Tradução da

6ª Edição
Americana

Manual de Bioquímica com

Correlações Clínicas
Thomas M. Devlin

Lançamento 2007

ISBN: 9788521204060
Páginas: 1216
Formato: 21x28 cm
Peso: 2.948 kg

RESUMO฀DO฀
CONTEÚDO
| |
PARTE฀I฀฀ ฀฀ESTRUTURA฀DE฀
MACROMOLÉCULAS
1฀฀Estrutura฀da฀Célula฀Eucariótica,฀1฀
2฀฀DNA฀e฀RNA:฀Composição฀e฀Estrutura,฀23฀
3฀฀Proteínas฀I:฀Composição฀e฀Estrutura,฀73
|
PARTE฀II฀฀ ฀฀TRANSMISSÃO฀DA฀
INFORMAÇÃO
4฀฀Replicação,฀Recombinação฀e฀Reparo฀do฀DNA,฀132
5฀฀RNA:฀Transcrição฀e฀Processamento,฀172
6฀฀Síntese฀de฀Proteínas:฀Tradução฀e฀Modificações฀
Pós-Tradução,฀197
7฀฀DNA฀Recombinante฀e฀Biotecnologia,฀241
8฀฀Regulação฀da฀Expressão฀Gênica,฀287
฀ |
PARTE฀III฀฀ ฀ FUNÇÕES
DE฀PROTEÍNAS
9฀฀฀ Proteínas฀II:฀Relações฀Estrutura-Função฀em฀
Famílias฀de฀Proteínas,฀315
10฀฀Enzimas:฀Classificação,฀Cinética฀e฀Controle,฀358
11฀฀Citocromos฀P450฀e฀Óxido฀Nítrico฀Sintases,฀407
12฀฀Membranas฀Biológicas:฀Estruturas฀e฀Transporte฀
em฀Membranas,฀436
13฀฀Fundamentos฀da฀Transdução฀de฀Sinal,฀483
BioQ.00 7
CONTEÚDO฀฀฀|฀฀฀VII
PARTE฀IV฀฀ ฀฀VIAS฀METABÓLICAS฀E฀SEU฀
CONTROLE
14฀฀Bioenergética฀e฀Metabolismo฀Oxidativo,฀521
15฀฀Metabolismo฀de฀Carboidratos฀I:฀Principais฀Vias฀
Metabólicas฀e฀Seu฀Controle,฀572
16฀฀Metabolismo฀de฀Carboidratos฀II:฀Vias฀Especiais฀
e฀Glicoconjugados,฀626
17฀฀Metabolismo฀de฀Lipídeos฀I:฀Síntese,฀Armazena-
mento฀e฀Utilização฀de฀ácidos฀Graxos฀e฀Triacilgli-
ceróis,฀650
18฀ Metabolismo฀de฀Lipídeos฀II:฀Vias฀do฀Metabolis-
mo฀de฀Lipídeos฀Especiais,฀683
19฀ Metabolismo฀de฀aminoácidos,฀725
20฀ Metabolismo฀de฀Purina฀e฀Pirimidina฀Nucletíde-
os,฀770
21฀ Metabolismo฀do฀Heme฀e฀do฀Ferro,฀803
22฀ Inter-Relações฀Metabólicas,฀829
|
PARTE฀V฀฀ ฀ PROCESSOS
฀ FISIOLÓGICOS
23฀ Bioquímica฀de฀Hormônios,฀870
24฀ Biologia฀Molecular฀das฀Células,฀925
25฀ Ciclo฀Celular,฀Morte฀Celular฀Programada฀e฀Cân-
cer,฀987
26฀ Digestão฀e฀Absorção฀de฀Constituintes฀Nutricio-
nais฀Básicos,฀1009
27฀ Princípios฀de฀Nutrição฀I:฀Macronutrientes,฀1043
28฀ Princípios฀de฀Nutrição฀II:฀Micronutrientes,฀1063
APÊNDICE฀REVISÃO฀DE฀QUÍMICA฀
ORGÂNICA,฀1094
GLOSSÁRIO,฀1107
ÍNDICE,฀1134
22.01.07 16:25:01
 CONTEÚDO฀฀฀|฀฀฀IX

CONTEÚDO
PREFÁCIO,฀XXI ฀ BIBLIOGRAFIA,฀69
PREFÁCIO฀PARA฀A฀EDIÇÃO฀BRASILEIRA,฀XXIII ฀ QUESTÕES฀E฀RESPOSTAS,฀70
AGRADECIMENTOS,฀XXV ฀ CORRELAÇÕES฀CLÍNICAS
TRADUTOR฀E฀CO-AUTORES,฀XXVII ฀ ฀ 2.1฀ Vacinas฀de฀DNA,฀25
฀ ฀ 2.2฀ Uso฀Diagnóstico฀de฀Matrizes฀(Ar-฀
฀ ฀ ฀ rays)฀de฀DNA฀em฀Medicina฀e฀Gené-฀

|
PARTE฀I฀ ฀฀ESTRUTURA฀DE฀
MACROMOLÉCULAS
฀
฀
฀
฀
฀
฀
฀ tica,฀38
2.3฀ Antibióticos฀Antitumorais฀que฀Mu-฀
฀ dam฀a฀Forma฀do฀DNA,฀42
฀ ฀ 2.4฀ Persistência฀Hereditária฀de฀Hemo-฀
1฀฀|฀฀ESTRUTURA฀DA฀CÉLULA฀EUCARIÓTICA,฀1 ฀ ฀ ฀ globina฀Fetal,฀45
฀ ฀ 2.5฀ Telomerase฀como฀Alvo฀para฀Agen-฀
฀ 1.1฀ VISÃO฀GERAL:฀CÉLULAS฀E฀COMPARTI-฀ ฀ ฀ ฀ tes฀Anticâncer,฀46
฀ ฀ MENTOS฀CELULARES,฀2 ฀ ฀ 2.6฀ Expansão฀de฀Tripletes฀de฀DNA฀re-฀฀
฀ 1.2฀ ÁGUA,฀PH฀E฀SOLUTOS:฀O฀AMBIENTE฀฀ ฀ ฀ ฀ petitivos฀em฀Doença฀Humana,฀48
฀ ฀ AQUOSO฀DAS฀CÉLULAS,฀3 ฀ ฀ 2.7฀ Topoisomerases฀no฀Tratamento฀de฀฀
฀ 1.3฀ COMPOSIÇÃO฀DE฀CÉLULAS฀EUCARIÓTI-฀ ฀ ฀ ฀ Doença,฀52
฀ ฀ CAS:฀PAPÉIS฀FUNCIONAIS฀DE฀ORGANE-฀ ฀ ฀ 2.8฀ Resistência฀de฀Staphylococcus฀฀à฀฀
฀ ฀ LAS฀SUBCELULARES฀E฀SISTEMAS฀DE฀฀ ฀ ฀ ฀ Eritromicina,฀65
฀ ฀ MEMBRANAS,฀11
฀ 1.4฀ INTEGRAÇÃO฀E฀CONTROLE฀DAS฀FUN-฀
฀
฀
฀ ÇÕES฀CELURES,฀19฀
BIBLIOGRAFIA,฀20 |
3฀฀ ฀฀PROTEÍNAS฀I:฀COMPOSIÇÃO฀E฀ESTRUTURA,฀
73
฀ QUESTÕES฀E฀RESPOSTAS,฀20
฀ CORRELAÇÕES฀CLÍNICAS ฀ 3.1฀ PAPÉIS฀FUNCIONAIS฀DE฀PROTEÍNAS฀NO฀฀
฀ ฀ 1.1฀ Concentração฀Sangüínea฀de฀Bicar-฀ ฀ ฀ HOMEM,฀74
฀ ฀ ฀ bonato฀na฀Acidose฀Metabólica,฀10 ฀ 3.2฀ COMPOSIÇÃO฀EM฀AMINOÁCIDOS฀DE฀฀
฀ ฀ 1.2฀ Doenças฀Mitocondriais,฀15 ฀ ฀ PROTEÍNAS,฀75
฀ ฀ 1.3฀ Enzimas฀Lisossomais฀e฀Gota,฀16 ฀ 3.3฀ PROPRIEDADES฀DE฀CARGAS฀E฀QUÍMICAS฀฀
฀ ฀ 1.4฀ Deficiência฀de฀Lipase฀Ácida ฀ ฀ DE฀AMINOÁCIDOS฀E฀PROTEÍNAS,฀81
฀ ฀ ฀ Lisossomal,฀18 ฀ 3.4฀ ESTRUTURA฀PRIMÁRIA฀DE฀PROTEÍNAS,฀88
฀ ฀ 1.5฀ Doenças฀da฀Biogênese฀de฀Peroxis-฀ ฀ 3.5฀ NÍVEIS฀SUPERIORES฀DE฀ORGANIZAÇÃO฀฀
฀ ฀ ฀ somos฀(PBDs),฀19 ฀ ฀ PROTEÍCA,฀90
฀ 3.6฀ OUTROS฀TIPOS฀DE฀PROTEÍNAS,฀97
฀ 3.7฀ DOBRAMENTO฀(FOLDING)฀DE฀PROTEÍ-฀
|
2฀฀ ฀ DNA฀E฀RNA:฀COMPOSIÇÃO฀E฀ESTRUTURA,฀
23
฀
฀
฀
฀
NAS฀DE฀ESTRUTURAS฀ALEATÓRIAS฀฀
PARA฀SINGULARES:฀ESTABILIDADE฀DA฀฀
฀ ฀ PROTEÍNA,฀108
฀ 2.1฀ VISÃO฀GERAL,฀24 ฀ 3.8฀ ASPECTOS฀DINÂMICOS฀DA฀ESTRUTURA฀฀
฀ 2.2฀ COMPONENTES฀ESTRUTURAIS฀DOS฀ÁCI-฀ ฀ ฀ DE฀PROTEÍNAS,฀115
฀ ฀ DOS฀NUCLÉICOS:฀NUCLEOBASES,฀NU-฀ ฀ 3.9฀ CARACTERIZAÇÃO,฀PURIFICAÇÃO฀E฀฀
฀ ฀ CLEOSÍDEOS฀E฀NUCLEOTÍDEOS,฀26 ฀ ฀ DETERMINAÇÃO฀DA฀ESTRUTURA฀E฀OR-฀
฀ 2.3฀ ESTRUTURA฀DO฀DNA,฀28 ฀ ฀ GANIZAÇÃO฀DE฀PROTEÍNAS,฀116
฀ 2.4฀ ORDEM฀SUPERIOR฀DA฀ESTRUTURA฀DO฀฀ ฀ BIBLIOGRAFIA,฀128
฀ ฀ DNA,฀47 ฀ QUESTÕES฀E฀RESPOSTAS,฀129
฀ 2.5฀ SEQÜÊNCIA฀E฀FUNÇÃO฀DO฀DNA,฀57 ฀ CORRELAÇÕES฀CLÍNICAS
฀ 2.6฀ ESTRUTURA฀DO฀RNA,฀61 ฀ ฀ 3.1฀ Proteínas฀Plasmáticas฀no฀Diagnósti-฀
฀ 2.7฀ TIPOS฀DE฀RNA,฀64 ฀ ฀ ฀ co฀de฀Doenças,฀86

BioQ.00 9 22.01.07 16:25:01

 X฀฀฀|฀฀฀CONTEÚDO
฀
฀
฀
฀
฀
฀
3.2฀
฀
฀
Diferenças฀em฀Insulinas฀Usadas฀em฀฀
Tratamento฀de฀Diabetes฀Mellitus,฀฀
89
|
5฀฀ ฀฀฀ RNA:฀TRANSCRIÇÃO฀E฀PROCESSAMENTO,฀
172

฀ ฀ 3.3฀ Uma฀Mutação฀Não-Conservativa฀฀
฀ ฀ ฀ Ocorre฀em฀Anemia฀Falciforme,฀90 ฀ 5.1฀ VISÃO฀GERAL,฀173
฀ ฀ 3.4฀ Doenças฀de฀síntese฀de฀Colágeno,฀98 ฀ 5.2฀ MECANISMOS฀DE฀TRANSCRIÇÃO,฀173
฀ ฀ 3.5฀ Hiperlipidemias,฀103 ฀ 5.3฀ TRANSCRIÇÃO฀EM฀EUCARIOTOS,฀178
฀ ฀ 3.6฀ Hipolipoproteinemias,฀105 ฀ 5.4฀ PROCESSAMENTO฀DE฀RNA,฀184
฀ ฀ 3.7฀ Hemoglobina฀Glicosilada,฀HbA1c ,฀฀ ฀ 5.5฀ EXPORTAÇÃO฀DO฀RNA฀E฀CONTROLE฀DE฀฀
฀ ฀ ฀ 108 ฀ ฀ QUALIDADE,฀191
฀ ฀ 3.8฀ Proteínas฀Como฀Agentes฀Infeccio-฀ ฀ 5.6฀ RNAs฀PEQUENOS฀INIBITÓRIOS,฀192
฀ ฀ ฀ sos:฀Príons฀e฀Encefalopatias฀Espon-฀ ฀ 5.7฀ REPARO฀DO฀DNA฀ACOPLADO฀À฀TRANS-฀
฀ ฀ ฀ giformes฀Transmissíveis฀Humanas฀฀ ฀ ฀ CRIÇÃO,฀192
฀ ฀ ฀ (TSEs),฀110 ฀ 5.8฀ NUCLEASES฀E฀TURNOVER฀DO฀RNA,฀193
฀ ฀ 3.9฀ Uso฀de฀Análise฀de฀Aminoácidos฀em฀฀ ฀ BIBLIOGRAFIA,฀194
฀ ฀ ฀ Diagnóstico฀de฀Doenças,฀121 ฀ QUESTÕES฀E฀RESPOSTAS,฀195
฀ CORRELAÇÕES฀CLÍNICAS
฀ ฀ 5.1฀ Antibióticos฀e฀Toxinas฀Que฀Têm฀฀

|
PARTE฀II฀ ฀฀TRANSMISSÃO฀DA฀
INFORMAÇÃO
฀
฀
฀
฀
฀
฀
฀ RNA฀Polimerase฀Como฀Alvo,฀176
5.2฀ Síndrome฀do฀X฀Frágil:฀Uma฀Doença฀฀
฀ de฀RNA-Cromatina?,฀179
฀ ฀ 5.3฀ Envolvimento฀de฀Fatores฀Transcrip-฀
฀ ฀ ฀ cionais฀em฀Carcinogênese,฀182

|
4฀฀ ฀฀฀ REPLICAÇÃO,฀RECOMBINAÇÃO฀E฀REPARO฀
DO฀DNA,฀132
฀
฀
฀
฀
฀
฀
5.4฀ Talassemia฀Devido฀a฀Defeitos฀na฀฀
฀ Síntese฀de฀RNA฀Mensageiro,฀188
5.5฀ Auto-Imunidade฀em฀Doença
฀ 4.1฀ CARACTERÍSTICAS฀COMUNS฀DA฀REPLI-฀ ฀ ฀ ฀ do฀Tecico฀Conjuntivo,฀189
฀ ฀ CAÇÃO,฀RECOMBINAÇÃO฀E฀REPARO,฀฀ ฀ ฀ 5.6฀ Síndrome฀de฀Cockayne,฀193
฀ ฀ 133
฀
฀
฀
4.2฀ REPLICAÇÃO฀DO฀DNA,฀133
4.3฀ RECOMBINAÇÃO,฀151
4.4฀ REPARO,฀156
|
6฀฀ ฀฀฀ SÍNTESE฀DE฀PROTEÍNAS:฀TRADUÇÃO฀E฀
MODIFICAÇÕES฀PÓS-TRADUÇÃO,฀197

฀ BIBLIOGRAFIA,฀169 ฀ 6.1฀ VISÃO฀GERAL,฀198

฀ QUESTÕES฀E฀RESPOSTAS,฀169 ฀ 6.2฀ COMPONENTES฀DO฀APARELHO฀DE฀TRA-฀
฀ CORRELAÇÕES฀CLÍNICAS ฀ ฀ DUÇÃO,฀198
฀ ฀ 4.1฀ Quimioterapia฀Pode฀Ter฀Como฀Al-฀ ฀ 6.3฀ BIOSSÍNTESE฀DE฀PROTEÍNAS,฀209
฀ ฀ ฀ vos฀Precursores฀da฀Síntese฀do฀DNA,฀฀ ฀ 6.4฀ AMADURECIMENTO฀DE฀PROTEÍNAS:฀฀
฀ ฀ ฀ 135 ฀ ฀ DOBRAMENTO,฀MODIFICAÇÃO,฀SECRE-฀
฀ ฀ 4.2฀ Topoisomerases฀Como฀Alvos฀฀Para฀฀ ฀ ฀ ÇÃO฀E฀DIRECIONAMENTO,฀218
฀ ฀ ฀ Drogas,฀144 ฀ 6.5฀ DIRECIONAMENTO฀PARA฀MEMBRANA฀E฀฀
฀ ฀ 4.3฀ Câncer฀e฀o฀Ciclo฀Celular,฀149 ฀ ฀ ORGANELAS,฀224
฀ ฀ 4.4฀ Análogos฀de฀Nucleosídeos฀e฀Resis-฀ ฀ 6.6฀ MAIS฀MODIFICAÇÕES฀PÓS-TRADUÇÃO,฀฀
฀ ฀ ฀ tência฀a฀Drogas฀na฀Terapia฀do฀HIV,฀฀ ฀ ฀ 227
฀ ฀ ฀ 149 ฀ 6.7฀ REGULAÇÃO฀DA฀TRADUÇÃO,฀234
฀ ฀ 4.5฀ Terapia฀Gênica,฀156 ฀ 6.8฀ DEGRADAÇÃO฀E฀TURNOVER฀DE฀PROTEÍ-฀
฀ ฀ 4.6฀ Quimioterapia,฀Lesão฀do฀DNA฀e฀฀ ฀ ฀ NAS,฀235
฀ ฀ ฀ Reparo,฀157 ฀ BIBLIOGRAFIA,฀237
฀ ฀ 4.7฀ Análogos฀de฀Nucleosídeos฀Como฀฀ ฀ QUESTÕES฀E฀RESPOSTAS,฀239
฀ ฀ ฀ Drogas:฀Tiopurinas,฀158 ฀ CORRELAÇÕES฀CLÍNICAS
฀ ฀ 4.8฀ Medicina฀Individualizada,฀159 ฀ ฀ 6.1฀ Mutações฀Com฀Sentido฀Errado:฀฀
฀ ฀ 4.9฀ Xeroderma฀Pigmentoso,฀162 ฀ ฀ ฀ Hemoglobina,฀202
฀ ฀ 4.10฀Reparo฀de฀Pareamento฀Errado฀e฀฀ ฀ ฀ 6.2฀ Mutação฀Gerando฀Códon฀de฀Ter-฀
฀ ฀ ฀ Câncer,฀164 ฀ ฀ ฀ minação,฀202
฀ ฀ 6.3฀฀ α-Talassemia,฀203
฀ ฀ 6.4฀ Mudança฀na฀Fase฀de฀Leitura฀(Fra-฀
฀ ฀ ฀ meshifting)฀Programada฀na฀Bios-฀
฀ ฀ ฀ síntese฀das฀Proteínas฀de฀HIV,฀204

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 CONTEÚDO฀฀฀|฀฀฀XI

฀ ฀ 6.5฀ Mutação฀em฀RNA฀Ribossômico฀฀ ฀ ฀ 7.2฀ Mapas฀de฀Restrição฀e฀Evolução,฀246

฀ ฀ ฀ Mitocondrial฀Resulta฀em฀Surdez฀฀ ฀ ฀ 7.3฀ Seqüenciamento฀Direto฀de฀DNA฀฀
฀ ฀ ฀ Induzida฀por฀Antibiótico,฀217 ฀ ฀ para฀o฀Diagnóstico฀de฀Doenças฀฀
฀ ฀ 6.6฀ Deleção฀de฀um฀Códon,฀Modifica-฀ ฀ ฀ Genéticas,฀248
฀ ฀ ฀ ção฀Pós-Tradução฀Incorreta฀e฀de฀ ฀ ฀ 7.4฀ Análise฀por฀PCR฀Multiplex฀de฀฀ ฀
฀ ฀ ฀ Gradação฀Prematura฀de฀Proteína:฀฀ ฀ ฀ Defeitos฀no฀Gene฀de฀HGPRTase฀฀
฀ ฀ ฀ Fibrose฀Cística,฀219 ฀ ฀ na฀Síndrome฀de฀Lesch-Nyhan,฀252
฀ ฀ 6.7฀ Dobramento฀Errado฀e฀Agregação฀฀ ฀ ฀ 7.5฀ Polimorfismo฀de฀Comprimento฀de฀฀
฀ ฀ ฀ de฀Proteína:฀Doença฀de฀Creuz-฀ ฀ ฀ Fragmentos฀de฀Restrição฀Determina฀฀
฀ ฀ ฀ feldt-Jacob,฀Doença฀da฀Vaca฀Lou-฀ ฀ ฀ a฀Origem฀Clonal฀de฀Tumores,฀257
฀ ฀ ฀ ca,฀Doença฀de฀Alzheimer฀e฀Doen-฀ ฀ ฀ 7.6฀ Polimorfismo฀de฀Conformação฀฀
฀ ฀ ฀ ça฀de฀Huntington,฀220 ฀ ฀ de฀Cadeia-Única฀para฀Detecção฀฀
฀ ฀ 6.8฀ Doenças฀de฀Função฀de฀Lisosso-฀ ฀ ฀ de฀Mutações฀Espontâneas฀que฀฀
฀ ฀ ฀ mos,฀226 ฀ ฀ Podem฀Levar฀a฀SIDS,฀259
฀ ฀ 6.9฀ Hiperproinsulinemia฀Familiar,฀229 ฀ ฀ 7.7฀ Mutagênese฀Sítio-Dirigida฀de฀
฀ ฀ 6.10฀ Ausência฀de฀modificação฀Pós-Tra-฀ ฀ ฀ ฀ HSV฀IgD,฀271
฀ ฀ ฀ dução:฀Deficiência฀Múltipla฀de฀฀ ฀ ฀ 7.8฀ Inibição฀de฀HIV฀Mediada฀por฀RNA,฀฀
฀ ฀ ฀ Sulfatases,฀230 ฀ ฀ 274
฀ ฀ 6.11฀ Defeitos฀na฀Síntese฀de฀Colágeno,฀฀ ฀ ฀ 7.9฀ Terapia฀Gênica:฀Genes฀Normais฀฀
฀ ฀ ฀ 233 ฀ ฀ Podem฀Ser฀Introduzidos฀em฀Células฀฀
฀ ฀ com฀Genes฀Defectivos,฀276

|
7฀฀ ฀฀DNA฀RECOMBINANTE฀E฀BIOTECNOLOGIA,฀
241
฀

฀
฀
฀
฀
7.10฀Modelos฀de฀Animais฀Transgênicos,฀฀
฀ 277
7.11฀ Camundongos฀Knockout฀para฀฀฀
฀ ฀ Definir฀um฀Papel฀para฀o฀฀ ฀
฀ 7.1฀ VISÃO฀GERAL,฀242
฀ ฀ Purinoceptor฀P2Y1,฀279
฀ 7.2฀ A฀REAÇÃO฀DE฀POLIMERASE฀EM฀CADEIA฀฀
฀ ฀ 7.12฀Análise฀por฀Microarray฀de฀Câncer฀฀
฀ (POLYMERASE฀CHAIN฀REACTION),฀243 ฀ ฀ de฀Mama,฀280
฀ 7.3฀ ENDONUCLEASES฀DE฀RESTRIÇÃO฀E฀฀฀
฀ MAPAS฀DE฀RESTRIÇÃO,฀243
8฀฀|฀฀REGULAÇÃO฀DA฀EXPRESSÃO฀GÊNICA,฀287
฀ 7.4฀ SEQÜENCIAMENTO฀DE฀DNA,฀245
฀ 7.5฀ DNA฀RECOMBINANTE฀E฀CLONAGEM,฀฀
฀ 248 ฀ 8.1฀ VISÃO฀GERAL,฀288
฀ 7.6฀ SELEÇÃO฀DE฀UM฀DNA฀ESPECÍFICO฀฀ ฀ ฀ 8.2฀ UNIDADE฀DE฀TRANSCRIÇÃO฀EM฀฀ ฀
฀ CLONADO฀EM฀BIBLIOTECAS,฀252 ฀ BACTÉRIAS:฀O฀OPERON,฀288
฀ 7.7฀ DETECÇÃO฀E฀IDENTIFICAÇÃO฀DE฀฀ ฀ ฀ 8.3฀ OPERON฀LACTOSE฀DE฀E.฀COLI,฀288
฀ ÁCIDOS฀NUCLÉICOS฀E฀PROTEÍNAS฀QUE฀฀ ฀ 8.4฀ OPERON฀TRIPTOFANO฀DE฀E.฀COLI,฀293
฀ LIGAM฀DNA,฀254 ฀ 8.5฀ OUTROS฀OPERONS฀BACTERIANOS,฀297
฀ 7.8฀ DNA฀COMPLEMENTAR฀E฀BIBLIOTECAS฀฀ ฀ 8.6฀ TRANSPOSONS฀BACTERIANOS,฀฀฀299
฀ DE฀DNA฀COMPLEMENTAR,฀260 ฀ 8.7฀ EXPRESSÃO฀GÊNICA฀EM฀EUCARIOTOS,฀฀
฀ 7.9฀ BACTERIÓFAGO,฀COSMÍDEO฀E฀VETORES฀฀ ฀ 300
฀ DE฀CLONAGEM฀EM฀LEVEDURA,฀262 ฀ 8.8฀฀ COMPLEXO฀DE฀PRÉ-INICIAÇÃO฀EM
฀ 7.10฀ ANÁLISE฀DE฀LONGAS฀SEQÜÊNCIAS฀DE฀฀ ฀ ฀ EUCARIOTOS:฀FATORES฀DE฀TRANSCRI-฀
฀ DNA,฀265 ฀ ÇÃO,฀RNA฀POLIMERASE฀II฀E฀DNA,฀303
฀ 7.11฀ VETORES฀DE฀EXPRESSÃO฀E฀PROTEÍNAS฀฀ ฀ 8.9฀ REGULAÇÃO฀DA฀EXPRESSÃO฀GÊNICA฀฀
฀ DE฀FUSÃO,฀265 ฀ EUCARIÓTICA,฀308
฀ 7.12฀ VETORES฀DE฀EXPRESSÃO฀EM฀CÉLULAS฀฀ ฀ BIBLIOGRAFIA,฀312
฀ EUCARIÓTICAS,฀267 ฀ QUESTÕES฀E฀RESPOSTAS,฀312
฀ 7.13฀ MUTAGÊNESE฀SÍTIO-DIRIGIDA,฀269 ฀ CORRELAÇÕES฀CLÍNICAS
฀ 7.14฀ APLICAÇÕES฀DA฀TECNOLOGIA฀DO฀DNA฀฀ ฀ ฀ 8.1฀ Resistência฀Transmissível฀a฀Múltiplas฀฀
฀ RECOMBINANTE,฀272 ฀ ฀ Drogas,฀300
฀ 7.15฀ GENÔMICA,฀PROTEÔMICA฀E฀ANÁLISE฀฀ ฀ ฀ 8.2฀ Síndrome฀de฀Rubstein-Taybi,฀302
฀ MICROARRAY,฀279 ฀ ฀ 8.3฀ Tamoxifeno฀e฀Receptor฀de฀฀ ฀
฀ BIBLIOGRAFIA,฀283 ฀ ฀ Estrógeno฀como฀Alvo,฀309
฀ QUESTÕES฀E฀RESPOSTAS,฀284 ฀ ฀ 8.4฀ Fatores฀de฀Transcrição฀e฀Doença฀฀
฀ CORRELAÇÕES฀CLÍNICAS ฀ Cardiovascular,฀310
฀ ฀ 7.1฀ Reação฀de฀Polimerase฀em฀Cadeia฀฀
฀ ฀ (Polymerase฀Chain฀Reaction),฀245

BioQ.00 11 22.01.07 16:25:02

 XII฀฀฀|฀฀฀CONTEÚDO
PARTE฀III฀|฀฀FUNÇÕES฀DE฀PROTEÍNAS
|
9฀฀ ฀฀฀ PROTEÍNAS฀II:฀RELAÇÕES฀ESTRUTURA-฀
FUNÇÃO฀EM฀FAMÍLIAS฀DE฀PROTEÍNAS,฀
315
฀ 9.1฀ VISÃO฀GERAL,฀316
฀ 9.2฀ MOLÉCULAS฀DE฀ANTICORPOS:฀฀ ฀ ฀
฀ SUPERFAMÍLIA฀DE฀PROTEÍNAS฀฀ ฀ ฀
฀ IMUNOGLOBULINAS,฀316
฀ 9.3฀ PROTEÍNAS฀COM฀UM฀MECANISMO฀฀
฀ CATALÍTICO฀COMUM:฀SERINO฀฀ ฀
฀ PROTEASES,฀324
฀ 9.4฀ HEMOGLOBINA฀E฀MIOGLOBINA,฀334
฀ 9.5฀ O฀COMPLEXO฀PROTÉICO฀DA฀LÂMINA฀฀
฀ BASAL,฀347
฀ BIBLIOGRAFIA,฀355
฀ QUESTÕES฀E฀RESPOSTAS,฀355
฀ CORRELAÇÕES฀CLÍNICAS
฀ 9.1฀ As฀Proteínas฀do฀Complemento,฀319
฀ 9.2฀ Funções฀de฀Diferentes฀Classes฀de฀฀ ฀
฀ Anticorpos,฀319
฀ 9.3฀ Imunização,฀320
฀ 9.4฀ Formação฀de฀Fibrina฀em฀um฀Infarto฀do
฀ ฀฀ Miocárdio฀e฀Uso฀de฀Ativador฀de฀฀ ฀
฀ Plasminogênio฀Tecidual฀Recombinante฀฀
฀ (rt-PA),฀326
฀ 9.5฀ Envolvimento฀de฀Serino฀Proteases฀em฀฀
฀ Metástase฀de฀Células฀Tumorais,฀326
฀ 9.6฀ Hemoglobinopatias,฀335
|
10฀฀ ฀฀ENZIMAS:฀CLASSIFICAÇÃO,฀CINÉTICA฀E฀
CONTROLE,฀358
฀ 10.1฀ VISÃO฀GERAL,฀359
฀ 10.2฀ CLASSIFICAÇÃO฀DE฀ENZIMAS,฀360
฀ 10.3฀ CONCEITOS฀GERAIS฀DE฀MECANISMOS฀฀
฀ ENZIMÁTICOS,฀363
฀ 10.4฀ SÍTIO฀ATIVO฀DE฀UMA฀ENZIMA,฀368
฀ 10.5฀ COENZIMAS,฀CO-SUBSTRATOS฀E฀฀ ฀
฀ COFATORES,฀371
฀ 10.6฀ CINÉTICA฀DE฀REAÇÕES฀QUÍMICAS,฀376
฀ 10.7฀ CINÉTICA฀ENZIMÁTICA฀DE฀REAÇÕES฀DE฀฀
฀ UM฀SUBSTRATO,฀379
฀ 10.8฀ CINÉTICA฀DE฀REAÇÕES฀DE฀DOIS฀฀ ฀
฀ SUBSTRATOS,฀387
฀ 10.9฀ INIBIDORES,฀388
฀ 10.10฀REGULAÇÃO฀DE฀ATIVIDADE฀ENZIMÁ-฀
฀ TICA,฀394
฀ 10.11฀REGULAÇÃO฀DE฀VIAS฀METABÓLICAS,฀฀
฀ 398
฀ 10.12฀APLICAÇÕES฀CLÍNICAS฀DE฀ENZIMAS,฀399
฀ BIBLIOGRAFIA,฀404
฀ QUESTÕES฀E฀RESPOSTAS,฀404
BioQ.00 12
฀ CORRELAÇÕES฀CLÍNICAS
฀ 10.1฀ Mutação฀de฀um฀Sítio฀de฀Ligação฀de฀฀
฀ Coenzima฀Resulta฀em฀Doença฀Clínica,฀฀
฀ 371
฀ 10.2฀ Um฀Caso฀de฀Gota฀Demonstra฀Duas฀Fases฀฀
฀ no฀Mecanismo฀de฀Ação฀Enzimática,฀382
฀ 10.3฀ Efeito฀Fisiológico฀de฀Mudanças฀nos฀฀
฀ Valores฀de฀Km฀de฀Enzimas,฀383
฀ 10.4฀ Labilidade฀Térmica฀da฀Glicose-6-฀ ฀
฀ Fosfato฀Desidrogenase฀Resulta฀em฀฀฀
Anemia฀Hemolítica,฀386
10.5฀ Isoenzimas฀da฀Álcool฀Desidrogenase฀฀
฀ com฀Diferentes฀pHs฀Ótimos,฀386
฀ 10.6฀ Inibidores฀de฀Xantina฀Oxidase฀Isolados฀฀
฀ de฀Plantas,฀388
฀ 10.7฀ Planejamento฀de฀um฀Inibidor฀Seletivo,฀฀
฀ 390
฀ 10.8฀ Um฀Caso฀de฀Envenenamento,฀393
฀ 10.9฀ Cogumelos฀e฀Metabolismo฀de฀Álcool,฀฀
฀ 393
฀ 10.10฀Um฀Caso฀de฀Gota฀Demonstra฀a฀Dife-฀
฀ rença฀entre฀um฀Sítio฀Alostérico฀e฀um
฀ ฀฀ Sítio฀de฀Ligação฀de฀Substrato,฀394
฀ 10.11฀Identificação฀e฀Tratamento฀de฀uma฀฀
฀ Deficiência฀Enzimática,฀400
฀ 10.12฀Ambigüidade฀no฀Ensaio฀de฀Enzimas฀฀
฀ Mutadas,฀401
|
11฀฀ ฀฀CITOCROMOS฀P450฀E฀ÓXIDO฀NÍTRICO฀
SINTASES,฀407
฀ 11.1฀ VISÃO฀GERAL,฀408
฀ 11.2฀ CITOCROMOS฀P450:฀PROPRIEDADES฀E฀฀
฀
฀ FUNÇÃO,฀408
11.3฀ CICLO฀DE฀REAÇÃO฀DO฀CITOCROMO฀฀
฀ P450,฀409
฀ 11.4฀ SISTEMAS฀DE฀TRANSPORTE฀DE฀฀ ฀
฀ ELÉTRONS฀DOS฀CITOCROMOS฀P450,฀410
฀ 11.5฀ CITOCROMO฀P450:฀NOMENCLATURA฀E฀฀
฀ ISOFORMAS,฀412
฀ 11.6฀ CITOCROMOS฀P450:฀SUBSTRATOS฀E฀฀
฀ FUNÇÕES฀FISIOLÓGICAS,฀413
฀ 11.7฀ CITOCROMOS฀P450฀PARTICIPAM฀DE฀฀
฀ SÍNTESE฀DE฀HORMÔNIOS฀ESTERÓIDES฀฀
฀ E฀DE฀OXIGENAÇÃO฀DE฀COMPOSTOS฀฀
฀ ENDÓGENOS,฀414
฀ 11.8฀ INDUÇÃO฀E฀INIBIÇÃO฀DE฀CITOCROMO฀฀
฀ P450,฀423
฀ 11.9฀ AS฀ÓXIDO฀NÍTRICO฀SINTASES:฀฀ ฀
฀ PROPRIEDADES฀E฀FUNÇÃO,฀425
฀ 11.10฀ISOFORMAS฀DE฀ÓXIDO฀NÍTRICO฀฀ ฀
฀ SINTASES฀E฀FUNÇÕES฀FISIOLÓGICAS฀
฀ 428
฀ BIBLIOGRAFIA,฀432
฀ QUESTÕES฀E฀RESPOSTAS,฀434
22.01.07 16:25:03
 CONTEÚDO฀฀฀|฀฀฀XIII

฀
฀
CORRELAÇÕES฀CLÍNICAS
฀
฀
11.1฀Hiperplasia฀Adrenal฀Congênita:฀฀
฀ Deficiência฀de฀CYP21A2,฀416
|
13฀฀ ฀฀FUNDAMENTOS฀DA฀TRANSDUÇÃO฀DE฀
SINAL,฀483

฀ ฀ 11.2฀Produção฀de฀Hormônios฀Esteróides฀฀ ฀ 13.1฀ VISÃO฀GERAL,฀484

฀ ฀ Durante฀a฀Gestação,฀418 ฀ 13.2฀ TRANSDUÇÃO฀DE฀SINAL฀INTERCELULAR,฀฀
฀ ฀ 11.3฀Inibição฀de฀Citocromo฀P450:฀฀ ฀ ฀ 485
฀ ฀ Interações฀Droga-Droga฀e฀Efeitos฀฀ ฀ 13.3฀ RECEPTORES฀PARA฀MOLÉCULAS฀฀ ฀
฀ ฀ Adversos,฀420 ฀ SECRETADAS,฀487
฀ ฀ 11.4฀Papel฀de฀CYP2E1฀em฀Toxicidade฀฀ ฀ 13.4฀ TRANSDUÇÃO฀DE฀SINAL฀INTRACELULAR฀฀
฀ ฀ Hepática฀Induzida฀por฀฀฀ ฀ ฀ POR฀RECEPTORES฀DE฀SUPERFÍCIE฀฀ ฀
฀ ฀ Acetaminofen,฀422 ฀ CELULAR,฀488
฀ ฀ 11.5฀Indução฀de฀Citocromo฀P450:฀฀ ฀ ฀ 13.5฀ RECEPTORES฀CANAIS฀IÔNICOS฀LIGANTE-฀
฀ ฀ Interações฀Droga-Droga฀e฀Efeitos฀฀ ฀ DEPENDENTES,฀493
฀ ฀ Adversos,฀423 ฀ 13.6฀ RECEPTORES฀LIGADOS฀A฀ENZIMAS,฀496
฀ ฀ 11.6฀Polimorfismos฀Genéticos฀das฀฀ ฀ ฀ 13.7฀ RECEPTORES฀DE฀CITOCINAS,฀500
฀ ฀ Enzimas฀P450,฀426 ฀ 13.8฀ RECEPTORES฀ACOPLADOS฀A฀PROTEÍNA฀฀
฀ ฀ 11.7฀Mecanismo฀de฀Ação฀de฀Sildenafil,฀฀ ฀ G,฀500
฀ ฀ 430 ฀ 13.9฀ TRANSDUÇÃO฀DE฀SINAL฀BASEADA฀EM฀฀
฀ ฀ 11.8฀Aspectos฀Clínicos฀da฀Produção฀de฀฀ ฀ AMP฀CÍCLICO,฀506
฀ ฀ Óxido฀Nítrico,฀431 ฀ 13.10฀TRANSDUÇÃO฀DE฀SINAL฀BASEADA฀EM฀฀
฀ ฀ 11.9฀História฀da฀Nitroglicerina,฀432 ฀ GMP฀CÍCLICO,฀509
฀ 13.11฀TRANSDUÇÃO฀DE฀SINAL฀BASEADA฀EM฀฀
฀ CÁLCIO,฀512

|
12฀฀ ฀฀MEMBRANAS฀BIOLÓGICAS:฀ESTRUTURA฀E฀
TRANSPORTE฀EM฀MEMBRANAS,฀436
฀

฀
13.12฀TRANSDUÇÃO฀DE฀SINAL฀BASEADA฀EM฀฀
฀ FOSFOLIPÍDEOS,฀514
BIBLIOGRAFIA,฀517
฀ 12.1฀ VISÃO฀GERAL,฀437 ฀ QUESTÕES฀E฀RESPOSTAS,฀518
฀ 12.2฀ COMPOSIÇÃO฀QUÍMICA฀DE฀฀ ฀ ฀ CORRELAÇÕES฀CLÍNICAS
฀ MEMBRANAS,฀438 ฀ ฀ 13.1฀Família฀de฀Receptores฀Tirosina฀฀
฀ 12.3฀ MICELAS,฀BICAMADAS฀LIPÍDICAS฀E฀฀ ฀ ฀ Quinases฀ErbB/HER฀como฀Alvos฀฀
฀ LIPOSSOMOS,฀445 ฀ ฀ para฀Quimioterapia฀do฀Câncer,฀498
฀ 12.4฀ ESTRUTURA฀DE฀MEMBRANAS฀฀ ฀ ฀ ฀ 13.2฀Receptores฀de฀Quimiocinas฀฀ ฀
฀ BIOLÓGICAS,฀447 ฀ ฀ Acoplados฀a฀Proteína฀G฀como฀Alvos฀฀
฀ 12.5฀ MOVIMENTO฀DE฀MOLÉCULAS฀ATRAVÉS฀฀ ฀ ฀ para฀o฀Vírus฀da฀Imunodeficiência฀฀
฀ DE฀MEMBRANAS,฀456 ฀ ฀ Humana฀(HIV),฀502
฀ 12.6฀ CANAIS฀DE฀MEMBRANAS,฀458 ฀ ฀ 13.3฀Mutações฀em฀Proteína฀G฀Gsα฀em฀฀
฀ 12.7฀ TRANSPORTADORES฀DE฀MEMBRANA,฀฀ ฀ ฀ Tumores฀de฀Glândula฀Pituitária฀e฀฀
฀ 466 ฀ ฀ Doenças฀Endócrinas,฀504
฀ 12.8฀ TRANSPORTE฀PASSIVO,฀468 ฀ ฀ 13.4฀Alterações฀em฀Proteínas฀฀ ฀
฀ 12.9฀ TRANSPORTE฀ATIVO,฀469 ฀ ฀ Sinalizadoras฀de฀Receptor฀β-฀ ฀
฀ 12.10฀IONÓFOROS,฀478 ฀ ฀ Adrenérgico฀em฀Insuficiência฀฀ ฀
฀ BIBLIOGRAFIA,฀479 ฀ ฀ Cardíaca฀Congestiva,฀507
฀ QUESTÕES฀E฀RESPOSTAS,฀480 ฀ ฀ 13.5฀Eixos฀Sinalizadores฀Óxido฀Nítrico/฀
฀ CORRELAÇÕES฀CLÍNICAS ฀ ฀ cGMP฀como฀Alvos฀Terapêuticos฀em฀฀
฀ ฀ 12.1฀Lipossomos฀como฀Carregadores฀de฀฀ ฀ ฀ Doenças฀Cardíacas฀e฀Vasculares,฀511
฀ ฀ Drogas฀e฀Enzimas,฀447
฀ ฀ 12.2฀Anomalias฀na฀Fluidez฀de฀฀ ฀
฀ ฀ Membranas฀Celulares฀em฀Doenças,฀฀
฀ ฀ 454
฀ ฀ 12.3฀Fibrose฀Cística฀e฀o฀Canal฀de฀Cl –,฀460
฀ ฀ 12.4฀O฀Rim฀de฀Mamíferos฀e฀฀฀ ฀
฀ ฀ Aquaporinas,฀462
฀ ฀ 12.5฀Doenças฀Envolvendo฀a฀Superfamília฀฀
฀ ฀ de฀Transportadores฀ABC,฀475
฀ ฀ 12.6฀Doenças฀que฀se฀Devem฀à฀Perda฀de
฀ ฀ ฀ Sistemas฀de฀Transporte฀de฀฀ ฀
฀ ฀ Membranas,฀476

BioQ.00 13 22.01.07 16:25:03

 XIV฀฀฀|฀฀฀CONTEÚDO

|
PARTE฀IV฀ ฀฀VIAS฀METABÓLICAS฀E฀SEU฀ ฀ 15.6฀ GLICOGENÓLISE฀E฀GLICOGÊNESE,฀609
฀ BIBLIOGRAFIA,฀623
CONTROLE ฀ QUESTÕES฀E฀RESPOSTAS,฀623
฀ CORRELAÇÕES฀CLÍNICAS
฀ ฀ 15.1฀ Álcool฀e฀Barbituratos,฀584

|
14฀฀ ฀฀BIOENERGÉTICA฀E฀METABOLISMO฀
OXIDATIVO,฀521
฀
฀
฀
฀
฀
฀
15.2฀ Envenenamento฀por฀Arsênico,฀585
15.3฀ Intolerância฀à฀Frutose,฀587
15.4฀ Diabetes฀Mellitus,฀589
฀ 14.1฀ SISTEMAS฀DE฀PRODUÇÃO฀E฀DE฀฀ ฀ ฀ ฀ 15.5฀ Acidose฀Láctica,฀591
฀ UTILIZAÇÃO฀DE฀ENERGIA,฀522 ฀ ฀ 15.6฀ “Picles”฀de฀Porco฀e฀Hipertermia฀฀
฀ 14.2฀ RELAÇÕES฀TERMODINÂMICAS฀E฀฀ ฀ ฀ ฀ Maligna,฀592
฀ COMPONENTES฀RICOS฀EM฀ENERGIA,฀524 ฀ ฀ 15.7฀ Angina฀Pectoris฀e฀Infarto฀do฀฀฀
฀ 14.3฀ FONTES฀E฀DESTINOS฀DA฀ACETIL-฀ ฀ ฀ ฀ Miocárdio,฀593
฀ COENZIMA฀A,฀529 ฀ ฀ 15.8฀ Deficiência฀de฀Piruvato฀Quinase฀e฀฀
฀ 14.4฀ CICLO฀DOS฀ÁCIDOS฀TRICARBOXÍLICOS,฀฀ ฀ ฀ Anemia฀Hemolítica,฀598
฀ 534 ฀ ฀ 15.9฀ Hipoglicemia฀e฀Crianças฀Prematu-฀
฀ 14.5฀ ESTRUTURA฀E฀COMPARTIMENTALI-฀฀ ฀ ฀ ras,฀599
฀ ZAÇÃO฀POR฀MEMBRANAS฀MITOCON-฀ ฀ ฀ 15.10฀ Hipoglicemia฀e฀Intoxicação฀฀ ฀
฀ DRIAIS,฀540 ฀ ฀ Alcoólica,฀608
฀ 14.6฀ CADEIA฀DE฀TRANSPORTE฀DE฀ELÉTRONS,฀฀ ฀ ฀ 15.11฀ Doenças฀de฀Armazenamento฀de฀฀
฀ 542 ฀ ฀ Glicogênio,฀ 612
฀ 14.7฀ FOSFORILAÇÃO฀OXIDATIVA,฀553
฀ 14.8฀ MEMBRANA฀MITOCONDRIAL฀INTERNA฀฀

|
฀ CONTÉM฀SISTEMAS฀DE฀TRANSPORTE฀DE฀฀ 16฀฀ ฀฀METABOLISMO฀DE฀CARBOIDRATOS฀II:฀
฀ SUBSTRATO฀559 VIAS฀ESPECIAIS฀E฀GLICOCONJUGADOS,฀
฀ 14.9฀ GENES฀MITOCONDRIAIS฀E฀DOENÇAS,฀฀ 626
฀ 563
฀ 14.10฀ESPÉCIES฀REATIVAS฀DE฀OXIGÊNIO฀(ROS),฀ ฀ 16.1฀ VISÃO฀GERAL,฀627
฀ 565 ฀ 16.2฀ VIA฀DAS฀PENTOSES฀FOSFATO,฀627
฀ BIBLIOGRAFIA,฀568 ฀ 16.3฀ INTERCONVERSÕES฀DE฀AÇÚCARES฀฀฀
฀ QUESTÕES฀E฀RESPOSTAS,฀569 ฀ E฀FORMAÇÃO฀DE฀NUCLEOTÍDEO-฀ ฀
฀ CORRELAÇÕES฀CLÍNICAS ฀ AÇÚCAR,฀631
฀ ฀ 14.1฀Deficiência฀de฀Piruvato฀฀฀ ฀ ฀ 16.4฀ BIOSSÍNTESE฀DE฀CARBOIDRATOS฀฀ ฀
฀ ฀ Desidrogenase,฀533 ฀ COMPLEXOS,฀637
฀ ฀ 14.2฀Deficiência฀de฀Fumarase,฀537 ฀ 16.5฀ GLICOPROTEÍNAS,฀638
฀ ฀ 14.3฀Envenenamento฀por฀Cianeto,฀552 ฀ 16.6฀ PROTEOGLICANOS,฀642
฀ ฀ 14.4฀Neuropatia฀Óptica฀Hereditária฀de฀฀ ฀ BIBLIOGRAFIA,฀647
฀ ฀ Leber,฀564 ฀ QUESTÕES฀E฀RESPOSTAS,฀647
฀ ฀ 14.5฀Miopatias฀Mitocondriais฀Devido฀a฀฀ ฀ CORRELAÇÕES฀CLÍNICAS
฀ ฀ Mutações฀em฀Genes฀de฀tRNA,฀564 ฀ ฀ 16.1฀ Glicose฀6-Fosfato฀Desidrogenase:฀฀
฀ ฀ 14.6฀Intolerância฀a฀Exercício฀฀ ฀ ฀ ฀ Deficiência฀Genética฀ou฀presença฀฀
฀ ฀ em฀Pacientes฀com฀Mutações฀no฀฀ ฀ ฀ de฀Variantes฀Genéticas฀em฀฀ ฀
฀ ฀ Citocromo฀b,฀565 ฀ ฀ Eritrócitos,฀629
฀ ฀ 14.7฀Lesão฀por฀Isquemia/Reperfusão,฀฀ ฀ ฀ 16.2฀ Síndrome฀de฀Wernicke-Korsakoff:฀฀
฀ ฀ 567 ฀ ฀ Deficiência฀ou฀Presença฀de฀Varian-฀
฀ ฀ tes฀Genéticos฀de฀Transcetolase,฀฀
฀ ฀ 629

|
15฀฀ ฀฀METABOLISMO฀DE฀CARBOIDRATOS฀I:฀ ฀ ฀ 16.3฀ Síndromes฀de฀Glicoproteínas฀฀฀
PRINCIPAIS฀VIAS฀METABÓLICAS฀E฀SEU฀ ฀ ฀ Deficientes฀em฀Carboidratos฀
CONTROLE,฀572 ฀ ฀ ฀ (CDGS),฀632
฀ ฀ 16.4฀ Frutosúria฀Essencial฀e฀Intolerância฀฀
฀ ฀ à฀Frutose:฀Deficiência฀de฀Frutoqui-฀
฀ 15.1฀ VISÃO฀GERAL,฀573 ฀ ฀ nase฀e฀de฀Frutose฀1-Fosfato฀Aldo-฀
฀ 15.2฀ GLICÓLISE,฀574 ฀ ฀ lase,฀633
฀ 15.3฀ VIA฀GLICOLÍTICA,฀577 ฀ ฀ 16.5฀ Galactosemia:฀Incapacidade฀de฀฀
฀ 15.4฀ REGULAÇÃO฀DA฀GLICÓLISE,฀584 ฀ ฀ Transformar฀Galactose฀em฀Glicose,฀฀
฀ 15.5฀GLUCONEOGÊNESE,฀597 ฀ ฀ 634

BioQ.00 14 22.01.07 16:25:04

 CONTEÚDO฀฀฀|฀฀฀XV

|
฀ ฀ 16.6฀ Pentosúria:฀Deficiência฀de฀Xilitol฀฀ 18฀฀ ฀฀METABOLISMO฀DE฀LIPÍDEOS฀II:฀VIAS฀DO฀
฀ ฀ Desidrogenase,฀635 METABOLISMO฀DE฀LIPÍDEOS฀ESPECIAIS,฀
฀ ฀ 16.7฀ Ácido฀Glucurônico:฀Significado฀฀ 683
฀ ฀ Fisiológico฀da฀Formação฀de฀฀ ฀
฀ ฀ Glucuronídeos,฀635
฀ 18.1฀ VISÃO฀GERAL,฀684
฀ ฀ 16.8฀ Substâncias฀dos฀Grupos฀Sangüí-฀
฀ 18.2฀ FOSFOLIPÍDEOS,฀684
฀ ฀ neos,฀638
฀ 18.3฀ COLESTEROL,฀694
฀ ฀ 16.9฀ Carboidrato฀Marcador฀Comum฀do
฀ 18.4฀ ESFINGOLIPÍDEOS,฀706
฀ ฀ ฀ Direcionamento฀Lisossomal฀e฀฀ ฀
฀ 18.5฀ PROSTAGLANDINAS฀E฀TROMBOXANES,฀฀
฀ ฀ Doença฀da฀Célula฀I,฀640
฀ 714
฀ ฀ 16.10฀Aspartilglicosilaminúria:฀Ausência฀฀
฀ 18.6฀ LIPOXIGENASE฀E฀ÁCIDOS฀฀ ฀ ฀
฀ ฀ de฀4-L-Aspartilglicosamina฀Amido-฀
฀ OXIEICOSATETRAENÓICOS,฀718
฀ ฀ hidrolase,฀641
฀ BIBLIOGRAFIA,฀721
฀ ฀ 16.11฀ Doenças฀de฀Glicolipídeos,฀642
฀ QUESTÕES฀E฀RESPOSTAS,฀722
฀ ฀ 16.12฀Heparina฀é฀um฀Anticoagulante,฀฀
฀ CORRELAÇÕES฀CLÍNICAS
฀ ฀ 643
฀ ฀ 18.1฀Síndrome฀do฀Desconforto฀฀ ฀
฀ ฀ 16.13฀Condrodistrofias฀Devidas฀a฀฀ ฀
฀ ฀ Respiratório,฀687
฀ ฀ Defeitos฀de฀Sulfatação,฀645
฀ ฀ 18.2฀Tratamento฀da฀Hipercolesterolemia,฀฀
฀ ฀ 16.14฀Mucopolissacaridoses,฀646
฀ ฀ 703
฀ ฀ 18.3฀Aterosclerose,฀704

|
฀ ฀ 18.4฀Diagnóstico฀da฀Doença฀de฀Gaucher฀฀
17฀฀ ฀฀METABOLISMO฀DE฀LIPÍDEOS฀I:฀SÍNTESE,฀
฀ ฀ em฀um฀Adulto,฀713
ARMAZENAMENTO฀E฀UTILIZAÇÃO฀DE฀
ÁCIDOS฀GRAXOS฀E฀TRIACILGLICERÓIS,฀650 19฀฀|฀฀METABOLISMO฀DE฀AMINOÁCIDOS,฀725
฀ 17.1฀ VISÃO฀GERAL,฀651
฀ 17.2฀ NATUREZA฀QUÍMICA฀DE฀ÁCIDOS฀฀ ฀ ฀ 19.1฀ VISÃO฀GERAL,฀726
฀ GRAXOS฀E฀ACILGLICERÓIS,฀652 ฀ 19.2฀ INCORPORAÇÃO฀DE฀NITROGÊNIO฀EM฀฀
฀ 17.3฀ TRANSPORTE฀INTERÓRGÃOS฀DE฀ÁCIDOS฀฀ ฀ AMINOÁCIDOS,฀727
฀ 19.3฀ TRANSPORTE฀DE฀NITROGÊNIO฀PARA฀฀
฀ GRAXOS฀E฀SEUS฀PRODUTOS฀PRIMÁRIOS,฀฀
฀ FÍGADO฀E฀RIM,฀732
฀ 656
฀ 19.4฀ CICLO฀DA฀URÉIA,฀733
฀ 17.4฀ SÍNTESE฀DE฀ÁCIDOS฀GRAXOS:฀฀ ฀
฀ 19.5฀ SÍNTESE฀E฀DEGRADAÇÃO฀DE฀฀ ฀
฀ LIPOGÊNESE,฀657 ฀ AMINOÁCIDOS฀INDIVIDUAIS,฀736
฀ 17.5฀ ARMAZENAMENTO฀DE฀ÁCIDOS฀GRAXOS ฀ BIBLIOGRAFIA,฀766
฀ ฀ COMO฀TRIACILGLICERÓIS,฀665 ฀ QUESTÕES฀E฀RESPOSTAS,฀767
฀ 17.6฀ UTILIZAÇÃO฀DE฀ÁCIDOS฀GRAXOS฀PARA฀฀ ฀ CORRELAÇÕES฀CLÍNICAS
฀ PRODUÇÃO฀DE฀ENERGIA,฀667 ฀ ฀ 19.1฀ Deficiências฀de฀Carbamoil฀Fosfato฀฀
฀ 17.7฀ REGULAÇÃO฀DO฀METABOLISMO฀DE฀฀ ฀ ฀ Sintetase฀e฀N-Acetilglutamato฀฀
฀ LIPÍDEOS,฀679 ฀ ฀ Sintetase,฀736
฀ BIBLIOGRAFIA,฀680 ฀ ฀ 19.2฀ Deficiências฀de฀Enzimas฀do฀Ciclo฀฀
฀ QUESTÕES฀E฀RESPOSTAS,฀681 ฀ ฀ da฀Uréia,฀738
฀ CORRELAÇÕES฀CLÍNICAS ฀ ฀ 19.3฀ Doenças฀do฀Metabolismo฀de฀฀฀
฀ ฀ 17.1฀Obesidade,฀654 ฀ ฀ Prolina,฀739
฀ ฀ 17.2฀Papel฀do฀Metabolismo฀de฀Ácidos฀฀ ฀ ฀ 19.4฀ Selenoproteínas,฀740
฀ ฀ Graxos฀em฀Diabetes฀Tipo฀2,฀655 ฀ ฀ 19.5฀ Hiperglicinemia฀Não-Cetótica,฀741
฀ ฀ 17.3฀Ciclo฀Triacilglicerol/Ácido฀Graxo,฀฀ ฀ ฀ 19.6฀ Deficiência฀de฀Ácido฀Fólico,฀743
฀ ฀ 668 ฀ ฀ 19.7฀ Fenilcetonúria,฀745
฀ ฀ 17.4฀Deficiências฀Genéticas฀no฀฀ ฀ ฀ ฀ 19.8฀ Doenças฀do฀Metabolismo฀de฀฀฀
฀ ฀ Transporte฀por฀Carnitina฀ou฀na฀฀ ฀ ฀ Tirosina,฀747
฀ ฀ Carnitina฀Palmitoil฀Transferase,฀670 ฀ ฀ 19.9฀ Mal฀de฀Parkinson,฀748
฀ ฀ 19.10฀Hiper-homocisteinemia฀e฀฀ ฀
฀ ฀ 17.5฀Deficiências฀Genéticas฀das฀Acil-CoA฀฀
฀ ฀ Aterogênese,฀751
฀ ฀ Desidrogenases,฀672
฀ ฀ 19.11฀Doenças฀de฀Aminoácidos฀฀ ฀
฀ ฀ 17.6฀Doença฀de฀Refsum,฀675
฀ ฀ que฀Contêm฀Enxofre,฀752
฀ ฀ 17.7฀Corpos฀Cetônicos฀como฀Combustí-฀ ฀ ฀ 19.12฀Acidúria฀Glutárica,฀756
฀ ฀ veis:฀A฀Dieta฀Atkins,฀677 ฀ ฀ 19.13฀Esquizofrenia฀e฀Outras฀Doenças฀฀
฀ ฀ Associadas฀a฀Neurotransmissores฀฀
฀ ฀ Derivados฀de฀Triptofano,฀757

BioQ.00 15 22.01.07 16:25:04

 XVI฀฀฀|฀฀฀CONTEÚDO
฀ ฀
฀
฀
19.14฀Doenças฀do฀Metabolismo฀de฀฀฀
฀
฀
Aminoácidos฀de฀Cadeia฀Ramifi-฀
cada,฀757
|
21฀฀ ฀ METABOLISMO฀DO฀HEME฀E฀DO฀FERRO,฀
803

฀ ฀ 19.15฀Doenças฀do฀Metabolismo฀de฀฀฀
฀ ฀ Propionato฀e฀Metilmalonato,฀760 ฀ 21.1฀ METABOLISMO฀DO฀FERRO:฀VISÃO฀฀฀
฀ ฀ 19.16฀Doenças฀Envolvendo฀Lisina฀e฀฀฀ ฀ GERAL,฀804
฀ ฀ Ornitina,฀762 ฀ 21.2฀ PROTEÍNAS฀QUE฀CONTÊM฀FERRO,฀804
฀ ฀ 19.17฀Histidinemia,฀762 ฀ 21.3฀ ABSORÇÃO฀INTESTINAL฀DE฀FERRO,฀807
฀ ฀ 19.18฀Doenças฀do฀Metabolismo฀de฀฀฀ ฀ 21.4฀ REGULAÇÃO฀MOLECULAR฀DA฀฀ ฀
฀ ฀ Folato,฀764 ฀ UTILIZAÇÃO฀DE฀FERRO,฀808
฀ 21.5฀ DISTRIBUIÇÃO฀E฀CINÉTICA฀DO฀FERRO,฀฀
฀ 811
฀ 21.6฀ BIOSSÍNTESE฀DE฀HEME,฀813
|
20฀฀ ฀฀METABOLISMO฀DE฀PURINA฀E฀PIRIMIDINA฀
NUCLEOTÍDEOS,฀770
฀
฀
21.7฀ CATABOLISMO฀DE฀HEME,฀821
BIBLIOGRAFIA,฀826
฀ QUESTÕES฀E฀RESPOSTAS,฀827
฀ 20.1฀ VISÃO฀GERAL,฀771 ฀ CORRELAÇÕES฀CLÍNICAS
฀ 20.2฀ FUNÇÕES฀METABÓLICAS฀DOS฀฀ ฀ ฀ ฀ 21.1฀ Sobrecarga฀de฀Ferro฀e฀Infecção,฀฀
฀ NUCLEOTÍDEOS,฀771 ฀ ฀ 805
฀ 20.3฀ METABOLISMO฀DE฀PURINA฀฀ ฀ ฀ ฀ 21.2฀ Patogenicidade฀Microbiana฀e฀฀
฀ NUCLEOTÍDEOS,฀772 ฀ ฀ Ferro,฀805
฀ 20.4฀ METABOLISMO฀DE฀PIRIMIDINA฀฀ ฀ ฀ ฀ 21.3฀ Síntese฀do฀Grupo฀Ferro-Enxofre฀e฀฀
฀ NUCLEOTÍDEOS,฀783 ฀ ฀ Doença฀Humana,฀807
฀ 20.5฀ FORMAÇÃO฀DE฀DESOXIRRIBONUCLEO-฀ ฀ ฀ 21.4฀ Ataxia฀de฀Friedreich,฀807
฀ TÍDEOS,฀786 ฀ ฀ 21.5฀ Absorção฀Duodenal฀de฀Ferro,฀809
฀ 20.6฀ NUCLEOSÍDEO฀E฀NUCLEOTÍDEO฀฀ ฀ ฀ ฀ 21.6฀ Elementos฀de฀Resposta฀ao฀Ferro฀฀
฀ QUINASES,฀789 ฀ ฀ Mutante,฀811
฀ 20.7฀ ENZIMAS฀QUE฀METABOLIZAM฀฀ ฀ ฀ ฀ 21.7฀ Deficiência฀de฀Ceruloplasmina,฀812
฀ NUCLEOTÍDEOS฀COM฀UMA฀FUNÇÃO฀฀ ฀ ฀ 21.8฀ Anemia฀por฀Deficiência฀de฀Ferro,฀฀
฀ EM฀CICLO฀CELULAR฀E฀TAXA฀DE฀DIVISÃO฀฀ ฀ ฀ 812
฀ CELULAR,฀790 ฀ ฀ 21.9฀ Hemocromatose฀Tipo฀I:฀Genética
฀ 20.8฀ SÍNTESE฀DE฀COENZIMAS฀NUCLEOTÍDEOS,฀฀ ฀ ฀ ฀ Molecular฀e฀a฀Questão฀das฀Dietas฀฀
฀ 791 ฀ ฀ Enriquecidas฀em฀Ferro,฀814
฀ 20.9฀ SÍNTESE฀E฀UTILIZAÇÃO฀DE฀5-FOSFOR-฀ ฀ ฀ 21.10฀Hemocromatose฀Tipo฀III,฀814
฀ RIBOSIL-1-PIROFOSFATO,฀791 ฀ ฀ 21.11฀Porfiria฀Intermitente฀Aguda,฀817
฀ 20.10฀AGENTES฀QUIMIOTERÁPICOS฀QUE฀฀฀ ฀ ฀ 21.12฀Papel฀Citoprotetor฀de฀Heme฀฀ ฀
฀ INTERFEREM฀COM฀METABOLISMO฀DE฀฀ ฀ ฀ Oxigenase,฀822
฀ PURINA฀E฀PIRIMIDINA฀NUCLEOTÍDEOS,฀฀ ฀ ฀ 21.13฀Hemólise฀Isoimune฀Neonatal,฀824
฀ 793 ฀ ฀ 21.14฀Deficiência฀de฀Bilirrubina฀UDP-฀
฀ BIBLIOGRAFIA,฀799 ฀ ฀ Glucuronosiltransferase,฀824
฀ QUESTÕES฀E฀RESPOSTAS,฀800 ฀ ฀ 21.15฀Elevação฀de฀Bilirrubina฀Conjugada฀฀
฀ CORRELAÇÕES฀CLÍNICAS ฀ ฀ no฀Soro,฀825
฀ ฀ 20.1฀Gota,฀777
฀ ฀ 20.2฀Síndrome฀de฀Lesch-Nyhan,฀779
฀ ฀ 20.3฀Atividade฀Aumentada฀da฀5’-฀ ฀ 22฀฀|฀฀INTER-RELAÇÕES฀METABÓLICAS,฀829
฀ ฀ Nucleotidase฀Citosólica,฀781
฀ ฀ 20.4฀Doenças฀com฀Imunodeficiências฀฀ ฀ 22.1฀ VISÃO฀GERAL,฀830
฀ ฀ Associadas฀com฀Defeitos฀na฀฀ ฀ ฀ 22.2฀ CICLO฀JEJUM-ALIMENTAÇÃO,฀830
฀ ฀ Degradação฀de฀Purina฀Nucleo-฀฀ ฀ 22.3฀ MECANISMOS฀ENVOLVIDOS฀NA฀฀ ฀
฀ ฀ sídeos,฀782 ฀ MUDANÇA฀DO฀METABOLISMO฀HEPÁ-
฀ ฀ 20.5฀Pacientes฀com฀Câncer฀em฀฀ ฀ ฀ ฀ TICO฀ENTRE฀OS฀ESTADOS฀BEM-฀ ฀
฀ ฀ Tratamento฀por฀Radiações฀ou฀฀ ฀ ฀ ALIMENTADO฀E฀DE฀JEJUM,฀843
฀ ฀ Quimioterapia,฀783 ฀ 22.4฀ INTER-RELAÇÕES฀METABÓLICAS฀DE
฀ ฀ 20.6฀Subclasses฀de฀Pacientes฀com฀฀ ฀ ฀ ฀ TECIDOS฀EM฀VÁRIOS฀ESTADOS฀฀ ฀
฀ ฀ Autismo,฀783 ฀ NUTRICIONAIS฀E฀HORMONAIS,฀852
฀ ฀ 20.7฀Acidúria฀Orótica฀Hereditária,฀785 ฀ BIBLIOGRAFIA,฀866
฀ QUESTÕES฀E฀RESPOSTAS,฀868

BioQ.00 16 22.01.07 16:25:05

 CONTEÚDO฀฀฀|฀฀฀XVII

฀
฀
฀
CORRELAÇÕES฀CLÍNICAS
฀
฀
22.1฀ Obesidade,฀831
22.2฀ Subnutrição฀Protéica,฀832
|
24฀฀ ฀฀BIOLOGIA฀MOLECULAR฀DAS฀CÉLULAS,฀
925
฀ ฀ 22.3฀ Jejum,฀833
฀ ฀ 22.4฀ Síndrome฀de฀Reye,฀837 ฀ 24.1฀ VISÃO฀GERAL,฀926
฀ ฀ 22.5฀ Coma฀Hiperglicêmico,฀฀ ฀ ฀ 24.2฀ TECIDO฀NERVOSO:฀METABOLISMO฀E฀฀
฀ ฀ Hiperosmolar,฀841 ฀ FUNÇÃO,฀926
฀ ฀ 22.6฀ Hiperglicemia฀e฀Glicação฀de฀฀ ฀ ฀ 24.3฀ OLHO:฀METABOLISMO฀E฀VISÃO,฀938
฀ ฀ Proteínas,฀841 ฀ 24.4฀ MOTORES฀MOLECULARES฀E฀PROTEÍNAS฀฀
฀ ฀ 22.7฀ Diabetes฀Mellitus฀Tipo฀2,฀855 ฀ ASSOCIADAS,฀952
฀ ฀ 22.8฀ Diabetes฀Mellitus฀Tipo฀1,฀857 ฀ 24.5฀ MECANISMO฀DA฀COAGULAÇÃO฀DO฀฀
฀ ฀ 22.9฀ Via฀do฀Poliol฀e฀Complicações฀do฀฀ ฀ SANGUE,฀967
฀ ฀ Diabetes,฀857 ฀ BIBLIOGRAFIA,฀983
฀ ฀ 22.10฀Caquexia฀do฀Câncer,฀858 ฀ QUESTÕES฀E฀RESPOSTAS,฀984
฀ CORRELAÇÕES฀CLÍNICAS

|
฀ ฀ 24.1฀ Síndrome฀Miastênica฀de฀Lambert-฀
PARTE฀V฀ ฀฀PROCESSOS฀ ฀ ฀ Eaton,฀933
฀ FISIOLÓGICOS ฀ ฀ 24.2฀ Miastenia฀Gravis:฀Uma฀Doença฀฀
฀ ฀ Neuromuscular,฀935
฀ ฀ 24.3฀ Degeneração฀da฀Mácula฀e฀Perda฀฀
23฀฀|฀฀BIOQUÍMICA฀DE฀HORMÔNIOS,฀870 ฀ ฀ de฀Visão,฀942
฀ ฀ 24.4฀ Doença฀de฀Niemann-Pick฀e฀฀ ฀
฀ ฀ Retinite฀Pigmentosa,฀942
฀ 23.1฀ VISÃO฀GERAL,฀871
฀ 23.2฀ HORMÔNIOS฀E฀O฀SISTEMA฀DE฀CASCATA฀฀ ฀ ฀ 24.5฀ Retinite฀Pigmentosa฀por฀Mutação฀฀
฀ HORMONAL,฀872 ฀ ฀ do฀Gene฀da฀Periferina,฀944
฀ 23.3฀ SÍNTESE฀DE฀HORMÔNIOS฀฀ ฀ ฀ ฀ ฀ 24.6฀ Amaurose฀Congênita฀de฀Leber:฀฀
฀ POLIPEPTÍDICOS฀E฀HORMÔNIOS฀DERI-฀ ฀ ฀ Distrofia฀da฀Retina฀Levando฀a฀฀
฀ VADOS฀DE฀AMINOÁCIDOS,฀875 ฀ ฀ Cegueira,฀949
฀ 23.4฀ PROTEÍNAS฀DE฀SINALIZAÇÃO฀฀ ฀ ฀ ฀ 24.7฀ Glicação฀e฀Estrutura฀e฀Função฀de฀฀
฀ HORMONAL,฀883 ฀ ฀ Miosina,฀956
฀ 23.5฀ RECEPTORES฀DE฀HORMÔNIOS฀DE฀฀ ฀ ฀ ฀ 24.8฀ Cardiomiopatias฀Hipertróficas฀฀
฀ MEMBRANA,฀891 ฀ ฀ Familiares฀e฀Mutações฀em฀฀ ฀
฀ 23.6฀ CASCATA฀HORMONAL฀INTRACELULAR:฀฀ ฀ ฀ Proteínas฀Musculares,฀957
฀ PROTEÍNAS฀QUINASES,฀894 ฀ ฀ 24.9฀ Cardiomiopatia฀Dilatada฀e฀฀ ฀
฀ 23.7฀ HORMÔNIOS฀ESTERÓIDES,฀902 ฀ ฀ Mutações฀em฀Actina,฀958
฀ 23.8฀ RECEPTORES฀DE฀HORMÔNIOS฀฀ ฀ ฀ ฀ 24.10฀ Subunidades฀da฀Troponina฀como฀฀
฀ ESTERÓIDES,฀914 ฀ ฀ Marcadores฀de฀Infarto฀do฀฀ ฀
฀ BIBLIOGRAFIA,฀921 ฀ ฀ Miocárdio,฀961
฀ QUESTÕES฀E฀RESPOSTAS,฀922 ฀ ฀ 24.11฀ Canelopatias฀de฀Íons฀Voltagem-฀
฀ CORRELAÇÕES฀CLÍNICAS ฀ ฀ Dependentes,฀962
฀ ฀ 23.1฀Testando฀a฀Atividade฀da฀Pituitária฀฀ ฀ ฀ 24.12฀ Canais฀Iônicos฀e฀Doença฀do฀฀ ฀
฀ ฀ Anterior,฀875 ฀ ฀ Músculo฀Cardíaco,฀962
฀ ฀ 23.2฀Hipopituitarismo,฀879 ฀ ฀ 24.13฀ Mutações฀Afetando฀Pigmentação:฀฀
฀ ฀ 23.3฀Atividade฀Reduzida฀do฀Receptor฀฀ ฀ ฀ Existe฀uma฀Conexão฀com฀Motor฀฀
฀ ฀ de฀Insulina฀Quinase฀no฀Diabetes฀฀ ฀ ฀ Molecular?,฀965
฀ ฀ Mellitus฀Gestacional,฀897 ฀ ฀ 24.14฀ Defeitos฀da฀Via฀Intrínseca:฀฀ ฀
฀ ฀ 23.4฀Contracepção฀Oral,฀913 ฀ ฀ Deficiência฀de฀Pré-calicreína,฀970
฀ ฀ 23.5฀Síndrome฀do฀Excesso฀Aparente฀de฀฀ ฀ ฀ 24.15฀ Hemofilia฀Clássica,฀974
฀ ฀ Mineralocorticóide,฀917 ฀ ฀ 24.16฀ Uso฀de฀Fator฀VIIa฀Recombinante฀฀
฀ ฀ 23.6฀Mutação฀no฀Receptor฀de฀฀ ฀ ฀ ฀ para฀Controlar฀Sangramento,฀975
฀ ฀ Mineralocorticóide฀Resulta฀em฀฀ ฀ ฀ 24.17฀ Trombose:฀Defeitos฀na฀Via฀da฀฀
฀ ฀ Hipertensão฀e฀Toxemia฀da฀Gravidez,฀฀ ฀ ฀ Proteína฀C฀e฀Níveis฀Aumentados฀฀
฀ ฀ 919 ฀ ฀ de฀Fatores฀da฀Coagulação,฀979

