2012

cglubulkp

Guia de Cultivo
Psilocybe Cubensis

Fonte: http://www.cogumelosmagicos.org/comunidade/

01/08/2012
Este guia consiste em um agrupamento de textos, imagens e técnicas de autoria dos
membros do Cogumelos Mágicos, Shroomery e minha.

A cada cultivo, independente de sua experiência, algo novo será compreendido,

portanto, esse é apenas um guia e não uma utopia na cultura de Cubensis.

Sumário

Apresentação Glove Box Hidratação de esporos Culturas Líquidas PF Tek Milho

Esterilização Inoculação Incubação Agulhas Crescimento X Temperatura Grain to Grain
Casing Terrário
Bulk Carimbos Carimbos em cotonetes Clonagem/Isolamento em papelão
Clonagem/Isolamento em meio BDA Armazenagem de Culturas Secagem Pastilhas
Contaminantes Comuns Aspectos Farmacológicos: Dosagem Outdoor In vitro

Apresentação
Os cogumelos eram usados no México, Guatemala e Amazonas em rituais religiosos e
por curandeiros. Os Maias utilizavam um fungo ao qual chamavam, na língua nahuátl,
teonanácatl (a "carne de deus") há já 3500 anos. No seu território foram
encontradas figuras de pedra com representações de cogumelos datadas de 1000 a.C. e
500 d.C. As primeiras referências ao seu consumo foram encontradas em livros
(1502), nos quais era mencionado o uso de cogumelos em rituais nas festas de
coroação de Moctezuma, o último imperador Azteca. A redescoberta do cogumelo
sagrado dos Maias - e o acesso à sua consumação ritual por R. Gordon Wasson e sua
esposa, a partir de 1953, na Sierra Mazateca, depois a colheita sistemática, a
cultura em laboratório e a análise detalhada das diferentes espécies de cogumelos
lamelares do gênero Psilocybe, sob os auspícios do Prof: Roger Heim, do museu de
História Natural de Paris, representam um acontecimento primordial para todas as
pessoas interessadas numa abordagem ao domínio complexo das plantas adivinhatórias.
Elas dão acesso às experiências iniciáticas que remontam a mais alta antiguidade e,
sem dúvida, até mesmo à pré-história.
O químico suiço Albert Hofmann que descobriu o LSD, foi também o primeiro a extrair
psilocibina e psilocina dos cogumelos entre 1957 e 1958. Nos anos 70, o LSD e a
psilocibina, entre outros, foram fundamentais para a Contracultura e o movimento
Hippie, visando a "libertação da mente", seguindo as idéias dos beats e de Timothy
Leary, um psicólogo proponente dos benefícios terapêuticos e espirituais do LSD e
da psilocibina. Atualmente, estudos comprovam possibilidades terapêuticas da
psilocibina. Em um deles, pessoas que receberam a psilocibina demonstraram uma
personalidade mais “aberta” após a sua experiência, um efeito que persistiu por
pelo menos 14 meses.
Timothy Leary e sua primeira experiência "Durante as cinco horas seguintes,
encontrei-me arrastado pelo desfrutar de uma experiência que poderia tentar
descrever graças às numerosas e extravagantes metáforas, mas que foi, antes de tudo
e sem dúvida alguma, a mais profunda experiência religiosa da minha vida (...)
Descobrir que o cérebro humano possui uma infinidade de potencialidades e pode
operar em dimensões de espaço-tempo inesperadas me transfigurou por completo;
convenci-me, sem qualquer sombra de dúvida, que acabava de despertar de um longo
sono ontológico." Relato de Gordon Wasson

"Está escuro. Todas as luzes foram apagadas. Brasas ardem nas pedras da lareira.
Madeira de Copal perfumada se consome num caco de cerâmica. Tudo está calmo. A
cabana, a choça, fica afastada da aldeia. A voz de Maria Sabina pira na cabana(...)
Tudo o que se vê naquela noite se banha na claridade da origem: a paisagem, as
casas, os utensílios de uso diário, os animais, tudo é calmamente irradiado pela
luz primordial; dir-se-ia que as coisas apenas acabam de serem produzidas pelo
criador! Esta novidade total - dir-se-ia a aurora da criação - o submerge e o
envolve, o dissolve na sua beleza inexplicável (...) Seu espírito está livre, você
vive uma eternidade numa noite, vê o infinito no grão de areia. O que você vê e
escuta grava-se na sua memória, é gravada ali para sempre. Enfim, você conhece o
inefável, sabe que o é o êxtase! (...) Uma simples planta abre as portas, libera o
inefável, traz o êxtase. Não é a primeira vez na história da humanidade que as
formas mais humildes de vida dão a luz ao divino. Por mais desconcertante que seja,
a maravilha que anuncia merece ser ouvida pelos homens."

Glove box
Caixa plástica; Silicone; Luvas de látex; Tubo de Pvc 100mm.
Desinfete a glove box inclusive suas entradas para luvas e tudo o que for para
dentro dela com água/água sanitária, um copo de água/uma colher de chá de água
sanitária. Sempre que precisar eliminar microorganismos indesejáveis, poderá usar a
água sanitária diluída, esperando certo tempo para que ela possa agir.

Hidratação de esporos
Material:
- Pote coletor. - Água destilada (farmácia) - álcool - Papel alumínio Glove box

Procedimento:
Ferva água por dez minutos. Ainda “fervendo” use-a para esterilizar o pote coletor
(ou copo de cachaça) e a seringa/agulha. Sugue a água e ejete por três vezes,
deixando, na terceira vez, a água dentro da seringa por dois minutos e também no
copo de cachaça. Esterilize também um copo normal, assim você poderá cobrir o copo
de cachaça com este copo maior dentro da glove, evitando contaminantes. Coloque a
água destilada no copo de cachaça.

