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Author: NA Document Number: Equ28-04
Effective (or Post) Date: 13-Jan-09
Document Origin: HNSC Company: NA
SMILE Approved by: Heidi Hanes
Review by Heidi Hanes Review date 10-Feb-20
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1. Sinonímia:
2. Aplicabilidade:
3. Aplicação clínica:
Exame laboratorial de rotina para avaliação quantitativa e qualitativa dos elementos figurados
do sangue. Sofre alterações significativas tanto nas doenças hematológicas quanto em doenças
das mais variadas patogêneses, tendo, por isso, grande valor preditivo e diagnóstico.
É composto pelos seguintes parâmetros: Contagem de eritrócitos, dosagem de hemoglobina,
determinação do hematócrito, volume corpuscular médio (VCM), hemoglobina corpuscular
média (HCM), concentração hemoglobínica corpuscular média (CHCM) e amplitude de
distribuição dos eritrócitos (RDW) que compõem o eritrograma; contagem de leucócitos e
fórmula leucocitária que compõem o leucograma.
4. Principio do teste:
5. Amostra:
6. Reagentes e materiais:
Corantes:
Solução de corante May-Grünwald-Giemsa.
Corante panótico rápido.
Reagentes para automação:
Cellpack – Solução de diluição: impedância e processo óptico (bombonas de 20 l),
Cellsheath – Solução de fluxo duplo: focagem hidrodinâmica (bombonas de 20 l),
Stromatolyser FB – Lise neutrófilos/basófilos: impedância e processo óptico (frasco de 5 l),
Stromatolyser 4DL – Lise eritrócitos: impedância e processo óptico (frasco de 5 l),
Stromatolyser 4DS – Coloração leucócitos: citometria de fluxo (sache de 42ml),
Stromatolyser NR – Lise e coloração eritroblastos: citometria de fluxo (frasco 1 l + 12ml),
Sulfolyser – Lise eritrócitos e complexo cromático hemoglobina: fotometria (frasco de 5 l),
Stromatolyser IM – Leucócitos imaturos: impedância e processo óptico (bombonas 10 l),
Ret search II – Lise/coloração reticulócitos: difusão/fluorescência direta (frasco 1 l + 12ml).
Materiais:
Lâminas: lâminas de vidro para microscopia, tamanho aproximado de 25 x 76 mm. Lâminas
de vidro lapidadas nas quadro faces, tamanho aproximado de 25 x 76 mm com uma das
extremidades reduzidas (distensora).
Reagentes para calibração e controle de qualidade:
Sangue controle: e-CHECK, sangue estabilizado para uso “in vitro, Sysmex America, Inc.
Calibrador: X-Cal, uso “in vitro”, Sismex America, Inc.
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HOSPITAL NOSSA SENHORA DA CONCEIÇÃO
C.R. LABORATÓRIO DE ANÁLISES CLÍNICAS – SETOR DE HEMATOLOGIA
HEMOGRAMA COMPLETO Procedimento Operacional Padrão
SANGUE TOTAL Data da 1ª versão: 06/12/2002
Automação Sysmex XE 2100 Versão n.º: 4
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POP: H01 Página 4 de 19
6.1 Preparo:
Vide Anexo-02 – Coloração de lâminas, para preparação dos corantes. Demais reagentes são
produtos comerciais pronto para uso.
6.2 Estabilidade:
A estabilidade dos reagentes de automação é de 60 dias após a abertura e/ou instalação no
equipamento, salvo Sulfolyser que é de 90 dias. O corante panótico rápido em uso possui
estabilidade de 7 dias e de 3 anos quando no frasco original. O corante May-Grünwald-
Giemsa em uso possui estabilidade de 24 horas e de 6 meses quando no frasco original.
6.3 Armazenamento:
Temperatura ambiente e abrigo da luz solar, exceto sangue controle e calibrador (em
geladeira: 2 a 8°C).
7. Equipamentos:
8. Calibração:
para que os códigos de barra fiquem voltados para frente (para leitura no equipamento).