BioQ.00 17 22.01.07 16:25:05

 XVIII฀฀฀|฀฀฀CONTEÚDO

|
25฀฀ ฀฀CICLO฀CELULAR,฀MORTE฀CELULAR฀
PROGRAMADA฀E฀CÂNCER,฀987 |
27฀฀ ฀฀PRINCÍPIO฀DE฀NUTRIÇÃO฀I:฀
MACRONUTRIENTES,฀1043

฀ 25.1฀ VISÃO฀GERAL,฀988 ฀ 27.1฀ VISÃO฀GERAL,฀1044

฀ 25.2฀ CICLO฀CELULAR,฀988 ฀ 27.2฀ METABOLISMO฀ENERGÉTICO,฀1044
฀ 25.3฀ APOPTOSE:฀MORTE฀CELULAR฀฀ ฀ ฀ 27.3฀ METABOLISMO฀DE฀PROTEÍNAS,฀1045
฀ PROGRAMADA,฀993 ฀ 27.4฀ DESNUTRIÇÃO฀PROTÉICO-ENERGÉTICA,฀฀
฀ 25.4฀ CÂNCER,฀997 ฀ 1048
฀ BIBLIOGRAFIA,฀1005 ฀ 27.5฀ EXCESSIVA฀INGESTÃO฀PROTÉICO-฀ ฀
฀ QUESTÕES฀E฀RESPOSTAS,฀1007 ฀ ENERGÉTICA,฀1050
฀ CORRELAÇÕES฀CLÍNICAS ฀ 27.6฀ CARBOIDRATOS,฀1051
฀ ฀ 25.1฀Vírus฀Oncogênicos฀de฀DNA,฀999 ฀ 27.7฀ GORDURAS,฀1051
฀ ฀ 25.2฀Droga฀Anti-Câncer฀Molecularmente฀฀ ฀ 27.8฀ FIBRAS,฀1052
฀ ฀ Dirigida,฀1002 ฀ 27.9฀ COMPOSIÇÃO฀DOS฀MACRONUTRIENTES฀฀
฀ ฀ 25.3฀Causa฀Ambiental฀de฀Cânceres฀฀฀ ฀ DA฀DIETA,฀1054
฀ ฀ Humanos,฀1003 ฀ BIBLIOGRAFIA,฀1059
฀ QUESTÕES฀E฀RESPOSTAS,฀1060

|
26฀฀ ฀฀DIGESTÃO฀E฀ABSORÇÃO฀DE฀ ฀ CORRELAÇÕES฀CLÍNICAS
CONSTITUINTES฀NUTRICIONAIS฀BÁSICOS,฀ ฀ ฀ 27.1฀Dietas฀Vegetarianas฀e฀Necessidades฀฀
1009 ฀ ฀ Protéico-Energéticas฀para฀Crianças,฀฀
฀ ฀ 1047
฀ ฀ 27.2฀Ingestão฀de฀Proteínas฀na฀Dieta฀e฀฀
฀ 26.1฀ VISÃO฀GERAL,฀1010
฀ ฀ Doença฀Renal,฀1048
฀ 26.2฀ CONSIDERAÇÕES฀GERAIS,฀1012
฀ ฀ 27.3฀Oferecendo฀Proteínas฀e฀Calorias
฀ 26.3฀ TRANSPORTE฀EPITELIAL,฀1016
฀ ฀ ฀ Adequadas฀a฀Pacientes฀Hospitali-฀
฀ 26.4฀ DIGESTÃO฀E฀ABSORÇÃO฀DE฀PROTEÍNAS,฀฀
฀ ฀ zados,฀1049
฀ 1024
฀ ฀ 27.4฀Carga฀de฀Carboidratos฀e฀Resistência฀฀
฀ 26.5฀ DIGESTÃO฀E฀ABSORÇÃO฀DE฀฀ ฀
฀ ฀ Atlética,฀1052
฀ CARBOIDRATOS,฀1028
฀ ฀ 27.5฀Dietas฀Ricas฀em฀Carboidratos฀Versus
฀ 26.6฀ DIGESTÃO฀E฀ABSORÇÃO฀DE฀LIPÍDEOS,฀฀
฀ ฀ ฀ Dietas฀Ricas฀em฀Gorduras฀para฀฀
฀ 1031
฀ ฀ Diabéticos,฀1053
฀ 26.7฀ METABOLISMO฀DE฀ÁCIDOS฀BILIARES,฀฀
฀ ฀ 27.6฀Ácidos฀Graxos฀Poliinsaturados฀e฀฀
฀ 1037
฀ ฀ Fatores฀de฀Risco฀para฀Doença฀฀ ฀
฀ BIBLIOGRAFIA,฀1040
฀ ฀ Cardíaca,฀1055
฀ QUESTÕES฀E฀RESPOSTAS,฀1040
฀ ฀ 27.7฀Adaptação฀Metabólica:฀฀ ฀
฀ CORRELAÇÕES฀CLÍNICAS
฀ ฀ Relação฀entre฀Ingestão฀de฀Carboi-฀
฀ ฀ 26.1฀Cloridorréia฀Familiar฀Causa฀Alcalose฀฀
฀ ฀ dratos฀e฀Triacilgliceróis฀no฀Soro,฀฀
฀ ฀ Metabólica,฀1017
฀ ฀ 1059
฀ ฀ 26.2฀Fibrose฀Cística,฀1020
฀ ฀ 26.3฀Diarréias฀Toxigênicas฀Bacterianas฀e
฀ ฀ ฀ Terapia฀de฀Reposição฀de฀Eletrólitos,฀฀

฀
฀
฀
฀ 1021
26.4฀Aminoacidúria฀Neutra:฀Doença฀de฀฀ |
28฀฀ ฀฀PRINCÍPIO฀DE฀NUTRIÇÃO฀II:฀
MICRONUTRIENTES,฀1063
฀ ฀ Hartnup,฀1026
฀ ฀ 26.5฀Deficiência฀de฀Dissacaridases,฀1030 ฀ 28.1฀ VISÃO฀GERAL,฀1064
฀ ฀ 26.6฀Intervenções฀Farmacológicas฀para ฀ 28.2฀ AVALIAÇÃO฀DE฀MÁ฀NUTRIÇÃO,฀1064
฀ ฀ ฀ Evitar฀Absorção฀de฀Gordura฀e฀฀฀ ฀ 28.3฀ INGESTÃO฀DIETÉTICAS฀DE฀REFERÊNCIAS,฀฀
฀ ฀ Obesidade,฀1033 ฀ 1064
฀ ฀ 26.7฀Cálculos฀de฀Colesterol,฀1036 ฀ 28.4฀ VITAMINAS฀LIPOSSOLÚVEIS,฀1066
฀ ฀ 26.8฀A-β-Lipoproteinemia,฀1038 ฀ 28.5฀ VITAMINAS฀HIDROSSOLÚVEIS,฀1073
฀ 28.6฀ VITAMINAS฀HIDROSSOLÚVEIS฀฀ ฀
฀ LIBERADORAS฀DE฀ENERGIA,฀1074
฀ 28.7฀ VITAMINAS฀HIDROSSOLÚVEIS฀฀ ฀
฀ HEMATOPOIÉTICAS,฀1079
฀ 28.8฀ OUTRAS฀VITAMINAS฀HIDROSSOLÚVEIS,฀฀
฀ 1082
฀ 28.9฀ MACROMINERAIS,฀1084
฀ 28.10฀MINERAIS฀TRAÇOS,฀1084

BioQ.00 18 22.01.07 16:25:05

 CONTEÚDO฀฀฀|฀฀฀XIX

฀ 28.11฀DIETA฀AMERICANA:฀FATO฀E฀FALÁCIA,฀฀ ฀ ฀ 28.5฀Considerações฀Nutricionais฀em฀฀
฀ 1087 ฀ ฀ Alcoólatras,฀1076
฀ 28.12฀AVALIAÇÃO฀DO฀ESTADO฀NUTRICIONAL฀฀ ฀ ฀ 28.6฀Necessidades฀de฀Vitamina฀B6฀em฀฀
฀ NA฀PRÁTICA฀CLÍNICA,฀1087 ฀ ฀ Usuários฀de฀Contraceptivos฀Orais,฀฀
฀ BIBLIOGRAFIA,฀1089 ฀ ฀ 1078
฀ QUESTÕES฀E฀RESPOSTAS,฀1091 ฀ ฀ 28.7฀Polimorfirmos฀Genéticos฀e฀฀ ฀
฀ CORRELAÇÕES฀CLÍNICAS ฀ ฀ Necessidades฀de฀Ácido฀Fólico,฀1081
฀ ฀ 28.1฀Considerações฀Nutricionais฀na฀฀฀ ฀ ฀ 28.8฀Dieta฀e฀Osteoporose,฀1085
฀ ฀ Fibrose฀Cística,฀1068 ฀ ฀ 28.9฀Necessidades฀Nutricionais฀de฀฀ ฀
฀ ฀ 28.2฀Osteodistrofia฀Renal,฀1069 ฀ ฀ Idosos,฀1089
฀ ฀ 28.3฀Considerações฀Nutricionais฀em฀฀
฀ ฀ Recém-Nascidos,฀1073 APÊNDICE฀
฀ ฀ 28.4฀Drogas฀Anticonvulsivantes฀e฀฀ ฀ ฀ REVISÃO฀DE฀QUÍMICA฀ORGÂNICA,฀1094
฀ ฀ Necessidades฀Vitamínicas,฀1074 GLOSSÁRIO,฀1107
ÍNDICE,฀1134

BioQ.00 19 22.01.07 16:25:06

 CAPÍTULO฀1฀฀ESTRUTURA฀DA฀CÉLULA฀EUCARIÓTICA฀฀฀|฀฀฀1

PARTE฀1฀ESTRUTURAS฀DE฀MACROMOLÉCULAS

1
�–

H H
�+
104.5o �+

ESTRUTURA฀DA฀CÉLULA฀
EUCARIÓTICA
Thomas฀M.฀Devlin

1.1฀ VISÃO฀GERAL:฀CÉLULAS฀E฀COMPARTIMENTOS฀ ฀ Retículo฀endoplasmático฀participa฀da฀síntese฀฀

CELULARES,฀2
1.2฀ ÁGUA,฀pH฀E฀SOLUTOS:฀O฀AMBIENTE฀AQUOSO฀
DAS฀CÉLULAS,฀3
Pontes฀de฀hidrogênio฀formam-se฀entre฀moléculas฀
de฀água,฀3
Água฀tem฀propriedades฀singulares฀como฀solvente,฀
4 ฀ Peroxissomos฀desempenham฀papel฀importante฀฀
Algumas฀moléculas฀dissociam-se฀formando฀cátions฀
e฀ânions,฀5
Água฀é฀um฀eletrólito฀fraco,฀6
Muitas฀moléculas฀biologicamente฀importantes฀são฀
ácidos฀ou฀bases฀fracos,฀6
฀ Ácido฀carbônico,฀7
Equação฀de฀Henderson-Hasselbalch฀define฀a฀rela-
ção฀entre฀pH฀e฀concentrações฀de฀ácido฀e฀base฀
conjugados,฀8
Tamponamento฀é฀importante฀para฀controlar฀o฀pH,฀
9
1.3฀ COMPOSIÇÃO฀DE฀CÉLULAS฀EUCARIÓTICAS:฀
PAPÉIS฀FUNCIONAIS฀DE฀ORGANELAS฀SUBCE-
LULARES฀E฀SISTEMAS฀DE฀MEMBRANAS,฀11
Composição฀química฀geral฀das฀células,฀12
Papel฀funcional฀de฀organelas฀subcelulares฀e฀siste-
mas฀de฀membranas,฀13
฀ Membrana฀Plasmática฀é฀a฀fronteira฀de฀uma฀฀
฀ célula,฀13
฀ Núcleo฀é฀local฀de฀síntese฀de฀DNA฀e฀RNA,฀13
฀ protéica฀e฀de฀muitas฀vias฀de฀síntese,฀13
Complexo฀de฀Golgi฀está฀envolvido฀na฀secreção฀de฀
proteínas,฀14
Mitocôndria฀fornece฀a฀maior฀parte฀do฀ATP฀de฀que฀
a฀célula฀necessita,฀14
Lisossomos฀são฀necessários฀para฀digestão฀intrace-
lular,฀15
฀ no฀metabolismo฀de฀lipídeos,฀17
฀ Citoesqueleto฀organiza฀o฀conteúdo฀intracelular,฀฀
฀ 18
฀ Citosol฀contém฀componentes฀celulares฀solúveis,฀฀
฀ 18
1.4฀ INTEGRAÇÃO฀E฀CONTROLE฀DAS฀FUNÇÕES฀
CELULARES,฀19
BIBLIOGRAFIA,฀20
QUESTÕES฀E฀RESPOSTAS,฀20
CORRELAÇÕES฀CLÍNICAS
1.1฀ Concentração฀Sangüínea฀de฀Bicarbonato฀na฀
Acidose฀Metabólica,฀10
1.2฀ Doenças฀Mitocondriais,฀15
1.3฀ Enzimas฀Lisossomais฀e฀Gota,฀16
1.4฀ Deficiência฀de฀Lipase฀Ácida฀Lisossomal,฀18
1.5฀ Doenças฀da฀Biogênese฀de฀Peroxissomos฀
(PBDs),฀19

BioQ.01 1 22.01.07 16:09:40

 |
CAPÍTULO฀1฀฀ESTRUTURA฀DA฀CÉLULA฀EUCARIÓTICA฀฀฀|฀฀฀11

1.3฀ ฀COMPOSIÇÃO฀ Partição฀ de฀ atividades฀ e฀ componentes฀ em฀ espaços฀

DE฀CÉLULAS฀
EUCARIÓTICAS:฀
PAPÉIS฀FUNCIONAIS฀
DE฀ORGANELAS฀
SUBCELULARES฀
E฀SISTEMAS฀DE฀
MEMBRANAS
Células฀ eucarióticas฀ contêm฀ organelas฀ celulares฀
bem฀ definidas,฀ como฀ núcleo,฀ mitocôndrias,฀ lisossomos฀
e฀peroxissomos,฀todos฀delimitados฀por฀uma฀membrana฀
(Figura฀1.9).฀Membranas฀formam฀uma฀rede฀tubular฀por฀
toda฀ a฀ célula,฀ o฀ retículo฀ endoplasmático฀ e฀ o฀ complexo฀
de฀Golgi,฀englobando฀um฀espaço฀interconectado฀ou฀cis-
ternas,฀ respectivamente.฀ A฀ natureza฀ lipídeo-proteína฀
das฀ membranas฀ celulares฀ (ver฀ p.฀ 455)฀ impede฀ rápi-
do฀movimento฀de฀muitas฀moléculas,฀incluindo฀água,฀de฀
um฀compartimento฀para฀outro.฀Mecanismos฀específicos฀
para฀ deslocamento฀ de฀ moléculas฀ pequenas฀ e฀ grandes,฀
carregadas฀ou฀não-carregadas,฀permitem฀que฀as฀várias฀
membranas฀modulem฀concentrações฀de฀substâncias฀em฀
seus฀ compartimentos.฀ Citosol฀ e฀ compartimento฀ fluido฀
de฀organelas฀têm฀composição฀distinta฀em฀íons฀inorgâni-
cos,฀moléculas฀orgânicas,฀proteínas฀e฀ácidos฀nucléicos.
delimitados฀por฀membranas฀tem฀muitas฀vantagens฀para฀
a฀economia฀da฀célula,฀incluindo฀(a)฀seqüestro฀de฀subs-
tratos,฀ cofatores฀ e฀ enzimas฀ para฀ maior฀ eficiência฀ me-
tabólica฀ e฀ (b)฀ ajuste฀ de฀ pH฀ e฀ composição฀ iônica฀ para฀
máxima฀atividade฀de฀processos฀biológicos.
As฀atividades฀e฀a฀composição฀de฀estruturas฀e฀organe-
ER
las฀celulares฀são฀determinadas฀em฀células฀intactas฀por฀
métodos฀ histoquímicos,฀ imunológicos฀Pe฀ de฀ coloração฀
fluorescente.฀Observações฀contínuas฀em฀tempo฀real฀de฀
eventos฀celulares฀em฀células฀intactas฀viáveis฀são฀possí-
veis.฀Por฀exemplo,฀mudanças฀de฀pH฀e฀de฀concentração฀
M
de฀íon฀cálcio฀podem฀ser฀estudadas฀no฀citosol฀pelo฀uso฀
de฀ indicadores฀ íon-específicos.฀ Organelas฀ individuais,฀
ER
membranas฀e฀componentes฀do฀citosol฀podem฀ser฀isola-
G
dos฀e฀analisados฀após฀rompimento฀da฀membrana฀plas-
Núcleo
mática.฀Técnicas฀para฀romper฀membranas฀incluem฀uso฀
Ly
de฀detergentes,฀choque฀osmótico฀ou฀homogeneização฀de฀
tecidos,฀ onde฀ o฀ atrito฀ quebra฀ a฀ membrana฀ plasmática.฀
Em฀meios฀de฀isolamento฀apropriados,฀organelas฀celula-
Nucléolo
res฀e฀sistemas฀de฀membranas฀podem฀ser฀separados฀por฀
centrifugação,฀graças฀a฀diferenças฀em฀tamanho฀e฀densi-
dade.฀Essas฀técnicas฀permitiram฀isolamento฀de฀frações฀
celulares฀ da฀ maioria฀ dos฀ tecidos฀ de฀ mamíferos.฀ Além฀
M
disso,฀componentes฀de฀organelas,฀como฀mitocôndrias฀e฀
peroxissomos,฀podem฀ser฀isolados฀após฀rompimento฀da฀
membrana฀da฀organela.฀Pelo฀uso฀dessas฀várias฀técnicas,฀
as฀ atividades฀ e฀ as฀ funções฀ dos฀ vários฀ compartimentos฀
(a)
celulares฀foram฀estudadas.
Membrana฀nuclear
Centríolos
Núcleo
Complexo
de฀Golgi
Nucléolo

Cromatina
ER

Ribossomos
livres Vacúolo

M Retículo
endoplasmático

ER Mitocôndria

G (b) Lisossomos Membrana฀celular

Ly Núcleo
FIGURA฀1.9
(a)฀Micrografia฀eletrônica฀de฀uma฀célula฀de฀fígado฀de฀rato,฀
marcada฀para฀indicar฀os฀principais฀componentes฀estruturais฀de฀
células฀eucarióticas฀e฀(b)฀desenho฀esquemático฀de฀uma฀célula฀
Nucléolo animal.฀Note฀o฀número฀e฀a฀variedade฀de฀organelas฀subcelulares฀
e฀a฀rede฀de฀membranas฀interconectadas฀que฀delimitam฀
canais฀ou฀cisternas.฀Nem฀todas฀as฀células฀eucarióticas฀são฀
tão฀complexas฀em฀sua฀aparência,฀mas฀a฀maioria฀contém฀as฀
principais฀estruturas฀mostradas.฀ER,฀retículo฀endoplasmático;฀
G,฀zona฀do฀Golgi;฀Ly,฀lisossomo;฀P,฀peroxissomo;฀M,฀
M mitocôndria.
Fotografia฀(a)฀reimpressa฀com฀permissão฀de฀Dr.฀K.฀R.฀Porter฀
de฀Porter,฀K.฀R.,฀e฀Bonneville,฀M.฀A.฀Em:฀Fine฀Structure฀of฀
Cells฀and฀Tissues.฀Philadelphia:฀Lea฀&฀Febiger,฀1972;฀esquema฀
(b)฀reimpresso฀com฀permissão฀de฀Voet,฀D.,฀e฀Voet,฀J.฀G.฀
Biochemistry,฀2ª฀ed.,฀New฀York,฀Wiley,฀1995.฀©฀(1995)฀John฀
(a)
Wiley฀&฀Sons,฀Inc.

Membrana฀nuclear
Centríolos
Núcleo
BioQ.01 11 Complexo 22.01.07 16:09:57

pendência฀mútua.฀Estima-se฀que฀esse฀evento฀possa฀ter฀
ocorrido฀ há฀ cerca฀ de฀ três฀ bilhões฀ de฀ anos.฀ A฀ herança฀
mitocondrial฀ ocorre฀ por฀ transmissão฀ materna฀ e฀ tem฀
sido฀possível฀estudar฀o฀movimento฀global฀humano฀por฀
avaliação฀das฀variações฀em฀mtDNA.฀Mitocôndrias฀tam-
bém฀ têm฀ os฀ RNAs฀ (ver฀ p.฀ 66)฀ e฀ enzimas฀ necessárias฀
para฀catalisar฀a฀síntese฀de฀algumas฀proteínas.฀A฀maioria฀
das฀proteínas฀mitocondriais,฀entretanto,฀derivaram฀de฀
genes฀presentes฀no฀DNA฀nuclear฀e฀são฀sintetizadas฀em฀
ribossomos฀livres฀no฀citosol,฀depois฀importadas฀para฀a฀
organela.฀ Há฀ várias฀ centenas฀ de฀ doenças฀ genéticas฀ de฀
atividades฀ mitocondriais;฀ algumas฀ resultam฀ de฀ muta-
ções฀ no฀ DNA฀ nuclear฀ que฀ codifica฀ proteínas฀ mitocon-
driais,฀enquanto฀outras฀resultam฀de฀mutações฀no฀DNA฀
mitocondrial฀(ver฀Corr.฀Clín.฀1.2).
Lisossomos฀São฀Necessários฀para฀Digestão฀
Intracelular
Lisossomos฀são฀responsáveis฀pela฀digestão฀intrace-
lular฀ de฀ substâncias฀ extracelulares฀ e฀ intracelulares.฀
Com฀ uma฀ única฀ membrana฀ delimitante,฀ mantêm฀ uma฀
matriz฀com฀pH฀ácido฀de฀cerca฀de฀5.฀Encapsulada฀nes-
sas฀organelas฀está฀uma฀classe฀de฀enzimas฀glicoprotéi-
cas฀–฀hidrolases฀–฀que฀catalisam฀clivagem฀hidrolítica฀de฀
ligações฀ carbono-oxigênio,฀ carbono-nitrogênio,฀ carbo-
CORRELAÇÃO฀CLÍNICA฀1.2
Doenças฀Mitocondriais
A฀primeira฀doença฀(doença฀de฀Luft)฀envolvendo฀es-
pecificamente฀transdução฀de฀energia฀mitocondrial฀
foi฀relatada฀em฀1962.฀Uma฀paciente฀de฀30฀anos฀de฀
idade฀ apresentava฀ fraqueza฀ generalizada,฀ transpi-
ração฀ excessiva,฀ alta฀ ingesta฀ calórica฀ sem฀ ganho฀
de฀peso฀e฀taxa฀de฀metabolismo฀basal฀muito฀elevada฀
(uma฀medida฀da฀utilização฀de฀oxigênio).฀Ela฀tinha฀
um฀defeito฀no฀mecanismo฀que฀controla฀a฀utilização฀
de฀ oxigênio฀ pela฀ mitocôndria฀ (ver฀ Capítulo฀ 14).฀
Desde฀ então,฀ várias฀ centenas฀ de฀ anomalias฀ gené-
ticas฀ foram฀ identificadas฀ que฀ levam฀ a฀ alterações฀
em฀ enzimas,฀ ácidos฀ ribonucléicos,฀ componentes฀
do฀transporte฀de฀elétrons฀e฀sistemas฀de฀transporte฀
de฀membranas฀mitocondriais.฀Mutações฀no฀mtDNA฀
bem฀como฀no฀DNA฀nuclear฀levam฀a฀doenças฀gené-
ticas฀mitocondriais.฀A฀primeira฀doença฀identificada฀
que฀se฀deve฀a฀uma฀mutação฀no฀mtDNA฀foi฀Neuropa-
Fonte:฀Luft,฀R.฀The฀development฀of฀mitochondrial฀medicine.฀Proc.฀Natl.฀Acad.฀Sci.฀USA฀91:8731,฀1994;฀Chalmers,฀
R.M.฀e฀Schapira,฀A.H.V.฀Clinical,฀biochemical฀and฀molecular฀genetic฀features฀of฀Leber’s฀hereditary฀optic฀neuropathy.฀
Biochim.฀Biophys.฀Acta฀1410:147,฀1999;฀Wallace,฀D.C.฀Mitochondrial฀DNA฀in฀aging฀and฀disease.฀Sci.฀Am.฀280:40,฀1997;฀
e฀Wallace,฀D.C.฀Mitochondrial฀diseases฀in฀man฀and฀mouse.฀Science฀283:1482,฀1999.
BioQ.01 15
CAPÍTULO฀1฀฀ESTRUTURA฀DA฀CÉLULA฀EUCARIÓTICA฀฀฀|฀฀฀15
no-enxofre฀ e฀ oxigênio-fósforo฀ em฀ proteínas,฀ lipídeos,฀
carboidratos฀ e฀ ácidos฀ nucléicos.฀ Uma฀ lista฀ parcial฀ das฀
enzimas฀ lisossomais฀ é฀ apresentada฀ na฀ Tabela฀ 1.7.฀ Hi-
drolases฀ lisossomais฀ são฀ mais฀ ativas฀ em฀ pHs฀ ácidos฀ e฀
quebram฀ moléculas฀ complexas฀ em฀ compostos฀ simples฀
de฀baixo฀peso฀molecular฀que฀podem฀ser฀reutilizados.฀A฀
relação฀entre฀pH฀e฀atividade฀enzimática฀é฀discutida฀na฀
p.฀368.
O฀conteúdo฀enzimático฀dos฀lisossomos฀varia฀em฀di-
ferentes฀tecidos฀e฀depende฀das฀funções฀específicas฀do฀
tecido.฀ A฀ membrana฀ lisossomal฀ contém฀ mediadores฀ e฀
receptores฀protéicos฀específicos,฀bem฀como฀transporta-
dores฀ para฀ deslocamento฀ de฀ substâncias฀ através฀ dela.฀
Lisossomos฀ isolados฀ só฀ catalisam฀ hidrólise฀ de฀ subs-
tratos฀ adicionados฀ quando฀ a฀ membrana฀ lisossomal฀ é฀
rompida.฀Rompimento฀da฀membrana฀em฀células฀leva฀à฀
digestão฀celular.฀Várias฀condições฀patológicas฀têm฀sido฀
atribuídas฀à฀liberação฀de฀enzimas฀lisossomais,฀incluin-
do฀artrite,฀respostas฀alérgicas,฀várias฀doenças฀muscula-
res฀e฀destruição฀tecidual฀induzida฀por฀drogas฀(ver฀Corr.฀
Clín.฀1.3).
tia฀Óptica฀Hereditária฀de฀Leber,฀que฀leva฀a฀ceguei-
ra฀súbita฀no฀início฀da฀idade฀adulta.฀Muitas฀doenças฀
mitocondriais฀envolvem฀músculo฀esquelético฀e฀sis-
tema฀nervoso฀central.฀Lesões฀no฀DNA฀mitocondrial฀
podem฀ocorrer,฀devido฀a฀radicais฀livres฀(superóxi-
dos)฀ formados฀ nas฀ mitocôndrias.฀ Anomalias฀ nas฀
mitocôndrias฀têm฀sido฀implicadas฀na฀patofisiologia฀
de฀ esquisofrenia,฀ doença฀ bipolar฀ e฀ doenças฀ dege-
nerativas฀ relacionadas฀ com฀ idade,฀ como฀ a฀ doença฀
de฀Parkinson,฀de฀Alzheimer฀e฀cardiomiopatias.฀Re-
centemente,฀sugeriu-se฀que฀uma฀única฀mutação฀em฀
um฀ tRNA฀ mitocondrial฀ levaria฀ a฀ uma฀ constelação฀
de฀sintomas,฀incluindo฀hipertensão,฀colesterol฀ele-
vado฀no฀sangue฀e฀níveis฀baixos฀de฀Mg 2+฀no฀plasma.฀
Ver฀as฀seguintes฀Correlações฀Clínicas฀para฀detalhes฀
de฀doenças฀mitocondriais:฀6.5,฀p.฀217;฀14.4,฀p.฀564;฀
14.5,฀p.฀564;฀14.6,฀p.฀565;฀e฀14.7,฀p.฀567.
22.01.07 16:10:00

CORRELAÇÃO฀CLÍNICA฀1.5
Doenças฀de฀Biogênese฀de฀Peroxissomos฀(PBDs)
Peroxissomos฀ são฀ responsáveis฀ por฀ várias฀ reações฀
metabólicas฀importantes,฀incluindo฀síntese฀de฀glice-
rol฀éteres,฀encurtamento฀de฀ácidos฀graxos฀de฀cadeia฀
muito฀ longa฀ para฀ que฀ as฀ mitocôndrias฀ possam฀ oxi-
dá-los฀completamente,฀e฀oxidação฀da฀cadeia฀lateral฀
do฀ colesterol฀ necessária฀ à฀ síntese฀ de฀ ácidos฀ bilia-
res.฀Doenças฀de฀biogênese฀de฀peroxissomos฀(PBDs)฀
compreendem฀mais฀de฀25฀doenças฀genética฀e฀fenoti-
picamente฀relacionadas฀que฀envolvem฀atividades฀en-
zimáticas฀de฀peroxissomos.฀São฀doenças฀autossômi-
cas฀recessivas฀raras฀que฀se฀caracterizam฀por฀níveis฀
diminuídos฀ de฀ lipídeos฀ glicerol-éteres฀ (plasmalo-
gênios),฀níveis฀aumentados฀de฀ácidos฀graxos฀de฀ca-
deias฀muito฀longas฀(C24฀e฀C26)฀e฀de฀derivados฀do฀áci-
do฀colestanóico฀(precursores฀de฀ácidos฀biliares).฀As฀
Fonte:฀Wanders,฀R.฀J.,฀Schutgens,฀R.฀B.,฀e฀Barth,฀P.฀G.฀Peroxissomal฀disorders:฀A฀review.฀J.฀Neuropathol.฀Exp.฀Neu-
rol.฀54:฀726,฀1995;฀FitzPatrick,฀D.฀R.,฀Zellweger฀syndrome฀and฀associated฀phenotypes.฀J.฀Med.฀Genet.฀33:863,฀1996;฀e฀
Warren,฀D.S.,฀Wolfe,฀B.฀D.฀e฀Gould,฀S.฀J.฀Phenotype-genotype฀relationships฀in฀PEX10-deficient฀peroxisome฀biogenesis฀
disorder฀patients.฀Hum.฀Mutat.฀15:509,฀2000.
|
1.4฀ ฀INTEGRAÇÃO฀E฀CON-
TROLE฀DAS฀FUNÇÕES฀
CELULARES
Uma฀célula฀eucariótica฀é฀uma฀estrutura฀complexa฀que฀
mantém฀ um฀ ambiente฀ intracelular฀ que฀ permite฀ que฀
muitas฀ reações฀ complexas฀ e฀ funções฀ ocorram฀ com฀ a฀
máxima฀eficiência฀possível.฀Células฀de฀organismos฀mul-
ticelulares฀também฀participam฀da฀manutenção฀do฀bem-
estar฀de฀todo฀o฀organismo,฀exercendo฀influências฀umas฀
sobre฀as฀outras฀para฀manter฀equilíbrio฀entre฀atividades฀
tissulares฀ e฀ celulares.฀ Processos฀ intracelulares฀ e฀ vias฀
metabólicas฀ são฀ muito฀ bem฀ controlados฀ e฀ integrados฀
para฀ conseguir฀ esse฀ equilíbrio.฀ Pouquíssimas฀ funções฀
operam฀ de฀ modo฀ totalmente฀ independente;฀ mudanças฀
em฀uma฀função฀podem฀exercer฀uma฀influência,฀positiva฀
ou฀negativa,฀sobre฀outras฀funções.฀Como฀será฀descrito฀
ao฀longo฀deste฀livro,฀controles฀de฀função฀são฀mediados฀
em฀muitos฀níveis,฀desde฀a฀expressão฀de฀um฀gene฀para฀
alterar฀a฀concentração฀de฀uma฀enzima฀ou฀proteína฀efe-
tora,฀ até฀ mudanças฀ em฀ níveis฀ de฀ substrato฀ ou฀ coenzi-
ma฀para฀ajustar฀a฀velocidade฀de฀uma฀reação฀enzimática฀
específica.฀A฀integração฀de฀muitos฀processos฀celulares฀
é฀controlada฀por฀proteínas฀que฀funcionam฀como฀ativa-
dores฀ ou฀ inibidores,฀ que฀ mantêm฀ homeostase฀ celular.฀
Muitos฀processos฀celulares฀são฀programados฀para฀ocor-
rerem฀ em฀ condições฀ específicas;฀ por฀ exemplo,฀ divisão฀
BioQ.01 19
CAPÍTULO฀1฀฀ESTRUTURA฀DA฀CÉLULA฀EUCARIÓTICA฀฀฀|฀฀฀19
doenças฀podem฀afetar฀fígado,฀rim,฀cérebro฀e฀sistema฀
esquelético.฀A฀mais฀grave฀é฀síndrome฀de฀Zellweger,฀
que฀se฀deve฀à฀ausência฀de฀peroxissomos฀funcionais;฀
morte฀freqüentemente฀ocorre฀por฀volta฀dos฀6฀meses฀
de฀idade.฀Nessa฀condição,฀o฀defeito฀genético฀está฀no฀
mecanismo฀ para฀ importar฀ enzimas฀ para฀ a฀ matriz฀
dos฀peroxissomos.฀Algumas฀condições฀PBD฀são฀cau-
sadas฀por฀mutações฀de฀splice฀doador฀ou฀de฀sentido฀
errado฀(missense)฀(ver฀p.฀158);฀em฀algumas,฀há฀au-
sência฀ de฀ uma฀ única฀ enzima฀ metabólica฀ ou฀ defeito฀
em฀ um฀ componente฀ do฀ transporte฀ de฀ membranas.฀
Em฀alguns฀casos,฀a฀doença฀pode฀ser฀diagnosticada฀
antes฀do฀nascimento฀por฀ensaio฀de฀enzimas฀de฀pero-
xissomos฀ou฀de฀ácidos฀graxos฀em฀células฀do฀líquido฀
amniótico.
celular฀ em฀ células฀ normais฀ só฀ ocorre฀ quando฀ os฀ pro-
cessos฀ necessários฀ à฀ divisão฀ celular฀ são฀ ativados฀ (ver฀
p.฀ 989).฀ Então,฀ e฀ somente฀ então,฀ ocorre฀ uma฀ série฀ de฀
reações฀ordenadas฀e฀integradas,฀culminando฀na฀divisão฀
de฀uma฀célula฀em฀duas฀células฀filhas.฀Um฀processo฀fas-
cinante฀ é฀ apoptose,฀ morte฀ celular฀ programada,฀ tam-
bém฀ chamada฀ suicídio฀ celular฀ (ver฀ p.฀ 993).฀ Esse฀ pro-
cesso฀ cuidadosamente฀ regulado฀ ocorre฀ em฀ células฀ de฀
todos฀os฀tecidos฀de฀mamíferos,฀mas฀etapas฀individuais฀
do฀processo฀variam฀de฀tecido฀para฀tecido.฀Muitas฀doen-
ças฀devem-se฀a฀erro฀em฀mecanismos฀específicos฀de฀con-
trole.฀ À฀ medida฀ que฀ alguém฀ amplia฀ sua฀ compreensão฀
da฀complexidade฀de฀células฀biológicas,฀esse฀alguém฀fica฀
admirado฀ de฀ que฀ não฀ ocorram฀ muito฀ mais฀ erros฀ e฀ de฀
que฀não฀existam฀muito฀mais฀indivíduos฀com฀condições฀
anormais.฀Assim,฀à฀medida฀que฀prosseguimos฀para฀o฀es-
tudo฀de฀componentes฀químicos฀separados฀e฀atividades฀
de฀células฀em฀capítulos฀subseqüentes,฀é฀importante฀não฀
esquecer฀as฀atividades฀concomitantes฀e฀vizinhas,฀limi-
tações฀ e฀ influência฀ do฀ ambiente.฀ Só฀ conciliando฀ todas฀
as฀partes฀e฀atividades฀de฀uma฀célula฀–฀isto฀é,฀montando฀
o฀quebra-cabeça฀–฀é฀que฀apreciaremos฀a฀maravilha฀das฀
células฀vivas.
22.01.07 16:10:03
 CAPÍTULO฀2฀฀DNA฀E฀RNA:฀COMPOSIÇÃO฀E฀ESTRUTURA฀฀฀|฀฀฀23

PARTE฀1฀ESTRUTURAS฀DE฀MACROMOLÉCULAS

2
DNA฀E฀RNA:฀COMPOSIÇÃO฀
E฀ESTRUTURA
Stephen฀A.฀Woski฀e฀Francis฀J.฀Schmidt

2.1฀ VISÃO฀GERAL,฀24 ฀ Empacotamento฀do฀DNA฀procariótico,฀51

฀ Dogma฀central฀da฀biologia฀molecular,฀24 ฀ Organização฀da฀cromatina฀eucariótica,฀54
฀ DNA฀pode฀transformar฀células,฀24 ฀ ฀ Nucleossomos฀e฀polinucleossomos,฀55
฀ Capacidade฀de฀informação฀do฀DNA฀é฀enorme,฀25 ฀ ฀ Empacotamento฀de฀polinucleossomos฀em฀฀
฀ estruturas฀superiores,฀56
2.2฀ COMPONENTES฀ESTRUTURAIS฀DOS฀ÁCIDOS฀
NUCLÉICOS:฀NUCLEOBASES,฀NUCLEOSÍDEOS฀E฀ 2.5฀ SEQÜÊNCIA฀E฀FUNÇÃO฀DO฀DNA,฀57
NUCLEOTÍDEOS,฀26 ฀ Endonucleases฀de฀restrição฀e฀palíndromes,฀57
฀ Propriedades฀físicas฀de฀nucleosídeos฀e฀nucleotí-฀ ฀ A฀maior฀parte฀do฀DNA฀procariótico฀codifica฀pro-฀
฀ deos,฀26 ฀ teínas฀específicas,฀58
฀ Propriedades฀estruturais฀de฀nucleosídeos฀e฀nu-฀ ฀ Apenas฀uma฀pequena฀percentagem฀do฀DNA฀euca-฀
฀ cleotídeos,฀27 ฀ riótico฀consisde฀de฀genes฀funcionais,฀59
฀ Seqüências฀repetidas,฀60
2.3฀ ESTRUTURA฀DO฀DNA,฀28
฀ Estrutura฀polinucleotídica,฀28 2.6฀ ESTRUTURA฀DO฀RNA,฀61
฀ ฀ Conformações฀dos฀polinucleotídeos,฀29 ฀ RNA฀é฀um฀polímero฀de฀ribonucleosídeos฀5�-mono฀
฀ ฀ Estabilidade฀do฀Esqueleto฀polinucleotídico,฀฀ ฀ fosfato,฀61
฀ 30 ฀ Estrutura฀secundária฀do฀RNA฀envolve฀pareamen-฀
฀ DNA฀dupla-hélice,฀31 ฀ to฀de฀bases฀intramolecular,฀61
฀ ฀ Fatores฀que฀estabilizam฀DNA฀dupla-hélice,฀฀ ฀ Moléculas฀de฀RNA฀têm฀estruturas฀terciárias,฀62
฀ 34
฀ ฀ Desnaturação฀e฀renaturação,฀35 2.7฀ TIPOS฀DE฀RNA,฀64
฀ ฀ Hibridização,฀36 ฀ RNA฀transportador฀tem฀duas฀funções:฀ativar฀฀
฀ ฀ Conformações฀do฀DNA฀dupla-hélice,฀39 ฀ aminoácidos฀e฀reconhecer฀códons฀no฀mRNA,฀฀
฀ Estruturas฀não-canônicas฀de฀DNA,฀40 ฀ 64
฀ ฀ DNA฀dobrado,฀41 ฀ RNA฀ribossômico฀é฀parte฀do฀aparelho฀de฀síntese฀฀
฀ ฀ DNA฀cruciforme,฀41 ฀ protéica,฀65
฀ ฀ DNA฀tripla-fita,฀43 ฀ RNAs฀mensageiros฀carregam฀a฀informação฀para฀a฀฀
฀ ฀ DNA฀quatro-fitas,฀44 ฀ estrutura฀primária฀de฀proteínas,฀66
฀ ฀ DNA฀deslocado,฀46 ฀ Mitocôndrias฀contêm฀espécies฀peculiares฀de฀฀
฀ RNA,฀66
2.4฀ ORDEM฀SUPERIOR฀DA฀ESTRUTURA฀DO฀DNA,฀47 ฀ RNA฀em฀partículas฀ribonucleoprotéicas,฀67
฀ DNA฀genômico฀pode฀ser฀linear฀ou฀circular,฀47 ฀ RNA฀catalítico:฀ribozimas,฀67
฀ DNA฀é฀super-hélice,฀49 ฀ RNAs฀podem฀ligar฀outras฀moléculas,฀68
฀ Topoisomerases,฀50 ฀ RNAs฀controlam฀tradução,฀69

BioQ.02 23 22.01.07 16:20:49

 28฀฀฀|฀฀฀PARTE฀1฀฀ESTRUTURA฀DE฀MACROMOLÉCULAS
os฀átomos฀de฀carbono฀desse฀arranjo฀lembram฀a฀letra฀S;฀ H NH2 NH2
por฀isso,฀essa฀conformação฀é฀às฀vezes฀chamada฀confor- N
6 2
mação-Sul.฀Na฀segunda฀torção฀comum,฀C3’฀é฀deslocada฀ H N O H
HO HO
em฀direção฀à฀face฀endo฀e฀é฀chamada฀C3’-endo.฀Os฀car- O
N
O
N
O H
bonos฀ da฀ pentose฀ desenham฀ uma฀ letra฀ N,฀ produzindo฀
a฀conformação-Norte.฀É฀notável฀que฀os฀grupos฀ligados฀
ao฀ açúcar฀ fiquem฀ em฀ orientações฀ muito฀ diferentes฀ em฀ OH OH
cada฀ uma฀ dessas฀ conformações.฀ Por฀ exemplo,฀ grupos฀ anti syn
5’-฀ e฀ 3’-fosfatos฀ ficam฀ muito฀ mais฀ afastados฀ na฀ torção฀ H
O
C2’-endo฀do฀que฀na฀C3’-endo.฀A฀orientação฀da฀ligação฀ O N
glicosídica฀ também฀ muda฀ significativamente฀ nas฀ duas฀ N H H2N
N N
conformações. H
8
N
Conformações฀C2’-endo฀e฀C3’-endo฀estão฀em฀rápido฀ HO N NH2 HO N H
O N O
equilíbrio.฀Um฀substituinte฀eletronegativo฀na฀posição฀2’฀
da฀ pentose฀ favorece฀ a฀ conformação฀ C3’-endo.฀ Portan-
to,฀ ribonucleosídeos฀ em฀ RNA฀ preferem฀ essa฀ torção฀ do฀ HO OH HO OH
açúcar.฀ Fatores฀ adicionais฀ como฀ pontes฀ de฀ hidrogênio฀
anti syn
entre฀o฀grupo฀2’-OH฀e฀o฀átomo฀O4’฀do฀resíduo฀vizinho฀
deslocam฀ o฀ equilíbrio฀ para฀ a฀ conformação฀ C3’-endo.฀ FIGURA฀2.7
Entretanto,฀ os฀ 2’-desoxinucleosídeos฀ do฀ DNA฀ contêm฀ Conformações฀glicosídicas฀de฀purinas฀e฀pirimidinas.
Em฀pirimidinas,฀fatores฀estéricos฀entre฀o฀açúcar฀e฀O2฀da฀base฀
um฀hidrogênio฀em฀lugar฀do฀grupo฀2’-OH,฀e฀a฀conforma- desfavorecem฀fortemente฀a฀conformação฀syn.฀Em฀purinas,฀as฀
ção฀C2’-endo฀é฀preferida. conformações฀anti฀e฀syn฀se฀interconvertem฀facilmente,฀com฀
As฀bases฀em฀nucleosídeos฀são฀planas.฀Embora฀rota- anti฀sendo฀mais฀estável฀na฀maioria฀dos฀casos.฀A฀conformação฀
syn฀é฀estabilizada฀em฀guanosina฀5’-fosfato,฀devido฀a฀interações฀
ção฀livre฀em฀torno฀da฀ligação฀glicosídica฀seja฀possível,฀ favoráveis฀entre฀o฀grupo฀2-NH2฀e฀os฀oxigênios฀do฀fosfato.
duas฀orientações฀da฀base฀em฀relação฀ao฀açúcar฀predo-
minam฀(Figura฀2.7).฀Em฀purinas,฀a฀conformação฀anti฀
coloca฀H8฀sobre฀o฀açúcar,฀enquanto฀a฀conformação฀syn฀ dica฀ syn.฀ Essa฀ preferência฀ também฀ foi฀ observada฀ em฀
posiciona฀esse฀átomo฀longe฀do฀açúcar฀e฀a฀maior฀parte฀da฀ DNA฀fita-dupla฀com฀seqüências฀de฀Gs฀e฀Cs฀alternados.฀
purina฀bicíclica฀sobre฀o฀açúcar.฀Em฀pirimidinas,฀o฀áto- A฀conformação฀syn฀dos฀resíduos฀G฀nesses฀DNAs฀resulta฀
mo฀ H6฀ fica฀ acima฀ do฀ anel฀ de฀ pentose฀ na฀ conformação฀ na฀formação฀de฀uma฀hélice฀pouco฀usual,฀que฀gira฀para฀a฀
anti,฀e฀o฀átomo฀O2,฀maior,฀fica฀acima฀do฀anel฀na฀confor- esquerda฀(ver฀p.฀40).
mação฀glicosídica฀syn.฀Pirimidinas,฀portanto,฀mostram฀
uma฀grande฀preferência฀pela฀conformação฀com฀menos฀
impedimento฀ estérico฀ anti.฀ Purinas฀ rapidamente฀ se฀
2.3฀|฀ESTRUTURA฀DO฀DNA
interconvertem฀entre฀as฀duas฀conformações,฀mas฀favo-
recem฀a฀orientação฀anti.฀Contudo,฀guanina฀5’-nucleotí- Estrutura฀Polinucleotídica
deos฀são฀exceções.฀Nesses฀casos,฀interações฀favoráveis฀
entre฀o฀grupo฀2-NH2฀e฀o฀grupo฀5’-fosfato฀estabilizam฀a฀ Ácidos฀ nucléicos฀ são฀ fitas฀ de฀ nucleotídeos฀ ligados฀ por฀
conformação฀ syn.฀ 2’-Desoxiguanosina฀ 5’-monofosfato฀ ligações฀ fosfodiéster฀ (Figura฀ 2.8).฀ O฀ comprimento฀
(dGMP),฀ por฀ exemplo,฀ prefere฀ a฀ conformação฀ glicosí- dessas฀fitas฀varia฀consideravelmente,฀de฀dois฀resíduos฀a฀
centenas฀de฀milhões฀de฀resíduos.฀Tipicamente,฀fitas฀de฀
P O
O base
ácidos฀nucléicos฀contendo฀≤50฀nucleotídeos฀são฀chama-
dos฀ oligonucleotídeos,฀ enquanto฀ os฀ mais฀ longos฀ são฀
polinucleotídeos.฀A฀ligação฀fosfodiéster฀liga฀o฀grupo฀
7.0 Å C-2� ���� 5’-hidroxila฀de฀um฀resíduo฀ao฀grupo฀3’-hidroxila฀do฀se-
P O “Sul”
guinte.฀Ligações฀entre฀dois฀5’-OHs฀ou฀dois฀3’-OHs฀não฀
são฀ vistas฀ em฀ DNA฀ de฀ ocorrência฀ natural.฀ A฀ direcio-
base nalidade฀ dessa฀ ligação฀ significa฀ que฀ oligo-฀ e฀ polinu-
P O O
cleotídeos฀ lineares฀ têm฀ uma฀ extremidade฀ que฀ termi-
5.9 Å P O
na฀em฀um฀5’-OH฀e฀outra฀que฀termina฀em฀3’-OH.฀Essas฀
extremidades฀são฀extremidade฀5’฀e฀extremidade฀3’,฀
C-3� ���� respectivamente.฀Em฀muitos฀polinucleotídeos,฀uma฀ou฀
“Norte”
ambas฀as฀extremidades฀são฀quimicamente฀modificadas฀
FIGURA฀2.6 com฀resíduos฀de฀grupos฀fosfatos฀ou฀aminoácidos.฀Poli-
Conformações฀preferenciais฀de฀açúcares฀pentoses. nucleotídeos฀circulares฀não฀têm฀nenhuma฀extremidade฀
Duas฀conformações฀produzem฀variações฀na฀orientação฀relativa฀ livre,฀e฀são฀formados฀unindo-se฀a฀extremidade฀5’฀de฀um฀
da฀base฀(com฀relação฀ao฀açúcar)฀e฀na฀distância฀entre฀os฀grupos฀
3’-฀e฀5’-fosfato฀(P).฀Finalmente,฀essas฀diferenças฀afetam฀a฀ polinucleotídeo฀linear฀com฀sua฀própria฀extremidade฀3’฀
conformação฀geral฀do฀complexo฀dupla-hélice. por฀uma฀ligação฀fosfodiéster.

BioQ.02 28 22.01.07 16:20:54

 42฀฀฀|฀฀฀PARTE฀1฀฀ESTRUTURA฀DE฀MACROMOLÉCULAS

CORRELAÇÃO฀CLÍNICA฀2.3
Antibióticos฀Antitumorais฀que฀Mudam฀a฀Forma฀do฀DNA

A฀ estrutura฀ local฀ tridimensional฀ do฀ DNA฀ é฀ impor-
tante฀ em฀ interações฀ com฀ proteínas฀ envolvidas฀ em฀
reparo,฀ transcrição,฀ recombinação฀ e฀ condensação฀
da฀cromatina.฀Foi฀proposto฀que฀antibióticos฀possam฀
induzir฀formação฀de฀estruturas฀de฀DNA฀que฀podem฀
recrutar฀essas฀proteínas฀com฀resultados฀citotóxicos.฀
O฀ exemplo฀ melhor฀ estudado฀ é฀ a฀ droga฀ antitumoral฀
cisplatina,฀ um฀ complexo฀ tetracoordenado฀ de฀ plati-
na฀ [cis-Pt(NH2)2CL2].฀ Cisplatina฀ é฀ usada฀ sozinha฀
ou฀em฀combinação฀com฀outros฀agentes฀antitumorais฀
para฀ tratar฀ uma฀ variedade฀ de฀ tumores,฀ incluindo฀
câncer฀testicular,฀ovariano,฀ósseo฀e฀pulmonar.฀For-
ma฀ ligações฀ cruzadas฀ inter-฀ e฀ intra-fitas฀ em฀ DNA฀
dupla-fita฀com฀o฀último฀aducto฀compreendendo฀90%฀
das฀lesões฀do฀DNA.฀Essas฀ligações฀surgem฀do฀deslo-
camento฀de฀cloretos฀ligados฀à฀platina฀por฀átomos฀N7฀
de฀duas฀guaninas฀vizinhas.฀Estudos฀estruturais฀ de฀
DNA฀com฀aducto฀fazendo฀ligação฀cruzada฀intra-fita฀
mostra฀que฀a฀dupla฀hélice฀é฀fortemente฀dobrada฀em฀
direção฀à฀fenda฀maior.
Estruturas฀dobradas฀de฀aductos฀DNA-cisplatina฀
são฀reconhecidas฀especificamente฀por฀várias฀proteí-
nas฀que฀se฀ligam฀ao฀DNA,฀tais฀como฀proteínas฀do฀re-
paro฀por฀excisão฀de฀nucleotídeos฀(NER)฀e฀proteínas฀
não-histonas฀que฀se฀ligam฀ao฀DNA฀como฀HMG-1.฀A฀
citotoxicidade฀ da฀ cisplatina฀ é฀ um฀ processo฀ compli-
cado฀mediado฀por฀interações฀específicas฀com฀essas฀
proteínas.฀ Processos฀ celulares฀ como฀ transcrição฀ e฀
apoptose฀ são฀ afetados฀ e฀ os฀ complexos฀ aducto-pro-
teína฀ provavelmente฀ interferem฀ com฀ transcrição.฀
Proteínas฀NER฀são฀recrutadas฀para฀reparar฀a฀lesão,฀
mas฀reparo฀por฀excisão฀está฀sujeito฀a฀introduzir฀que-
bras฀de฀fita฀no฀DNA.฀Acúmulo฀dessas฀quebras฀indu-
zirá,฀finalmente,฀apoptose,฀quando฀o฀DNA฀se฀tornar฀
danificado฀ demais฀ para฀ funcionar.฀ Mecanismos฀ se-
melhantes฀foram฀propostos฀como฀responsáveis฀pela฀
citotoxicidade฀de฀outras฀drogas฀que฀ligam฀ao฀DNA,฀
como฀ditercalinium,฀uma฀molécula฀bifuncional฀que฀
forma฀ aductos฀ não-covalentes฀ com฀ DNA฀ que฀ tam-
bém฀fica฀fortemente฀dobrado.฀Acredita-se฀que฀cito-
toxicidade฀surja฀da฀indução฀da฀via฀de฀reparo฀aborti-
vo,฀que฀leva฀a฀quebras฀da฀fita฀de฀DNA.฀Interações฀do฀
aducto฀cisplatina-DNA฀com฀proteínas฀HMG฀também฀
podem฀ contribuir฀ para฀ sua฀ citotoxicidade.฀ Ligação฀
de฀ proteínas฀ HMG฀ pode฀ sinalizar฀ incorretamente฀
que฀ a฀ região฀ danificada฀ do฀ DNA฀ é฀ transcripcional-
mente฀ ativa฀ e฀ impedir฀ condensação฀ em฀ estruturas฀
de฀ cromatina฀ enovelada.฀ Esses฀ complexos฀ também฀
perpetuam฀a฀lesão,฀porque฀bloqueiam฀o฀aducto฀DNA-
cisplatina฀impedindo฀reparo.

��

��� ���

Fonte:฀Zamble,฀D.B.฀e฀Lippard,฀S.J.฀The฀response฀of฀cellular฀proteins฀to฀cisplatin-damaged฀DNA.฀In:฀B.฀Lippert฀
(Ed.)฀Cisplatin:฀Chemistry฀and฀Biochemistry฀of฀a฀Leading฀Anticancer฀Drug.฀New฀York:฀Wiley-VCH,฀1999,฀pp.฀73-
134;฀e฀Lambert,฀B.,฀Segal-Bendirjian,฀E.,฀Esnault,฀C.,฀Le฀Pecq,฀J.-B.,฀Roques,฀B.P.,฀Jones,฀B.฀e฀Yeunf,฀A.T.฀Recognition฀
by฀the฀DNA฀repair฀system฀of฀DNA฀structural฀alterations฀induced฀by฀reversible฀drug-DNA฀interactions.฀Anti-Cancer฀
Drug฀Des.฀5:43,฀1990.

BioQ.02 42 22.01.07 16:21:15

 CAPÍTULO฀2฀฀DNA฀E฀RNA:฀COMPOSIÇÃO฀E฀ESTRUTURA฀฀฀|฀฀฀61
mente฀300฀pb฀de฀comprimento฀e฀são฀repetidas฀mais฀de฀
500.000฀vezes.฀As฀estruturas฀das฀repetições฀dispersas฀
curtas,฀ incluindo฀ família฀ Alu,฀ são฀ remanescentes฀ de฀
transposons.
Aproximadamente฀1-15%฀do฀DNA฀genômico฀eucari-
ótico฀consiste฀de฀seqüências฀tipicamente฀menores฀do฀
que฀ 20฀ nucleotídeos฀ reiteradas฀ milhares฀ ou฀ milhões฀
de฀ vezes.฀ A฀ maioria฀ das฀ seqüências฀ altamente฀ reite-
radas฀ tem฀ uma฀ composição฀ em฀ bases฀ característica,฀
e฀elas฀podem฀ser฀isoladas฀fragmentando-se฀o฀DNA฀em฀
segmentos฀de฀algumas฀centenas฀de฀nucleotídeos฀e฀se-
parando-se฀ os฀ fragmentos฀ por฀ centrifugação฀ em฀ gra-
diente฀de฀densidade.฀Esses฀fragmentos฀são฀chamados฀
DNA฀ satélite,฀ porque฀ aparecem฀ como฀ satélites฀ das฀
bandas฀que฀contêm฀a฀maior฀parte฀do฀DNA฀após฀centri-
fugação.฀Outras฀seqüências฀altamente฀reiteradas,฀que฀
não฀podem฀ser฀isoladas฀por฀centrifugação,฀podem฀ser฀
identificadas฀ por฀ sua฀ propriedade฀ de฀ rápido฀ reanela-
mento.฀Esses฀DNAs฀altamente฀reiterados฀são฀também฀
chamados฀ DNAs฀ de฀ seqüência฀ simples.฀ Seqüências฀
simples฀estão฀tipicamente฀presentes฀no฀DNA฀da฀maio-
ria฀dos฀eucariotos,฀se฀não฀de฀todos.฀Em฀algumas฀espé-
cies,฀uma฀seqüência฀principal฀está฀presente,฀enquanto฀
em฀outras,฀várias฀seqüências฀simples฀são฀repetidas฀até฀
um฀ milhão฀ de฀ vezes.฀ DNAs฀ de฀ seqüência฀ simples฀ po-
dem฀freqüentemente฀ser฀isolados,฀como฀DNA฀satélite.฀
O฀encontrado฀no฀centrômero฀de฀eucariotos฀superiores฀
consiste฀de฀milhares฀de฀cópias฀em฀seqüência฀de฀uma฀
ou฀de฀algumas฀poucas฀seqüências฀curtas.฀Seqüências฀
satélites฀têm฀apenas฀5-10฀pb฀de฀comprimento฀e฀são฀um฀
constituinte฀ dos฀ telômeros,฀ onde฀ têm฀ um฀ papel฀ bem฀
definido฀ na฀ replicação฀ do฀ DNA.฀ Alguns฀ DNAs฀ de฀ se-
qüência฀ simples฀ mais฀ longos฀ foram฀ identificados.฀ Por฀
exemplo,฀ no฀ genoma฀ do฀ macaco฀ verde฀ africano,฀ um฀
segmento฀ de฀ 172฀ pb฀ que฀ contém฀ algumas฀ repetições฀
de฀seqüências฀é฀altamente฀reiterado.
Repetições฀ invertidas฀ são฀ motivos฀ estruturais฀ do฀
DNA.฀Repetições฀invertidas฀curtas,฀consistindo฀de฀até฀
seis฀nucleotídeos฀de฀comprimento฀(p.฀ex.,฀a฀seqüência฀
palindrômica฀GAATTC),฀ocorrem฀por฀acaso฀uma฀vez฀a฀
cada฀3.000฀nucleotídeos.฀Tais฀repetições฀curtas฀não฀po-
dem฀formar฀uma฀estrutura฀cruciforme฀estável,฀como฀a฀
formada฀por฀seqüências฀palindrômicas฀mais฀longas.฀Se-
qüências฀repetitivas฀invertidas฀que฀são฀suficientemente฀
longas฀para฀formar฀cruciformes฀estáveis,฀é฀pouco฀prová-
vel฀que฀ocorram฀por฀acaso,฀e฀deveriam฀ser฀classificadas฀
como฀uma฀classe฀separada฀de฀seqüências฀eucarióticas.฀
No฀DNA฀humano,฀cerca฀de฀dois฀milhões฀de฀repetições฀
invertidas฀ estão฀ presentes,฀ com฀ um฀ comprimento฀ mé-
dio฀de฀cerca฀de฀200฀pb;฀entretanto,฀seqüências฀inverti-
das฀com฀mais฀de฀1.000฀pb฀já฀foram฀detectadas.฀A฀maio-
ria฀das฀seqüências฀repetidas฀invertidas฀é฀repetida฀1.000฀
ou฀mais฀vezes฀por฀célula.
BioQ.02 61
2.6฀|฀ESTRUTURA฀DO฀RNA
RNA฀é฀um฀Polímero฀de฀
Ribonucleosídeo฀5’-Monofosfatos
RNA฀ é฀ um฀ polímero฀ linear฀ de฀ ribosídeos฀ monofosfatos.฀
As฀bases฀púricas฀do฀RNA฀são฀adenina฀e฀guanina;฀as฀piri-
mídicas฀são฀citosina฀e฀uracil.฀Exceto฀por฀uracil,฀que฀subs-
titui฀timina,฀são฀as฀mesmas฀bases฀encontradas฀no฀DNA.฀
Nucleotídeos฀ de฀ A,฀ C,฀ G฀ e฀ U฀ são฀ incorporados฀ no฀ RNA฀
durante฀transcrição.฀Muitos฀RNAs฀também฀contêm฀nu-
cleotídeos฀modificados,฀que฀são฀produzidos฀por฀proces-
samento.฀ Nucleotídeos฀ modificados฀ são฀ especialmente฀
característicos฀de฀espécies฀de฀RNAs฀estáveis฀(i.é,฀tRNA฀
e฀ rRNA);฀ contudo,฀ alguns฀ nucleotídeos฀ metilados฀ estão฀
também฀presentes฀em฀mRNA฀eucariótico.฀Na฀sua฀maior฀
parte,฀ nucleotídeos฀ modificados฀ no฀ RNA฀ têm฀ papel฀ no฀
“ajuste฀fino”,฀e฀não฀funções฀indispensáveis฀na฀célula.
As฀ligações฀3’,5’-fosfodiéster฀do฀RNA฀formam฀um฀es-
queleto,฀a฀partir฀do฀qual฀as฀bases฀se฀estendem฀(Figura฀
2.51).฀ RNAs฀ eucarióticos฀ variam฀ de฀ aproximadamente฀
20฀nucleotídeos฀de฀comprimento฀a฀mais฀de฀200.000฀nu-
cleotídeos.฀ Cada฀ RNA฀ é฀ complementar฀ à฀ seqüência฀ de฀
bases฀de฀porções฀específicas฀de฀apenas฀uma฀das฀fitas฀do฀
DNA.฀฀Portanto,฀ao฀contrário฀da฀composição฀em฀bases฀do฀
DNA,฀as฀relações฀molares฀(A฀+฀U)฀e฀(G฀+฀C)฀no฀RNA฀não฀
são฀iguais.฀RNA฀celular฀é฀linear฀e฀de฀fita-única,฀mas฀RNA฀
fita-dupla฀está฀presente฀em฀certos฀genomas฀virais.
Quimicamente,฀ RNA฀ é฀ semelhante฀ a฀ DNA.฀ Ambos฀
contêm฀ ligações฀ fosfodiéster฀ carregadas฀ negativamen-
te,฀e฀as฀bases฀são฀quimicamente฀muito฀semelhantes.฀As฀
diferenças฀químicas฀entre฀DNA฀e฀RNA฀devem-se฀prin-
cipalmente฀a฀dois฀fatores.฀Primeiro,฀RNA฀contém฀ribose฀
em฀lugar฀de฀2’-desoxirribose฀como฀açúcar฀componente฀
do฀ nucleotídeo,฀ e฀ segundo,฀ RNAs฀ geralmente฀ são฀ fita-
única฀em฀lugar฀de฀dupla-fita.
O฀ grupo฀ 2’-hidroxila฀ torna฀ as฀ ligações฀ fosfodiéster฀
de฀ uma฀ molécula฀ de฀ RNA฀ mais฀ susceptível฀ à฀ hidrólise฀
química,฀ especialmente฀ em฀ soluções฀ alcalinas,฀ do฀ que฀
as฀do฀DNA.฀A฀instabilidade฀química฀do฀RNA฀reflete-se฀
em฀ sua฀ instabilidade฀ metabólica.฀ Alguns฀ RNAs,฀ como฀
mRNA฀bacteriano,฀são฀sintetizados,฀usados฀e฀degrada-
dos฀em฀minutos.฀Outros,฀como฀rRNA฀humano,฀são฀mais฀
estáveis฀metabolicamente,฀com฀tempo฀de฀vida฀medido฀
em฀dias.฀Entretanto,฀mesmo฀os฀RNAs฀mais฀estáveis,฀são฀
menos฀estáveis฀que฀o฀DNA.
Estrutura฀Secundária฀do฀RNA฀
Envolve฀Pareamento฀de฀Bases฀
Intramolecular฀
Como฀ moléculas฀ de฀ RNA฀ são฀ fita-única,฀ geralmente฀
não฀ formam฀ extensas฀ duplas-hélices.฀ Em฀ vez฀ disso,฀ a฀
estrutura฀ secundária฀ de฀ uma฀ molécula฀ de฀ RNA฀ resul-
ta฀de฀regiões฀relativamente฀curtas฀com฀pareamento฀de฀
22.01.07 16:21:40
 CAPÍTULO฀3฀฀PROTEÍNAS฀I:฀COMPOSIÇÃO฀E฀ESTRUTURA฀฀฀|฀฀฀73
PARTE฀1฀ESTRUTURAS฀DE฀MACROMOLÉCULAS
3
PROTEÍNAS฀I:฀COMPOSIÇÃO฀
E฀ESTRUTURA
Richard฀M.฀Schultz฀e฀Michael฀N.฀Liebman
3.1฀ PAPÉIS฀ FUNCIONAIS฀ DE฀ PROTEÍNAS฀ NO฀ HO-
MEM,฀74
3.2฀ COMPOSIÇÃO฀EM฀AMINOÁCIDOS฀DE฀PROTEÍ-
NAS,฀75
฀ Aminoácidos฀comuns,฀75
฀ ฀ Cadeias฀laterais฀definem฀a฀natureza฀química฀e฀฀
฀ ฀ as฀estruturas฀de฀α-aminoácidos,฀76
฀ ฀ Cistina฀é฀um฀aminoácido฀derivado,฀78
฀ ฀ Aminoácidos฀têm฀um฀centro฀de฀assimetria,฀
฀ ฀ 78
฀ Aminoácidos฀São฀Polimerizados฀em฀Peptídeos฀e฀฀
฀ ฀ Proteínas,฀78
3.3฀ PROPRIEDADES฀DE฀CARGAS฀E฀QUÍMICAS฀DE฀
AMINOÁCIDOS฀E฀PROTEÍNAS,฀81
฀ Grupos฀ionizáveis฀de฀aminoácidos฀e฀proteínas฀são฀฀
฀ críticos฀para฀a฀função฀biológica,฀81
฀ ฀ Forma฀iônica฀de฀um฀aminoácido฀ou฀uma฀pro-฀
฀ ฀ teína฀pode฀ser฀determinada฀em฀dado฀pH,฀
฀ ฀ 82
฀ ฀ Titulação฀de฀um฀ácido฀monoamino-monocar-฀
฀ ฀ boxílico:฀determinação฀do฀pH฀isoelétrico,฀
฀ ฀ 82
฀ ฀ Titulação฀de฀um฀ácido฀monoamino-dicarboxí-฀
฀ ฀ lico,฀83
฀ Relação฀geral฀entre฀as฀propriedades฀de฀carga฀de฀฀
฀ aminoácidos฀e฀proteínas,฀e฀pH,฀83
฀ Aminoácidos฀e฀proteínas฀podem฀ser฀separados฀฀
฀ com฀base฀em฀valores฀de฀pI,฀84
฀ Cadeias฀laterais฀de฀aminoácidos฀têm฀proprieda-฀
฀ des฀polares฀e฀apolares,฀84
฀ Aminoácidos฀sofrem฀várias฀reações฀químicas,฀87
3.4฀ ESTRUTURA฀PRIMÁRIA฀DE฀PROTEÍNAS,฀88
BioQ.03 73
3.5฀ NÍVEIS฀SUPERIORES฀DE฀ORGANIZAÇÃO฀PRO-
TÉICA,฀90
฀ Estrutura฀secundária,฀90
฀ ฀ Estrutura฀em฀α-hélice,฀91
฀ ฀ Estrutura-β,฀92
฀ ฀ Motivos฀estruturais฀e฀dobras฀das฀proteínas,฀
฀ ฀ 92
฀ Estrutura฀terciária,฀93
฀ Estrutura฀quaternária,฀94
฀ Bioinformática฀relaciona฀estrutura฀e฀função฀das฀฀
฀ proteínas฀como฀produtos฀gênicos,฀95
฀ Estruturas฀de฀dobras฀homólogas฀são฀freqüente-฀
฀ mente฀formadas฀a฀partir฀de฀seqüências฀de฀฀฀
฀ aminoácidos฀não-homólogas,฀96
3.6฀ OUTROS฀TIPOS฀DE฀PROTEÍNAS,฀97
฀ Proteínas฀fibrosas:฀colágeno,฀elastina,฀queratina฀e฀฀
฀ tropomiosina,฀98
฀ Colágeno,฀98
฀ ฀ Composição฀em฀aminoácido฀do฀colágeno,฀98
฀ ฀ Seqüência฀de฀aminoácido฀do฀colágeno,฀98
฀ ฀ Estrutura฀do฀colágeno,฀99
฀ ฀ Formação฀de฀ligações฀covalentes฀cruzadas฀no฀฀
฀ ฀ colágeno,฀100
฀ Elastina฀é฀uma฀proteína฀fibrosa฀com฀ligações฀cru-฀
฀ zadas฀geradas฀por฀alisina,฀100
฀ Queratina฀e฀tropomiosina,฀102
฀ Lipoproteínas฀plasmáticas฀são฀complexos฀de฀lipí-฀
฀ deos฀com฀proteínas,฀102
฀ Glicoproteínas฀contêm฀carboidratos฀ligados฀cova-฀
฀ lentemente,฀107
฀ ฀ Ligações฀covalentes฀carboidrato-proteína,฀107
22.01.07 16:30:59
 CAPÍTULO฀3฀฀PROTEÍNAS฀I:฀COMPOSIÇÃO฀E฀ESTRUTURA฀฀฀|฀฀฀81

|
3.3฀ ฀PROPRIEDADES฀DE฀
CARGAS฀E฀QUÍMICAS฀
DE฀AMINOÁCIDOS฀E฀
PROTEÍNAS
Grupos฀Ionizáveis฀de฀Aminoácidos฀e฀
Proteínas฀São฀Críticos฀para฀a฀Função฀
Biológica
Grupos฀ ionizáveis฀ comuns฀ a฀ proteínas฀ e฀ aminoácidos฀
são฀mostrados฀na฀Tabela฀3.3.฀As฀formas฀ácidas฀estão฀à฀
esquerda฀do฀sinal฀de฀equilíbrio,฀e฀as฀formas฀básicas฀do฀
lado฀direito.฀Ao฀formar฀sua฀base฀conjugada,฀a฀forma฀áci-
da฀libera฀um฀próton.฀Ao฀contrário,฀a฀forma฀básica฀asso-
cia-se฀com฀um฀próton฀para฀formar฀o฀respectivo฀ácido.฀A฀
dissociação฀de฀um฀ácido฀é฀caracterizada฀por฀uma฀cons-
tante฀de฀dissociação฀ácida฀(K�a)฀e฀seu฀valor฀de฀pK�a :฀pK�a฀
=฀log10฀(1/K�a).฀Tabela฀3.3฀mostra฀a฀faixa฀de฀valores฀de฀
pK’a฀para฀cada฀grupo฀ácido,฀porque฀o฀pK�a฀real฀depende฀
do฀meio฀no฀qual฀o฀grupo฀ácido฀está฀colocado.฀Por฀exem-
plo,฀quando฀um฀grupo฀amônio฀carregado฀positivamente฀
(−NH3+)฀é฀colocado฀perto฀de฀um฀grupo฀carregado฀nega-
tivamente฀em฀uma฀proteína,฀a฀carga฀negativa฀estabiliza฀
a฀forma฀ácida฀carregada฀positivamente,฀tornando฀mais฀
difícil฀a฀dissociação฀do฀seu฀próton.฀O฀pK�a฀do฀−NH3+฀terá฀
um฀valor฀maior฀do฀que฀o฀normal฀para฀um฀grupo฀amônio฀
na฀ausência฀de฀uma฀estabilização฀por฀uma฀carga฀nega-
tiva฀próxima.
Outros฀ fatores,฀ além฀ da฀ carga,฀ que฀ afetam฀ o฀ pK�a฀
incluem฀ polaridade฀ do฀ meio,฀ ausência฀ ou฀ presença฀ de฀
água฀e฀potencial฀para฀formação฀de฀pontes฀de฀hidrogê-
nio.฀ Além฀ disso,฀ grupos฀ ácidos฀ (α-COOH฀ ou฀ α-NH3+)฀
nas฀ extremidades฀ dos฀ polipeptídeos฀ tipicamente฀ têm฀
um฀valor฀de฀pK�a฀mais฀baixo฀do฀que฀os฀mesmos฀tipos฀de฀
grupos฀ácidos฀nas฀cadeias฀laterais฀(Tabela฀3.4).฀Os฀ami-
noácidos฀cujos฀grupos฀R฀contêm฀átomos฀de฀nitrogênio฀
(Lys฀e฀Arg)฀são฀os฀aminoácidos฀básicos,฀uma฀vez฀que฀
suas฀ cadeias฀ laterais฀ têm฀ valores฀ relativamente฀ altos฀
de฀pK�a฀e฀funcionam฀como฀bases฀em฀pH฀fisiológico.฀Eles฀
estão฀geralmente฀em฀sua฀forma฀ácida฀e฀carregada฀posi-
tivamente฀em฀pH฀fisiológico.฀Aminoácidos฀cujas฀cadeias฀
laterais฀ contêm฀ um฀ grupo฀ carboxílico฀ têm฀ valores฀ de฀
pK�a฀relativamente฀baixos฀que฀facilmente฀perdem฀seus฀
prótons฀e฀são฀aminoácidos฀acídicos.฀Estão฀predomi-

TABELA฀3.3฀Valores฀de฀pK�a฀característicos฀para฀os฀Grupos฀Ácidos฀Comuns฀em฀Proteínas
Onde฀o฀Grupo฀Ácido฀É฀Encontrado Forma฀Ácida Forma฀Básica Faixa฀Aproximada฀de฀pK�a฀฀
Para฀o฀Grupo

NH2-terminal฀ou฀cadeia฀lateral฀de฀ R—NH3 + R—NH2฀+฀H +

↔ 7,6–10,6
lisina Amônia Amina

COOH-terminal฀฀ou฀cadeias฀laterais฀ R—COOH R—COO –฀+฀H +

↔ 3,0–5,5
de฀glutamato฀e฀aspartato Ácido฀carboxílico Carboxilato
+฀
Cadeia฀lateral฀de฀arginina R—NH—C — …฀NH2 R—NH—C= NH฀+฀H
฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀
฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀| |฀
↔ 11,5–12,5
฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀NH2 ฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀NH2
Guanidínio Guanidino

Cadeia฀lateral฀de฀cisteína R—SH R—S –฀+฀H +฀

↔ 8,0–9,0
Tiol Tiolato

Cadeia฀lateral฀de฀histidina R—C=CH R—C=CH

฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀|฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀ | ฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀|฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀ |
฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀HN฀฀฀฀฀฀฀ + NH ฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀HN฀฀฀฀฀฀฀ ฀฀ N+H +
↔ 6,0–7,0
฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀C ฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀C
฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀H ฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀H
฀฀฀฀฀฀฀฀Imidazólio ฀฀฀฀฀฀฀฀฀Imidazol

Cadeia฀lateral฀de฀tirosina

R— —OH R— —OH – +H +
↔ 9,5–10,5

Fenol Fenolato

TABELA฀3.฀4฀pK�a฀da฀Cadeia฀Lateral฀e฀Grupos฀ nantemente฀ em฀ sua฀ forma฀ desprotonada฀ e฀ carregada฀

Ácidos฀Terminais฀em฀Ribonuclease negativamente฀em฀pH฀fisiológico.฀Proteínas฀nas฀quais฀a฀
—NH3 + —COOH razão฀(∑Lys฀+฀∑Arg)/(∑Glu฀+฀∑Asp)฀é฀maior฀do฀que฀1฀
são฀proteínas฀básicas.฀Proteínas,฀nas฀quais฀a฀razão฀é฀
Cadeia฀lateral Lisina฀฀10,2 Glu฀e฀Asp฀฀฀4,6
menor฀do฀que฀1,฀são฀proteínas฀ácidas.
Final฀da฀cadeia N-terminal฀=฀7,8 C-terminal฀=฀3,8

BioQ.03 81 22.01.07 16:31:12

 98฀฀฀|฀฀฀PARTE฀1฀฀ESTRUTURA฀DE฀MACROMOLÉCULAS

Proteínas฀Fibrosas:฀Colágeno,฀
Elastina,฀Queratina฀e฀Tropomiosina
Proteínas฀ fibrosas฀ caracteristicamente฀ têm฀ quanti-
dades฀ maiores฀ de฀ estrutura฀ secundária฀ regular,฀ uma฀
forma฀cilíndrica฀longa฀(tipo฀bastão),฀baixa฀solubilidade฀
em฀água฀e฀uma฀função฀estrutural฀em฀lugar฀de฀um฀papel฀
dinâmico.฀Exemplos฀de฀proteínas฀fibrosas฀com฀essas฀ca-
racterísticas฀são฀colágeno,฀queratina฀e฀tropomiosina.
Colágeno฀
Colágeno฀é฀uma฀família฀de฀proteínas฀presente฀em฀to-
dos฀ os฀ tecidos฀ e฀ órgãos฀ e฀ fornece฀ o฀ arcabouço฀ que฀ dá฀
aos฀tecidos฀sua฀forma฀e฀resistência.฀A฀porcentagem฀de฀
colágeno฀por฀peso฀para฀alguns฀tecidos฀e฀órgãos฀huma-
nos฀ representativos฀ é:฀ fígado฀ 4%,฀ pulmão฀ 10%,฀ aorta฀
12-24%,฀cartilagem฀50%,฀córnea฀64%,฀osso฀cortical฀to-
tal฀23%฀e฀pele฀74%฀(ver฀Corr.฀Clín.฀3.4).
CORRELAÇÃO฀CLÍNICA฀3.4
Doenças฀de฀Síntese฀de฀
Colágeno
Colágeno฀ está฀ presente฀ em฀ praticamente฀ todos฀
os฀tecidos฀e฀é฀a฀mais฀abundante฀proteína฀do฀cor-
po.฀ Certos฀ órgãos฀ dependem฀ muito฀ dele฀ para฀
funcionar฀fisiologicamente.฀Síntese฀ou฀estrutura฀
anormal฀de฀colágeno฀causa฀disfunção฀em฀órgãos฀
cardiovasculares฀(aneurisma฀da฀aorta฀e฀arterial฀e฀
defeitos฀de฀válvulas฀cardíacas),฀ossos฀(fragilidade฀
e฀fratura฀fácil),฀pele฀(cicatrização฀difícil฀e฀disten-
sibilidade฀ incomum),฀ articulações฀ (hipermobili-
dade฀e฀artrite)฀e฀olhos฀(deslocamento฀do฀crista-
lino).฀Doenças฀causadas฀por฀síntese฀anormal฀de฀
colágeno฀ incluem฀ síndrome฀ de฀ Ehlers-Danlos,฀
Composição฀em฀Aminoácidos฀do฀
Colágeno
A฀ composição฀ do฀ colágeno฀ tipo฀ I฀ de฀ pele฀ e฀ das฀ proteí-
nas฀ globulares฀ ribonuclease฀ e฀ hemoglobina฀ são฀ dadas฀
na฀Tabela฀3.10.฀Colágeno฀de฀pele฀é฀rico฀em฀glicina฀(33%฀
de฀seus฀aminoácidos),฀prolina฀(13%)฀e฀aminoácidos฀de-
rivados฀4-hidroxiprolina฀(9%)฀e฀5-hidroxilisina฀(0,6%)฀
(Figura฀3.37).฀Hidroxiprolina฀é฀exclusiva฀de฀colágenos,฀
sendo฀formada฀enzimaticamente฀a฀partir฀de฀prolina.฀A฀
maior฀parte฀das฀hidroxiprolinas฀tem฀o฀grupo฀hidroxila฀
na฀posição฀4฀(carbono฀γ),฀embora฀uma฀pequena฀quanti-
dade฀de฀3-hidroxiprolina฀também฀seja฀formada฀(Tabela฀
3.10).฀ Colágenos฀ são฀ glicoproteínas฀ com฀ carboidratos฀
ligados฀a฀5-hidroxilisina฀por฀uma฀ligação฀O-glicosídica฀
por฀meio฀do฀grupo฀hidroxila฀do฀carbono-δ.
Seqüência฀de฀Aminoácidos฀do฀
Colágeno
A฀família฀colágeno฀é฀composta฀por฀polipeptídeos฀deriva-
dos฀de฀40฀genes฀conhecidos฀de฀cadeias฀de฀colágeno,฀que฀
produzem฀cerca฀de฀20฀tipos฀de฀colágeno.฀Cada฀molécula฀
de฀colágeno฀maduro฀ou฀tropocolágeno฀contém฀três฀ca-
deias฀polipeptídicas.฀Alguns฀tipos฀de฀colágeno฀contêm฀
três฀cadeias฀polipeptídicas฀idênticas.฀No฀tipo฀I฀(Tabela฀
3.11),฀há฀duas฀cadeias฀α1(I)฀e฀uma฀α2(I).฀Colágeno฀tipo฀
V฀contém฀α1(V),฀α2(V)฀e฀α3(V).฀Colágenos฀diferem฀em฀
seqüência฀de฀aminoácidos,฀mas฀há฀grandes฀regiões฀de฀
seqüências฀ homólogas฀ entre฀ todos฀ os฀ diferentes฀ tipos฀
de฀colágeno.฀Em฀todos฀os฀tipos฀de฀colágeno฀há฀regiões฀
com฀os฀tripeptídeos฀Gly-Pro-Y฀e฀Gly-X-Hyp฀(onde฀X฀e฀
Y฀são฀quaisquer฀aminoácidos)฀repetidos฀em฀seguida฀vá-
H H
N N
H2C CH COOH H2 C CH COOH
HC CH2 H2 C CH
OH OH

osteogênese฀ imperfeita฀ e฀ escorbuto.฀ Essas฀ do- 4-Hidroxiprolina 3-Hidroxiprolina

enças฀podem฀resultar฀de฀genes฀anormais฀de฀co-
lágeno,฀ modificações฀ pós-tradução฀ anormais฀ do฀
colágeno฀ou฀deficiência฀de฀cofatores฀necessários฀ OH NH2
às฀ enzimas฀ responsáveis฀ por฀ modificações฀ pós- NH2 CH2 CH CH2 CH2 C H
tradução฀de฀colágeno.
COOH
5-Hidroxilisina

Fonte:฀Aronson,฀D.฀Cross-linking฀of฀glycated฀colla- NH2
gen฀in฀the฀pathogenesis฀of฀arterial฀and฀myocardial฀stiff-
O C CH2 CH2 CH2 C H
ening฀of฀aging฀and฀diabetes.฀J.฀Hypertens.฀21:3,฀2003.฀
H COOH
Byers,฀ P.฀ H.฀ Disorders฀ of฀ collagen฀ biosynthesis฀ and฀
structure.฀In:฀C.฀R.฀Scriver,฀et฀al.฀(Eds.),฀The฀Metabolic฀ Alisina

and฀ Molecular฀ Bases฀ of฀ Inherited฀ Disease,฀ 8th฀ ed.฀

McGraw-Hill,฀ 2001,฀ Chapter฀ 205.฀ Hudson,฀ B.฀ G.,฀ et฀ al.,฀ FIGURA฀3.37
Aminoácidos฀derivados฀encontrados฀no฀colágeno.฀
Alport’s฀ syndrome,฀ Goodpasture’s฀ syndrome฀ and฀ type฀ Carboidrato฀é฀ligado฀a฀5-OH฀de฀hidroxilisina฀por฀uma฀ligação฀
IV฀collagen,฀N.฀Engl฀J฀Med฀348:2543,฀2003. glicosídica฀tipo฀III฀(ver฀Figura฀3.45).