Abra o carimbo e raspe (com algo esterilizado) parte (¼) dos esporos no pote
coletor. Sugue a mistura com a seringa, injete de volta e sugue novamente, coloque
a proteção da agulha e embrulhe em um papel alumínio desinfetado com álcool.
Guardar na gaveta da geladeira próxima ao congelador (hidratação). Deixe por, no
mínimo, um dia antes de usar. (Carimbos velhos precisam de uma hidratação mais
efetiva – 7 dias a um mês). Vire de lado, de vez em quando, para os esporos não
ficarem grudados na lateral da seringa.
Cultura Líquida

Material Glucose de milho (lojas de confeitaria/artigos p festa) conhecida também

como dextrose Água mineral Frascos para CL:

Procedimento Medidas: Não utilize mais do que 4% de açúcar nas Culturas Líquidas.
Uma medida de 2% funcionou bem. ������ �� á��� ������� = (� ������� ÷ 0,03) − � ������ ������ ��
á��� ������� = ������� �� ���ℎ� ( �� �) ÷ 0,03 Se tiveres uma balança de precisão, prefira
usar a glucose de milho, pois os fungos se dão melhor com seu açúcar do que com a
glicose de farmácias. Misture bem e preencha os copos. Importante: Preencha somente
1/3 dos copos com o líquido, pois é necessário bastante oxigênio dentro dos copos
para um crescimento saudável do micélio. Você pode colocar algum objeto dentro do
pote para ajudar a “cortar” o micélio quando estiver bem desenvolvido. Panela de
pressão neles por 30 minutos. Não fiz furos nas tampas de alumínio, apenas apertei
com as mãos. Agora espere esfriar completamente dentro da panela. Agite
violentamente os copos, por 1 minuto. Isso irá trazer oxigênio de volta à água. A
panela
de pressão tira a maior parte do oxigênio da água. É por isso que é deixado o
espaço dentro do copo, para ter oxigênio suficiente para o bom desenvolvimento da
cultura. Deixe em temperatura de colonização. Uma vez por dia, se quiser acelerar o
crescimento do micélio, agite cuidadosamente e devagar as culturas (formando um
redemoinho). Deve observar o crescimento entre 3 a 7 dias. Começa com "pequenas
nuvens de algodão". É dificil dizer com certeza se uma cultura líquida está ou não
contaminada. Mas dá pra se basear em teorias. Por exemplo: Essa cultura tem 99% de
chances de ser saudável: O micélio é vigoroso e unido, o restante da água é
transparente. O certo é somente usar CL com uma ótima aparência. Cores diferentes
dentro do copo, e água esbranquiçada é contaminante. Quando for usar as CL’s,
deixe-as fora da geladeira por 2 dias antes de inocular.

Observação:
Uma CL pronta, já com micélio bem desenvolvido (2 semanas) pode ser guardado em
geladeira (baixar temperatura para estagnar o crescimento do micélio, nunca no
freezer) por no máximo 7 meses. O ideal é 3 meses.
PF TEK
Ingredientes: -Vermiculita -Alpiste ou arroz integral (de preferência com casca)
-Copos largos com boca larga -Papel Alumínio -Desinfetante (álcool)

Procedimento: Umedeça um pouco a vermiculita e esterilize no microondas em potência

máxima por 3 minutos. Bata o arroz no liquidificador, até que muitos grãos sejam
quebrados. Não deixe que vire uma farinha fina, o ideal do substrato é que fique
bem aerado. Utilize a proporção de 2/1 de vermiculita/alpiste e umedeça com água
mineral: expremendo o substrato, algumas gotas devem cair.
Coloque uma fina camada de vermiculita seca no fundo do copo, preencha-o com
substrato até mais ou menos um dedo (precisamente será do tamanho tal qual a agulha
da seringa que for usar) da boca. IMPORTANTE: Limpe as bordas de dentro e de fora
do copo com um papel toalha e um bom desinfetante, agora preencha o que falta com
vermiculita esterilizada. Faça tampas de papel alumínio e esterilize em pp por uma
hora.

Fure cuidadosamente o papel alumínio rente a parede do pote e empurre a agulha até
ultrapassar 1 cm o selo de vermiculita e injete uma quantidade do conteúdo da
seringa. Faça 4 furos equidistantes, isso acelera o processo de colonização. Dunk
and Roll: Antes de tirar o bolo colonizado do pote injete 100 ml de água mineral.
Use seringa como na inoculação. Cubra os furos com durex coloque o pote dentro de
um saco e deixe 24 horas dentro da geladeira. Nesse período o bolo vai absorver
toda água injetada e o frio para o crescimento do micélio. Depois do dunk, role o
bolo sobre vermiculita esterilizada e seca (É melhor usar seco porque prende mais
fácil no bolo). Logo após use névoa (umidificador ou borrifador) para umedecer a
vermiculita. Esse método permite que o bolo frutifique de todos os lados mais
facilmente. Double casing: Técnica para umidificar bolos que consiste em colocar
duas camadas de vermiculita úmida, uma em cima e outra em baixo do bolo. A umidade
da vermiculita hidrata pouco a pouco o bolo. Depois de cada flush, relimpe o bolo e
coloque vermiculita nova. O que isso faz é prevenir contaminantes de crescer. Os
bolos permanecem incontaminados e frutíferos por uns bons dois ou três meses.
Depois que o bolo foi relimpo, posicione-o em uma camada inferior umidecida de
vermiculita (em um prato ou em uma tampa). Então, vermiculita seca é colocada no
topo do bolo e suavizada para uma camada de cerca de 3mm. Uma camada fina é o
melhor caminho porque os cogumelos podem crescer facilmente sem precisar atravessar
uma camada espessa de vermiculita. Borrife a camada do topo algumas vezes. Faça
isso uma ou duas vezes por dia, quando você aera o bolo. Isso vai alimentar os
bolos com água gradualmente. Os bolos irão se tornar brancos novamente. Logo que
você visualiza as primórdias surgindo na camada de casing, deixe de borrifar a
camada diretamente e permita que as primórdias cresçam. É por causa disso que é
importante não usar uma camada fina no topo do bolo. Assim que as primórdias
começam a aparecer, molhar as mesmas pode matá-las.
Milho
1º morte aos micros Ferva o milho por 10 minutos, desligue o fogo e deixe 24 horas
de repouso, panela fechada.

