UNIVERSIDADE DE SÃO PAULO - INSTITUTO DE BIOCIÊNCIAS

DEPARTAMENTO DE ECOLOGIA
LABORATÓRIO DE LIMNOLOGIA

DETERMINAÇÃO DO TEOR DE NITROGÊNIO E FÓSFORO

TOTAIS

INTRODUÇÃO

Os nutrientes fósforo e nitrogênio totais são obtidos pela análise de alíquotas de

amostra que não sofreram filtração (PARANHOS, 1996) e apresentam grande importância,
uma vez que os dados obtidos nas análises destes nutrientes, em conjunto com outras
variáveis, podem ser utilizados na determinação de diversos índices de estado trófico.
O índice de Carlson (1977), por exemplo, é fundamentado nas concentrações de
fósforo total, clorofila ‘a’ e na profundidade de desaparecimento do disco de Secchi. O
índice de Kratzer e Brezonick (1981) utiliza, entre outros fatores, a concentração de
nitrogênio total. O índice de Carlson modificado por Toledo et al. (1983), também faz uso
das concentrações de nitrogênio e fósforo totais.
Existem diversos métodos para se determinar os valores destes nutrientes.
Segundo Carmouze (1994), há métodos que se baseiam na mineralização da matéria
orgânica por digestão química, fotoquímica ou por combustão à temperatura elevada e
subseqüente determinação da(s) forma(s) de nitrogênio e/ou fósforo produzido(s).
Os métodos mais difundidos baseiam-se na oxidação da matéria orgânica por um
forte agente oxidante, ou na digestão ácida de Kjeldhal (CARMOUZE, 1994).
No primeiro método, o nitrogênio orgânico é transformado em nitrato enquanto no
método de Kjeldahl há a formação do íon amônio (AMEEL et al., 1993). O fósforo é
convertido em ortofosfato (EATON et al., 1995).
Segundo Eaton (1995) a técnica, que se utiliza do persulfato de potássio, é a mais
simples. O método da digestão com persulfato não requer a utilização de ácidos fortes ou
metais tóxicos, e produz despejos não tóxicos quando comparado com o método Kjeldahl,
outras vantagens deste método segundo Ameel et al. (1993), são:

 Pequeno volume de amostra é requerido;

 Não há necessidade de equipamento especial;
 Pode ser utilizado em águas com baixas concentrações de nutrientes (<0,04 ppm);
 fósforo total pode ser obtido da mesma digestão.
 Não apresenta problemas quando as concentrações de nitrato e/ou nitrito são
elevadas;

No método da digestão com persulfato, para que ocorra a oxidação é necessário um

meio alcalino para os componentes de nitrogênio e um meio ácido para os componentes
fosfóricos. No método descrito por Valderrama (1981), estas condições são obtidas por um
sistema ácido bórico e hidróxido de sódio. O pH, no início da reação é de 9,7 (alcalino) e
termina em 5-6 (ácido).
A digestão realiza-se a 120-130 ºC numa panela de pressão ou autoclave por 45
minutos (CARMOUZE, 1994).
De acordo com Eaton (1995), após a digestão o fósforo é determinado por método
colorimétrico. Assim como o nitrogênio total que é convertido a nitrato.
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REAGENTES PARA DETERMINAÇÃO SIMULTÂNEA DOS TEORES DE NITROGÊNIO

E FÓSFORO TOTAL, DE ACORDO COM VALDERRAMA (1981):

1) Reagente oxidante (OR)

Adicionar 50 g de persulfato de potássio (k 2S2O8) e 30 g de ácido bórico (H 3BO3),
dissolvidos em 350 ml de NaOH 1M, completar a 1 litro de água destilada. Estocar a
solução em frasco âmbar, em temperatura ambiente e protegida da luz solar direta. Esta
solução é estável por 6 a 9 meses.

2) Solução de hidróxido de sódio 1M

Dissolver 40 g de NaOH a 1litro de água destilada.

PROCEDIMENTO COM AS AMOSTRAS PARA DETERMINAÇÃO SIMULTÂNEA DOS

TEORES DE FÓSFORO E NITROGÊNIO TOTAL, DE ACORDO COM VALDERRAMA
(1981):

 Colocar 45ml da amostra de água bruta (não filtrada) e 6 ml do reagente oxidante

(OR);
 autoclavar a 120 0C por 50 minutos, esfriar;
 determinar os teores de nitrogênio e fósforo totais, seguindo os procedimentos em
rotina no laboratório, respectivamente, os métodos empregados nas determinações
dos teores de nitrato e ortofosfato, nos cálculos empregar as respectivas curvas;
 Para confeccionar o branco usa-se água deionizada.

Observação: O OR poderá ser adicionado à amostra imediatamente após a coleta e a

análise efetuada num prazo máximo de 90 dias.

Referências bibliográficas

AMEEL, J. J., AXLER, R. P. & OWEN, C. J. Persulfate Digestion For Determination Of Total Nitrogen And Phosphorus In
Low-Nutrient Waters. American Environmental Laboratory, v.10, p.7-10. 1993.

CARLSON, R. E. A Trophic State Index for Lakes. Limnol. Oceanogr., v.22, p.361-369. 1977.

CARMOUZE, J. P. O metabolismo dos ecossistemas aquáticos - Fundamentos teóricos, métodos de estudo e análises
químicas: Editora FAPESP. 1994. 253 p.

EATON, A. D., CLESCERI, L. S. & GREENBERG, A. E. Standard methods for the examinationof water and wastewater.
Am.Publ.Health. Ass., p.106-114. 1995.

KRATZER, C. R. & BREZONICK, P. L. A. A Carlson type trophic state index for nitrogen in Florida lakes. Water Res.
Bull., v.17, p.713-714. 1981.

PARANHOS, R. Alguns métodos para análise da água. Rio de Janeiro: Cadernos didáticos UFRJ. 1996. 200 p.

TOLEDO, A. P., TALARICO, M., CHINEZ, S. J. & AGUDO, E. G. A aplicação de modelos simplificados para avaliação de
processos de eutrofização em lagos e reservatórios tropicais. XIX Congresso Interamericano de Engenharia
Sanitária e Ambiental. Camboriú, 1983. 57 p.

VALDERRAMA, J. C. The simultaneous analysis of total nitrogen and total phosphorous in natural waters. Marine
chemistry, v.10, p.109-222. 1981.