BioQ.03 98 22.01.07 16:31:51

 116฀฀฀|฀฀฀PARTE฀1฀฀ESTRUTURA฀DE฀MACROMOLÉCULAS
tos฀de฀domínios฀e฀mudanças฀de฀estrutura฀quaternária,฀
como฀os฀observados฀em฀hemoglobina฀após฀ligação฀de฀O2฀
(ver฀p.฀344).฀O฀comportamento฀dinâmico฀de฀proteínas฀ 0.05 S F A A1c
é฀a฀base฀para฀(a)฀mudanças฀conformacionais฀induzidas฀ A

Absorbância (415 nm)

A1c
por฀substrato,฀inibidor฀ou฀droga฀quando฀se฀liga฀a฀uma฀ A2 F
enzima฀ou฀receptor,฀(b)฀geração฀de฀efeitos฀alostéricos฀
em฀hemoglobinas,฀(c)฀transferência฀de฀elétrons฀em฀cito- S
cromos,฀e฀(d)฀a฀formação฀de฀montagens฀supramolecula-
res฀como฀vírus.฀Os฀movimentos฀também฀podem฀ter฀um฀
papel฀funcional฀na฀ação฀catalítica฀de฀enzimas. A2

|
3.9฀ ฀CARACTERIZAÇÃO,฀PU- 0

RIFICAÇÃO฀E฀DETERMI- 14 15 16 17
NAÇÃO฀DA฀ESTRUTURA฀ Tempo (min)
E฀ORGANIZAÇÃO฀DE฀ (a) (b)

PROTEÍNAS
Separação฀de฀Proteínas฀com฀Base฀
em฀Carga
Em฀eletroforese,฀proteína฀dissolvida฀em฀uma฀solução฀
tampão฀em฀um฀pH฀em฀particular฀é฀colocada฀num฀campo฀
elétrico.฀Dependendo฀da฀relação฀entre฀o฀pH฀do฀tampão฀e฀
o฀pI฀da฀proteína,฀a฀proteína฀move-se฀em฀direção฀ao฀cáto-
do฀(–)฀ou฀ao฀ânodo฀(+)฀ou฀permanece฀estacionária฀(pH฀
=฀pI).฀Suportes฀como฀géis฀poliméricos฀(p.฀ex.,฀poliacri-
lamida),฀amido฀ou฀papel฀são฀usados.฀Os฀suportes฀iner-
tes฀são฀saturados฀com฀solução฀tampão,฀uma฀amostra฀de฀
proteína฀é฀colocada฀sobre฀o฀suporte,฀um฀campo฀elétrico฀
é฀aplicado฀ao฀suporte,฀e฀a฀proteína฀carregada฀migra฀no฀
suporte฀em฀direção฀ao฀pólo฀de฀carga฀oposta.
Uma฀técnica฀de฀resolução฀extremamente฀alta฀é฀a฀fo-
calização฀ isoelétrica,฀ na฀ qual฀ misturas฀ de฀ anfolitos฀
poliamino-ácidos฀ policarboxílicos฀ com฀ uma฀ faixa฀ defi-
nida฀ de฀ valores฀ de฀ pI฀ são฀ usadas฀ para฀ estabelecer฀ um฀
gradiente฀ de฀ pH฀ ao฀ longo฀ do฀ campo฀ elétrico฀ aplicado.฀
Uma฀ proteína฀ carregada฀ migra฀ pelo฀ gradiente฀ de฀ pH฀
no฀ campo฀ elétrico฀ até฀ alcançar฀ uma฀ região฀ de฀ pH฀ no฀
gradiente฀igual฀ao฀seu฀valor฀de฀pI.฀Nesse฀ponto,฀a฀pro-
teína฀torna-se฀estacionária฀e฀pode฀ser฀visualizada฀(Fi-
gura฀3.55).฀Proteínas฀que฀diferem฀por฀tão฀pouco฀quanto฀
0,0025฀em฀seus฀valores฀de฀pI฀são฀separadas฀no฀gradien-
te฀apropriado฀de฀pH.
Cromatografia฀de฀troca-iônica฀em฀colunas฀é฀usada฀
para฀separação฀preparativa฀de฀proteínas฀por฀carga.฀Re-
sinas฀de฀troca-iônica฀consistem฀de฀materiais฀insolúveis฀
(agarose,฀poliacrilamida,฀celulose฀e฀vidro)฀que฀contêm฀
grupos฀ carregados฀ (Figura฀ 3.56).฀ Resinas฀ carregadas฀
negativamente฀ligam฀cátions฀fortemente฀e฀são฀resinas฀
de฀troca฀catiônica.฀Resinas฀carregadas฀positivamente฀
ligam฀ânions฀fortemente฀e฀são฀resinas฀de฀troca฀aniô-
nica.฀O฀grau฀de฀retardo฀de฀uma฀proteína฀(ou฀um฀amino-
ácido)฀por฀uma฀resina฀depende฀da฀magnitude฀da฀carga฀
da฀proteína฀no฀pH฀particular฀do฀experimento.฀Moléculas฀
FIGURA฀3.55
Focalização฀isoelétrica฀de฀hemoglobinas฀de฀um฀paciente฀hete-
rozigoto฀para฀HbS฀e฀β-talassemia.฀
Figura฀mostra฀separação฀por฀focalização฀isoelétrica฀de฀HbA1c฀
(HbA฀glicosilada฀na฀extremidade฀NH2,฀ver฀Corr.฀Clín.฀3.7),฀HbA฀
de฀adulto฀normal,฀HbF฀fetal,฀HbS฀de฀anemia฀falciforme฀(ver฀
Corr.฀Clín฀3.3)฀e฀HbA 2฀minoritária฀de฀adulto.฀(a)฀Focalização฀
isoelétrica฀realizada฀por฀eletroforese฀capilar฀com฀anfólito฀na฀
faixa฀de฀pH฀entre฀6,7฀e฀7,7฀e฀detecção฀de฀bandas฀a฀415฀nm.฀(b)฀
Focalização฀isoelétrica฀realizada฀em฀gel฀com฀Pharmacia฀Phast฀
System;฀anfólito฀na฀faixa฀de฀pH฀entre฀6,7฀e฀7,7.
De฀Molteni,฀S.,฀Frischknecht,฀H.฀e฀Thormann,฀W.฀Electrophore-
sis฀15:22,฀1994฀(Figura฀4,฀partes฀A฀e฀B).
R CH2 COO–
Ligante carregado negativamente: carboximetil
+
C2H5
R N
C2H5
H
Ligante carregado positivamente: dietilamino
FIGURA฀3.56
Dois฀exemplos฀de฀ligantes฀carregados฀usados฀em฀cromatogra-
fia฀de฀troca-iônica.
de฀mesma฀carga฀que฀a฀resina฀são฀eluídas฀primeiro,฀em฀
uma฀única฀banda,฀seguidas฀das฀que฀têm฀carga฀oposta฀à฀
da฀resina,฀em฀uma฀ordem฀baseada฀na฀densidade฀de฀car-
gas฀da฀proteína฀(Figura฀3.57).฀Quando฀é฀difícil฀remover฀
uma฀ molécula฀ da฀ resina,฀ devido฀ à฀ força฀ de฀ interação฀
atrativa฀ entre฀ a฀ molécula฀ ligada฀ e฀ a฀ resina,฀ mudanças฀
sistemáticas฀no฀pH฀ou฀na฀força฀iônica฀são฀usadas฀para฀
enfraquecer฀a฀interação.
Por฀exemplo,฀um฀gradiente฀crescente฀de฀pH฀em฀uma฀
resina฀de฀troca฀catiônica฀reduz฀a฀diferença฀entre฀o฀pH฀
da฀ solução฀ e฀ o฀ pI฀ da฀ proteína฀ ligada.฀ Essa฀ diminuição฀
entre฀pH฀e฀pI฀reduz฀a฀magnitude฀da฀carga฀final฀da฀prote-
ína฀e฀diminui฀a฀força฀da฀interação฀de฀cargas฀entre฀a฀pro-
teína฀e฀a฀resina.฀Um฀gradiente฀crescente฀de฀força฀iônica฀
também฀diminui฀a฀interação฀de฀cargas฀e฀elui฀eletrólitos฀
fortemente฀ligados฀à฀resina.

BioQ.03 116 22.01.07 16:32:44

 132฀฀฀|฀฀฀PARTE฀2฀฀TRANSMISSÃO฀DA฀INFORMAÇÃO

PARTE฀2฀TRANSMISSÃO฀DA฀INFORMAÇÃO

4
REPLICAÇÃO,฀
RECOMBINAÇÃO฀
E฀REPARO฀NO฀DNA
Howard฀J.฀Edenberg

4.1฀ CARACTERÍSTICAS฀COMUNS฀DA฀REPLICAÇÃO,฀ 4.3฀ RECOMBINAÇÃO,฀151

RECOMBINAÇÃO฀E฀REPARO,฀133
4.2฀ REPLICAÇÃO฀DO฀DNA,฀133
฀ O฀básico,฀133
฀ A฀química฀da฀elongação฀da฀cadeia,฀134
฀ DNA฀polimerases,฀135
฀ Separando฀as฀fitas฀parentais:฀a฀forquilha฀de฀
฀ ฀ replicação,฀137
฀ Resolvendo฀o฀problema฀da฀polaridade:฀síntese฀de฀฀
฀ DNA฀semidescontínua,฀138
฀ Movimento฀da฀forquilha฀de฀replicação,฀138
฀ ฀ Início,฀138
฀ ฀ Elongação฀da฀fita,฀138
฀ ฀ Remoção฀do฀primer,฀138
฀ ฀ Preenchimento฀da฀falha,฀138
฀ ฀ Ligação,฀139
฀ ฀ Desenrolando฀as฀fitas฀parentais,฀141
฀ ฀ Braçadeiras฀corrediças฀(sliding฀clamps)฀e฀
฀ ฀ ฀ processividade,฀142
฀ Coreografia฀em฀três฀dimensões:฀o฀replissomo,฀
฀ 142
฀ Enzimas฀procarióticas฀de฀replicação,฀142
฀ Enzimas฀eucarióticas฀de฀replicação,฀144
฀ Início฀da฀replicação,฀146
฀ O฀ciclo฀celular,฀147
฀ Término฀da฀replicação฀em฀genomas฀circulares,฀
฀ 150
฀ Término฀da฀replicação฀em฀genomas฀lineares:฀telô-
meros,฀150
฀ ฀ Telomerase,฀151
฀ Replicação฀de฀genomas฀de฀RNA,฀151
฀ Modelos฀de฀recombinação฀homóloga,฀152
฀ ฀ Modelo฀Holliday,฀152
฀ ฀ Modelo฀de฀Meselson฀e฀Radding,฀153
฀ ฀ Modelo฀de฀quebra฀da฀dupla฀fita,฀153
฀ Enzimas-chaves฀da฀recombinação฀em฀E.฀coli,฀
฀ 153
฀ ฀ RecA,฀153
฀ ฀ RecBCD,฀RuvA,฀RuvC,฀155
฀ Recombinação฀não-homóloga,฀155
฀ ฀ Recombinação฀sítio-específica,฀155
฀ ฀ Transposição,฀155
฀ ฀ Ligação฀de฀extremidades฀não-homólogas,฀
฀ ฀ 155
4.4฀ REPARO,฀156
฀ Lesão฀no฀DNA,฀156
฀ Mutações,฀158
฀ Reparo฀por฀excisão,฀160
฀ ฀ Reparo฀por฀excisão฀de฀base,฀160
฀ ฀ Reparo฀por฀excisão฀de฀nucleotídeo,฀161
฀ ฀ Reparo฀acoplado฀à฀transcrição,฀162
฀ ฀ Reparo฀de฀pareamento฀errado,฀162
฀ Desmetilação฀direta,฀165
฀ Fotorreativação,฀165
฀ Lesões฀podem฀bloquear฀a฀replicação,฀165
฀ Síntese฀bypass฀(translesão),฀166
฀ Reparo฀de฀falha฀na฀fita฀filha,฀166
฀ Enrolamento฀e฀reparo฀de฀forquilhas฀de฀replica-฀
฀ ção,฀167
฀ Reparo฀de฀quebra฀na฀dupla฀fita,฀167
฀ Regulação฀do฀reparo฀do฀DNA:฀o฀regulon฀SOS,฀
฀ 168

BioQ.04 132 22.01.07 16:37:06

 CAPÍTULO฀4฀฀REPLICAÇÃO,฀RECOMBINAÇÃO฀E฀REPARO฀NO฀DNA฀฀฀|฀฀฀151
Telomerase
Telômeros฀ são฀ mantidos฀ por฀ telomerases,฀ enzimas฀
que฀ adicionam฀ novas฀ repetições฀ de฀ seis฀ nucleotídeos฀
à฀extremidade฀3’฀dos฀telômeros.฀Telomerases฀são฀com-
plexos฀ribonucleoprotéicos฀contendo฀um฀pequeno฀RNA฀
que฀serve฀de฀molde฀para฀adição฀de฀uma฀nova฀repetição฀
de฀ seis฀ nucleotídeos฀ (Figura฀ 4.18).฀ Uma฀ telomerase฀
liga-se฀à฀extremidade฀da฀fita฀3’,฀como฀parte฀do฀RNA฀da฀
telomerase฀ligado฀por฀pontes฀de฀hidrogênio฀aos฀últimos฀
nucleotídeos฀ do฀ cromossomo.฀ Uma฀ repetição฀ de฀ seis฀
nucleotídeos฀é฀sintetizada,฀usando฀o฀RNA฀como฀molde.฀
Então,฀a฀telomerase฀pode฀se฀dissociar฀e฀reassociar฀para฀
adicionar฀outro฀hexâmero.
Telômeros฀não฀precisam฀permanecer฀exatamente฀do฀
mesmo฀tamanho;฀algum฀encurtamento฀não฀é฀problema฀
porque฀essas฀repetições฀não฀codificam฀proteínas.฀Telô-
meros฀passam฀por฀ciclos฀de฀encurtamento฀das฀fitas฀tar-
dias฀devido฀a฀incapacidade฀de฀síntese฀completa฀(Figura฀
4.17a)฀e฀adição฀de฀novas฀repetições฀de฀seis฀nucleotídeos฀
à฀extremidade฀3’฀pela฀telomerase฀(Figura฀4.18).฀Embo-
ra฀o฀comprimento฀dos฀telômeros฀não฀permaneça฀cons-
tante,฀ encurtamento฀ progressivo฀ é฀ evitado฀ por฀ adição฀
de฀ repetições.฀ Telomerases฀ também฀ restabelecem฀ os฀
excessos฀3’,฀característicos฀dos฀telômeros.
Células฀que฀diferenciaram฀e฀se฀dividirão฀apenas฀um฀
número฀limitado฀de฀vezes,฀não฀expressam฀telomerase.฀
Assim,฀ os฀ telômeros฀ encurtam฀ a฀ cada฀ divisão฀ subse-
qüente;฀isso฀limita฀o฀número฀de฀vezes฀que฀tais฀células฀
podem฀se฀dividir฀antes฀que฀a฀perda฀dos฀telômeros฀dis-
pare฀apoptose฀–฀isto฀é,฀morte฀celular฀programada฀(ver฀p.฀
1020).฀Expressão฀de฀telomerase฀é฀geralmente฀reativada฀
em฀ células฀ tumorais,฀ o฀ que฀ lhes฀ permite฀ continuar฀ as฀
divisões฀ indefinidamente,฀ sem฀ encurtamento฀ cromos-
sômico.฀Isso฀torna฀a฀telomerase฀um฀alvo฀atraente฀para฀
quimioterapia฀do฀câncer.฀Deve-se฀notar฀que฀inativação฀
da฀telomerase฀em฀um฀tumor฀não฀levaria฀a฀uma฀parada฀
rápida฀no฀crescimento฀do฀tumor;฀o฀efeito฀seria฀retarda-
do฀por฀muitos฀ciclos฀celulares,฀até฀que฀as฀extremidades฀
cromossômicas฀ fossem฀ encurtadas฀ significativamente.฀
Portanto,฀é฀provável฀que฀inibidores฀da฀telomerase฀sejam฀
úteis฀apenas฀em฀combinação฀com฀outras฀terapias.
[TTAGGG]nTTAGGGTTAGGGTTAGGG 3�
���������
[AATCCC]nAATCCC 5�
�
��
฀��
��
3� ฀
��
�–
5�
FIGURA฀4.18฀
Telomerase.฀
Telomerase฀é฀um฀complexo฀ribonucleoprotéico฀com฀uma฀
fita฀curta฀de฀RNA,฀como฀parte฀integral;฀catalisa฀a฀adição฀de฀
novas฀repetições฀teloméricas฀de฀6-nt฀à฀extremidade฀3’฀de฀uma฀
cadeia฀de฀DNA.฀O฀RNA฀da฀telomerase฀pareia฀parcialmente฀
pelas฀bases฀com฀a฀repetição฀telomérica฀e฀serve฀de฀molde฀
para฀a฀reação,฀enquanto฀o฀componente฀protéico฀funciona฀
como฀uma฀transcriptase฀reversa,฀sintetizando฀DNA฀usando฀o฀
RNA฀como฀molde.฀Depois฀da฀adição฀de฀uma฀repetição฀de฀seis฀
nucleotídeos,฀a฀enzima฀pode฀se฀dissociar฀e฀se฀ligar฀novamente฀
e฀adicionar฀novas฀repetições฀de฀6-nt.฀
BioQ.04 151
Replicação฀de฀Genomas฀de฀RNA
Alguns฀ vírus฀ têm฀ um฀ genoma฀ de฀ RNA.฀ Tais฀ genomas฀
são฀replicados฀com฀muito฀menor฀precisão฀e฀eles฀podem฀
acumular฀ variações฀ em฀ período฀ relativamente฀ curto.฀
Um฀exemplo฀particularmente฀importante฀disso฀é฀o฀ví-
rus฀ da฀ imunodeficiência฀ humano฀ (HIV),฀ que฀ cau-
sa฀AIDS฀(síndrome฀da฀imunodeficiência฀adquirida).฀O฀
RNA฀ viral฀ do฀ HIV฀ é฀ reversamente฀ transcrito฀ em฀ DNA฀
e,฀ depois,฀ o฀ DNA฀ integra-se฀ ao฀ cromossomo.฀ A฀ trans-
criptase฀reversa฀do฀HIV฀é฀um฀alvo฀para฀quimioterapia฀
antiviral฀(Corr.฀Clín.฀4.4).
Transcrição฀reversa฀do฀RNA฀genômico฀do฀HIV฀é฀mui-
to฀menos฀precisa฀que฀síntese฀de฀DNA,฀e฀a฀precisão฀dimi-
nuída฀leva฀à฀rápida฀geração฀de฀uma฀coleção฀de฀vírus฀va-
riantes฀em฀um฀indivíduo.฀É฀provável฀que฀uma฀pequena฀
fração฀desses฀variantes฀seja฀resistente฀a฀qualquer฀droga฀
única฀ que฀ esteja฀ sendo฀ usada฀ para฀ tratar฀ a฀ infecção.฀
Essa฀ fração฀ pode฀ continuar฀ a฀ replicar฀ na฀ presença฀ do฀
agente฀terapêutico฀até฀se฀tornar฀a฀variante฀dominante,฀
o฀que฀leva฀à฀perda฀de฀eficácia฀da฀droga.฀Atuais฀terapias฀
combinadas฀são฀projetadas฀para฀reduzir฀a฀probabilida-
de฀de฀um฀vírus฀ser฀resistente฀simultaneamente฀a฀todas฀
as฀drogas฀da฀combinação.฀Terapias฀combinadas฀atuais฀
têm฀ como฀ alvos฀ tanto฀ a฀ transcriptase฀ reversa฀ do฀ HIV฀
como฀a฀protease฀do฀HIV.
4.3฀|฀RECOMBINAÇÃO
Recombinação฀ é฀ a฀ troca฀ de฀ informação฀ genética.฀ Há฀
dois฀ tipos฀ básicos:฀ recombinação฀ homóloga฀ e฀ re-
combinação฀ não-homóloga.฀ Recombinação฀ homó-
loga฀(também฀chamada฀recombinação฀ geral)฀ocorre฀
entre฀ seqüências฀ idênticas฀ ou฀ quase฀ idênticas฀ –฀ por฀
exemplo,฀entre฀os฀cromossomos฀paterno฀e฀materno฀de฀
um฀par.฀Cromossomos฀não฀são฀passados฀intactos฀de฀ge-
ração฀ para฀ geração฀ (Figura฀ 4.19);฀ em฀ vez฀ disso,฀ cada฀
cromossomo฀que฀você฀herda฀de฀seu฀pai฀contém฀porções฀
de฀ambos฀os฀pais฀e,฀da฀mesma฀forma฀para฀os฀cromosso-
mos฀herdados฀de฀sua฀mãe.฀Esta฀é฀uma฀parte฀normal฀do฀
processo฀ de฀ alinhamento฀ cromossômico฀ e฀ segregação฀
������������������
�
������������������
���������� k l m n o p q r
�
� � � � � � � � � � KLMNOPQR
FIGURA฀4.19฀
Recombinação฀homóloga.฀
(a)฀O฀cromossomo฀paterno฀é฀mostrado฀em฀cinza฀com฀os฀alelos฀
mostrados฀por฀letras฀maiúsculas.฀O฀cromossomo฀homólogo฀
materno฀é฀mostrado฀em฀preto฀com฀os฀alelos฀mostrados฀por฀
letras฀minúsculas.฀(b)฀Depois฀da฀recombinação฀homóloga฀entre฀
os฀genes฀j฀e฀k,฀ambos฀os฀cromossomos฀contêm฀DNA฀de฀ambos฀
os฀pais.฀Houve฀uma฀troca฀igual,฀recíproca฀entre฀eles.
22.01.07 16:37:33
 158฀฀฀|฀฀฀PARTE฀2฀฀TRANSMISSÃO฀DA฀INFORMAÇÃO
Mutações
As฀ mutações฀ são฀ alterações฀ hereditárias฀ na฀ seqüência฀
do฀DNA.฀Podem฀resultar฀de฀erros฀na฀replicação,฀de฀le-
sões฀ no฀ DNA฀ ou฀ de฀ erros฀ durante฀ o฀ reparo฀ de฀ lesões.฀
Mutações฀que฀são฀trocas฀de฀um฀único฀par฀de฀bases฀são฀
chamadas฀ mutações฀ puntuais.฀ Mutações฀ puntuais฀
podem฀ser฀classificadas฀pela฀natureza฀das฀bases฀altera-
das.฀Transições฀são฀mutações฀puntuais,฀nas฀quais฀uma฀
purina฀é฀substituída฀por฀outra฀(p.฀ex.,฀A฀por฀G฀ou฀G฀por฀
A)฀ou฀uma฀pirimidina฀é฀substituída฀por฀outra฀(p.฀ex.,฀T฀
por฀C฀ou฀C฀por฀T).฀Deaminação฀de฀C,฀se฀não฀reparada,฀
levaria฀ a฀ uma฀ transição.฀ A฀ freqüência฀ de฀ transições฀ é฀
aumentada฀ por฀ análogos฀ de฀ bases,฀ incluindo฀ 2-amino฀
purina฀ (Corr.฀ Clín.฀ 4.7).฀ Transversões฀ são฀ mutações฀
puntuais,฀nas฀quais฀uma฀purina฀é฀substituída฀por฀uma฀
pirimidina฀ou฀vice฀versa฀(p.฀ex.,฀A฀por฀C฀ou฀C฀por฀A).
Mutações฀puntuais฀também฀podem฀ser฀caracteriza-
das฀por฀seu฀efeito฀sobre฀uma฀seqüência฀codificadora.฀
Mutações฀ de฀ sentido฀ errado฀ (missense)฀ são฀ mu-
tações฀ puntuais฀ que฀ trocam฀ um฀ único฀ par฀ de฀ bases฀
em฀um฀códon,฀de฀modo฀que฀o฀códon฀agora฀codifica฀um฀
aminoácido฀diferente฀(Figura฀4.24a).฀Mutações฀sem฀
sentido฀(nonsense)฀são฀mutações฀puntuais฀que฀tro-
cam฀um฀único฀par฀de฀bases฀em฀um฀códon฀para฀um฀có-
don฀de฀terminação฀(stop฀codon)฀que฀termina฀a฀tradu-
ção฀(Figura฀4.24b).฀Mutações฀sem฀sentido฀geralmente฀
têm฀ efeitos฀ mais฀ graves฀ do฀ que฀ mutações฀ de฀ sentido฀
errado฀porque฀levam฀à฀síntese฀de฀polipeptídeos฀trun-
cados฀ (e฀ geralmente฀ instáveis).฀ Mutações฀ silenciosas฀
ou฀ sinônimos฀ não฀ alteram฀ o฀ aminoácido฀ codificado;฀
estas฀ incluem฀ muitas฀ mudanças฀ no฀ terceiro฀ nucleotí-
deo฀de฀um฀códon.
CORRELAÇÃO฀CLÍNICA฀4.7
Análogos฀de฀Nucleosídeos฀como฀Drogas:฀Tiopurinas
6-Mercapto฀purina฀(6-MP)฀é฀um฀análogo฀de฀purina฀
administrado฀oralmente฀que฀é฀útil฀na฀quimioterapia฀
de฀ leucemias฀ agudas฀ e฀ para฀ imunossupressão฀ após฀
transplante฀de฀órgãos.฀Age฀por฀vários฀mecanismos,฀
incluindo฀inibição฀da฀biossíntese฀de฀purinas฀e฀toxi-
cidade฀após฀incorporação฀no฀DNA.฀É฀metabolizado฀
a฀6-MP฀ribosina฀5´-fosfato,฀que฀tem฀curta฀meia-vida,฀
porque฀é฀degradada฀por฀xantina฀oxidase.฀A฀velocida-
de฀de฀degradação฀é฀muito฀reduzida฀em฀pacientes฀que฀
estão฀sendo฀tratados฀com฀alopurinol฀(um฀inibidor฀da฀
xantina฀ oxidase)฀ para฀ hiperuricemia฀ relacionada฀ à฀
gota,฀de฀modo฀que฀a฀dose฀deve฀ser฀drasticamente฀re-
duzida฀em฀tais฀pacientes.
Fonte:฀ Sanderson,฀ J.,฀ Ansari,฀ A.,฀ Marinaki,฀ T.฀ e฀ Duley,฀ J.฀ Thiopurine฀ methyltransferase:฀ Should฀ it฀ be฀ measured฀
before฀commencing฀thiopurine฀drug฀therapy?฀Ann.฀Clin.฀Biochem.฀41:294,฀2004.
BioQ.04 158
Inserções฀ou฀remoções฀de฀um฀ou฀mais฀pares฀de฀ba-
ses฀podem฀levar฀a฀mudanças฀na฀estrutura฀de฀leitu-
ra฀( frameshifts)฀(se฀o฀número฀de฀pares฀de฀bases฀não฀
for฀ múltiplo฀ de฀ 3),฀ destruindo฀ o฀ código฀ de฀ uma฀ pro-
teína฀ (Figura฀ 4.24c,d).฀ Tradução฀ de฀ um฀ mRNA฀ não฀
tem฀pontuação;฀ao฀contrário,฀uma฀vez฀que฀o฀código฀de฀
iniciação฀tenha฀sido฀determinado,฀tripletes฀sucessivos฀
são฀lidos฀como฀códons.฀Portanto,฀adição฀(ou฀deleção)฀
de฀um฀múltiplo฀de฀três฀pares฀de฀bases฀em฀uma฀região฀
codificadora฀adicionaria฀(ou฀subtrairia)฀aminoácidos฀a฀
uma฀proteína,฀mas฀adição฀de฀outros฀números฀de฀pares฀
de฀bases฀deslocaria฀a฀estrutura฀da฀leitura฀daquele฀pon-
to฀ em฀ diante.฀ Mudança฀ na฀ estrutura฀ de฀ leitura฀ ( fra-
meshift)฀muda฀os฀aminoácidos฀codificados฀a฀partir฀do฀
ponto฀de฀inserção฀ou฀remoção.฀Frameshifts฀geralmen-
te฀levam฀à฀terminação฀prematura฀(ou,฀mais฀raramente,฀
à฀elongação)฀da฀cadeia฀polipeptídica฀codificada,฀quan-
do฀ códons฀ de฀ terminação฀ (stop฀ codons)฀ são฀ gerados฀
ou฀ removidos฀ pela฀ mudança฀ na฀ estrutura฀ de฀ leitura.฀
Alguns฀agentes฀químicos,฀incluindo฀acridinas฀e฀pro-
flavina,฀intercalam-se฀no฀DNA;฀isto฀é,฀inserem-se฀en-
tre฀pares฀de฀bases฀adjacentes.฀Isso฀geralmente฀leva฀a฀
inserções฀ou฀remoções฀de฀um฀único฀par฀de฀bases.฀Mu-
tações฀ também฀ podem฀ resultar฀ de฀ alterações฀ em฀ lar-
ga฀escala,฀incluindo฀inserção฀de฀transposons.฀Embora฀
raras฀ em฀ uma฀ geração฀ qualquer,฀ mutações฀ acumula-
ram-se฀ em฀ populações฀ ao฀ longo฀ de฀ milhões฀ de฀ anos,฀
de฀modo฀que฀duas฀pessoas฀diferem฀em฀cerca฀de฀1฀pb฀
por฀1000฀ao฀longo฀de฀seus฀genomas.฀Muitas฀dessas฀di-
ferenças฀genéticas฀não฀têm฀efeito,฀mas฀outras฀afetam฀
nossa฀fisiologia,฀susceptibilidade฀a฀doenças฀e฀resposta฀
a฀tratamentos฀(Corr.฀Clín.฀4.8).
Outra฀ enzima฀ que฀ metaboliza฀ 6-MP฀ (e฀ o฀ anti-
metabólito฀ relacionado฀ 6-tioguanina)฀ é฀ tiopurina฀
metil฀transferase฀(TPMT).฀Alguns฀pacientes฀(cerca฀
de฀ 10%฀ da฀ população)฀ são฀ heterozigotos฀ para฀ um฀
polimorfismo฀que฀inativa฀a฀enzima฀e,฀portanto,฀tem฀
aproximadamente฀ 50%฀ da฀ atividade,฀ e฀ 1/300฀ das฀
pessoas฀não฀têm฀atividade฀de฀TPMT฀e฀têm฀risco฀ex-
tremamente฀alto฀de฀imunossupressão฀grave฀e฀morte฀
se฀forem฀tratadas฀com฀6-MP.฀Por฀outro฀lado,฀pessoas฀
que฀ metabolizam฀ as฀ drogas฀ mais฀ rapidamente฀ po-
dem฀ não฀ chegar฀ a฀ ter฀ dose฀ terapêutica฀ suficiente.฀
Essa฀ diferença฀ farmacogenética,฀ portanto,฀ tem฀ sé-
rias฀implicações฀para฀o฀tratamento฀com฀tiopurinas.
22.01.07 16:37:40
 CAPÍTULO฀4฀฀REPLICAÇÃO,฀RECOMBINAÇÃO฀E฀REPARO฀NO฀DNA฀฀฀|฀฀฀169
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Kowalczykowski,฀S.฀C.฀Initiation฀of฀genetic฀recombination฀and฀
|฀฀QUESTÕES฀฀|฀฀Carol฀N.฀Angstadt
Questões฀de฀Múltipla฀Escolha.
1.฀ Replicação:
A.฀ é฀semiconservativa.
B.฀ requer฀apenas฀proteínas฀com฀atividade฀de฀DNA฀poli-
merase.
C.฀ usa฀atividade฀de฀polimerase฀5’฀para฀3’฀para฀sintetizar฀
uma฀fita,฀e฀atividade฀de฀polimerase฀3’฀para฀5’฀para฀sin-
tetizar฀a฀fita฀complementar.
D.฀ requer฀um฀primer฀em฀eucariotos,฀mas฀não฀em฀proca-
riotos.
E.฀ deve฀começar฀com฀uma฀etapa฀de฀quebra.
2.฀ Na฀replicação฀de฀DNA฀eucariótica:
A.฀ só฀um฀replissomo฀se฀forma,฀porque฀há฀uma฀única฀ori-
gem฀de฀replicação.
B.฀ os฀fragmentos฀de฀Okasaki฀têm฀1000฀a฀2000฀nucleotíde-
os฀de฀comprimento.
C.฀ helicase฀ se฀ dissocia฀ do฀ DNA฀ assim฀ que฀ as฀ bolhas฀ de฀
iniciação฀se฀formam.
BioQ.04 169
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D.฀ FEN฀1฀( flap฀ endonuclease฀ 1)฀está฀envolvida฀na฀re-
moção฀do฀primer.
E.฀ o฀processo฀ocorre฀ao฀longo฀de฀todo฀o฀ciclo฀celular.
3.฀ Todas฀ as฀ afirmativas฀ seguintes฀ sobre฀ a฀ telomerase฀ são฀
corretas,฀exceto:
A.฀ o฀componente฀RNA฀age฀como฀molde฀para฀a฀síntese฀de฀
um฀segmento฀de฀DNA.
B.฀ adiciona฀ telômeros฀ às฀ extremidades฀ 5’฀ das฀ fitas฀ de฀
DNA.
C.฀ fornece฀um฀mecanismo฀para฀replicar฀as฀extremidades฀
de฀cromossomos฀lineares.
D.฀ reconhece฀uma฀fita฀única฀do฀DNA฀rica฀em฀G.
E.฀ é฀uma฀transcriptase฀reversa.
4.฀ Uma฀mutação฀por฀transição:
A.฀ ocorre฀quando฀uma฀purina฀é฀substituída฀por฀uma฀piri-
midina฀ou฀vice-versa.
B.฀ resulta฀da฀inserção฀de฀uma฀ou฀duas฀bases฀na฀cadeia฀de฀
DNA.
22.01.07 16:37:56
 172฀฀฀|฀฀฀PARTE฀2฀฀TRANSMISSÃO฀DA฀INFORMAÇÃO

PARTE฀2฀TRANSMISSÃO฀DA฀INFORMAÇÃO

PA
IIB
IID

IIA
IIF

TATA INR DPE

Pol II

IIE
IIH

5
RNA:฀TRANSCRIÇÃO฀E฀
PROCESSAMENTO
Francis฀J.฀Schmidt฀e฀David฀R.฀Setzer

5.1฀ VISÃO฀GERAL,฀173 ฀ mento฀durante฀transcrição฀em฀eucariotos,฀186

5.2฀ MECANISMOS฀DE฀TRANSCRIÇÃO,฀173
฀ Processo฀inicial฀de฀síntese฀de฀RNA฀é฀transcrição,฀
฀ 173
฀ Informação฀em฀seqüência฀de฀DNA฀sinaliza฀síntese฀฀
฀ de฀RNA,฀173
฀ RNA฀polimerase฀catalisa฀o฀processo฀de฀transcri-฀
฀ ção,฀174
฀ Etapas฀da฀transcrição฀em฀procariotos,฀175
฀ ฀ Reconhecimento฀do฀promotor,฀175
฀ ฀ Início฀da฀síntese,฀176
฀ ฀ Elongação,฀177
฀ ฀ Terminação,฀178
฀ ฀ Capping,฀186
฀ ฀ Remoção฀de฀íntrons฀de฀precursores฀de฀mRNA,฀
฀ ฀ 186
฀ ฀ Poliadenilação,฀188
฀ Mutações฀em฀sinais฀de฀splicing฀causam฀doenças฀฀
฀ humanas,฀188
฀ Splicing฀alternativo฀de฀pré-mRNA฀pode฀levar฀à฀฀
฀ síntese฀de฀múltiplas฀isoformas฀de฀proteínas฀฀
฀ a฀partir฀de฀uma฀única฀seqüência฀codificadora฀฀
฀ no฀DNA,฀190
5.5฀ EXPORTAÇÃO฀DO฀RNA฀E฀CONTROLE฀DE฀QUA-฀
฀ LIDADE,฀191

5.3฀ TRANSCRIÇÃO฀EM฀EUCARIOTOS,฀178 5.6฀ RNAs฀PEQUENOS฀INIBITÓRIOS,฀192

฀ Natureza฀da฀cromatina฀ativa,฀178
฀ Ativação฀da฀transcrição฀opera฀por฀recrutamento฀฀ 5.7฀ REPARO฀DO฀DNA฀ACOPLADO฀À฀TRANSCRI-฀
฀ de฀RNA฀polimerase,฀179 ฀ ÇÃO,฀192
฀ ฀ Enhancers,฀179
฀ Transcrição฀por฀RNA฀polimerase฀II,฀180 5.8฀ NUCLEASES฀E฀TURNOVER฀DO฀RNA,฀193
฀ ฀ Promotores฀para฀a฀síntese฀de฀mRNA,฀180
฀ Transcrição฀por฀RNA฀polimerase฀I,฀181 BIBLIOGRAFIA,฀194
฀ Transcrição฀por฀RNA฀polimerase฀III,฀181
฀ A฀base฀enzimática฀comum฀para฀ação฀de฀RNA฀฀ QUESTÕES฀E฀RESPOSTAS,฀195
฀ polimerases,฀183
CORRELAÇÕES฀CLÍNICAS
5.4฀ PROCESSAMENTO฀DE฀RNA,฀184 ฀ 5.1฀ Antibióticos฀e฀Toxinas฀que฀Têm฀RNA฀Poli-฀
฀ RNA฀transportador฀é฀modificado฀por฀clivagem,฀฀ ฀ merase฀como฀Alvo,฀176
฀ adição฀e฀modificação฀de฀bases,฀184 ฀ 5.2฀ Síndrome฀do฀X฀Frágil:฀Uma฀Doença฀de฀RNA-฀
฀ ฀ Clivagem,฀184 ฀ Cromatina?,฀179
฀ ฀ Adição฀na฀extremidade฀3´,฀184 ฀ 5.3฀ Envolvimento฀de฀Fatores฀Transcripcionais฀฀
฀ ฀ Nucleosídeos฀modificados,฀184 ฀ em฀Carcinogênese,฀182
฀ Processamento฀de฀RNA฀ribossômico฀libera฀vários฀฀ ฀ 5.4฀ Talassemia฀Devido฀a฀Defeitos฀na฀Síntese฀de฀฀
฀ RNAs฀de฀um฀precursor฀mais฀longo,฀184 ฀ RNA฀Mensageiro,฀188
฀ Processamento฀de฀RNA฀mensageiro฀garante฀a฀฀ ฀ 5.5฀ Auto-imunidade฀em฀Doença฀do฀Tecido฀Con-฀
฀ seqüência฀codificadora฀correta,฀185 ฀ juntivo,฀189
฀ RNA฀polimerase฀II฀recruta฀enzimas฀de฀processa-฀ ฀ 5.6฀ Síndrome฀de฀Cockayne,฀193

BioQ.05 172 22.01.07 16:40:55


Sítios HSS
(setas) 5�
Oviduto, imaturo
Oviduto, maduro
Eritrócitos
-5 0
Distância no DNA do início da transcrição, em quilobases
FIGURA฀5.5
Sítios฀hipersensíveis฀à฀DNase฀(HSS)฀antes฀do฀promotor฀do฀
gene฀de฀lisozima฀de฀galinha,฀uma฀unidade฀transcripcional฀
eucariótica฀típica.฀
Sítios฀hiper-sensíveis฀–฀isto฀é,฀seqüências฀próximas฀ao฀gene฀
da฀lisozima฀que฀são฀particularmente฀susceptíveis฀à฀digestão฀
por฀nucleases฀mesmo฀quando฀empacotadas฀em฀cromatina฀
–฀são฀indicados฀por฀setas.฀É฀provável฀que฀esses฀sítios฀fiquem฀
livres฀de฀nucleossomos.฀Note฀que฀alguns฀sítios฀hipersensíveis฀
são฀encontrados฀no฀promotor฀da฀lisozima฀tanto฀em฀oviduto฀
maduro฀como฀imaturo.฀Indução฀da฀síntese฀de฀lisozima฀em฀ovi-
duto฀maduro฀é฀acompanhada฀pelo฀aparecimento฀de฀um฀novo฀
sítio฀hipersensível.฀Em฀contraste,฀nenhum฀sítio฀hipersensível฀
está฀presente฀em฀eritrócitos฀nucleados฀que฀nunca฀sintetizam฀
lisozima.
Adaptado฀de฀Elgin,฀S.฀C.฀R.฀J.฀Biol.฀Chem.฀263:1925,฀1988.
Outras฀ modificações฀ de฀ histonas฀ que฀ influenciam฀
atividade฀gênica฀incluem฀metilação,฀fosforilação฀e฀ubi-
quitinação.฀ Combinações฀ dessas฀ modificações฀ ocor-
rendo฀ em฀ diferentes฀ posições฀ específicas฀ em฀ histonas฀
podem฀constituir฀um฀“código฀histona”฀que฀acopla฀mo-
dificação฀de฀histonas,฀compactação฀de฀cromatina,฀mo-
dificação฀ do฀ DNA฀ e฀ atividade฀ gênica฀ (Corr.฀ Clín.฀ 5.2).฀
A฀idéia฀geral฀é฀que฀cromatina฀parcialmente฀desdobrada฀
seja฀necessária,฀mas฀não฀suficiente,฀para฀transcrição.
Ativação฀de฀Transcrição฀Opera฀por฀
Recrutamento฀de฀RNA฀Polimerase
Fatores฀ protéicos฀ eucarióticos,฀ independentemente฀
da฀seqüência฀à฀qual฀se฀liguem,฀operam฀de฀modo฀funda-
mentalmente฀diferente฀do฀fator฀σ฀de฀E.coli.฀Em฀vez฀de฀
primeiro฀fazer฀parte฀de฀um฀complexo฀protéico฀e฀depois฀
procurar฀ a฀ seqüência฀ relevante฀ no฀ DNA,฀ os฀ fatores฀ se฀
ligam฀ a฀ um฀ sítio฀ específico฀ (seqüência)฀ do฀ DNA฀ e฀ de-
pois฀ligam฀RNA฀polimerase฀(com฀ou฀sem฀envolvimento฀
de฀fatores฀intermediários).฀Esse฀mecanismo฀é฀chamado฀
“recrutamento”.฀Recrutamento฀é฀um฀meio฀pouco฀impor-
tante฀em฀ativação฀de฀genes฀em฀procariotos,฀e฀o฀princi-
pal฀mecanismo฀em฀eucariotos.
Enhancers
Enhancers฀ou฀amplificadores฀aumentam฀muitas฀
vezes฀a฀expressão฀de฀um฀gene.฀Fatores฀de฀transcrição฀
BioQ.05 179
CAPÍTULO฀5฀฀RNA:฀TRANSCRIÇÃO฀E฀PROCESSAMENTO฀฀฀|฀฀฀179
transcrito
CORRELAÇÃO฀CLÍNICA฀5.2
Síndrome฀do฀X฀Frágil:฀Uma฀
Doença฀de฀RNA-Cromatina?
Síndrome฀ do฀ X฀ frágil฀ é฀ a฀ forma฀ individual฀ mais฀
comum฀ de฀ retardo฀ mental฀ hereditário,฀ afetando฀
1/1250฀homens฀e฀1/2000฀mulheres.฀Uma฀variedade฀
de฀sintomas฀anatômicos฀e฀neurológicos฀resulta฀de฀
inativação฀do฀gene฀FMR1,฀localizado฀no฀cromosso-
mo฀X.฀A฀genética฀da฀síndrome฀é฀complexa,฀devido฀
ao฀mecanismo฀molecular฀da฀mutação฀do฀X฀frágil.
A฀ condição฀ do฀ X฀ frágil฀ resulta฀ de฀ expansão฀
de฀ uma฀ seqüência฀ repetida฀ de฀ um฀ trinucleotí-
deo,฀ CGG,฀ encontrado฀ na฀ região฀ 5’฀ não-traduzi-
da฀do฀gene฀FRM1.฀Normalmente,฀essa฀repetição฀
está฀ presente฀ em฀ 30฀ cópias,฀ embora฀ indivíduos฀
normais฀possam฀ter฀até฀200฀cópias฀da฀repetição.฀
Em฀indivíduos฀com฀síndrome฀do฀X฀frágil,฀o฀gene฀
FRM1฀contém฀muito฀mais฀cópias,฀de฀200฀a฀milha-
res,฀ da฀ repetição฀ CGG.฀ A฀ genética฀ complexa฀ da฀
doença฀resulta฀do฀potencial฀da฀repetição฀CGG฀se฀
expandir฀de฀geração฀para฀geração.
A฀presença฀de฀um฀número฀anormalmente฀ele-
vado฀de฀repetições฀CGG฀induz฀extensa฀metilação฀
do฀DNA฀de฀toda฀a฀região฀do฀promotor฀de฀FMR1.฀
DNA฀ metilado฀ é฀ transcripcionalmente฀ inativo,฀
de฀modo฀que฀mRNA฀de฀FMR1฀não฀é฀sintetizado.฀
Ausência฀ da฀ proteína฀ FMR1฀ leva฀ à฀ patologia฀ da฀
doença.฀Proteína฀FMR1฀normalmente฀se฀localiza฀
no฀citoplasma฀de฀todos฀os฀tecidos฀do฀feto฀jovem฀
e,฀mais฀tarde,฀especialmente฀no฀cérebro฀e฀tecido฀
neural฀ fetal.฀ A฀ proteína฀ FMR฀ afeta฀ tradução฀ de฀
vários฀mRNAs฀e฀uma฀hipótese฀é฀que฀essa฀proteí-
na฀ajude฀na฀tradução฀e฀localização฀de฀mRNAs฀es-
pecíficos฀durante฀desenvolvimento.฀Uma฀possibi-
lidade฀descoberta฀recentemente฀é฀que฀a฀proteína฀
FMR1฀esteja฀envolvida฀em฀RNA฀de฀interferência฀
e฀sua฀perda฀possa฀causar฀ampla฀regulação฀gênica฀
anormal฀ (ver฀ Seção฀ 5.7).฀ É฀ provável฀ que฀ várias฀
vias฀ de฀ sinalização฀ estejam฀ ligadas฀ à฀ patologia฀
dessa฀doença฀muito฀complexa.
Fonte:฀Warren,฀S.฀L.฀e฀Nelson,฀D.฀L.฀Advance฀in฀molecu-
lar฀analysis฀of฀Fragile฀X฀syndrome.฀JAMA฀271:536,฀1994.฀
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nlm.nih.gov/entrez/dispomim.cgi?id=309550
22.01.07 16:41:05
 184฀฀฀|฀฀฀PARTE฀2฀฀TRANSMISSÃO฀DA฀INFORMAÇÃO
Nucleotídeos฀entram฀e฀RNA฀sai฀por฀dois฀outros฀canais฀
separados฀ na฀ molécula.฀ A฀ despeito฀ das฀ diferenças฀ em฀
seqüências฀e฀composição฀em฀subunidades,฀RNA฀polime-
rases฀procarióticas฀e฀eucarióticas฀mantiveram฀estrutu-
ras฀semelhantes฀para฀desempenhar฀os฀mesmos฀objeti-
vos฀levando฀à฀síntese฀de฀uma฀nova฀cadeia฀de฀RNA.฀Estas฀
incluem:฀(1)฀passagem฀do฀DNA฀molde฀por฀um฀canal฀na฀
enzima;฀ (2)฀ separação฀ das฀ fitas฀ de฀ DNA฀ para฀ formar฀
uma฀bolha฀na฀qual฀um฀híbrido฀RNA-DNA฀existe฀com฀a฀
extremidade฀3’฀da฀cadeia฀de฀RNA฀posicionada฀no฀sítio฀
ativo;฀ (3)฀ colocação฀ de฀ nucleotídeos฀ no฀ sítio฀ ativo฀ por฀
um฀ poro฀ da฀ enzima;฀ (4)฀ uso฀ de฀ um฀ íon฀ metálico฀ para฀
ajudar฀na฀catálise฀da฀formação฀de฀uma฀nova฀ligação฀és-
ter฀ fosfato฀ entre฀ o฀ fosfato฀ α฀ do฀ nucleosídeo฀ trifosfato฀
que฀está฀chegando฀e฀a฀extremidade฀3’฀da฀cadeia฀nascen-
te฀ de฀ RNA;฀ (5)฀ exclusão฀ do฀ RNA฀ produzido฀ por฀ outro฀
poro;฀e฀(6)฀direção฀do฀re-pareamento฀das฀duas฀fitas฀de฀
DNA,฀à฀medida฀que฀saem฀da฀enzima.฀
Lembre-se฀que฀a฀subunidade฀σ฀da฀holoenzima฀pro-
cariótica฀é฀responsável฀por฀ligar฀as฀caixas฀–10฀e฀–35฀de฀
promotores.฀ Estudos฀ estruturais฀ demonstraram฀ que฀
sigma฀é฀uma฀molécula฀oblonga,฀composta฀por฀um฀feixe฀
de฀ resíduos฀ em฀ α-hélice,฀ empacotados฀ em฀ uma฀ forma฀
de฀“V”฀aberto.฀Um฀braço฀do฀“V”฀contém฀resíduos฀críticos฀
para฀ reconhecimento฀ do฀ promotor฀ e฀ ligação฀ com฀ poli-
merase฀core.฀Um฀lado฀desse฀braço฀contém฀uma฀α-hélice฀
que฀se฀liga฀à฀seqüência฀“–10”,฀e฀a฀outra฀face฀liga฀polime-
rase฀core฀por฀interações฀hidrofóbicas.
|
5.4฀ ฀PROCESSAMENTO฀DE฀
RNA
Cópias฀em฀RNA฀de฀seqüências฀de฀DNA฀devem฀ser฀modi-
ficadas฀em฀moléculas฀maduras,฀funcionais,฀em฀procario-
tos฀e฀eucariotos.฀As฀reações฀de฀processamento฀do฀RNA฀
podem฀ incluir฀ remoção฀ de฀ nucleotídeos฀ extras,฀ modifi-
cação฀ de฀ bases,฀ adição฀ de฀ nucleotídeos฀ e฀ separação฀ de฀
diferentes฀seqüências฀de฀RNA฀pela฀ação฀de฀nucleases฀es-
pecíficas.฀Reações฀de฀processamento฀podem฀ocorrer฀co-
transcripcionalmente฀(enquanto฀o฀RNA฀ainda฀está฀sen-
do฀ transcrito)฀ ou฀ pós-transcripcionalmente฀ (depois฀ do฀
transcrito฀ter฀sido฀liberado฀pela฀RNA฀polimerase).฀Final-
mente,฀em฀eucariotos,฀RNAs฀são฀exportados฀do฀núcleo.
RNA฀Transportador฀É฀Modificado฀
por฀Clivagem,฀Adição฀e฀Modificação฀
de฀Bases
Clivagem
O฀transcrito฀primário฀de฀um฀gene฀de฀tRNA฀contém฀se-
qüências฀extras฀de฀nucleotídeos,฀tanto฀5’฀como฀3’฀da฀se-
qüência฀do฀tRNA.฀Esses฀transcritos฀primários฀também฀
podem฀conter฀íntrons฀na฀região฀do฀anticódon.฀Reações฀
de฀processamento฀pós-transcripcional฀ocorrem฀em฀uma฀
BioQ.05 184
ordem฀temporal฀bem฀definida,฀mas฀não฀necessariamen-
te฀rígida.฀Primeiro,฀o฀transcrito฀primário฀é฀cortado฀de฀
modo฀relativamente฀inespecífico฀para฀gerar฀uma฀molé-
cula฀precursora฀com฀extensões฀5’฀e฀3’฀mais฀curtas.฀En-
tão฀ribonuclease฀P,฀uma฀ribozima฀(ver฀p.฀68),฀remove฀
a฀ extensão฀ 5’฀ por฀ clivagem฀ endonucleolítica.฀ A฀ extre-
midade฀3’฀é฀cortada฀exonucleoliticamente,฀seguida฀por฀
síntese฀ da฀ terminação฀ CCA.฀ Síntese฀ dos฀ nucleotídeos฀
modificados฀ ocorre฀ em฀ qualquer฀ ordem฀ em฀ relação฀ à฀
clivagem฀nucleolítica.฀Remoção฀de฀íntrons฀é฀determina-
da฀pela฀estrutura฀secundária฀do฀precursor฀(ver฀Figura฀
5.10)฀e฀é฀executada฀por฀um฀sistema฀enzimático฀solúvel,฀
com฀dois฀componentes;฀uma฀enzima฀remove฀o฀íntron฀e฀
a฀outra฀sela฀novamente฀a฀cadeia฀nucleotídica.
Adição฀na฀Extremidade฀3’
Todo฀tRNA฀funcional฀tem฀a฀seqüência฀CCA฀em฀sua฀ex-
tremidade฀ 3’.฀ Essa฀ seqüência฀ é฀ essencial฀ para฀ tRNA฀
aceitar฀aminoácidos.฀Na฀maioria฀dos฀casos,฀é฀adicionada฀
seqüencialmente฀pela฀enzima฀tRNA฀nucleotidiltransfe-
rase.฀ Nucleotidiltransferases฀ usam฀ ATP฀ e฀ CTP฀ como฀
substratos฀ e฀ sempre฀ incorporam-nos฀ em฀ tRNA฀ numa฀
razão฀de฀2C/1A.฀As฀extremidades฀CCA฀são฀encontradas฀
tanto฀em฀tRNAs฀citoplasmáticos฀como฀mitocondriais.
Nucleosídeos฀Modificados
Nucleotídeos฀de฀RNA฀transportador฀são฀os฀mais฀modi-
ficados฀de฀todos฀os฀ácidos฀nucléicos.฀Mais฀de฀60฀modifi-
cações฀diferentes฀nas฀bases฀e฀na฀ribose,฀exigindo฀bem฀
mais฀de฀100฀diferentes฀reações฀enzimáticas,฀foram฀en-
contradas฀em฀tRNA.฀Muitas฀são฀simples,฀metilações฀de฀
uma฀etapa,฀mas฀outras฀envolvem฀síntese฀com฀múltiplas฀
etapas.฀
Formação฀de฀algumas฀bases฀modificadas฀na฀realida-
de฀requer฀quebra฀da฀ligação฀β-glicosídica฀entre฀ribose฀
e฀a฀base.฀Enzimas฀modificadoras฀produzem฀as฀mesmas฀
modificações฀ específicas฀ em฀ mais฀ de฀ uma฀ espécie฀ de฀
tRNA;฀entretanto,฀as฀enzimas฀modificadoras฀são฀local-
específicas.฀A฀maioria฀das฀modificações฀se฀completa฀an-
tes฀de฀os฀precursores฀de฀tRNA฀terem฀sido฀clivados฀ao฀
tamanho฀do฀tRNA฀maduro.
Processamento฀de฀RNA฀Ribossômico฀
Libera฀Vários฀RNAs฀de฀um฀Precursor฀
Mais฀Longo
O฀produto฀primário฀da฀transcrição฀do฀gene฀de฀rRNA฀é฀
um฀RNA฀longo,฀chamado฀45S฀RNA,฀que฀contém฀as฀se-
qüências฀ dos฀ rRNAs฀ 28S,฀ 5,8S฀ e฀ 18S.฀ Processamento฀
do฀ 45S฀ RNA฀ ocorre฀ no฀ nucléolo,฀ e฀ é฀ feito฀ por฀ grandes฀
estruturas฀de฀ribonucleoproteínas,฀com฀múltiplas฀subu-
nidades.฀ Processamento฀ dos฀ rRNAs฀ segue฀ uma฀ ordem฀
seqüencial฀(Figura฀5.11).
Processamento฀de฀pré-rRNA฀em฀procariotos฀também฀
envolve฀clivagem฀de฀precursores฀de฀alto฀peso฀molecular฀
22.01.07 16:41:13
 CAPÍTULO฀5฀฀RNA:฀TRANSCRIÇÃO฀E฀PROCESSAMENTO฀฀฀|฀฀฀193

CORRELAÇÃO฀CLÍNICA฀5.6
Síndrome฀de฀Cockayne
Síndrome฀de฀Cockayne฀(CS)฀é฀uma฀doença฀complexa฀
autossômica฀recessiva฀causada฀por฀uma฀mutação฀em฀
um฀de฀dois฀genes.฀Pacientes฀com฀CS฀apresentam฀alte-
rações฀de฀desenvolvimento฀e฀neurológicas,฀anomalias฀
esqueléticas฀ e฀ de฀ retina,฀ e฀ uma฀ deformidade฀ facial฀
“tipo฀pássaro”.฀Morte฀geralmente฀ocorre฀por฀volta฀dos฀
20฀anos฀de฀idade฀e฀é฀causada฀por฀degeneração฀neural.฀
A฀maioria฀dos฀pacientes฀com฀síndrome฀de฀Cockayne฀
são฀também฀fotossensíveis฀e฀predispostos฀a฀câncer฀de฀
pele.
Fotossensibilidade฀ aponta฀ para฀ um฀ defeito฀ em฀
reparo฀do฀DNA.฀Por฀exemplo,฀xeroderma฀pigmento-
so฀(XP)฀resulta฀de฀mutações฀em฀vários฀dos฀compo-
nentes฀da฀via฀de฀reparo฀do฀DNA.฀CS฀também฀é฀uma฀
deficiência฀em฀reparo฀do฀DNA.฀Surpreendentemen-
te,฀um฀dos฀dois฀genes฀responsáveis฀pela฀síndrome฀é฀
uma฀subunidade฀da฀RNA฀polimerase฀II.฀A฀proteína฀
codificada฀ pelo฀ gene฀ da฀ síndrome฀ de฀ Cockayne฀ B฀
aumenta฀a฀velocidade฀de฀elongação฀pela฀RNA฀poli-
merase฀II.
Como฀pode฀uma฀deficiência฀de฀RNA฀polimerase฀
causar฀um฀problema฀no฀reparo฀do฀DNA?฀A฀resposta฀
é฀que฀os฀pacientes฀com฀CS฀são฀deficientes฀no฀repa-
ro฀do฀DNA฀acoplado฀à฀transcrição.฀Reparo฀acoplado฀
à฀ transcrição฀ ocorre฀ quando฀ RNA฀ polimerase฀ fica฀
parada฀ por฀ ter฀ encontrado฀ uma฀ base฀ alterada฀ (p.฀
ex.,฀ um฀ fotodímero฀ de฀ timina).฀ Transcrição฀ pára,฀
o฀ transcrito฀ parcial฀ é฀ degradado,฀ e฀ a฀ fita฀ molde฀ do฀
DNA฀é฀reparada.฀Aparentemente,฀aumento฀da฀trans-
crição฀pela฀proteína฀CSB฀também฀estimula฀o฀reparo฀
do฀DNA฀acoplado฀à฀transcrição.
Se฀ esta฀ fosse฀ toda฀ a฀ história,฀ síndrome฀ de฀ Co-
ckayne฀ seria฀ uma฀ variante฀ do฀ xeroderma฀ pigmen-
toso;฀ entretanto,฀ pacientes฀ com฀ XP฀ têm฀ desenvol-
vimento฀ normal฀ e฀ são฀ neurologicamente฀ normais,฀
embora฀ainda฀sejam฀fotossensíveis.฀O฀que฀causa฀as฀
outras฀características฀de฀CS?฀É฀provável฀que฀esses฀
outros฀ sintomas฀ sejam฀ devidos฀ a฀ uma฀ deficiência฀
primária฀na฀elongação฀da฀transcrição฀causada฀pelo฀
fator฀de฀elongação฀CSB฀alterado฀pela฀mutação.฀Essa฀
idéia฀expande฀nosso฀entendimento฀da฀relação฀entre฀
mutação฀ e฀ doença.฀ Geralmente,฀ doenças฀ genéticas฀
são฀ causadas฀ por฀ uma฀ mutação฀ em฀ processos฀ bio-
químicos฀que฀ficam฀fora฀das฀vias฀centrais฀de฀infor-
mação฀ da฀ célula.฀ Isso฀ faz฀ sentido,฀ porque฀ inibição฀
geral฀da฀síntese฀de฀DNA,฀RNA฀ou฀proteína฀seria฀letal฀
num฀estágio฀precoce฀do฀desenvolvimento.฀Os฀defei-
tos฀generalizados฀de฀CS฀devem฀se฀dever฀à฀mutação฀
afetando฀a฀transcrição฀de฀alguns฀genes฀mais฀do฀que฀
a฀de฀outros.

Fonte:฀Citterio,฀E.,฀Vermeulen,฀W.฀e฀Hoeijmakers,฀J.฀H.฀J.฀Transcriptional฀healing.฀Cell฀101:447,฀2000;฀Selby,฀C.฀P.฀
e฀Sancar,฀A.฀Cockayne฀syndrome฀group฀B฀protein฀enhances฀elongation฀by฀RNA฀polymerase฀II.฀Proc.฀Natl.฀Acad.฀Sci.฀
U.S.A.฀94:11205,฀1997.฀van฀Gool,฀A.฀J.,฀van฀der฀Horst,฀G.฀T.฀J.,฀Citterio,฀E.฀e฀Hoeijmakers,฀J.฀H.฀J.฀Cockayne฀syndrome:฀
defective฀repair฀of฀transcription?฀EMBO฀J.฀16:4155,฀1997.฀Cockayne฀Syndrome,฀Type฀I;฀CKN1฀in฀Online฀Mendelian฀
Inheritance฀in฀Man,฀http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/dispomim.cgi?id=216400

|
5.8฀ ฀NUCLEASES฀E฀
TURNOVER฀DO฀RNA
As฀ diferentes฀ funções฀ de฀ RNA฀ e฀ DNA฀ em฀ expressão฀
gênica฀refletem-se฀em฀seus฀destinos฀metabólicos.฀O฀re-
positório฀ de฀ informação฀ genética฀ de฀ uma฀ célula฀ (DNA)฀
deve฀ser฀preservado,฀explicando฀assim฀a฀existência฀dos฀
múltiplos฀ sistemas฀ de฀ reparo฀ e฀ edição฀ do฀ DNA฀ no฀ nú-
cleo.฀Embora฀seqüências฀individuais฀de฀nucleotídeos฀no฀
DNA฀possam฀ser฀recicladas,฀a฀molécula฀como฀um฀todo฀é฀
metabolicamente฀inerte฀quando฀não฀está฀replicando.฀As฀
várias฀moléculas฀de฀RNA,฀por฀outro฀lado,฀são฀individu-
almente฀ dispensáveis฀ e฀ podem฀ ser฀ substituídas฀ por฀ es-
pécies฀recém-sintetizadas฀com฀a฀mesma฀especificidade.฀
Não฀é฀surpreendente฀que฀sistemas฀de฀reparo฀de฀RNA฀não฀
sejam฀ conhecidos.฀ Em฀ vez฀ disso,฀ RNAs฀ defeituosos฀ são฀
removidos฀ das฀ células฀ por฀ degradação฀ a฀ nucleotídeos,฀
que฀depois฀são฀reutilizados฀em฀novas฀espécies฀de฀RNA.
Isso฀ é฀ mais฀ claro฀ para฀ espécies฀ de฀ mRNA,฀ que฀ são฀
classificadas฀ como฀ instáveis.฀ Entretanto,฀ mesmo฀ os฀
RNAs฀ditos฀estáveis฀são฀reciclados;฀por฀exemplo,฀a฀meia฀
vida฀de฀espécies฀de฀tRNA฀no฀fígado฀é฀cerca฀de฀5฀dias.฀
Uma฀meia฀vida฀bastante฀longa฀para฀um฀mRNA฀de฀ma-
míferos฀é฀30฀h.
Remoção฀de฀RNAs฀do฀citoplasma฀é฀realizada฀por฀ri-
bonucleases฀celulares.฀Nucleases฀são฀de฀vários฀tipos฀e฀
especificidades.฀A฀distinção฀mais฀útil฀é฀entre฀exonuclea-
ses,฀que฀degradam฀RNA฀a฀partir฀da฀extremidade฀5’฀ou฀3’,฀
e฀endonucleases,฀que฀clivam฀ligações฀fosfodiéster฀dentro฀
de฀ uma฀ molécula.฀ Produtos฀ de฀ ação฀ de฀ RNase฀ contêm฀
fosfatos฀3’-฀ou฀5’-terminal,฀e฀tanto฀endo-฀como฀exonucle-
ases฀ podem฀ ser฀ melhor฀ caracterizadas฀ pela฀ posição฀ (5’฀
ou฀ 3’),฀ na฀ qual฀ o฀ monofosfato฀ criado฀ pela฀ clivagem฀ fica฀
localizado.฀A฀estrutura฀do฀RNA฀também฀afeta฀a฀ação฀da฀
nuclease.฀A฀maioria฀das฀nucleases฀é฀menos฀eficiente฀em฀
regiões฀de฀RNA฀com฀estrutura฀muito฀ordenada.
Assim,฀ tRNAs฀ são฀ preferencialmente฀ clivados฀ em฀
regiões฀ não-pareadas฀ da฀ seqüência.฀ Por฀ outro฀ lado,฀

BioQ.05 193 22.01.07 16:41:25

 CAPÍTULO฀6฀฀SÍNTESE฀DE฀PROTEÍNAS:฀TRADUÇÃO฀E฀MODIFICAÇÕES฀PÓS-TRADUÇÃO฀฀฀|฀฀฀197
PARTE฀2฀TRANSMISSÃO฀DA฀INFORMAÇÃO
6
SÍNTESE฀DE฀PROTEÍNAS:฀
TRADUÇÃO฀E฀MODIFICA-
ÇÕES฀PÓS-TRADUÇÃO
Dohn฀Glitz
6.1฀ VISÃO฀GERAL,฀198
6.2฀ COMPONENTES฀DO฀APARELHO฀DE฀TRADU-
ÇÃO,฀198
฀ RNA฀mensageiro฀transmite฀informação฀codifica-฀
฀ da฀em฀DNA,฀198
฀ RNA฀transportador฀é฀uma฀molécula฀tradutora฀฀
฀ bilíngüe,฀199
฀ O฀código฀genético฀usa฀um฀alfabeto฀de฀quatro฀฀
฀ letras฀de฀nucleotídeos,฀199
฀ ฀ Códons฀em฀mRNA฀são฀palavras฀de฀três฀letras,฀
฀ ฀ 199
฀ ฀ Pontuação,฀199
฀ Interações฀códon-anticódon฀permitem฀leitura฀de฀฀
฀ mRNA,฀199
฀ ฀ “Decifrando”฀o฀código฀genético,฀200
฀ ฀ Mutações,฀201
฀ Aminoacilação฀de฀RNA฀transportador฀ativa฀
฀ ฀ aminoácidos฀para฀síntese฀protéica,฀203
฀ ฀ Especificidade฀e฀fidelidade฀de฀reações฀de฀
฀ ฀ ฀ aminoacilação,฀205
฀ Ribossomos฀são฀bancadas฀de฀trabalho฀para฀
฀ ฀ síntese฀protéica,฀205
6.3฀ BIOSSÍNTESE฀DE฀PROTEÍNAS,฀209
฀ Tradução฀é฀direcional฀e฀colinear฀com฀mRNA,฀209
฀ Iniciação฀da฀síntese฀de฀proteínas฀é฀um฀processo฀฀
฀ complexo,฀209
฀ Elongação฀é฀a฀formação฀passo฀a฀passo฀de฀ligações฀฀
฀ peptídicas,฀211
฀ Terminação฀da฀síntese฀do฀polipeptídeo฀requer฀um฀฀
฀ códon฀de฀parada฀(stop฀codon),฀215
฀ Tradução฀tem฀custo฀energético฀significativo,฀215
฀ Síntese฀de฀proteínas฀em฀mitocôndrias฀difere฀฀
฀ ligeiramente,฀215
BioQ.06 197
฀ Alguns฀antibióticos฀e฀toxinas฀inibem฀biossíntese฀฀
฀ de฀proteínas,฀215
6.4฀ AMADURECIMENTO฀DE฀PROTEÍNAS:฀DOBRA-
MENTO,฀MODIFICAÇÃO,฀SECREÇÃO฀E฀DIRE-
CIONAMENTO,฀218
฀ Chaperones฀ajudam฀em฀dobramento฀de฀proteínas฀
฀ 218
฀ Proteínas฀para฀exportação฀seguem฀a฀via฀
฀ ฀ secretória,฀218
฀ Glicosilação฀de฀proteínas฀ocorre฀no฀retículo฀endo-฀
฀ plasmático฀e฀no฀complexo฀de฀Golgi,฀218
6.5฀ DIRECIONAMENTO฀PARA฀MEMBRANA฀E฀OR-
GANELAS,฀224
฀ Seleção฀de฀proteínas฀na฀via฀secretória,฀224
฀ Importação฀de฀proteínas฀por฀mitocôndrias฀requer฀฀
฀ sinais฀específicos,฀227
฀ Direcionamento฀para฀outras฀organelas฀requer฀฀
฀ sinais฀específicos,฀227
6.6฀ MAIS฀MODIFICAÇÕES฀PÓS-TRADUÇÃO,฀227
฀ Proteólise฀parcial฀libera฀insulina฀e฀ativa฀
฀ ฀ zimogênios,฀227
฀ Aminoácidos฀podem฀ser฀modificados฀após฀
฀ ฀ incorporação฀em฀proteínas,฀228
฀ Biossíntese฀de฀colágeno฀requer฀muitas฀
฀ ฀ modificações฀pós-tradução,฀231
฀ ฀ Formação฀de฀pró-colágeno฀no฀retículo฀endo-฀
฀ ฀ plasmático฀e฀no฀complexo฀de฀Golgi,฀231
฀ ฀ Maturação฀de฀colágeno,฀231
6.7฀ REGULAÇÃO฀DA฀TRADUÇÃO,฀234
22.01.07 16:43:42
 CAPÍTULO฀6฀฀SÍNTESE฀DE฀PROTEÍNAS:฀TRADUÇÃO฀E฀MODIFICAÇÕES฀PÓS-TRADUÇÃO฀฀฀|฀฀฀209
sintetizam฀proteínas฀que฀serão฀secretadas฀da฀célula฀ou฀
seqüestradas฀ e฀ funcionam฀ em฀ retículo฀ endoplasmáti-
co,฀complexo฀de฀Golgi฀ou฀lisossomos.฀Em฀homogenatos฀
celulares,฀ fragmentos฀ de฀ membranas฀ com฀ ribossomos฀
ligados฀constituem฀a฀fração฀microssomal;฀detergentes฀
que฀destroem฀membranas฀liberam฀esses฀ribossomos.
|
6.3฀ ฀BIOSSÍNTESE฀DE฀
PROTEÍNAS
Tradução฀É฀Direcional฀e฀Colinear฀com฀
mRNA
Seqüências฀ de฀ RNA฀ mensageiro฀ são฀ escritas฀ (e฀ trans-
critas)฀ 5’→3’,฀ e฀ durante฀ tradução฀ são฀ lidas฀ na฀ mesma฀
direção.฀Seqüências฀de฀aminoácidos฀são฀tanto฀escritas฀
como฀ sintetizadas฀ do฀ resíduo฀ amino-terminal฀ para฀ o฀
carboxi-terminal.฀ Um฀ ribossomo฀ permanece฀ ligado฀ a฀
uma฀molécula฀de฀mRNA฀e฀se฀move฀ao฀longo฀do฀compri-
mento฀do฀mRNA฀até฀que฀chegue฀a฀um฀códon฀de฀parada.฀
Comparações฀de฀seqüências฀de฀mRNA฀com฀seqüências฀
das฀ proteínas฀ que฀ codificam฀ mostraram฀ uma฀ corres-
pondência฀perfeita,฀colinear,฀sem฀sobreposições฀e฀sem฀
falhas฀entre฀a฀seqüência฀codificadora฀do฀mRNA฀e฀a฀do฀
polipeptídeo฀ sintetizado.฀ (Para฀ uma฀ rara฀ exceção,฀ ver฀
Corr.฀Clín.฀6.4).฀De฀fato,฀é฀comum฀deduzir฀a฀seqüência฀
de฀uma฀proteína,฀exclusivamente฀a฀partir฀da฀seqüência฀
de฀ seu฀ mRNA฀ ou฀ do฀ DNA฀ de฀ seu฀ gene.฀ Entretanto,฀ a฀
seqüência฀ deduzida฀ pode฀ diferir฀ da฀ proteína฀ genuína,฀
devido฀a฀modificações฀pós-tradução.
Uma฀história฀pode฀ser฀analisada฀em฀função฀de฀seu฀
início,฀seu฀desenvolvimento฀ou฀parte฀do฀meio฀e฀seu฀final.฀
Biossíntese฀ de฀ proteínas฀ será฀ descrita฀ num฀ arcabouço฀
semelhante:฀ início฀ do฀ processo,฀ elongação฀ durante฀ a฀
qual฀a฀maior฀parte฀da฀proteína฀é฀formada,฀e฀terminação฀
da฀ síntese฀ e฀ liberação฀ do฀ polipeptídeo฀ completo.฀ Va-
mos฀depois฀examinar฀modificações฀pós-tradução,฀pelas฀
quais฀uma฀proteína฀pode฀passar.
Iniciação฀da฀Síntese฀de฀Proteínas฀É฀
um฀Processo฀Complexo
Iniciação฀requer฀aproximação฀de฀uma฀subunidade฀ribos-
sômica฀pequena฀(40฀S),฀um฀mRNA฀e฀um฀complexo฀tRNA฀
do฀ aminoácido฀ amino-terminal,฀ todos฀ em฀ uma฀ orienta-
ção฀correta.฀Segue-se฀associação฀da฀subunidade฀grande฀
(60฀S)฀para฀formar฀um฀complexo฀de฀iniciação฀completo฀
em฀um฀ribossomo฀80฀S.฀Esse฀processo฀requer฀um฀grupo฀
de฀proteínas฀ligadas฀transitoriamente,฀conhecidas฀como฀
fatores฀de฀iniciação,฀que฀só฀atuam฀na฀iniciação.฀A฀fun-
ção฀específica฀de฀alguns฀fatores฀de฀iniciação฀eucarióticos฀
permanece฀ pouco฀ clara,฀ mas฀ síntese฀ de฀ proteínas฀ pro-
cariótica฀fornece฀um฀modelo฀mais฀simples฀para฀compa-
ração.฀A฀iniciação฀da฀tradução฀é฀apresentada฀na฀Figura฀
6.7.฀Como฀primeira฀etapa,฀fator฀de฀iniciação฀eucarió-
BioQ.06 209
tico฀2a฀(eIF-2a)฀liga-se฀a฀GTP฀e฀ao฀tRNA฀iniciador,฀Met-
tRNA imet,฀ para฀ formar฀ um฀ complexo฀ ternário.฀ Nenhum฀
outro฀ aminoacil-tRNA฀ pode฀ substituir฀ o฀ Met-tRNA imet฀
iniciação-específico฀ nessa฀ etapa.฀ Procariotos฀ também฀
utilizam฀um฀tRNA฀iniciador฀específico,฀cuja฀metionina฀é฀
modificada฀por฀formilação฀de฀seu฀amino฀grupo.฀Só฀fMet-
tRNA imet฀é฀reconhecido฀pelo฀IF-2฀procariótico.
A฀ segunda฀ etapa฀ requer฀ subunidades฀ ribossômi-
cas฀ 40฀ S฀ associadas฀ a฀ uma฀ proteína฀ muito฀ complexa,฀
eIF-3.฀ eIF-3฀ de฀ mamíferos฀ contém฀ oito฀ polipeptídeos฀
diferentes฀ e฀ tem฀ uma฀ massa฀ de฀ 600-650฀ kDa;฀ liga-se฀
à฀superfície฀da฀subunidade฀40฀S฀que฀fará฀contato฀com฀
a฀subunidade฀60฀S฀e฀bloqueia฀fisicamente฀a฀associação฀
das฀ subunidades.฀ Portanto,฀ eIF-3฀ é฀ um฀ fator฀ antias-
sociação฀ribossômica฀–฀assim฀como฀eIF-6฀que฀se฀liga฀a฀
subunidades฀60฀S.฀Um฀complexo฀que฀inclui฀eIF-2a-GTP,฀
Met-tRNA i Met,฀eIF-3-40฀S฀e฀fatores฀protéicos฀adicionais฀
agora฀se฀forma.฀Na฀terceira฀etapa,฀o฀complexo฀de฀pré-
iniciação฀é฀formado:฀mRNA,฀eIF-4f,฀também฀chamado฀
complexo฀ de฀ ligação฀ ao฀ cap,฀ eIF-4a,฀ uma฀ helicase฀
que฀desenrola฀estrutura฀secundária฀da฀seqüência฀líder฀
não-traduzida฀do฀mRNA,฀PAB,฀uma฀proteína฀de฀ligação฀
a฀poliA฀que฀faz฀uma฀alça฀aproximando฀a฀extremidade฀3’฀
do฀mRNA฀do฀5’-cap,฀e฀várias฀outras฀proteínas฀são฀ne-
cessárias.฀O฀mRNA฀é฀então฀percorrido฀5´à3´฀até฀que฀o฀
primeiro฀ triplete฀ AUG฀ seja฀ encontrado.฀ Raramente,฀ o฀
primeiro฀AUG฀não฀é฀usado฀e฀um฀AUG฀posterior,฀carac-
terizado฀por฀sua฀estrutura฀secundária฀no฀mRNA,฀é฀se-
lecionado฀para฀iniciação.฀GTP฀é฀hidrolisado฀por฀eIF-2a฀
com฀a฀ajuda฀de฀eIF-5,฀e฀eIF-2a-GDP฀e฀outros฀fatores฀são฀
liberados.฀O฀eIF-2a-GDP฀interage฀com฀fator฀trocador฀de฀
nucleotídeo฀ de฀ guanina฀ eIF-2b฀ e฀ GTP฀ para฀ regenerar฀
eIF-2a-GTP฀para฀outro฀ciclo฀de฀iniciação.
A฀ etapa฀ final฀ requer฀ ligação฀ desse฀ complexo฀ com฀
uma฀subunidade฀60S฀e฀um฀fator฀adicional,฀eIF-5b-GTP.฀
GTP฀ é฀ hidrolisado,฀ e฀ eIF-5b-GDP฀ e฀ outros฀ fatores฀ são฀
liberados.฀ O฀ complexo฀ de฀ iniciação฀ completo฀ é฀ um฀
ribossomo฀80฀S฀com฀o฀mRNA฀e฀tRNA฀iniciador฀correta-
mente฀posicionados฀para฀começar฀tradução.
Procariotos฀ usam฀ menos฀ fatores฀ de฀ iniciação฀ para฀
formar฀ um฀ complexo฀ de฀ iniciação฀ similar.฀ Suas฀ subu-
nidades฀30฀S,฀complexadas฀com฀um฀IF-3฀mais฀simples,฀
podem฀ ligar฀ mRNA฀ ou฀ um฀ complexo฀ ternário฀ de฀ IF-2,฀
fMet-tRNA i met฀ e฀ GTP.฀ Orientação฀ do฀ mRNA฀ depende,฀
em฀parte,฀do฀pareamento฀de฀bases฀entre฀uma฀seqüência฀
rica฀em฀pirimidinas฀de฀oito฀nucleotídeos฀no฀16฀S฀rRNA฀e฀
uma฀seqüência฀“Shine-Dalgarno”฀rica฀em฀purinas,฀cer-
ca฀de฀10฀nucleotídeos฀antes฀do฀códon฀AUG฀iniciador.
Complementaridade฀ entre฀ rRNA฀ e฀ mRNA฀ pode฀ in-
cluir฀ vários฀ pares฀ errados,฀ mas฀ maior฀ complementari-
dade฀geralmente฀leva฀a฀iniciação฀que฀é฀mais฀eficiente.฀
Fator฀ de฀ iniciação฀ IF1฀ também฀ atua฀ na฀ formação฀ do฀
complexo฀ de฀ pré-iniciação.฀ Finalmente,฀ subunidade฀
50฀S฀é฀ligada,฀GTP฀é฀hidrolisado฀a฀GDP฀e฀os฀fatores฀de฀
iniciação฀são฀liberados.฀É฀interessante฀que฀procariotos฀
usem฀ pareamento฀ de฀ bases฀ RNA-RNA฀ para฀ posicionar฀
mRNA,฀enquanto฀eucariotos฀usam฀muitos฀fatores฀pro-
téicos฀para฀chegar฀ao฀mesmo฀resultado.
22.01.07 16:43:55
 CAPÍTULO฀6฀฀SÍNTESE฀DE฀PROTEÍNAS:฀TRADUÇÃO฀E฀MODIFICAÇÕES฀PÓS-TRADUÇÃO฀฀฀|฀฀฀219

CORRELAÇÃO฀CLÍNICA฀6.6
Deleção฀de฀um฀Códon,฀Modificação฀Pós-Tradução฀Incorreta฀e฀
Degradação฀Prematura฀de฀Proteína:฀Fibrose฀Cística

Fibrose฀ cística฀ é฀ a฀ doença฀ autossômica฀ recessiva฀ vem฀secreções฀mucosas฀viscosas฀que฀levam฀a฀doença฀

mais฀comum฀em฀caucasianos,฀com฀uma฀freqüência฀
de฀ cerca฀ de฀ 1฀ por฀ 2000.฀ O฀ gene฀ CF฀ tem฀ 230฀ kb฀ de฀
comprimento฀e฀inclui฀27฀éxons฀que฀codificam฀uma฀
proteína฀de฀1480฀aminoácidos.฀A฀proteína฀conhecida฀
como฀regulador฀de฀condutância฀transmembrânica฀da฀
fibrose฀cística฀ou฀CFTR฀(ver฀p.฀474)฀é฀um฀membro฀de฀
uma฀família฀de฀proteínas฀de฀transporte฀dependen-
tes฀de฀ATP.฀Contém฀dois฀domínios฀que฀atravessam฀a฀
membrana,฀cada฀um฀com฀seis฀regiões฀transmembrâ-
nicas,฀dois฀domínios฀de฀ligação฀a฀ATP฀e฀um฀domínio฀
regulatório฀ que฀ inclui฀ vários฀ sítios฀ de฀ fosforilação.฀
CFTR฀funciona฀como฀um฀canal฀de฀cloreto฀regulado฀
por฀ AMP฀ cíclico.฀ Epitélios฀ em฀ CF฀ caracterizam-se฀
por฀ transporte฀ defeituoso฀ de฀ eletrólitos.฀ Os฀ órgãos฀
mais฀afetados฀incluem฀pulmões,฀pâncreas฀e฀fígado,฀
e฀os฀efeitos฀que฀mais฀oferecem฀risco฀de฀vida฀envol-
pulmonar฀obstrutiva฀crônica฀e฀infecções฀persisten-
tes฀nos฀pulmões.
Em฀cerca฀de฀70%฀dos฀indivíduos฀afetados,฀há฀uma฀
deleção฀dos฀três฀nucleotídeos฀que฀codificam฀fenila-
lanina฀508,฀normalmente฀localizada฀no฀domínio฀1฀de฀
ligação฀ao฀ATP,฀no฀lado฀citoplasmático฀da฀membrana฀
plasmática.฀Como฀em฀várias฀outras฀mutações฀CF,฀a฀
proteína฀com฀deleção฀de฀Phe฀508฀não฀se฀dobra฀cor-
retamente฀no฀ER฀e฀não฀é฀adequadamente฀glicosilada฀
ou฀ transportada฀ para฀ a฀ superfície฀ celular.฀ Em฀ vez฀
disso,฀ é฀ devolvida฀ ao฀ citoplasma฀ para฀ ser฀ degrada-
da฀ nos฀ proteassomos.฀ Uma฀ abordagem฀ terapêutica,฀
ainda฀não฀aplicada฀em฀pacientes,฀usa฀drogas฀que฀mi-
metizam฀interações฀chaperones฀com฀CFTR฀mutante฀
e฀ajudam-nas฀em฀seu฀dobramento฀e฀transporte฀para฀
a฀membrana.