2º morte aos micros que eclodiram dos esporos Aqueça até ferver, desligue o fogo e
deixe 24 horas de repouso.

3º morte aos remanescentes. Aqueça até ferver, desligue o fogo e espere esfriar.
Passe para o escorredor e cubra com um prato, deixando-o na geladeira frost (não no
freezer) por 24 horas. A geladeira serve para secar o grão.

4º esterilização ( morte a todos micros presentes) Distribua em copos e esterilize

por 2 horas em panela de pressão.
Colocando água até cobrir o milho e sempre usando fogo baixo, não precisa adicionar
água no decorrer do processo. São muitas etapas de aquecimento, então, não deixe
por tempo excessivo, o milho pode amolecer demais e virar uma papa.

Esterilizando o Substrato:
Para fazer a tampa, costumamos cortar três cubos de papel alumínio, 2 folhas para a
tampa que será permanente e 1 para ser retirada no momento da inoculação e
recolocada rapidamente logo após o ato ser consumado, junto com o esparadrapo. Faz-
se um pequeno furo nas duas tampas de alumínio, para que o vapor possa sair. A
terceira tampa fica semiaberta. Pode-se usar as próprias tampas metálicas dos
frascos furadas ao meio, com um filtro tyvek por baixo delas como mostra a foto no
final do texto. Esse material é encontrado facilmente em lojas de materiais de
segurança a baixo custo (toucas de tyvek, etc). A vantagem é que o tyvek permite
trocas gasosas entre o substrato e o meio, acelerando a colonização, além de aderir
melhor ao esparadrapo por sobre o furo de inoculação.
Arrume os potes na panela de pressão. Coloque água até começar a flutuar, adicione
um pouco mais. É necessário um cuidado para que a água que cai nos copos não entre
nele. Um desses cuidados é não fazer o furo no centro da tampa de alumínio pois,
por ficar mais baixo que as bordas, acaba deixando a água entrar, o que prejudica e
atrasa a colonização. Feche a panela sem a válvula. Quando começar sair vapor,
continuamente pelo pico, coloque a válvula. O tempo vai depender do substrato;
milho: 2 horas, Bolo pf: 1 hora e CL’s: 30 minutos. É recomendável que você os
deixe esfriar na própria panela de pressão, de um dia para o outro (7 – 12hrs).
Inoculação:
Limpe a panela, externamente, com solução de água sanitária diluída e pano fino.
Abra a panela retire o pote, limpe-o com álcool e passe para a glove box. Retire a
primeira tampa de papel alumínio do pote e reserve. Após retirar a seringa com
esporos do papel alumínio, passe álcool em toda ela e faça furos no papel alumínio
do pote, injetando cerca de 0,5 ml da solução. Em bolos PF, faça quatro furos nas
laterais do pote para uma rápida colonização Cubra os potes com a tampa de papel
alumínio retirada e passe fita adesiva em volta. É muito difícil entrar
contaminantes pelos furos de inoculação. Guarde os potes em caixa de isopor a cerca
de 25°C (calor de menos retarda o processo, mas em demasia, mata os fungos ). Use
um termostato. Sacudir logo depois de inocular é um erro, nunca faça isso. Se você
fizer isso, o micélio será felpudo no início, como algodão fino. Eu sugiro inocular
e não sacudir pelo menos por 1 semana. Sacudindo, você espalha os esporos pelo pote
forçando o micélio monocariótico buscar por um par. Se você deixar os esporos
germinarem próximos uns aos outros, eles se unirão e formarão micélio dicariótico
nos primeiros dias, se tornando denso e rizomórfico nos próximos dias. Somente leve
um bolo para o terrário quando ele estiver 100% colonizado. Caso contrário ele vai
contaminar e espalhar a contaminação em todo terrário. Se a colonização paralisar,
provavelmente será por falta de O2. Troque, dentro da glove, a tampa de
papelalumínio por um papel coador de café.
Utilize somente agulhas de calibre grosso ao trabalhar com CL’s:

Incubação
É a condição ideal para que o fungo colonize o substrato, seja grãos, bolos pf’s,
bulk ou mesmo o casing. A incubação se dá no escuro, a uma temperatura de 26°C (já
que o micélio produz calor ao crescer, elevando ainda mais a temperatura). Pode
ocorrer de o micélio paralisar seu crescimento. Isso frequentemente se deve à falta
de O2, quando ocorrer, podes trocar, dentro da glove, a tampa de alumínio por uma
de filtro de papel para coar café.
Crescimento X Temperatura
Crescimento em mm Temperatura (°C) 40 35 31 30 28 28 25 23 20 15 11 9 3,8 0 1 2 3 4
5 6 7 8 9 5 0 10 17 16 25 31,6