Observar que a numeração é seqüencial e única para as amostras independentemente da
origem. Inicia em 1, é diária e por turno (diurno: 1,2,3...n e noturno: 1,2,3...n). Numerar o
mapa de trabalho mesmo das amostras faltantes, registrando seu número, nome do paciente e
exames a realizar em caderno próprio para este fim. Anotar em, caderno próprio, o último
número seqüencial utilizado, ficando assim assegurada a correta identificação numérica da
próxima amostra. Observar, no mapa de trabalho, a existência de outra solicitação médica que
não hemograma:
Reticulócitos: separar o tubo para análise no equipamento de automação apropriado (Sysmex
XE 2100 – Sysmex 2) ou processar o teste manualmente. Vide POP-H07 – Reticulócitos.
VHS (somente para amostras realizadas no mesmo tubo do hemograma): numerar o rótulo do
VSG com o mesmo número do hemograma, separar o material, se possível, e processá-lo. Se
não for possível a separação, colocar o rótulo numerado em um tubo (vazio) de automação
para VSG e após a realização do hemograma processar o VSG. Vide POP-H11 – Velocidade
de hemossedimentação.
Teste de falcização: preparar a lâmina. Vide POP-H09 – Teste de falcização.
Teste de fragilidade osmótica: avisar o bioquímico responsável pela realização do exame para
processá-lo após a realização do hemograma. Vide POP-H12 – Teste de fragilidade osmótica.
Corrida das amostras:
Correr as racks com as amostras previamente identificadas e numeradas. Utilizar-se dos
equipamentos de automação previamente liberados para uso. Correr as amostras no modo
sampler (tubo fechado). Amostras de pouco volume devem ser passadas no modo manual
(tubo aberto). Vide POPE-H01 – Sysmex XE 2100. Utilizar os três equipamentos separando
as amostras conforme a origem: emergência e hospitais preferencialmente no equipamento 2,
ambulatório e postos de saúde comunitária nos outros. Caso apenas um dos equipamentos
esteja habilitado passar as amostras na ordem de priorização (emergências, hospitais e
ambulatório-postos de saúde comunitária).
Passar os mapas de trabalho com os resultados ao bioquímico responsável pela triagem. Vide
Anexo-03 – Critérios para triagem.
Amostras com a solicitação de urgência, quando personalizadas, devem ter tratamento
prioritário: passar a amostra no equipamento de automação e o resultado diretamente a um
bioquímico para triagem.
Fazer distensões sangüíneas das amostras previamente marcadas na triagem realizada pelo
bioquímico responsável. Vide Anexo-01 – Confecção de lâminas. Corar as distensões
sangüíneas. Vide Anexo-02 – Coloração de lâminas.
Passar as distensões coradas, limpas e secas a mesa de lâminas.
Avaliação microscópica da amostra: (Bioquímicos)
Examinar as lâminas das amostras selecionadas após coloração. Utilizar-se dos microscópios
do setor (Olympus CX40). Usar objetiva de 50X de imersão ou 40X a seco, a objetiva de
100X de imersão deve ser reservada para avaliação de inclusões, granulações citoplasmáticas
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etc. Avaliar a série vermelha focando campos da cauda da distensão onde os eritrócitos não
se sobrepõem. Observar a forma, dimensão, coloração e empilhamento dos eritrócitos.
Verificar se os dados numéricos do resultado fornecido pelos equipamentos de automação são
comparáveis aos vistos ao microscópio. Avaliar as plaquetas quanto ao número e morfologia
independentemente de terem sido solicitadas ou não. Fazer a fórmula leucocitária
percorrendo a lâmina ao longo da distensão junto a borda lateral da cauda, método em ameia
(iniciar a contagem na borda lateral penetrando no corpo da lâmina em movimento
ziguezague) ou método em ameia modificado (contar dois campos perto e paralelos à borda
da distensão, depois quatro campos em ângulo reto e dois campos paralelos à borda, e assim
por diante). Contar 100 leucócitos classificando-os. Atentar para características morfológicas,
tintoriais e atípicas. Observar a existência de eritroblastos, contá-los separadamente dos
leucócitos relacionando-os com 100 leucócitos, corrigindo a contagem global de leucócitos se
for o caso. O equipamento de automação Sysmex II faz a distinção de eritroblastos se
solicitado, logo resultados provenientes desta automação não devem ter o número total de
leucócitos corrigidos quando este parâmetro tiver sido solicitado e corretamente emitido.