Fonte:฀Ward,฀C.,฀Omura,฀S.,฀e฀Kopito,฀R.฀Degradation฀of฀CFTR฀by฀the฀ubiquitin-proteasome฀pathway.฀Cell฀83:121,฀
1995.฀Plemper,฀R.฀K.฀e฀Wolf,฀D.฀H.฀Retrograde฀protein฀translocation:฀Eradication฀of฀secretory฀proteins฀in฀health฀and฀di-
sease.฀Trends฀Biochem.฀Sci.฀24:266,฀1999.฀Egan,฀M.฀E.,฀Pearson,฀M.,฀Weiner,฀S.฀A.,฀Rajendran,฀V.,฀Rubin,฀D.,฀Glockner-
Pagel,฀J.,฀et฀al.฀Curcumin,฀a฀major฀constituent฀of฀turmeric,฀corrects฀cystic฀fibrosis฀defects.฀Science฀304:600,฀2004.

na฀nascente,฀a฀seqüência฀sinal฀hidrofóbica฀é฀inserida,฀e฀
tradução฀e฀extrusão฀no,฀ou฀através฀do,฀translocon฀estão฀
agora฀acopladas.฀Mesmo฀segmentos฀muito฀hidrofílicos฀ou฀
carregados฀são฀direcionados฀através฀da฀membrana฀para฀
o฀lúmen฀do฀ER.฀O฀peptídeo฀sinal฀é฀excisado฀pela฀pepti-
dase฀sinal,฀uma฀proteína฀integral฀de฀membrana฀da฀face฀
luminal฀do฀ER.฀A฀proteína฀pode฀dobrar,฀e฀componentes฀
de฀proteínas฀formadas฀por฀múltiplas฀subunidades฀podem฀
se฀organizar.฀Outras฀etapas฀podem฀incluir฀processamen-
to฀proteolítico฀e฀glicosilação,฀que฀ocorre฀no฀lúmen฀do฀ER฀
e฀durante฀trânsito฀da฀proteína฀pelo฀aparelho฀de฀Golgi฀e฀
em฀vesículas฀secretórias.

Glicosilação฀de฀Proteínas฀Ocorre฀
no฀Retículo฀Endoplasmático฀e฀no฀
Complexo฀de฀Golgi
Glicosilação฀de฀proteínas฀para฀formar฀glicoproteínas฀
(ver฀p.฀231)฀é฀importante฀por฀muitas฀razões.฀Glicosila-
ção฀ altera฀ as฀ propriedades฀ de฀ proteínas,฀ modificando฀ FIGURA฀6.12
sua฀ estabilidade,฀ solubilidade฀ e฀ volume฀ físico.฀ Além฀ Retículo฀endoplasmático฀rugoso.฀
disso,฀ os฀ resíduos฀ de฀ carboidratos฀ atuam฀ como฀ sinais฀ Três฀setas฀paralelas฀indicam฀três฀ribossomos฀dentre฀os฀muitos฀
ligados฀às฀membranas.฀Seta฀única฀indica฀uma฀mitocôndria,฀
de฀ reconhecimento฀ que฀ podem฀ dirigir฀ a฀ distribuição฀ para฀comparação.
de฀ proteínas฀ e฀ influenciar฀ interações฀ célula-célula฀ e฀ Cortesia฀de฀Dr.฀U.฀Jarlfors,฀University฀of฀Miami.

BioQ.06 219 22.01.07 16:44:09

 CAPÍTULO฀6฀฀SÍNTESE฀DE฀PROTEÍNAS:฀TRADUÇÃO฀E฀MODIFICAÇÕES฀PÓS-TRADUÇÃO฀฀฀|฀฀฀235
alça฀da฀seqüência฀líder฀5’฀do฀mRNA฀da฀ferritina฀(ver฀p.฀
807).฀Esse฀mRNA฀é฀seqüestrado฀para฀uso฀futuro.฀Ácido฀
δ-aminolevulínico฀ sintase,฀ uma฀ enzima฀ da฀ biossínte-
se฀de฀heme,฀também฀é฀regulada฀por฀um฀5’-IRE฀no฀seu฀
mRNA.฀Em฀contraste,฀mais฀mRNA฀do฀receptor฀de฀fer-
ritina฀é฀necessário฀se฀ferro฀estiver฀limitado;฀seu฀mRNA฀
tem฀ IREs฀ em฀ sua฀ região฀ 3’฀ não-traduzida.฀ Ligação฀ da฀
proteína฀repressora฀estabiliza฀o฀mRNA฀e฀prolonga฀sua฀
vida฀útil.฀Muitos฀mRNAs฀regulados฀por฀crescimento,฀in-
cluindo฀os฀de฀proteínas฀ribossômicas,฀têm฀um฀encade-
amento฀de฀polipirimidinas฀em฀sua฀seqüência฀líder.฀Uma฀
proteína฀ que฀ se฀ liga฀ a฀ polipirimidinas฀ ajuda฀ a฀ regular฀
sua฀tradução.
Moléculas฀ pequenas฀de฀ RNA฀ regulam฀biossínte-
se฀de฀proteínas฀em฀dois฀níveis.฀Micro-RNAs฀(miRNA)฀
são฀RNAs฀de฀21฀a฀23฀nucleotídeos฀de฀comprimento฀que฀
são฀ formados฀ a฀ partir฀ de฀ RNAs฀ maiores฀ dupla-fita฀ ou฀
grampo฀ por฀ uma฀ endonuclease฀ citoplasmática฀ chama-
da฀ Dicer.฀ Uma฀ RNA฀ helicase฀ separa฀ as฀ fitas,฀ uma฀ das฀
quais฀é฀ligada฀por฀um฀complexo฀silenciador฀induzi-
do฀por฀RNA฀(RISC)฀que฀guia฀o฀miRNA฀para฀seqüên-
cias฀ complementares฀ no฀ mRNA.฀ Formação฀ de฀ um฀ du-
plex฀ mRNA-miRNA฀ imperfeito฀ reprime฀ tradução,฀ mas฀
não฀afeta฀estabilidade฀do฀mRNA.฀Interação฀cooperativa฀
de฀múltiplos฀miRNAs฀com฀um฀mRNA฀aumenta฀eficiên-
cia฀ de฀ inibição.฀ Dicer฀ e฀ RISC฀ também฀ geram฀ duplexes฀
perfeitamente฀complementares฀de฀moléculas฀pequenas฀
de฀RNA฀com฀mRNA.฀Esses฀complexos฀de฀RNA฀peque-
no฀de฀interferência฀(siRNA)฀resultam฀em฀clivagem฀e฀
inativação฀do฀mRNA฀alvo฀por฀uma฀endonuclease฀RISC฀
chamada฀slicer.฀RNAs฀de฀silenciamento฀e฀interferência฀
são฀ importantes฀ no฀ desenvolvimento฀ normal฀ e฀ no฀ de-
senvolvimento฀de฀câncer.
|
6.8฀ ฀DEGRADAÇÃO฀
E฀TURNOVER฀DE฀
PROTEÍNAS
Proteínas฀têm฀tempos฀de฀vida฀que฀variam฀muito.฀Célu-
las฀do฀cristalino฀não฀são฀substituídas฀e฀suas฀proteínas฀
não฀são฀recicladas.฀Hemoglobina฀em฀eritrócitos฀dura฀o฀
tempo฀de฀vida฀dessas฀células,฀cerca฀de฀120฀dias.฀Outras฀
proteínas฀têm฀tempos฀de฀vida฀medidos฀em฀dias,฀horas฀
ou฀ até฀ minutos.฀ Algumas฀ proteínas฀ da฀ coagulação฀ do฀
sangue฀sobrevivem฀apenas฀alguns฀dias,฀de฀modo฀que฀he-
mofílicos฀só฀estão฀protegidos฀por฀um฀curto฀período฀após฀
transfusão฀ou฀injeção฀de฀fatores฀necessários.฀Diabéticos฀
requerem฀ injeções฀ de฀ insulina฀ regularmente฀ uma฀ vez฀
que฀ o฀ hormônio฀ é฀ metabolizado.฀ Enzimas฀ metabólicas฀
variam฀quantitativamente,฀dependendo฀de฀necessidade฀
ou฀mudança฀de฀situação;฀por฀exemplo,฀a฀concentração฀
de฀enzimas฀do฀ciclo฀da฀uréia฀muda฀em฀resposta฀à฀die-
ta.฀Proteínas฀estão฀também฀sujeitas฀a฀danos฀por฀oxida-
ção,฀ proteólise,฀ desnaturação฀ ou฀ outras฀ modificações฀
irreversíveis.฀ Erros฀ em฀ tradução฀ e฀ dobramento฀ levam฀
a฀ proteínas฀ não-funcionais,฀ e฀ processamento฀ proteolí-
BioQ.06 235
tico฀ gera฀ peptídeos฀ não-funcionais฀ como฀ o฀ peptídeo-C฀
da฀pró-insulina.฀Em฀todos฀os฀casos,฀um฀“tratamento฀do฀
lixo”฀é฀necessário.฀Proteólise฀reduz฀as฀proteínas฀a฀peptí-
deos฀e฀eventualmente฀a฀aminoácidos.฀A฀maioria฀desses฀
aminoácidos฀ é฀ reciclada฀ para฀ sintetizar฀ novas฀ proteí-
nas,฀mas฀alguns฀são฀metabolizados฀e฀seus฀produtos฀de฀
degradação฀são฀excretados.฀Proteases฀digestivas฀como฀
pepsina,฀ tripsina,฀ quimotripsina฀ e฀ elastase฀ hidrolisam฀
proteínas฀da฀dieta฀e฀não฀participam฀do฀turnover฀(reci-
clagem)฀intracelular฀de฀proteínas,฀mas฀os฀aminoácidos฀
que฀geram฀contribuem฀para฀a฀reserva฀metabólica฀usa-
da฀na฀tradução.฀Isso฀é฀particularmente฀necessário฀para฀
aminoácidos฀essenciais฀(ver฀Tabela฀19.1,฀p.฀726).
Proteólise฀Dependente฀de฀ATP฀
Ocorre฀em฀Proteassomos
Uma฀ via฀ proteolítica฀ bem฀ descrita฀ usa฀ proteassomos,฀
estruturas฀em฀forma฀de฀halteres฀que฀contêm฀cerca฀de฀
28฀polipeptídeos฀(Figura฀6.22).฀Um฀núcleo฀cilíndrico฀é฀
tampado฀em฀ambas฀as฀extremidades฀por฀complexos฀em฀
forma฀ de฀ V฀ que฀ ajudam฀ a฀ reconhecer฀ e฀ desdobrar฀ po-
lipeptídeos฀ e฀ transportá-los฀ para฀ o฀ núcleo฀ proteolítico฀
em฀um฀mecanismo฀que฀depende฀de฀ATP.฀Direcionamen-
to฀para฀proteassomos฀normalmente฀requer฀ubiquitina,฀
uma฀ proteína฀ muito฀ conservada฀ de฀ 76฀ aminoácidos.฀
Proteínas฀são฀marcadas฀para฀degradação฀por฀poliubi-
quitinação,฀como฀mostrado฀na฀Figura฀6.23.
Ubiquitina฀é฀ativada฀por฀enzima฀E1฀para฀formar฀um฀
tioéster;฀ ATP฀ é฀ necessário฀ e฀ um฀ complexo฀ transitório฀
AMP-ubiquitina฀ está฀ envolvido.฀ A฀ ubiquitina฀ é,฀ então,฀
passada฀ para฀ enzima฀ E2฀ e,฀ finalmente,฀ via฀ um฀ grupo฀
de฀ complexos฀ multiprotéicos฀ E3,฀ para฀ uma฀ proteína฀
alvo.฀ Ligação฀ da฀ ubiquitina฀ ocorre฀ por฀ ligações฀ iso-
peptídicas฀entre฀ε-amino฀grupos฀de฀resíduos฀de฀lisina฀
da฀proteína฀e฀o฀resíduo฀de฀glicina฀carboxi-terminal฀da฀
ubiquitina.฀Várias฀moléculas฀de฀ubiquitina฀são฀ligadas฀à฀
proteína฀e฀uma฀à฀outra,฀e฀a฀proteína฀poliubiquitinada฀é฀
levada฀ aos฀ proteassomos฀ e฀ degradada;฀ uma฀ isopepti-
dase฀libera฀ubiquitina฀intacta฀para฀ser฀reutilizada.
Proteínas฀danificadas,฀defeituosas,฀dobradas฀errone-
amente฀ ou฀ mutadas฀ são฀ rapidamente฀ degradadas฀ pela฀
via฀ da฀ ubiquitina.฀ Uma฀ mutação฀ na฀ fibrose฀ cística฀ que฀
resulta฀em฀deleção฀de฀um฀aminoácido฀altera฀muito฀a฀es-
tabilidade฀de฀CFTR฀(Corr.฀Clín.฀6.6).฀Seleção฀de฀proteí-
nas฀nativas฀para฀degradação฀depende฀da฀especificidade฀
da฀ enzima฀ E3;฀ tanto฀ conformação฀ como฀ seqüência฀ de฀
aminoácidos฀ são฀ importantes.฀ Seqüências฀ desestabili-
zadoras฀PEST฀(ricas฀em฀Pro,฀Glu,฀Ser฀e฀Thr)฀foram฀iden-
tificadas฀em฀várias฀proteínas฀de฀vida฀curta,฀e฀um฀motivo฀
de฀interação฀com฀ubiquitina,฀que฀liga฀ubiquitina฀e฀às฀ve-
zes฀também฀promove฀poliubiquitinação,฀foi฀identificado.฀
Outro฀determinante฀é฀a฀identidade฀do฀aminoácido฀ami-
no-terminal.฀ De฀ acordo฀ com฀ a฀ regra฀ do฀ N-terminal,฀
proteínas฀com฀resíduos฀amino-terminais฀diferentes฀são฀
degradadas฀a฀velocidades฀completamente฀diferentes,฀e฀
o฀tempo฀de฀vida฀de฀uma฀proteína฀pode฀ser฀modificado฀
pela฀incorporação฀de฀um฀resíduo฀N-terminal฀desestabi-
22.01.07 16:44:26
 CAPÍTULO฀7฀฀DNA฀RECOMBINANTE฀E฀BIOTECNOLOGIA฀฀฀|฀฀฀241

PARTE฀2฀TRANSMISSÃO฀DA฀INFORMAÇÃO

7
Plasmídeo
Promotor
���฀Z
Restrição
ao sítio A

Restricção
ao sítio B

Gene
resistente à
antibióticos

DNA฀RECOMBINANTE฀E฀
BIOTECNOLOGIA
Gerald฀Soslau

7.1฀ VISÃO฀GERAL,฀242 7.7฀ DETECÇÃO฀E฀IDENTIFICAÇÃO฀DE฀ÁCIDOS฀NU-

CLÉICOS฀E฀PROTEÍNAS฀QUE฀LIGAM฀DNA,฀254
7.2฀ A฀REAÇÃO฀DE฀POLIMERASE฀EM฀CADEIA฀ ฀ Ácidos฀nucléicos฀como฀sondas฀(probes)฀para฀฀
(POLYMERASE฀CHAIN฀REACTION),฀243 ฀ seqüências฀específicas฀de฀DNA฀ou฀RNA,฀254
฀ ฀ Técnica฀de฀Southern฀blot฀para฀identificar฀frag-฀
7.3฀ ENDONUCLEASES฀DE฀RESTRIÇÃO฀E฀MAPAS฀DE฀ ฀ ฀ mentos฀de฀DNA,฀255
RESTRIÇÃO,฀243 ฀ Polimorfismo฀de฀conformação฀de฀cadeia฀única,฀
฀ Endonucleases฀de฀restrição฀hidrolisam฀seletiva-฀ ฀ 256
฀ mente฀DNA,฀243 ฀ Detecção฀de฀mRNA,฀258
฀ Mapas฀de฀restrição฀permitem฀preparação฀rotinei-฀ ฀ Detecção฀de฀proteínas฀que฀se฀ligam฀a฀seqüência฀฀
฀ ra฀de฀segmentos฀definidos฀de฀DNA,฀245 ฀ específica฀no฀DNA,฀258

7.4฀ SEQÜENCIAMENTO฀DE฀DNA,฀245 7.8฀ DNA฀COMPLEMENTAR฀E฀BIBLIOTECAS฀DE฀

฀ Método฀de฀clivagem฀enzimática฀interrompida:฀฀
฀ procedimento฀de฀Sanger,฀246
7.5฀ DNA฀RECOMBINANTE฀E฀CLONAGEM,฀248
฀ DNAs฀de฀diferentes฀fontes฀podem฀ser฀ligados฀฀
฀ para฀formar฀uma฀nova฀espécie฀de฀DNA:฀DNA฀฀
฀ recombinante,฀248
฀ Vetores฀de฀DNA฀recombinante฀são฀produzidos฀por฀฀
฀ clonagem,฀249
฀ Clonagem฀direcional:฀DNA฀inserido฀em฀DNA฀vetor฀฀
฀ em฀uma฀direção฀específica,฀249
฀ Bactérias฀transformadas฀com฀DNA฀recombinante฀฀
฀ e฀necessidade฀de฀um฀processo฀de฀seleção,฀250
฀ Moléculas฀de฀DNA฀recombinante฀em฀uma฀biblio-฀
฀ teca฀gênica,฀250
฀ PCR฀contorna฀a฀necessidade฀de฀clonar฀DNA,฀251
7.6฀ SELEÇÃO฀DE฀UM฀DNA฀ESPECÍFICO฀CLONADO฀
EM฀BIBLIOTECAS,฀252
฀ Seleção฀de฀bactéria฀transformada฀por฀perda฀de฀฀
฀ resistência฀a฀antibiótico,฀252
α-Complementação฀para฀selecionar฀bactérias฀que฀฀
฀ carregam฀plasmídeos฀recombinantes,฀254
DNA฀COMPLEMENTAR,฀260
฀ mRNA฀como฀molde฀para฀síntese฀de฀DNA฀usando฀฀
฀ transcriptase฀reversa,฀260
฀ ฀ mRNA฀desejado฀pode฀ser฀enriquecido฀por฀฀
฀ ฀ técnicas฀de฀separação,฀261
฀ ฀ Síntese฀de฀DNA฀complementar,฀261
฀ ฀ RNA฀celular฀total฀como฀molde฀para฀síntese฀de฀฀
฀ ฀ DNA฀usando฀RT-PCR,฀262
7.9฀ BACTERIÓFAGOS,฀COSMÍDEO฀E฀VETORES฀DE฀
CLONAGEM฀EM฀LEVEDURA,฀262
฀ Bacteriófagos฀como฀vetores฀de฀clonagem,฀263
฀ ฀ Examinando฀(screening)฀bibliotecas฀de฀bacte-฀
฀ ฀ riófagos,฀264
฀ Clonando฀fragmentos฀de฀DNA฀em฀cosmídeos฀e฀฀
฀ vetores฀cromossomos฀artificiais,฀264
7.10฀ ANÁLISE฀DE฀LONGAS฀SEQÜÊNCIAS฀DE฀DNA,฀
265
฀ Subclonagem฀permite฀definição฀de฀grandes฀seg-฀
฀ mentos฀de฀DNA,฀265
฀ Caminhar฀nos฀cromossomos฀(chromosome฀฀฀
฀ walking)฀define฀arranjo฀de฀genes฀em฀segmen-฀
฀ tos฀longos฀de฀DNA,฀265

BioQ.07 241 22.01.07 16:48:30

 254฀฀฀|฀฀฀PARTE฀2฀฀TRANSMISSÃO฀DA฀INFORMAÇÃO

α-Complementação฀para฀Selecionar฀
Bactérias฀que฀Carregam฀Plasmídeos฀
Recombinantes
Vetores฀foram฀construídos฀(a฀série฀pUC)฀de฀tal฀modo฀que฀
bactérias฀ selecionadas฀ transformadas฀ com฀ esses฀ veto-
res฀carregando฀insertos฀de฀DNA฀estrangeiro,฀podem฀ser฀
identificadas฀visualmente฀(Figura฀7.10).฀Os฀plasmídeos฀
pUC฀contêm฀as฀seqüências฀regulatórias฀e฀parte฀da฀seqü-
ência฀5’-codificadora฀(146฀aminoácidos฀N-terminais)฀do฀
gene฀da฀β-galactosidase฀(gene฀lacZ)฀do฀operon฀lac฀(ver฀
p.฀293).฀O฀fragmento฀traduzido฀N-terminal฀da฀β-galac-
tosidase฀é฀um฀polipeptídeo฀inativo.฀E.฀coli฀mutante,฀que฀
codifica฀a฀porção฀carboxi-terminal฀inativa฀que฀falta฀da฀
β-galactosidase,฀ pode฀ ser฀ transformada฀ usando-se฀ os฀
plasmídeos฀pUC.฀A฀tradução฀das฀porções฀da฀β-galactosi-
dase฀do฀plasmídeo฀e฀a฀da฀célula฀hospedeira฀em฀resposta฀
a฀um฀indutor,฀isopropil฀tio-β-d-galactosídeo,฀se฀com-
plementam฀mutuamente฀gerando฀uma฀enzima฀ativa.฀O฀
processo฀é฀chamado฀α-complementação.฀Quando฀es-
sas฀bactérias฀transformadas฀são฀crescidas฀em฀presença฀
de฀ um฀ substrato฀ cromogênico฀ (5-bromo-4-cloro-3-in-
dolil-β-D-galactosídeo฀ [X-gal])฀ para฀ a฀ β-galactosidase,฀
formam฀ colônias฀ azuis.฀ Se,฀ entretanto,฀ um฀ fragmento฀
de฀ DNA฀ estrangeiro฀ for฀ inserido฀ na฀ seqüência฀ da฀ por-
ção฀N-terminal฀da฀β-galactosidase,฀a฀enzima฀ativa฀não฀
pode฀ser฀formada.฀Bactérias฀transformadas฀com฀esses฀
plasmídeos฀recombinantes฀e฀crescidas฀em฀X-gal฀dão฀co-
lônias฀ brancas฀ e฀ podem฀ ser฀ selecionadas฀ visualmente,฀
das฀colônias฀azuis฀não฀transformadas.
|
7.7฀ ฀DETECÇÃO฀E฀IDENTIFI-
CAÇÃO฀DE฀ÁCIDOS฀NU-
CLÉICOS฀E฀PROTEÍNAS฀
QUE฀LIGAM฀DNA
Ácidos฀Nucléicos฀como฀Sondas฀
(Probes)฀para฀Seqüências฀Específicas฀
de฀DNA฀ou฀RNA
Sondas฀de฀DNA฀e฀RNA฀são฀usadas฀para฀seleção฀de฀bac-
térias฀ que฀ abrigam฀ DNA฀ recombinante฀ de฀ interesse,฀
para฀análise฀de฀mRNA฀expresso฀em฀uma฀célula฀ou฀para฀
identificação฀ de฀ seqüências฀ de฀ DNA฀ em฀ um฀ genoma.฀
Contêm฀seqüências฀complementares฀ao฀ácido฀nucléico฀
alvo฀e฀hibridizam฀com฀o฀ácido฀nucléico฀de฀interesse.฀O฀
grau฀de฀complementaridade฀determina฀a฀força฀de฀liga-
ção฀da฀sonda.฀A฀sonda฀não฀precisa฀conter฀a฀seqüência฀
complementar฀inteira฀do฀DNA.฀A฀sonda฀pode฀ser฀marca-
da,฀geralmente฀com฀32P฀ou฀com฀marcas฀não-radioativas฀
que฀ dependem฀ de฀ substratos฀ de฀ enzimas฀ acoplados฀ a฀
nucleotídeos฀ que,฀ quando฀ incorporados฀ ao฀ ácido฀ nuc-
léico,฀podem฀ser฀detectados฀por฀uma฀reação฀catalisada฀
por฀enzima.
Sondas฀ marcadas฀ podem฀ ser฀ produzidas฀ por฀ nick฀
translation฀(tradução฀com฀corte)฀do฀DNA฀dupla-fita.฀

Sítio de policlonagem N-terminal FIGURA฀7.10

�
interrompido α-Complementação฀para฀detecção฀de฀
Seqüência bactérias฀transformadas.฀
codificadora DNA estranho Um฀vetor฀construído฀(pUC฀18)฀expressa฀
ampr pUC 18 ampr pUC 18
N-terminal inserido a฀seqüência฀codificadora฀N-terminal฀
2686 bp do gene da 2686 bp
da฀enzima฀β-galactosidase฀do฀operon฀
-galactosidase N-terminal lac.฀Bactérias฀mutantes฀que฀codificam฀
do operon-��� interrompido a฀região฀C-terminal฀da฀β-galactosidase฀
são฀transformadas฀com฀pUC฀18.฀Essas฀
Promotor bactérias฀transformadas,฀crescidas฀em฀
Transformação presença฀de฀um฀substrato฀especial฀
para฀a฀enzima฀intacta฀(X-gal),฀resultam฀
Transformação em฀colônias฀azuis,฀porque฀contêm฀a฀
enzima฀para฀reagir฀com฀o฀substrato.฀
As฀seqüências฀codificadoras฀funcionais฀
Cromossomo
N-terminal฀e฀C-terminal฀do฀gene฀
complementam-se฀mutuamente,฀
Seqüência codificadora gerando฀uma฀enzima฀funcional.฀Se,฀
� N-terminal do gene da
 -galactosidase
pUC18
recombinante
entretanto,฀um฀fragmento฀de฀DNA฀
estrangeiro฀for฀inserido,฀interrompe฀a฀
do operon-��� seqüência฀codificadora฀N-terminal฀da฀
pUC18 A bactéria cresce em agar
contendo X-gal a um indutor β-galactosidase,฀bactérias฀transformadas฀
A bactéria cresce em agar do operon���� com฀essa฀molécula฀recombinante฀não฀
contendo X-gal a um indutor produzirão฀enzima฀funcional.฀Colônias฀
do operon���� de฀bactérias฀que฀contêm฀esses฀vetores฀
recombinantes฀podem฀ser฀detectadas฀
Colônias visualmente฀como฀colônias฀brancas.
brancas
contêm
pUC18
recombinante

Colônias azuis

Colônias azuis contêm pUC18

sem o DNA estrangeiro

BioQ.07 254 22.01.07 16:48:41

 CAPÍTULO฀7฀฀DNA฀RECOMBINANTE฀E฀BIOTECNOLOGIA฀฀฀|฀฀฀259

CORRELAÇÃO฀CLÍNICA฀7.6
Polimorfismo฀de฀Conformação฀de฀Cadeia-Única฀para฀Detecção฀de฀
Mutações฀Espontâneas฀que฀Podem฀Levar฀a฀SIDS
A฀ síndrome฀ da฀ morte฀ súbita฀ infantil฀ (SIDS)฀ é฀ uma฀ a฀síndrome฀do฀QT฀longo฀continha฀a฀substituição฀de฀
causa฀importante฀de฀morte฀durante฀o฀primeiro฀ano฀ AAC฀para฀TCC฀na฀posição฀2971฀a฀2972฀(proteína฀as-
de฀vida฀nos฀Estados฀Unidos.฀Estudo฀prospectivo฀em฀ sociada฀com฀o฀canal฀de฀sódio),฀por฀análise฀de฀poli-
mais฀ de฀ 34.000฀ recém-nascidos฀ que฀ foram฀ monito- morfismo฀ de฀ conformação฀ de฀ cadeia-única฀ (SSCP)฀
rados฀por฀eletrocardiografia฀indicou฀uma฀forte฀cor- na฀amostra฀de฀DNA฀da฀criança,฀mas฀não฀dos฀pais.฀A฀
relação฀ entre฀ risco฀ aumentado฀ de฀ SIDS฀ e฀ intervalo฀ mutação฀ substituiu฀ um฀ resíduo฀ de฀ serina฀ por฀ uma฀
QT฀prolongado฀em฀seu฀ECG.฀Com฀base฀nesse฀estudo,฀ asparagina฀ em฀ uma฀ região฀ muito฀ conservada฀ da฀
decidiu-se฀ procurar฀ uma฀ mutação฀ em฀ um฀ ou฀ mais฀ proteína,฀que฀se฀presume฀participe฀da฀função฀do฀ca-
dos฀genes฀que฀se฀sabe฀estarem฀relacionados฀com฀a฀ nal฀ de฀ sódio.฀ A฀ mutação฀ não฀ foi฀ detectada฀ em฀ 200฀
síndrome฀ do฀ QT฀ longo฀ em฀ uma฀ criança฀ de฀ 44฀ dias฀ indivíduos฀controles.฀A฀conclusão฀foi฀que฀a฀criança฀
de฀idade,฀que฀se฀apresentou฀cianótica,฀apnéica฀e฀sem฀ tinha฀ uma฀ mutação฀ espontânea฀ em฀ um฀ gene฀ asso-
pulso฀ao฀pronto-socorro฀de฀um฀hospital.฀A฀arritmia฀ ciado฀com฀intervalo฀QT฀prolongado฀e฀isso฀contribuiu฀
da฀criança฀com฀um฀intervalo฀QT฀prolongado฀foi฀esta- para฀um฀evento฀tipo฀SIDS.฀Após฀tratamento,฀a฀crian-
bilizada฀ com฀ múltiplos฀ eletrochoques฀ DC,฀ seguidos฀ ça฀ ficou฀ sem฀ nenhum฀ sintoma฀ por฀ volta฀ dos฀ cinco฀
de฀ tratamento฀ com฀ drogas.฀ DNA฀ genômico฀ foi฀ pre- anos฀de฀idade.฀Esse฀estudo฀indica฀o฀valor฀potencial฀
parado฀ a฀ partir฀ de฀ linfócitos฀ do฀ sangue฀ periférico฀ do฀exame฀eletrocardiográfico฀neonatal฀para฀reduzir฀
da฀ criança฀ e฀ de฀ seus฀ pais.฀ Um฀ gene฀ associado฀ com฀ mortalidade฀infantil฀por฀SIDS.

Fonte:฀Schwartz,฀P.฀J.,฀Priori,฀S.฀G.,฀Dumaine,฀R.฀Napolitano,฀C.,฀Antzelevitch,฀C.,฀Stramba-Badiale,฀M.,฀Richard,฀T.฀
A.,฀Berji,฀M.฀R.฀e฀Bloise,฀R.฀A฀molecular฀link฀between฀the฀sudden฀infant฀death฀syndrome฀and฀the฀long-QT฀syndrome.฀
N.฀Engl.฀J.฀Med.฀343:262,฀2000.

(a) Solução de hidrização FIGURA฀7.13

Ensaio฀de฀proteção฀de฀nuclease.฀
250 bases 300 bases mRNA฀celular฀total฀pode฀ser฀isolado฀
Sonda X Sonda Y
+ de฀diferentes฀tecidos.฀Sondas฀de฀DNA฀
fita-única฀que฀são฀complementares฀a฀
seqüências฀conhecidas฀de฀diferentes฀
mRNAX + mRNAY genes฀transcritos฀(mRNAx,฀mRNAy,฀
Outros RNAs
400 bases mRNAz)฀são฀hibridizadas฀com฀a฀
Sonda Z mistura฀de฀RNAs.฀Digestão฀com฀
+
uma฀ribonuclease฀hidrolisará฀
mRNAZ e sondas não as฀regiões฀de฀RNA฀fita-única฀de฀
hidridizadas mRNA฀não-hibridizado฀com฀a฀
sonda฀de฀DNA฀e฀todas฀as฀espécies฀
de฀RNA฀que฀não฀hibridizaram.฀Só฀
(b) Digestão com nuclease
os฀híbridos฀DNA-RNA฀protegidos฀
250 bp 300 bp 400 bp da฀nuclease฀permanecerão฀para฀
Híbrido X Híbrido Y Híbrido Z análise฀por฀eletroforese฀em฀gel฀de฀
+ + poliacrilamida.฀Expressão฀diferencial฀
de฀genes฀em฀diferentes฀tecidos฀é,฀
então,฀facilmente฀observada
�c � Reações de amostras de RNA de diferentes tecidos analisadas por eletroforese em gel de poliacrilamida.
Coração

Cérebro
Pulmão
Padrão

Pele

400 bp

300 bp
250 bp

BioQ.07 259 22.01.07 16:48:46

 272฀฀฀|฀฀฀PARTE฀2฀฀TRANSMISSÃO฀DA฀INFORMAÇÃO
Gene ��� Z truncado FIGURA฀7.25
RE Mutagênese฀sítio-dirigida฀de฀um฀
Sítio de único฀nucleotídeo฀e฀detecção฀do฀DNA฀
Gene clonado Gene clonado mutado.฀
policlonagem
Endonucleose e purificado A฀figura฀é฀uma฀visão฀geral฀
de restrição (RE) simplificada฀do฀método.฀Esse฀
processo฀envolve฀a฀inserção฀de฀um฀
fragmento฀de฀DNA฀amplificado฀
RE Elemento puro฀em฀um฀vetor฀bacteriófago฀
regulatório modificado,฀M13.฀E.฀coli฀susceptível,฀
PLASMÍDEO de ��� Z Vetor M13 transformada฀com฀o฀DNA฀
recombinante฀de฀M13,฀sintetiza฀
a฀fita฀(+)฀de฀DNA,฀acondicionada฀
Transformar nas฀proteínas฀do฀bacteriófago.฀
������ Os฀bacteriófagos฀são฀isolados฀do฀
Fita susceptível meio฀de฀cultura,฀e฀o฀DNA฀do฀M13฀
recombinante recombinante฀fita-única฀é฀purificado.฀
(–) do M13 Isolar DNA fita
O฀DNA฀do฀M13฀recombinante฀serve฀
única de M13
de฀molde฀para฀replicação฀do฀DNA฀por฀
recombinante
DNA฀polimerase,฀desoxinucleosídeos฀
do meio M13 RECOMBINANTE
trifosfato฀(dNTPs),฀DNA฀ligase฀e฀
um฀primer฀especial.฀O฀primer฀de฀
Oligômero com DNA฀(oligômero฀com฀pareamento฀
um único nucleotídeo errado)฀é฀sintetizado฀de฀modo฀a฀ser฀
com pareamento errado DNA polimerase exatamente฀complementar฀a฀uma฀
quatro dNTPs, região฀do฀DNA฀(gene)฀de฀interesse,฀
DNA ligase exceto฀por฀uma฀base฀que฀se฀deseja฀
alterar฀(mutar).฀O฀DNA฀do฀M13฀
recém-sintetizado,฀portanto,฀contém฀
DNA ligado a filtro de nitrocelulose uma฀base฀especificamente฀mutada฀
com NaOH, hibridizado com sonda marcada que,฀quando฀reintroduzida฀em฀E.฀coli฀
5� para o oligômero com pareamento errado susceptível,฀será฀fielmente฀replicada.฀
A฀E.฀coli฀transformada฀é฀crescida฀
em฀placas฀de฀agar฀com฀réplicas฀das฀
3�
colônias฀resultantes฀sendo฀feitas฀em฀
filtro฀de฀nitrocelulose.฀DNA฀associado฀
com฀cada฀colônia฀é฀desnaturado฀
e฀fixado฀ao฀filtro฀com฀NaOH,฀e฀o฀
Transformar ������ DNA฀ligado฀ao฀filtro฀é฀hibridizado฀
Tocar a placa de agar
suscetível e plaquear com฀uma฀sonda฀oligômero฀de฀DNA฀
com filtro de
o bacteriófago resultante marcada฀com฀32P,฀com฀pareamento฀
nitrocelulose
contendo M13 tipo errado.฀Os฀mutantes฀putativos฀são,฀
selvagem mais Mutante então,฀identificados฀por฀exposição฀do฀
DNA mutado putativo filtro฀a฀filme฀de฀raio฀X.
sobre o tapete
de ������
crescida em agar
Auto-radiografia

|
fita฀de฀M13฀é฀transformado฀em฀uma฀E.฀coli฀tipo-selva-
gem,฀a฀fita฀contendo฀uracil฀é฀destruída฀e฀a฀fita฀mutada฀
7.14฀ ฀APLICAÇÕES฀DA฀
(–)serve฀de฀molde฀para฀a฀progênese฀dos฀bacteriófagos,฀a฀ TECNOLOGIA฀DO฀DNA฀
maioria฀dos฀quais฀carregando฀a฀mutação฀de฀interesse.
O฀PCR฀também฀pode฀ser฀empregado฀para฀mutagêne-
RECOMBINANTE
se฀sítio-dirigida.฀Estratégias฀foram฀desenvolvidas฀para฀
incorporar฀ uma฀ base฀ com฀ pareamento฀ errado฀ em฀ um฀
Métodos฀de฀DNA฀recombinante฀são฀aplicáveis฀a฀nume-
dos฀ oligonucleotídeos฀ que฀ servem฀ de฀ primer฀ para฀ o฀
rosas฀disciplinas฀biológicas฀incluindo฀agricultura,฀estu-
PCR.฀ Alguns฀ desses฀ procedimentos฀ empregam฀ bacte-
dos฀de฀evolução,฀biologia฀forense฀e฀clínica฀médica.฀En-
riófago฀M13฀e฀seguem฀os฀princípios฀descritos฀na฀Figura฀
genharia฀ genética฀ pode฀ introduzir฀ proteínas฀ novas฀ ou฀
7.26.฀Uma฀variação฀desses฀métodos฀de฀PCR,฀mutagêne-
alteradas฀ em฀ grãos฀ (p.฀ ex.,฀ milho),฀ de฀ modo฀ que฀ eles฀
se฀por฀PCR฀inverso,฀foi฀aplicada฀a฀pequenos฀plasmíde-
contenham฀aminoácidos฀essenciais฀para฀o฀homem฀mas฀
os฀recombinantes฀(4-5฀kb)฀(Figura฀7.25).
freqüentemente฀ ausentes฀ de฀ proteínas฀ vegetais.฀ Toxi-
O฀método฀é฀muito฀rápido,฀com฀50-100%฀das฀colônias฀
nas฀letais฀a฀insetos฀específicos,฀mas฀inócuas฀ao฀homem,฀
geradas฀ contendo฀ a฀ seqüência฀ mutante.฀ Os฀ dois฀ pri-
podem฀ ser฀ introduzidas฀ em฀ grãos฀ para฀ protegerem฀ as฀
mers฀são฀sintetizados฀de฀modo฀que฀pareiem฀final-com-
plantas,฀evitando฀assim฀o฀uso฀de฀pesticidas฀que฀agridem฀
final฀com฀um฀primer฀contendo฀a฀base฀errada.
o฀meio฀ambiente.฀O฀DNA฀isolado฀de฀células฀do฀líquido฀
amniótico฀ de฀ uma฀ mulher฀ grávida฀ pode฀ ser฀ analisado฀
quanto฀ a฀ defeitos฀ genéticos฀ no฀ feto.฀ Quantidades฀ mi-

BioQ.07 272 22.01.07 16:49:01

 CAPÍTULO฀8฀฀REGULAÇÃO฀DA฀EXPRESSÃO฀GÊNICA฀฀฀|฀฀฀287
PARTE฀2฀TRANSMISSÃO฀DA฀INFORMAÇÃO
8
REGULAÇÃO฀DA฀
EXPRESSÃO฀GÊNICA
Daniel฀L.฀Weeks฀e฀John฀E.฀Donelson
8.1฀ VISÃO฀GERAL,฀288
8.2฀ UNIDADE฀DE฀TRANSCRIÇÃO฀EM฀BACTÉRIAS:฀O฀
OPERON,฀288
8.3฀ OPERON฀LACTOSE฀DE฀E.฀COLI,฀288
฀ Repressor฀do฀operon฀lactose฀é฀uma฀proteína฀difu-฀
฀ sível,฀290
฀ Seqüência฀operador฀do฀operon฀lactose฀é฀contígua฀฀
฀ a฀um฀promotor฀e฀três฀genes฀estruturais,฀291
฀ RNA฀polimerase฀e฀uma฀proteína฀reguladora฀reco-฀
฀ nhecem฀seqüência฀do฀promotor฀do฀operon฀lac-฀
฀ tose,฀292
฀ Proteína฀ativadora฀de฀catabólito฀liga฀promotor฀
฀ ฀ lactose,฀292
8.4฀ OPERON฀TRIPTOFANO฀DE฀E.฀COLI฀,฀293
฀ Operon฀triptofano฀é฀controlado฀por฀uma฀proteína฀฀
฀ repressora,฀293
฀ Região฀atenuadora฀do฀operon฀triptofano,฀295
฀ Atenuação฀da฀transcrição฀controla฀outros฀ope-฀
฀ rons฀de฀biossíntese฀de฀aminoácidos,฀296
8.5฀ OUTROS฀OPERONS฀BACTERIANOS,฀297
฀ Síntese฀de฀proteínas฀ribossômicas฀é฀regulada฀de฀฀
฀ modo฀coordenado,฀297
฀ Resposta฀estringente฀controla฀síntese฀de฀rRNAs฀e฀฀
฀ tRNAs,฀297
8.6฀ TRANSPOSONS฀BACTERIANOS,฀฀฀299
฀ Transposons฀são฀segmentos฀móveis฀do฀DNA,฀299
฀ Transposons฀TN3฀contêm฀três฀genes฀estruturais,฀
฀ 299
BioQ.08 287
8.7฀ EXPRESSÃO฀GÊNICA฀EM฀EUCARIOTOS,฀300
฀ DNA฀eucariótico฀é฀ligado฀a฀histonas฀para฀formar฀฀
฀ cromatina,฀301
฀ Metilação฀do฀DNA฀correlaciona-se฀com฀inativação฀฀
฀ de฀genes,฀302
8.8฀ COMPLEXO฀ DE฀ PRÉ-INICIAÇÃO฀ EM฀ EUCARIO-
TOS:฀ FATORES฀ DE฀ TRANSCRIÇÃO,฀ RNA฀ POLI-
MERASE฀II฀E฀DNA,฀303
฀ Promotores฀eucarióticos฀e฀outras฀seqüências฀que฀฀
฀ influenciam฀transcrição,฀305
฀ Projeto฀modular฀de฀fatores฀de฀transcrição฀euca-
฀ ฀ rióticos,฀305
฀ Motivos฀comuns฀em฀proteínas฀que฀ligam฀DNA฀e฀
฀ ฀ regulam฀transcrição,฀306
8.9฀ REGULAÇÃO฀DA฀EXPRESSÃO฀GÊNICA฀EUCA-
฀ ฀ RIÓTICA,฀308
฀ Regulando฀os฀reguladores,฀309
฀ Ativação฀da฀transcrição฀do฀gene฀do฀receptor฀de฀฀
฀ LDL฀ilustra฀muitas฀características฀encontra-฀
฀ das฀na฀regulação฀gênica฀eucariótica,฀309
BIBLIOGRAFIA,฀312
QUESTÕES฀E฀RESPOSTAS,฀312
CORRELAÇÕES฀CLÍNICAS
฀ 8.1฀Resistência฀Transmissível฀a฀Múltiplas฀Drogas,฀
฀ 300
฀ 8.2฀Síndrome฀de฀Rubstein-Taybi,฀302
฀ 8.3฀Tamoxifeno฀e฀Receptor฀de฀Estrógeno฀como฀฀
฀ Alvo,฀309
฀ 8.4฀Fatores฀de฀Transcrição฀e฀Doença฀Cardiovas-
฀ ฀ cular,฀310
22.01.07 16:52:32

influencie฀a฀formação฀de฀alças฀em฀grampo฀alternativas,฀
uma฀ das฀ quais฀ lembrando฀ um฀ grampo฀ de฀ terminação฀
seguido฀ de฀ vários฀ resíduos฀ U.฀ Ao฀ contrário฀ do฀ operon฀
trp,฀transcrição฀do฀operon฀his฀é฀regulada฀primariamen-
te฀por฀atenuação,฀uma฀vez฀que฀não฀possui฀um฀operador฀
reconhecido฀por฀uma฀proteína฀repressora.฀Em฀vez฀dis-
so,฀o฀ribossomo฀age฀como฀uma฀proteína฀reguladora฀po-
sitiva,฀ semelhante฀ ao฀ complexo฀ cAMP-CAP฀ no฀ operon฀
lac.฀Se฀o฀ribossomo฀estiver฀ligado฀(i.é.,฀parado)฀no฀sítio฀
atenuador,฀ transcrição฀ dos฀ genes฀ estruturais฀ a฀ seguir฀
estará฀ aumentada.฀ Se฀ o฀ ribossomo฀ não฀ estiver฀ ligado,฀
transcrição฀desses฀genes฀estará฀muito฀reduzida.
Transcrição฀de฀alguns฀operons,฀mostrados฀na฀Figu-
ra฀8.11,฀pode฀ser฀atenuada฀por฀mais฀de฀um฀aminoácido.฀
Por฀exemplo,฀o฀operon฀thr฀é฀atenuado฀por฀treonina฀ou฀
isoleucina,฀enquanto฀o฀operon฀ilv฀é฀atenuado฀por฀leuci-
na,฀ valina฀ ou฀ isoleucina.฀ Esse฀ efeito฀ pode฀ ser฀ explica-
do฀em฀todos฀os฀casos฀por฀pausa฀do฀ribossomo฀no฀códon฀
correspondente,฀ o฀ que฀ interfere฀ com฀ formação฀ de฀ um฀
grampo฀ de฀ terminação.฀ É฀ possível฀ que฀ em฀ seqüências฀
líderes฀mais฀longas,฀a฀pausa฀em฀mais฀de฀um฀códon฀seja฀
necessária฀para฀atingir฀máxima฀transcrição฀pela฀região฀
de฀atenuação.
|
8.5฀ ฀OUTROS฀OPERONS฀
BACTERIANOS
Síntese฀de฀Proteínas฀Ribossômicas฀É฀
Regulada฀de฀Modo฀Coordenado
Muitos฀operons฀bacterianos฀possuem฀os฀mesmos฀meca-
nismos฀ regulatórios฀ gerais฀ dos฀ operons฀ lac,฀ trp฀ e฀ his.฀
Entretanto,฀cada฀operon฀tem฀suas฀próprias฀característi-
cas฀distintas.฀Um฀exemplo฀é฀dado฀pelos฀genes฀estrutu-
rais฀das฀70฀ou฀mais฀proteínas฀que฀compõem฀os฀ribosso-
mos฀(Figura฀8.12).฀Cada฀ribossomo฀contém฀uma฀cópia฀
de฀cada฀proteína฀ ribossômica฀(exceto฀proteínas฀L7-
L12,฀que฀provavelmente฀estão฀presentes฀em฀quatro฀có-
pias).฀ Portanto,฀ todas฀ as฀ 70฀ proteínas฀ são฀ necessárias฀
em฀quantidades฀equimolares,฀e฀faz฀sentido฀que฀sua฀sín-
tese฀ seja฀ regulada฀ de฀ modo฀ coordenado.฀ Seis฀ operons฀
diferentes,฀contendo฀cerca฀de฀metade฀dos฀genes฀de฀pro-
teínas฀ribossômicas,฀ocorrem฀em฀dois฀grupos฀principais฀
de฀genes.฀Um฀grupo฀contém฀quatro฀operons฀adjacentes฀
(Spc,฀ S10,฀ str฀ e฀ a)฀ e฀ o฀ outro฀ grupo฀ tem฀ dois฀ operons฀
(L11฀e฀rif)฀localizados฀em฀outro฀ponto฀do฀cromossomo฀
de฀E.฀coli.฀Não฀há฀nenhum฀padrão฀óbvio฀de฀distribuição฀
dos฀genes฀entre฀esses฀operons.฀Alguns฀operons฀codifi-
cam฀proteínas฀de฀uma฀subunidade฀ribossômica;฀outros฀
codificam฀ proteínas฀ de฀ ambas฀ as฀ subunidades.฀ Esses฀
operons฀também฀contêm฀genes฀de฀outras฀proteínas฀(re-
lacionadas).
Por฀exemplo,฀o฀operon฀str฀contém฀genes฀de฀fatores฀
de฀elongação฀de฀tradução฀solúveis,฀EF-Tu฀e฀EF-G,฀e฀ge-
nes฀ de฀ algumas฀ proteínas฀ da฀ subunidade฀ ribossômica฀
30S.฀O฀operon฀a฀contém฀genes฀de฀proteínas฀de฀ambas฀
BioQ.08 297
CAPÍTULO฀8฀฀REGULAÇÃO฀DA฀EXPRESSÃO฀GÊNICA฀฀฀|฀฀฀297
Operon Proteína Proteínas especificadas pelo operon
regulatória
��� S8 L14-L24-L5-S14-S8-L6-L18-S5-L15-L30
��� L4 S10-L3-L2-L4-L23-S19-L22-S3-S17-L16-L29
S12-S7-EF•G-EF•Tu
��� S7
� S4 S13-S11-S4-�-L17
��� L1 L11-L1
��� L10 L10-L7-�−��
FIGURA฀8.12
Operons฀contendo฀genes฀de฀proteínas฀ribossômicas฀de฀E.฀coli.฀
Genes฀dos฀componentes฀protéicos฀das฀subunidades฀ribossômicas฀
pequena฀(S)฀e฀grande฀(L)฀de฀E.฀coli฀ficam฀agrupados฀em฀vários฀
operons.฀Alguns฀desses฀operons฀também฀contêm฀genes฀das฀
subunidades฀α,฀β฀e฀β‘฀da฀RNA฀polimerase฀e฀fatores฀de฀síntese฀
protéica฀EF-G฀e฀EF-Tu.฀Pelo฀menos฀um฀dos฀produtos฀protéicos฀de฀
cada฀operon฀geralmente฀regula฀expressão฀desse฀operon฀
(ver฀texto).
as฀subunidades฀ribossômicas฀e฀um฀gene฀da฀subunidade฀
α฀ da฀ RNA฀ polimerase.฀ O฀ operon฀ rif฀ tem฀ os฀ genes฀ das฀
subunidades฀β฀e฀β’฀da฀RNA฀polimerase฀e฀de฀proteínas฀
ribossômicas.
Uma฀característica฀comum฀aos฀seis฀operons฀de฀pro-
teínas฀ribossômicas฀é฀que฀sua฀expressão฀é฀regulada฀por฀
um฀ dos฀ produtos฀ de฀ seus฀ próprios฀ genes฀ estruturais;฀
isto฀ é,฀ são฀ auto-regulados.฀ Em฀ alguns฀ casos,฀ regu-
lação฀ocorre฀em฀nível฀de฀tradução,฀não฀de฀transcrição฀
como฀ discutido฀ para฀ operons฀ lac฀ e฀ trp.฀ Depois฀ que฀ o฀
mRNA฀policistrônico฀é฀feito,฀a฀proteína฀ribossômica฀“re-
gulatória”฀liga-se฀a฀esse฀mRNA฀e฀determina฀que฀região,฀
se฀alguma,฀será฀traduzida.฀Em฀geral,฀a฀proteína฀ribos-
sômica฀que฀regula฀expressão฀de฀seu฀próprio฀operon฀as-
socia-se฀com฀RNA฀ribossômico฀(rRNAs)฀no฀ribossomo.฀
Essa฀proteína฀tem฀uma฀alta฀afinidade฀por฀rRNA฀e฀uma฀
afinidade฀menor฀por฀uma฀ou฀mais฀regiões฀de฀seu฀próprio฀
mRNA.฀ Portanto,฀ competição฀ ocorre฀ entre฀ rRNA฀ e฀ o฀
operon฀do฀mRNA฀pela฀ligação฀com฀a฀proteína.฀À฀medida฀
que฀a฀proteína฀se฀acumula,฀alcançando฀um฀nível฀mais฀
alto฀que฀o฀de฀rRNA฀livre,฀liga-se฀a฀seu฀próprio฀mRNA฀e฀
impede฀ síntese฀ protéica฀ em฀ uma฀ ou฀ mais฀ das฀ seqüên-
cias฀codificadoras฀desse฀mRNA฀(Figura฀8.13).฀Quando฀
mais฀ribossomos฀são฀formados,฀o฀excesso฀dessa฀proteí-
na฀ribossômica฀é฀usado฀e฀tradução฀de฀seu฀mRNA฀pode฀
recomeçar.
Resposta฀Estringente฀Controla฀
Síntese฀de฀rRNAs฀e฀tRNAs
Bactérias฀respondem฀de฀várias฀maneiras฀a฀extremo฀es-
tresse฀geral.฀Uma฀dessas฀situações฀é฀quando฀há฀amino-
ácidos฀insuficientes฀para฀manter฀síntese฀protéica.฀Nessas฀
condições,฀a฀célula฀invoca฀a฀resposta฀estringente,฀que฀
reduz฀síntese฀de฀rRNAs฀e฀tRNAs฀cerca฀de฀20฀vezes.฀Sín-
tese฀de฀mRNAs฀também฀diminui฀cerca฀de฀três฀vezes.
22.01.07 16:52:44
 300฀฀฀|฀฀฀PARTE฀2฀฀TRANSMISSÃO฀DA฀INFORMAÇÃO
CORRELAÇÃO฀CLÍNICA฀8.1
Resistência฀Transmissível฀a฀
Múltiplas฀Drogas
Uma฀tendência฀alarmante฀é฀que฀bactérias฀pato-
gênicas฀estão฀ficando฀cada฀vez฀mais฀resistentes฀a฀
um฀grande฀número฀de฀antibióticos.฀Muitos฀casos฀
foram฀documentados,฀nos฀quais฀uma฀cepa฀bacte-
riana฀ em฀ um฀ paciente฀ que฀ vinha฀ sendo฀ tratado฀
com฀um฀antibiótico,฀subitamente฀torna-se฀resis-
tente฀ a฀ esse฀ antibiótico฀ e,฀ simultaneamente,฀ a฀
vários฀outros฀antibióticos,฀embora฀essa฀cepa฀bac-
teriana฀ nunca฀ tenha฀ sido฀ exposta฀ antes฀ a฀ esses฀
outros฀antibióticos.฀Isso฀ocorre฀quando฀a฀bactéria฀
subitamente฀ adquire,฀ de฀ outra฀ cepa฀ bacteriana,฀
um฀ plasmídeo฀ que฀ contém฀ vários฀ transposons฀
diferentes,฀cada฀um฀contendo฀um฀ou฀mais฀genes฀
de฀resistência฀a฀antibióticos.฀Exemplos฀incluem:฀
os฀genes฀que฀codificam฀β-lactamase,฀que฀inativa฀
penicilina฀ e฀ cefalosporinas;฀ a฀ cloranfenicol฀ ace-
tiltransferase,฀que฀inativa฀cloranfenicol;฀e฀fosfo-
transferases,฀ que฀ modificam฀ aminoglicosídeos,฀
como฀neomicina฀e฀gentamicina.
Fonte:฀Neu,฀H.฀C.฀The฀crisis฀in฀antibiotic฀resistance.฀
Science฀257:1064,฀1992
transcritos฀de฀modo฀divergente฀a฀partir฀de฀uma฀região฀
de฀controle฀de฀163฀pb,฀localizada฀entre฀eles,฀que฀liga฀o฀
repressor.฀O฀repressor฀também฀participa฀da฀inserção฀do฀
novo฀transposon,฀mas฀não฀afeta฀transcrição฀do฀gene฀de฀
resistência฀à฀ampicilina.
Mutações฀em฀tnpA฀que฀inativam฀a฀transposase฀di-
minuem฀ a฀ freqüência฀ de฀ transposição฀ de฀ Tn3.฀ Muta-
ções฀ em฀ tnpR฀ que฀ inativam฀ o฀ repressor฀ aumentam฀ a฀
freqüência฀ de฀ transposição.฀ Essas฀ mutações฀ desrepri-
mem฀tnpA,฀resultando฀em฀mais฀moléculas฀de฀transposa-
se;฀isso฀aumenta฀a฀formação฀de฀mais฀cópias฀duplicadas฀
do฀transposon.฀Também฀desreprime฀tnpR,฀mas฀como฀o฀
repressor฀é฀inativo,฀isso฀não฀tem฀efeito.
Transposons฀localizados฀em฀plasmídeos฀bacterianos฀
são฀de฀importância฀crescente฀em฀uso฀clínico฀de฀antibi-
óticos.฀Plasmídeos฀bacterianos฀que฀não฀foram฀alterados฀
para฀ uso฀ experimental฀ geralmente฀ contêm฀ genes฀ que฀
facilitam฀sua฀transferência฀de฀uma฀bactéria฀para฀outra.฀
Quando฀esses฀plasmídeos฀se฀transferem฀entre฀diferen-
tes฀ cepas฀ bacterianas฀ infecciosas,฀ seus฀ transposons฀
contendo฀ genes฀ de฀ resistência฀ a฀ antibióticos฀ são฀
transportados฀ para฀ as฀ novas฀ cepas฀ bacterianas.฀ Uma฀
vez฀dentro฀de฀uma฀nova฀bactéria,฀o฀transposon฀pode฀se฀
duplicar฀ no฀ cromossomo฀ e฀ ficar฀ permanentemente฀ es-
tabelecido฀naquela฀linhagem฀celular.฀O฀resultado฀é฀que฀
mais฀e฀mais฀cepas฀de฀bactérias฀patogênicas฀tornaram-
se฀resistentes฀a฀um฀número฀crescente฀de฀antibióticos.
BioQ.08 300
|
8.7฀ ฀EXPRESSÃO฀GÊNICA฀EM฀
EUCARIOTOS
Transcrição฀ de฀ genes฀ em฀ organismos฀ eucarióticos฀ é฀
também฀ regulada฀ para฀ dar฀ a฀ resposta฀ adequada฀ a฀ ne-
cessidades฀biológicas.฀Além฀de฀modular฀a฀expressão฀de฀
genes฀em฀resposta฀a฀condições฀nutricionais฀ou฀ambien-
tais,฀ organismos฀ multicelulares฀ regulam฀ a฀ expressão฀
de฀genes฀especializados฀que฀direcionam฀diferenciação฀
celular฀e฀caracterizam฀tipos฀celulares฀específicos.฀Al-
guns฀genes฀(chamados฀genes฀zeladores฀ou฀housekee-
ping)฀são฀expressos฀na฀maioria฀das฀células,฀outros฀são฀
ativados฀ sob฀ demanda฀ e฀ outros,฀ ainda,฀ ficam฀ perma-
nentemente฀ inativos฀ em฀ todos,฀ exceto฀ alguns฀ poucos฀
tipos฀de฀células.฀Em฀células฀eucarióticas,฀a฀membrana฀
nuclear฀serve฀de฀barreira฀que฀permite฀seletivamente฀o฀
acesso฀de฀algumas฀proteínas฀ao฀DNA,฀enquanto฀man-
tém฀outras฀no฀citosol.฀Em฀bactérias,฀uma฀RNA฀polime-
rase฀é฀responsável฀pela฀transcrição฀de฀todos฀os฀RNAs฀
(tRNA,฀rRNA฀e฀mRNA).฀Em฀organismos฀eucarióticos,฀
três฀ RNA฀ polimerases฀ diferentes฀ são฀ usadas฀ (ver฀ p.฀
181).฀RNA฀polimerase฀I฀transcreve฀os฀genes฀de฀rRNA,฀
RNA฀polimerase฀II฀transcreve฀os฀genes฀que฀codificam฀
proteínas,฀cujos฀transcritos฀se฀tornam฀mRNAs,฀e฀RNA฀
polimerase฀III฀transcreve฀os฀genes฀de฀tRNAs฀e฀a฀maio-
ria฀dos฀outros฀RNAs฀pequenos.฀Embora฀alguns฀princí-
pios฀de฀ativação฀gênica฀e฀controle฀eucarióticos฀se฀apli-
quem฀a฀todas฀as฀três฀RNA฀polimerases,฀nesta฀seção฀o฀
foco฀será฀transcrição฀por฀RNA฀polimerase฀II.฀RNA฀po-
limerase฀II฀é฀composta฀por฀pelo฀menos฀10฀subunidades฀
diferentes,฀ com฀ tamanhos฀ entre฀ 10฀ e฀ 220฀ kDa.฀ Algu-
mas฀ das฀ subunidades฀ são฀ também฀ parte฀ dos฀ comple-
xos฀das฀RNA฀polimerases฀I฀e฀III,฀enquanto฀outras฀são฀
exclusivas฀da฀RNA฀polimerase฀II.฀A฀subunidade฀maior฀
da฀ RNA฀ polimerase฀ II฀ tem,฀ dependendo฀ da฀ espécie,฀
até฀52฀repetições฀da฀seqüência฀de฀aminoácidos฀PTSP-
SYS฀em฀sua฀região฀C-terminal฀(CTD,฀C-terminal฀do-
main).฀Uma฀característica฀própria฀dessas฀repetições฀é฀
que฀treonina฀(T),฀serina฀(S)฀e฀tirosina฀(Y)฀podem฀ser฀
fosforiladas.
Para฀entender฀melhor฀a฀regulação฀da฀transcrição฀em฀
eucariotos,฀é฀útil฀relembrar฀a฀organização฀do฀DNA฀em฀
cromatina฀e฀o฀papel฀de฀modificação฀no฀DNA,฀especial-
mente฀metilação฀de฀citosina,฀sobre฀ativação฀gênica.
Além฀disso,฀vamos฀considerar฀como฀RNA฀polimerase฀
II฀ é฀ posicionada฀ no฀ ponto฀ correto฀ do฀ promotor฀ de฀ um฀
gene฀para฀transcrever฀esse฀gene฀pela฀formação฀de฀um฀
complexo฀de฀pré-iniciação,฀que฀envolve฀organização฀de฀
fatores฀de฀transcrição฀gerais฀(TFs)฀com฀RNA฀poli-
merase฀II.฀A฀seguir,฀vamos฀ver฀como฀atividade฀de฀genes฀
específicos฀pode฀ser฀regulada฀pelo฀uso฀de฀enhancers,฀
sítios฀de฀ligação฀de฀fatores฀de฀transcrição฀e฀sítios฀
de฀ organização฀ de฀ RNA฀ polimerase.฀ Finalmente,฀
vamos฀discutir฀a฀ativação฀da฀transcrição฀por฀fatores฀de฀
transcrição฀ específicos,฀ algumas฀ de฀ suas฀ característi-
cas฀gerais฀e฀como฀são฀regulados.
22.01.07 16:52:47
 308฀฀฀|฀฀฀PARTE฀2฀฀TRANSMISSÃO฀DA฀INFORMAÇÃO

|
Proteínas฀bZIP฀têm฀um฀domínio฀de฀ligação฀ao฀DNA฀
composto฀por฀uma฀região฀básica,฀definida฀pela฀presença฀
8.9฀ ฀REGULAÇÃO฀DA฀
de฀arginina฀e฀lisina,฀localizada฀a฀sete฀aminoácidos฀antes฀ EXPRESSÃO฀GÊNICA฀
da฀primeira฀leucina฀e฀α-hélice.฀Os฀aminoácidos฀básicos฀
estabilizam฀ a฀ associação฀ DNA-proteína฀ por฀ interações฀
EUCARIÓTICA
eletrostáticas฀com฀o฀esqueleto฀carregado฀negativamen-
te฀do฀DNA,฀além฀de฀formar฀pontes฀de฀hidrogênio฀na฀fen-
Como฀ indicado฀ acima,฀ uma฀ região฀ relativamente฀ pe-
da฀maior.฀Sítios฀de฀ligação฀de฀homodímeros฀têm฀sime-
quena฀de฀uma฀proteína฀regulatória฀pode฀ser฀dedicada฀à฀
tria฀díade,฀enquanto฀essa฀simetria฀não฀é฀encontrada฀em฀
ligação฀seqüência-específica฀ao฀DNA,฀enquanto฀outros฀
sítios฀de฀ligação฀de฀heterodímeros.
domínios฀estão฀envolvidos฀em฀interações฀proteína-pro-
A฀classe฀hélice-alça-hélice฀de฀fatores฀de฀transcrição฀
teína฀ou฀ligante.฀Vários฀domínios฀de฀ativação฀caracte-
inclui฀ myoD,฀ myc฀ e฀ max.฀ Dois฀ segmentos฀ de฀ α-hélice฀
rísticos฀foram฀identificados,฀incluindo฀domínios฀ácidos฀
anfipática฀separados฀por฀uma฀alça฀interveniente฀carac-
(alta฀concentração฀de฀aminoácidos฀com฀cadeias฀laterais฀
terizam฀proteínas฀hélice-alça-hélice.
ácidas),฀domínios฀ricos฀em฀glutamina,฀e฀domínios฀ricos฀
As฀ hélices฀ não฀ são฀ responsáveis฀ por฀ ligação฀ com฀
em฀ prolina.฀ Experimentalmente,฀ superprodução฀ de฀
DNA,฀como฀nas฀proteínas฀dedos฀de฀zinco,฀mas฀por฀di-
qualquer฀ desses฀ domínios฀ por฀ técnicas฀ de฀ recombina-
merização฀com฀outra฀proteína.฀Como฀foi฀descrito฀para฀
ção,฀mesmo฀sem฀seus฀domínios฀de฀ligação฀ao฀DNA฀cor-
as฀proteínas฀bZIP,฀os฀dímeros฀formados฀podem฀ser฀homo฀
respondentes,฀pode฀levar฀à฀ativação฀errônea฀de฀trans-
ou฀heterodímeros.฀O฀domínio฀de฀ligação฀ao฀DNA฀é฀uma฀
crição฀de฀uma฀variedade฀de฀genes.฀Eles฀parecem฀ativar฀
extensão฀de฀uma฀das฀α-hélices฀que฀formam฀o฀feixe฀de฀
transcrição฀por฀meio฀do฀aumento฀da฀taxa฀de฀montagem฀
quatro-hélices฀gerado฀por฀dimerização฀(Figura฀8.27).
do฀ complexo฀ de฀ pré-iniciação.฀ Alguns฀ interagem฀ dire-
tamente฀com฀TFIID,฀aumentando฀ligação฀ao฀TATA฀box,฀
enquanto฀outros฀interagem฀com฀TFIIB฀ou฀TAFs฀que฀são฀
parte฀do฀complexo฀TFIID.฀Quando฀múltiplos฀fatores฀de฀
transcrição฀se฀ligam฀a฀um฀promotor,฀eles฀podem฀ter฀um฀
efeito฀ combinatório฀ sobre฀ a฀ ligação฀ e฀ a฀ montagem฀ do฀
complexo฀ de฀ pré-iniciação.฀ Domínios฀ de฀ ativação฀ de฀
muitos฀fatores฀de฀transcrição฀têm฀como฀alvos฀as฀mes-
mas฀proteínas฀no฀complexo฀de฀pré-iniciação.