Observação:
A temperatura dentro dos potes normalmente está 3 a 4°C acima da temperatura
exterior, por vezes mais. Portanto, mantenha a incubadora a 26°C. Temperaturas
muito altas favorecem contaminantes.
Grain to Grain
Significa Transferência de Grão para Grão. Uma vez que se tenha aprendido a
preparar Spawn esterilizado de sementes de pássaros, arroz ou grãos e colonizá-lo
totalmente com Micélio, pode-se facilmente propagar um único frasco de 250ml
colonizado em mais 20 via transferência Grain to grain. Proporções de Spawn
alcançando de 1:10 a 1:40 estão sendo usadas, com 1:40 estando "na margem de ser
mal sucedido" [Stamets, GGMM 2000]. Frascos propagados via Grain to grain
geralmente colonizam 100% em condições ótimas em cerca de 10 a 14 dias. Dado isto,
Esporos não tem que Germinar, já que o que é transferido para os frascos novos é
Micélio ativo colonizado em grãos ou sementes. O método é preparar frascos novos,
como se você fosse inocular via Seringa. A diferença é que se transfere os grãos de
um frasco colonizado para os frascos não-colonizados. O procedimento é simples e
requer somente bom senso, preparação mínima e o máximo de assepsia possível. Agite
cada frasco novo para espalhar o material colonizado. Transferência G2G e a
agitação do frasco machuca o micélio, por isso levará cerca de 3 dias para ele se
recuperar do choque. Não há necessidade de agitar os frascos mais de uma vez. Fazer
isso só atrasará a colonização, ao invés de agilizá-la.
Casing
Material:
O material utilizado na camada é o mais diverso: Fibra de coco, pó de casca de
coco, pó de pinus, turfa, vermiculita, terra vegetal organica, fibra de bananeira,
borra de café, calcáreo, bicarbonato de cálcio, pó de casca de ovo, pó de concha,
pó de ostra, leite de magnésia, etc. Sendo que o mais usado é: Vermiculita Pó de
coco (coquim) ou Turfa Duas cascas de ovo moídas (sem pele)

Procedimento:
Encha a vasilha com água e água sanitária, deixando por uma hora. Geralmente é
usada a receita de ½ de vermiculita e ½ de pó de coco e duas cascas de ovo moídas
(para uma pequena quantidade de casing). Umedeça um pouco a vermiculita e
esterilize no microondas em potência máxima por 2 minutos. Misture os ingredientes
em uma vasilha de sorvete e adicione água até atingir a umidade ideal. Leve a
vasilha, com o material úmido, ao microondas, aqueça em potência não muito alta e
misture o material de vez em quando, até totalizarem 10 minutos de aquecimento.
Coloque uma camada fina e mais seca no fundo da vasilha, o spawn colonizado e
despedaçado no meio e mais uma camada em cima (bem úmida e aerada). Deixe em
condições de colonização até que o micélio comece a surgir na superfície. Use um
borrifador para manter a mistura úmida (use água mineral e não encharque os
fungos!). O casing pode ser feito também no bulk, após o spawn o ter colonizado.

Quando frutificar o casing?

Uma vez que o micélio surja nos vales da camada de casing e seus fios comecem a
atravessar a mesma, porém a superfície não esteja colonizada, deve-se iniciar o
pinning. Se o micélio começar a surgir de forma muito irregular, espere colonizar
totalmente a superfície e coloque uma camada extremamente fina de casing por cima;
dessa forma você terá um casing nas condições ideais para frutificar.
Umedecer o casing pode causar abortos? Não, umedecer o casing suavemente não causa
abortos. A regra é nunca molhar muito o casing, mas umedecer de tempo em tempo
fazendo com que ele permaneça úmido por todo o tempo. Molhar demais pode prejudicar
os pins e tornar a superfície do casing pouco favorável à formação de cogumelos.
Mas umedecer está ok e é necessário. Tente não molhar diretamente os cogumelos
maiores, pois podem estragar. Nesse estágio tente umedecer a superfície entre eles,
entretanto algumas gotas diretamente nos cogumelos não farão mal algum.

Terrário:
O ideal para a frutificação é uma temperatura 22-28° e uma umidade muito alta.

Material:
Vasilha grande e larga Argila Expandida (lojas de jardinagem) Água Sanitária
Borrifador

Procedimento:
Lave a argila, coloque em uma panela e ferva por 20 minutos. Coloque a argila no
terrário, com água da torneira adicionando uma gota de água sanitária. Fazer dois
furos logo acima do nível de argila para circulação de ar e colocar lã acrílica. A
argila deve ficar com 3 cm de altura no fundo da vasilha. A água adicionada deve
ficar um pouco abaixo da argila. O uso de argila expandida ou perlita coloca a
umidade do terrário na faixa 95% - 98%, que é o ideal. Não use vasilhas
trasnparentes para fazer casings, os cogumelos são fototrópicos. O terrário deve
ser bem fechado. Não deixar a vasilha no chão (é aí que se encontram a maior parte
das bactérias contaminantes). Troca de ar

É um dos parâmetros mais importantes a ser controlado. Enquanto o substrato está

colonizando o ar no interior do pote deve ser rico em CO2 (gás carbônico). Quando o
bolo ou casing é colocado no terrário o ar deve ser rico em O2 (oxigênio). O ar no
interior do terrário deve ser renovado para manter a quantidade de O2 superior a de
CO2. Para manter o ar rico em O2 no interior do terrário é necessário intervir: A
cada 8 horas a tampa do terrário é aberta e abanando algumas vezes, o ar é
renovado.

Temperatura Dentro do terrário o casing deve ser mantido a 26°C. Luz A luz, como a
temperatura e oxigenação (renovação de ar) é um alerta ao micélio que é hora de
produzir o corpo reprodutivo (cogumelo). 1 - A luz pode entrar no terrário,
naturalmente, pela tampa (plástico) do terrário.

Segurança
Segurança nada mais é do que manter o terrário fechado a invasores. Os invasores
podem ser microorganismos ou insetos. Todas as aberturas devem ser protegidas com
filtro. O filtro comumente usado é lã acrílica. O filtro é feito cortando pedaços
da lã, colocando 2, 3, ou mais pedaços sobrepostos. Depois o filtro é preso a
abertura.