Após a avaliação microscópica fazer as alterações, se necessárias, e acrescentar as
informações importantes diretamente na papeleta de resultados impressa pela equipamento de
automação, utilizando-se dos históricos para hemograma. Vide Anexo-04 – Históricos. Fazer
a liberação dos resultados nos arquivos de interfaceamento ou diretamente no Sistema
Esmeralda. Vide POPE-H01 – Sysmex XE 2100.
10.1 Interno:
Background. e-CHECK em três níveis (baixo, normal e alto), amostra do dia anterior (duas
amostras normais) e reprodutibilidade (freqüência diária). Repetibilidade (freqüência
semanal). Vide POPE-H01 – Sysmex XE 2100. Os dados de controle de qualidade resultam
na liberação dos equipamentos de automação e são revistos pelo responsável do setor e/ou
laboratório.
10.2 Externo:
Controle PNCQ (freqüência mensal). CAP (freqüência quadrimestral). Vide POPE-H01 –
Sysmex XE 2100.
11. Resultados:
Homem Mulher
Hemácias em milhões/uL 4,5 - 6,5 3,9 - 5,8
Hemoglobina em g/dL 13,5 - 18,0 11,5 -16,4
Hematócrito em % 40,0 - 54,0 36,0 - 47,0
Vol. Glob. Média em fL 76,0 - 96,0
Hem. Glob. Média em pg. 27,0 - 32,0
C. H. Glob. Média em % 32,0 - 36,0
RDW 11,5 - 16,0
Eosinófilos 1 - 6 45 600
Basófilos 0 - 0 200
Monócitos 2 - 10 100 1.000
Linfócitos 20 - 45 1.500 3.500
Plasmócitos 0
São resultados que podem comprometer a vida do paciente. Devendo o médico assistente ser
informado imediatamente. Pacientes com resultados já conhecidos não necessitam informação
ao médico assistente. Priorizar:
Hematócrito: inferior a 15.
Hemoglobina: inferior a 5,0.
Leucócitos: inferior a 1000 e superior a 100000.
Vide POP-L12 – Valores críticos.
14. Linearidade:
15.1 Interferentes:
Ligados a amostra:
Excesso de anticoagulante (EDTA): Causa desidratação dos eritrócitos (alterações
morfológicas) e alteração para menos do hematócrito (Erro pouco significativo nos contadores
eletrônicos).
Amostra de pouco volume: Pode causar hemo-diluição se o anticoagulante usado for líquido.
Pode provocar erro de diluição por aspiração incorreta do equipamento de automação. Anotar
no mapa de trabalho correspondente.
Sangue anticoagulado com heparina: Não deve ser usado para o leucograma (variação
significativa no número de linfócitos). Não deve ser usado para contagem de plaquetas. Pode
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ser usado para o eritrograma. Se usado imediatamente após a colheita as diferenças são pouco
significativas. Anotar no mapa de trabalho correspondente.
Amostra com microcoágulos: Pode apresentar resultados errôneos por erro na diluição da
amostra. Na impossibilidade de nova colheita de material avisar o bioquímico responsável e
anotar no mapa de trabalho correspondente.
Amostra lipêmica: interferência com hemoglobina (aumento). Anotar no mapa de trabalho
correspondente.
Amostra coagulada: Rejeição incondicional dos resultados. Providenciar nova colheita de
material.
Ligados ao equipamento de automação:
Erro na homogeneização da amostra por falha no sistema: Apresenta resultados menores ou
maiores dependendo da sedimentação do material. Nem sempre o resultado apresenta alarme
o que prejudica a avaliação. Avaliação da distensão sangüínea ao microscópio sempre que os
resultados estiverem fora dos limites de normalidade.
Falha na aspiração da amostra: Resultados sempre com alarme. Repetir o exame.
Interferência por indução eletromagnética: Resultados sempre com alarme (*). Repetir o
exame.
Entupimento nas câmaras de diluição: Resultados das contagens tendem a zero. Proceder a
desobstrução das câmaras conforme descrito no Manual on line. Repetir o exame.
Amostras hemolisadas: Os equipamentos de automação possuem mecanismos de
compensação afim de minimizar erros. Anotar no mapa de trabalho correspondente.
Exame de auxílio diagnóstico para doenças hematológicas e sistêmicas. Valores fora dos
limites de referência podem indicar: anemias, neoplasias hematológicas, reações infecciosas
e inflamatórias, acompanhamento de terapias medicamentosas, entre outras patologias.