��� FIGURA฀8.27
Formação฀do฀fator฀de฀transcrição฀dimérico฀é฀
mediada฀por฀interações฀hélice-alça-hélice.฀
O฀motivo฀hélice-alça-hélice฀aproxima฀dois฀
monômeros฀para฀formar฀um฀dímero฀que฀se฀liga฀
ao฀DNA.฀(a)฀Cada฀monômero฀tem฀duas฀hélices฀
unidas฀por฀uma฀alça.฀Uma฀hélice฀é฀usada฀para฀
interação฀proteína-proteína,฀enquanto฀a฀outra฀
é฀usada฀para฀ligar฀a฀fenda฀maior฀do฀DNA.฀Assim,฀
o฀dímero฀consiste฀de฀um฀feixe฀de฀quatro฀hélices฀
Se฀o฀dímero฀for฀formado฀por฀dois฀monômeros฀
idênticos,฀então฀se฀espera฀que฀os฀sítios฀de฀
ligação฀no฀DNA฀sejam฀muito฀semelhantes฀ou฀
idênticos;฀entretanto,฀se฀os฀monômeros฀forem฀
proteínas฀diferentes฀(formando฀heterodímeros),฀
então฀os฀sítios฀de฀ligação฀no฀DNA฀podem฀
ser฀não-relacionados.฀(b)฀Quando฀fatores฀de฀
transcrição฀ligam-se฀como฀dímeros,฀a฀presença฀
de฀um฀monômero฀truncado฀pode฀impedir฀
ligação฀ao฀DNA,฀mesmo฀em฀presença฀de฀
��� Homodímero HLS ativo Heterodímero HLS inativo monômeros฀completos.฀Por฀exemplo,฀se฀a฀hélice฀
de฀dimerização฀da฀proteína฀for฀feita฀sem฀o฀
domínio฀de฀ligação฀ao฀DNA,฀a฀dimerização฀com฀
um฀monômero฀completo฀produz฀um฀produto฀
incapaz฀de฀se฀ligar฀eficientemente฀ao฀DNA.
Modificado฀de฀Alberts,฀B.,฀Bray,฀D.,฀Lewis,฀J.,฀
Raff,฀M.,฀Roberts,฀K.฀e฀Watson,฀J.฀Molecular฀
Biology฀of฀the฀Cell.฀New฀York:฀Garland,฀1994.

DNA

BioQ.08 308 22.01.07 16:53:21

 CAPÍTULO฀9฀฀PROTEÍNAS฀II:฀RELAÇÕES฀ESTRUTURA-FUNÇÃO฀฀฀|฀฀฀315

PARTE฀3฀FUNÇÕES฀DE฀PROTEÍNAS

9
Fab 1 Fab 2

Sítio de ligação
Sítio de ligação
do anticorpo (Ag)
do anticorpo (Ag)

SS

Tuftsina C1q

CHO
Prot–A Prot–A

Fc

PROTEÍNAS฀II:฀RELAÇÕES฀
ESTRUTURA-FUNÇÃO฀EM฀
FAMÍLIAS฀DE฀PROTEÍNAS
Richard฀M.฀Schultz

9.1฀ VISÃO฀GERAL,฀316 ฀ Estruturas฀terciárias฀da฀família฀serino฀proteases฀฀

฀ são฀semelhantes,฀332
9.2฀ MOLÉCULAS฀DE฀ANTICORPOS:฀SUPERFAMÍLIA฀
DE฀PROTEÍNAS฀IMUNOGLOBULINAS,฀316 9.4฀ HEMOGLOBINA฀E฀MIOGLOBINA,฀334
฀ Moléculas฀de฀anticorpos฀contêm฀quatro฀cadeias฀฀ ฀ Hemoglobina฀humana฀ocorre฀em฀várias฀formas,฀฀
฀ polipeptídicas,฀317 ฀ 334
฀ ฀ Regiões฀de฀seqüências฀constantes฀e฀variáveis฀฀ ฀ Mioglobina:฀uma฀cadeia฀polipeptídica฀única฀com฀
฀ ฀ da฀estrutura฀primária,฀318 um฀sítio฀de฀ligação฀para฀O2,฀334
฀ Imunoglobulinas฀de฀uma฀classe฀contêm฀regiões฀฀ ฀ Grupo฀prostético฀heme฀é฀sítio฀de฀ligação฀de฀O2,฀฀
฀ de฀seqüências฀homólogas฀comuns,฀318 ฀ 334
฀ ฀ Seqüências฀repetitivas฀geram฀dobras฀homólo-฀ ฀ Cristalografia฀de฀raios-X฀definiu฀a฀estrutura฀de฀฀
฀ ฀ gas฀tridimensionais฀em฀um฀anticorpo,฀318 ฀ hemoglobina฀e฀mioglobina,฀336
฀ Há฀dois฀sítios฀de฀ligação฀de฀antígeno฀por฀molécula฀฀ ฀ ฀ Estruturas฀primária,฀secundária฀e฀terciária฀de฀฀
฀ de฀anticorpo,฀322 ฀ ฀ mioglobina฀e฀cadeias฀de฀hemoglobina,฀336
฀ Genética฀das฀imunoglobulinas,฀323 ฀ Um฀equilíbrio฀simples฀define฀ligação฀de฀O2฀à฀mio-฀
฀ Dobra฀de฀imunoglobulina฀é฀encontrada฀em฀uma฀฀ ฀ globina,฀337
฀ grande฀família฀de฀proteínas฀com฀diferentes฀฀ ฀ Ligação฀de฀O2฀à฀hemoglobina฀envolve฀cooperativi-฀
฀ papéis฀funcionais,฀323 ฀ dade฀entre฀subunidades,฀339
฀ ฀ Mecanismo฀molecular฀de฀cooperatividade฀na฀฀
9.3฀ PROTEÍNAS฀COM฀UM฀MECANISMO฀CATALÍTI- ฀ ฀ ligação฀de฀O2,฀340
CO฀COMUM:฀SERINO฀PROTEASES,฀324 ฀ Hemoglobina฀facilita฀transporte฀de฀CO2฀e฀NO,฀342
฀ Enzimas฀proteolíticas฀são฀classificadas฀por฀seu฀฀ ฀ Diminuição฀em฀pKa฀de฀grupos฀ácidos฀com฀mudan-฀
฀ mecanismo฀catalítico,฀324 ฀ ça฀de฀conformação฀T฀para฀R฀leva฀à฀dissociação฀฀
฀ ฀ Serino฀proteases฀apresentam฀notável฀especifi-฀ ฀ de฀prótons,฀343
฀ ฀ cidade฀em฀hidrólise฀de฀ligações฀peptídicas,฀฀ ฀ ฀ Transporte฀de฀CO2฀e฀O2฀é฀ligado฀por฀prótons฀
฀ ฀ 325 ฀ ฀ de฀efeito฀Bohr,฀344
฀ Serino฀proteases฀são฀sintetizadas฀como฀zimogê-฀ ฀ ฀ 2,3-Bisfosfoglicerato฀(BPG)฀em฀eritrócitos฀฀
฀ nios,฀329 ฀ ฀ modula฀liberação฀de฀oxigênio฀de฀hemoglo-฀
฀ Inibidores฀protéicos฀específicos฀para฀serino฀pro-฀ ฀ ฀ bina,฀345
฀ teases,฀330 ฀ Hemoglobina฀entrega฀óxido฀nítrico฀(NO)฀para฀a฀฀
฀ Serino฀proteases฀têm฀relações฀estrutura-função฀฀ ฀ parede฀capilar฀de฀tecidos฀onde฀promove฀฀฀
฀ semelhantes,฀330 ฀ liberação฀de฀O2,฀345
฀ Homologia฀de฀seqüência฀em฀serino฀proteases,฀331

BioQ.09 315 22.01.07 16:59:32

 324฀฀฀|฀฀฀PARTE฀3฀฀FUNÇÕES฀DE฀PROTEÍNAS
|
9.3฀ ฀PROTEÍNAS฀COM฀UM฀
MECANISMO฀CATALÍ-
TICO฀COMUM:฀SERINO฀
PROTEASES
Serino฀ proteases฀ são฀ uma฀ família฀ de฀ enzimas฀ que฀
usam฀um฀resíduo฀de฀serina฀ativado฀de฀modo฀singular฀no฀
sítio฀de฀ligação฀ao฀substrato,฀para฀hidrolisar฀catalitica-
mente฀ligações฀peptídicas.฀Essa฀serina฀pode฀ser฀carac-
terizada฀pela฀reação฀irreversível฀de฀seu฀grupo฀hidroxila฀
de฀ cadeia฀ lateral฀ com฀ diisopropilfluorofosfato฀ (DFP)฀
(Figura฀9.11).฀De฀todas฀as฀serinas฀da฀proteína,฀DFP฀re-
age฀só฀com฀a฀serina฀cataliticamente฀ativa,฀formando฀um฀
éster฀de฀fosfato.
BioQ.09 324
FIGURA฀9.9
Seqüência฀de฀aminoácidos฀das฀regiões฀constantes฀de฀
cadeias฀pesadas฀de฀genes฀de฀cadeia฀pesada฀de฀IgG฀1,฀
2฀฀e฀4.฀
Seqüências฀de฀CH1,฀região฀de฀articulação฀H฀(hinge),฀
regiões฀CH2฀e฀CH3฀são฀apresentadas.฀Seqüência฀de฀γ1฀
está฀completa,฀e฀diferenças฀em฀γ2฀e฀γ4฀em฀comparação฀
com฀seqüência฀γ1฀são฀mostradas฀usando฀abreviações฀de฀
uma฀letra฀dos฀aminoácidos.฀Linha฀tracejada฀(—)฀indica฀
ausência฀de฀aminoácido฀na฀posição฀correspondente฀em฀
γ1,฀com฀a฀finalidade฀de฀melhor฀alinhar฀as฀seqüências฀
para฀mostrar฀a฀homologia฀máxima.
Seqüência฀de฀cadeia฀γ1฀de฀Ellison,฀J.฀W.,฀Berson,฀B.฀J.฀e฀
Hood,฀L.฀E.฀Nucleic฀Acid฀Res.฀10:4071,฀1982.฀Seqüências฀
dos฀genes฀γ2฀e฀γ4฀de฀Ellison,฀J.฀e฀Hood,฀L.฀Proc.฀Natl.฀
Acad.฀Sci.฀USA฀79:1984,฀1984.
Enzimas฀Proteolíticas฀São฀
Classificadas฀por฀seu฀Mecanismo฀
Catalítico
Enzimas฀proteolíticas฀são฀classificadas฀de฀acordo฀com฀
seu฀ mecanismo฀ catalítico.฀ Além฀ das฀ serino฀ proteases,฀
outras฀classes฀utilizam฀cisteína฀(cisteíno฀proteases),฀
aspartato฀ (aspartato฀ proteases)฀ ou฀ íons฀ metálicos฀
(metalo฀ proteases)฀ para฀ realizar฀ sua฀ função฀ catalí-
tica.฀As฀que฀hidrolisam฀ligações฀peptídicas฀no฀interior฀
de฀um฀polipeptídeo฀são฀endopeptidases,฀e฀aquelas฀que฀
quebram฀a฀ligação฀peptídica฀de฀aminoácidos฀COOH-฀ou฀
NH2-terminais฀são฀exopeptidases.
Serino฀proteases฀freqüentemente฀ativam฀outras฀se-
rino฀proteases฀a฀partir฀de฀sua฀forma฀precursora฀inativa,฀
denominada฀um฀zimogênio,฀por฀clivagem฀de฀uma฀liga-
ção฀ peptídica฀ específica.฀ Esse฀ mecanismo฀ de฀ ativação฀
22.01.07 16:59:43
 CAPÍTULO฀9฀฀PROTEÍNAS฀II:฀RELAÇÕES฀ESTRUTURA-FUNÇÃO฀฀฀|฀฀฀335
CORRELAÇÃO฀CLÍNICA฀9.6฀
Hemoglobinopatias
Há฀ mais฀ de฀ 800฀ hemoglobinas฀ humanas฀ mutantes฀
diferentes.฀ Mutações฀ causam฀ instabilidade฀ na฀ es-
trutura฀ da฀ hemoglobina,฀ afinidade฀ aumentada฀ ou฀
diminuída฀por฀oxigênio,฀ou฀um฀aumento฀na฀taxa฀de฀
oxidação฀do฀ferro฀ferroso฀do฀heme฀(Fe2+)฀para฀o฀es-
tado฀férrico฀(Fe3+).฀Uma฀hemoglobina฀férrica,฀não-
funcional,฀é฀chamada฀meta-hemoglobina฀e฀é฀simbo-
lizada฀por฀HbM.
Hemoglobinas฀instáveis฀surgem฀por฀substituição฀
de฀prolina฀por฀um฀aminoácido฀em฀uma฀região฀de฀α-
hélice฀da฀dobra฀de฀globina.฀Prolinas฀não฀participam฀
da฀estrutura฀em฀α-hélice฀e฀a฀quebra฀de฀um฀segmento฀
de฀ α-hélice฀ gera฀ uma฀ hemoglobina฀ instável฀ (exem-
plos฀ são฀ HbSakiβ14Leu→Pro฀ e฀ HbGenova฀ β28Leu→Pro).฀ Ou-
tras฀hemoglobinas฀instáveis฀surgem฀por฀substituição฀
por฀ um฀ aminoácido฀ que฀ é฀ muito฀ grande฀ ou฀ muito฀
pequeno฀para฀estabelecer฀contatos฀corretos,฀ou฀por฀
colocação฀de฀um฀grupo฀carregado฀ou฀polar฀no฀lado฀
de฀ dentro฀ de฀ um฀ domínio.฀ Hemoglobinas฀ instáveis฀
desnaturam฀facilmente฀e฀precipitam,฀formando฀cor-
pos฀de฀Heinz,฀que฀danificam฀a฀membrana฀do฀eritró-
cito.฀ Pacientes฀ com฀ hemoglobinas฀ instáveis฀ podem฀
desenvolver฀ anemia,฀ reticulocitose,฀ esplenomegalia฀
e฀urobilinúria.
Algumas฀ hemoglobinas฀ mutantes฀ têm฀ afinida-
de฀ aumentada฀ por฀ oxigênio฀ (P50฀ mais฀ baixa).฀ Um฀
exemplo฀interessante฀é฀HbCowtown฀β246His→Leu,฀na฀qual฀
a฀histidina,฀que฀dissocia฀50%฀dos฀prótons฀do฀efeito฀
Bohr,฀é฀perdida.฀Essa฀mutação฀impede฀a฀regulação฀
da฀dissociação฀de฀oxigênio฀por฀concentração฀de฀íons฀
hidrogênio฀e฀desestabiliza฀a฀conformação฀T,฀em฀re-
lação฀ à฀ conformação฀ R,฀ causando฀ um฀ aumento฀ na฀
afinidade฀por฀oxigênio฀e฀liberação฀diminuída฀de฀O2฀
para฀ os฀ tecidos.฀ Mutações฀ em฀ hemoglobina฀ que฀ in-
terferem฀ com฀ ligação฀ de฀ DPG฀ também฀ aumentam฀
afinidade฀ por฀ oxigênio.฀ Hemoglobinopatias฀ com฀
Fonte:฀Dickerson,฀R.฀E.฀e฀Geis,฀I.฀Hemoglobin:฀Structure,฀Function,฀Evolution,฀and฀Pathology.฀Menlo฀Park,฀CA:฀
Benjamin-Cummings,฀1983.฀Arcasoy,฀M.฀O.฀e฀Gallagher,฀P.฀G.฀Molecular฀diagnosis฀of฀hemoglobinopathies฀and฀other฀red฀
blood฀cell฀disorders.฀Semin.฀Hematol.฀36:328,฀1999.
Quatro฀ligações฀são฀com฀os฀átomos฀de฀nitrogênio฀pirró-
lico฀da฀porfirina.฀Como฀os฀anéis฀pirrólicos฀e฀os฀carbonos฀
de฀ ligação฀ fazem฀ parte฀ do฀ mesmo฀ sistema฀ aromático,฀
esses฀átomos฀ficam฀em฀um฀plano฀comum.฀O฀ferro฀ligado฀
à฀ porfirina฀ tenderá฀ a฀ ficar฀ no฀ mesmo฀ plano฀ da฀ porfiri-
na.฀A฀quinta฀e฀a฀potencial฀sexta฀ligações฀com฀ferro฀são฀
direcionadas฀ao฀longo฀de฀um฀eixo฀perpendicular฀ao฀pla-
no฀do฀anel฀porfirínico฀(Figura฀9.20).฀A฀quinta฀ligação฀é฀
com฀um฀nitrogênio฀do฀imidazol฀de฀uma฀histidina.฀Esta฀
BioQ.09 335
afinidade฀ aumentada฀ por฀ oxigênio฀ são฀ freqüen-
temente฀caracterizadas฀por฀anemia฀hemolítica฀e฀
formação฀de฀corpos฀de฀Heinz.
Hemoglobinas฀ mutantes฀ que฀ formam฀ meta-
hemoglobina฀ incluem฀ HbM Iwateα87His→Tyr฀ e฀
HbM HydeParkβ92His→Tyr,฀ onde฀ as฀ histidinas฀ pro-
ximais฀ F8฀ das฀ cadeias฀ α฀ e฀ β,฀ respectivamen-
te,฀ estão฀ mutadas.฀ Na฀ HbM Bostonα58His→Tyr฀ e฀ na฀
HbMSaskatoonβ63His→Tyr,฀ as฀ histidinas฀ distais฀ E7฀
estão฀mutadas.฀Mutações฀de฀aminoácidos฀que฀fi-
cam฀junto฀do฀heme฀ou฀formam฀o฀sítio฀de฀ligação฀
com฀oxigênio฀freqüentemente฀levam฀a฀meta-he-
moglobina.฀ Pacientes฀ com฀ altas฀ concentrações฀
de฀ meta-hemoglobina฀ apresentam฀ cianose฀ (cor฀
azulada฀na฀pele).
Duas฀ das฀ mutações฀ mais฀ prevalentes฀ ocor-
rem฀no฀aminoácido฀da฀mesma฀posição,฀o฀β6Glu.฀
Quando฀esse฀glutamato฀é฀substituído฀por฀valina,฀
o฀ resultado฀ é฀ HbS β6Glu→Val;฀ enquanto฀ substitui-
ção฀ por฀ lisina฀ gera฀ HbCβ6Glu→Lys.฀ Homozigotos฀
com฀HbS฀expressam฀anemia฀falciforme,฀na฀qual฀
as฀ moléculas฀ de฀ hemoglobina฀ precipitam฀ como฀
tactóides฀ou฀longas฀cadeias,฀o฀que฀produz฀a฀for-
ma฀de฀foice฀dos฀eritrócitos฀(ver฀Corr.฀Clín.฀3.3).฀
HbC฀forma฀uma฀estrutura฀diferente฀de฀agregado฀
consistindo฀de฀cristalóides฀de฀extremidades฀ce-
gas.฀ Isso฀ reduz฀ o฀ tempo฀ de฀ vida฀ dos฀ eritrócitos,฀
mas฀causa฀menos฀hemólise฀que฀HbS.฀Esta฀forma฀
de฀ hemoglobinopatia฀ apresenta฀ efeitos฀ patológi-
cos฀mais฀limitados.฀Como฀ambas฀HbS฀e฀HbC฀são฀
comumente฀ encontradas฀ em฀ certas฀ populações฀
negras฀da฀África,฀não฀é฀raro฀encontrar฀indivídu-
os฀heterozigotos฀para฀ambos฀os฀genes฀mutantes฀
nessas฀ populações.฀ Indivíduos฀ com฀ HbSC฀ terão฀
uma฀ anemia฀ intermediária฀ entre฀ as฀ observadas฀
para฀homozigotos฀de฀HbS฀e฀HbC.
é฀designada฀como฀histidina฀proximal฀nas฀estruturas฀
de฀hemoglobina฀e฀mioglobina฀(Figuras฀9.20฀e฀9.21).฀O2฀
forma฀ a฀ sexta฀ ligação;฀ o฀ O2฀ é฀ colocado฀ entre฀ o฀ átomo฀
ferroso฀e฀um฀segundo฀imidazol฀de฀histidina,฀designada฀
como฀histidina฀distal.฀Na฀desoxi-hemoglobina,฀a฀sex-
ta฀posição฀está฀desocupada.
O฀heme฀é฀posicionado฀dentro฀de฀um฀bolsão฀hidrofó-
bico฀de฀cada฀subunidade฀globina,฀com฀aproximadamen-
te฀ 80฀ interações฀ fornecidas฀ por฀ cerca฀ de฀ 18฀ resíduos,฀
22.01.07 16:59:57
 CAPÍTULO฀9฀฀PROTEÍNAS฀II:฀RELAÇÕES฀ESTRUTURA-FUNÇÃO฀฀฀|฀฀฀347

VEIA ARTÉRIA de฀ divisão฀ celular,฀ morte฀ (apoptose),฀ diferenciação฀ e฀

O2
HS SH 2 O HS SH O
2 2
migração.฀Todas฀as฀células฀produzem฀constituintes฀de฀
1
  CO2   membrana฀basal,฀e฀cada฀membrana฀basal฀tem฀caracte-
� � CO2 � � rísticas฀ do฀ tipo฀ celular,฀ a฀ partir฀ do฀ qual฀ é฀ sintetizada.฀
T O2 R O2 Uma฀membrana฀basal฀sublinha฀camadas฀de฀células฀epi-
teliais฀e฀endoteliais,฀e฀circunda฀outros฀tipos฀de฀células฀
5 ON HS SH ONS SH O
6 O2 2
(Figura฀9.39).฀Uma฀membrana฀basal฀separa฀duas฀cama-
    das฀de฀células฀no฀glomérulo฀renal,฀onde฀funciona฀como฀
� �
X-SNO
� � um฀filtro฀seletivo.
O2 T O2 R O2 Uma฀ lâmina฀ basal฀ é฀ formada฀ por฀ associações฀ não-
covalentes฀entre฀sítios฀específicos฀localizados฀em฀domí-
nios฀de฀ligação฀das฀proteínas฀associadas.฀Muitas฀prote-
X-SNO ínas฀de฀membrana฀basal฀também฀se฀ligam฀a฀células฀por฀
CO2 meio฀de฀domínios฀de฀ligação฀a฀células฀nas฀proteínas฀e฀
8 ON HS SH 7 HS SH receptores฀ celulares฀ na฀ membrana฀ celular฀ externa.฀ A฀
    estrutura฀de฀muitas฀das฀proteínas฀é฀composta฀de฀uni-
� � CO2 � �
dades฀modulares฀com฀homologia฀de฀seqüência฀e฀de฀do-
T 4 O2 T bras฀com฀superdobras฀comuns,฀como฀as฀dobras฀de฀imu-
noglobulinas฀(Ig)฀e฀de฀fator฀de฀crescimento฀epidérmico฀
4 HS SH 3 O2 HS SH O2 (EGF).฀Essas฀dobras฀são฀encontradas฀repetitivamente฀
  NO   e฀ são฀ os฀ blocos฀ construtores฀ de฀ proteínas฀ de฀ matriz฀
� � � � extracelular.฀Enquanto฀módulos฀EGF฀nessas฀proteínas฀
NO T NO R O2 não฀parecem฀ter฀função฀de฀fator฀de฀crescimento,฀prote-
3 O2 1 O2 ínas฀fatores฀de฀crescimento฀e฀citocinas฀são฀encontradas฀
CAPILAR ARTERÍOLA na฀ lâmina฀ basal,฀ particularmente฀ em฀ associação฀ com฀
as฀partes฀carboidrato฀dos฀proteoglicanos฀componentes.฀
FIGURA฀9.37
Ligação฀e฀liberação฀de฀NO฀por฀hemoglobina฀durante฀o฀ciclo฀ Durante฀ a฀ reciclagem฀ (turnover)฀ da฀ membrana฀ basal฀
respiratório.฀ induzida฀por฀proteases฀e฀heparanases,฀esses฀fatores฀de฀
O฀modelo฀mostra฀a฀ligação฀e฀a฀dissociação฀de฀NO,฀O2฀e฀ crescimento฀e฀citosinas฀são฀liberados฀para฀agirem฀sobre฀
CO2฀enquanto฀uma฀molécula฀de฀hemoglobina฀faz฀dois฀
ciclos฀completos฀na฀circulação.฀O฀primeiro฀ciclo฀envolve฀ células฀vizinhas.฀Além฀disso,฀muitas฀proteínas฀de฀lâmi-
intermediários฀1-4,฀e฀o฀segundo฀ciclo,฀intermediários฀5-8.฀ na฀basal฀escondem฀atividades฀crípticas฀que฀são฀ativadas฀
As฀conformações฀T฀e฀R฀são฀mostradas฀e฀os฀grupos฀SH฀são฀da฀ quando฀ clivadas฀ e฀ removidas฀ da฀ seqüência฀ completa฀
cadeia฀lateral฀de฀βCys93.฀O฀NO฀é฀ligado฀diretamente฀a฀um฀
ferro-heme฀ou฀ao฀SH฀da฀βCys93.฀As฀etapas-chaves฀no฀transporte฀ por฀ação฀de฀proteases฀(ver฀endostatina,฀p.฀1021).฀O฀pró-
de฀NO฀são฀(i)฀sua฀ligação฀inicial฀a฀um฀heme฀no฀intermediário฀ protease฀plasminogênio฀está฀ubiquamente฀presente฀na฀
3฀e฀transferência฀do฀heme฀de฀uma฀subunidade฀β฀para฀βCys93฀ matriz฀extracelular฀e฀é฀ativado฀por฀secreção฀celular฀de฀
no฀intermediário฀6฀(conformação฀R)฀e฀(ii)฀sua฀transferência฀
para฀uma฀molécula฀tiol฀pequena฀X-SH฀no฀intermediário฀7฀ ativadores฀de฀plasminogênio฀(ver฀p.฀979).
(conformação฀T),฀quando฀hemoglobina฀é฀convertida฀de฀R฀para฀
T.฀A฀molécula฀de฀hemoglobina฀representada฀pode฀ser฀apenas฀
1฀em฀1.000฀moléculas฀de฀hemoglobina฀circulantes,฀devido฀à฀
Composição฀Protéica฀da฀Lâmina฀
relativamente฀baixa฀concentração฀molar฀de฀NO฀no฀sangue. Basal
Redesenhado฀de฀Gross,฀S.฀S.฀e฀Lane,฀P.฀Proc.฀Natl.฀Acad.฀Sci.฀
USA฀96:9967,฀1999. A฀ lâmina฀ basal฀ é฀ composta฀ de฀ colágeno฀ tipo฀ IV,฀ lami-
nina,฀ nidogem฀ (também฀ chamado฀ entactina)฀ e฀ perle-

|
9.5฀ ฀O฀COMPLEXO฀PROTÉICO฀
DA฀LÂMINA฀BASAL
Uma฀lâmina฀basal฀é฀um฀complexo฀muito฀estruturado฀
de฀ proteínas฀ de฀ matriz฀ extracelular฀ observado฀ inicial-
mente฀ao฀microscópio฀como฀uma฀região฀amorfa฀densa-
mente฀empacotada฀de฀cerca฀de฀50฀a฀100฀nm฀de฀espes-
sura฀ circundando฀ tecidos฀ ou฀ células฀ (Figura฀ 9.39).฀ O฀
termo฀ membrana฀ basal฀ é฀ usado฀ para฀ descrever฀ a฀ lâ-
mina฀basal฀e฀os฀colágenos฀fibrilares฀ligados฀ao฀seu฀lado฀
externo.฀A฀membrana฀basal฀dá฀suporte฀a฀tecidos฀e฀re-
gula฀acesso฀de฀células฀ao฀estroma฀intersticial.฀Também฀
participa฀ da฀ determinação฀ de฀ propriedades฀ de฀ células฀
que฀estão฀ligadas฀a฀ela,฀incluindo฀os฀críticos฀processos฀
cam,฀ o฀ proteoglicano฀ de฀ heparam฀ sulfato.฀ Além฀ disso,฀
pequenas฀quantidades฀de฀talvez฀50฀outras฀proteínas฀po-
dem฀estar฀presentes,฀incluindo฀osteopontina฀(também฀
chamada฀BM-40฀ou฀SPARC),฀fibulina,฀colágeno฀tipo฀XV,฀
colágeno฀tipo฀XVIII฀e฀o฀proteoglicano฀agrim.฀A฀diversi-
dade฀e฀a฀tecido-especificidade฀de฀uma฀membrana฀basal฀
é฀determinada฀pelas฀isoformas฀de฀colágeno฀tipo฀IV฀e฀la-
minina฀e฀os฀tipos฀de฀proteínas฀minoritárias฀presentes.฀
Isoformas฀de฀colágeno฀tipo฀IV฀são฀produzidas฀por฀sete฀
genes฀ diferentes฀ de฀ colágeno฀ tipo฀ IV.฀ Essas฀ isoformas฀
compartilham฀ homologia฀ de฀ estrutura฀ de฀ domínios,฀
mas฀diferem฀em฀30-50%฀de฀suas฀seqüências฀de฀amino-
ácidos.฀ Há฀ pelo฀ menos฀ 12฀ isoformas฀ de฀ laminina.฀ As฀
isoformas฀de฀colágeno฀tipo฀IV฀e฀laminina฀expressas฀são฀
características฀do฀tipo฀celular฀e฀do฀tecido฀que฀sintetiza฀
a฀membrana฀basal฀associada.

BioQ.09 347 22.01.07 17:00:54

 358฀฀฀|฀฀฀PARTE฀3฀฀FUNÇÕES฀DE฀PROTEÍNAS
PARTE฀3฀FUNÇÕES฀DE฀PROTEÍNAS
10
ENZIMAS:฀CLASSIFICAÇÃO,฀
CINÉTICA฀E฀CONTROLE
Henry฀Weiner
10.1฀ VISÃO฀GERAL,฀359
10.2฀CLASSIFICAÇÃO฀DE฀ENZIMAS,฀360
฀ Classe฀1:฀Óxido-redutases,฀361
฀ Classe฀2:฀Transferases,฀361
฀ Classe฀3:฀Hidrolases,฀361
฀ Classe฀4:฀Liases,฀362
฀ Classe฀5:฀Isomerases,฀362
฀ Classe฀6:฀Ligases,฀363
10.3฀CONCEITOS฀GERAIS฀DE฀MECANISMOS฀ENZI-
MÁTICOS,฀363
฀ Considerações฀termodinâmicas,฀363
฀ Ligação฀de฀substrato฀por฀uma฀enzima,฀364
฀ Estado฀de฀transição,฀364
฀ ฀ Ligação฀forte฀no฀estado฀de฀transição,฀365
฀ ฀ Reações฀iônicas฀não฀precisam฀envolver฀íons,฀
฀ ฀ 365
฀ ฀ Ligações฀parcialmente฀carregadas,฀366
฀ ฀ Importância฀do฀grupo฀carbonila,฀366
฀ ฀ Oxidações,฀367
฀ ฀ Adição฀e฀remoção฀de฀prótons,฀367
฀ Ligação฀covalente฀de฀substrato฀à฀enzima,฀367
฀ pH฀afeta฀a฀reação฀por฀afetar฀ácidos฀e฀bases฀gerais,฀
368
10.4฀SÍTIO฀ATIVO฀DE฀UMA฀ENZIMA,฀368
฀ Estereoquímica฀ajuda฀a฀explicar฀o฀mecanismo฀de฀฀
฀ reações฀catalisadas฀por฀enzimas,฀370
฀ Influência฀de฀grupos฀sobre฀o฀substrato฀distal฀à฀฀
฀ ligação฀a฀ser฀modificada,฀370
10.5฀COENZIMAS,฀CO-SUBSTRATOS฀E฀COFATORES,฀
371
฀ Coenzimas,฀371
฀ ฀ NAD฀e฀NADP฀são฀formas฀coenzimas฀da฀niaci-฀
฀ na,฀372
BioQ.10 358
฀ ฀ FMN฀e฀FAD฀são฀formas฀coenzimas฀da฀ribofla-฀
฀ vina,฀373
฀ ฀ Piridoxal฀fosfato฀é฀a฀forma฀coenzima฀de฀piri-฀
฀ ฀ doxal,฀373
฀ Adenosina฀trifosfato฀pode฀ser฀um฀segundo฀subs-฀
฀ trato฀ou฀um฀modulador฀de฀atividade,฀374
฀ Cofatores฀íons฀metálicos,฀374
฀ ฀ Papel฀de฀metais฀em฀oxidação฀e฀redução,฀376
10.6฀CINÉTICA฀DE฀REAÇÕES฀QUÍMICAS,฀376
฀ Velocidade฀de฀formação฀de฀produto,฀376
฀ ฀ Reações฀de฀primeira฀e฀segunda฀ordem,฀377
฀ Velocidade฀de฀desaparecimento฀de฀substrato,฀377
฀ Reações฀reversíveis,฀378
฀ Reações฀complexas฀,฀378
10.7฀CINÉTICA฀ENZIMÁTICA฀DE฀REAÇÕES฀DE฀UM฀
SUBSTRATO,฀379
฀ Equação฀de฀Michaelis-Menten,฀380
฀ ฀ Concentração฀de฀enzima฀livre,฀382
฀ ฀ Significado฀de฀Km,฀382
฀ ฀ Número฀de฀turnover฀(kcat),฀382
฀ Significado฀de฀kcat฀na฀equação฀de฀Michaelis-Men-฀
฀ ten,฀383
฀ ฀ Quando฀concentração฀de฀substrato฀é฀muito฀฀
฀ ฀ maior฀que฀Km,฀383
฀ ฀ Quando฀concentração฀de฀substrato฀é฀muito฀฀
฀ ฀ menor฀que฀Km,฀383
฀ ฀ Reações฀reversíveis,฀384
฀ Baixo฀Km฀versus฀alto฀kcat,฀384
฀ Calculando฀as฀constantes,฀384
฀ ฀ Substrato฀e฀produto฀ligam-se฀ao฀mesmo฀฀฀
฀ ฀ sítio,฀385
฀ Efeito฀das฀condições฀de฀ensaio,฀385
฀ ฀ Temperatura,฀385
฀ ฀ pH,฀385
22.01.07 17:10:09
 CAPÍTULO฀10฀฀ENZIMAS:฀CLASSIFICAÇÃO,฀CINÉTICA฀E฀CONTROLE฀฀฀|฀฀฀371

CORRELAÇÃO฀CLÍNICA฀10.1
Mutação฀de฀um฀Sítio฀de฀Ligação฀de฀Coenzima฀Resulta฀em฀Doença฀Clínica

Cistationinúria฀é฀uma฀doença฀genética฀na฀qual฀γ-cis- ticos฀ de฀ cistationina.฀ Esses฀ pacientes฀ produzem฀ a฀

tationase฀ está฀ deficiente฀ ou฀ inativa.฀ A฀ cistationase฀
catalisa฀a฀reação:
Cistationina฀→฀cisteína฀+฀α-cetobutirato
Deficiência฀da฀enzima฀leva฀ao฀acúmulo฀da฀cista-
tionina฀no฀plasma.฀Como฀cistationase฀é฀uma฀enzima฀
dependente฀de฀piridoxal฀fosfato,฀vitamina฀B6฀foi฀ad-
ministrada฀a฀pacientes฀cujos฀fibroblastos฀continham฀
material฀que฀apresentavam฀reação฀cruzada฀com฀an-
ticorpos฀contra฀cistationase.฀Muitos฀responderam฀à฀
terapia฀ com฀ B6฀ com฀ uma฀ queda฀ nos฀ níveis฀ plasmá-
apoenzima,฀que฀reagiu฀com฀o฀anticorpo.฀Em฀um฀pa-
ciente,฀a฀atividade฀enzimática฀era฀não-detectável฀em฀
homogenatos฀ de฀ fibroblastos,฀ mas฀ aumentou฀ para฀
31%฀do฀normal฀com฀a฀adição฀de฀piridoxal฀fosfato฀1฀
mM฀à฀mistura฀de฀reação.฀Acredita-se฀que฀o฀Km฀ para฀
a฀ligação฀do฀piridoxal฀fosfato฀à฀enzima฀tenha฀aumen-
tado,฀devido฀a฀uma฀mutação฀no฀sítio฀de฀ligação.฀Ati-
vidade฀é฀parcialmente฀restaurada฀aumentando-se฀a฀
concentração฀ de฀ coenzima.฀ Aparentemente,฀ esses฀
pacientes฀ requerem฀ uma฀ concentração฀ de฀ estado฀
estacionário฀ mais฀ alta฀ de฀ coenzima฀ para฀ manter฀ a฀
atividade฀de฀γ-cistationase.

Fonte:฀Pascal,฀T.฀A.,฀Gaull,฀G.฀E.,฀Beratis,฀N.฀G.,฀Gillam,฀B.฀M.,฀Tallan,฀H.฀H.฀e฀Hirschhorn,฀K.฀Vitamin฀B6 -responsive฀
and฀unresponsive฀cystathionuria:฀two฀variant฀molecular฀forms.฀Science฀190:฀1209,฀1975.

|
10.5฀ ฀COENZIMAS,฀
฀ CO-SUBSTRATOS฀E฀
COFATORES
Muitas฀enzimas฀requerem฀a฀participação฀de฀uma฀coenzi-
ma,฀um฀co-substrato฀ou฀cofator฀na฀reação฀catalítica.฀Co-
enzimas฀são฀moléculas฀orgânicas฀pequenas,฀freqüente-
mente฀derivados฀de฀vitaminas฀(ver฀p.฀1074).฀Podem฀ser฀
ou฀ não฀ modificadas฀ (p.฀ ex.,฀ oxidadas฀ ou฀ reduzidas)฀ na฀
reação.฀As฀que฀são฀alteradas฀são฀também฀chamadas฀co-
substratos.฀Para฀algumas฀reações,฀a฀energia฀de฀hidróli-
se฀de฀ATP฀é฀necessária฀sem฀incorporação฀de฀sulfato฀ao฀
produto.฀ ATP฀ nessas฀ reações฀ é฀ um฀ co-substrato.฀ Íons฀
metálicos฀são฀freqüentemente฀necessários฀para฀reações฀
enzimáticas฀e฀chamados฀cofatores.
Coenzimas
Tabela฀10.2฀lista฀as฀coenzimas฀e฀vitaminas฀a฀partir฀das฀
quais฀são฀derivadas.฀Coenzimas฀participam฀de฀enzimas฀
catalisadas฀por฀enzimas,฀mas฀não฀são฀os฀compostos฀pri-
mários฀que฀estão฀sendo฀modificados.฀Algumas฀coenzi-
mas฀participam฀da฀ação฀de฀muitas฀enzimas฀diferentes,฀
enquanto฀ outros฀ participam฀ apenas฀ de฀ um฀ número฀ li-
mitado฀ de฀ reações.฀ Podem฀ ter฀ afinidades฀ pela฀ enzima฀
semelhantes฀ ao฀ substrato,฀ podem฀ ser฀ fortemente฀ liga-
das฀ou฀podem฀ser฀covalentemente฀ligadas.฀Algumas฀são฀
modificadas฀durante฀uma฀reação,฀mas฀estão฀no฀seu฀es-
tado฀ original฀ no฀ final฀ da฀ reação฀ (modificação฀ cíclica),฀
enquanto฀ outras฀ permanecem฀ modificadas฀ no฀ fim.฀ Se฀
estiverem฀modificadas฀no฀fim฀(p.฀ex.,฀oxidadas฀ou฀redu-
zidas),฀devem฀participar฀de฀outra฀reação฀para฀retornar฀
ao฀seu฀estado฀original.฀Coenzimas฀estão฀presentes฀em฀
células฀em฀uma฀concentração฀razoavelmente฀constante,฀

TABELA฀10.2฀Coenzimas
Coenzima Vitamina Reação฀Mediada

Biotina Biotina Carboxilação

Cobalamina฀(B12) Cobalamina฀(B12) Alquilação

Coenzima฀A Pantotenato Transferência฀de฀acil

Coenzimas฀flavina Riboflavina฀(B2) Oxidação-redução

Ácido฀lipóico Transferência฀de฀acil

Coenzimas฀nicotinamida Nicotinamida Oxidação-redução

Piridoxal฀fosfato Piridoxina฀(B6 ) Transferência฀de฀amino

Tetra-hidrofolato Ácido฀fólico Transferência฀de฀grupo฀de฀um฀carbono

Tiamina฀pirofosfato Tiamina฀(B1) Transferência฀de฀carbonila

BioQ.10 371 22.01.07 17:10:28

 CAPÍTULO฀10฀฀ENZIMAS:฀CLASSIFICAÇÃO,฀CINÉTICA฀E฀CONTROLE฀฀฀|฀฀฀383
CORRELAÇÃO฀CLÍNICA฀10.3
Efeito฀Fisiológico฀de฀Mudanças฀nos฀Valores฀de฀Km฀de฀Enzimas
A฀sensibilidade฀incomum฀de฀asiáticos฀a฀bebidas฀alco-
ólicas฀tem฀uma฀base฀bioquímica.฀Em฀alguns฀japone-
ses฀e฀chineses,฀muito฀menos฀álcool฀é฀necessário฀para฀
produzir฀vasodilatação,฀que฀resulta฀em฀rubor฀facial฀
e฀aceleração฀dos฀batimentos฀cardíacos,฀do฀que฀o฀ne-
cessário฀ para฀ causar฀ o฀ mesmo฀ efeito฀ em฀ europeus.฀
Os฀efeitos฀fisiológicos฀devem-se฀ao฀acetaldeído฀gera-
do฀ pela฀ álcool฀ desidrogenase฀ hepática.฀ Acetaldeído฀
é฀normalmente฀removido฀por฀aldeído฀desidrogenase฀
(ALDH),฀ que฀ converte฀ acetaldeído฀ em฀ acetato.฀ Um฀
aminoácido฀ na฀ posição฀ 487฀ na฀ subunidade฀ de฀ 500฀
aminoácidos฀da฀enzima฀tetramérica฀está฀trocado฀em฀
alguns฀dos฀indivíduos฀afetados.฀A฀enzima฀ativa฀tem฀
um฀glutamato,฀enquanto฀a฀variante฀inativa฀tem฀uma฀
lisina.฀Descobriu-se฀que฀a฀variante฀asiática฀tem฀ati-
vidade฀ muito฀ baixa,฀ e฀ o฀ Km฀ para฀ NAD+฀ aumentado฀
de฀ 30฀ μM฀ para฀ 7.000฀ μM.฀ Embora฀ a฀ enzima฀ esteja฀
ativa,฀teria฀muito฀pouca฀atividade฀no฀fígado฀porque฀
o฀Km฀é฀muito฀alto฀e฀kcat,฀muito฀baixa.
Além฀ disso,฀ indivíduos฀ afetados฀ eram฀ heterozi-
gotos,฀tendo฀genes฀para฀a฀enzima฀glutamato฀ativa฀e฀
a฀enzima฀lisina฀essencialmente฀inativa.฀Esperar-se-ia฀
Fonte:฀Zhou฀J.฀e฀Weiner,฀H.฀Basis฀for฀half-of-the-site฀reactivity฀and฀the฀dominance฀of฀the฀K487฀oriental฀subu-
nit฀over฀the฀E487฀subunit฀in฀heterotetrameric฀human฀liver฀mitochondrial฀aldehyde฀dehydrogenase.฀Biochemistry฀
39:12019,฀2000.
geral,฀este฀termo฀representa฀a(s)฀etapa(s)฀mais฀lenta(s)฀
da฀reação.฀Como฀Km,฀kcat฀é฀composta฀de฀várias฀constan-
tes฀de฀velocidade฀individuais.
Significado฀de฀kcat฀na฀Equação฀de฀
Michaelis-Menten
Quando฀Concentração฀de฀Substrato฀É฀
Muito฀Maior฀do฀que฀Km
Equação฀10.19฀está฀na฀forma฀de฀uma฀equação฀hiperbóli-
ca฀geral.฀Quando฀o฀valor฀de฀[S]฀é฀muito฀maior฀que฀o฀va-
lor฀de฀Km,฀o฀valor฀do฀denominador฀aproxima-se฀do฀valor฀
de฀[S],฀e฀a฀equação฀pode฀ser฀aproximada฀por
k [E][S]
v = cat = kcat [E] (10.26)
฀ [S] ฀
isto฀é,฀a฀velocidade฀torna-se฀independente฀da฀concentra-
ção฀de฀S;฀a฀reação฀torna-se฀de฀ordem฀zero฀com฀relação฀
a฀S.฀Isso฀é฀encontrado฀na฀parte฀da฀curva฀onde฀a฀veloci-
dade฀essencialmente฀se฀nivela,฀e฀não฀aumenta฀quando฀a฀
concentração฀de฀[S]฀aumenta฀(inclinação฀=฀0)฀(Figura฀
10.47).฀A฀reação฀está฀acontecendo฀à฀sua฀velocidade฀má-
BioQ.10 383
que฀sua฀enzima฀fosse฀50%฀ativa,฀mas฀apresentava฀ati-
vidade฀muito฀baixa.฀ALDH฀forma฀tetrâmeros฀com฀os฀
dois฀monômeros฀(E4,฀E3K,฀E2K2,฀EK3฀e฀K4),฀onde฀E4฀
e฀K4฀são฀formas฀homotetraméricas฀das฀subunidades฀
contendo฀ glutamato฀ e฀ lisina,฀ respectivamente,฀ e฀ as฀
outras฀são฀heterotetrâmeros.฀E3K฀tinha฀50%฀da฀ativi-
dade฀total,฀não฀75%,฀enquanto฀EK3฀praticamente฀não฀
tinha฀ atividade,฀ não฀ os฀ 25%฀ que฀ se฀ poderia฀ esperar฀
com฀uma฀subunidade฀ativa.฀A฀subunidade฀K฀era฀do-
minante฀e฀podia฀inativar฀a฀subunidade,฀à฀qual฀estava฀
pareada,฀uma฀vez฀que฀o฀resíduo฀da฀posição฀487฀inte-
rage฀com฀uma฀arginina฀da฀posição฀475.฀Quando฀um฀
glutamato฀estava฀na฀posição฀487,฀uma฀ligação฀salina฀
estável฀se฀formava,฀mas฀quando฀uma฀lisina฀estava฀na฀
posição฀ 487,฀ causava฀ um฀ movimento฀ da฀ arginina.฀ O฀
movimento฀ rompia฀ o฀ bolsão฀ de฀ ligação฀ a฀ NAD,฀ em-
bora฀ o฀ resíduo฀ 487฀ não฀ estivesse฀ em฀ contato฀ com฀ a฀
dobra฀ de฀ Rossmann.฀ Este฀ exemplo฀ ilustra฀ o฀ fato฀ de฀
uma฀mutação฀puntual฀em฀uma฀enzima฀poder฀afetar฀
o฀sítio฀ativo,฀embora฀o฀resíduo฀não฀esteja฀em฀contato฀
direto฀ com฀ essa฀ região.฀ Também฀ mostra฀ como฀ uma฀
subunidade฀pode฀ser฀dominante฀sobre฀outra.
xima฀ nessas฀ condições฀ porque฀ praticamente฀ 100%฀ da฀
enzima฀está฀no฀complexo฀ES.฀No฀instante฀em฀que฀uma฀
molécula฀de฀produto฀é฀feita,฀ela฀deixa฀a฀enzima฀e฀outra฀
molécula฀de฀S฀liga-se฀à฀enzima,฀mantendo฀sempre฀a฀en-
zima฀saturada฀com฀S.฀Nessas฀condições,฀a฀velocidade฀é฀
governada฀ estritamente฀ pelos฀ termos฀ que฀ governam฀ a฀
reação฀de฀ES฀indo฀para฀produto฀(ES฀→฀E฀+฀P).
Quando฀Concentração฀de฀Substrato฀É฀
Muito฀Menor฀do฀que฀Km
Quando฀[S]฀é฀muito฀baixa฀comparada฀com฀Km,฀Eq.฀10.18฀
pode฀ser฀aproximada฀como
kcat [Et ][S] Vmax [S]
v= ou v = (10.27)
km Km
฀ ฀
Um฀ gráfico฀ de฀ v฀ versus฀ [S]฀ seria฀ linear,฀ uma฀ con-
dição฀ que฀ existe฀ só฀ quando฀ [S]฀ <<฀ valor฀ de฀ Km.฀ Como฀
para฀qualquer฀reação฀química฀a฀velocidade฀de฀formação฀
de฀produto฀é฀uma฀constante฀de฀velocidade฀multiplicada฀
pela฀concentração฀de฀reagentes,฀o฀termo฀kcat /Km฀pode฀
ser฀considerado฀como฀uma฀constante฀de฀velocidade฀de฀
segunda฀ordem,฀uma฀vez฀que฀há฀dois฀termos฀de฀concen-
22.01.07 17:10:54
 394฀฀฀|฀฀฀PARTE฀3฀฀FUNÇÕES฀DE฀PROTEÍNAS
|
10.10฀ ฀ REGULAÇÃO฀DE฀ATI-
VIDADE฀ENZIMÁTICA
Modificação฀Covalente
Células฀ têm฀ capacidade฀ de฀ regular฀ a฀ atividade฀ de฀ en-
zimas-chaves฀por฀modificação฀covalente฀ou฀ligação฀re-
versível฀ de฀ ligantes.฀ Muitos฀ exemplos฀ de฀ modificação฀
covalente,฀como฀fosforilação,฀serão฀descritos฀em฀outros฀
capítulos.฀Há฀muitas฀proteínas฀quinases฀que฀catalisam฀
fosforilação฀de฀resíduos฀de฀serina,฀treonina฀ou฀treoni-
na฀ em฀ proteínas฀ e฀ enzimas฀ específicas฀ (ver฀ p.฀ 490)฀ e฀
proteína฀fosforilases฀que฀removem฀o฀fosfato฀por฀hidróli-
se.฀Dependendo฀da฀proteína,฀fosforilação฀pode฀aumen-
tar฀ou฀diminuir฀a฀atividade฀enzimática.฀Outros฀grupos฀
além฀ do฀ fosfato฀ podem฀ ser฀ adicionados฀ a฀ uma฀ enzima฀
para฀alterar฀sua฀atividade,฀incluindo฀sulfato฀e฀acetato.฀
Modificação฀covalente฀de฀proteínas฀é฀um฀modo฀rápido฀
e฀ eficiente฀ de฀ controlar฀ atividade฀ de฀ uma฀ proteína฀ ou฀
enzima.
Controle฀Alostérico฀de฀Atividade฀
Enzimática
Embora฀os฀sítios฀de฀ligação฀de฀substrato฀e฀ativo฀de฀uma฀
enzima฀sejam฀estruturas฀bem฀definidas,฀a฀atividade฀de฀
muitas฀enzimas฀pode฀ser฀modulada฀por฀ligantes฀agindo฀
CORRELAÇÃO฀CLÍNICA฀10.10
Um฀Caso฀de฀Gota฀Demonstra฀a฀
Diferença฀entre฀um฀Sítio฀Alostérico฀
e฀um฀Sítio฀de฀Ligação฀de฀Substrato
A฀descoberta฀de฀que฀sítios฀alostéricos฀inibitórios฀são฀separa-
dos฀de฀sítios฀alostéricos฀ativadores,฀bem฀como฀dos฀sítios฀de฀
ligação฀de฀substrato฀e฀catalítico,฀é฀ilustrada฀por฀um฀estudo฀
de฀um฀paciente฀com฀gota,฀cujo฀nível฀de฀PRPP฀nos฀eritrócitos฀
estava฀aumentando.฀Descobriu-se฀que฀a฀PRPP฀sintetase฀do฀
paciente฀tinha฀valores฀normais฀de฀Km,฀Vmax,฀juntamente฀com฀
sensibilidade฀ à฀ ativação฀ por฀ fosfato.฀ Os฀ níveis฀ aumentados฀
de฀PRPP฀e฀hiperuricemia฀surgiram฀porque฀os฀produtos฀finais฀
da฀via฀(ATP,฀GTP)฀não฀eram฀capazes฀de฀inibir฀a฀sintetase฀no฀
sítio฀ alostérico฀ inibitório฀ (I).฀ Sugeriu-se฀ que฀ uma฀ mutação฀
no฀sítio฀inibitório฀ou฀no฀mecanismo฀de฀acoplamento฀entre฀o฀
sítio฀inibitório฀e฀catalítico฀levou฀ao฀defeito฀do฀mecanismo฀de฀
controle฀por฀feedback.
Fonte:฀ Sperling,฀ O.,฀ Persky-Brosh,฀ S.,฀ Boen,฀ P.฀ e฀ DeVries,฀ A.฀ Human฀ erytrocyte฀ phosphoribosyl-pyrophosphate฀
synthetase฀mutationally฀altered฀in฀regulatory฀properties.฀Biochem.฀Med.฀7:฀389,฀1973
BioQ.10 394
de฀modos฀diferentes฀de฀inibidores฀competitivos฀ou฀não-
competitivos.฀Ligantes฀podem฀ser฀ativadores,฀até฀mes-
mo฀os฀substratos฀de฀enzimas.฀Os฀ligantes฀que฀mudam฀a฀
atividade฀enzimática,฀mas฀não฀são฀modificados฀em฀con-
seqüência฀da฀ação฀enzimática,฀são฀chamados฀efetores,฀
modificadores฀ou฀moduladores.฀A฀maioria฀das฀enzimas฀
sujeitas฀à฀modulação฀por฀ligantes฀são฀enzimas฀determi-
nantes฀de฀velocidade฀de฀vias฀metabólicas.
Enzimas฀ que฀ respondem฀ a฀ moduladores฀ têm฀ sí-
tios฀ adicionais฀ conhecidos฀ como฀ sítio(s)฀ alostérico(s).฀
Alostérico฀é฀derivado฀da฀raiz฀grega฀allo,฀significando฀
“o฀outro”.฀Um฀sítio฀alostérico฀é฀uma฀região฀específica฀da฀
enzima,฀bem฀diferente฀do฀sítio฀de฀ligação฀do฀substrato.฀
A฀ existência฀ de฀ sítios฀ alostéricos฀ é฀ ilustrada฀ na฀ Corr.฀
Clín.฀10.10.฀Os฀ligantes฀que฀se฀ligam฀a฀sítios฀alostéricos฀
são฀chamados฀efetores฀alostéricos฀ou฀moduladores.฀Li-
gação฀de฀um฀efetor฀alostérico฀causa฀uma฀mudança฀con-
formacional฀ na฀ enzima,฀ de฀ modo฀ que฀ a฀ afinidade฀ pelo฀
substrato฀ ou฀ outros฀ ligantes฀ também฀ muda.฀ Efetores฀
alostéricos฀positivos฀(+)฀aumentam฀a฀afinidade฀da฀enzi-
ma฀por฀substrato฀ou฀outro฀ligante.฀O฀inverso฀é฀verdade฀
para฀efetores฀alostéricos฀negativos฀(–).฀O฀sítio฀alostéri-
co฀no฀qual฀o฀efetor฀positivo฀se฀liga฀é฀chamado฀um฀sítio฀
ativador;฀o฀efetor฀negativo฀liga-se฀a฀um฀sítio฀inibitório.
Enzimas฀alostéricas฀são฀divididas฀em฀duas฀classes,฀
com฀base฀no฀efeito฀do฀efetor฀alostérico฀sobre฀Km฀e฀Vmax.฀
Na฀ classe฀ K,฀ o฀ efetor฀ altera฀ o฀ Km,฀ mas฀ não฀ Vmax,฀ en-
quanto฀na฀classe฀V,฀o฀efetor฀altera฀Vmax,฀mas฀não฀Km.฀
Enzimas฀ da฀ classe฀ K฀ dão฀ gráficos฀ duplos-recíprocos฀
como฀os฀de฀inibidores฀competitivos,฀e฀enzimas฀da฀classe฀
A PRPP
sintetase
I
C
+
PRPP
–
Pi
ATP
Ribose
AMP ATP
GMP GTP
22.01.07 17:11:17
 CAPÍTULO฀11฀฀CITOCROMOS฀P450฀E฀ÓXIDO฀NÍTRICO฀SINTASES฀฀฀|฀฀฀407

PARTE฀3฀FUNÇÕES฀DE฀PROTEÍNAS

11
Adenina
Ribose Citocromo P450
Fosfato Redutase
Fosfato
Ribitol
Citocromo �5
2e- N N ?
NADPH O CH3 1e- Fosfato
N N CH3 Ribitol C N• C
O N N N Fe N
[FAD] H3C O C N C
N 1e-
H3C N
C N C
O
[FMN]
N • • •• N

C N C

Citocromo P450

CITOCROMOS฀P450฀E฀
ÓXIDO฀NÍTRICO฀SINTASES
Linda฀J.฀Roman฀e฀Bettie฀Sue฀Siler฀Masters

11.1฀ VISÃO฀GERAL,฀408 11.9฀ AS฀ÓXIDO฀NÍTRICO฀SINTASES:฀PROPRIEDA-

DES฀E฀FUNÇÃO,฀425
11.2฀ CITOCROMOS฀P450:฀PROPRIEDADES฀E฀FUN-
ÇÃO,฀408 11.10฀ISOFORMAS฀DE฀ÓXIDO฀NÍTRICO฀SINTASES฀E฀
FUNÇÕES฀FISIOLÓGICAS,฀428
11.3฀ CICLO฀DE฀REAÇÃO฀DO฀CITOCROMO฀P450,฀ ฀ NOSI,฀428
409 ฀ NOSII,฀429
฀ NOSIII,฀430
11.4฀ SISTEMAS฀DE฀TRANSPORTE฀DE฀ELÉTRONS฀
DOS฀CITOCROMOS฀P450,฀410 BIBLIOGRAFIA,฀432
฀ NADPH-citocromo฀p450฀redutase฀é฀a฀flavopro-
฀ ฀ teína฀doadora฀de฀elétrons฀no฀retículo฀endo-฀ QUESTÕES฀E฀RESPOSTAS,฀434
฀ plasmático,฀410
฀ NADPH-adrenodoxina฀redutase฀é฀a฀flavoproteína฀฀ CORRELAÇÕES฀CLÍNICAS
฀ doadora฀de฀elétrons฀em฀mitocôndrias,฀411 ฀ 11.1฀ Hiperplasia฀Adrenal฀Congênita:฀Deficiência฀฀
฀ de฀CYP21A2,฀416
11.5฀ CITOCROMO฀P450:฀NOMENCLATURA฀E฀ISO- ฀ 11.2฀ Produção฀de฀Hormônios฀Esteróides฀Duran-฀
FORMAS,฀412 ฀ te฀a฀Gestação,฀418
฀ 11.3฀ Inibição฀de฀Citocromo฀P450:฀Interações฀฀
11.6฀ CITOCROMOS฀P450:฀SUBSTRATOS฀E฀FUN- ฀ Droga-Droga฀e฀Efeitos฀Adversos,฀420
ÇÕES฀FISIOLÓGICAS,฀413 ฀ 11.4฀ Papel฀de฀CYP2E1฀em฀Toxicidade฀Hepática฀฀
฀ Induzida฀por฀Acetaminofen,฀422
11.7฀ CITOCROMOS฀P450฀PARTICIPAM฀DE฀SÍNTESE฀ ฀ 11.5฀ Indução฀de฀Citocromo฀P450:฀Interações฀฀
DE฀HORMÔNIOS฀ESTERÓIDES฀E฀DE฀OXIGENA- ฀ Droga-Droga฀e฀Efeitos฀Adversos,฀423
ÇÃO฀DE฀COMPOSTOS฀ENDÓGENOS,฀414 ฀ 11.6฀ Polimorfismos฀Genéticos฀de฀Enzimas฀P450,฀
฀ Citocromos฀P450฀oxidam฀substratos฀lipofílicos฀฀ ฀ 426
฀ exógenos,฀417 ฀ 11.7฀ Mecanismo฀de฀Ação฀de฀Sildenafil,฀430
฀ 11.8฀ Aspectos฀Clínicos฀da฀Produção฀de฀Óxido฀฀
11.8฀ INDUÇÃO฀E฀INIBIÇÃO฀DE฀CITOCROMO฀P450,฀ ฀ Nítrico,฀431
423 ฀ 11.9฀ História฀da฀Nitroglicerina,฀432
฀ Interações฀droga-droga,฀423
฀ Polimorfismos฀genéticos฀de฀citocromo฀P450,฀425
฀ Inibição฀terapêutica฀de฀citocromo฀P450,฀425

BioQ.11 407 22.01.07 17:15:52

 412฀฀฀|฀฀฀PARTE฀3฀฀FUNÇÕES฀DE฀PROTEÍNAS

|
11.5฀ ฀ CITOCROMO฀P450:฀
NOMENCLATURA฀E฀
ISOFORMAS
Devido฀ao฀grande฀número฀de฀citocromos฀P450฀que฀fo-
ram฀identificados฀(mais฀de฀4.500฀em฀janeiro฀de฀2005),฀
um฀ sistema฀ de฀ classificação฀ das฀ enzimas฀ em฀ grupos฀
funcionais฀e฀nomenclatura฀foi฀desenvolvido.฀O฀sistema฀
escolhido฀é฀baseado฀em฀classificação฀de฀acordo฀com฀a฀
identidade฀relativa฀das฀seqüências฀de฀aminoácidos฀das฀
enzimas.฀ A฀ superfamília฀ dos฀ citocromos฀ P450฀ é฀ assim฀
dividida฀inicialmente฀em฀famílias,฀nas฀quais฀a฀identida-
de฀da฀seqüência฀de฀aminoácidos฀dos฀membros฀é฀superior฀
a฀40%.฀A฀família฀é฀designada฀pelo฀prefixo฀“CYP”,฀em฀re-
ferência฀a฀cytochrome฀P450,฀seguida฀por฀um฀numeral฀
arábico฀(p.฀ex.,฀CYP1,฀CYP2,฀CYP3,฀etc).฀As฀famílias฀são฀
ainda฀divididas฀em฀subfamílias,฀nas฀quais฀a฀identidade฀
de฀seqüência฀de฀aminoácidos฀dos฀membros฀é฀superior฀a฀
55%.฀A฀subfamília฀é฀identificada฀por฀uma฀letra฀maiús-
cula฀ arábica฀ (p.฀ ex.,฀ CYP1A,฀ CYP1B,฀ CYP1C,฀ etc.).฀ Os฀
membros฀individuais฀de฀cada฀subfamília฀são฀então฀nu-
merados฀na฀ordem฀em฀que฀foram฀identificados฀(p.฀ex.,฀
CYP1A1,฀ CYP1A2,฀ CYP1A3,฀ etc.).฀ Embora฀ citocromos฀
P450฀ sejam฀ enzimas,฀ os฀ termos฀ “isoenzima”฀ ou฀ “isozi-
ma”฀não฀são฀usados฀para฀descrever฀essas฀proteínas;฀em฀
ver฀disso,฀o฀termo฀“forma”ou฀“isoforma”฀é฀usado.
Tabelas฀11.1฀e฀11.2฀relacionam฀as฀isoformas฀conheci-
das฀de฀citocromos฀P450฀humanos.฀Há฀57฀isoformas฀divi-
didas฀em฀18฀famílias฀e฀41฀subfamílias.฀O฀genoma฀humano฀
codifica฀58฀pseudogenes฀CYP฀que฀não฀formam฀proteína฀
ativa.฀Tabela฀11.1฀lista฀as฀isoformas฀que฀utilizam฀prima-
riamente฀compostos฀exógenos฀(p.฀ex.,฀drogas฀e฀xenobió-
ticos);฀cada฀isoforma฀metaboliza฀uma฀ampla฀variedade฀de฀
substratos.฀Tabela฀11.2฀lista฀as฀isoformas฀envolvidas฀em฀
metabolismo฀ de฀ compostos฀ endógenos;฀ essas฀ isoformas฀
geralmente฀ reconhecem฀ apenas฀ um฀ ou฀ dois฀ substratos฀
específicos,฀e฀estes฀são฀apresentados฀na฀tabela.

TABELA฀11.1฀Citocromos฀P450฀Humanos฀Envolvidos฀em฀Metabolismo฀Exógeno
Família฀ Substrato(s)฀฀ Inibidor(es)฀ Indutor(es)฀
Isoformas
CYP Selecionado(s) Selecionado(s) Selecionado(s)

1 1A1 Benzo(a)pireno,฀diclofenac Cetoconazol Benzo(a)pireno

1A2 Benzo(a)pireno,฀warfarina Ciprofloxin Erva฀de฀São฀João

1B1 Benzo(a)pireno,฀aflatoxina฀B1 Tamoxifen NCa

2 2A6 Acetaminofen,฀nicotina Canabidol Dexametasona

2A7 NC NC NC

2A13 Hexametilfosforamida NC NC

2B6 Diazepam,฀mefenitoína Cetoconazol Rifampicina

2C8 Taxol,฀ibuprofen,฀verapamil Quinina Fenobarbital

2C9 Amitriptilina,฀naproxen Sulfafenazol Rifampicina

2C18 Imipramina,฀metadona NC Rifampicina

2C19 Diazepan,฀omeprazol Isoniazida Rifampicina

2D6 Fluvastatina,฀codeína,฀risperidona Quinidona Dimetilsulfóxido

2E1 Acetaminofen,฀halotano Watercress Isoniazida,฀etanol

2F1 Naftaleno,฀estireno NC NC

2J2 Bufuralol NC NC

2R1,฀2S1 NC NC NC

2U1,฀2W1 NC NC NC

3 3A4 Eritromicina,฀nifedipina,฀codeína,฀warfarina,฀ Troleandomicina,฀ Cortisol,฀rifampina,฀

terfenadina cetoconazol fenobarbital

3A5 Verapamil,฀prevastatina NC Dexametazona

3A7 Ácido฀retinóico,฀codeína,฀cortisol DHEA NC

3A43 Testosterona NC NC

a
฀NC,฀não฀bem฀caracterizado.

BioQ.11 412 22.01.07 17:16:01

 420฀฀฀|฀฀฀PARTE฀3฀฀FUNÇÕES฀DE฀PROTEÍNAS
Metabolismo de Terfenadina Acetaminofen,฀comumente฀usado฀como฀analgésico฀
e฀antipirético,฀é฀convertido฀por฀CYP2E1฀em฀N-acetil-p-
OH Terfenadina
(Seldane) benzoquinoneimina฀(NAPQ1),฀um฀composto฀muito฀rea-
HO N
tivo฀levando฀a฀aductos฀protéicos,฀estresse฀oxidativo฀e฀to-
xicidade.฀Normalmente,฀acetaminofen฀é฀primariamente฀
metabolizado฀ por฀ vias฀ de฀ glucuronidação฀ e฀ sulfatação฀
CYP3A4 em฀conjugados฀polares,฀inativos,฀que฀são฀facilmente฀ex-
cretados฀(Figura฀11.14,฀vias฀superior฀e฀inferior,฀respec-
OH Fexofenadina tivamente).฀Acetaminofen฀é฀também฀metabolizado฀por฀
(Allegra)
HO N CYP2E1฀em฀NAPQ1฀muito฀reativo฀(Figura฀11.14,฀via฀do฀
meio).฀A฀quantidade฀de฀acetaminofen฀que฀é฀metaboliza-
da฀por฀CYP2E1฀é฀normalmente฀baixa,฀em฀comparação฀
CO2H
com฀glucuronidação฀e฀sulfatação.฀As฀pequenas฀quanti-
FIGURA฀11.12 dades฀de฀NAPQ1฀formadas฀são฀rapidamente฀conjugadas฀
O฀metabolismo฀de฀terfenadina฀em฀fexofenadina,฀o฀composto฀ por฀glutationa฀(ver฀p.฀764)฀em฀um฀metabólito฀não-tóxico.฀
bioativo.

CORRELAÇÃO฀CLÍNICA฀11.3
Inibição฀de฀Citocromo฀P450:฀Interações฀Droga-Droga฀e฀Efeitos฀Adversos

Os฀ papéis฀ que฀ citocromos฀ P450฀ desempenham฀ no฀ cardíacos฀sérios฀surgiram,฀porque฀a฀droga฀parental฀

metabolismo฀ de฀ drogas฀ e฀ as฀ sérias฀ conseqüências฀
das฀ interações฀ droga-droga฀ foram฀ demonstrados฀
com฀ clareza฀ para฀ duas฀ drogas,฀ terfenadina฀ (Selda-
ne)฀e฀cisapride฀(Propulside),฀quando฀seu฀metabolis-
mo฀foi฀inibido฀por฀outras฀drogas.฀Uma฀pequena฀por-
centagem฀dos฀usuários฀teve฀efeitos฀adversos฀graves,฀
que฀forçaram฀seus฀fabricantes฀e฀o฀Food฀and฀Drug฀
Administration฀(FDA)฀a฀divulgar฀avisos฀de฀que฀es-
sas฀drogas฀não฀podem฀ser฀tomadas฀juntamente฀com฀
outras฀drogas฀que฀inibem฀CYP3A4.฀A฀gravidade฀dos฀
efeitos฀ adversos฀ forçou฀ o฀ FDA฀ a฀ remover฀ ambas฀ as฀
drogas฀do฀mercado.
O฀FDA฀aprovou฀terfenadina,฀um฀anti-histamínico฀
de฀ segunda฀ geração,฀ em฀ 1985,฀ para฀ tratar฀ alergias฀
sazonais.฀ Terfenadina฀ é฀ rapidamente฀ metabolizada฀
no฀fígado฀por฀CYP3A4฀em฀fexofenadina,฀como฀mos-
tra฀ a฀ Figura฀ 11.12,฀ resultando฀ em฀ baixos฀ níveis฀ da฀
droga฀original฀logo฀depois฀da฀ingestão,฀mas฀os฀efei-
tos฀terapêuticos฀do฀terfenadina฀são฀realmente฀cau-
sados฀por฀fexofenadina.฀Como฀muitas฀outras฀drogas฀
são฀substratos฀ou฀inibidores฀de฀CYP3A4,฀o฀metabo-
lismo฀ de฀ terfenadina฀ é฀ potencialmente฀ passível฀ de฀
inibição.฀Indivíduos฀que฀tomaram฀terfenadina฀com฀o฀
antibiótico฀macrolídeo฀eritromicina,฀ou฀com฀o฀agente฀
antifúngico฀cetoconazol,฀ambos฀fortes฀inibidores฀de฀
CYP3A4,฀apresentaram฀níveis฀plasmáticos฀significa-
tivamente฀elevados฀de฀terfenadina.฀Numa฀pequena฀
porcentagem฀de฀usuários฀de฀terfenadina,฀problemas฀
causou฀ alteração฀ nos฀ canais฀ cardíacos฀ de฀ potássio฀
e฀aumentou฀o฀risco฀de฀uma฀taquicardia฀ventricular฀
rara,฀chamada฀Torsade฀de฀Pointes.฀Alguns฀indiví-
duos฀ morreram฀ de฀ problemas฀ cardíacos฀ que฀ se฀ de-
senvolveram฀ depois฀ que฀ tomaram฀ terfenadina฀ com฀
eritromicina฀ou฀cetoconazol.฀Como฀as฀propriedades฀
terapêuticas฀ da฀ terfenadina฀ estão฀ associadas฀ com฀
seu฀metabólito฀não-tóxico฀fexofenadina,฀o฀fabrican-
te฀testou฀fexofenadina฀como฀um฀novo฀medicamento฀
e฀ buscou฀ aprovação฀ do฀ FDA฀ para฀ esse฀ metabólito,฀
agora฀comercializado฀como฀Allegra.
Cisapride฀ foi฀ aprovado฀ em฀ 1993฀ para฀ pacientes฀
que฀sofrem฀de฀azia฀noturna,฀que฀resulta฀de฀doença฀
de฀refluxo฀gastro-esofágico฀ou฀GERD.฀A฀eliminação฀
dessa฀droga฀do฀corpo฀depende฀do฀seu฀metabolismo฀
por฀CYP3A4,฀e฀quando฀administrada฀sozinha฀ou฀com฀
outras฀drogas฀que฀não฀inibem฀CYP3A4,฀a฀droga฀ori-
ginal฀não฀se฀acumula฀no฀plasma.฀Entretanto,฀quan-
do฀tomada฀com฀outras฀drogas฀que฀são฀substratos฀ou฀
inibidores฀de฀CYP3A4,฀o฀metabolismo฀de฀cisapride฀é฀
reduzido฀ e฀ acumula-se฀ com฀ administrações฀ subse-
qüentes.฀ Em฀ alguns฀ indivíduos,฀ níveis฀ aumentados฀
de฀cisapride฀causam฀arritmias฀cardíacas฀e,฀por฀volta฀
do฀final฀de฀1999,฀anomalias฀de฀ritmo฀cardíaco฀foram฀
relatados฀em฀341฀pacientes฀que฀tomavam฀cisapride,฀
resultando฀em฀80฀mortes.฀Então,฀o฀fabricante฀de฀ci-
sapride฀parou฀de฀comercializar฀essa฀droga฀nos฀Esta-
dos฀Unidos,฀após฀2000.

Fonte:฀Terfenadine:฀proposal฀to฀withdraw฀approval฀of฀two฀new฀drugs฀applications฀and฀one฀abbreviated฀new฀drug฀
application.฀Fed.฀Reg.฀62:1889,฀1997.฀(Esse฀documento฀pode฀ser฀visto฀na฀página฀da฀internet฀do฀Federal฀Register฀em฀
http://www.access.gpo.gov/su_docs/aces/aces140.html);฀ e฀ Desta,฀ Z.,฀ Soukhova,฀ N.,฀ Mahal,฀ S.฀ K.฀ e฀ Flockhart,฀ D.฀ A.฀
Interactions฀of฀cisapride฀with฀the฀human฀cytochrome฀P450฀system:฀metabolism฀and฀inhibition฀studies.฀Drug฀Metab.฀
Dispos.฀28:789,฀2000.