Garrafa de gelo para diminuição de temperatura

Bulk

Bulk consiste em usar um spawn (milho colonizado) para colonizar um substrato de

volume ainda maior. Nessa técnica, o spawn é misturado com o substrato bulk
(esterco) e colocado em uma bacia ou outro recipiente que sirva de terrário
(mantenha a umidade), com tampa. É de extrema importância que o substrato bulk seja
bem aerado (espaçamento entre as suas estruturas) para que o micélio possa se
propagar e colonizá-lo rapidamente, antes dos contaminantes. Essa técnica fornece,
geralmente, uma produção maior que as outras, pois nela se tem uma massa muito
maior de micélio. Bom lembrar também que o esterco bovino é o substrato predileto
dos cubensis.
Não se deve esterilizar um substrato bulk, pois a contaminação será certa. Quando
você pasteuriza substratos a 60-70°C, alguns microorganismos benéficos,
principalmente bactérias, permanecem vivos e habitam o substrato, "protegendo-o" de
outros microorganismos mais agressivos. Esta é a razão pela qual você pode inocular
substratos bulk com spawn em lugares abertos, sem se preocupar com cuidados
especiais de esterilização e também manter o cultivo dessa forma.

Material: Esterco bovino ( um pouco seco e duro) Palha (aeração do substrato)

Vermiculita
Três cascas inteiras de ovo SEM PELE e trituradas pra cada dois copos de estrume
(correção de ph). Pode ser usado o carbonato de cálcio.

Procedimento:
(...) Um experimento bem simples é cavar um buraco raso próximo as raízes de uma
planta, colocar o seu bolo e depois cobrir com a terra removida. Pode ser um vaso
que tenha uma planta com raízes bem desenvolvidas. Se você fizer com bolo
aniversariando, exaurido de flushs ou contaminado, com certeza retirará alguns
cogumelos, a quantidade dependerá das condições e do tamanho do bolo. Isso provará
que ali, ao redor das raízes, existe um equilíbrio de nutrientes e microorganismos
que ajudam a revigorar o micélio, mesmo ele estando combalido por contaminações.
Existem microorganismos ao redor das raízes que controlam a proliferação de outros
microorganismos nocivos, que poderiam matar a planta, mas permitem outros que
ajudam seu desenvolvimento. A pasteurização transporta essa tek da natureza para
dentro de casa, uma
pasteurização bem realizada, permite render bastantes frutos num bulk ou casing,
assegurando sua integridade por um longo período (...).

Apresento dois métodos de pasteurização de substrato: Primeiro: Ponha a palha,

vermiculita, estrume e a casca de ovo num pote de sorvete, hidrate-os e coloque em
banho maria. Mantenha 67º C por 1 hora (usar duas resistências de chuveiro em
série). Repita essa mesma operação por mais 2 dias, totalizando 3 aquecimentos.
Entre cada aquecimento, intervalo de 24 horas e bacia fechada hermeticamente.
Monitore a temperatura com termômetro culinário para não exceder 70º C. Você deve
mexer de quando em quando para homogeneizar. Cheque a
umidade do bulk: espremendo-o um pouco, apenas algumas gotas devem cair. Não demore
mais que um dia para inocular o spawn. Segundo: Proceda como no primeiro método,
mas pasteurize por duas horas à temperatura entre 76°C e 80°C, somente uma vez.
Espere esfriar e inocule o Spawn. Encha o monotub com água e meio copo de água
sanitária para desinfetar, deixando por uma hora. É necessário tapar a lateral e o
fundo para evitar que o monotub receba luz (cogumelos são fototrópicos). Coloque o
substrato bulk no monotub e o inocule com o Spawn (misture o spawn e o bulk com uma
colher desinfetada. Uma proporção de 1/4 é o suficiente). Misture com cuidado para
que a recuperação do micélio seja rápida. Não deixar no chão (é aí que se encontram
a maior parte das bactérias contaminantes).

Deixe em condições de colonização: Temperatura: 26°C Luz: Nenhuma Ar: Deve ser
permitido ao bulk a troca de ar, através de furos no tub, tapados com lã acrílica.

Bulk 100% colonizado, aguarde mais uma semana para que a rede micelial se torne
vigorosa e:  Induzir a frutificação ou  Fazer o casing por sobre ele. Espere o
micélio surgir por sobre o casing e induza a frutificação: Temperatura: 23-25°C.
Luz: Fluorescente ou do dia, 12 hrs com luz e 12 horas no escuro. Ar: Rico em O2.
Umidade: 95% e 98%

Caso o bulk esteja seco, borrife um pouco de água mineral na tampa e nas paredes do
mesmo (por dentro). O micélio precisa de um alto índice de O2 para frutificar; Os
furos no monotub devem ser feitos bem rente ao substrato e alguns em um nível mais
acima: O CO2 é mais denso que o ar atmosférico, depositando-se no fundo do monotub
e causando problemas à frutificação. Assim, o gás carbônico sai pelos furos mais
baixos e o oxigênio entra pelos furos superiores.

Obs: 1- É normal o aparecimento de gotas amareladas em cima do micélio. São

metabólitos excretados pelo cubensis, devido ao estresse causado pela competição
com bactérias ou outros fungos.