17. Biossegurança:
18. Anexos:
19. Bibliografia:
Bain, Barbara J. Células sangüíneas: um guia prático. 2.ed. – Porto Alegre: Artes Médicas,
1997.
Failace, Renato. Hemograma: manual de interpretação. 3.ed. – Porto Alegre: Artes Médicas,
1995.
Operator’s manual XE-2100L/XE-2100D Main, Operator’s manual XE-2100L/XE2100D IPU
e manual online.
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atuou durante pouco tempo. Distensões de cor cinza ou cinza azulada ou esverdeada estão
muito alcalinas, ou o corante agiu durante muito tempo. Microscopicamente a apreciação de
uma boa coloração é feita pela avaliação das plaquetas. Estas devem apresentar-se azuladas
com finas granulações azurófilas. Quando coradas de azul-pálido: coloração ácida ou
insuficiente. Quando coradas de cor púrpura-escura: coloração alcalina ou excessiva.
Coloração característica:
1. Cromatina e corpos de Howell-Jolly: púrpura.
2. Grânulos promielocíticos e bastões de Auer: vermelho-purpúreo.
3. Citoplasma dos linfócitos: Azul.
4. Citoplasma dos monócitos: azul-acinzentado.
5. Citoplasma basófilo (rico em RNA): azul-escuro.
6. Corpos de Döhle: azul-acinzentado.
7. Grânulos específicos dos neutrófilos, linfócitos e plaquetas: púrpura-claro ou rosa.
8. Grânulos específicos dos basófilos: púrpura-escuro.
9. Grânulos específicos dos eosinófilos: laranja
10. Eritrócitos: rosa.
Interferentes: Presença de contaminantes (geralmente acido acético) no álcool metílico.
PH da água muito baixo (ácido): os componentes basófilos não se coram adequadamente,
os leucócitos são geralmente pálidos, com grânulos eosinófilos de um vermelho
brilhante. PH da água muito alto (alcalino): captação excessiva do corante básico com
excesso de coloração. É difícil distinguir os eritrócitos policromáticos dos normais. Os
grânulos dos eosinófilos coram-se de azul-escuro ou de cinza-escuro. Os grânulos dos
neutrófilos normais ficam excessivamente corados, simulando granulação tóxica.
Controle de qualidade: Corantes satisfatoriamente elaborados com sais de boa
procedência proporcionam coloração dentro dos padrões aceitos. Verificar no início da
rotina e desprezar, corantes filtrados que tenham sido utilizados pelo plantão noturno.
Utilizar água com o pH adequado o que pode ser avaliado verificado-se a coloração da
distensão macroscopicamente e microscopicamente conforme descrito acima. Ajustar o
pH da água se necessário, ou trocar o corante em uso.
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Anexo-04 – Históricos
001- anisocitose 9+ Microcitose 9+ Hipocromia 9+ 002- anisocitose 9+ Microcitose 9+ Hipocromia 9+
003- 999.99
011- anisocitose 1+ 012- anisocitose 2+ 013- Anisocitose 3+
021- policromatocitose 1+ 022- policromatocitose 2+ 023- policromatocitose 3+
031- hipocromia 1+ 032- hipocromia 2+ 033- hipocromia 3+ 034- algumas hemácias hipocromicas
041- pecilocitose 1+ 042- pecilocitose 2+ 043- pecilocitose 3+
051- microcitose 1+ 052- microcitose 2+ 053- microcitose 3+ 054- alguns micrócitos
061- macrocitose 1+ 062- macrocitose 2+ 063- macrocitose 3+ 064- alguns macrócitos
065- alguns macrócitos e micrócitos
071- hemácias fragmentadas (esquizócitos) 1+ 072- hemácias fragmentadas (esquizócitos) 2+
073- hemácias fragmentadas (esquizócitos) 3+
081- hemácias em alvo (target cells) 1+ 082- hemácias em alvo (target cells) 2+
083- hemácias em alvo (target cells) 3+
091- hemácias em gota (dacriócitos) 1+ 092- hemácias em gota (dacriócitos) 2+
093- hemácias em gota (dacriócitos) 3+
101- eliptócitos 1+ 102- eliptócitos 2+ 103- eliptócitos 3+
111- drepanócitos 1+ 112- drepanócitos 2+ 113- drepanócitos 3+
121- esferócitos (raros) 122- esferócitos (alguns) 123- esferócitos (vários) 124- esferócitos (numerosos)
