulas do sistema imune. Essas estratgias abriram caminhos para inovaes,
particularmente no contexto do desenvolvimento de vacinas mais seguras, eficazes e
polivalentes (JUNIOR; 2004).
Entre estas esto as vacinas, consideradas de segunda gerao, de sub-unidades
constitudas de antgenos purificados ou recombinantes provenientes da cultura dos
agentes infecciosos, ou obtidos por meios sintticos (JUNIOR; 2004).
Mais recentemente, surgiram as vacinas gnicas ou de terceira gerao, onde os
genes ou fragmentos de genes que codificam antgenos potencialmente imunizantes so
carreados por DNA plasmidial (JUNIOR; 2004). Entre as vantagens dessas vacinas est
a maior facilidade no controle de qualidade, a estabilidade temperatura ambiente e
apossibilidade de serem liofilizadas. Esses aspectos facilitam a utilizao das mesmas
em campanhas de vacinao. (BRAZ; et al. 2014).

OBJETIVO
O objetivo do trabalho se fundamenta em apresentar alguns conceitos sobre a
vacina de terceira gerao, seu mecanismo de ao, alguns vetores envolvidos e
perspectivas sobre avanos na pesquisa e desenvolvimento de vacinas.
DESENVOLVIMENTO
A vacina de DNA foi descrita em 1990, quando o plasmdeo contendo um gene
reprter que codifica a -galactosidase expressou a protena aps a inoculao direta no
msculo de camundongos. At ento, acreditava-se que o DNA livre seria rapidamente
degradado e no seria aplicvel para imunizao (WOLFF; et al. 1990).
A comprovao do mtodo ocorreu em 1993 pela demonstrao da eficcia de
uma vacina de DNA contra Influenza A em ratos (ULMER, 1993). Nesse estudo foi
realizada a insero de uma construo plasmidial codificando uma nucleoprotena de
H1N1 porvia intramuscular. Os animais imunizados foram expostos a doses letais de
H3N2 e 90% deles sobreviveram. Um aspecto importante observado foi a induo de
ambas as respostas humoral e celular, pela deteco de linfcitos T citotxicos e
anticorpos especficos para o antgeno (HASAN; et al. 1999).
A terceira gerao de vacinas parte de um conceito inovador que a diferencia de
uma forma radical das outras geraes vacinais. Sem dvida, mais do que uma vacina
especfica, as vacinas DNA representam uma forma alternativa de desenvolver
imunoterapias viabilizadas graas introduo das tcnicas de DNA recombinante
pesquisa vacinal (DINIZ; FERREIRA, 2010). Nessa, ao invs da utilizao de uma
protena ou um vrus completo inativado, como se faz nas vacinas de primeira e segunda
geraes, o paciente recebe a informao gentica que codifica uma protena tpica do
agente agressor, passando a expressar permanentemente a protena exgena,
estimulando seu prprio sistema imune (LINDEN, 2010).
Um vetor ideal deve carrear grande capacidade genmica; ser de fcil produo;
direcionar a resposta imune para tipos especficos de clulas; no permitir replicao
autnoma do DNA; garantir uma expresso gnica por longo perodo; no ser txico; e
no induzir reaes de tolerncia e auto-imune nos hospedeiros
Os vetores virais e plasmodiais so os mais utilizados na transferncia gnica
direta.Os vetores virais so de fcil propagao entre as clulas, eficazes na ativao
tanto da resposta imune humoral quanto celular e requerem muitas vezes, apenas uma
aplicao. Entretanto, tm a desvantagem de serem derivados de patgenos;
apresentarem risco de mutagnese insercional; inativao pelo sistema complemento; e
serem contra-indicados para pessoas com imunodepresso.
 Um dos vetores utilizados nas vacinas de DNA o plasmdeo bacteriano,
desenvolvido originalmente para expresso in vitro de protenas em clulas de
mamferos (DAVIS; MCCLUSKIE, 1999).
Os plasmdeos apresentam maior segurana biolgica, baixo custo, fcil
produo, relativa estabilidade e capacidade genmica de 2 a 19 kilobases, que podem
ser transferidos para as clulas musculares.
Os plasmdeos utilizados como vacinas devem conter os seguintes elementos
essenciais: (a) um promotor de expresso para clulas de mamferos; (b) sinal de
poliadenilao (poliA) do transcrito (mRNA), (c) um marcador de seleo; (d) uma
origem de replicao procaritica e (e) stio de mltipla clonagem onde inserido o
gene de interesse (KANO, 2007). Aps a clonagem do gene no plasmdeo, eles so
introduzidos em bactrias hospedeiras, geralmente Escherichia coli, com o objetivo de
produzir plasmdeos em larga escala e ter quantidade suficiente de DNA para vacinao
(SILVA, 1997).
Esse procedimento de produo relativamente simples e menos oneroso do que