2- Evitar oscilações na temperatura é importante durante todo o cultivo. Na fase de

colonização essas oscilações podem causar uma demora no processo porque o micélio
tem que se adaptar às mudanças ao invés de crescer. Na frutificação ocorre o mesmo,
podendo mudar bastante a morfologia dos frutos. 3- Caso haja uma falta de umidade
dentro do monotub injete água mineral abaixo da superfície do micélio, com uma
seringa.
Carimbo de esporos
Utensílios recomendados: Folha de alumínio Desinfetante para área de trabalho Luvas
de látex Recipiente ou potes de plástico Bolsas de zip-lock para lacrar os carimbos
Glove box Procedimento geral:

É recomendável trabalhar limpo para que os esporos não entrem em contato com
nenhuma contaminação durante o processo de produção de carimbo! Borrife bem a folha
de alumínio ou papel (material para depositar esporos) com álcool. Deixe secar
completamente. Use corpos frutíferos diretamente apos a colheita! Corte o caule
aonde começa o chapéu. Trabalhe cuidadosamente e não danifique nenhuma lamina ou
poro.
Agora você pode por os chapeis no material para depositar esporos, dentro de um
recipiente plástico estéril. Os esporos precisam de 8-12 horas até eles caírem.
Para evitar contaminações, não toque os esporos com suas mãos e deixe-os na glove.
Acrescente sílica gel para secar bem o material antes de lacrar os prints. Lacrados
hermeticamente em plástico filme, os esporos são germináveis por aproximadamente 1
ano. É recomendável armazenar os esporos em um lugar escuro, limpo a temperatura
ambiente e com um pouco de sílica. A sílica serve para retirar a umidade e impedir
que os esporos germinem antes da hora.
Carimbo em cotonetes
A idéia é esterilizar cotonetes e esfregá-los nos esporos de cogumelos que são mais
difíceis em depositar esporos em carimbos convencionais. Esta técnica pode também
se mostrar mais eficiente na hora de inocular esporos em culturas líquidas ou BDA,
ou mesmo em seringas de esporos. Procedimento: Coloque os cotonetes em “embalagens”
de papel alumínio, leve-os para dentro de um copo seco e com uma tampa que deixe-o
bem vedado (para não entrar água no processo de esterilização).
Tampe bem o pote e esterilize na panela de pressão por 30 minutos. Todo
procedimento a seguir deve ser executado em uma glove Box. Escolha o cogumelo,
passe um pouco de álcool para desinfetá-lo e leve para a glove, cortandoo como se
vê nas fotos.  Use luvas, passando álcool nelas para desinfetá-las, assegurando a
boa qualidade dos carimbos.
Depois de esfregar cuidadosamente o cotonete nas lamelas do cogumelo seccionado,
volte com ele para dentro da sua embalagem de alumínio, deixe por uma hora o papel
alumínio meio aberto em um pote limpo, tampado e com sílica para secar bem o
cotonete.

Depois de secos, feche bem o papel alumínio e envolva-os em plástico filme para
protegê-los de contaminates. Na hora de confeccionar seringas de esporos, culturas
líquidas ou BDA, basta agitar a ponta do cotonete no meio a ser utilizado.
Técnica de clonagem/isolamento em papelão

O método permite a clonagem sem o uso de ágar. O papelão é celulose pura, favorável
para cubensis e desfavorável para o crescimento dos contaminantes, que buscam
nutrientes. Isso não impede que os contaminantes fiquem “escondidos” no papelão,
por isso a necessidade de esterilizar. Funciona para muitas espécies, em especial
para os que se proliferam melhor em madeira morta. Aqui foi usado P. cubensis.
Corte um quadrado 3cmx3cm de papelão, desses ondulados sem tinta ou muita cola,
retire os lados lisos e use somente a parte ondulada. Remova os resíduos de cola.

Dentro de um copo coloque 1/4 de água e o pedaço de papelão. Pode ser usado perlon
(polyfill) para fazer um filtro no copo, máscaras descartáveis ou camadas de filtro
de café. Leve ao microondas em potência máxima até começar a ferver, então desligue
e coloque em uma potencia bem mais baixa só para manter a temperatura até totalizar
5 minutos. Lave-o em água corrente, salpique um pouco de vermiculita e repita o
procedimento mais uma vez. Isso vai hidratar o papelão e também diluir a cola em
água. Limpe um pote plástico com tampa ou outro recipiente com álcool (aqui foi
usado pedra petri), retire o papelão do copo, coloque no recipiente limpo e deixe
tampado por enquanto. Em um local previamente limpo, pegue o cogumelo escolhido.
Após um corte transversal remova um pequeno pedaço do centro próximo a base e deixe
submerso em uma solução de água oxigenada 3% e água destilada, 1ml/9ml durante
alguns segundos e passe rapidamente para o centro do papelão, feche novamente o
pote, vedado, e guarde em local escuro em temperatura de incubação. Você pode
umedecer o papelão com meio de cultura líquida se quiser. Faça mais dois ou três
isolamentos, até que o micélio resultante seja extremamente rizomórfico. Esse
micélio coloniza mais rapidamente, é mais resistente a contaminantes, frutifica
mais e de forma estável. Os frutos são agrupamentos de hifas, que originam
primórdias e o corpo do cogumelo. Se a rede de hifas não é robusta poucos frutos
são gerados. Você pode transferir diretamente para CL’s, grãos ou armazenar o
micélio em água estéril. Um detalhe importante é que essa técnica pode ser usada
para clonar cogumelos secos há tempos, desde que estes tenham sido bem armazenados
e em temperatura abaixo de 35°C.
Clonagem/Isolamento em BDA