131- acantócitos 1+ 132- acantócitos 2+ 133- acantócitos 3+
141- estomatócitos 1+ 142- estomatócitos 2+ 143- estomatócitos 3+
150- eritroblastos: 999 em 100 leucócitos 151- eritroblastos (raros)
161- pontilhado basófilo em raras hemácias 162- pontilhado basófilo em algumas hemácias
163- pontilhado basófilo em várias hemácias 164- pontilhado basófilo em numerosas hemácias
171- corpos de Howell-Jolly em raras hemácias 172- corpos de Howell-Jolly em algumas hemácias
173- corpos de Howell-Jolly em várias hemácias 174- corpos de Howell-Jolly em numerosas hemácias
180- auto-aglutinação sugestiva da presença de crio-aglutininas 181- presença de crio-aglutininas
190- rouleaux 191- dupla população hemática 192- corpos de Heinz
193- corpúsculos de Pappeheimer (siderossomas) 194- anéis de Cabot
195- rouleaux acentuado sugestivo de disproteinemia
201- linfócitos atípicos (raros) 202- linfócitos atípicos (alguns)
203- linfócitos atípicos (vários) 204- linfócitos atípicos (numerosos)
205- presença de células linfomatosas 206- presença de células com núcleo clivado
211- mononucleares atípicos (raros) 212- mononucleares atípicos (alguns)
213- mononucleares atípicos (vários) 214- mononucleares atípicos (numerosos)
221- granulações tóxicas 1+ 222- granulações tóxicas 2+ 223- granulações tóxicas 3+
231- vacuolizações citoplasmáticas nos neutrófilos 1+ 232- vacuolizações citoplasmáticas nos neutrófilos 2+
233- vacuolizações citoplasmáticas nos neutrófilos 3+
241- neutrófilos hipersegmentados (raros) 242- neutrófilos hipersegmentados (alguns)
243- neutrófilos hipersegmentados (vários) 241- neutrófilos hipersegmentados (numerosos)
251- restos celulares (raros) 252- restos celulares (alguns) 253- restos celulares (vários)
254- restos celulares (numerosos)
261- Corpúsculos de Dohle (raros) 262- Corpúsculos de Dohle (alguns)
263- Corpúsculos de Dohle (vários) 264- Corpúsculos de Dohle (numerosos)
270- anomalia granulocítica de Pelger-Huet 271- sugestivo de anomalia granulocítica de Pelger-Huet
280- diferencial prejudicado pela leucopenia
301- plaquetas gigantes (raras) 302- plaquetas gigantes (algumas)
303- plaquetas gigantes (várias) 304- plaquetas gigantes (numerosas)
311- plaquetas dismórficas (raras) 312- plaquetas dismórficas (algumas)
313- plaquetas dismórficas (várias) 314- plaquetas dismórficas (numerosas)
320- presença de microcoágulos 330- aglutinação plaquetária
333 (insere uma linha em branco editável)
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340- aparente trombocitopenia 341- nítida trombocitopenia
350- aparente trombocitose 351- nítida trombocitose
360- plaquetas normais, contagem prejudicada.
361- plaquetas aparentemente normais em numero e morfologia 370 contagem de plaquetas prejudicada
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Automação Sysmex XE 2100 Versão n.º: 4
Data da efetivação:
POP n.º: H01 Página 21 de 19
Informações:
Atividades Responsável Assinatura Data
Elaborado por: Dalton Kittler de Mello
Revisado por: Márcia Henriques Xavier
Aprovado por: Raquel Arrieche Fernandes
Liberado por: Andréa Cauduro de Castro
Desativado por:
Distribuição:
Local Ass.responsável Data/distribuição Data/recolhimento
Revisões:
Revisado por: Assinatura Data
Desativado:
Data:_______/_______/_______
Desativado por:_____________________________________________________________
Motivo:____________________________________________________________________
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Conhecimento:
Colaboradores devem ler e dar ciência (por escrito).
Declaramos que lemos, compreendemos e seguiremos fielmente este procedimento:
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