BioQ.11 420 22.01.07 17:16:08

 428฀฀฀|฀฀฀PARTE฀3฀฀FUNÇÕES฀DE฀PROTEÍNAS

|
11.10฀ ฀ ISOFORMAS฀DE฀
ÓXIDO฀NÍTRICO฀
SINTASES฀E฀FUNÇÕES฀
FISIOLÓGICAS
Há฀três฀isoformas฀principais฀de฀NOS฀–฀neuronal฀(NOSI฀
ou฀ nNOS),฀ indutível฀ (NOSII฀ ou฀ iNOS)฀ e฀ endotelial฀
(NOSIII฀ ou฀ eNOS)฀ –฀ embora฀ variações฀ em฀ cada฀ um฀
desses฀tipos฀ocorram฀em฀muitos฀organismos฀diferentes.฀
Propriedades฀dessas฀isoformas฀são฀resumidas฀na฀Tabe-
la฀11.4.
Muitas฀das฀funções฀fi฀siológicas฀de฀NO฀são฀mediadas฀
por฀ ativação฀ de฀ guanilato฀ ciclase฀ solúvel,฀ uma฀ proteí-
na฀ heterodimérica฀ (α/β)฀ contendo฀ heme฀ que฀ converte฀
GTP฀em฀cGMP.฀cGMP฀é฀um฀segundo฀mensageiro฀envol-
vido฀em฀muitas฀cascatas฀de฀transdução฀de฀sinal฀(ver฀p.฀
518).฀ A฀ forma฀ inativa฀ da฀ guanilato฀ ciclase฀ solúvel฀ tem฀
um฀ heme฀ penta-coordenado,฀ ligado฀ por฀ uma฀ histidina฀
à฀subunidade฀β.฀NO฀liga-se฀à฀sexta฀posição฀para฀formar฀
um฀ heme฀ hexa-coordenado฀ e฀ causa฀ quebra฀ da฀ ligação฀
heme-histidina,฀gerando฀o฀complexo฀nitrosil฀ativo,฀pen-
ta-coordenado,฀ da฀ guanilato฀ ciclase฀ solúvel฀ (Figura฀
11.19).฀Ativação฀da฀guanilato฀ciclase฀solúvel฀causa฀au-
mento฀de฀até฀400฀vezes฀na฀taxa฀de฀formação฀de฀cGMP.฀
Os฀níveis฀de฀cGMP฀são฀regulados฀por฀um฀equilíbrio฀entre฀
atividade฀de฀guanilato฀ciclase฀e฀fosfodiesterase฀(PDE),฀
particularmente฀PDE5,฀que฀é฀específi฀ca฀para฀cGMP,฀que฀
hidrolisa฀cGMP฀em฀5’-GMP,฀desligando฀o฀sinal.
NOSI
NOSI฀ é฀ encontrada฀ primariamente฀ em฀ músculo฀ es-
quelético฀ e฀ em฀ neurônios฀ tanto฀ do฀ sistema฀ nervoso฀
central฀como฀do฀periférico.฀É฀uma฀enzima฀solúvel,฀em-
bora฀ se฀ localize฀ na฀ membrana฀ por฀ interações฀ proteí-
na-proteína฀com฀uma฀gama฀de฀proteínas฀regulatórias฀
e฀de฀localização.฀É฀expressa฀constitutivamente,฀o฀que฀
signifi฀ca฀ que฀ não฀ é฀ normalmente฀ induzida฀ em฀ nível฀
transcripcional,฀e฀é฀ativada฀pelo฀infl฀uxo฀de฀cálcio.฀No฀
caso฀de฀NOSI,฀e฀NOSIII,฀ver฀a฀seguir),฀calmodulina฀não฀
está฀ ligada฀ à฀ enzima฀ nos฀ níveis฀ intracelulares฀ basais฀
de฀ cálcio.฀ Requer฀ um฀ infl฀uxo฀ de฀ cálcio฀ para฀ elevar฀ a฀
concentração฀de฀cálcio,฀permitindo฀ligação฀da฀calmo-
dulina,฀assim฀ativando฀a฀formação฀de฀NO.฀A฀quantida-
de฀de฀NO฀sintetizado฀no฀estado฀ativado฀é฀muito฀baixa฀
–฀isto฀é,฀picomolar.฀O฀NO฀produzido฀funciona฀como฀um฀
neurotransmissor฀nos฀sistemas฀nervosos฀central฀e฀pe-
riférico.฀No฀músculo฀esquelético,฀NO฀também฀serve฀de฀
mediador฀da฀força฀contrátil.
No฀ sistema฀ nervoso฀ central,฀ NO฀ é฀ produzido฀ geral-
mente฀por฀NOSI฀no฀neurônio฀pós-sináptico,฀mas฀difun-
de฀ de฀ volta฀ na฀ sinapse฀ para฀ o฀ neurônio฀ pré-sináptico.฀
Síntese฀de฀NO฀é฀regulada฀pelo฀infl฀uxo฀de฀cálcio฀por฀ca-
nais฀dependentes฀de฀receptor฀–฀isto฀é,฀após฀estimulação฀
pós-sináptica฀ de฀ receptores฀ de฀ N-metil-D-aspartado฀
(NMDA)฀pelo฀neurotransmissor฀excitatório฀glutamato.฀
Guanilato฀ciclase฀é฀ativada฀por฀NO,฀produzindo฀cGMP,฀
que฀regula฀síntese฀dos฀neurotransmissores฀norepinefri-
na฀ e฀ glutamato,฀ aumentando฀ assim฀ a฀ produção฀ de฀ NO฀
(Figura฀11.20).฀NO฀está฀implicado฀em฀sinalização฀neu-
ral,฀neurotoxicidade,฀plasticidade฀neuronal,฀aprendiza-
do฀e฀memória,฀e฀percepção฀de฀dor.
Além฀de฀seus฀domínios฀oxigenase฀e฀redutase,฀NOSI฀
tem฀um฀domínio฀PDZ฀N-terminal฀de฀300฀aminoácidos,฀
que฀medeia฀sua฀interação฀com฀outras฀proteínas.฀No฀sis-
tema฀nervoso฀central,฀o฀domínio฀PDZ฀da฀NOSI฀interage฀
com฀ a฀ proteína฀ de฀ densidade฀ pós-sináptica฀ PSD-95.฀ O฀
receptor฀NMDA฀também฀interage฀com฀PSD-95,฀aproxi-
mando฀ muito฀ NOSI฀ e฀ o฀ receptor฀ NMDA,฀ de฀ modo฀ que฀
NOSI฀fi฀ca฀diretamente฀exposta฀ao฀cálcio฀entrando฀pelo฀
canal฀iônico฀do฀receptor฀NMDA฀ativado.

������� ������ ����� FIGURA฀11.19

His
Ativação฀da฀guanilato฀ciclase฀solúvel฀por฀NO.
His
His Redesenhado฀com฀base฀em฀fi฀gura฀de฀Bellamy,฀T.฀C.฀e฀
�1 �1 �1 �1 �1 �1 Garthwaite,฀J.฀The฀receptor-like฀properties฀of฀nitric฀
Fe2+
2+ oxide-activated฀soluble฀guanylate฀cyclase฀in฀intact฀
Fe
Fe2+ cells.฀Mol.฀Cell.฀Biochem.฀230:165,฀2002.
NO
NO
NO

TABELA฀11.4฀Propriedades฀das฀Isoformas฀de฀NOS
Propriedade NOSI NOSII NOSIII

Massa฀molecular 160฀kDa 130฀kDa 135฀kDa

Expressão Constitutiva Indutível Constitutiva

Fração฀celular Citoplasmática Citoplasmática Ligada฀à฀membrana

Dependência฀de฀infl฀uxo฀de฀cálcio Dependente Independente Dependente

Ação฀fi฀siológica Neurotransmissão Citotoxicidade Vasodilatação

BioQ.11 428 22.01.07 17:16:19

 436฀฀฀|฀฀฀PARTE฀3฀฀FUNÇÕES฀DE฀PROTEÍNAS
PARTE฀3฀FUNÇÕES฀DE฀PROTEÍNAS
12
MEMBRANAS฀BIOLÓGICAS:฀
ESTRUTURA฀E฀TRANSPORTE฀
EM฀MEMBRANAS
Thomas฀M.฀Devlin
12.1฀ VISÃO฀GERAL,฀437
12.2฀ COMPOSIÇÃO฀QUÍMICA฀DE฀MEMBRANAS,฀
438
฀ Lipídeos฀são฀importantes฀componentes฀de฀
฀ ฀ membranas,฀438
฀ Glicerofosfolipídeos฀são฀os฀lipídeos฀mais฀
฀ ฀ abundantes฀de฀membranas,฀438
฀ ฀ Glicerofosfolipídeos฀são฀anfipáticos,฀441
฀ Esfingolipídeos฀estão฀presentes฀em฀membranas,฀฀
฀ 441
฀ Colesterol฀é฀um฀importante฀componente฀de฀฀
฀ membranas฀plasmáticas,฀443
฀ Composição฀em฀lipídeos฀varia฀entre฀membranas,฀฀
฀ 443
฀ Proteínas฀de฀membrana,฀444
฀ Carboidratos฀de฀membranas฀são฀parte฀de฀
฀ ฀ glicoproteínas฀ou฀glicolipídeos,฀445
12.3฀ MICELAS,฀BICAMADAS฀LIPÍDICAS฀E฀LIPOS-
SOMOS,฀445
฀ Lipídeos฀formam฀estruturas฀vesiculares,฀445
฀ ฀ Bicamadas฀lipídicas฀sintéticas฀e฀
฀ ฀ ฀ lipossomos,฀445
฀ Propriedades฀gerais฀de฀bicamadas฀lipídicas,฀446
12.4฀ ESTRUTURA฀DE฀MEMBRANAS฀BIOLÓGICAS,฀
447
฀ Modelo฀do฀mosaico฀fluido฀de฀membranas฀
฀ ฀ biológicas,฀447
฀ Lipídeos฀são฀distribuídos฀assimetricamente฀em฀฀
฀ membranas,฀448
฀ Proteínas฀integrais฀de฀membrana฀ficam฀
฀ ฀ mergulhadas฀na฀bicamada฀lipídica,฀449
BioQ.12 436
฀ Proteínas฀periféricas฀de฀membrana,฀451
฀ Proteínas฀de฀membrana฀ancoradas฀por฀lipídeos,฀฀
฀ 451
฀ Proteínas฀e฀lipídeos฀difundem฀em฀lamelas฀da฀฀
฀ membrana,฀452
฀ Microdomínios฀de฀complexos฀lipídeo-proteína฀฀
฀ estão฀presentes฀em฀membranas,฀454
฀ Natureza฀dinâmica฀de฀membranas,฀455
12.5฀ MOVIMENTO฀DE฀MOLÉCULAS฀ATRAVÉS฀DE฀
MEMBRANAS,฀456
฀ Algumas฀moléculas฀difundem฀através฀de฀
฀ ฀ bicamadas฀lipídicas,฀456
฀ Classificação฀e฀nomenclatura฀de฀sistemas฀de฀฀
฀ deslocamento฀por฀membrana,฀457
12.6฀ CANAIS฀DE฀MEMBRANAS,฀458
฀ Classificação฀dos฀canais฀de฀membrana,฀458
฀ Características฀dos฀canais฀de฀membrana,฀459
฀ Aquaporinas฀e฀aquagliceroporinas,฀459
฀ Canais฀iônicos฀de฀Na+,฀Ca 2+,฀K+฀e฀Cl–฀
฀ ฀ controlados฀por฀voltagem,฀460
฀ Canal฀nicotínicos฀de฀acetilcolina฀(nAChR),฀464
฀ Junções฀comunicantes฀(gap฀junctions)฀e฀
฀ ฀ canais฀do฀poro฀nuclear,฀465
12.7฀ TRANSPORTADORES฀DE฀MEMBRANA,฀466
฀ Quatro฀etapas฀no฀transporte฀de฀moléculas฀de฀฀
฀ soluto,฀466
฀ Energética฀de฀sistemas฀de฀transporte฀de฀
฀ ฀ membrana,฀467
12.8฀ TRANSPORTE฀PASSIVO,฀468
22.01.07 17:18:53
 CAPÍTULO฀12฀฀MEMBRANAS฀BIOLÓGICAS:฀ESTRUTURA฀E฀TRANSPORTE฀EM฀MEMBRANAS฀฀฀|฀฀฀445

Carboidratos฀de฀Membranas฀ CH2OH
O
São฀Parte฀de฀Glicoproteínas฀ou฀ H
H
H

Glicolipídeos OH H
HO OH
Carboidratos฀ estão฀ presentes฀ em฀ membranas฀ como฀
oligossacarídeos฀ covalentemente฀ ligados฀ a฀ proteínas฀ H HNCOCH3
(glicoproteínas)฀e฀a฀lipídeos฀(glicolipídeos).฀Os฀açú- N-Acetil-�-D-glucosamina
cares฀ nos฀ oligossacarídeos฀ incluem฀ glicose,฀ galactose,฀
manose,฀ fucose,฀ N-acetilgalactosamina,฀ N-acetilglu- CH2OH

cosamina฀ e฀ ácido฀ N-acetilneuramínico฀ (ácido฀ siálico)฀ O

HO H
(Figura฀12.18฀e฀Apêndice,฀para฀estruturas).฀Estruturas฀ H
de฀glicoproteínas฀e฀glicolipídeos฀são฀apresentadas฀nas฀ OH H
H OH
páginas฀638฀e฀708,฀respectivamente.฀O฀carboidrato฀fica฀
na฀ superfície฀ extracelular฀ da฀ membrana฀ plasmática฀ e฀ H HNCOCH3
na฀superfície฀luminal฀do฀retículo฀endoplasmático.฀Fun-
N-Acetil-�-D-galactosamina
ções฀de฀carboidratos฀ligados฀a฀proteínas฀em฀membranas฀
incluem฀ reconhecimento฀ célula-célula,฀ adesão฀ e฀ ação฀ H
como฀receptor.฀Há฀pouco฀ou฀nenhum฀carboidrato฀livre฀ O
H H
em฀membranas. CH3

|
H HO
HO OH
12.3฀ ฀MICELAS,฀BICAMADAS฀
LIPÍDICAS฀E฀ OH

�-L-Fucose
H

LIPOSSOMOS
Lipídeos฀Formam฀Estruturas฀
Vesiculares
A฀característica฀estrutural฀básica฀das฀membranas฀deve-
se฀às฀propriedades฀físico-químicas฀dos฀glicerofosfolipí-
deos฀e฀esfingolipídeos.฀Esses฀compostos฀anfipáticos,฀com฀
uma฀cabeça฀hidrofílica฀e฀uma฀cauda฀hidrofóbica฀(Figura฀
12.19a),฀interagem฀em฀sistemas฀aquosos฀in฀vitro฀para฀
formar฀esferas,฀chamadas฀micelas฀(Figura฀12.19b).฀Os฀
grupos฀das฀cabeças฀polares฀ficam฀no฀lado฀de฀fora฀da฀es-
fera,฀ enquanto฀ as฀ caudas฀ hidrofóbicas฀ interagem฀ para฀
excluir฀água.฀Micelas฀têm฀apenas฀uma฀superfície฀polar,฀
que฀fica฀no฀lado฀apresentado฀para฀a฀fase฀aquosa.฀Mice-
las฀ podem฀ ser฀ preparadas฀ contendo฀ um฀ único฀ lipídeo฀
ou฀uma฀mistura฀de฀lipídeos.฀A฀concentração฀de฀lipídeos฀
necessária฀para฀formação฀de฀micelas฀é฀a฀concentração฀
micelar฀crítica.฀Formação฀de฀micelas฀também฀depen-
de฀da฀temperatura฀e,฀se฀uma฀mistura฀de฀lipídeos฀estiver฀
presente,฀da฀razão฀entre฀as฀concentrações฀dos฀diferen-
tes฀lipídeos฀(ver฀p.฀1062).฀A฀estrutura฀da฀micela฀é฀muito฀
estável,฀graças฀às฀interações฀hidrofóbicas฀entre฀cadeias฀
hidrocarbônicas฀e฀atração฀dos฀grupos฀polares฀de฀cabe-
ça฀pela฀água.฀Micelas฀são฀importantes฀em฀digestão฀in-
testinal฀e฀absorção฀de฀lipídeos฀(ver฀p.฀1031).
Bicamadas฀Lipídicas฀Sintéticas฀e฀
Lipossomos
Dependendo฀ das฀ condições฀ experimentais,฀ lipídeos฀
anfipáticos฀ como฀ glicerofosfolipídeos฀ formam฀ uma฀ es-
H
O
H O
CH3 C N HCOH COOH
HCOH
CH2OH
H H H OH
OH H
II
Ácido N-Acetil-D-neuramínico
FIGURA฀12.18
Estruturas฀de฀alguns฀carboidratos฀de฀membrana.
trutura฀ em฀ bicamada,฀ com฀ duas฀ camadas฀ de฀ lipídeos฀
formando฀ uma฀ estrutura฀ na฀ qual฀ há฀ contato฀ mínimo฀
das฀ cadeias฀ hidrocarbônicas฀ com฀ água.฀ Os฀ grupos฀ da฀
cabeça฀polar฀ficam฀na฀interface฀entre฀o฀meio฀aquoso฀e฀
o฀ lipídeo,฀ e฀ as฀ caudas฀ hidrofóbicas฀ interagem,฀ criando฀
um฀ambiente฀interior฀hidrofóbico฀que฀exclui฀água฀(Fi-
gura฀12.19c).฀Esta฀conformação฀em฀bicamada฀é฀a฀estru-
tura฀lipídica฀básica฀de฀todas฀as฀membranas฀biológicas.฀
Bicamadas฀lipídicas฀são฀extremamente฀estáveis,฀sendo฀
mantidas฀juntas฀por฀forças฀hidrofóbicas฀das฀cadeias฀hi-
drocarbônicas฀e฀interações฀iônicas฀dos฀grupos฀carrega-
dos฀das฀cabeças฀com฀água.฀Bicamadas฀lipídicas฀selam-
se฀automaticamente,฀se฀rompidas.
Uma฀ bicamada฀ lipídica,฀ em฀ condições฀ adequadas,฀
fechar-se-á฀ sobre฀ si฀ mesma฀ para฀ formar฀ uma฀ vesícula฀
esférica฀ que฀ separa฀ o฀ ambiente฀ externo฀ de฀ um฀ com-
partimento฀ aquoso฀ interno.฀ Tais฀ vesículas,฀ chamadas฀
lipossomos฀ (Figura฀ 12.19d),฀ são฀ preparadas฀ usando฀
lipídeos฀purificados฀e฀lipídeos฀extraídos฀de฀membranas฀

BioQ.12 445 22.01.07 17:19:06

 462฀฀฀|฀฀฀PARTE฀3฀฀FUNÇÕES฀DE฀PROTEÍNAS

CORRELAÇÃO฀CLÍNICA฀12.4฀
O฀Rim฀de฀Mamíferos฀e฀
Aquaporinas
O฀papel฀primário฀do฀rim฀é฀regular฀o฀pH฀do฀sangue,฀
eliminar฀produtos฀tóxicos฀do฀metabolismo฀e฀regular฀
equilíbrio฀de฀água฀do฀corpo.฀Cada฀rim฀contém฀cer-
ca฀de฀um฀milhão฀de฀néfrons,฀as฀unidades฀funcionais฀
multicelulares฀do฀tecido.฀Cada฀néfron฀tem฀várias฀re-
giões฀distintas฀(ver฀diagrama),฀cada฀uma฀com฀fun-
ções฀muito฀específicas฀no฀processamento฀do฀filtrado฀
do฀ sangue,฀ que฀ ocorre฀ no฀ glomérulo.฀ Uma฀ grande฀
quantidade฀de฀sangue฀é฀filtrada฀(cerca฀de฀150฀L/dia),฀
e฀a฀água฀deve฀ser฀reabsorvida฀no฀néfron฀e฀ductos฀co-
letores,฀ exceto฀ cerca฀ de฀ 1,5฀ L/dia,฀ que฀ é฀ excretado฀
como฀urina.฀Aquaporinas฀são฀responsáveis฀pela฀re-
cuperação฀de฀água฀do฀filtrado฀à฀medida฀que฀flue฀pelo฀
lúmen฀do฀néfron.฀Como฀indicado฀no฀diagrama,฀pelo฀
em฀isquemia฀tissular.฀Em฀algumas฀condições,฀como฀
insuficiência฀cardíaca฀congestiva,฀cirrose฀hepática฀e฀
gravidez,฀há฀um฀aumento฀na฀quantidade฀de฀AQP2฀no฀
rim,฀levando฀a฀uma฀expansão฀no฀volume฀líquido฀ex-
tracelular.฀Seres฀humanos฀sem฀atividade฀de฀AQP1฀do฀
rim฀ aparentemente฀ não฀ têm฀ problemas฀ detectáveis฀
em฀condições฀normais,฀mas฀podem฀ter฀em฀condições฀
de฀estresse฀(desidratação).฀Espera-se฀que฀condições฀
clínicas฀adicionais฀venham฀a฀ser฀atribuídas฀a฀altera-
ções฀nas฀outras฀aquaporinas.
Túbulo contornado
distal
Túbulo de
conexão
Glomérulo

menos฀sete฀diferentes฀isoformas฀de฀aquaporinas,฀lo-
calizadas฀em฀diferentes฀pontos฀ao฀longo฀do฀néfron฀e฀ Água
dos฀ductos฀coletores,฀são฀responsáveis฀pela฀reabsor-
ção฀de฀água. Tubo proximal +ADH
AQP 1, 7, 8 água
Existem฀várias฀doenças฀renais฀nas฀quais฀a฀reab-
Água
sorção฀de฀água฀é฀anormal฀e฀nas฀quais฀a฀expressão฀e฀
a฀função฀das฀aquaporinas฀foi฀investigada.฀Vários฀mo-
delos฀ animais฀ dessas฀ condições฀ foram฀ úteis฀ na฀ de-
Água
terminação฀da฀causa฀de฀algumas฀dessas฀condições.฀ Dutos coletores
Alça descendente
Baixos฀níveis฀de฀AQP2฀e฀poliúria฀(excreção฀excessi- AQP 2, 3, 4, 6, 8
fina
va฀de฀urina)฀são฀encontrados฀em฀diabetes฀insipidus฀ AQP 1
nefrogênica฀adquirida฀(NDI),฀hipocalemia฀adquirida฀
Água
(baixo฀K+฀sangüíneo)฀e฀hipercalcemia฀(Ca 2+฀sangü-
íneo฀aumentado).฀Em฀muitos฀casos,฀NDI฀é฀causada฀ Alça
ascencente +ADH
por฀ incapacidade฀ do฀ rim฀ responder฀ a฀ vasopressina฀ fina água
(ver฀ p.฀ 897);฀ considera-se฀ que฀ isso฀ leve฀ a฀ uma฀ ex-
pressão฀ diminuída฀ e/ou฀ incorporação฀ de฀ AQP2฀ na฀ Urina final
membrana.฀Em฀outros฀casos฀de฀NDI,฀há฀um฀defeito฀
no฀ gene฀ da฀ aquaporina;฀ em฀ alguns฀ casos,฀ este฀ de-
feito฀leva฀a฀uma฀incapacidade฀do฀monômero฀formar฀ Localização฀de฀aquaporinas฀em฀cada฀segmento฀do฀
estruturas฀ tetraméricas฀ normais.฀ Níveis฀ de฀ AQP1,฀ néfron฀e฀ductos฀coletores฀do฀rim.
AQP2฀ e฀ AQP3฀ em฀ modelos฀ animais฀ são฀ reduzidos฀ Modificado฀a฀partir฀de฀figura฀das฀citações฀abaixo.

Fonte:฀King,฀L.฀S.฀e฀Yasui,฀M.฀Aquaporins฀and฀disease:฀Lessons฀from฀mice฀to฀humans.฀Trends฀Endocrinol.฀Metab.฀
13:355,฀2002.฀Nielsen,฀S.,฀Frokiaer,฀J.,฀Marples,฀D.,฀Kwon,฀T-H.,฀Agre,฀P.,฀e฀Knepper,฀M.฀A.฀Aquaporins฀in฀the฀kidney:฀
From฀molecules฀to฀medicine.฀Physiol.฀Rev.฀82:฀205,฀2002.฀King,฀L.฀S.,฀Kozono,฀K.,฀e฀Agre,฀P.฀From฀structure฀to฀disease:฀
The฀evolving฀tale฀of฀Aquaporin฀biology.฀Nature฀Rev.฀Mol.฀Cell฀Biol.฀5:687,฀2004.

acessórias฀(β,฀γ฀ou฀δ)฀não฀têm฀uma฀estrutura฀comum;฀ resíduo฀ carregado฀ positivamente฀ a฀ cada฀ terceira฀ posi-

algumas฀têm฀vários฀segmentos฀transmembrânicos฀e฀ou-
tras฀são฀proteínas฀periféricas฀localizadas฀inteiramente฀
intra฀ou฀extracelularmente.฀Estão฀geralmente฀envolvi-
das฀em฀regulação฀do฀canal;฀subunidades฀β฀podem฀inte-
ragir฀com฀proteínas฀de฀citoesqueleto฀e฀de฀matriz฀extra-
celular.฀Um฀modelo฀do฀canal฀de฀Na+฀é฀apresentado฀na฀
Figura฀12.38.฀Um฀segmento฀transmembrânico฀tem฀um฀
ção,฀ e฀ pode฀ servir฀ como฀ um฀ sensor฀ de฀ voltagem;฀ des-
locamento฀mecânico฀deste฀segmento฀pode฀levar฀a฀uma฀
mudança฀ conformacional฀ na฀ proteína,฀ resultando฀ em฀
abertura฀ do฀ canal.฀ Dois฀ mecanismos฀ muito฀ diferentes฀
foram฀sugeridos,฀mas฀nenhum฀provado,฀para฀como฀o฀ca-
nal฀e฀os฀domínios฀sensíveis฀a฀voltagem฀são฀acoplados฀e฀
iniciam฀ a฀ abertura฀ do฀ canal.฀ Canais฀ iônicos฀ voltagem-

BioQ.12 462 22.01.07 17:19:39

 478฀฀฀|฀฀฀PARTE฀3฀฀FUNÇÕES฀DE฀PROTEÍNAS

12.10฀|฀IONÓFOROS tem฀o฀canal฀e฀grupos฀hidrofóbicos฀ficam฀na฀periferia฀do฀
canal,฀ interagindo฀ com฀ a฀ membrana฀ lipídica.฀ A฀ estru-
tura฀permite฀a฀passagem฀de฀água฀e฀cátions฀divalentes,฀
mas฀não฀ânions.฀Associação฀e฀dissociação฀de฀monôme-
Um฀ grupo฀ interessante฀ de฀ compostos฀ sintetizados฀ e฀
ros฀controla฀a฀taxa฀de฀fluxo฀de฀íons.
excretados฀por฀bactérias฀facilita฀a฀translocação฀de฀íons฀
Ionóforos฀ têm฀ atividade฀ de฀ antibiótico,฀ porque฀
inorgânicos฀ através฀ de฀ membranas฀ de฀ outras฀ células.฀
rompem฀ o฀ equilíbrio฀ iônico฀ intracelular.฀ São฀ também฀
Essas฀ moléculas,฀ chamadas฀ ionóforos,฀ são฀ membros฀
valiosas฀ ferramentas฀ experimentais฀ em฀ estudos฀ de฀
dos฀ canais฀ sintetizados฀ não-ribossomicamente฀ (ver฀ p.฀
translocação฀ de฀ íons฀ em฀ membranas฀ biológicas฀ e฀ para฀
459)฀e฀são฀compostos฀de฀peso฀molecular฀relativamente฀
manipulação฀da฀composição฀iônica฀de฀células.
baixo฀(até฀alguns฀milhares฀de฀daltons).฀Há฀dois฀subgru-
pos฀ principais.฀ (1)฀ transportadores฀ móveis,฀ que฀ ligam฀
L-Val D-Val
um฀íon฀e฀se฀difundem฀facilmente฀em฀uma฀membrana,฀e฀ O
(2)฀formadores฀de฀canal.฀Alguns฀ionóforos฀importantes฀ O
são฀listados฀na฀Tabela฀12.11. O N
N H O
O
Cada฀ transportador฀ móvel฀ tem฀ uma฀ especificidade฀ O O
O L L
definida฀ para฀ íons.฀ Valinomicina฀ (Figura฀ 12.59)฀ tem฀ N
O K+
uma฀afinidade฀por฀K+฀1.000฀vezes฀maior฀do฀que฀por฀Na+,฀ D-Val
O
L-Val
N H
e฀A23187฀(Figura฀12.60)฀tem฀uma฀afinidade฀por฀Ca 2+฀ H O
O
10฀ vezes฀ maior฀ do฀ que฀ por฀ Mg2+.฀ Vários฀ dos฀ transpor- O L O
O N
tadores฀móveis฀têm฀uma฀estrutura฀cíclica,฀e฀o฀íon฀fica฀ N O
coordenado฀ com฀ átomos฀ de฀ oxigênio฀ no฀ centro฀ da฀ es- O

trutura;฀a฀periferia฀da฀molécula฀consiste฀de฀grupos฀hi- O D-Val
L-Val
drofóbicos.฀Quando฀um฀íon฀é฀quelado฀pelo฀ionóforo,฀sua฀
capa฀de฀água฀é฀removida฀e฀o฀íon฀é฀envolvido฀pela฀capa฀ FIGURA฀12.59
Estrutura฀do฀complexo฀valinomicina-K+.฀
hidrofóbica.฀O฀complexo฀ionóforo-íon฀difunde-se฀livre- Abreviaturas:฀D-Val,฀D-valina;฀L-Val:฀L-valina;฀L,฀L-lactato;฀H,฀
mente฀através฀da฀membrana.฀Como฀interação฀de฀íon฀e฀ D-hidroxiisovalerato.
ionóforo฀é฀uma฀reação฀de฀equilíbrio,฀uma฀concentração฀
de฀estado฀estacionário฀(steady฀state)฀do฀íon฀se฀estabe- CH3
lece฀em฀ambos฀os฀lados฀da฀membrana.
Valinomicina฀ transporta฀ K+฀ por฀ um฀ mecanismo฀ ele- H3 C CH3
trogênico฀uniporte฀que฀cria฀um฀gradiente฀eletroquímico฀ H O O
através฀de฀uma฀membrana,฀visto฀que฀transporta฀um฀K+฀ H CH3
carregado฀positivamente฀(Figura฀12.61a).฀Nigericina฀é฀
um฀ antiporter฀ eletricamente฀ neutro;฀ seu฀ grupo฀ carbo- C O
N O
xila,฀ quando฀ dissociado,฀ liga฀ um฀ íon฀ positivo,฀ como฀ K+,฀
OH
formando฀um฀complexo฀neutro฀que฀cruza฀a฀membrana.฀ NH
Transporta฀um฀próton฀de฀volta฀na฀difusão฀pela฀membra- C
na,฀levando฀a฀uma฀troca฀de฀K+฀por฀H+฀(Figura฀12.61b). O
Gramicidina฀A฀é฀um฀peptídeo฀de฀15฀resíduos฀com฀ NH
D-฀e฀L-aminoácidos฀alternados.฀Em฀membranas,฀forma฀ CH3
uma฀β-hélice฀e฀pode฀dimerizar,฀formando฀um฀longo฀seg-
mento฀transmembrânico฀(25฀Å)฀e฀um฀canal฀de฀diâmetro฀ FIGURA฀12.60
estreito฀ (5฀ Å)฀ (Figura฀ 12.62).฀ Resíduos฀ polares฀ reves- Estrutura฀de฀A23187,฀um฀ionóforo฀de฀Ca2+.

TABELA฀12.11฀Importantes฀Ionóforos
Composto Importantes฀Cátions฀Transportados Ação
+ +
Valinomicina K ฀ou฀Rb Uniporte,฀eletrogênico
+ +
Nonactina NH4 ,฀K Uniporte,฀eletrogênico

A23187 Ca2+ /2฀H + Antiporte,฀elétron-neutro

+ +
Nigericina K /H Antiporte,฀elétron-neutro
+ +
Monensina Na /H Antiporte,฀elétron-neutro

Gramicidina H +,฀Na +,฀K+,฀Rb + Forma฀canais

+ +
Alameticina K ,฀Rb Forma฀canais

BioQ.12 478 22.01.07 17:20:19

 CAPÍTULO฀13฀฀FUNDAMENTOS฀DA฀TRANSDUÇÃO฀DE฀SINAL฀฀฀|฀฀฀483
PARTE฀3฀FUNÇÕES฀DE฀PROTEÍNAS
P P
P P
13
FUNDAMENTOS฀DA฀
TRANSDUÇÃO฀DE฀SINAL
George฀R.฀Dubyak
13.1฀ VISÃO฀GERAL,฀484
13.2฀ TRANSDUÇÃO฀DE฀SINAL฀INTERCELULAR,฀
485
฀ Dois฀modos฀fundamentais฀de฀transdução฀de฀฀
฀ sinal฀intercelular,฀485
฀ ฀ Sinalização฀justácrina฀ou฀contato-depen-฀
฀ ฀ dente,฀485
฀ ฀ Sinalização฀endócrina,฀486
฀ ฀ Sinalização฀parácrina,฀486
฀ ฀ Sinalização฀sináptica฀ou฀neuronal,฀486
฀ ฀ Sinalização฀autócrina,฀486
฀ Moléculas฀sinalizadoras฀secretadas,฀487
13.3฀ RECEPTORES฀PARA฀MOLÉCULAS฀SECRETA-
DAS,฀487
13.4฀ TRANSDUÇÃO฀DE฀SINAL฀INTRACELULAR฀
POR฀RECEPTORES฀DE฀SUPERFÍCIE฀CELULAR,฀
488
฀ Ligantes,฀receptores฀e฀interações฀receptor-li-฀
฀ gante,฀488
฀ Relações฀entre฀receptores,฀efetores฀e฀segundos฀฀
฀ mensageiros,฀489
฀ Fosforilação฀de฀proteínas฀na฀transdução฀de฀฀
฀ sinal,฀490
฀ Proteínas฀regulatórias฀que฀ligam฀GTP฀na฀trans-฀
฀ dução฀de฀sinal,฀491
฀ Outros฀componentes฀de฀complexos฀de฀sinaliza-฀
฀ ção฀mediada฀por฀receptor฀e฀cascatas,฀491
฀ Interação฀ligante-receptor฀e฀eventos฀subse-฀
฀ qüentes฀de฀sinalização,฀492
฀ Término฀da฀transdução฀de฀sinal฀por฀receptores฀฀
฀ de฀superfície฀celular,฀492
13.5฀ RECEPTORES฀CANAIS฀IÔNICOS฀LIGANTE-DE-
PENDENTES,฀493
BioQ.13 483
฀ Receptores฀canais฀iônicos฀,฀494
฀ Término฀da฀sinalização฀por฀receptores฀canais฀
iônicos,฀495
฀ Regulação฀de฀canais฀iônicos฀por฀outros฀recep-฀
฀ tores,฀495
13.6฀ RECEPTORES฀LIGADOS฀A฀ENZIMAS,฀496
฀ Funções฀fisiológicas฀de฀ligantes฀extracelulares,฀฀
฀ 496
฀ Receptores฀tirosina฀quinases฀(RTKs),฀496
฀ ฀ Ras฀GTPase฀e฀MAP฀quinase,฀497
฀ Receptores฀serina/treonina฀quinases,฀499
13.7฀ RECEPTORES฀DE฀CITOCINAS,฀500
฀ Receptores฀de฀citocinas:฀estrutura฀e฀função,฀
500
13.8฀ RECEPTORES฀ACOPLADOS฀A฀PROTEÍNA฀G,฀
500
฀ Funções฀fisiológicas฀e฀ligantes฀extracelulares,฀฀
฀ 500
฀ Estrutura฀de฀receptores฀acoplados฀a฀proteína฀G,฀฀
฀ 501
฀ Proteínas฀G฀heterotriméricas,฀503
฀ O฀ciclo฀da฀proteína฀G,฀505
฀ ฀ Término฀da฀sinalização฀por฀receptores฀฀
฀ ฀ acoplados฀a฀proteína฀G,฀506
฀ ฀ Efeitos฀de฀toxinas฀bacterianas฀sobre฀pro-
฀ ฀ ฀ teínas฀G฀heterotriméricas,฀506
13.9฀ TRANSDUÇÃO฀DE฀SINAL฀BASEADA฀EM฀AMP฀
CÍCLICO,฀506
฀ Regulação฀da฀síntese฀e฀degradação฀de฀AMP฀฀
฀ cíclico,฀506
฀ Mecanismos฀intracelulares฀de฀sinalização฀por฀฀
฀ AMP฀cíclico,฀508
22.01.07 17:40:53
 488฀฀฀|฀฀฀PARTE฀3฀฀FUNÇÕES฀DE฀PROTEÍNAS
ou฀ reprimir฀ transcrição฀ e,฀ assim,฀ alterar฀ a฀ expressão฀
de฀proteínas฀codificadas฀por฀estes฀genes.฀Devido฀a฀seus฀
efeitos฀sobre฀a฀expressão฀gênica,฀ativação฀de฀receptores฀
intracelulares฀produz฀mudanças฀de฀longa฀duração฀(de฀
horas฀a฀dias)฀na฀função฀das฀células-alvos.฀A฀estrutura฀
e฀a฀função฀desses฀receptores฀são฀descritas฀em฀maiores฀
detalhes฀na฀p.฀488.
Receptores฀ de฀ superfície฀ celular฀ atuam฀ como฀
sítios฀de฀reconhecimento฀para฀a฀vasta฀maioria฀de฀mo-
léculas฀ sinalizadoras฀ que฀ são฀ muito฀ grandes฀ (proteí-
nas฀ou฀hormônios฀polipeptídicos)฀ou฀muito฀hidrofílicas฀
para฀ cruzar฀ rapidamente฀ a฀ membrana฀ plasmática฀ da฀
célula-alvo.฀ Tais฀ moléculas฀ sinalizadoras฀ interagem฀
com฀a฀célula-alvo฀ligando-se฀a฀receptores฀de฀superfí-
cie฀ celular฀ que฀ são฀ proteínas฀ integrais฀ de฀ membrana฀
(Figura฀13.3b).฀Proteínas฀receptores฀de฀superfície฀são฀
acopladas฀a฀uma฀variedade฀de฀reações฀bioquímicas฀in-
tracelulares฀chamadas฀cascatas฀ou฀vias฀de฀transdu-
ção฀de฀sinal.
O฀ evento฀ mais฀ proximal฀ ou฀ precoce฀ da฀ transdução฀
de฀ sinal,฀ desencadeado฀ pela฀ ligação฀ de฀ uma฀ molécula฀
sinalizadora฀a฀um฀receptor,฀é฀uma฀mudança฀conforma-
cional฀do฀receptor฀que฀resulta฀no฀seguinte:฀(1)฀geração฀
��� Receptor canal iônico ligante-dependente
Membrana Íons
plasmática
Neurotransmissor
Citosol
Receptor
��� Receptores ligados a enzimas
Domínio catalítico inativo Domínio catalítico inativo
��� Receptores de citocinas
Enzima ativada
��� Receptores acoplados a proteína G
Neurotransmissor ou hormônio
Proteína G Enzima Proteína G ativada
BioQ.13 488
de฀ moléculas฀ sinalizadoras฀ intracelulares฀ conhecidas฀
como฀ segundos฀ mensageiros฀ (a฀ molécula฀ secretada฀
extracelular฀é฀o฀primeiro฀mensageiro);฀ou฀(2)฀uma฀mu-
dança฀no฀potencial฀elétrico฀de฀membrana฀plasmática;฀e฀
(3)฀ ativação฀ de฀ cascatas฀ enzimáticas฀ envolvendo฀ pro-
teína฀quinases,฀proteína฀fosfatases฀ou฀proteases.฀Qua-
tro฀superfamílias฀principais฀de฀receptores฀de฀superfície฀
celular฀ estrutural฀ e฀ funcionalmente฀ relacionados฀ são฀
mediadores฀da฀imensa฀maioria฀de฀vias฀de฀comunicação฀
intercelular฀ (Figura฀ 13.4);฀ estas฀ incluem฀ receptores฀
canais฀ iônicos฀ ligante-dependentes,฀ receptores฀
ligados฀ a฀ enzimas฀ ou฀ catalíticos;฀ família฀ de฀ re-
ceptores฀ de฀ citocinas;฀ e฀ receptores฀ acoplados฀ a฀
proteína฀G฀ou฀GPCR.
|
13.4฀ ฀TRANSDUÇÃO฀DE฀
SINAL฀INTRACELULAR฀
POR฀RECEPTORES฀DE฀
SUPERFÍCIE฀CELULAR
Ligantes,฀Receptores฀e฀Interações฀
Receptor-Ligante
Um฀ligante฀é฀qualquer฀molécula฀que฀se฀liga฀a฀uma฀re-
ceptor฀protéico.฀Um฀agonista฀é฀um฀ligante฀que,฀ao฀se฀li-
gar,฀ativa฀transdução฀de฀sinal,฀enquanto฀um฀antagonis-
ta฀é฀um฀ligante฀que฀impede฀transdução฀de฀sinal฀quando฀
se฀ liga฀ ao฀ receptor.฀ Um฀ agonista฀ ou฀ antagonista฀ fi-
siológico฀é฀uma฀molécula฀de฀ocorrência฀natural฀(como฀
um฀hormônio฀ou฀neurotransmissor)฀que฀atua฀como฀um฀
ligante฀para฀um฀receptor.฀Um฀agonista฀ou฀antagonis-
ta฀ farmacológico฀ é฀ uma฀ molécula฀ sintética฀ que฀ atua฀
como฀um฀ligante฀para฀um฀receptor.฀Muitas฀drogas฀tera-
pêuticas฀são฀agonistas฀ou฀antagonistas฀de฀receptores.
Certos฀agonistas฀fisiológicos฀podem฀estimular฀múl-
tiplos฀tipos฀de฀receptores฀que฀são฀chamados฀subtipos฀
de฀receptores.฀O฀conceito-chave฀é฀que฀a฀mesma฀molé-
cula฀ extracelular฀ sinalizadora฀ pode฀ se฀ ligar฀ a฀ diferen-
tes฀receptores฀protéicos฀que฀são฀produtos฀de฀diferentes฀
genes.฀Por฀exemplo,฀acetilcolina฀pode฀interagir฀com฀um฀
receptor฀ canal฀ iônico฀ ligante-dependente฀ (ver฀ p.฀ 465)฀
que฀ causa฀ contração฀ de฀ músculo฀ esquelético,฀ ou฀ com฀
receptores฀acoplados฀a฀proteína฀G฀(ver฀p.฀491)฀que฀cau-
sam฀relaxamento฀do฀músculo฀cardíaco฀(Figura฀13.5).
FIGURA฀13.4
Principais฀classes฀de฀receptores฀de฀
superfície฀celular฀para฀moléculas฀
sinalizadoras฀secretadas.
Redesenhado฀com฀base฀em฀figura฀de฀
Alberts,฀B.,฀et฀al.฀Essential฀Cell฀Biology,฀
Enzima ativada 2nd฀ed.฀New฀York:฀Garland,฀2004.
22.01.07 17:41:19
 498฀฀฀|฀฀฀PARTE฀3฀฀FUNÇÕES฀DE฀PROTEÍNAS
CORRELAÇÃO฀CLÍNICA฀13.1
Família฀de฀Receptores฀Tirosina฀Quinases฀ErbB/HER฀como฀Alvos฀para฀
Quimioterapia฀do฀Câncer
O฀ receptor฀ de฀ fator฀ de฀ crescimento฀ epidérmico฀
(EGF)฀foi฀o฀primeiro฀com฀atividade฀intrínseca฀de฀ti-
rosina฀quinase฀a฀ser฀identificado฀e฀caracterizado฀em฀
detalhes.฀Este฀receptor฀catalítico฀é฀membro฀de฀uma฀
família฀de฀quatro฀proteínas฀relacionadas,฀chamadas฀
receptores฀ErbB/HER,฀devido฀à฀sua฀semelhança฀com฀
o฀oncogene฀v-erbB฀de฀vírus฀de฀eritroblastose฀aviária,฀
que฀induz฀leucemia฀eritróide฀em฀pássaros.฀Esta฀liga-
ção฀entre฀proteínas฀ErbB/HER฀e฀câncer฀também฀se฀
observa฀no฀homem.฀Superexpressão฀do฀gene฀ErbB1฀
humano,฀ que฀ codifica฀ o฀ receptor฀ humano฀ de฀ EGF฀
(HER1),฀caracteriza฀cânceres฀de฀bexiga,฀mama,฀rim,฀
próstata฀e฀pulmão฀de฀célula฀não-pequena.฀Um฀gene฀
ErbB1฀mutante฀produz฀um฀receptor฀que฀não฀tem฀o฀
domínio฀ extracelular฀ de฀ ligação฀ a฀ EGF,฀ e฀ é฀ muito฀
expresso฀ nos฀ glioblastomas,฀ que฀ correspondem฀ a฀
25%฀dos฀tumores฀de฀cérebro฀humano฀adulto.฀ErbB3฀
e฀ ErbB4฀ humanos,฀ respectivamente,฀ codificam฀ os฀
receptores฀HER3฀e฀HER4฀que฀se฀ligam฀a฀proteínas฀
extracelulares฀pertencentes฀à฀família฀NRG฀(neurre-
gulina/herregulina/neu)฀ de฀ fatores฀ de฀ crescimento฀
e฀ diferenciação.฀ ErbB3฀ é฀ freqüentemente฀ superex-
presso฀em฀cânceres฀de฀mama,฀cólon,฀próstata฀e฀estô-
mago,฀enquanto฀superexpressão฀de฀ErbB4฀foi฀obser-
vada฀em฀tumores฀de฀células฀da฀granulosa฀ovariana.฀
O฀outro฀membro฀da฀família฀é฀o฀gene฀ErbB2,฀que฀co-
difica฀a฀proteína฀HER2฀a฀qual,฀surpreendentemente,฀
não฀ tem฀ capacidade฀ de฀ se฀ ligar฀ a฀ nenhum฀ fator฀ de฀
crescimento฀ extracelular฀ conhecido.฀ Em฀ vez฀ disso,฀
receptores฀HER2฀possuem฀uma฀conformação฀basal฀
que฀permite฀a฀eles฀formarem฀homodímeros฀com฀ou-
tras฀proteínas฀HER2฀não-ligadas฀ou฀heterodímeros฀
com฀receptores฀HER1,฀HER3฀ou฀HER4฀ocupados฀por฀
fator฀ de฀ crescimento.฀ Como฀ dimerização฀ é฀ a฀ etapa฀
crítica฀para฀ativar฀a฀atividade฀intrínseca฀de฀tirosina฀
quinase฀ dessa฀ proteína,฀ mesmo฀ modesta฀ superex-
pressão฀de฀HER2฀pode฀alterar฀regulação฀normal฀de฀
crescimento฀ celular.฀ Significativamente,฀ expressão฀
Fonte:฀Roskowski,฀R.,฀Jr.฀The฀ErbB/HER฀receptor฀protein-tyrosine฀kinases฀and฀cancer.฀Biochem.฀Biophys.฀Res.฀
Commun.฀319:1,฀2004.
transitoriamente฀e฀estimulam฀uma฀família฀de฀proteína฀
serina/treonina฀quinases,฀que฀desencadeiam฀a฀cascata฀
da฀proteína฀quinase฀ativada฀por฀mitógeno฀(mitogen-ac-
tivated฀protein฀kinase)฀ou฀cascata฀da฀MAP฀quinase฀
(Figura฀ 13.17).฀ Esta฀ cascata฀ de฀ amplificação฀ envolve฀
ações฀ em฀ série฀ de฀ três฀ proteína฀ quinases;฀ a฀ primeira฀
quinase,฀ativada฀por฀Ras฀(ou฀MAP฀quinase฀quinase฀qui-
nase)฀ativa฀um฀conjunto฀intermediário฀de฀MAP฀quinase฀
quinases,฀que฀ativam฀as฀MAP฀quinases฀finais฀efetoras.฀
BioQ.13 498
do฀gene฀ErbB2฀é฀amplificada฀em฀até฀duas฀ordens฀de฀
grandeza฀em฀20%฀dos฀seres฀humanos฀com฀câncer฀de฀
mama฀invasivo.
A฀expressão฀aberrante฀de฀proteína฀ErbB/HER฀em฀
múltiplos฀cânceres฀humanos฀tem฀levado฀ao฀desenvol-
vimento฀de฀várias฀terapias฀por฀drogas฀que฀têm฀estes฀
receptores฀ como฀ alvos.฀ Um฀ grupo฀ de฀ agentes฀ tera-
pêuticos฀inclui฀anticorpos฀monoclonais฀que฀se฀ligam฀
a฀domínios฀extracelulares฀funcionalmente฀significa-
tivos฀ de฀ diferentes฀ subtipos฀ de฀ HER.฀ Trastuzumab฀
(Herceptin®฀ da฀ Genentech)฀ é฀ um฀ anticorpo฀ anti-
HER2฀que฀tem฀sido฀usado,฀desde฀1998,฀para฀o฀trata-
mento฀desses฀cânceres฀de฀mama฀caracterizados฀por฀
superexpressão฀de฀ErbB2/HER2.฀O฀mecanismo฀por฀
trás฀ das฀ ações฀ antitumorais฀ de฀ Trastuzumab/Her-
ceotin®฀envolve฀o฀recrutamento฀de฀fatores฀imunes฀
anticorpo-dependentes฀que฀matam฀as฀células฀tumo-
rais฀e฀a฀atenuação฀da฀proteólise฀do฀ectodomínio฀de฀
HER2฀(por฀metaloproteases฀nativas)฀que฀potencia-
liza฀ ainda฀ mais฀ a฀ dimerização฀ constitutiva฀ desses฀
receptores.฀Cetixumab฀(IMC-C225฀ou฀Erbitux®฀da฀
ImClone)฀é฀um฀anticorpo฀que฀interage฀com฀o฀domí-
nio฀ de฀ ligação฀ de฀ EGF฀ da฀ proteína฀ ErbB1/HER1฀ e,฀
assim,฀impede฀ativação฀induzida฀por฀ligante฀do฀re-
ceptor.฀Este฀agente฀está฀sendo฀testado฀em฀pacientes฀
com฀cânceres฀de฀célula฀escamosa฀de฀cabeça฀e฀pes-
coço฀ou฀cânceres฀de฀pulmão฀de฀célula฀não-pequena.฀
Além฀dessas฀terapias฀baseadas฀em฀anticorpos,฀uma฀
variedade฀ de฀ drogas฀ que฀ são฀ moléculas฀ pequenas฀
foi฀ projetada฀ para฀ atingir฀ os฀ domínios฀ intracelula-
res฀tirosina฀quinase฀das฀proteínas฀ErbB/HER.฀Esses฀
reagentes฀são฀compostos฀baseados฀em฀4-anilinoqui-
nazolina,฀ que฀ atuam฀ como฀ inibidores฀ competitivos฀
dos฀sítios฀de฀ligação฀de฀ATP฀das฀quinases,฀particu-
larmente฀do฀subtipo฀ErbB1/HER1.฀No฀momento,฀tais฀
drogas฀estão฀sendo฀testadas฀em฀pacientes฀sofrendo฀
de฀cânceres฀de฀pulmão฀de฀célula฀não-pequena฀que฀
não฀responderam฀a฀outras฀quimioterapias.
Quando฀ ativadas,฀ as฀ MAP฀ quinases฀ terminais฀ fosfori-
lam฀múltiplas฀proteínas-alvos฀no฀citosol฀e฀no฀núcleo,฀in-
cluindo฀fatores฀de฀transcrição฀que฀regulam฀a฀expressão฀
de฀genes฀necessários฀para฀divisão฀celular,฀sobrevivência฀
celular฀ou฀diferenciação฀fenotípica.
22.01.07 17:42:09
 514฀฀฀|฀฀฀PARTE฀3฀฀FUNÇÕES฀DE฀PROTEÍNAS
Proteína quinase
dependente de Pi
calmodulina Proteína fosfatase
P Ca2+ independente
(50-80% ativa)
Domínio catalítico
+Ca2+
Calmodulina
+Ca2+/calmodulina
Ca2+
ADP ATP
P
Autofosforilação
Totalmente
ativa
nal)฀ podem฀ fosforilar฀ uma฀ ampla฀ faixa฀ de฀ proteínas฀
substratos.฀ Alterar฀ a฀ atividade฀ dessas฀ proteínas฀ é฀ o฀
mecanismo฀primário,฀pelo฀qual฀Ca 2+฀aumentado฀alte-
ra฀o฀comportamento฀celular.฀CaM-quinase฀II฀também฀
se฀autofosforila฀quando฀ligada฀a฀calmodulina.฀Embora฀
Ca 2+฀citosólico฀seja฀só฀transitoriamente฀aumentado฀em฀
resposta฀à฀ativação฀de฀receptores฀de฀superfície฀celular,฀
esta฀ autofosforilação฀ de฀ CaM-quinase฀ II฀ permite฀ que฀
permaneça฀ ativa฀ muito฀ depois฀ do฀ Ca 2+฀ citosólico฀ ter฀
voltado฀ao฀nível฀de฀linha฀basal.฀CaM-quinases฀podem฀
fosforilar฀e฀modular฀uma฀ampla฀faixa฀de฀enzimas,฀ca-
nais฀iônicos,฀proteínas฀contráteis฀e฀proteínas฀regulató-
rias฀de฀genes.
|
13.12฀ ฀ TRANSDUÇÃO฀DE฀
SINAL฀BASEADA฀EM฀
FOSFOLIPÍDEOS
Metabolismo฀Regulado฀de฀
Fosfolipídeos฀como฀um฀Componente฀
de฀Vias฀Intracelulares฀de฀Sinalização
Transdução฀ de฀ sinal฀ por฀ muitos฀ receptores฀ de฀ super-
fície฀ celular฀ envolve฀ ativação฀ de฀ uma฀ ou฀ mais฀ fosfoli-
pases฀ que฀ catalisam฀ a฀ hidrólise฀ de฀ diferentes฀ classes฀
de฀ fosfolipídeos฀ (p.฀ ex.,฀ fosfolipídeos฀ de฀ inositol฀ ou฀
colina).฀ Várias฀ importantes฀ classes฀ de฀ enzimas฀ efeto-
ras฀ fosfolipases฀ catalisam฀ a฀ produção฀ de฀ diferentes฀
produtos฀ que฀ atuam฀ como฀ segundos฀ mensageiros฀ ou฀
reguladores฀ de฀ produção฀ de฀ segundos฀ mensageiros฀
(Figura฀ 13.32).฀ Enzimas฀ fosfolipases฀ C฀ (PI-PLC)฀
hidrolisam฀ fosfolipídeos฀ de฀ inositol฀ gerando฀ inositol฀
BioQ.13 514
FIGURA฀13.31
Domínio inibitório Papel฀de฀calmodulina฀e฀proteína฀quinases฀
reguladas฀por฀calmodulina฀nas฀cascatas฀de฀
sinalização฀intracelular฀reguladas฀por฀Ca2+.
COOH Redesenhado฀com฀base฀em฀figura฀de฀Alberts,฀B.,฀et฀
al.฀Molecular฀Biology฀of฀the฀Cell,฀4th฀ed.฀New฀York:฀
Inativa Garland,฀2002.฀฀Principais฀classes฀de฀fosfolipases฀
usadas฀durante฀transdução฀de฀sinal฀mediada฀por฀
NH2
receptor.
Ativada
fosfatos฀ e฀ diacilgliceróis฀ como฀ segundos฀ mensagei-
ros.฀ Inositol฀ fosfolipídeos฀ podem฀ ser฀ mais฀ fosforilados฀
por฀ fosfoinositídeo-3-quinase฀ (PI-3K)฀ para฀ produ-
zir฀fosfatidilinositol-3,4,5-trisfosfato฀(PIP3),฀outro฀
segundo฀mensageiro.฀Enzimas฀fosfolipases฀D฀(PLD)฀
hidrolisam฀predominantemente฀fosfolipídeos฀de฀colina฀
ou฀etanolamina฀para฀produzir฀ácido฀ fosfatídico,฀que฀
é฀subseqüentemente฀metabolizado฀por฀ácido฀fosfatídico฀
fosfo-hidrolases฀(PAP)฀para฀gerar฀o฀segundo฀mensagei-
ro฀ diacilglicerol.฀ Enzimas฀ fosfolipases฀ A2฀ (PLA2)฀
atacam฀vários฀fosfolipídeos฀para฀produzir฀ácidos฀graxos฀
livres,฀como฀ácido฀araquidônico฀e฀liso-fosfolipídeos.
Regulação฀de฀Fofolipase฀C฀e฀
Fosfolipase฀D
Como฀descrito฀anteriormente฀para฀transdução฀de฀sinal฀
baseada฀ em฀ Ca 2+,฀ muitos฀ receptores฀ acoplados฀ a฀ pro-
teína฀G฀e฀receptores฀tirosina฀quinases฀estimulam฀a฀li-
beração฀ de฀ Ca 2+฀ do฀ retículo฀ endoplasmático฀ por฀ meio฀
de฀ativação฀da฀produção฀de฀1,4,5-inositol฀trisfosfato฀
(IP3).฀Este฀segundo฀mensageiro฀solúvel฀em฀água฀é฀deri-
vado฀da฀hidrólise฀de฀fosfatidilinositol-4,5-bisfosfa-
to฀(PIP2),฀um฀fosfolipídeo฀de฀membrana฀relativamente฀
minoritário฀que฀é฀gerado฀por฀múltiplas฀fosforilações฀do฀
resíduo฀de฀inositol฀do฀fosfatidilinositol.฀Esta฀hidrólise฀de฀
PIP2฀é฀catalisada฀por฀uma฀família฀de฀fosfolipases฀tipo฀C฀
(PLC)฀com฀alta฀seletividade฀para฀inositol฀fosfolipídeos฀
(Figura฀13.32).฀É฀importante฀apreciar฀que฀a฀hidrólise฀de฀
PIPs฀por฀uma฀PLC฀gera฀dois฀segundos฀mensageiros฀di-
ferentes:฀(1)฀o฀produto฀solúvel฀IP3฀e฀(2)฀diacilglicerol฀
(DAG),฀um฀segundo฀mensageiro฀hidrofóbico.฀Enzimas฀
PI-PLCβ฀são฀ativadas฀por฀interação฀com฀subunidades฀
α฀de฀proteínas฀G฀da฀família฀Gq /11฀ou฀as฀subunidades฀βγ฀
22.01.07 17:43:19
 CAPÍTULO฀14฀฀BIOENERGÉTICA฀E฀METABOLISMO฀OXIDATIVO฀฀฀|฀฀฀521

PARTE฀4฀VIAS฀METABÓLICAS฀E฀SEU฀CONTROLE

P P
P P

14
BIOENERGÉTICA฀E฀
METABOLISMO฀OXIDATIVO
Diana฀S.฀Beattie

14.1฀ SISTEMAS฀DE฀PRODUÇÃO฀E฀DE฀UTILIZAÇÃO฀ ฀ Conversão฀do฀grupo฀acetil฀de฀acetil-CoA฀a฀CO2฀฀

DE฀ENERGIA,฀522
฀ ATP฀liga฀sistemas฀de฀produção฀e฀de฀utilização฀฀฀฀฀฀฀
฀ de฀energia,฀522
฀ NAD+฀e฀NADPH฀em฀catabolismo฀e฀anabolismo,฀฀฀฀
฀ 523
14.2฀ RELAÇÕES฀TERMODINÂMICAS฀E฀COMPO-
NENTES฀RICOS฀EM฀ENERGIA,฀524
฀ Energia฀Livre฀é฀energia฀disponível฀para฀traba-฀
฀ lho฀útil,฀525
฀ Valor฀calórico฀de฀componentes฀da฀dieta,฀526
฀ Compostos฀são฀classificados฀com฀base฀em฀ener-฀
฀ gia฀liberada฀na฀hidrólise฀de฀grupos฀específi-฀
฀ cos,฀526
฀ Variações฀de฀energia฀livre฀podem฀ser฀determi-฀
฀ nadas฀em฀reações฀enzimáticas฀acopladas,฀฀
฀ 527
฀ Energias฀de฀ligações฀de฀alta฀energia฀de฀vários฀฀
฀ grupos฀podem฀ser฀transferidas฀de฀um฀com-฀
฀ posto฀para฀outro,฀527
14.3฀ FONTES฀E฀DESTINOS฀DA฀ACETIL-COENZIMA฀
A,฀529
฀ Fontes฀e฀destinos฀metabólicos฀do฀piruvato,฀
฀ 530
฀ Piruvato฀desidrogenase฀é฀um฀complexo฀mul-฀
฀ tienzimático,฀531
฀ Piruvato฀desidrogenase฀é฀rigorosamente฀regu-฀
฀ lada,฀531
฀ Acetil-CoA฀é฀usado฀por฀várias฀vias฀diferentes,฀
฀ 534
14.4฀ CICLO฀DOS฀ÁCIDOS฀TRICARBOXÍLICOS,฀534
฀ Reações฀do฀ciclo฀dos฀ácidos฀tricarboxílicos,฀
535
฀ e฀H2O฀conserva฀energia,฀537
฀ Ciclo฀dos฀ácidos฀tricarboxílicos฀serve฀como฀฀
฀ uma฀fonte฀de฀intermediários฀biossintéticos,฀
฀ ฀ 537
฀ Reações฀anapleróticas฀repõem฀intermediários฀฀
฀ do฀ciclo฀dos฀ácidos฀tricarboxílicos,฀538
฀ Atividade฀do฀ciclo฀dos฀ácidos฀tricarboxílicos฀é฀฀
฀ cuidadosamente฀regulada,฀539
14.5฀ ESTRUTURA฀E฀COMPARTIMENTALIZAÇÃO฀
POR฀MEMBRANAS฀MITOCONDRIAIS,฀540
฀ Membranas฀mitocondriais฀interna฀e฀externa฀฀
฀ têm฀diferentes฀composições฀e฀funções,฀540
14.6฀ CADEIA฀DE฀TRANSPORTE฀DE฀ELÉTRONS,฀
542
฀ Reações฀de฀oxidação-redução,฀542
฀ Variações฀da฀energia฀livre฀em฀reações฀redox,฀
฀ 544
฀ Transporte฀mitocondrial฀de฀elétrons฀é฀um฀฀
฀ sistema฀com฀múltiplos฀componentes,฀544
฀ Complexo฀I:฀NADH-ubiquinona฀óxido-redutase,฀
฀ 545
฀ Complexo฀II:฀succinato-ubiquinona฀óxido-redu-฀
฀ tase,฀546
฀ ฀ Outras฀desidrogenases฀flavoproteínas฀mito-฀
฀ ฀ condriais,฀546
฀ Complexo฀III:฀ubiquinol-citocromo฀c฀óxido-re-฀
฀ dutase,฀฀547
฀ ฀ Citocromos,฀547
฀ ฀ Ciclo฀Q฀para฀transferência฀de฀elétrons฀e฀฀
฀ ฀ bombeamento฀de฀prótons฀no฀complexo฀฀
฀ ฀ III,฀549
฀ ฀ Movimento฀proposto฀das฀proteínas฀ferro-฀
฀ ฀ enxofre฀durante฀transferência฀de฀elé-฀
฀ ฀ trons฀no฀complexo฀III,฀549

BioQ.14 521 22.01.07 17:50:31

 524฀฀฀|฀฀฀PARTE฀4฀฀VIA฀METABÓLICAS฀E฀SEU฀CONTROLE
Carboidrato Nicotinamida Nicotinamida
(oxidada) (reduzida)

H C OH
O Íon híbrido, O
H H H
4 H:–
C NH2 C NH2 + H+

Nicotinamida adenina dinucleotídeo (NAD+)

5 3
H C O
6 2
..
N+ N
1
H C OH –O O CH2

...
P O
H O H H
Oxidado H H
O OH OH NH2

Lipídeo O N
N

AMP
P
–O O CH2
H C H O N N
H H
H H
OH OH
Reduzido
NADP+ contém um grupo fosforil
nessa 2�-hidroxila

FIGURA฀14.3 FIGURA฀14.4
Estados฀de฀oxidação฀de฀átomos฀de฀carbono฀típicos฀em฀ Estrutura฀de฀nicotinamida฀adenina฀dinucleotídeo฀(NAD +).฀
carboidratos฀e฀lipídeos. Íon฀hidreto฀(H: -,฀um฀próton฀com฀dois฀elétrons)฀transferido฀para฀NAD +฀
forma฀NADH.

|
14.2฀ ฀RELAÇÕES฀TERMO- Substrato
reduzido
Produto
oxidado
DINÂMICAS฀E฀COM-
PONENTES฀RICOS฀EM฀ Catabolismo

ENERGIA
NADP+ NADPH

Células฀ podem฀ interconverter฀ diferentes฀ formas฀ de฀

Anabolismo
energia฀e฀também฀trocam฀energia฀com฀seu฀ambiente.฀Os฀
princípios฀de฀termodinâmica฀governam฀reações฀desse฀
Produto Precursor
tipo.฀Conhecimento฀desses฀princípios฀facilita฀uma฀per-
reduzido oxidado
cepção฀de฀como฀reações฀que฀produzem฀e฀que฀utilizam฀
energia฀ ocorrem฀ dentro฀ da฀ mesma฀ célula,฀ e฀ como฀ um฀
FIGURA฀14.5
organismo฀ é฀ capaz฀ de฀ executar฀ várias฀ funções฀ de฀ tra- Transferência฀de฀equivalentes฀de฀redução฀durante฀catabolismo฀
balho.฀A฀primeira฀lei฀da฀termodinâmica฀afirma฀que฀ e฀anabolismo฀usando฀NADPH฀e฀NADH.
energia฀não฀pode฀ser฀criada฀nem฀destruída.฀Essa฀lei฀de฀
conservação฀ de฀ energia฀ estipula฀ que,฀ embora฀ energia฀
possa฀ser฀convertida฀de฀uma฀forma฀para฀outra,฀a฀energia฀ sistema.฀Entropia฀é฀vista฀como฀a฀energia฀de฀um฀sistema฀
total฀de฀um฀sistema฀permanece฀constante.฀Por฀exemplo,฀ que฀não฀está฀disponível฀para฀realizar฀trabalho฀útil.฀To-
energia฀química฀disponível฀em฀um฀combustível฀metabó- dos฀os฀processos,฀sejam฀químicos฀ou฀biológicos,฀tendem฀
lico,฀como฀glicose,฀é฀convertida฀na฀glicólise฀em฀energia฀ a฀progredir฀em฀direção฀a฀uma฀situação฀de฀máxima฀en-
química฀de฀ATP.฀No฀músculo฀esquelético,฀a฀energia฀quí- tropia.฀Portanto,฀sistemas฀vivos฀que฀são฀muito฀ordena-
mica฀envolvida฀em฀ligações฀fosfato฀ricas฀em฀energia฀do฀ dos,฀nunca฀estão฀em฀equilíbrio฀com฀seu฀ambiente,฀visto฀
ATP฀é฀convertida฀em฀energia฀mecânica,฀durante฀a฀con- que฀ o฀ equilíbrio฀ em฀ um฀ sistema฀ resulta฀ quando฀ acaso฀
tração฀muscular.฀A฀energia฀de฀um฀gradiente฀de฀prótons฀ ou฀desordem฀(entropia)฀está฀no฀máximo.฀Em฀sistemas฀
com฀eletropotencial฀osmótico฀através฀da฀membrana฀mi- biológicos,฀ entretanto,฀ é฀ quase฀ impossível฀ quantificar฀
tocondrial฀é฀convertida฀em฀energia฀química฀durante฀a฀ mudanças฀ de฀ entropia฀ porque฀ tais฀ sistemas฀ raramen-
síntese฀de฀ATP.฀ te฀ estão฀ em฀ equilíbrio.฀ Para฀ maior฀ simplicidade฀ e฀ por฀
A฀ segunda฀ lei฀ da฀ termodinâmica฀ diz฀ respeito฀ a฀ utilidade฀inerente฀nessas฀considerações,฀uma฀grandeza฀
entropia.฀Entropia,฀designada฀por฀S,฀é฀uma฀medida฀ou฀ chamada฀energia฀livre฀é฀empregada.฀
indicador฀do฀grau฀de฀desordem฀ou฀casualidade฀de฀um฀

BioQ.14 524 22.01.07 17:50:36

 CAPÍTULO฀14฀฀BIOENERGÉTICA฀E฀METABOLISMO฀OXIDATIVO฀฀฀|฀฀฀537
COO– COO– H COO–
C ligadas฀ no฀ ciclo฀ TCA฀ é฀ rapidamente฀ oxidado฀ a฀ NAD +฀
CH2 CH2
C pela฀cadeia฀respiratória.฀Este฀é฀outro฀fator฀que฀favorece฀
CH2 COO– H COO–
COO–
Succinato Malonato Maleato
FIGURA฀14.21
Estruturas฀do฀succinato,฀um฀intermediário฀do฀ciclo฀TCA;฀
malonato,฀um฀inibidor฀da฀succinato฀desidrogenase฀e฀do฀ciclo;฀e฀
maleato,฀um฀composto฀não฀envolvido฀no฀ciclo.
(200฀kDa)฀e฀é฀estereoespecífica฀para฀a฀forma฀trans฀do฀
substrato฀(a฀forma฀cis,฀maleato,฀não฀é฀substrato;฀Figura฀
14.21).฀ A฀ reação฀ é฀ livremente฀ reversível฀ em฀ condições฀
fisiológicas.฀Correlação฀Clínica฀14.2฀descreve฀uma฀defi-
ciência฀genética฀de฀fumarase.
A฀reação฀final฀do฀ciclo฀TCA฀é฀catalisada฀pela฀mala-
to฀desidrogenase,฀na฀qual฀os฀equivalentes฀de฀redução฀
são฀transferidos฀para฀NAD +,฀para฀formar฀NADH฀+฀H+.฀
O฀ equilíbrio฀ da฀ reação฀ é฀ fortemente฀ deslocado฀ para฀ a฀
formação฀de฀L-malato,฀com฀um฀ΔGo’฀=฀+7,0฀kcal฀mol–1.฀
Esta฀ reação฀ endergônica฀ é฀ deslocada฀ no฀ sentido฀ para฀
frente฀por฀ação฀da฀citrato฀sintase฀e฀de฀outras฀reações,฀
que฀removem฀oxaloacetato.
CORRELAÇÃO฀CLÍNICA฀14.2
Deficiência฀de฀Fumarase
Deficiência฀de฀enzimas฀do฀ciclo฀TCA฀é฀rara,฀indi-
cando฀ a฀ importância฀ desta฀ via฀ para฀ sobrevivên-
cia.฀Vários฀casos,฀entretanto,฀foram฀descritos,฀de฀
severa฀deficiência฀de฀fumarase฀em฀mitocôndrias฀
e฀citosol฀de฀tecidos฀(p.฀ex.,฀linfócitos฀do฀sangue).฀
É฀caracterizada฀por฀severa฀deficiência฀neurológi-
ca,฀encefalopatia฀e฀distonia,฀que฀se฀desenvolvem฀
logo฀após฀o฀nascimento.฀Urina฀contém฀quantida-
des฀ anormais฀ de฀ fumarato฀ e฀ níveis฀ elevados฀ de฀
succinato,฀ α-cetoglutarato,฀ citrato฀ e฀ malato.฀ As฀
isoenzimas฀mitocondrial฀e฀citosólica฀de฀fumara-
se฀são฀derivadas฀de฀um฀único฀gene.฀Em฀pacientes฀
afetados,฀ambos฀os฀pais฀têm฀a฀metade฀dos฀níveis฀
normais฀de฀atividade฀enzimática,฀mas฀são฀clini-
camente฀ normais,฀ como฀ seria฀ de฀ se฀ esperar฀ em฀
uma฀ doença฀ autossômica฀ recessiva.฀ A฀ primeira฀
mutação฀caracterizada฀no฀gene฀da฀fumarase฀con-
tém฀ uma฀ glutamina฀ substituída฀ por฀ um฀ resíduo฀
de฀glutamato฀319.
Fonte:฀Bourgeron,฀T.,฀Chreiten,฀D.,฀Poggi-Bach,฀J.,฀et.฀
al.฀Mutation฀of฀the฀fumarase฀gene฀in฀two฀siblings฀with฀
progressive฀encephalopathy฀and฀fumarase฀deficiency.฀J.฀
Clin.฀Invest.฀93:2514,฀1994.
BioQ.14 537
O฀NADH฀produzido฀nas฀três฀desidrogenases฀NAD + -
a฀direção฀para฀frente฀da฀malato฀desidrogenase.
Conversão฀do฀Grupo฀Acetil฀de฀Acetil-
CoA฀a฀CO2฀e฀H2O฀Conserva฀Energia
O฀ ciclo฀ TCA฀ (Figura฀ 14.20)฀ é฀ a฀ via฀ oxidativa฀ terminal฀
para฀a฀maioria฀dos฀combustíveis฀metabólicos.฀Resíduos฀
de฀dois฀carbonos฀na฀forma฀de฀acetil-CoA฀são฀completa-
mente฀oxidados฀a฀CO2฀e฀H2O,฀e฀quatro฀etapas฀oxidativas฀
resultam฀na฀formação฀de฀3฀NADH฀+฀H+฀e฀1฀FADH2,฀que฀
são฀ usados฀ subseqüentemente฀ para฀ geração฀ de฀ ATP.฀
Oxidação฀de฀cada฀NADH฀+฀H+฀resulta฀em฀formação฀de฀
2,5฀ATPs฀por฀fosforilação฀oxidativa,฀enquanto฀que฀oxi-
dação฀do฀FADH2฀formado฀na฀reação฀da฀succinato฀desi-
drogenase฀gera฀1,5฀ATPs.฀Uma฀ligação฀de฀alta฀energia฀é฀
formada฀como฀GTP,฀na฀reação฀da฀succinil-CoA฀sinteta-
se.฀Assim,฀a฀geração฀líquida฀de฀ATP฀ou฀seus฀equivalen-
tes฀(i.฀é,฀GTP)฀para฀a฀completa฀oxidação฀de฀um฀grupo฀
acetil฀no฀ciclo฀de฀Krebs฀é฀10.
Ciclo฀dos฀Ácidos฀Tricarboxílicos฀Serve฀
como฀uma฀Fonte฀de฀Intermediários฀
Biossintéticos
A฀ discussão฀ do฀ ciclo฀ TCA฀ até฀ agora฀ se฀ concentrou฀ em฀
seu฀ papel฀ na฀ quebra฀ oxidativa฀ de฀ grupos฀ acetil฀ a฀ CO2฀
e฀ H2O,฀ formação฀ de฀ coenzimas฀ reduzidas฀ e฀ síntese฀ de฀
ATP.฀Em฀geral,฀o฀ciclo฀TCA฀é฀o฀mecanismo฀final฀comum฀
para฀ quebra฀ de฀ alimentos;฀ entretanto,฀ como฀ resumido฀
na฀ Figura฀ 14.22,฀ os฀ compostos฀ de฀ quatro,฀ cinco฀ e฀ seis฀
carbonos฀gerados฀nas฀reações฀do฀ciclo฀TCA฀são฀impor-
tantes฀ intermediários฀ em฀ processos฀ biossintéticos.฀
Succinil-CoA,฀ malato,฀ oxaloacetato,฀ α-cetoglutarato฀ e฀
citrato฀são฀todos฀precursores฀da฀biossíntese฀de฀impor-
tantes฀compostos฀celulares.
Transaminação฀converte฀α-cetoglutarato฀em฀glu-
tamato,฀que฀pode฀deixar฀a฀mitocôndria฀e฀ser฀converti-
do฀ em฀ vários฀ outros฀ aminoácidos.฀ No฀ tecido฀ nervoso,฀
α-cetoglutarato฀ é฀ convertido฀ nos฀ neurotransmissores฀
glutamato฀e฀ácido฀γ-aminobutírico฀(GABA).฀Glutamato฀
é฀ também฀ produzido฀ a฀ partir฀ de฀ α-cetoglutarato฀ pela฀
enzima฀mitocondrial฀glutamato฀desidrogenase,฀em฀pre-
sença฀ de฀ NADH฀ ou฀ NADPH฀ e฀ amônia.฀ O฀ amino฀ grupo฀
incorporado฀em฀glutamato฀pode,฀então,฀ser฀transferido฀
para฀formar฀vários฀aminoácidos,฀por฀diferentes฀amino-
transferases.฀Estas฀enzimas฀e฀a฀relevância฀da฀incorpo-
ração฀ou฀da฀liberação฀de฀amônia฀em฀ou฀de฀α-cetoácidos฀
são฀discutidas฀no฀Capítulo฀19.
Succinil-CoA฀ representa฀ um฀ ponto฀ de฀ ramificação฀
metabólico฀ (Figura฀ 14.23),฀ porque฀ pode฀ ser฀ formado฀
a฀partir฀de฀α-cetoglutarato฀no฀ciclo฀ou฀a฀partir฀de฀me-
tilmalonil-CoA,฀ nas฀ etapas฀ finais฀ da฀ quebra฀ de฀ ácidos฀
graxos฀de฀cadeia฀ímpar฀ou฀dos฀aminoácidos฀de฀cadeia฀
ramificada฀valina฀e฀isoleucina,฀ou฀pode฀ser฀convertido฀
22.01.07 17:50:57
 CAPÍTULO฀14฀฀BIOENERGÉTICA฀E฀METABOLISMO฀OXIDATIVO฀฀฀|฀฀฀565
CORRELAÇÃO฀CLÍNICA฀14.6
Intolerância฀a฀Exercício฀em฀Pacientes฀com฀Mutações฀no฀Citocromo฀b
Em฀ 1993,฀ uma฀ mutação฀ no฀ citocromo฀ b฀ resultando฀
em฀atividade฀diminuída฀do฀complexo฀citocromo฀bc1฀
foi฀encontrada฀em฀um฀homem฀de฀25฀anos฀de฀idade,฀
que฀ se฀ apresentava฀ com฀ intolerância฀ a฀ exercício฀ e฀
fraqueza฀proximal.฀A฀mutação฀substituía฀um฀resíduo฀
de฀ aspartato,฀ no฀ lugar฀ de฀ uma฀ glicina฀ conservada฀
na฀posição฀290.฀Subseqüentemente,฀demonstrou-se฀
que฀ outros฀ pacientes฀ com฀ sintomas฀ semelhantes฀ e฀
atividade฀diminuída฀do฀complexo฀bc1฀têm฀mutações฀
nas฀quais฀um฀glutamato฀substituiu฀uma฀glicina฀con-
servada฀na฀posição฀339,฀e฀uma฀serina฀substituiu฀uma฀
glicina฀conservada฀na฀posição฀34.฀Mais฀recentemen-
te,฀demonstrou-se฀que฀um฀paciente฀com฀severa฀car-
diomiopatia฀hipertrófica฀tinha฀uma฀mutação฀na฀qual฀
um฀glutamato฀substituiu฀uma฀glicina฀conservada฀na฀
posição฀166.฀As฀mutações฀de฀glicina฀para฀aspartato฀
ou฀ glutamato฀ estavam฀ localizadas฀ no฀ citocromo฀ b฀
próximo฀ao฀sítio฀QO฀para฀oxidação฀de฀ubiquinol,฀en-
quanto฀ a฀ mutação฀ glicina฀ para฀ serina฀ localizava-se฀
próxima฀do฀sítio฀Qi฀da฀redução฀de฀ubiquinona.฀Todas฀
Fonte:฀Andreu,฀A.฀L.,฀et฀al.฀Exercise฀intolerance฀due฀to฀mutations฀in฀the฀cytochrome฀b฀gene฀of฀mitochondrial฀DNA.฀
N.฀Engl.฀J.฀Med.฀341:1037,฀1999.
|
14.10฀ ฀ ESPÉCIES฀REATIVAS฀
DE฀OXIGÊNIO฀(ROS)
Oxigênio฀é฀essencial฀para฀a฀vida.฀A฀maioria฀das฀oxida-
ções฀ intracelulares฀ resulta฀ em฀ transferência฀ de฀ dois฀
elétrons฀ para฀ aceptores฀ apropriados,฀ como฀ NAD +฀ ou฀
FAD,฀que฀são฀então฀oxidados฀pela฀cadeia฀de฀transporte฀
de฀elétrons.฀A฀etapa฀final฀desta฀cadeia฀é฀catalisada฀por฀
citocromo฀c฀oxidase,฀que฀liga฀fortemente฀O2฀ao฀centro฀
binuclear,฀ onde฀ redução฀ passo฀ a฀ passo฀ do฀ O2฀ ocorre,฀
sem฀liberação฀de฀intermediários฀no฀processo฀de฀oxida-
ção฀(ver฀Seção฀14.6,฀p.฀542).฀A฀estrutura฀eletrônica฀do฀
O2,฀entretanto,฀favorece฀sua฀redução฀por฀adição฀de฀um฀
elétron฀ de฀ cada฀ vez,฀ levando฀ à฀ geração฀ de฀ radicais฀ de฀
oxigênio฀que฀podem฀causar฀dano฀celular.฀Um฀radical฀é฀
uma฀molécula฀com฀um฀elétron฀não-pareado฀muito฀reati-
vo฀em฀um฀orbital฀externo,฀que฀pode฀iniciar฀uma฀cadeia฀
de฀reações฀por฀remoção฀de฀um฀elétron฀de฀outra฀molé-
cula฀para฀completar฀seu฀próprio฀orbital.฀A฀transferência฀
passo฀a฀passo฀de฀elétrons฀para฀O2฀resulta฀em฀formação฀
de฀ânions฀superóxido฀(O2-),฀depois฀peróxido฀de฀hi-
drogênio฀ (H2O2),฀ e฀ finalmente฀ radical฀ hidroxila฀ li-
vre฀(OH•)฀(Figura฀14.61).฀
BioQ.14 565
essas฀mutações฀envolvem฀uma฀transição฀de฀guanina฀
para฀adenina฀no฀mtDNA,฀sugerindo฀que฀a฀mutação฀
pode฀ ter฀ resultado฀ de฀ dano฀ oxidativo.฀ Além฀ disso,฀
em฀ todas฀ as฀ mutações฀ de฀ sentido฀ errado฀ (missen-
se),฀uma฀glicina฀conservada฀foi฀substituída฀por฀uma฀
molécula฀ carregada฀ maior;฀ isto฀ alterou฀ a฀ estrutura฀
do฀ citocromo฀ b,฀ resultando฀ em฀ atividade฀ catalítica฀
diminuída฀ do฀ complexo฀ bc1.฀ Mutações฀ sem฀ sentido฀
(nonsense)฀ resultando฀ em฀ citocromo฀ b฀ truncado฀ e฀
mutações฀envolvendo฀deleções฀de฀4-24฀pares฀de฀ba-
ses฀ do฀ mtDNA฀ foram฀ identificadas.฀ Estas฀ mutações฀
nonsense฀ e฀ por฀ deleções฀ freqüentemente฀ levam฀ a฀
severa฀intolerância฀a฀exercício,฀acidose฀láctica฀no฀es-
tado฀de฀repouso฀e฀ocasionalmente฀mioglobinúria.฀Em฀
contraste฀com฀a฀maioria฀das฀mutações฀no฀mtDNA,฀as฀
mutações฀ identificadas฀ no฀ gene฀ do฀ citocromo฀ b฀ não฀
são฀de฀herança฀materna.฀Além฀disso,฀a฀maioria฀foi฀ex-
pressa฀apenas฀em฀tecidos฀musculares,฀sugerindo฀que฀
sejam฀ mutações฀ somáticas,฀ que฀ ocorreram฀ durante฀
diferenciação฀de฀células฀troncos฀miogênicas.
O฀radical฀hidroxila฀é,฀sem฀dúvida,฀o฀radical฀livre฀mais฀
perigoso,฀uma฀vez฀que฀está฀envolvido฀em฀reações฀como฀
peroxidação฀de฀lipídeos฀e฀geração฀de฀outros฀radicais฀tó-
xicos.฀ Peróxido฀ de฀ hidrogênio฀ não฀ é฀ um฀ radical฀ livre,฀
mas฀é฀convertido฀pelas฀reações฀de฀Fenton฀ou฀de฀Haber-
Weiss฀no฀radical฀hidroxila,฀em฀presença฀de฀Fe2+฀ou฀de฀
Cu+,฀que฀são฀prevalentes฀em฀células฀(Figura฀14.62).
Produção฀de฀Espécies฀Reativas฀de฀
Oxigênio
Embora฀ processos฀ oxidativos฀ em฀ células฀ geralmente฀
resultem฀em฀transferência฀de฀elétrons฀para฀O2฀para฀for-
mar฀água,฀sem฀liberação฀de฀intermediários,฀um฀peque-
no฀número฀de฀radicais฀de฀oxigênio฀é฀inevitavelmente฀
formado฀devido฀a฀vazamento฀nas฀reações฀de฀transferên-
cia฀ de฀ elétrons.฀ A฀ principal฀ fonte฀ intracelular฀ de฀ radi-
cais฀ de฀ oxigênio฀ é฀ a฀ cadeia฀ de฀ transporte฀ de฀ elétrons฀
mitocondrial,฀onde฀superóxido฀é฀produzido฀por฀transfe-
rência฀de฀um฀elétron฀para฀O2,฀a฀partir฀da฀semiquinona฀
estável฀produzida฀durante฀a฀redução฀de฀ubiquinona฀pe-
los฀complexos฀I฀e฀II฀(Figura฀14.63).฀Superóxido฀também฀
pode฀ser฀produzido฀por฀transferência฀de฀um฀elétron฀de฀
uma฀ flavina,฀ como฀ FMN.฀ As฀ espécies฀ reativas฀ de฀ oxi-
22.01.07 17:51:56
 572฀฀฀|฀฀฀PARTE฀4฀฀VIA฀METABÓLICAS฀E฀SEU฀CONTROLE