Meio de cultura BDA é um meio mais profissional e eficiente do que o papelão. O

meio BDA (batata, Dextrose, Agar) é um dos meios mais utilizados para cultura de
cogumelos em Placa de Petri, tubos ou potes. A batata é usada como fonte dos
nutrientes, e a Dextrose como fonte de açúcar simples. O Agar serve para
solidificar o meio. Uma formulação comum, abaixo, suficiente para se produzir 500
ml de meio de cultura é:
Batatas cruas – 100 g Glucose de milho – 10 g Ágar – 10 g Água mineral – 500 ml
Glucose e Agar – Se encontra em lojas de confeitaria e/ou materiais para festas.
Para outros volumes menores ou maiores, preparar os ingredientes proporcionalmente.
Assim como em outros meios de cultura podem ser acrescentados outros ingredientes,
como levedura e gentamicina (Antibiótico, para controlar Bactérias). Procedimento:
Lavar e escovar bem as batatas, retirando todos os resíduos de terra. Cortar em
fatias finas sem retirar as cascas e ferver em 250 ml de água mineral até que fique
bem macia. Filtrar o líquido reservando-o e descartar as batatas cozidas. Adicionar
ao filtrado a glucose de milho e o Agar-Agar. Acertar o volume final para 500 ml
com água mineral. Obs: Caso queira usar uma menor quantidade, coza 50 g de batatas
em 200 ml de água mineral e acerte o volume final para 250 ml. Retire o tanto que
for usar dos 250 ml e acrescente o Agar e a dextrose PROPORCIONALMENTE. Exemplo: 50
g de batatas foram cozidas, volume final de 250 ml. Irei utilizar somente 50 ml,
então: 10 g – 500 ml X g – 50 ml Devo usar, então, 1 g de dextrose e 1 g de Agar.

Misturar manualmente em banho-maria até dissolver bem o ágar. Não usar batedeira ou
liquidificador, pois será formada muita espuma que não permitirá que o meio seja
utilizado. Em banho Maria para evitar que o açúcar fique caramelizado, o que
impedirá o crescimento do Micélio. Distribuir nos recipientes que serão usados e
esterilizar por 30 minutos. No resfriamento após a esterilização o meio se
solidifica. Placas petri são difíceis de encontrar, utilize tampas de vidros ou
cinzeiros. Faça dois a três repiques do micélio ou para novas placas, até obter um
bom isolamento: micélio rizomórfico. Outra vantagem deste meio, e que se surgirem
contaminates, certamente você os reconhecerá. Você pode germinar os esporos
previamente em placas petri também, permitindo-se assim selecionar o que resultar
mais rizomórfico.
Armazenagem da cultura em água destilada estéril
Coloque um pouco de água destilada em um tubo de ensaio com tampa de borracha,
obviamente estéreis. Faça então uma transferência asséptica de pedaços de micélio
sem material nutritivo para o tubo. Esses tubos serão então armazenados em
temperatura ambiente dentro de caixas de isopor. Esse método, segundo dados da
literatura, pode ser usado para armazenar culturas à temperatura ambiente por até
dois anos sem necessidade de repiques. A falta de nutrientes paralisará o
crescimento do fungo.
Secagem
Procedimento: Deixe os cogumelos no túnel de vento por 24 horas para perder a
umidade excessiva (não deixá-los ao alcance da luz nem cortá-los). Coloque a sílica
em um pote de sorvete bem seco e limpo, cubra com papel toalha e em seguida coloque
os cogumelos, tampando bem a vasilha: deixar por 24 horas. Depois de ficarem
cracker dry, armazene-os em pote HERMETICAMENTE fechado: Coloque um pouco de sílica
no fundo do pote, filtro de café por cima, os cogumelos dentro de um saco plástico
com a boca aberta e voltada para cima, para evitar o contato com a sílica. Guardar
em temperatura ambiente. A sílica pode ser reutilizada, deixando-a no forno a
temperatura mínima por 30 minutos (até que recupere a coloração normal).
Pastilhas de cogumelos
Pegue os cogumelos secos e triture no liquidificador ate virarem pó e reserve em
uma pote. Esse pó devera ser prensado:

Use um cano de metal, moedas de 25 centavos (que tampem a extremidade do cano) e

algum bastão para que possas prensar o cogumelo triturado. Uma balança de precisão
para medir a dosagem. Deixe por 1 minuto na prensa antes de retirar as pastilhas.
Armazene as pastilhas em um vidro juntamente com sílica (evitar o contato),
mantenha salvo de luz e umidade. Não observei náuseas e desconfortos estomacais com
esse método de ingestão.

Contaminantes Comuns
Bolor de teia de aranha (Cobweb) ou Dactylium Mildew (Hypomyces sp.) Um micélio
algodoado cresce sobre o casing. Quando entra em contato com um cogumelo, o micélio
em pouco tempo cobre o cogumelo com bolor e causa um leve apodrecimento. É também
um parasita de cogumelos selvagens. O Cobweb é mais escuro que micélio... quase
cinza comparado ao branco. A diferença na cor às vezes é difícil de perceber para
quem não os viu lado a lado. O Cobweb tem outros vários indicadores: um é que dá
uma freada na velocidade de crescimento. Uma pequena mancha do tamanho de uma moeda
de um centavo se espalhará para cobrir um casing inteiro em apenas um dia ou dois.
Possui tranças muito, muito finas, enquanto o
micélio tende a ser mais grosso. Cobweb é favorecido por umidade alta. As
estratégias de controle incluem baixar a umidade e/ou aumentar a circulação de ar.
Duende Verde (Green Mold) - Trichoderma harzianum, T. viride, T. koningii O Duende
Verde causado pelo Trichoderma harzianum é caracterizado por um micélio branco
agressivo que cresce sobre o casing e dentro de cogumelos causando uma leve
decadência dos mesmos. Suas massas de esporos eventualmente formam um
verdeesmeralda. Essas espécies de Trichoderma também esporulam na superfície do
casing e devem esporular nos cogumelos infectados. Esse fungo indica que
carboidratos estão disponíveis, possivelmente devido à suplementação de nitrogênio
inadequada durante a fase 1 ou na compostagem. T. viride produz toxinas que
destroem as paredes celulares dos cogumelos. Um composto úmido demais, com pouca
amônia anterior á pasteurização, moscas, pouca higiene, anaerobiose e outros
fatores influenciam a presença do duende verde. São comuns em palhas e
freqüentemente ocorrem nas produções de especialidades de cogumelos. Trichoderma é
muitas vezes confundido com bolor de Penicillium ou Aspergillus e vice-versa, sendo
que todos três são muito similares e não é fácil distinguir sem o auxílio de um
microscópio. Bolor azul-esverdeado (Blue-green Molds) - Penicillium spp. Esporos
abundantes de cor azul-esverdeada são produzidos na superfície do substrato. É
similar ao Aspergillus. Penicillium spp. utiliza carboidratos, celulose, amido,
gordura e lignina. Esses fungos são muito comum em especialidades de cogumelos e
são uma das principais preocupações no agar e cultura em grãos. Os esporos estão no
ar e em todo os lugares.

