Método Oficial AOCS Ca 5a-40

Revisado 1996
Ácidos Graxos Livres

Definição
Este método determina os ácidos graxos livres presentes na amostra.

Alcance
É aplicável a todos os óleos vegetais refinados e brutos, óleos marinhos e animais.

Material
1. Erlemnmeyer frascos de 250 mL
2. Buretas de 10 ou 25 mL

Reagentes
1. Alcool Etílico, 95% - o uso das fórmulas 30 e 3A USSD é permitido (ver notas, 1). O
álcool deve dar um ponto terminal claro, distinto e preciso com fenolftaleína e deve ser
neutralizado com álcali para uma cor rosa clara, mas permanente, imediatamente antes
do uso.
2. Solução indicadora de fenolftaleína – 1% em álcool 95%.
3. Solução de hidróxido de sódio – padronizada com precisão. Ver a (tabela 1) para a
normalidade apropriada da solução de hidróxido de sódio, dependendo da faixa
esperada para a concentração de ácidos graxos livres.

Método
1. As amostras devem estar bem homogeneizadas e perfeitamente liquidas antes de serem
pesadas; no entanto, a amostra não deve ser aquecida a mais de 10°C acima do seu ponto
de fusão.
2. Usar a tabela 1 para determinar o peso da amostra para as diferentes faixas de ácidos
graxos livres. Pesar o tamanho da amostra designado em um frasco de amostra de óleo
ou frasco de Erlenmeyer (ver Notas 2).

Tabela 1
Faixa de ácidos graxos livres, volume de álcool e alcali.
 Normalidade da
Faixa de AGL (%) Amostra (g) Álcool (mL)
Solução de NaOH
0,00 a 0,2 56,4 ± 0,2 50 0,1 N
0,2 a 1,0 28,2 ± 0,2 50 0,1 N
1,0 a 30,0 7,05 ± 0,05 75 0,25 N
30,0 a 50,0 7,05 ± 0,05 100 0,25 ou 1,0 N
50,0 a 100 3,525 ± 0,001 100 1,0 N
*AGL, Ácidos graxos livres; N, normalidade.

3. Adicionar ao álcool 95% (quantidade especificada) 2mL do indicador e neutralizar com

a solução de hidróxido de sódio até atingir a coloração de cor rosa claro.
4. Adicionar o álcool neutralizado e levemente aquecido a amostra de óleo a ser analisada.
5. Titule com o hidróxido de sódio padrão, mexendo vigorosamente até que apareça a
primeira indicação de cor rosa permanente com a mesma intensidade do álcool antes da
amostra. A cor deve persistir por 30 segundos.

Cálculos
1. A porcentagem de ácidos graxos livres na maioria dos tipos de gorduras e óleos é
calculada como ácido oleico, embora em óleos de coco e palmiste seja frequentemente
expresso como ácido láurico e para o óleo de palma é expresso como ácido palmítico.

a) Ácidos graxos livres, expresso como oleico,

𝑚𝐿 𝑑𝑒 𝑁𝑎𝑂𝐻 𝑢𝑡𝑖𝑙𝑖𝑧𝑎𝑑𝑜 𝑥 𝑁 𝑥 28,2

%=
𝑝𝑒𝑠𝑜 𝑑𝑎 𝑎𝑚𝑜𝑠𝑡𝑟𝑎

b) Ácidos graxos livres, expresso como láurico,

𝑚𝐿 𝑑𝑒 𝑁𝑎𝑂𝐻 𝑢𝑡𝑖𝑙𝑖𝑧𝑎𝑑𝑜 𝑥 𝑁 𝑥 20,0

%=
𝑝𝑒𝑠𝑜 𝑑𝑎 𝑎𝑚𝑜𝑠𝑡𝑟𝑎

c) Ácidos graxos livres, expresso como palmítico,

𝑚𝐿 𝑑𝑒 𝑁𝑎𝑂𝐻 𝑢𝑡𝑖𝑙𝑖𝑧𝑎𝑑𝑜 𝑥 𝑁 𝑥 25,6

%=
𝑝𝑒𝑠𝑜 𝑑𝑎 𝑎𝑚𝑜𝑠𝑡𝑟𝑎
 2. Ácidos graxos livres são frequentemente expressos em termos de valor ácido em vez de
porcentagem de ácidos graxos livres. O valor de ácido se define como o número de
miligramas de KOH necessário para neutralizar a amostra. Para converter em
porcentagem de ácidos graxos livres (como oleico) a valor de ácido, deve se multiplicar
o percentual de ácidos graxos livres por 1,99.

Precisão
Os dados de precisão para óleos desodorizados, refinados e branqueados são mostrados na
Tabela 2. Os dados de precisão para o óleo bruto são mostrados na Tabela 3.

Tabela 2
Variação média esperada entre laboratórios (desvio padrão de reprodutibilidade, SR) para
a determinação de ácidos graxos livres em óleos refinados, branqueados e desodorizadosa.

Valor aproximado
0,01-0,05 0,05-0,1 0,1-1,0 1,0-2,0
de AGL, (%)
SR 0,007 0,010 0,046 0,073
RSD (CV,%) 33,93 12,73 9,90 4,75
R (95%)=2,8 x SR 0,02 0,03 0,13 0,20
a
Valores obtidos do Programa de Competências AOCS Smalley Lab.

Tabela 3
A variação média esperada entre laboratórios (desvio padrão de reprodutibilidade, S R)
para a determinação de ácidos graxos livres brutosa.

Valor aproximado de AGL, (%) 0,1-1,0 1,0-2,0

SR 0,077 0,156
RSD (CV,%) 14,57 9,84
R (95%)=2,8 x SR 0,22 0,44
a
Valores obtidos do Programa de Competências AOCS Smalley Lab.

Notas

1. O isopropanol, 99%, pode ser utilizado como solvente alternativo em óleos vegetais
brutos e refinados.
2. Se o óleo tiver uma camada de gás carbônico na garrafa e agitar vigorosamente por 1
min.