PARTE฀4฀VIAS฀METABÓLICAS฀E฀SEU฀CONTROLE

Glicogênio G C

15
METABOLISMO฀DE฀CAR-
BOIDRATOS฀I:฀PRINCIPAIS฀
VIAS฀METABÓLICAS฀E฀SEU฀
CONTROLE
Robert฀A.฀Harris

15.1฀ VISÃO฀GERAL,฀573 15.4฀ REGULAÇÃO฀DA฀GLICÓLISE,฀584

฀ Hexoquinase฀e฀glucoquinase฀têm฀propriedades฀฀
15.2฀ GLICÓLISE,฀574 ฀ diferentes,฀586
฀ Glicólise฀ocorre฀em฀todas฀as฀células฀humanas,฀฀ ฀ 6-Fosfofruto-1-quinase฀é฀uma฀enzima฀regulatória฀฀
฀ 574 ฀ da฀glicólise,฀589
฀ Glicose฀é฀metabolizada฀diferentemente฀em฀várias฀ ฀ ฀ Regulação฀da฀6-fosfofruto-1-quinase฀por฀฀
células,฀575 ฀ ฀ ATP฀e฀AMP,฀589
฀ ฀ Regulação฀da฀6-fosfofruto-1-quinase฀por฀pH฀฀
15.3฀ VIA฀GLICOLÍTICA,฀577 ฀ ฀ intracelular,฀590
฀ Glicólise฀ocorre฀em฀três฀estágios,฀578 ฀ ฀ Regulação฀da฀6-fosfofruto-1-quinase฀por฀฀
฀ ฀ Estágio฀um:฀preparação฀da฀glicose,฀578 ฀ ฀ citrato,฀592
฀ ฀ Estágio฀dois:฀quebra฀de฀um฀intermediário฀฀ ฀ Controle฀hormonal฀da฀6-fosfofruto-1-quinase฀por฀฀
฀ ฀ fosforilado,฀578 ฀ cAMP฀e฀frutose฀2,6-bisfosfato,฀592
฀ ฀ Estágio฀três:฀reações฀de฀óxido-redução฀e฀฀ ฀ A฀enzima฀bifuncional฀6-fosfofruto-2-quinase/fru-฀
฀ ฀ síntese฀de฀ATP,฀578 ฀ tose฀2,6-bisfosfatase฀é฀regulada฀por฀fosforila-฀
฀ ção,฀595
฀ Rendimento฀em฀ATP฀e฀equação฀balanceada฀da฀฀
฀ Coração฀contém฀uma฀isoenzima฀diferente฀da฀
฀ glicólise฀anaeróbica,฀581
฀ ฀ 6-fosfofruto-2-quinase/frutose฀2,6-bisfosfa-฀
฀ NADH฀gerado฀por฀glicólise฀deve฀ser฀oxidado฀no-฀
฀ tase,฀595
฀ vamente฀a฀NAD +:฀papel฀da฀lactato฀desidro-฀
฀ Piruvato฀quinase฀é฀também฀uma฀enzima฀regula-฀
฀ genase฀e฀das฀lançadeiras฀de฀substrato,฀582 ฀ tória฀da฀glicólise,฀595
฀ ฀ Glicólise฀anaeróbica,฀582
฀ ฀ Glicólise฀aeróbica,฀582 15.5฀GLUCONEOGÊNESE,฀597
฀ Lançadeiras฀são฀importantes฀em฀outras฀vias฀de฀฀ ฀ Síntese฀de฀glicose฀é฀necessária฀para฀sobrevivên-฀
฀ óxido-redução,฀583 ฀ cia,฀597
฀ ฀ Oxidação฀de฀álcool,฀583 ฀ ฀ Ciclos฀de฀Cori฀e฀da฀alanina,฀599
฀ ฀ Formação฀de฀glucuronídeo,฀583 ฀ Síntese฀de฀glicose฀a฀partir฀de฀lactato,฀600
฀ Reagentes฀sulfidrila฀e฀fluoreto฀inibem฀glicólise,฀ ฀ ฀ Gluconeogênese฀usa฀muitas฀enzimas฀glicolí-฀
฀ 583 ฀ ฀ ticas฀na฀direção฀inversa,฀601
฀ Arsenato฀impede฀síntese฀de฀ATP฀sem฀inibir฀gli-฀ ฀ Glicose฀é฀sintetizada฀a฀partir฀da฀maioria฀dos฀฀
฀ cólise,฀583 ฀ aminoácidos,฀602

BioQ.15 572 22.01.07 18:00:31

 574฀฀฀|฀฀฀PARTE฀4฀฀VIA฀METABÓLICAS฀E฀SEU฀CONTROLE
GLICOGÊNIO
Glicogenólise Glicogênese
GLICOSE
Glicólise Gluconeogênese
LACTATO
FIGURA฀15.1
Relação฀da฀glicose฀com฀as฀principais฀vias฀do฀metabolismo฀de฀
carboidratos.
gulação฀é฀exercida฀em฀enzimas฀chaves฀será฀enfatizado฀
ao฀longo฀do฀capítulo.฀
Isto฀ será฀ particularmente฀ verdadeiro฀ para฀ síntese฀
(glicogênese)฀ e฀ degradação฀ (glicogenólise)฀ de฀ glicogê-
nio.฀Muitas฀células฀armazenam฀glicogênio฀para฀suas฀pró-
prias฀necessidades฀futuras.฀O฀fígado฀é฀menos฀egoísta,฀ar-
mazenando฀glicogênio฀principalmente฀para฀manutenção฀
da฀glicose฀sangüínea,฀para฀garantir฀que฀outros฀tecidos,฀
em฀especial฀o฀cérebro,฀tenham฀um฀suprimento฀adequa-
do.฀Regulação฀da฀síntese฀e฀da฀degradação฀de฀glicogênio฀é฀
um฀modelo฀para฀nosso฀entendimento฀de฀como฀hormônios฀
funcionam฀e฀como฀vias฀metabólicas฀são฀reguladas.฀Estes฀
tópicos฀contribuem฀para฀nosso฀entendimento฀da฀condi-
ção฀ diabética,฀ do฀ jejum฀ e฀ de฀ como฀ os฀ tecidos฀ do฀ corpo฀
respondem฀a฀estresse,฀trauma฀severo฀e฀lesões.
A฀ química฀ e฀ a฀ nomenclatura฀ dos฀ carboidratos฀ são฀
apresentadas฀no฀Apêndice.
15.2฀|฀GLICÓLISE
Glicólise฀Ocorre฀em฀Todas฀as฀Células฀
Humanas
A฀via฀de฀Embden-Meyerhof฀ou฀via฀glicolítica฀repre-
senta฀um฀processo฀antigo,฀que฀ocorre฀em฀todas฀as฀célu-
las฀do฀corpo฀humano,฀pelo฀qual฀ocorre฀degradação฀ana-
eróbica฀de฀glicose฀em฀lactato,฀com฀liberação฀de฀energia฀
como฀ATP.฀฀Este฀é฀um฀exemplo฀da฀fermentação฀ana-
eróbica,฀ um฀ termo฀ usado฀ para฀ vias฀ metabólicas฀ que฀
organismos฀usam฀para฀extrair฀energia฀química฀de฀com-
bustíveis฀ ricos฀ em฀ energia,฀ em฀ ausência฀ de฀ oxigênio.฀
Para฀muitos฀tecidos,฀glicólise฀é฀só฀uma฀via฀fornecedora฀
de฀energia฀de฀emergência,฀capaz฀de฀produzir฀2฀moles฀de฀
ATP฀a฀partir฀de฀1฀mol฀de฀glicose,฀em฀ausência฀de฀oxi-
gênio฀(Figura฀15.2).฀Quando฀o฀suprimento฀de฀oxigênio฀
de฀ um฀ tecido฀ é฀ interrompido,฀ os฀ níveis฀ de฀ ATP฀ ainda฀
podem฀ser฀mantidos฀pela฀glicólise,฀pelo฀menos฀por฀um฀
curto฀ período.฀ Muitos฀ exemplos฀ poderiam฀ ser฀ dados,฀
mas฀ a฀ capacidade฀ de฀ utilizar฀ glicólise฀ como฀ uma฀ fon-
te฀de฀energia฀é฀particularmente฀importante฀durante฀o฀
nascimento฀natural฀de฀seres฀humanos.฀Com฀exceção฀do฀
cérebro,฀a฀circulação฀do฀sangue฀diminui฀para฀a฀maioria฀
das฀partes฀do฀corpo฀do฀bebê,฀durante฀o฀parto.฀Normal-
mente,฀o฀cérebro฀não฀é฀privado฀de฀oxigênio฀durante฀o฀
parto,฀mas฀outros฀tecidos฀passam฀a฀depender฀da฀glicóli-
BioQ.15 574
CH2OH
O
H H
OH H
HO OH
H OH
�-D-Glicose
2 ADP3– + 2 Pi2–
2 ATP4–
O O–
C
2 HO C H
CH3
L-Lactato
FIGURA฀15.2
Equação฀geral฀balanceada฀da฀soma฀das฀reações฀da฀glicólise.
se฀para฀seu฀suprimento฀de฀ATP,฀até฀que฀um฀suprimento฀
normal฀ de฀ oxigênio฀ esteja฀ disponível.฀ Isto฀ economiza฀
oxigênio฀ para฀ ser฀ usado฀ pelo฀ cérebro,฀ ilustrando฀ um฀
dos฀muitos฀mecanismos฀que฀evoluíram฀para฀assegurar฀a฀
sobrevivência฀do฀tecido฀cerebral฀em฀momentos฀de฀es-
tresse.฀Oxigênio฀não฀é฀necessário฀para฀glicólise;฀de฀fato,฀
oxigênio฀ pode,฀ indiretamente,฀ suprimir฀ glicólise฀ pelo฀
efeito฀ Pasteur,฀ que฀ será฀ considerado฀ mais฀ tarde฀ (p.฀
589).฀Contudo,฀glicólise฀ocorre฀em฀células฀com฀um฀su-
primento฀abundante฀de฀oxigênio฀molecular.฀Desde฀que฀
as฀células฀também฀contenham฀mitocôndrias,฀o฀produto฀
final฀da฀glicólise฀em฀presença฀de฀oxigênio฀é฀piruvato,฀e฀
não฀lactato.฀Piruvato฀é,฀então,฀completamente฀oxidado฀
a฀ CO2฀ e฀ H2O฀ pelo฀ complexo฀ piruvato฀ desidrogenase฀ e฀
enzimas฀do฀ciclo฀TCA฀alojadas฀dentro฀de฀mitocôndrias฀
(Figura฀15.3).฀Glicólise,฀portanto,฀prepara฀para฀a฀oxida-
ção฀aeróbica฀dos฀carboidratos.฀O฀processo฀completo฀de฀
glicólise฀ e฀ oxidação฀ mitocondrial฀ do฀ piruvato฀ a฀ CO2฀ e฀
H2O฀tem฀a฀seguinte฀equação:
D-Glicose(C6H12O6)฀+฀6฀O2฀+฀32฀ADP3-฀+฀32฀Pi฀2-฀+฀
+฀32฀H+฀→฀6฀CO2฀+฀6฀H2O฀+฀32฀ATP4฀-
Muito฀ mais฀ ATP฀ é฀ produzido฀ na฀ oxidação฀ comple-
ta฀da฀glicose฀a฀CO2฀e฀H2O฀(32฀ATP/glicose)฀do฀que฀na฀
conversão฀ de฀ glicose฀ em฀ lactato฀ (2฀ ATP/glicose).฀ Isto฀
tem฀ importantes฀ conseqüências฀ a฀ serem฀ consideradas฀
em฀ detalhes฀ mais฀ adiante.฀ A฀ importância฀ da฀ glicólise฀
como฀uma฀via฀preparatória฀é฀melhor฀exemplificada฀pelo฀
cérebro,฀que฀tem฀uma฀necessidade฀absoluta฀de฀glicose.฀
O฀piruvato฀processado฀pela฀glicólise฀é฀oxidado฀a฀CO2฀em฀
mitocôndrias.
Um฀ cérebro฀ humano฀ adulto฀ usa฀ aproximadamente฀
120฀g฀de฀glicose฀por฀dia฀para฀suprir฀sua฀necessidade฀de฀
ATP.฀Em฀contraste,฀glicólise฀com฀lactato฀como฀produto฀
final฀é฀o฀principal฀mecanismo฀de฀produção฀de฀ATP฀em฀
alguns฀outros฀tecidos.฀Glóbulos฀vermelhos฀não฀têm฀mi-
tocôndrias฀e,฀portanto,฀são฀incapazes฀de฀converter฀piru-
vato฀em฀CO2.฀A฀córnea,฀o฀cristalino฀e฀regiões฀da฀retina฀
22.01.07 18:00:33
 CAPÍTULO฀15฀฀METABOLISMO฀DE฀CARBOIDRATOS฀I:฀PRINCIPAIS฀VIAS฀METABÓLICAS฀E฀SEU฀CONTROLE฀฀฀|฀฀฀589
ína฀enzima฀glucoquinase฀no฀fígado.฀Portanto,฀uma฀pes-
soa฀que฀está฀consumindo฀uma฀refeição฀grande฀e฀rica฀em฀
carboidratos฀terá฀maiores฀quantidades฀de฀glucoquinase฀
do฀ que฀ uma฀ que฀ não฀ está.฀ O฀ fígado฀ com฀ glucoquinase฀
induzida฀contribui฀mais฀para฀baixar฀os฀níveis฀elevados฀
de฀ glicose฀ no฀ sangue.฀ A฀ ausência฀ de฀ insulina฀ torna฀ o฀
fígado฀de฀pacientes฀com฀diabetes฀mellitus฀deficiente฀em฀
glucoquinase,฀a฀despeito฀dos฀altos฀níveis฀de฀glicose฀san-
güínea,฀e฀diminui฀a฀capacidade฀de฀฀o฀fígado฀“tamponar”฀
a฀ glicose฀ sangüínea฀ (ver฀ Corr.฀ Clín.฀ 15.4).฀ Defeitos฀ no฀
gene฀que฀codifica฀glucoquinase,฀que฀alteram฀sua฀S0,5฀e/
ou฀Vmax฀causam฀diabetes฀do฀jovem฀com฀início฀na฀matu-
ridade฀(MODY,฀maturity-onset฀diabetes฀of฀the฀young),฀
uma฀forma฀de฀diabetes฀mellitus฀tipo฀2.
6-Fosfofruto-1-quinase฀É฀uma฀
Enzima฀Regulatória฀da฀Glicólise
6-Fosfofruto-1-quinase฀ seja฀ um฀ ponto฀ regulatório฀
muito฀importante฀da฀glicólise.฀Catalisa฀a฀primeira฀eta-
pa฀ de฀ comprometimento฀ da฀ glicólise฀ porque฀ a฀ reação฀
catalisada฀pela฀fosfoglicose฀isomerase฀é฀reversível,฀e฀cé-
lulas฀fazem฀uso฀de฀glicose฀6-fosfato฀na฀via฀das฀pentoses฀
fosfato฀e฀para฀síntese฀de฀glicogênio.฀Citrato,฀ATP฀e฀íons฀
hidrogênio฀ (baixo฀ pH)฀ são฀ os฀ efetores฀ alostéricos฀ ne-
gativos฀ importantes,฀ enquanto฀ AMP฀ e฀ frutose฀ 2,6-bis-
fosfato฀ são฀ importantes฀ efetores฀ alostéricos฀ positivos฀
(Figura฀15.13).฀Estes฀compostos฀sinalizam฀a฀necessida-
de฀de฀diferentes฀velocidades฀da฀glicólise฀em฀resposta฀a฀
mudanças฀ em฀ (a)฀ estado฀ energético฀ da฀ célula฀ (ATP฀ e฀
AMP),฀(b)฀ambiente฀interno฀da฀célula฀(íons฀hidrogênio),฀
(c)฀disponibilidade฀de฀combustíveis฀alternativos,฀como฀
ácidos฀graxos฀e฀corpos฀cetônicos฀(citrato),฀e฀(d)฀razão฀
insulina/glucagon฀no฀sangue฀(frutose฀2,6-bisfosfato).฀
Regulação฀da฀6-Fosfofruto-1-quinase฀por฀
ATP฀e฀AMP
O฀efeito฀Pasteur฀é฀a฀inibição฀da฀utilização฀de฀glicose฀
e฀ o฀ acúmulo฀ de฀ lactato฀ que฀ ocorre฀ quando฀ respiração฀
(consumo฀de฀oxigênio)฀é฀iniciada฀em฀células฀anaeróbi-
cas.฀É฀perfeitamente฀compreensível฀em฀bases฀termodi-
nâmicas,฀uma฀vez฀que฀a฀oxidação฀completa฀da฀glicose฀a฀
CO2฀e฀H2O฀rende฀muito฀mais฀ATP฀do฀que฀glicólise฀ana-
eróbica:
Glicólise:
D-Glicose฀+฀2฀ADP3–฀+฀2฀Pi 2 –฀→฀2฀L-lactato –฀+฀2฀ATP4–
Oxidação฀completa:
D-Glicose฀+฀6฀O2฀+฀32฀ADP3-฀+฀32฀Pi 2 –฀+฀32฀H+฀→฀
→ 6฀CO2฀+฀6฀H2O฀+฀32฀ATP4–
Células฀usam฀ATP฀para฀fornecer฀a฀energia฀necessá-
ria฀a฀seus฀processos฀de฀trabalho฀inerentes.฀Como฀muito฀
mais฀ATP฀é฀produzido฀a฀partir฀de฀glicose฀em฀presença฀
de฀oxigênio,฀muito฀menos฀glicose฀precisa฀ser฀consumida฀
para฀satisfazer฀a฀demanda฀de฀energia.฀O฀efeito฀Pasteur฀
BioQ.15 589
CORRELAÇÃO฀CLÍNICA฀15.4
Diabetes฀Mellitus
Diabetes฀ mellitus฀ é฀ uma฀ doença฀ crônica฀ que฀ se฀
caracteriza฀ por฀ alterações฀ no฀ metabolismo฀ de฀
carboidratos,฀ lipídeos฀ e฀ proteínas.฀ Dois฀ tipos฀
principais฀são฀identificados฀clinicamente:฀tipo฀1฀
(ver฀ Corr.฀ Clín.฀ 22.8,฀ p.฀ 857)฀ e฀ tipo฀ 2฀ (ver฀ Corr.฀
Clín.฀22.7,฀p.฀855).
Em฀ pacientes฀ sem฀ hiperglicemia฀ em฀ jejum,฀
o฀teste฀de฀tolerância฀à฀glicose฀por฀via฀oral฀pode฀
ser฀usado฀para฀diagnóstico.฀Consiste฀na฀determi-
nação฀ do฀ nível฀ de฀ glicose฀ sangüínea฀ no฀ estado฀
de฀jejum฀e฀em฀intervalos฀de฀30-60฀min.,฀por฀2฀h฀
ou฀ mais,฀ após฀ consumo฀ de฀ sobrecarga฀ de฀ 100฀ g฀
de฀ glicose.฀ Em฀ indivíduos฀ normais,฀ glicose฀ san-
güínea฀ retorna฀ aos฀ níveis฀ normais฀ em฀ 2฀ h฀ após฀
ingestão฀do฀carboidrato.฀No฀diabetes,฀glicose฀no฀
sangue฀atinge฀um฀nível฀mais฀elevado฀e฀permane-
ce฀ elevada฀ por฀ períodos฀ de฀ tempo฀ mais฀ longos,฀
dependendo฀da฀gravidade฀da฀doença.฀Entretanto,฀
muitos฀ fatores฀ podem฀ contribuir฀ para฀ um฀ teste฀
de฀tolerância฀a฀glicose฀anormal.฀O฀paciente฀deve฀
ter฀ consumido฀ uma฀ dieta฀ rica฀ em฀ carboidratos฀
nos฀3฀dias฀anteriores,฀presumivelmente฀para฀per-
mitir฀indução฀de฀enzimas฀das฀vias฀de฀utilização฀
de฀glicose,฀por฀exemplo,฀glucoquinase,฀acil฀graxo฀
sintase฀e฀acetil-CoA฀carboxilase.฀Quase฀todas฀as฀
infecções฀(até฀mesmo฀um฀resfriado)฀e฀“estresse”฀
menos฀definido฀(presumivelmente฀por฀efeitos฀so-
bre฀ o฀ sistema฀ nervoso฀ simpático)฀ podem฀ resul-
tar฀ em฀ anormalidades฀ transitórias฀ no฀ teste฀ de฀
tolerância฀ à฀ glicose.฀ Devido฀ a฀ esses฀ problemas,฀
hiperglicemia฀ de฀ jejum฀ seria,฀ provavelmente,฀ o฀
teste฀sine฀qua฀non฀para฀o฀diagnóstico฀de฀diabe-
tes.฀Captação฀de฀glicose฀por฀tecidos฀sensíveis฀a฀in-
sulina฀–฀isto฀é,฀múscular฀e฀adiposo฀–฀é฀diminuída฀
no฀estado฀diabético.฀O฀paciente฀diabético฀ou฀não฀
tem฀insulina฀ou฀desenvolveu฀“resistência฀à฀insuli-
na”฀nestes฀tecidos.฀Resistência฀à฀insulina฀resulta฀
de฀anomalia฀no฀receptor฀de฀insulina฀ou฀em฀etapas฀
subseqüentes,฀mediadoras฀dos฀efeitos฀metabólicos฀
da฀insulina.฀Células฀do฀parênquima฀hepático฀não฀
requerem฀insulina฀para฀captar฀glicose.฀Sem฀insu-
lina,฀contudo,฀o฀fígado฀tem฀capacidade฀diminuída฀
para฀remover฀glicose฀do฀sangue.฀Isto฀é฀explicado,฀
em฀parte,฀por฀atividade฀diminuída฀de฀glucoquina-
se฀e฀a฀perda฀de฀ação฀da฀insulina฀sobre฀enzimas-
chaves฀da฀glicogênese฀e฀da฀via฀glicolítica.
Fonte:฀Taylor,฀S.฀I.฀Insulin฀action,฀insulin฀resistance฀
and฀ type฀ 2฀ diabetes฀ mellitus.฀ Em:฀ C.฀ R.฀ Scriver,฀ A.฀ L.฀
Beaudet,฀W.฀S.฀Sly฀e฀D.฀Valle฀(Eds.),฀The฀Metabolic฀and฀
Molecular฀ Bases฀ of฀ Inherited฀ Disease,฀ 8th฀ ed.,฀ New฀
York:฀McGraw-Hill,฀2001,฀p.฀1433.
22.01.07 18:00:57
 CAPÍTULO฀15฀฀METABOLISMO฀DE฀CARBOIDRATOS฀I:฀PRINCIPAIS฀VIAS฀METABÓLICAS฀E฀SEU฀CONTROLE฀฀฀|฀฀฀609
|
15.6฀ ฀ GLICOGENÓLISE฀E฀
GLICOGÊNESE
Glicogênio฀É฀a฀Forma฀de฀
Armazenamento฀de฀Glicose
Glicogenólise฀refere-se฀à฀quebra฀de฀glicogênio฀em฀gli-
cose฀ou฀glicose฀6-fosfato;฀glicogênese฀refere-se฀à฀síntese฀
de฀glicogênio.฀Estes฀processos฀ocorrem฀em฀quase฀todos฀
os฀tecidos,฀mas฀especialmente฀em฀músculo฀e฀fígado.฀No฀
homem฀ bem฀ alimentado,฀ o฀ conteúdo฀ de฀ glicogênio฀ no฀
fígado฀pode฀responder฀por฀até฀10%฀do฀peso฀úmido฀des-
se฀órgão.฀Músculo฀armazena฀menos฀glicogênio,฀quando฀
expresso฀ nas฀ mesmas฀ bases฀ –฀ um฀ máximo฀ de฀ apenas฀
1-2%฀do฀seu฀peso฀úmido.฀Contudo,฀a฀maioria฀das฀pes-
soas฀tem฀mais฀músculos฀do฀que฀fígado,฀com฀o฀total฀do฀
glicogênio฀muscular฀chegando฀ao฀dobro฀da฀quantidade฀
de฀glicogênio฀hepático.
Grânulos฀ de฀ glicogênio฀ são฀ abundantes฀ no฀ fígado฀
de฀animais฀bem฀alimentados฀(Figura฀15.46),฀mas฀estão฀
virtualmente฀ausentes฀deste฀órgão฀após฀24฀h฀de฀jejum.฀
Exercício฀pesado฀causa฀a฀mesma฀perda฀de฀grânulos฀de฀
glicogênio฀ em฀ fibras฀ musculares.฀ Esses฀ grânulos฀ são฀
grupos฀de฀moléculas฀individuais฀de฀glicogênio฀que฀têm฀
uma฀ massa฀ de฀ até฀ 2฀ ฀ 107฀ Da.฀ Glicogênio฀ é฀ composto฀
de฀ resíduos฀ glucosil,฀ ligados฀ principalmente฀ por฀ liga-
ções฀glicosídicas฀α-1,4฀(Figura฀15.47).฀Ramificações฀
surgem฀ de฀ ligações฀ α-1,6฀ freqüentes.฀ Um฀ braço฀ da฀
FIGURA฀15.46
Micrografia฀eletrônica฀mostrando฀grânulos฀de฀glicogênio฀
(material฀corado฀escuro)฀no฀fígado฀de฀um฀rato฀alimentado.
฀Micrografia฀generosamente฀cedida฀por฀Dr.฀Robert฀R.฀Cardell฀
do฀Department฀of฀Anatomy฀da฀University฀of฀Cincinnati.
BioQ.15 609
CH2OH CH2OH
O O
O O O
Ligação glicosídica -1,4
���
CH2OH
O
O O
CH2
O
O O
Ligação glicosídica -1,6
���
FIGURA฀15.47
Dois฀tipos฀de฀ligações฀entre฀as฀moléculas฀de฀glicose฀estão฀
presentes฀no฀glicogênio.
“árvore”฀ do฀ glicogênio฀ (ver฀ Figura฀ 15.48)฀ é฀ caracteri-
zado฀por฀ramos฀a฀cada฀quatro฀resíduos฀glucosil฀no฀es-
queleto฀(core)฀mais฀central฀da฀molécula,฀e฀muito฀menos฀
freqüentemente฀ em฀ regiões฀ mais฀ externas.฀ Glicogênio฀
contrasta฀ com฀ proteínas฀ e฀ ácidos฀ nucléicos,฀ devido฀ a฀
essa฀ ramificação,฀ mas,฀ é฀ claro,฀ é฀ uma฀ forma฀ de฀ arma-
zenamento฀de฀combustível฀e฀não฀catalisa฀reações฀nem฀
contém฀informação฀em฀uma฀célula.
Glicogênio฀é฀estocado฀em฀músculo฀e฀fígado฀por฀razões฀
bem฀ diferentes.฀ Glicogênio฀ do฀ músculo฀ é฀ uma฀ reserva฀
de฀combustível฀para฀a฀produção฀de฀ATP฀dentro฀daquele฀
tecido,฀ enquanto฀ glicogênio฀ hepático฀ é฀ uma฀ reserva฀ de฀
glicose฀para฀a฀manutenção฀das฀concentrações฀de฀glicose฀
no฀sangue.฀Os฀níveis฀de฀glicogênio฀hepático฀variam:฀são฀
altos฀logo฀após฀uma฀refeição฀e,฀depois,฀diminuem฀lenta-
mente฀à฀medida฀que฀é฀usado฀para฀ajudar฀a฀manter฀o฀nível฀
de฀glicose฀no฀sangue฀(ver฀Figura฀15.49)฀entre฀refeições฀
e฀durante฀o฀jejum฀noturno.฀No฀homem฀como฀no฀rato,฀o฀
FIGURA฀15.48
Estrutura฀ramificada฀do฀glicogênio
22.01.07 18:01:40
 626฀฀฀|฀฀฀PARTE฀4฀฀VIA฀METABÓLICAS฀E฀SEU฀CONTROLE

PARTE฀4฀VIAS฀METABÓLICAS฀E฀SEU฀CONTROLE

16
COO– CH2OH
O –O SO O
H
H
3
H O–
OH H O H
H H H

H OH H HNCOCH3
�
Unidade repetitiva do condroitim 4-sulfato

METABOLISMO฀DE฀
CARBOIDRATOS฀II:฀
VIAS฀ESPECIAIS฀E฀
GLICOCONJUGADOS
Nancy฀B.฀Schwartz

16.1฀ VISÃO฀GERAL,฀627 16.5฀ GLICOPROTEÍNAS,฀638

16.2฀ VIA฀DAS฀PENTOSES฀FOSFATO,฀627
฀ Via฀das฀pentoses฀fosfato฀tem฀duas฀fases,฀627
฀ ฀ Glicose฀6-fosfato฀é฀oxidada฀e฀descarboxilada฀฀
฀ ฀ em฀uma฀pentose฀fosfato,฀627
฀ ฀ Interconversões฀de฀pentoses฀fosfato฀levam฀a฀฀
฀ ฀ intermediários฀glicolíticos,฀628
฀ Glicose฀6-fosfato฀pode฀ser฀completamente฀oxida-฀
฀ da฀a฀CO2,฀628
฀ Via฀das฀pentoses฀fosfato฀produz฀NADPH,฀630
฀ ฀
16.3฀ INTERCONVERSÕES฀DE฀AÇÚCARES฀E฀FORMA-
ÇÃO฀DE฀NUCLEOTÍDEOS-AÇÚCAR,฀631
฀ Isomerização฀e฀fosforilação฀são฀reações฀comuns฀฀
฀ para฀interconverter฀carboidratos,฀631
฀ Açúcares฀ligados฀a฀nucleotídeos฀são฀intermediários฀฀
฀ em฀muitas฀transformações฀de฀açúcares,฀633
฀ Epimerização฀interconverte฀glicose฀e฀galactose,฀
฀ 633
฀ Ácido฀glucurônico฀é฀formado฀por฀oxidação฀de฀฀
฀ UDP-glicose,฀634
฀ Descarboxilação,฀óxido-redução฀e฀transaminação฀฀
฀ de฀açúcares฀geram฀produtos฀necessários,฀635
฀ Ácidos฀siálicos฀são฀derivados฀de฀N-acetilglucosa-฀
฀ mina,฀637
฀ Glicoproteínas฀contêm฀quantidades฀variáveis฀de฀฀
฀ carboidratos,฀639
฀ Carboidratos฀são฀ligados฀Covalentemente฀a฀glico-฀
฀ proteínas฀por฀ligações฀N-฀ou฀O-glicosídicas,฀฀
฀ ฀ 639
฀ Síntese฀de฀glicoproteínas฀N-ligadas฀envolve฀doli-฀
฀ col฀fosfato,฀640
16.6฀ PROTEOGLICANOS,฀642
฀ Existem฀seis฀classes฀de฀proteoglicanos,฀642
฀ Hialuronato฀é฀um฀copolímero฀de฀N-acetilglu-฀
฀ ฀ cosamina฀e฀ácido฀glucurônico,฀642
฀ ฀ Condroitim฀sulfatos฀são฀os฀glicosaminoglica-฀
฀ ฀ nos฀mais฀abundantes,฀642
฀ ฀ Dermatam฀sulfato฀contém฀ácido฀L-idurônico,฀
฀ ฀ 643
฀ ฀ Heparina฀e฀heparam฀sulfato฀diferem฀dos฀฀
฀ ฀ outros฀glicosaminoglicanos,฀643
฀ ฀ Queratam฀sulfato฀existe฀em฀duas฀formas,฀643
฀ Biossíntese฀de฀condroitim฀sulfato฀é฀típica฀da฀฀
฀ formação฀de฀glicosaminoglicanos,฀643
BIBLIOGRAFIA,฀647
QUESTÕES฀E฀RESPOSTAS,฀647

16.4฀ BIOSSÍNTESE฀DE฀CARBOIDRATOS฀COMPLE-
XOS,฀637

BioQ.16 626 22.01.07 18:09:26

 CAPÍTULO฀16฀฀METABOLISMO฀DE฀CARBOIDRATOS฀II:฀VIAS฀ESPECIAIS฀E฀GLICOCONJUGADOS฀฀฀|฀฀฀631

ATP ADP (6) NADP+ (6) NADPH + (6) H+ H2O

Glicose (6) Glicose 6-fosfato 6-Fosfoglucono-lactona 6-Fosfogluconato

(6) NADP+
(6) CO2 (6) NADPH + (6)H+

(6) Ribulose 5-fosfato

(4) Xilulose 5-fosfato (2) Ribose 5-fosfato

(2) Frutose 6-fosfato

(2) Gliceraldeído 3-fosfato + (2) Sedo-heptulose 7-fosfato
+

Gliceraldeído 3-fosfato

(2) Eritrose 4-fosfato + (2) Frutose 6-fosfato

FIGURA฀16.3
Via฀das฀pentoses฀fosfato.

des,฀requerem฀equivalentes฀de฀redução฀de฀NADPH.฀No฀
fígado,฀20-30%฀do฀CO2฀produzido฀pode฀ser฀proveniente฀
da฀via฀das฀pentoses฀fosfato;฀o฀equilíbrio฀entre฀glicólise฀e฀
via฀das฀pentoses฀fosfato฀depende฀das฀necessidades฀me-
tabólicas฀do฀órgão.฀Em฀músculo฀estriado฀de฀mamíferos,฀
que฀apresenta฀pouca฀síntese฀de฀ácidos฀graxos฀e฀esterói-
des,฀todo฀catabolismo฀de฀G6P฀ocorre฀por฀glicólise฀e฀ciclo฀
TCA,฀com฀nenhuma฀oxidação฀direta฀de฀glicose฀6-fosfato฀
pela฀via฀das฀pentoses฀fosfato.
Isomerização฀e฀Fosforilação฀são฀
Reações฀Comuns฀para฀Interconverter฀
Carboidratos
Formação฀ de฀ alguns฀ açúcares฀ pode฀ ocorrer฀ direta-
mente,฀ começando฀ com฀ glicose,฀ por฀ reações฀ de฀ modi-
ficações,฀como฀conversão฀de฀G6P฀em฀frutose฀6-fosfato฀
por฀ fosfoglucose฀ isomerase,฀ na฀ glicólise.฀ Uma฀ isomeri-
zação฀ aldose-cetose฀ semelhante,฀ catalisada฀ por฀ fos-

|
fomanose฀isomerase,฀produz฀manose฀6-fosfato.฀De-
16.3฀ ฀INTERCONVERSÕES฀ ficiência฀ dessa฀ enzima฀ leva฀ a฀ uma฀ forma฀ de฀ síndrome฀
DE฀AÇÚCARES฀E฀FOR- de฀ glicoproteínas฀ deficientes฀ em฀ carboidratos฀ (CDGS,฀
carbohydrate-deficient฀glycoprotein฀syndrome)฀(ver฀
MAÇÃO฀DE฀NUCLEO- Corr.฀Clín.฀16.3).
TÍDEO-AÇÚCAR Fosforilação฀ e฀ transferência฀ interna฀ de฀ um฀ grupo฀
fosfato฀na฀mesma฀molécula฀de฀açúcar฀são฀também฀mo-
dificações฀comuns.฀Glicose฀1-fosfato,฀resultante฀da฀gli-
A฀ maioria฀ dos฀ monossacarídeos฀ encontrados฀ em฀ com- cogenólise,฀é฀convertida฀em฀G6P฀pela฀fosfoglucomutase.฀
postos฀biológicos฀deriva฀da฀glicose.฀As฀transformações฀ Galactose฀é฀fosforilada฀a฀galactose฀1-fosfato฀por฀galac-
dos฀açúcares฀mais฀comuns฀em฀sistemas฀de฀mamíferos฀ toquinase,฀e฀manose฀a฀manose฀6-fosfato฀por฀manoqui-
são฀resumidas฀na฀Figura฀16.4. nase.฀Frutose฀livre,฀um฀importante฀constituinte฀da฀die-
ta,฀é฀fosforilada฀no฀fígado฀a฀frutose฀1-fosfato,฀por฀uma฀
frutoquinase฀especial.฀Entretanto,฀nenhuma฀mutase฀in-
terconverte฀frutose฀1-fosfato฀e฀frutose฀6-fosfato,฀nem฀a฀
fosfofrutoquinase฀pode฀sintetizar฀frutose฀1,6-bisfosfato฀
a฀partir฀de฀frutose฀1-fosfato.฀Em฀vez฀disso,฀frutose฀1-fos-

BioQ.16 631 22.01.07 18:09:30

 638฀฀฀|฀฀฀PARTE฀4฀฀VIA฀METABÓLICAS฀E฀SEU฀CONTROLE
redutora฀de฀um฀açúcar฀aceptor.฀Uma฀glicosiltransferase฀
é฀específica฀para฀o฀açúcar฀aceptor,฀o฀açúcar฀transferido฀
e฀a฀ligação฀formada.฀Uma฀reação฀de฀glicosiltransferase฀
é฀resumida฀como฀se฀segue:
Nucleosídeo-
glicosiltransferase
 glicosil1 −
difosfato- + glicose    Isso฀ sugere฀ que฀ oligossacarídeos฀ tenham฀ o฀ potencial฀
glicose (aceptor) O − glicose2 −
(glicosídeo)
(doador)
+ nucleosídeo difosfato
CORRELAÇÃO฀CLÍNICA฀16.8
Substâncias฀dos฀Grupos฀
Sangüíneos
A฀ superfície฀ dos฀ eritrócitos฀ humanos฀ é฀ coberta฀
por฀um฀complexo฀mosaico฀de฀determinantes฀an-
tigênicos฀específicos,฀muitos฀dos฀quais฀são฀polis-
sacarídeos฀complexos.฀Há฀cerca฀de฀100฀determi-
nantes฀de฀grupos฀sangüíneos,฀pertencentes฀a฀21฀
sistemas฀ de฀ grupos฀ sangüíneos฀ independentes.฀
Os฀ mais฀ estudados฀ são฀ os฀ do฀ sistema฀ ABO฀ de฀
grupos฀sangüíneos฀e฀do฀sistema฀Lewis,฀estreita-
mente฀relacionado.฀Variação฀genética฀é฀alcançada฀
por฀glicosiltransferases฀específicas,฀responsáveis฀
pela฀síntese฀dos฀determinantes฀heterossacarídi-
cos.฀ O฀ gene฀ H฀ codifica฀ uma฀ fucosiltransferase,฀
que฀ adiciona฀ fucose฀ a฀ uma฀ galactose฀ periférica฀
do฀heterossacarídeo฀precursor.฀O฀alelo฀A฀codifica฀
uma฀ N-acetilgalactosamina฀ glicosiltransferase,฀
o฀alelo฀B฀codifica฀uma฀galactosiltransferase,฀e฀o฀
alelo฀O฀codifica฀uma฀proteína฀inativa.฀Os฀açúca-
res฀transferidos฀pelas฀enzimas฀A฀e฀B฀são฀adicio-
nados฀ ao฀ oligossacarídeo฀ H-específico.฀ O฀ gene฀
Lewis฀ (Le)฀ codifica฀ outra฀ fucosiltransferase,฀
que฀ adiciona฀ fucose฀ a฀ um฀ resíduo฀ periférico฀ de฀
N-acetilglucosamina฀ do฀ precursor.฀ Ausência฀ do฀
produto฀ do฀ gene฀ H฀ dá฀ origem฀ ao฀ determinante฀
Lea฀ específico,฀ enquanto฀ ausência฀ de฀ ambas฀ as฀
enzimas฀H฀e฀Le฀é฀responsável฀pela฀especificidade฀
Leb.฀ Elucidação฀ das฀ estruturas฀ desses฀ oligossa-
carídeos฀determinantes฀representa฀um฀marco฀na฀
química฀ de฀ carboidratos.฀ Este฀ conhecimento฀ é฀
essencial฀para฀práticas฀de฀transfusão฀de฀sangue฀
e฀ para฀ propósitos฀ legais฀ e฀ históricos.฀ Por฀ exem-
plo,฀ pó฀ de฀ tecidos฀ contendo฀ carboidratos฀ com-
plexos฀foi฀utilizado฀em฀análises฀sorológicas฀para฀
estabelecer฀o฀grupo฀sangüíneo฀de฀Tutankhamen฀
e฀de฀seus฀prováveis฀ancestrais.
Fonte:฀ Yamamoto,฀ F.,฀ Clausen,฀ I.,฀ White,฀ T.,฀ Mark,฀
J.฀e฀Hakomori,฀S.฀Molecular฀genetic฀basis฀of฀the฀histo-
blood฀group฀ABO฀system.฀Nature฀345:229,฀1990.
BioQ.16 638
Mais฀de฀40฀tipos฀de฀ligações฀glicosídicas฀foram฀iden-
tificados฀ em฀ oligossacarídeos฀ de฀ mamíferos,฀ e฀ cerca฀
de฀ 15฀ mais฀ em฀ glicosaminoglicanos.฀ A฀ multiplicidade฀
de฀ ligações฀ surge฀ da฀ diversidade฀ de฀ monossacarídeos฀
envolvidos฀ e฀ da฀ formação฀ de฀ ligações฀ α฀ e฀ β฀ com฀ cada฀
um฀dos฀grupos฀hidroxila฀disponíveis฀no฀açúcar฀aceptor.฀
para฀ grande฀ conteúdo฀ informacional.฀ De฀ fato,฀ sabe-se฀
que฀a฀bioatividade฀de฀muitas฀moléculas฀é฀determinada฀
pela฀ natureza฀ dos฀ resíduos฀ de฀ açúcares฀ constituintes.฀
Por฀exemplo,฀a฀especificidade฀antigênica฀dos฀principais฀
tipos฀ sangüíneos฀ é฀ determinada฀ pela฀ composição฀ em฀
açúcares฀(ver฀Corr.฀Clín.฀16.8).
N-acetilgalactosamina฀ é฀ o฀ imunodeterminante฀ do฀
sangue฀tipo฀A,฀e฀galactose,฀do฀sangue฀tipo฀B.฀Remoção฀
de฀N-acetilgalactosamina฀de฀eritrócitos฀do฀tipo฀A,฀ou฀
de฀galactose฀de฀eritrócitos฀do฀tipo฀B,฀converte฀ambos฀
em฀eritrócitos฀do฀tipo฀O.฀Cada฀vez฀mais,฀outros฀exem-
plos฀ de฀ açúcares฀ como฀ determinantes฀ de฀ especifici-
dade฀de฀receptores฀de฀superfície฀celular฀e฀interações฀
com฀lectinas,฀do฀direcionamento฀de฀células฀para฀cer-
tos฀tecidos฀e฀da฀sobrevivência฀ou฀remoção฀da฀circula-
ção฀de฀certas฀moléculas,฀têm฀sido฀reconhecidos.฀Todas฀
as฀ ligações฀ glicosídicas฀ identificadas฀ em฀ compostos฀
biológicos฀ são฀ degradadas฀ por฀ enzimas฀ hidrolíticas฀
específicas,฀glicosidases.฀Além฀de฀serem฀instrumentos฀
valiosos฀ para฀ a฀ elucidação฀ da฀ estrutura฀ de฀ oligossa-
carídeos,฀o฀interesse฀nessa฀classe฀de฀enzimas฀baseia-
se฀ nas฀ muitas฀ doenças฀ genéticas฀ do฀ metabolismo฀ de฀
carboidratos฀ complexos฀ que฀ resultam฀ de฀ defeitos฀ em฀
glicosidases฀(ver฀Corr.฀Clín.฀16.10฀e฀16.11;฀p.฀641฀e฀642,฀
respectivamente).
16.5฀|฀GLICOPROTEÍNAS
Glicoproteínas฀foram฀definidas฀como฀proteínas฀conjuga-
das,฀que฀contêm฀um฀ou฀mais฀açúcares,฀sem฀uma฀unida-
de฀repetitiva฀serial,฀e฀são฀ligados฀covalentemente฀a฀uma฀
proteína.฀ Esta฀ definição฀ exclui฀ os฀ proteoglicanos฀ (ver฀
p.฀652).฀Glicoproteínas฀em฀membranas฀celulares฀podem฀
ter฀um฀papel฀importante฀no฀comportamento฀de฀células฀
e,฀especialmente,฀em฀funções฀biológicas฀da฀membrana.฀
Glicoproteínas฀são฀constituintes฀do฀muco฀secretado฀por฀
certas฀ células฀ epiteliais,฀ onde฀ medeiam฀ lubrificação฀ e฀
proteção฀de฀tecidos฀que฀revestem฀os฀sistemas฀respira-
tório,฀gastrointestinal฀e฀reprodutor฀feminino.
Muitas฀ proteínas฀ secretadas฀ são฀ glicoproteínas,฀ e฀
estas฀ incluem฀ (a)฀ hormônios฀ como฀ hormônio฀ folículo-
estimulante,฀ hormônio฀ luteinizante฀ e฀ gonadotrofina฀
coriônica฀ e฀ (b)฀ proteínas฀ plasmáticas฀ como฀ orosomu-
cóides,฀ ceruloplasmina,฀ plasminogênio,฀ protrombina฀ e฀
imunoglobulinas.
22.01.07 18:09:38
 642฀฀฀|฀฀฀PARTE฀4฀฀VIA฀METABÓLICAS฀E฀SEU฀CONTROLE

CORRELAÇÃO฀CLÍNICA฀16.11 Defeitos฀Enzimáticos฀na฀Degradação฀de฀Glicolipídeos
Doenças฀de฀Glicolipídeos Doença Deficiência฀Enzimática

Um฀grupo฀de฀doenças฀genéticas฀humanas฀surge฀de฀ Tay-Sachs β-Hexosaminidase฀A

deficiências฀ em฀ hidrolases,฀ que฀ agem฀ predominan- de฀Sandhoff β-Hexosaminidases฀A฀e฀B
temente฀em฀substratos฀glicolipídicos,฀resultando฀em฀ GM1฀gangliosidose β-Galactosidase
acúmulo฀de฀produtos฀de฀glicolipídeos฀e฀gangliosíde- Sialidose Sialidase
os.฀ Os฀ sintomas฀ clínicos฀ associados฀ a฀ cada฀ um฀ dos฀ de฀Fabry α-Galactosidase
glicoconjugados฀ podem฀ variar฀ muito.฀ Entretanto,฀ de฀Gaucher β-Glucoceramidase
devido฀à฀preponderância฀de฀lipídeos฀no฀sistema฀ner-
de฀Krabbe β-Galactoceramidase
voso,฀tais฀doenças฀freqüentemente฀têm฀neurodege-
Leucodistrofia฀metacro- Arilsulfatase฀A฀(cerebro-
neração฀ associada฀ e฀ severa฀ deterioração฀ mental฀ e฀
mática sídeo฀sulfatase)
motora.

Fonte:฀Beutler,฀E.฀e฀G.฀Garabowski.฀Gaucher฀disease.฀Em:฀C.฀R.฀Scriver,฀A.฀R.฀Beaudet,฀W.฀S.฀Sly฀e฀D.฀Valle฀(Eds.),฀
The฀Metabolic฀and฀Molecular฀Bases฀of฀Inherited฀Disease,฀Vol.฀III,฀8th฀ed.฀New฀York:฀McGraw-Hill,฀2001,฀p.฀3635.

16.6฀|฀PROTEOGLICANOS das฀matrizes฀extracelulares฀e฀das฀superfícies฀celulares,฀
e฀participam฀de฀adesão฀e฀sinalização฀celular.

Esta฀ é฀ uma฀ classe฀ de฀ macromoléculas฀ complexas฀ que฀

pode฀conter฀95%฀ou฀mais฀carboidratos,฀e฀lembra฀mais฀
polissacarídeo฀ do฀ que฀ proteína.฀ Para฀ distingui-los฀ de฀
outras฀ glicoproteínas,฀ eles฀ são฀ chamados฀ proteoglica-
nos.฀Suas฀cadeias฀de฀carboidratos฀são฀chamadas฀glico-
saminoglicanos฀ou฀mucopolissacarídeos,฀especialmente฀
em฀referência฀às฀doenças฀de฀acúmulo฀mucopolissacari-
doses,฀que฀resultam฀de฀uma฀incapacidade฀de฀degradar฀
essas฀moléculas฀(ver฀Corr.฀Clín.฀16.13).
Existem฀Seis฀Classes฀de฀
Proteoglicanos
Proteoglicanos฀ consistem฀ de฀ muitas฀ cadeias฀ de฀ glico-
saminoglicanos฀ diferentes,฀ ligadas฀ covalentemente฀ a฀
um฀ esqueleto฀ protéico.฀ Seis฀ classes฀ são฀ reconhecidas:฀
condroitim฀ sulfato,฀ dermatam฀ sulfato,฀ queratam฀ sul-
fato,฀ heparam฀ sulfato,฀ heparina฀ e฀ hialuronato.฀ Certas฀
características฀ são฀ comuns฀ a฀ todas฀ as฀ diferentes฀ clas-
ses฀ de฀ glicosaminoglicanos.฀ As฀ longas฀ cadeias฀ hetero-
polissacarídicas฀ não-ramificadas฀ são฀ compostas,฀ em฀
grande฀ parte,฀ por฀ unidades฀ dissacarídicas฀ repetitivas,฀
consistindo฀ de฀ uma฀ hexosamina฀ e฀ um฀ ácido฀ urônico.฀
Constituintes฀ comuns฀ dos฀ glicosaminoglicanos฀ são฀
grupos฀sulfatos,฀ligados฀por฀ligações฀éster฀a฀certos฀mo-
nossacarídeos,฀ ou฀ por฀ ligações฀ amida฀ ao฀ grupo฀ amino฀
de฀glucosamina.฀Só฀hialuronato฀não฀é฀sulfatado฀e฀não฀
é฀covalentemente฀ligado฀a฀proteína.฀As฀carboxilas฀dos฀
ácidos฀ urônicos฀ e฀ os฀ grupos฀ sulfatos฀ contribuem฀ para฀
a฀natureza฀fortemente฀carregada฀dos฀glicosaminoglica-
nos.฀ Sua฀ carga฀ elétrica฀ e฀ sua฀ estrutura฀ macromolecu-
lar฀são฀importantes฀em฀seu฀papel฀como฀lubrificantes฀e฀
como฀ elementos฀ de฀ sustentação฀ no฀ tecido฀ conjuntivo.฀
Glicosaminoglicanos฀ são฀ componentes฀ predominantes฀
Hialuronato฀É฀um฀Copolímero฀de฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀
N-Acetilglucosamina฀e฀Ácido฀Glucurônico
Hialuronato฀difere฀dos฀outros฀tipos฀de฀glicosaminogli-
canos.฀É฀não-sulfatado,฀não฀é฀ligado฀covalentemente฀a฀
proteína,฀e฀não฀está฀limitado฀a฀tecidos฀animais,฀sendo฀
também฀ produzido฀ por฀ bactérias.฀ É฀ classificado฀ como฀
glicosaminoglicano฀ devido฀ a฀ sua฀ similaridade฀ estru-
tural฀ com฀ esses฀ polímeros,฀ e฀ consiste฀ exclusivamente฀
de฀ unidades฀ dissacarídicas฀ repetitivas฀ de฀ N-acetilglu-
cosamina฀ e฀ ácido฀ glucurônico฀ (Figura฀ 16.12).฀ Embora฀
tenha฀a฀estrutura฀química฀menos฀complexa฀dos฀glicosa-
minoglicanos,฀as฀cadeias฀podem฀alcançar฀105 -107฀Da.฀A฀
alta฀massa,฀o฀caráter฀polieletrolítico฀e฀o฀grande฀volume฀
que฀ocupa฀em฀solução฀contribuem฀para฀as฀propriedades฀
do฀ hialuronato฀ como฀ um฀ lubrificante฀ e฀ absorvente฀ de฀
choques.฀É฀encontrado฀predominantemente฀em฀líquido฀
sinovial,฀humor฀vítreo฀e฀cordão฀umbilical.
Condroitim฀Sulfatos฀São฀os฀
Glicosaminoglicanos฀Mais฀Abundantes
Os฀ glicosaminoglicanos฀ mais฀ abundantes฀ do฀ corpo,฀ os฀
condroitim฀sulfatos,฀são฀ligados฀a฀resíduos฀específicos฀
de฀ serina฀ em฀ um฀ esqueleto฀ protéico฀ por฀ meio฀ de฀ uma฀
região฀de฀ligação฀tetrassacarídica:
GluUA Gal Gla Xyl �-Ser
1�3 1�3 1�4
As฀ unidades฀ dissacarídicas฀ características฀ consis-
tem฀de฀N-acetilgalactosamina฀e฀ácido฀glucurônico,฀que฀
são฀ligadas฀a฀essa฀região฀de฀ligação฀(Figura฀16.12).฀Os฀
dissacarídeos฀ podem฀ ser฀ sulfatados฀ na฀ posição฀ 4-฀ ou฀
6-฀ da฀ N-acetilgalactosamina.฀ Cada฀ cadeia฀ contém฀ 30-

BioQ.16 642 22.01.07 18:09:43

 650฀฀฀|฀฀฀PARTE฀4฀฀VIA฀METABÓLICAS฀E฀SEU฀CONTROLE

PARTE฀4฀VIAS฀METABÓLICAS฀E฀SEU฀CONTROLE

17
Fígado

Ácidos graxos Glicose

��������������
Acetil-CoA
Glicerol
Corpos
cetônicos

METABOLISMO฀DE฀
LIPÍDEOS฀I:฀SÍNTESE,฀
ARMAZENAMENTO฀
E฀UTILIZAÇÃO฀DE฀
ÁCIDOS฀GRAXOS฀E฀
TRIACILGLICERÓIS
Martin฀D.฀Snider,฀J.฀Denis฀McGarry฀e฀
Richard฀W.฀Hanson

17.1฀ VISÃO฀GERAL,฀651 ฀ ฀ prometimento฀na฀síntese฀de฀ácidos฀graxos,฀฀

17.2฀ NATUREZA฀QUÍMICA฀DE฀ÁCIDOS฀GRAXOS฀E฀
ACILGLICERÓIS,฀652
฀ Ácidos฀graxos฀são฀cadeias฀alquila฀terminando฀em฀฀
฀ um฀grupo฀carboxila,฀652
฀ A฀maioria฀dos฀ácidos฀graxos฀no฀homem฀ocorre฀฀
฀ como฀triacilgliceróis,฀653
฀ A฀hidrofobicidade฀dos฀triacilgliceróis฀é฀importan-฀
฀ te฀para฀suas฀funções,฀653
17.3฀ TRANSPORTE฀INTERÓRGÃOS฀DE฀ÁCIDOS฀
GRAXOS฀E฀SEUS฀PRODUTOS฀PRIMÁRIOS,฀656
฀ Transporte฀de฀lipídeos฀no฀estado฀alimentado,฀656
฀ Transporte฀de฀lipídeos฀no฀estado฀de฀jejum,฀657
17.4฀ SÍNTESE฀DE฀ÁCIDOS฀GRAXOS:฀LIPOGÊNESE,฀
657
฀ Glicose฀é฀o฀principal฀precursor฀para฀síntese฀de฀฀
฀ ácidos฀graxos,฀657
฀ Via฀de฀biossíntese฀de฀ácidos฀graxos,฀658
฀ ฀ Formação฀de฀malonil-CoA฀é฀a฀etapa฀de฀com-฀
฀ ฀ 658
฀ ฀ Seqüência฀de฀reações฀para฀a฀síntese฀de฀ácido฀฀
฀ ฀ palmítico,฀658
฀ ฀ Ácido฀graxo฀sintase฀de฀mamíferos฀é฀um฀poli-฀
฀ ฀ peptídeo฀multifuncional,฀659
฀ ฀ Estequiometria฀da฀síntese฀de฀ácidos฀graxos,฀฀
฀ ฀ 659
฀ Via฀de฀clivagem฀de฀citrato฀fornece฀acetil-CoA฀e฀฀
฀ NADPH฀para฀lipogênese฀no฀citosol,฀660
฀ Modificação฀de฀ácidos฀graxos,฀662
฀ ฀ Reações฀de฀elongação,฀662
฀ ฀ Formação฀de฀ácidos฀monoenóicos฀pela฀estea-฀
฀ ฀ roil-CoA฀dessaturase,฀662
฀ ฀ Formação฀e฀modificação฀de฀ácidos฀graxos฀฀
฀ ฀ poliinsaturados,฀663
฀ ฀ Formação฀de฀hidroxiácidos฀graxos฀no฀tecido฀฀
฀ ฀ nervoso,฀664
฀ Ácido฀graxo฀sintase฀pode฀produzir฀outros฀ácidos฀฀
฀ graxos฀além฀do฀palmitato,฀664
฀ Acil฀graxo-CoAs฀podem฀ser฀reduzidos฀a฀álcoois฀฀
฀ graxos,฀664

BioQ.17 650 22.01.07 18:11:45

 656฀฀฀|฀฀฀PARTE฀4฀฀VIA฀METABÓLICAS฀E฀SEU฀CONTROLE

|
17.3฀ ฀ TRANSPORTE฀INTER-
ÓRGÃOS฀DE฀ÁCIDOS฀
GRAXOS฀E฀SEUS฀PRO-
DUTOS฀PRIMÁRIOS
Em฀todos฀os฀mamíferos,฀o฀transporte฀e฀o฀armazenamen-
to฀de฀ácidos฀graxos฀são฀regulados฀pelo฀estado฀dietético.฀
Triacilglicerol฀ é฀ armazenado฀ no฀ estado฀ alimentado,฀
com฀deposição฀em฀tecido฀adiposo.฀Durante฀jejum,฀tria-
cilglicerol฀do฀tecido฀adiposo฀é฀hidrolisado,฀e฀os฀produ-
tos฀são฀distribuídos฀por฀todo฀o฀corpo฀para฀serem฀usados฀
para฀produção฀de฀energia.฀Em฀jejum฀prolongado฀(mais฀
de฀2฀dias),฀o฀fígado฀converte฀ácidos฀graxos฀em฀corpos฀
cetônicos,฀ acetoacetato฀ e฀ β-hidroxibutirato,฀ que฀
são฀liberados฀no฀sangue฀e฀são฀uma฀fonte฀importante฀de฀
energia฀para฀muitos฀tecidos.฀Esses฀processos฀são฀resu-
midos฀na฀Figura฀17.6
Transporte฀de฀Lipídeos฀no฀Estado฀
Alimentado
Triacilgliceróis฀ da฀ dieta฀ são฀ digeridos฀ no฀ estômago฀ e฀
intestino฀delgado฀por฀lípases฀gástrica฀e฀pancreática฀
(ver฀p.฀1031).฀Os฀principais฀produtos฀são฀2-monoacilgli-
ceróis฀e฀ácidos฀graxos฀livres,฀que฀são฀absorvidos฀pe-
las฀células฀epiteliais฀que฀revestem฀o฀intestino฀delgado.฀
Estas฀ células฀ ligam฀ os฀ ácidos฀ graxos฀ e฀ monoacilglice-
róis฀absorvidos฀em฀triacilgliceróis฀(ver฀p.฀1031),฀que฀são฀
então฀empacotados฀em฀quilomícrons,฀uma฀lipoproteí-
na฀plasmática฀rica฀em฀triacilglicerol฀(ver฀p.฀1035).฀Qui-
lomícrons฀ são฀ secretados฀ na฀ linfa฀ e,฀ depois,฀ circulam฀
para฀ a฀ corrente฀ sangüínea.฀ O฀ fígado฀ é฀ outra฀ fonte฀ de฀
triacilgliceróis฀no฀estado฀alimentado.฀Ácidos฀graxos฀são฀
sintetizados฀nesse฀tecido฀a฀partir฀do฀excesso฀de฀carboi-
dratos฀e฀aminoácidos.฀Esses฀ácidos฀graxos฀são฀ligados฀
em฀triacilgliceróis฀e฀acondicionados฀em฀lipoproteínas฀
de฀muito฀baixa฀densidade฀(VLDL),฀uma฀segunda฀li-

��� Estado alimentado Glicose e FIGURA฀17.6

Fígado outros combustíveis Transporte฀interórgãos฀de฀ácidos฀graxos.฀
(A)฀No฀estado฀alimentado,฀há฀deposição฀de฀
Acetil-CoA
triacilglicerol฀no฀tecido฀adiposo.฀As฀fontes฀são฀
Intestino delgado Ácidos graxos gordura฀da฀dieta฀e฀ácidos฀graxos฀sintetizados฀
no฀fígado฀a฀partir฀de฀excesso฀de฀carboidratos฀e฀
Triacilglicerol aminoácidos.฀(B)฀No฀estado฀de฀jejum,฀triacilgliceróis฀
Triacilglicerol da dieta
são฀hidrolisados,฀e฀ácidos฀graxos฀livres฀e฀glicerol฀são฀
liberados฀no฀sangue.
Quilomícrons Lipoproteínas de *Durante฀jejum฀prolongado,฀o฀fígado฀sintetiza฀
densidade muito baixa corpos฀cetônicos,฀que฀se฀tornam฀um฀importante฀
Triacilglicerol em quilomícrons combustível฀no฀sangue.
Corrente sangüínea
e lipoproteínas de densidade muito baixa

Ácidos graxos
Ácidos graxos
���������฀����฀��������
��฀�������� Triacilglicero l

Músculo
Tecido adiposo

��� Estado de jejum

Cérebro Fígado

Ácido graxo Glicose

Corpos cetônicos
��������฀��� ��������������
��฀�������� Acetil-CoA
Acetil-CoA Glicerol
��฀�������� Corpos
��������฀����฀������
฀฀฀���฀��฀�������� cetônicos

Corpos Ácidos graxos =

Corrente sangüínea Glicerol
ceetônicos albumina

Glicerol
+
Ácidos graxos
Ácidos graxos (+ corpos cetô-
nicos) ��������฀����฀��������
��฀�������� Triacilglicerol
Músculo e
outros tecidos Tecido adiposo