Bolor Preto (também Bolor Amarelo e outros) - Aspergillus sp. Muito comum nas
culturas de agar e grãos e na preparação de compostos. Encontrado na maioria de
substratos orgânicos, Aspergillus prefere um pH próximo ao neutro a levemente
básico. Bandejas e estantes feitas de madeira para manter composto são habitats
freqüentes deste contaminante. As cores das espécies variam do amarelo, verde ao
preto, porém é mais freqüente serem esverdeadas, similares ao Penicillium. Essas
manchas, como muitas outras, mudam sua cor e aparência de acordo com o meio onde
elas ocorrem. Várias espécies são termofílicas. Algumas espécies de Aspergillus são
tóxicas. Aspergillus flavus, uma espécie amarela/amarelaesverdeada, produz as
mortais aflatoxins. A. flavus ataca sementes ricas em óleo que foram armazenadas em
locais quentes e úmidos. De todas as toxinas, asaflatoxins são o mais potente
causador de câncer de fígado já encontrado. A toxicidade dessas espécies era
largamente desconhecida até que em 1960 100.000 de perus morreram
misteriosamente após a explosão desta doença na Grã-Bretanha. Visto que A. flavus
cresce praticamente em todos os tipos de grãos, essa espécie causa sérias
preocupações nos cultivadores. O tratamento cuidadoso de qualquer mancha,
particularmente do Aspergillus, deve ser uma responsabilidade primária de todos que
trabalham em cultivos de cogumelos. A. fumigatus e A. niger, que se reproduzem e
crescem melhor na escala de temperatura 10 a 50°C, são também patogênicos para
humanos em quantidades concentradas.
Aspectos farmacológicos
Psilocibina (orthophosphoryl-4-hydroxy-n-dimethyltryptamine). Após o consumo, os
alcalóides dos cogumelos bloqueiam os efeitos da serotonina no cérebro, por terem
estruturas químicas similares. De um modo geral os efeitos iniciam-se 30-60 minutos
após a ingestão, por vezes mais, consoante a dose ingerida. 1 grama de cubensis
secos contém cerca de 10 mg de psilocibina. Dose leve: 1 grama secos ou 10 gramas
frescos; Dose moderada: 1 a 3 gramas secos, ou 10 a 30 gramas frescos; Dose alta: 3
a 5 gramas secos ou 30 a 50 gramas frescos; “Doses heróicas” mencionadas por vezes
ultrapassam as 20 gramas secos.
A Psilocibina é convertida em Psilocina pelo organismo humano, sendo excretada sem
transformação na urina. Como muitas outras substâncias psicoactivas, os efeitos são
subjectivos, imprevisíveis e fortemente dependentes das expectativas e dos
contextos do consumo. Não ocasionam dependência física ou psíquica.

Psilocibina

Frutificação Outdoor
Todos os cogumelos nascem na natureza... Então, quando se decide começar um projeto
outdoor, a questão não é "Qual strain é boa para outdoor". Pense nas condições
climáticas onde você tentará realizar seu outdoor.

Cultivo realizado fora de um terrário, caixa protetora ou balde. Pode ser em

canteiros, vasos, etc. É bom lembrar-se das condições ideais para fruticação dos
cubensis:     Altas temperaturas (26°C). Umidade elevada do ar. Não deixar o
micélio secar, muito menos encharcado. Não deixar os cogumelos no sol, apenas luz
indireta e fraca (não são plantas).


PH levemente básico ( elevador de ph: casca de ovo moída - CaCO3)

Solos e condimentos geralmente têm ph ácido (4 – 6), por isso, deve se adicionar
cal hidratada (uma base) para elevar o ph para a condição ideal no cultivo de
cogumelos (6,5 – 8). O método mais utilizado consiste em colonizar grãos e, depois
de 100% colonizados e fortes, enterrar em um vaso, preparado com solo, húmus ou
outros condimentos encontrados em lojas de jardinagem. Faça apenas uma fina camada
de vermiculita sobre o micélio. Borrife água quando sentir o solo muito seco. Esta
técnica costuma não render muito no primeiro flush. Após o primeiro flush, retire
todos os pins e certifique-se de que o micélio está bem úmido. O cultivo outdoor
dura, teoricamente, para sempre, embora não se tenha flushes regulares. Uma
desvantagem é que não se pode carimbar seus cogumelos, pela provável presença de
contaminantes. “Você pode colonizar milho ou outro substrato e num vaso fazer uma
cama de terra, por o substrato e cobrir. Eu tenho vasos com plantas e quando quero
fazer um outdoor pego parte dessa terra e transfiro para outro vaso. Essa terra tem
uma atividade microobiologica equilibrada que protege o micélio de contaminantes.”
Cultivo in vitro

Consite na montagem de um “casing” dentro do vidro. Somente cerca de 60% ou menos

do recipiente deve ser ocupado pelo substrato. Coloca-se uma fina camada de casing
sobre o milho colonizado. Deve ser promovida oxigenação (8 em 8 horas), luz
indireta e umidade (borrifador).

Bibliografia: https://cogumelosmagicos.org/comunidade/ http://www.shroomery.org/