aquele envolvido na obteno de protenas recombinantes como no caso das vacinas de
segunda gerao. Assim, a imunogenicidade e eficcia dessas vacinas tem sido
analisadas em um grande nmero de sistemas e os resultados de estudos pr-clnicos
tem dado suporte aos estudos clnicos em humanos para uma variedade de doenas
como o cncer (LEITNER; YING; RESTIFO, 1999).
A hiptese sobre o mecanismo de induo da imunidade mais aceito atualmente
a de que aps a inoculao intramuscular, o DNA incorporado s clulas musculares
(micitos) e/ou clulas apresentadoras de antgeno (APC). O DNA plasmidiano
internalizado pela clula e a transcrio do imunogene iniciada utilizando o
maquinrio celular do hospedeiro. Em seguida, o RNA mensageiro traduzido para que
ocorra a sntese do antgeno proteico relacionado ao agente infeccioso. Alguns dos
antgenos produzidos pelas clulas musculares so secretados para o espao
extracelular, onde podem tanto estimular linfcitos B a produzir anticorpos especficos
como ser endocitados por outras clulas apresentadoras de antgenos (KANO;
VIDOTTO; VIDOTTO, 2007).
Diferentemente das vacinas inativadas ou de subunidade, as vacinas de DNA
resultam em uma exibio antignica via molculas de molculas de classe I e II que
so codificadas por genes do complexo principal de histocompatibilidade (MHC I e
MHC II), ativando linfcitos T CD4+, TCD8+ (KANO; VIDOTTO; VIDOTTO, 2007).
 As vacinas de DNA so, portanto, capazes de induzir ambos os tipos de
imunidade protetora, humoral e celular, com a estimulao de linfcitos T CD4+ e T
CD8+, sem alguns dos possveis riscos associados s vacinas com organismos vivos
(HENKE, 2002).
Atualmente, esto listados 25 estudos clnicos em andamento para avaliar
vacinas de DNA no banco de dados americano Clinical Trials, nenhum deles
desenvolvido no Brasil. A maioria (68%) destes ensaios est investigando vacinas
contra cncer (48%) ou o HIV (20%). Quase metade (42%) de vacinas contra o cncer
sendo investigados so direcionadas para o tratamento do cncer cervical. Os restantes
32% de ensaios clnicos registrados ou ativos esto investigando vacinas para hepatite B
e C, gripe e Papilomavrus Humano (HPV) (BRAZ; et al. 2014).
Os avanos no design de antgenos, as melhorias nas formulaes, a incluso de
adjuvantes moleculares e mtodos fsicos de entrega tem aumentado a imunogenicidade
das vacinas de DNA. Essas melhorias na performance tem impulsionado o interesse
nessas vacinas, o que refletido pelo grande nmero de pesquisas investigando suas
aplicaes para preveno e tratamento de doenas. Ainda assim, a busca por vacinas
cada vez mais seguras e eficientes continua com diversas pesquisas na rea sejam de
vacinas de primeira segunda ou terceira gerao. (FERRARO; et al. 2011).
H um esforo coletivo entre os produtores nacionais visando a nacionalizar a
produo de novas vacinas, no menor prazo e ao menor preo, de sorte a possibilitar sua
introduo no calendrio vacinal. A Poltica Nacional de Biotecnologia e o Programa
Nacional de Competitividade em Vacinas (INOVACINA) so iniciativas nessa direo.
Esses dois marcos definem quais as vacinas prioritrias, o que permite induzir projetos
de desenvolvimento orientados para produtos. Fontes de fomento esto sendo
especialmente criadas para esses projetos e, por seu turno, os produtores nacionais esto
reformando seus modelos de gesto adotando ferramentas para inovao. O cenrio
promissor, mas fundamental garantir que as polticas e programas para esse segmento
sejam mantidos para que o Brasil se torne autnomo no desenvolvimento e produo
das vacinas que interessam ao pas (BRAZ; et al. 2014).

CONCLUSO
A biotecnologia tem contribudo de forma decisiva para o aprimoramento de
processos relacionados ao desenvolvimento e produo de novas vacinas ou ao
aprimoramento de vacinas j existentes, afim de que se tornem mais seguras e eficazes.
 A disponibilizao de vacinas profilticas e a perspectiva de desenvolvimento
das mesmas com efeito teraputico para tumores associados ao HPV principalmente
ilustram de forma clara, o impacto que a biotecnologia moderna traz para o campo da
pesquisa vacinal. Alm da atuao diretamente neste campo, a produtividade de novas
vacinas vem sendo de extrema importncia para outras enfermidades.
A continuidade e incentivo das pesquisas so essenciais, tornando-se um fator
inovador tanto no tratamento de diversas doenas, quanto no auxlio na medicina
humana.

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