BioQ.17 656 22.01.07 18:11:51

 668฀฀฀|฀฀฀PARTE฀4฀฀VIA฀METABÓLICAS฀E฀SEU฀CONTROLE
CORRELAÇÃO฀CLÍNICA฀17.3
Ciclo฀Triacilglicerol/Ácido฀Graxo
Triacilglicerol฀que฀é฀armazenado฀no฀tecido฀adiposo฀
é฀hidrolisado฀a฀ácidos฀graxos฀livres฀(FFA)฀durante฀
jejum฀ para฀ fornecer฀ energia฀ para฀ tecidos฀ como฀ os฀
músculos฀esquelético฀e฀cardíaco,฀e฀também฀indire-
tamente฀para฀o฀cérebro,฀via฀corpos฀cetônicos.฀Hor-
mônios,฀ principalmente฀ insulina,฀ controlam฀ este฀
processo.฀À฀medida฀que฀o฀nível฀de฀insulina฀cai฀du-
rante฀o฀jejum,฀a฀taxa฀de฀hidrólise฀de฀triacilglicerol฀
(lipólise)฀aumenta,฀resultando฀em฀liberação฀de฀FFA฀
do฀tecido฀adiposo.฀Um฀aspecto฀surpreendente฀deste฀
processo฀é฀o฀destino฀de฀FFA;฀em฀seres฀humanos฀em฀
jejum,฀ até฀ 65%฀ destes฀ FFA฀ são฀ reesterificados฀ em฀
triacilgliceróis฀ no฀ fígado฀ e฀ em฀ outros฀ tecidos฀ peri-
féricos.฀ No฀ fígado,฀ aproximadamente฀ 60%฀ do฀ FFA฀
captado฀é฀reesterificado฀em฀triacilglicerol,฀liberado฀
no฀ sangue฀ como฀ VLDL,฀ e฀ enviado฀ de฀ volta฀ para฀ o฀
tecido฀adiposo฀para฀deposição฀como฀triacilglicerol.฀
Este฀processo฀foi฀chamado฀ciclo฀triacilglicerol/ácido฀
graxo.
A฀ síntese฀ de฀ triacilglicerol฀ em฀ tecidos฀ de฀ ma-
míferos฀requer฀glicerol฀3-fosfato,฀que฀é฀derivado฀da฀
glicose฀da฀dieta฀via฀glicólise,฀no฀estado฀alimentado.฀
Durante฀ jejum,฀ quando฀ insulina฀ baixa฀ inibe฀ a฀ uti-
lização฀ de฀ glicose,฀ o฀ glicerol฀ 3-fosfato฀ para฀ a฀ rees-
terificação฀ de฀ FFA฀ é฀ gerado฀ por฀ gliceroneogênese,฀
uma฀versão฀abreviada฀da฀gluconeogênese.฀Nesta฀via,฀
piruvato,฀ou฀compostos฀que฀podem฀gerar฀piruvato,฀
como฀alanina฀ou฀lactato,฀é฀convertido฀em฀glicerol฀3-
fosfato฀via฀di-hidroxiacetona฀fosfato฀(Figura฀17.19).฀
A฀ enzima฀ que฀ controla฀ a฀ velocidade฀ da฀ via฀ de฀ gli-
ceroneogênese฀ é฀ fosfoenolpiruvato฀ carboxiquinase฀
Fonte:฀Reshef,฀L.฀Olswang,฀Y.฀Cassuto,฀H.฀Blum,฀B.฀Croniger,฀C.฀M.฀Kalhan฀S.฀C,฀Tilghman,฀S.฀M.฀e฀Hanson฀R.฀W.฀
Glyceroneogenesis฀and฀the฀triglyceride/fatty฀acid฀cycle.฀J.฀ Biol.฀ Chem.฀278:30413,฀2003.฀Jensen,฀M.฀D.,฀Ekberg,฀K.฀
e฀Landau,฀B.฀R.฀Lipid฀metabolism฀during฀fasting.฀Am.฀J.฀Physiol.฀Endocrinol.฀Metab.฀281:E789฀2001.฀Tordjman,฀J.฀
Khazan,฀W.฀Antoine,฀B.฀Chauvet,฀G.฀Quette,฀J฀Fouque,฀F.฀Beale,฀E.฀G.฀Benelli,฀C.฀e฀Forest,฀C.฀Regulation฀of฀glycero-
neogenesis฀and฀phosphoenolpyruvate฀carboxykinase฀by฀fatty฀acids,฀retinoic฀acid฀and฀thiazolidinediones.฀Biochimie฀
85:1213,฀2003.
repouso.฀A฀maioria฀dos฀tecidos฀pode฀usar฀ácidos฀graxos฀
como฀combustível.฀Ácidos฀graxos฀são฀uma฀importante฀
fonte฀ de฀ energia฀ em฀ músculos฀ esquelético฀ e฀ cardíaco,฀
mas฀o฀cérebro฀oxida฀pouco฀os฀ácidos฀graxos฀devido฀ao฀
transporte฀limitado฀através฀da฀barreira฀hemato-encefá-
lica.฀Eritrócitos฀são฀incapazes฀de฀oxidar฀ácidos฀graxos,฀
porque฀ não฀ têm฀ mitocôndrias,฀ o฀ local฀ de฀ oxidação฀ de฀
ácidos฀graxos.฀Durante฀jejum฀prolongado,฀o฀fígado฀con-
verte฀acetil-CoA฀gerado฀por฀oxidação฀de฀ácidos฀graxos฀
e฀quebra฀de฀aminoácidos฀em฀corpos฀cetônicos,฀que฀se฀
tornam฀ importantes฀ combustíveis.฀ A฀ maioria฀ dos฀ teci-
dos,฀incluindo฀o฀cérebro,฀adapta-se฀ao฀jejum฀pela฀utili-
zação฀destes฀corpos฀cetônicos.
BioQ.17 668
(PEPCK),฀que฀tem฀alta฀atividade฀em฀tecido฀adiposo฀
pardo฀e฀branco.฀Se฀a฀expressão฀do฀gene฀PEPCK฀for฀
abolida฀no฀tecido฀adiposo฀de฀camundongos,฀glicero-
neogênese฀é฀inibida฀e฀o฀estoque฀de฀triacilglicerol฀é฀
reduzido.฀Ao฀contrário,฀superprodução฀do฀gene฀PEP-
CK฀no฀tecido฀adiposo฀de฀camundongos฀transgênicos฀
aumenta฀a฀taxa฀de฀gliceroneogênese,฀resultando฀em฀
obesidade.
A฀lógica฀metabólica฀do฀ciclo฀triacilglicerol/ácido฀
graxo฀reside฀provavelmente฀na฀importância฀dos฀áci-
dos฀ graxos฀ como฀ combustíveis฀ durante฀ jejum.฀ Para฀
garantir฀que฀exista฀FFA฀suficiente฀no฀sangue,฀mais฀
FFA฀é฀liberado฀de฀células฀adiposas฀do฀que฀o฀necessá-
rio;฀o฀que฀não฀é฀usado฀é฀reesterificado฀a฀triacilglice-
rol฀e฀redepositado฀no฀tecido฀adiposo,฀com฀um฀custo฀
energético฀mínimo.฀O฀ciclo฀triacilglicerol/ácido฀graxo฀
consome฀3-6%฀da฀energia฀em฀uma฀molécula฀de฀tria-
cilglicerol.฀Aparentemente,฀é฀melhor฀ter฀o฀combustí-
vel฀necessário฀disponível,฀e฀pagar฀por฀isso฀energeti-
camente,฀do฀que฀ficar฀sem!฀A฀taxa฀de฀reesterificação฀
de฀FFA฀no฀ciclo฀triacilglicerol/ácido฀graxo฀é,฀muito฀
provavelmente,฀um฀fator-chave฀na฀determinação฀da฀
concentração฀de฀estado฀estacionário฀de฀FFA฀no฀san-
gue,฀um฀parâmetro฀que฀está฀diretamente฀envolvido฀
na฀etiologia฀do฀diabetes฀Tipo฀2.฀As฀glitazonas,฀uma฀
classe฀de฀drogas฀antidiabéticas,฀induzem฀a฀atividade฀
de฀PEPCK฀em฀tecido฀adiposo฀e฀fígado,฀e฀aumentam฀
a฀ taxa฀ de฀ reesterificação฀ de฀ FFA฀ em฀ triacilglicerol฀
via฀ gliceroneogênese฀ nesses฀ tecidos,฀ suportando฀ o฀
importante฀papel฀deste฀processo฀na฀manutenção฀da฀
homeostase฀lipídica.
�-Oxidação฀de฀Ácidos฀Graxos฀de฀
Cadeia฀Linear฀É฀um฀Importante฀
Processo฀de฀Produção฀de฀Energia
Ésteres฀de฀CoA฀dos฀ácidos฀graxos฀são฀os฀substratos฀para฀
oxidação.฀Na฀maior฀parte,฀a฀via฀de฀oxidação฀de฀ácidos฀
graxos฀ é฀ semelhante,฀ mas฀ não฀ idêntica,฀ ao฀ reverso฀ do฀
processo฀de฀síntese฀de฀palmitato.฀Isto฀é,฀fragmentos฀de฀
dois฀carbonos฀são฀removidos฀seqüencialmente฀a฀partir฀
da฀extremidade฀carboxila฀do฀ácido฀graxo฀por฀desidro-
genação,฀hidratação฀e฀oxidação,฀para฀formar฀um฀β-
cetoácido,฀que฀é฀então฀quebrado฀por฀tiólise.
22.01.07 18:12:07

|
17.7฀ ฀ REGULAÇÃO฀DO฀
METABOLISMO฀DE฀
LIPÍDEOS
Regulação฀no฀estado฀alimentado
O฀metabolismo฀de฀lipídeos฀no฀homem฀é฀controlado฀pelo฀
estado฀dietético฀do฀indivíduo฀via฀um฀conjunto฀complexo฀
de฀sinais฀hormonais.฀Depois฀de฀uma฀refeição฀que฀con-
tém฀lipídeos,฀carboidratos฀e฀proteínas,฀o฀lipídeo฀da฀die-
ta฀é฀depositado฀como฀triacilglicerol฀no฀tecido฀adiposo.฀
Além฀disso,฀carboidrato฀e฀aminoácidos฀da฀dieta,฀em฀ex-
cesso฀em฀relação฀ao฀necessário฀para฀energia฀ou฀síntese฀
de฀proteínas,฀são฀convertidos฀em฀ácidos฀graxos฀e฀depo-
sitados฀ no฀ tecido฀ adiposo฀ como฀ triacilglicerol.฀ O฀ prin-
cipal฀ hormônio฀ anabólico,฀ insulina,฀ é฀ necessário฀ para฀
síntese฀de฀ácidos฀graxos฀e฀para฀formação฀de฀triacilgli-
cerol฀no฀tecido฀adiposo.฀Um฀resumo฀destas฀regulações฀é฀
apresentado฀nas฀Tabelas฀17.2,฀p.฀657,฀e฀17.3,฀p.฀661.฀Este฀
hormônio฀age฀em฀dois฀níveis;฀induz฀a฀transcrição฀de฀ge-
nes฀que฀codificam฀enzimas฀críticas฀das฀vias฀de฀síntese฀e฀
armazenamento฀de฀lipídeos฀(regulação฀de฀longo฀prazo)฀
e฀controla฀processos฀como฀captação฀de฀glicose฀e฀hidró-
lise฀de฀triacilglicerol฀(regulação฀de฀curto฀prazo).
Insulina฀ estimula฀ síntese฀ de฀ ácidos฀ graxos฀ por฀ au-
mentar฀ os฀ níveis฀ de฀ enzimas-chaves,฀ incluindo฀ ácido฀
graxo฀ sintase,฀ NADP-malato฀ desidrogenase฀ (enzima฀
málica)฀e฀acetil-CoA฀carboxilase,฀no฀fígado,฀por฀induzir฀
a฀transcrição฀de฀seus฀genes.฀Insulina฀também฀estimula฀a฀
síntese฀de฀glicose฀6-fosfato฀desidrogenase฀e฀6-fosfoglu-
conato฀desidrogenase,฀as฀duas฀enzimas฀da฀porção฀oxi-
dativa฀da฀via฀das฀pentoses,฀que฀geram฀parte฀do฀NADPH฀
que฀é฀necessário฀para฀síntese฀de฀ácidos฀graxos.฀O฀efeito฀
de฀curto฀prazo฀da฀insulina฀na฀síntese฀hepática฀de฀ácidos฀
graxos฀é฀exercido฀por฀ativação฀de฀uma฀fosfoproteína฀
fosfatase฀específica,฀que฀remove฀fosfato฀da฀acetil-CoA฀
carboxilase,฀ativando฀assim฀esta฀enzima.฀Fluxo฀aumen-
tado฀pela฀glicólise฀é฀também฀importante฀para฀fornecer฀
acetil-CoA฀para฀síntese฀de฀ácidos฀graxos.
No฀ tecido฀ adiposo,฀ insulina฀ é฀ necessária฀ no฀ estado฀
alimentado฀para฀captação฀de฀glicose฀via฀transportador฀
GLUT฀4.฀O฀metabolismo฀desta฀glicose฀via฀glicólise฀for-
nece฀glicerol฀3-fosfato฀para฀a฀síntese฀de฀triacilglicerol.฀
Insulina฀também฀bloqueia฀um฀ciclo฀fútil.฀Como฀no฀fíga-
do,฀insulina฀exerce฀seus฀efeitos฀de฀curto฀prazo฀por฀ati-
var฀fosfoproteína฀fosfatases.฀Isso฀diminui฀a฀fosforilação฀
de฀ proteínas-chaves,฀ incluindo฀ lipase฀ hormônio-sensí-
vel฀e฀perilipina,฀levando฀à฀quebra฀diminuída฀de฀triacil-
gliceróis.
Regulação฀no฀estado฀de฀jejum
Jejum฀ resulta฀ em฀ uma฀ alteração฀ dramática฀ do฀ meta-
bolismo฀ de฀ lipídeos.฀ À฀ medida฀ que฀ a฀ concentração฀ de฀
glicose฀no฀sangue฀diminui,฀há฀um฀decréscimo฀paralelo฀
da฀concentração฀de฀insulina฀na฀circulação.฀Há฀também฀
BioQ.17 679
CAPÍTULO฀17฀฀METABOLISMO฀DE฀LIPÍDEOS฀I:฀฀฀|฀฀฀679
um฀ aumento฀ em฀ epinefrina฀ e฀ glucagon,฀ que฀ elevam฀ o฀
nível฀de฀cAMP฀e฀ativam฀proteína฀quinase฀A.฀No฀tecido฀
adiposo,฀há฀uma฀fosforilação฀aumentada฀de฀lipase฀hor-
mônio฀sensível฀e฀perilipina,฀resultando฀em฀um฀aumento฀
na฀ quebra฀ de฀ triacilglicerol฀ e฀ liberação฀ de฀ ácidos฀ gra-
xos฀livres฀e฀glicerol฀deste฀tecido฀(ver฀Tabela฀17.2,฀p.฀657,฀
para฀um฀resumo฀destes฀controles).
No฀fígado,฀essas฀alterações฀hormonais฀levam฀a฀uma฀
diminuição฀na฀síntese฀de฀ácidos฀graxos,฀devido฀à฀redu-
ção฀ nos฀ níveis฀ de฀ enzimas฀ chaves฀ (ver฀ Tabela฀ 17.3,฀ p.฀
661).฀ Há฀ também฀ inibição฀ da฀ enzima฀ limitante฀ da฀ ve-
locidade,฀acetil-CoA฀carboxilase,฀devido฀à฀fosforila-
ção฀cAMP-dependente฀da฀enzima.฀Glicólise฀é฀também฀
inibida,฀ com฀ diminuição฀ no฀ suprimento฀ de฀ acetil-CoA฀
para฀lipogênese.฀O฀fígado฀começa฀a฀produzir฀corpos฀ce-
tônicos,฀ à฀ medida฀ que฀ o฀ jejum฀ progride,฀ devido฀ a฀ um฀
aumento฀na฀taxa฀de฀oxidação฀de฀ácidos฀graxos฀e฀níveis฀
aumentados฀de฀enzimas฀da฀síntese฀de฀corpos฀cetônicos.฀
Durante฀jejum฀prolongado,฀cerca฀de฀metade฀dos฀ácidos฀
graxos฀que฀entram฀no฀fígado฀são฀convertidos฀em฀corpos฀
cetônicos฀e฀liberados฀no฀sangue฀para฀utilização฀por฀te-
cidos฀como฀músculo,฀coração฀e฀(após฀2฀dias฀de฀jejum)฀o฀
cérebro,฀economizando฀assim฀o฀uso฀de฀glicose.
Regulação฀da฀oxidação฀de฀ácidos฀
graxos
A฀taxa฀de฀oxidação฀de฀ácidos฀graxos฀em฀mitocôndrias฀
é฀ controlada฀ pela฀ regulação฀ da฀ entrada฀ de฀ substratos฀
nestas฀organelas.฀A฀enzima-chave฀é฀carnitina฀palmi-
toiltransferase฀I฀(CPT฀I),฀que฀sintetiza฀acilcarnitina฀a฀
partir฀de฀acil-CoA฀citosólico฀(Figura฀17.20).฀No฀fígado,฀
acetil-CoA฀ carboxilase฀ é฀ ativada฀ no฀ estado฀ alimenta-
do,฀ porque฀ os฀ níveis฀ de฀ enzima฀ são฀ altos,฀ fosforilação฀
cAMP-dependente฀é฀baixa฀e฀a฀enzima฀é฀ativada฀por฀ci-
trato.฀ A฀ alta฀ concentração฀ de฀ malonil-CoA฀ resultante฀
estimula฀síntese฀de฀ácidos฀graxos,฀mas฀bloqueia฀oxida-
ção฀ de฀ ácidos฀ graxos฀ por฀ inibir฀ CPT฀ I.฀ Esta฀ regulação฀
impede฀um฀ciclo฀fútil.฀Ao฀contrário,฀no฀estado฀de฀jejum,฀
a฀atividade฀de฀acetil-CoA฀carboxilase฀no฀fígado฀é฀baixa,฀
porque฀ os฀ níveis฀ de฀ enzima฀ são฀ baixos,฀ a฀ enzima฀ está฀
fosforilada฀e฀oxidação฀de฀ácidos฀graxos฀ocorre฀em฀alta฀
velocidade฀ nessas฀ condições,฀ devido฀ aos฀ baixos฀ níveis฀
de฀malonil-CoA.
Oxidação฀ de฀ ácidos฀ graxos฀ em฀ músculo฀ é฀ também฀
regulada฀por฀malonil-CoA,฀embora฀este฀tecido฀não฀sin-
tetize฀ácidos฀graxos.฀Músculo฀contém฀uma฀isoenzima฀da฀
acetil-CoA฀carboxilase,฀que฀produz฀malonil-CoA฀exclu-
sivamente฀para฀regulação฀de฀CPT฀I.฀A฀enzima฀é฀ativada฀
por฀citrato฀e฀inibida฀por฀fosforilação.฀É฀fosforilada฀pela฀
proteína฀quinase฀A฀e฀por฀uma฀quinase฀dependente฀de฀
AMP.฀ Fosforilação฀ pela฀ primeira฀ enzima฀ permite฀ que฀
a฀oxidação฀de฀ácidos฀graxos฀seja฀regulada฀pelo฀estado฀
dietético.฀No฀estado฀alimentado,฀a฀alta฀concentração฀de฀
insulina฀resulta฀em฀baixos฀níveis฀de฀fosforilação.฀A฀en-
zima฀ produz฀ malonil-CoA,฀ que฀ inibe฀ CPT฀ I฀ e฀ bloqueia฀
oxidação฀de฀ácidos฀graxos.฀Ao฀contrário,฀no฀estado฀de฀
22.01.07 18:12:19
 684฀฀฀|฀฀฀PARTE฀4฀฀VIAS฀METABÓLICAS฀E฀SEU฀CONTROLE
18.5฀ PROSTAGLANDINAS฀E฀TROMBOXANES,฀714
฀ Prostaglandinas฀e฀tromboxanes฀são฀derivados฀de฀฀
฀ ácidos฀monocarboxílicos,฀714
฀ Síntese฀de฀prostaglandinas฀envolve฀uma฀ciclooxi-฀
฀ genase,฀715
฀ ฀ Produção฀de฀prostaglandinas฀é฀inibida฀por฀฀
฀ ฀ agentes฀antiinflamatórios฀esteroídicos฀e฀฀
฀ ฀ não-esteroídicos,฀717
฀ Prostaglandinas฀têm฀muitos฀efeitos฀fisiológicos฀
฀ 718
18.6฀ LIPOXIGENASE฀E฀ÁCIDOS฀OXIEICOSATETRAE-
NÓICOS,฀718
฀ Ácidos฀mono-hidroperoxieicosatetraenóicos฀são฀฀
฀ produtos฀da฀ação฀da฀lipoxigenase,฀718
฀ Leucotrienos฀e฀ácidos฀hidroxieicosatetraenóicos฀฀
฀ são฀hormônios฀derivados฀de฀HPETEs,฀719
฀ Leucotrienos฀e฀HETEs฀afetam฀vários฀processos฀฀
฀ fisiológicos,฀719
BIBLIOGRAFIA,฀721
QUESTÕES฀E฀RESPOSTAS,฀722
CORRELAÇÕES฀CLÍNICAS
฀ 18.1฀ Síndrome฀do฀Desconforto฀Respiratório,฀687
฀ 18.2฀ Tratamento฀da฀Hipercolesterolemia,฀703
฀ 18.3฀ Aterosclerose,฀704
฀ 18.4฀ Diagnóstico฀da฀Doença฀de฀Gaucher฀em฀um฀฀
฀ Adulto,฀713

18.1฀|฀ VISÃO฀GERAL de฀hormônios฀farmacologicamente฀potentes฀derivados฀

do฀ácido฀araquidônico฀–฀a฀saber,฀prostaglandinas฀e฀leu-
cotrienos฀–฀serão฀discutidos.฀Ver฀o฀Apêndice฀para฀uma฀
discussão฀sobre฀nomenclatura฀e฀química฀dos฀lipídeos.
Lipídeo฀é฀um฀termo฀geral฀que฀descreve฀substâncias฀que฀
são฀relativamente฀insolúveis฀em฀água฀e฀que฀podem฀ser฀
extraídas฀ por฀ solventes฀ apolares.฀ Lipídeos฀ complexos฀ 18.2฀|฀FOSFOLIPÍDEOS
do฀homem฀estão฀classificados฀em฀duas฀categorias฀am-
plas:฀lipídeos฀não-polares,฀tais฀como฀triacilgliceróis฀e฀
Duas฀ classes฀ principais฀ de฀ acilglicerolipídeos฀ são฀
ésteres฀de฀colesterol,฀e฀lipídeos฀polares,฀que฀são฀anfipá-
triacilgliceróis฀e฀ glicerofosfolipídeos,฀que฀têm฀em฀
ticos฀pois฀contêm฀tanto฀uma฀região฀hidrofóbica,฀como฀
seu฀núcleo฀o฀poliol฀C3฀glicerol.฀Os฀dois฀grupos฀álcool฀pri-
uma฀região฀hidrofílica฀na฀mesma฀molécula.฀Este฀capí-
mário฀ do฀ glicerol฀ não฀ são฀ estereoquimicamente฀ idên-
tulo฀ discute฀ lipídeos฀ polares,฀ incluindo฀ fosfolipídeos,฀
ticos;฀ no฀ caso฀ de฀ fosfolipídeos,฀ geralmente฀ é฀ o฀ mesmo฀
esfingolipídeos฀e฀eicosanóides.฀As฀regiões฀hidrofóbicas฀
grupo฀hidroxila฀que฀é฀esterificado฀ao฀resíduo฀de฀fosfato.฀
e฀ hidrofílicas฀ são฀ unidas฀ por฀ um฀ resíduo฀ de฀ glicerol฀
O฀ sistema฀ de฀ numeração฀ esteroespecífica฀ é฀ a฀ melhor฀
em฀glicerofosfolipídeos,฀e฀por฀esfingosina฀em฀esfingo-
maneira฀de฀designar฀diferentes฀grupos฀hidroxila.฀Neste฀
mielina฀e฀glicoesfingolipídeos.฀Triacilglicerol฀está฀con-
sistema,฀quando฀a฀estrutura฀do฀glicerol฀é฀desenhada฀na฀
finado,฀ em฀ grande฀ parte,฀ a฀ locais฀ de฀ armazenamento฀
projeção฀de฀Fischer,฀com฀o฀grupo฀hidroxila฀C2฀projetan-
no฀tecido฀adiposo,฀enquanto฀lipídeos฀polares฀ocorrem฀
do-se฀para฀a฀esquerda฀da฀página,฀os฀átomos฀de฀carbono฀
primariamente฀em฀membranas฀celulares.฀Membranas฀
são฀ numerados฀ como฀ mostra฀ a฀ Figura฀ 18.1.฀ Quando฀ o฀
geralmente฀ contêm฀ 40%฀ do฀ seu฀ peso฀ seco฀ como฀ lipí-
sistema฀de฀numeração฀estéreo-específica฀(sn)฀é฀uti-
deo,฀e฀60%฀como฀proteína.
lizado,฀o฀prefixo฀sn-฀é฀usado฀antes฀do฀nome฀do฀compos-
Reconhecimento฀célula-célula,฀fagocitose,฀inibição฀
to.฀Glicerofosfolipídeos฀geralmente฀contêm฀um฀resíduo฀
por฀contato฀e฀rejeição฀de฀tecidos฀e฀órgãos฀transplanta-
de฀ sn-glicerol฀ 3-fosfato.฀ Embora฀ ambos฀ contenham฀ o฀
dos฀são฀todos฀fenômenos฀de฀importância฀médica,฀que฀
resíduo฀ de฀ glicerol฀ como฀ um฀ elemento฀ estrutural฀ fun-
envolvem฀ sítios฀ de฀ reconhecimento฀ muito฀ específicos฀
damental,฀triacilgliceróis฀neutros฀e฀fosfolipídeos฀iônicos฀
na฀ superfície฀ das฀ membranas฀ plasmáticas.฀ Glicoes-
carregados฀ têm฀ propriedades฀ físicas฀ e฀ funções฀ muito฀
fingolipídeos฀ parecem฀ desempenhar฀ um฀ papel฀ nestes฀
diferentes.
eventos฀ biológicos.฀ Sua฀ síntese฀ será฀ descrita.฀ Vários฀
esfingolipídeos฀ acumulam-se฀ no฀ fígado,฀ no฀ baço,฀ no฀
rim฀ e฀ no฀ sistema฀ nervoso฀ em฀ certas฀ doenças฀ genéti-
cas฀chamadas฀esfingolipidoses.฀Glicolipídeos฀merecem฀
estudo,฀porque฀os฀determinantes฀antigênicos฀dos฀gru-
pos฀ sangüíneos฀ ABO฀ são฀ primariamente฀ de฀ natureza฀
Número
glicolipídica.฀ do carbono
A฀via฀de฀biossíntese฀de฀colesterol฀e฀sua฀regulação,฀ CH2OH 1
como฀ colesterol฀ funciona฀ como฀ um฀ precursor฀ de฀ sais฀ HO C H 2
biliares฀e฀hormônios฀esteróides,฀e฀o฀papel฀da฀lipopro-
CH2OH 3
teína฀de฀alta฀densidade฀(HDL,฀high฀density฀lipopro-
tein)฀e฀da฀lecitina:colesterol฀aciltransferase฀(LCAT)฀no฀
gerenciamento฀do฀colesterol฀plasmático฀são฀descritos.฀ FIGURA฀18.1
Finalmente,฀o฀metabolismo฀e฀a฀função฀de฀duas฀classes฀ Numeração฀estéreo-específica฀do฀glicerol.

BioQ.18 684 22.01.07 19:25:50

 694฀฀฀|฀฀฀PARTE฀4฀฀VIAS฀METABÓLICAS฀E฀SEU฀CONTROLE
O O

R1C CoA H2C O CR1 R2OH

H2COH C O O 2

C O O CoA H2 C O P O–
H2 C OR2
1
H2 C O P O– O– R1CO–
C O O
O– O
H2C O P O–
DHAP O–

O H2 C OR2 NADPH + H+
3
R3 C O CH O
+ NADP+
H2C O P OCH2CH2 N(CH3)3

O– H2C OR2
6 CMP
Colina plasmalogênio HOCH O

H2 C O P O–
CDP-colina O–
O H2 C OR2 4 O
R3 C O CH 5 R3C CoA
O H C OR2
H2C OH 2
CoA
R3C CH O
Pi H2O
H2C O P O–

O–

FIGURA฀18.25
Via฀de฀biossíntese฀de฀colina฀plasmalogênio฀a฀partir฀de฀DHAP.฀
1,฀acil-CoA:di-hidroxiacetona฀fosfato฀aciltransferase;฀2,฀alquil-di-hidroxiacetona฀fosfato฀sintase;฀3,฀NADPH:alquil-di-hidroxiacetona฀
fosfato฀óxi-redutase;฀4,฀acil-CoA:1-alquil-2-liso-sn-glicero-3-fosfato฀aciltransferase;฀5,฀1-alquil-2-acil-sn-glicerol-3-fosfato฀fosfo-
hidrolase;฀6,฀CDP-colina:1-alquil-2-acil-sn-glicerol฀colina฀fosfotransferase.

18.3฀|฀COLESTEROL (não-esterificado);฀ o฀ restante฀ é฀ colesteril฀ ésteres,฀ nos฀

quais฀um฀ácido฀graxo฀de฀cadeia฀longa,฀geralmente฀ácido฀
linoléico,฀ é฀ esterificado฀ ao฀ C3฀ do฀ anel฀ A.฀ Este฀ resíduo฀
Colesterol,฀um฀Composto฀Alicíclico,฀É฀ de฀ácido฀graxo฀aumenta฀a฀hidrofobicidade฀do฀colesterol฀
(Figura฀18.28).
Amplamente฀Distribuído฀nas฀Formas฀
Livre฀e฀Esterificada 12
13
17
11 16

Colesterol฀é฀um฀composto฀alicíclico,฀cuja฀estrutura฀in- C D
1 9
clui฀ (1)฀ o฀ núcleo฀ peridrociclopentanofenantreno฀ 2 10 14 15
8
com฀ seus฀ quatro฀ anéis฀ fundidos,฀ (2)฀ um฀ único฀ grupo฀ A B
hidroxila฀em฀C3,฀(3)฀um฀centro฀insaturado฀entre฀C5฀e฀ 3 5 7
C6,฀ (4)฀ uma฀ cadeia฀ hidrocarbônica฀ ramificada฀ de฀ oito฀ 4 6

membros฀ligada฀ao฀anel฀D฀em฀C17฀e฀(5)฀um฀grupo฀metil฀
FIGURA฀18.26
(designado฀por฀C19)฀ligado฀à฀posição฀C10,฀e฀outro฀grupo฀ O฀anel฀ciclopentanofenantreno.
metil฀(designado฀por฀C18)฀ligado฀à฀posição฀C13฀(Figu-
ras฀18.26฀e฀18.27).
21 22 24 26
Colesterol฀tem฀solubilidade฀muito฀baixa฀em฀água;฀a฀ 20 25
25oC,฀ o฀ limite฀ de฀ solubilidade฀ é฀ aproximadamente฀ 0,2฀ 17
23
18 27
mg฀dL -1,฀ou฀4,7฀mM.฀A฀concentração฀real฀de฀colesterol฀
no฀plasma฀de฀uma฀pessoa฀sadia฀é฀geralmente฀150฀a฀200฀
mg฀dL -1.฀Este฀valor฀é฀quase฀duas฀vezes฀a฀concentração฀ 19

normal฀de฀glicose฀no฀sangue.฀Esta฀alta฀concentração฀de฀
3
colesterol฀no฀sangue฀é฀possível฀graças฀às฀lipoproteínas฀
HO
plasmáticas฀(principalmente฀LDL฀e฀VLDL),฀que฀contêm฀
grandes฀quantidades฀de฀colesterol฀(ver฀p.฀698).฀Apenas฀ FIGURA฀18.27
cerca฀de฀30%฀do฀total฀de฀colesterol฀no฀plasma฀está฀livre฀ Estrutura฀do฀colesterol฀(5-colesteno-3�-ol).

BioQ.18 694 22.01.07 19:26:07

 704฀฀฀|฀฀฀PARTE฀4฀฀VIAS฀METABÓLICAS฀E฀SEU฀CONTROLE
Em฀ tecidos฀ especializados,฀ como฀ córtex฀ adrenal฀ e฀
ovários,฀o฀colesterol฀derivado฀de฀LDL฀é฀o฀precursor฀de฀
hormônios฀ esteróides,฀ como฀ cortisol฀ e฀ estradiol,฀ res-
pectivamente.฀No฀fígado,฀o฀colesterol฀extraído฀de฀LDL฀
e฀HDL฀é฀convertido฀em฀sais฀biliares,฀que฀funcionam฀na฀
digestão฀intestinal฀de฀gordura.
Colesterol฀É฀Excretado฀
Primariamente฀como฀Ácidos฀Biliares
Ácidos฀ biliares฀ são฀ os฀ produtos฀ finais฀ do฀ metabolismo฀
de฀colesterol.฀Ácidos฀biliares฀primários฀são฀sintetizados฀
em฀hepatócitos,฀diretamente฀a฀partir฀de฀colesterol.฀Os฀
CORRELAÇÃO฀CLÍNICA฀18.3
Aterosclerose
Aterosclerose฀ é฀ a฀ principal฀ causa฀ de฀ morte฀ em฀
países฀ ocidentais฀ industrializados.฀ O฀ risco฀ de฀
desenvolvê-la฀ é฀ diretamente฀ relacionado฀ com฀ a฀
concentração฀plasmática฀de฀LDL-colesterol฀e฀in-
versamente฀proporcional฀ao฀nível฀de฀HDL-coles-
terol.฀Isso฀explica฀por฀que฀o฀primeiro฀é฀freqüen-
temente฀ chamado฀ colesterol฀ “ruim”,฀ e฀ o฀ último,฀
colesterol฀“bom”,฀embora฀quimicamente฀não฀exis-
ta฀diferença.฀Na฀aterosclerose,฀a฀parede฀arterial฀
contém฀colesteril-ésteres฀acumulados฀em฀células฀
derivadas฀ da฀ linhagem฀ monócito-macrófago,฀ há฀
também฀proliferação฀de฀células฀musculares฀lisas฀
e฀ fibrose.฀ A฀ anomalia฀ mais฀ precoce฀ é฀ migração฀
de฀monócitos฀do฀sangue฀para฀o฀subendotélio฀da฀
artéria.฀ Estas฀ células฀ então฀ se฀ diferenciam฀ em฀
macrófagos฀ e฀ acumulam฀ colesteril-ésteres฀ deri-
vados฀de฀LDL฀plasmática.฀Parte฀da฀LDL฀pode฀ser฀
captada฀por฀vias฀que฀não฀requerem฀receptor฀de฀
LDL.฀Por฀exemplo,฀existem฀receptores฀que฀cap-
tam฀LDL฀acetilada฀ou฀LDL฀complexada฀com฀dex-
tran฀sulfato;฀entretanto,฀esta฀via฀não฀é฀regulada฀
por฀conteúdo฀celular฀de฀colesterol.฀Distorção฀do฀
subendotélio฀leva฀à฀agregação฀plaquetária฀na฀su-
perfície฀ do฀ endotélio฀ e฀ liberação฀ de฀ mitógenos฀
derivados฀ de฀ plaquetas,฀ como฀ o฀ fator฀ de฀ cresci-
mento฀derivado฀de฀plaquetas฀(PDGF,฀platelet฀de-
rived฀growth฀factor),฀que฀estimula฀o฀crescimen-
to฀de฀células฀musculares฀lisas.฀Morte฀das฀células฀
esponjosas฀leva฀à฀deposição฀do฀lipídeo฀celular฀e฀
fibrose.฀A฀placa฀aterosclerótica฀resultante฀estrei-
ta฀o฀vaso฀sangüíneo฀e฀leva฀à฀formação฀de฀trombo,฀
o฀ que฀ precipita฀ o฀ infarto฀ do฀ miocárdio฀ (ataque฀
cardíaco).
Fonte:฀Wick,฀G,฀Knoflach,฀M.฀e฀Xu,฀Q.฀B.฀Autoimmu-
ne฀ and฀ inflammatory฀ mechanisms฀ in฀ atherosclerosis.฀
Annu.฀Rev.฀Immunol.฀22:361,~2004.
BioQ.18 704
ácidos฀ biliares฀ são฀ derivados฀ de฀ ácido฀ colânico฀ (Figu-
ra฀ 18.41).฀ Ácido฀ cólico฀ e฀ ácido฀ quenodesoxicólico฀
(Figura฀18.42)฀são฀compostos฀C24,฀contendo฀três฀e฀dois฀
grupos฀ OH,฀ respectivamente,฀ e฀ uma฀ cadeia฀ lateral฀ C5฀
que฀termina฀em฀um฀grupo฀carboxila,฀que฀é฀ionizado฀a฀
pH฀7,0฀(daí฀o฀nome฀sal฀biliar).฀O฀grupo฀carboxila฀é฀fre-
qüentemente฀ conjugado,฀ por฀ uma฀ ligação฀ amida,฀ com฀
glicina฀ (NH2-CH2-COOH)฀ (Figura฀ 18.43)฀ ou฀ taurina฀
(NH2-CH2-CH2-SO3H),฀para฀formar฀ácido฀glicocólico฀ou฀
taurocólico,฀respectivamente.
Os฀ ácidos฀ biliares฀ primários฀ são฀ modificados฀ por฀
microorganismos฀ dos฀ intestinos฀ para฀ ácidos฀ biliares฀
secundários:฀ ácido฀ desoxicólico฀ e฀ ácido฀ litocólico฀ são฀
derivados฀do฀ácido฀cólico฀e฀do฀ácido฀quenodesoxicólico,฀
respectivamente,฀por฀remoção฀de฀um฀grupo฀OH฀(Figura฀
18.42).฀Transformação฀de฀colesterol฀em฀ácidos฀biliares฀
requer:฀(1)฀epimerização฀do฀grupo฀3β-OH,฀(2)฀redução฀
da฀dupla฀ligação฀C5,฀(3)฀introdução฀de฀grupos฀OH฀em฀
C7฀ (ácido฀ quenodesoxicólico)฀ ou฀ em฀ C7฀ e฀ C12฀ (ácido฀
cólico),฀ e฀ (4)฀ conversão฀ da฀ cadeia฀ lateral฀ C27฀ em฀ um฀
ácido฀carboxílico฀C24฀por฀eliminação฀de฀um฀equivalen-
te฀propil.
Ácidos฀biliares฀são฀secretados฀na฀bile,฀armazenados฀
na฀vesícula฀biliar฀e฀depois฀secretados฀no฀intestino฀del-
gado.฀Produção฀hepática฀de฀ácidos฀biliares฀é฀insuficien-
te฀ para฀ atender฀ as฀ necessidades฀ fisiológicas,฀ de฀ modo฀
que฀o฀corpo฀depende฀de฀uma฀circulação฀êntero-hepáti-
ca,฀que฀carrega฀os฀ácidos฀biliares฀do฀intestino,฀de฀volta฀
para฀o฀fígado,฀várias฀vezes฀por฀dia.
Ácidos฀biliares฀e฀fosfolipídeos฀solubilizam฀colesterol฀
na฀bile฀e,฀assim,฀impedem฀que฀colesterol฀se฀precipite฀na฀
vesícula฀biliar.฀Ácidos฀biliares฀no฀intestino฀atuam฀como฀
agentes฀emulsificantes฀para฀triacilgliceróis฀da฀dieta,฀fa-
cilitando฀ sua฀ hidrólise฀ pela฀ lipase฀ pancreática.฀ Ácidos฀
biliares฀desempenham฀um฀papel฀direto฀na฀ativação฀da฀
lipase฀pancreática฀(ver฀p.฀1031)฀e฀facilitam฀a฀absorção฀
de฀ vitaminas฀ lipossolúveis,฀ particularmente฀ vitamina฀
D,฀no฀intestino.
21
H3C 22
23
18
20
CH3 COOH
12 17 24
11 13 16
19
CH2 14 15
1 9
2 10 8
3 5 7
4 6
H
FIGURA฀18.41
Estrutura฀do฀ácido฀colânico.
22.01.07 19:26:18
 718฀฀฀|฀฀฀PARTE฀4฀฀VIAS฀METABÓLICAS฀E฀SEU฀CONTROLE
Prostaglandinas฀Têm฀Muitos฀Efeitos฀
Fisiológicos
Prostaglandinas฀são฀mediadores฀naturais฀da฀inflama-
ção.฀Reações฀inflamatórias฀freqüentemente฀envolvem฀
as฀ articulações฀ (p.฀ ex.,฀ artrite฀ reumatóide),฀ pele฀ (p.฀
ex.,฀ psoríase)฀ e฀ olhos,฀ e฀ são฀ tratadas,฀ freqüentemen-
te,฀com฀corticosteróides฀que฀inibem฀síntese฀de฀prosta-
glandinas.฀Administração฀de฀PGE2฀e฀PGE1฀induz฀rubor฀
e฀calor฀(devido฀à฀vasodilatação฀arteriolar),฀juntamente฀
com฀ inchaço฀ e฀ edema฀ resultantes฀ de฀ permeabilidade฀
capilar฀aumentada฀característica฀da฀inflamação.฀PGE2฀
gerada฀no฀sistema฀imune฀(p.฀ex.,฀macrófagos,฀mastó-
citos,฀células฀B)฀evoca฀quimiotaxia฀de฀células฀T.฀PGE2฀
em฀ quantidades฀ que฀ não฀ causam฀ dor,฀ antes฀ da฀ admi-
nistração฀ de฀ histamina฀ e฀ bradicinina,฀ aumenta฀ a฀ in-
tensidade฀ e฀ a฀ duração฀ da฀ dor฀ causada฀ por฀ esses฀ dois฀
agentes.฀Acredita-se฀que฀pirógenos฀(agentes฀indutores฀
de฀ febre)฀ ativem฀ a฀ via฀ de฀ síntese฀ de฀ prostaglandinas฀
com฀liberação฀de฀PGE2฀no฀hipotálamo,฀onde฀a฀tempe-
ratura฀do฀corpo฀é฀regulada.฀Aspirina,฀uma฀droga฀anti-
pirética,฀inibe฀a฀ciclooxigenase.฀PGE2฀e฀PGF2฀têm฀sido฀
utilizadas฀para฀induzir฀parto฀e฀para฀terminar฀gravidez฀
não-desejada,฀especificamente฀no฀segundo฀trimestre.฀
Também฀ há฀ evidências฀ de฀ que฀ as฀ prostaglandinas฀ da฀
série฀PGE฀possam฀ser฀efetivas฀no฀tratamento฀da฀infer-
tilidade฀masculina.
Prostaglandinas฀ sintéticas฀ são฀ muito฀ eficientes฀
na฀ inibição฀ de฀ secreção฀ ácida฀ gástrica฀ em฀ pacien-
tes฀ com฀ úlcera฀ péptica.฀ Parecem฀ inibir฀ a฀ formação฀
de฀ cAMP฀ em฀ células฀ da฀ mucosa฀ gástrica฀ e฀ acelerar฀ a฀
cicatrização฀ de฀ úlceras฀ gástricas.฀ PGE,฀ PGA฀ e฀ PGI 2฀
são฀vasodilatadores฀que฀baixam฀a฀pressão฀arterial฀sis-
têmica,฀ aumentando฀ assim฀ o฀ fluxo฀ sangüíneo฀ local฀ e฀
diminuindo฀a฀resistência฀periférica.฀TXA 2฀causa฀con-
tração฀ da฀ musculatura฀ vascular฀ lisa฀ e฀ do฀ mesângio฀
glomerular.฀No฀feto,฀PGE2฀mantém฀a฀desobstrução฀do฀
ductus฀arteriosus฀antes฀do฀nascimento.฀Se฀o฀ductus฀
permanecer฀aberto฀após฀o฀nascimento,฀o฀fechamento฀
pode฀ ser฀ acelerado฀ por฀ administração฀ do฀ inibidor฀ de฀
ciclooxigenase฀indometacina.฀Em฀bebês฀nascidos฀com฀
anomalias฀ congênitas,฀ nos฀ quais฀ o฀ defeito฀ pode฀ ser฀
corrigido฀cirurgicamente,฀infusão฀de฀prostaglandinas฀
manterá฀o฀fluxo฀sangüíneo฀através฀do฀ductus฀até฀que฀a฀
cirurgia฀seja฀feita.
PGI2฀inibe฀agregação฀plaquetária,฀enquanto฀PGE2฀
e฀TXA 2฀promovem฀esse฀processo฀de฀coagulação.฀TXA 2฀
é฀produzido฀por฀plaquetas฀e฀é฀responsável฀por฀sua฀agre-
gação฀ quando฀ em฀ contato฀ com฀ alguma฀ superfície฀ es-
tranha,฀colágeno฀ou฀trombina.฀Células฀endoteliais฀que฀
revestem฀os฀vasos฀sangüíneos฀liberam฀PGI2,฀que฀pode฀
responder฀pela฀não-aderência฀de฀plaquetas฀à฀parede฀do฀
vaso฀ sangüíneo฀ sadio.฀ PGE2฀ e฀ PGD2฀ dilatam฀ os฀ vasos฀
sangüíneos฀renais฀e฀aumentam฀o฀fluxo฀sangüíneo฀pelo฀
rim.฀Elas฀também฀regulam฀a฀excreção฀de฀sódio฀e฀o฀rit-
mo฀de฀filtração฀glomerular.
BioQ.18 718
|
18.6฀ ฀LIPOXIGENASE฀E฀ÁCI-
DOS฀OXIEICOSATE-
TRAENÓICOS
Ciclooxigenase฀direciona฀ácidos฀graxos฀poliinsaturados฀
para฀a฀via฀das฀prostaglandinas฀que฀tem฀ácido฀araquidô-
nico฀como฀substrato.฀Lipoxigenase฀é฀uma฀dioxigenase฀
que฀também฀atua฀sobre฀ácido฀araquidônico.฀Diferentes฀
lipoxigenases฀ são฀ específicas฀ para฀ a฀ dupla฀ ligação฀ do฀
ácido฀ araquidônico,฀ na฀ qual฀ o฀ ataque฀ inicial฀ do฀ oxigê-
nio฀ ocorre฀ (p.฀ ex.,฀ posições฀ 5,฀ 12฀ ou฀ 15).฀ No฀ homem,฀
os฀leucotrienos฀mais฀importantes฀são฀os฀produtos฀da฀5-
lipoxigenase,฀que฀são฀mediadores฀de฀doenças฀inflama-
tórias.฀Lipoxigenases฀ocorrem฀amplamente฀em฀plantas฀
e฀ fungos,฀ bem฀ como฀ em฀ animais,฀ mas฀ estão฀ ausentes฀
em฀leveduras฀e฀na฀maioria฀dos฀procariotos.฀Elas฀contêm฀
ferro฀não-hemínico฀e฀são฀ativas฀quando฀este฀ferro฀está฀
no฀estado฀férrico.
Ácidos฀Mono-Hidroperoxieicosate-
traenóicos฀São฀Produtos฀da฀Ação฀da฀
Lipoxigenase
Lipoxigenase฀adiciona฀um฀grupo฀hidroperóxido฀ao฀áci-
do฀araquidônico฀para฀produzir฀ácidos฀mono-hidrope-
roxieicosatetraenóicos฀ (HPETEs)฀ (Figura฀ 18.71).฀
Em฀contraste฀com฀a฀ciclooxigenase฀da฀prostaglandina฀
endoperóxido฀ sintase,฀ que฀ catalisa฀ a฀ bis-dioxigenação฀
de฀ ácidos฀ graxos฀ insaturados฀ a฀ endoperóxidos,฀ lipoxi-
genases฀ catalisam฀ a฀ monodioxigenação฀ de฀ ácidos฀ gra-
xos฀insaturados฀a฀hidroperóxidos฀alílicos.฀Substituição฀
hidroperoxi฀ de฀ ácido฀ araquidônico฀ por฀ lipoxigenases฀
pode฀ocorrer฀nas฀posições฀5,฀12฀ou฀15.฀Uma฀15-lipoxige-
nase฀(15-LOX)฀oxigena฀ácido฀araquidônico฀no฀carbono฀
15.฀ 5-HPETE฀ é฀ o฀ principal฀ produto฀ em฀ basófilos,฀ leu-
cócitos฀ polimorfonucleares฀ (PMN),฀ macrófagos,฀ mas-
tócitos฀ e฀ qualquer฀ órgão฀ passando฀ por฀ resposta฀ infla-
matória;฀ 12-HPETE฀ predomina฀ em฀ plaquetas,฀ células฀
das฀ ilhotas฀ pancreáticas,฀ musculatura฀ lisa฀ vascular฀ e฀
células฀glomerulares;฀15-HPETE฀é฀o฀principal฀produto฀
em฀reticulócitos,฀eosinófilos,฀linfócitos฀T฀e฀células฀epite-
liais฀da฀traquéia.฀As฀5-,฀12-฀e฀15-lipoxigenases฀ocorrem฀
principalmente฀ no฀ citosol.฀ Como฀ o฀ átomo฀ de฀ carbono฀
oxigenado฀em฀HPETEs฀é฀assimétrico,฀existem฀dois฀es-
tereoisômeros฀ possíveis฀ do฀ ácido฀ hidroperoxi,฀ (R)฀ ou฀
(S).฀Por฀exemplo,฀a฀estéreo-configuração฀é฀especifica-
da฀ 12R-LOX฀ ou฀ 12S-LOX.฀ Os฀ três฀ principais฀ HPETEs฀
são฀da฀configuração฀(S).฀5-LOX฀tem฀uma฀atividade฀de฀
dioxigenase฀ que฀ converte฀ ácido฀ araquidônico฀ em฀ 5-
HPETE,฀e฀uma฀atividade฀de฀desidratase฀que฀transforma฀
5-HPETE฀em฀LTA4.
A฀ atividade฀ 5-LOX฀ é฀ restrita฀ a฀ poucos฀ tipos฀ celu-
lares,฀ incluindo฀ linfócitos฀ B,฀ mas฀ não฀ linfócitos฀ T.฀ É฀
ativada฀ por฀ uma฀ proteína฀ acessória฀ chamada฀ proteína฀
ativadora฀de฀5-lipoxigenase฀(FLAP).฀Em฀leucócitos฀hu-
22.01.07 19:26:40
 CAPÍTULO฀19฀฀METABOLISMO฀DE฀AMINOÁCIDOS฀฀฀|฀฀฀725

PARTE฀4฀VIAS฀METABÓLICAS฀E฀SEU฀CONTROLE

19
Fígado
piruvato
NH4+ glutamato

+
NH4
glutamato uréia �-cetoglutarato

glutamina

METABOLISMO฀DE฀
AMINOÁCIDOS
Marguerite฀W.฀Coomes

19.1฀ VISÃO฀GERAL,฀726 ฀ Glutamato฀é฀o฀precursor฀de฀glutationa฀e฀γ-ami-฀

฀ nobutirato,฀736
19.2฀ INCORPORAÇÃO฀DE฀NITROGÊNIO฀EM฀AMI- ฀ Arginina฀é฀também฀sintetizada฀em฀intestinos฀e฀฀
NOÁCIDOS,฀727 ฀ rins,฀737
฀ A฀maioria฀dos฀aminoácidos฀é฀obtida฀da฀dieta,฀ ฀ Ornitina฀e฀prolina,฀737
฀ 727 ฀ Serina฀e฀glicina,฀738
฀ Grupos฀amino฀são฀transferidos฀de฀um฀aminoáci-฀ ฀ Tetra-hidrofolato฀é฀um฀cofator฀em฀algumas฀rea-฀
฀ do฀para฀formar฀outro,฀728 ฀ ções฀de฀aminoácidos,฀741
฀ Piridoxal฀fosfato฀é฀cofator฀de฀aminotransfera-฀ ฀ Treonina,฀744
฀ ses,฀729 ฀ Fenilalanina฀e฀tirosina,฀744
฀ Glutamato฀desidrogenase฀incorpora฀e฀produz฀฀ ฀ ฀ Metabolismo฀de฀tirosina฀produz฀fumarato฀e฀฀
฀ amônia,฀729 ฀ ฀ acetoacetato,฀744
฀ Amônia฀livre฀é฀incorporada฀em฀e฀produzida฀a฀฀ ฀ ฀ Dopamina,฀epinefrina฀e฀norepinefrina฀são฀฀
฀ partir฀de฀glutamina,฀730 ฀ ฀ derivados฀de฀tirosina,฀746
฀ ฀ O฀grupo฀amida฀da฀asparagina฀é฀derivado฀de฀฀ ฀ ฀ Tirosina฀é฀necessária฀para฀síntese฀de฀melani-฀
฀ ฀ glutamina,฀732 ฀ ฀ na,฀hormônio฀tireoideano฀e฀quinoproteí-฀
฀ Aminoácido฀oxidases฀removem฀grupos฀amino,฀
฀ ฀ nas,฀747
฀ 732
฀ Metionina฀e฀cisteína,฀747
฀ ฀ Metionina฀primeiro฀reage฀com฀adenosina฀฀
19.3฀ TRANSPORTE฀DE฀NITROGÊNIO฀PARA฀FÍGADO฀
฀ ฀ trifosfato,฀749
E฀RIM,฀732
฀ S-Adenosilmetionina฀é฀um฀doador฀de฀grupo฀฀
฀ Proteína฀é฀constantemente฀degradada,฀732
฀ Aminoácidos฀são฀transportados฀do฀músculo฀฀ ฀ metil,฀751
฀ após฀proteólise,฀733 ฀ ฀ S-Adenosilmetionina฀é฀o฀precursor฀de฀esper-฀
฀ Amônia฀é฀liberada฀no฀fígado฀e฀no฀rim,฀733 ฀ ฀ midina฀e฀espermina,฀752
฀ Metabolismo฀de฀cisteína฀produz฀compostos฀que฀฀
19.4฀ CICLO฀DA฀URÉIA,฀733 ฀ contêm฀enxofre,฀753
฀ Átomos฀de฀nitrogênios฀da฀uréia฀vêm฀de฀amônia฀e฀฀ ฀ Triptofano,฀754
฀ aspartato,฀733 ฀ ฀ Triptofano฀é฀um฀precursor฀de฀NAD,฀755
฀ Síntese฀de฀uréia฀requer฀cinco฀enzimas,฀734 ฀ ฀ Piridoxal฀fosfato฀é฀importante฀no฀metabolis-฀
฀ Síntese฀da฀uréia฀é฀regulada฀por฀um฀efetor฀alos-฀ ฀ ฀ mo฀de฀triptofano,฀756
฀ térico฀e฀indução฀enzimática,฀735 ฀ ฀ Serotonina฀e฀melatonina฀são฀derivadas฀do฀฀
฀ Doenças฀metabólicas฀da฀síntese฀da฀uréia฀têm฀฀ ฀ ฀ triptofano,฀756
฀ resultados฀sérios,฀735 ฀ ฀ Triptofano฀induz฀sono,฀757
฀ Aminoácidos฀de฀cadeia฀ramificada,฀758
19.5฀ SÍNTESE฀E฀DEGRADAÇÃO฀DE฀AMINOÁCIDOS฀ ฀ ฀ Reações฀iniciais฀do฀metabolismo฀de฀BCAA฀฀
INDIVIDUAIS,฀736 ฀ ฀ são฀as฀mesmas,฀758

BioQ.19 725 22.01.07 18:16:14

 732฀฀฀|฀฀฀PARTE฀4฀฀VIAS฀METABÓLICAS฀E฀SEU฀CONTROLE
O฀Grupo฀Amida฀da฀Asparagina฀É฀Derivado฀
de฀Glutamina
O฀grupo฀amida฀da฀asparagina฀vem฀da฀glutamina฀(Fi-
gura฀19.17),฀e฀não฀de฀amônia฀livre,฀como฀na฀síntese฀de฀
glutamina.฀ATP฀é฀necessário฀para฀ativar฀o฀grupo฀β-car-
boxila฀receptor.฀Asparagina฀é฀facilmente฀sintetizada฀na฀
maioria฀ das฀ células,฀ mas฀ algumas฀ células฀ leucêmicas฀
parecem฀ter฀perdido฀esta฀capacidade.฀Uma฀abordagem฀
terapêutica฀que฀foi฀tentada฀em฀pacientes฀com฀tumores฀
deficientes฀em฀asparagina฀sintetase฀é฀tratamento฀com฀
asparaginase฀ exógena,฀ para฀ hidrolisar฀ a฀ asparagina฀
originária฀ do฀ sangue,฀ da฀ qual฀ estas฀ células฀ dependem฀
(Figura฀19.18).฀Células฀normais฀sintetizam฀e฀degradam฀
asparagina.
NH2
C O
Aminoácido฀Oxidases฀Removem฀
Grupos฀Amino
Muitos฀aminoácidos฀são฀substratos฀para฀L-aminoácido฀
oxidase฀(Figura฀19.19).฀O฀significado฀desta฀reação฀no฀
metabolismo฀é฀incerto,฀mas฀parece฀ser฀pequeno.฀A฀en-
zima฀contém฀flavina฀mononucleotídeo฀(FMN)฀e฀produz฀
peróxido฀de฀hidrogênio.฀Catalase฀metaboliza฀o฀peróxido฀
de฀hidrogênio฀a฀oxigênio฀e฀água.฀Os฀produtos฀finais฀são฀
um฀ α-cetoácido,฀ amônia฀ e฀ água,฀ os฀ mesmos฀ produtos฀
da฀ reação฀ da฀ glutamato฀ desidrogenase.฀ Na฀ reação฀ da฀
aminoácido฀ oxidase,฀ diferentemente฀ da฀ reação฀ catali-
sada฀pela฀glutamato฀desidrogenase,฀não฀há฀produção฀de฀
NADH฀e,฀portanto,฀nenhuma฀produção฀de฀ATP.
Uma฀ D-aminoácido฀ oxidase฀ ocorre฀ em฀ células฀
humanas.฀ Muito฀ pouco฀ dos฀ isômeros฀ D-aminoácidos฀ é฀
encontrado฀ no฀ homem,฀ e฀ a฀ enzima฀ pode฀ degradar฀ D-
aminoácidos฀derivados฀de฀bactérias฀intestinais.

|
COO– CH2

CH2 CH2
19.3฀ ฀TRANSPORTE฀DE฀
HC
+
NH3
+
HC
+
NH3 NITROGÊNIO฀PARA฀
COO– COO– FÍGADO฀E฀RIM
Aspartato Glutamina

ATP
Proteína฀É฀Constantemente฀
AMP + PPi
Degradada
Células฀ morrem฀ em฀ uma฀ base฀ regular฀ e฀ programada,฀
NH2 COO–
um฀processo฀chamado฀apoptose฀(ver฀p.฀993),฀e฀suas฀mo-
C O CH2 léculas฀componentes฀são฀metabolizadas.฀Proteínas฀indi-
CH2 + CH2
viduais฀também฀sofrem฀turnover฀regular฀em฀condições฀
+ + normais฀(ver฀p.฀239).฀Embora฀muitas฀reações฀envolvidas฀
HC NH3 HC NH3

COO– COO–

Asparagina Glutamato COO–

+
FIGURA฀19.17 HC NH3
Síntese฀de฀asparagina.
R
NH2 FMN H2O2
C O
FMNH2 O2
CH2
Asparagina
+ COO–
HC NH3
+
C NH2
COO–

R
H2 O
+
NH4 H2 O

COO–
COO–
CH2 Aspartato
+ +
C O + NH4
HC NH3

COO–– R

FIGURA฀19.18 FIGURA฀19.19
Reação฀catalisada฀pela฀asparaginase. Reação฀da฀L-aminoácido฀oxidase,฀uma฀flavoproteína.

BioQ.19 732 22.01.07 18:16:32

 CAPÍTULO฀19฀฀METABOLISMO฀DE฀AMINOÁCIDOS฀฀฀|฀฀฀745

+ tetra-hidrobiopterina di-hidrobiopterina + H
NH3 NH3 H2 N N N H H
O2 H2O
CH2 CH COO– CH2 CH COO– H
fenilalanina hidroxilase
HN
N CH CH CH3
HO H
O OH
Fenilalanina Tirosina OH

Tetra-hidrobiopterina
FIGURA฀19.46
Fenilalanina฀hidroxilase.
H
N N H H
HN

H
HN
FIGURA฀19.47 N CH CH CH3
Biopterina.฀ O
OH OH
A฀forma฀di-hidro-฀(quinonóide)฀é฀produzida฀durante฀
oxidação฀de฀aminoácidos฀aromáticos฀e฀depois฀reduzida฀à฀
forma฀tetra-hidro฀por฀uma฀desidrogenase,฀usando฀NADH. Di-hidrobiopterina

CORRELAÇÃO฀CLÍNICA฀19.7
Fenilcetonúria฀
Fenilcetonúria฀(PKU)฀é฀a฀doença฀mais฀comum฀cau-
sada฀ por฀ uma฀ deficiência฀ de฀ uma฀ enzima฀ do฀ meta-
bolismo฀ de฀ aminoácidos.฀ O฀ nome฀ vem฀ da฀ excreção฀
do฀ ácido฀ fenilpirúvico,฀ uma฀ fenilcetona,฀ na฀ urina.฀
Fenil-lactato฀(Figura฀19.47),฀a฀forma฀reduzida฀do฀fe-
nilpiruvato,฀ e฀ fenilacetato฀ são฀ também฀ excretados.฀
O฀ último฀ dá฀ à฀ urina฀ um฀ odor฀ “murino”.฀ Esses฀ três฀
metabólitos฀são฀encontrados฀em฀quantidades฀muito฀
pequenas฀na฀urina฀de฀pessoas฀saudáveis.฀Os฀sinto-
mas฀de฀retardo฀mental฀associados฀a฀esta฀doença฀po-
dem฀ser฀evitados฀por฀uma฀dieta฀pobre฀em฀fenilalani-
na.฀Teste฀de฀triagem฀de฀rotina฀é฀determinado฀pelos฀
governos฀de฀muitas฀partes฀do฀mundo.฀PKU฀clássica฀
é฀ uma฀ deficiência฀ autossômica฀ recessiva฀ de฀ fenila-
lanina฀ hidroxilase.฀ Mais฀ de฀ 417฀ mutações฀ no฀ gene฀
foram฀descritas.฀Em฀alguns฀casos,฀há฀sintomas฀neu-
rológicos฀ graves฀ e฀ QI฀ muito฀ baixo.฀ Estes฀ são฀ geral-
mente฀atribuídos฀aos฀efeitos฀tóxicos฀da฀fenilalanina,฀
possivelmente฀devido฀ao฀transporte฀reduzido฀e฀me-
tabolismo฀de฀outros฀aminoácidos฀aromáticos฀no฀cé-
rebro,฀devido฀à฀competição฀das฀altas฀concentrações฀
de฀fenilalanina.฀A฀cor฀clara฀característica฀da฀pele฀e฀
dos฀olhos฀deve-se฀à฀falta฀de฀pigmentação,฀devido฀à฀
deficiência฀ de฀ tirosina.฀ Tratamento฀ convencional฀ é฀
por฀uma฀dieta฀sintética,฀pobre฀em฀fenilalanina,฀mas฀
incluindo฀tirosina,฀por฀cerca฀de฀quatro฀a฀cinco฀anos,฀
seguida฀de฀restrição฀de฀proteínas฀na฀dieta฀por฀vários฀
anos฀mais฀ou฀por฀toda฀a฀vida.
Cerca฀ de฀ 3%฀ das฀ crianças฀ com฀ altos฀ níveis฀ de฀
fenilalanina฀ têm฀ hidroxilase฀ normal,฀ mas฀ são฀ defi-
cientes฀na฀síntese฀ou฀na฀redução฀de฀biopterina.฀Uma฀
deficiência฀de฀BH4฀pode฀ser฀causada฀por฀mutação฀na฀
GTP฀ciclo-hidrolase฀(GTPCH),฀6-piruvoiltetra-hidro-
biopterina฀sintetase฀(PTPS)฀ou฀sepiapterina฀reduta-
se฀ (SPR),฀ as฀ três฀ enzimas฀ que฀ convertem฀ GTP฀ em฀
BH4.฀Duas฀enzimas฀são฀necessárias฀para฀regenera-
ção฀ de฀ BH4:฀ pterina-4a-carbinolamina฀ desidratase฀
(PCD)฀e฀di-hidropterina฀redutase฀(DHPR).฀Deficiên-
cia฀de฀BH4฀ocorre฀a฀uma฀taxa฀de฀um฀em฀um฀milhão.฀
Screening฀ para฀ hiperfenilalaninemia฀ sem฀ redução฀
de฀atividade฀de฀fenilalanina฀hidroxilase฀in฀vitro฀in-
dica฀a฀possibilidade฀de฀uma฀deficiência฀de฀BH4.฀Se฀
a฀ condição฀ não฀ for฀ tratada,฀ pacientes฀ apresentam฀
sintomas฀de฀hiperfenilalaninemia,฀cabelo฀vermelho,฀
retardo฀psicomotor฀e฀deterioração฀neurológica฀pro-
gressiva.฀ Estes฀ últimos฀ sintomas฀ são฀ um฀ resultado฀
da฀incapacidade฀de฀produzir฀melanina,฀catecolami-
nas฀e฀serotonina.฀Tratamento฀é฀suplementação฀com฀
BH4฀ e฀ precursor฀ de฀ neurotransmissores.฀ Distonia฀
que฀responde฀a฀DOPA฀(DRD)฀e฀deficiência฀de฀SR฀não฀
podem฀ser฀detectadas฀em฀testes฀de฀screening฀para฀
PKU.฀Fibroblastos฀de฀pele฀são฀úteis฀para฀o฀diagnós-
tico฀ destas฀ condições.฀ A฀ descoberta฀ da฀ deficiência฀
de฀ SR฀ levou฀ à฀ descoberta฀ de฀ vias฀ alternativas฀ do฀
metabolismo฀de฀BH4,฀incluindo฀um฀papel฀para฀di-hi-
drofolato฀redutase฀(DHFR).฀Baixos฀níveis฀de฀DHFR฀
no฀cérebro฀permitem฀que฀di-hidrobiopterina฀se฀acu-
mule฀e฀iniba฀tirosina฀e฀triptofano฀hidroxilases.฀DHP฀
também฀desacopla฀óxido฀nítrico฀sintase฀e฀pode฀levar฀
à฀morte฀de฀célula฀neuronal.

Fonte:฀ Scriver,฀ C.฀ R.฀ e฀ Clow,฀ L.฀ L.฀ Phenylketonuria:฀ Epitome฀ of฀ human฀ biochemical฀ genetics.฀ N.฀ Engl.฀ J.฀ Med.฀
303:1336,1980.฀Woo,฀S.฀L.฀C.฀Molecular฀basis฀and฀population฀genetics฀of฀phenylketonuria.฀Biochemistry฀28:1,฀1989.฀
Shintaku,฀ H.฀ Disorders฀ of฀ tetrahydrobiopterin฀ metabolism฀ and฀ their฀ treatments.฀ Curr.฀ Drug.฀ Metab.฀ 3:123;฀ 2002.฀
Blau,฀N.,฀Bonafe,฀L.฀e฀Thony,฀B.฀Tetrahydrobiopterin฀deficiencies฀without฀hyperphenylalaninemia฀diagnosis฀and฀gene-
tics฀of฀dopa-responsive฀distonia฀and฀sepiapterin฀reductase฀deficiency.฀Mol.฀Genet.฀Metab.฀74:172,฀2001.

BioQ.19 745 22.01.07 18:16:49

 760฀฀฀|฀฀฀PARTE฀4฀฀VIAS฀METABÓLICAS฀E฀SEU฀CONTROLE
(A partir de leucina) ATP CO2 H2O ADP + Pi CH3 CH2 C SCoA
–OOC CH2 C CH C SCoA
CH3 C CH C SCoA
O
CH3 O metilcrotonil-CoA CH3 O
Propionil-CoA
�–Metilcrotonil-CoA carboxilase �–Metilglutaconil-CoA

H2 O CO2
metilglutaconil-CoA
O hidratase propionil-CoA
carboxilase
CH3 C SCoA OH
Acetil-CoA –OOC CH2 C CH2 SCoA
C
hidroximetilglutaril-CoA liase CH3
CH3 O –OOC CH C SCoA
�–Hidroxi–�–metilglutaril-CoA
O
CH3 C CH2 C O– (HMG CoA)
D–Metilmalonil-CoA
O O
Acetoacetato
metilmalonil-CoA
FIGURA฀19.70 racemase
Reações฀finais฀na฀degradação฀de฀leucina.

–OOC CH C SCoA
ocorre,฀ de฀ maneira฀ dependente฀ de฀ piridoxal.฀ Reações฀
CH3 O
subseqüentes฀levam฀a฀acetoacetil-CoA.฀Uma฀via฀mino-
ritária฀começa฀com฀remoção฀do฀α-amino-grupo฀e฀pros- L–Metilmalonil-CoA

segue฀via฀o฀composto฀cíclico฀pipecolato฀(Figura฀19.73),฀
para฀se฀juntar฀à฀via฀principal฀no฀nível฀do฀intermediário฀ metilmalonil-CoA
mutase
semialdeído.฀Esta฀não฀substitui฀a฀via฀principal,฀mesmo฀ FIGURA฀19.71
em฀uma฀deficiência฀de฀enzimas฀na฀parte฀inicial฀da฀via฀ Interconversão฀de฀propionil-
CoA,฀metilmalonil-CoA฀e฀
(ver฀Corr.฀Clín.฀19.16). succinil-CoA.฀ –OOC SCoA
CH2 CH2 C
A฀mutase฀requer฀
5’-desoxiadenosilcobalamina฀ O
para฀atividade. Succinil-CoA

CORRELAÇÃO฀CLÍNICA฀19.15
Doenças฀do฀Metabolismo฀de฀Propionato฀e฀Metilmalonato
Deficiência฀de฀qualquer฀das฀três฀enzimas฀mostradas฀
na฀Figura฀19.71฀contribui฀para฀cetoacidose.฀Propiona-
to฀é฀formado฀na฀degradação฀de฀valina,฀isoleucina,฀me-
tionina,฀treonina,฀cadeia฀lateral฀do฀colesterol฀e฀ácidos฀
graxos฀de฀cadeia฀ímpar.฀Os฀aminoácidos฀parecem฀ser฀
os฀ principais฀ precursores,฀ uma฀ vez฀ que฀ diminuição฀
ou฀ eliminação฀ de฀ proteínas฀ da฀ dieta฀ minimiza฀ ime-
diatamente฀ a฀ acidose.฀ Um฀ defeito฀ na฀ propionil-CoA฀
carboxilase฀ resulta฀ em฀ acúmulo฀ de฀ propionato,฀ que฀
é฀desviado฀para฀vias฀alternativas,฀incluindo฀incorpo-
ração฀em฀ácidos฀graxos฀em฀lugar฀do฀primeiro฀grupo฀
acetil,฀para฀formar฀ácidos฀graxos฀de฀cadeia฀ímpar.฀A฀
extensão฀ dessas฀ reações฀ é฀ muito฀ limitada.฀ Em฀ um฀
caso,฀relatou-se฀que฀grandes฀quantidades฀de฀biotina฀
produziram฀ efeitos฀ benéficos,฀ sugerindo฀ que฀ mais฀
de฀um฀defeito฀diminua฀a฀atividade฀da฀propionil-CoA฀
carboxilase.฀ As฀ possibilidades฀ são:฀ uma฀ perda฀ de฀
biotinidase฀ intestinal,฀ que฀ libera฀ biotina฀ de฀ alimen-
to฀ ingerido฀ para฀ absorção,฀ ou฀ uma฀ perda฀ de฀ biotina฀
holocarboxilase,฀que฀incorpora฀biotina฀de฀alimentos฀
ingeridos฀para฀absorção,฀ou฀perda฀de฀biotina฀holocar-
boxilase,฀que฀incorpora฀biotina฀em฀enzimas฀biotina-
dependentes.฀Acidose฀em฀crianças฀pode฀ser฀causada฀
por฀altos฀níveis฀de฀metilmalonato,฀que฀normalmente฀
não฀ é฀ detectado฀ no฀ sangue.฀ Fígado฀ retirado฀ de฀ au-
tópsia฀ ou฀ fibroblastos฀ em฀ cultura฀ mostraram฀ em฀ al-
guns฀casos,฀deficiência฀de฀metilmalonil-CoA฀mutase.฀
Algumas฀ amostras฀ foram฀ incapazes฀ de฀ converter฀
metilmalonil-CoA฀em฀succinil-CoA฀em฀qualquer฀con-
dição,฀mas฀outras฀amostras฀executaram฀a฀conversão฀
quando฀5’-adenosilcobalamina฀foi฀adicionada.฀É฀claro฀
que฀aqueles฀com฀defeito฀no฀sítio฀ativo฀da฀enzima,฀não฀
conseguem฀metabolizar฀metilmalonato,฀mas฀aqueles฀
com฀defeito฀no฀manuseio฀da฀vitamina฀B12฀respondem฀
a฀ altas฀ doses฀ da฀ vitamina.฀ Outros฀ casos฀ de฀ acidúria฀
metilmalônica฀ têm฀ uma฀ incapacidade฀ mais฀ funda-
mental฀de฀usar฀vitamina฀B12,฀que฀leva฀a฀deficiência฀de฀
metilcobalamina฀(co-enzima฀da฀recuperação฀de฀me-
tionina)฀ e฀ deficiência฀ de฀ 5’-adenosilcobalamina฀ (co-
enzima฀da฀isomerização฀de฀metilmalonil-CoA).

Fonte:฀Mahoney,฀M.฀J.฀e฀Bick,฀D.฀Recent฀advances฀in฀the฀inherited฀methylmalonic฀acidemias.฀Acta฀Paediatr.฀Scand.฀
76:689,฀1987.

BioQ.19 760 22.01.07 18:17:07

 770฀฀฀|฀฀฀PARTE฀4฀฀VIAS฀METABÓLICAS฀E฀SEU฀CONTROLE

PARTE฀4฀VIAS฀METABÓLICAS฀E฀SEU฀CONTROLE

20
HCO3–
Glicina

Amina de aspartato 6 7
5 N
1 N
8
2
"C1"–H4folato
4 N
"C1"–H4folato N 9
3

Amida de glutamina

METABOLISMO฀DE฀
PURINA฀E฀PIRIMIDINA฀
NUCLEOTÍDEOS
Joseph฀G.฀Cory

20.1฀ VISÃO฀GERAL,฀771 20.5฀ FORMAÇÃO฀DE฀DESOXIRRIBONUCLEOTÍDE-

OS,฀786
20.2฀ FUNÇÕES฀METABÓLICAS฀DOS฀NUCLEOTÍ- ฀ Desoxirribonucleotídeos฀são฀formados฀por฀redu-฀
DEOS,฀771 ฀ ção฀de฀ribonucleosídeos฀5’-difosfatos,฀786
฀ Distribuição฀de฀nucleotídeos฀varia฀com฀o฀tipo฀de฀฀ ฀ Síntese฀de฀desoxitimidilato฀requer฀N5,฀N10 -meti-฀
฀ célula,฀771 ฀ leno฀H4folato,฀788
฀ Interconversões฀de฀pirimidinas฀com฀ênfase฀em฀฀
20.3฀ METABOLISMO฀DE฀PURINA฀NUCLEOTÍDEOS,฀ ฀ desoxirribopirimidina฀nucleosídeos฀e฀nucleo-฀
772 ฀ tídeos,฀788
฀ Síntese฀de฀purina฀nucleotídeos,฀772 ฀ Pirimidina฀nucleotídeos฀são฀degradados฀a฀β-ami-฀
฀ ฀ Síntese฀de฀IMP,฀772 ฀ noácidos,฀789
฀ ฀ IMP฀é฀precursor฀de฀AMP฀e฀GMP,฀774
฀ ฀ Síntese฀de฀purina฀nucleotídeos฀é฀muito฀regu-฀ 20.6฀ NUCLEOSÍDEO฀E฀NUCLEOTÍDEO฀QUINASES,฀
789
฀ ฀ lada,฀774
฀ Purina฀bases฀e฀nucleosídeos฀são฀recuperados฀฀
20.7฀ ENZIMAS฀QUE฀METABOLIZAM฀NUCLEOTÍDE-
฀ para฀regenerar฀nucleotídeos,฀775
OS฀COM฀UMA฀FUNÇÃO฀EM฀CICLO฀CELULAR฀E฀
฀ Purina฀nucleotídeos฀são฀interconvertidos฀para฀฀
TAXA฀DE฀DIVISÃO฀CELULAR,฀790
฀ equilibrar฀níveis฀celulares฀de฀adenina฀e฀gua-฀
฀ nina฀nucleotídeos,฀778 20.8฀ SÍNTESE฀DE฀COENZIMAS฀NUCLEOTÍDEOS,฀791
฀ GTP฀é฀o฀precursor฀de฀tetra-hidrobiopterina฀,฀778
฀ Ácido฀úrico฀é฀o฀produto฀final฀da฀degradação฀฀ 20.9฀ SÍNTESE฀E฀UTILIZAÇÃO฀DE฀5-FOSFORRIBOSIL-
฀ de฀purinas฀no฀homem,฀778 1-PIROFOSFATO,฀791
฀ ฀ Formação฀de฀ácido฀úrico,฀781
20.10฀AGENTES฀QUIMIOTERÁPICOS฀QUE฀INTER-
20.4฀ METABOLISMO฀DE฀PIRIMIDINA฀NUCLEOTÍ- FEREM฀COM฀METABOLISMO฀DE฀PURINA฀E฀
DEOS,฀783 PIRIMIDINA฀NUCLEOTÍDEOS,฀793
฀ Síntese฀de฀pirimidina฀nucleotídeos,฀783 ฀ Inibidores฀do฀metabolismo฀de฀purina฀e฀pirimidi-฀
฀ ฀ Síntese฀de฀pirimidina฀nucleotídeos฀é฀regula-฀ ฀ na฀nucleotídeos,฀794
฀ ฀ da฀ao฀nível฀da฀carbamoil฀fosfato฀sintetase฀฀ ฀ ฀ Antimetabólitos฀são฀análogos฀estruturais฀de฀฀
฀ ฀ II,฀784 ฀ ฀ bases฀ou฀nucleosídeos.฀794
฀ Bases฀pirimídicas฀são฀recuperadas฀para฀regene-฀ ฀ ฀ Antifolatos฀inibem฀a฀formação฀de฀tetra-hi-฀
฀ rar฀nucleotídeos,฀786 ฀ ฀ drofolato,฀795

BioQ.20 770 22.01.07 18:22:07

 CAPÍTULO฀20฀฀METABOLISMO฀DE฀PURINA฀E฀PIRIMIDINA฀NUCLEOTÍDEOS฀฀฀|฀฀฀783
CORRELAÇÃO฀CLÍNICA฀20.5
Pacientes฀com฀Câncer฀em฀
Tratamento฀por฀Radiações฀ou฀
Quimioterapia
฀Pacientes฀com฀câncer฀com฀tumores฀grandes,฀em฀
tratamento฀ por฀ radioterapia฀ ou฀ quimioterapia฀
também฀apresentam฀concentrações฀aumentadas฀
de฀ácido฀úrico฀no฀soro฀e฀na฀urina.฀A฀fonte฀deste฀
ácido฀úrico฀aumentado฀não฀é฀síntese฀aumentada฀
de฀ purina฀ nucleotídeos,฀ mas฀ sim฀ destruição฀ de฀
células฀tumorais฀que,฀por฀sua฀vez,฀liberam฀ácidos฀
nucléicos฀ degradados฀ e฀ nucleotídeos฀ celulares,฀
que฀são฀metabolizados฀a฀ácido฀úrico.฀Muitos฀dos฀
protocolos฀de฀tratamento฀de฀câncer฀incluem฀alo-
purinol฀como฀uma฀das฀drogas,฀com฀o฀único฀pro-
pósito฀ de฀ limitar฀ o฀ acúmulo฀ de฀ ácido฀ úrico฀ nos฀
pacientes.฀Uma฀nova฀droga฀uricolítica฀(Rasburi-
case,฀uma฀enzima฀bacteriana)฀que฀converte฀ácido฀
úrico฀em฀um฀composto฀hidrossolúvel฀está฀sendo฀
usada฀ em฀ crianças฀ e฀ adultos฀ para฀ lidar฀ com฀ os฀
níveis฀aumentados฀de฀ácido฀úrico฀formado฀após฀
células฀tumorais฀terem฀sido฀destruídas.฀Embora฀
o฀uso฀de฀uricase฀ter฀certas฀vantagens฀farmacoló-
gicas฀sobre฀alopurinol,฀tem฀a฀desvantagem฀de฀ser฀
mais฀caro.
Fonte:฀ Smalley,฀ R.฀ V.,฀ Guaspari,฀ A.,฀ Haase-\break฀
Statz,฀S.,฀Anderson,฀S.฀A.,฀Cederberg,฀D.฀e฀Hohneker,฀J.฀
A.฀Allopurinol:฀Intravenous฀use฀for฀prevention฀and฀tre-
atment฀of฀hyperuricemia.฀J.฀Clin.฀Oncol.฀18:1758,฀2000.฀
Ribeiro,฀R.฀C.฀e฀Pui,฀C.฀H.฀Recombinant฀urate฀oxidase฀
for฀ prevention฀ of฀ hyperuricemia฀ and฀ tumor฀ lysis฀ syn-
drome฀ in฀ lymphoid฀ malignancies.฀ Clin.฀ Lymphoma฀
3:252,฀2003.฀Yim,฀B.฀T.,฀Sims-McCallum,฀R.฀P.฀e฀Chong,฀
P.฀ H.฀ Rasburicase฀ for฀ the฀ treatment฀ and฀ prevention฀ of฀
hyperuricemia.฀Ann.฀Pharmacother.฀37:1047,฀2003.
causa฀ de฀ hiperuricemia/hiperuricúria฀ pode฀ ser฀ defini-
da฀como฀um฀defeito฀metabólico฀relacionado฀com฀a฀su-
perprodução฀de฀purina฀nucleotídeos,฀e฀outras฀situações฀
nas฀quais฀não฀há฀alterações฀metabólicas฀definidas฀(ver฀
Corr.฀Clín.฀20.1,฀20.2,฀20.5฀e฀20.6).
|
20.4฀ ฀METABOLISMO฀
DE฀PIRIMIDINA฀
NUCLEOTÍDEOS
A฀síntese฀de฀ novo฀ do฀anel฀pirimidínico฀em฀células฀de฀
mamíferos฀utiliza฀aminoácidos฀como฀doadores฀de฀car-
bono฀e฀nitrogênio,฀além฀de฀CO2.฀Uridina฀5’-monofosfa-
to฀(UMP)฀é฀sintetizado฀em฀uma฀via฀metabólica฀de฀seis฀
BioQ.20 783
CORRELAÇÃO฀CLÍNICA฀20.6
Subclasse฀de฀Pacientes฀com฀
Autismo
Recentemente฀demonstrou-se฀que฀uma฀subclas-
se฀de฀crianças฀com฀autismo฀infantil฀excreta฀ácido฀
úrico฀em฀mais฀de฀dois฀desvios฀padrões฀acima฀da฀
média฀normal.฀Este฀grupo฀de฀crianças฀represen-
ta฀ aproximadamente฀ 20%฀ da฀ população฀ autis-
ta.฀ Com฀ cultura฀ de฀ fibroblastos฀ destas฀ crianças฀
autistas,฀descobriu-se฀que฀a฀síntese฀de฀novo฀de฀
purina฀nucleotídeos,฀medida฀por฀incorporação฀de฀
[14C]-formato฀em฀purina฀nucleotídeos,฀estava฀au-
mentada฀quatro฀vezes,฀em฀relação฀ao฀observado฀
em฀fibroblastos฀de฀controles฀normais.฀A฀razão฀de฀
adenina฀ nucleotídeos฀ para฀ guanina฀ nucleotíde-
os฀ no฀ pool฀ estava฀ alterada,฀ sugerindo฀ que฀ a฀ via฀
de฀interconversão฀de฀purina฀nucleotídeos฀estava฀
comprometida.฀Até฀o฀momento,฀a฀base฀molecular฀
para฀a฀síntese฀de฀novo฀aumentada฀de฀purina฀nu-
cleotídeos฀nestas฀crianças฀autistas฀não฀é฀conhe-
cida.฀Um฀aspecto฀incomum฀da฀síntese฀aumentada฀
de฀ purina฀ nucleotídeos฀ nestas฀ crianças฀ é฀ que฀ a฀
excreção฀de฀ácido฀úrico฀é฀elevada,฀mas฀a฀concen-
tração฀de฀ácido฀úrico฀no฀soro฀está฀na฀faixa฀nor-
mal.฀Em฀um฀relato฀recente,฀um฀paciente฀do฀sexo฀
masculino฀foi฀tratado฀com฀uma฀dose฀oral฀de฀uridi-
na฀por฀um฀período฀de฀dois฀anos.฀Como฀resultado,฀
o฀paciente฀teve฀notável฀melhora฀no฀desempenho฀
social,฀cognitivo,฀de฀linguagem฀e฀motor.฀Surpre-
endentemente,฀quando฀a฀uridina฀foi฀descontinu-
ada,฀os฀sintomas฀de฀autismo฀voltaram,฀mas฀com฀o฀
reinício฀do฀tratamento฀com฀uridina,฀o฀comporta-
mento฀do฀menino฀melhorou฀novamente.
Page,฀T.฀e฀Coleman,฀M.฀Purine฀metabolism฀abnorma-
lities฀in฀a฀hyperuricosuric฀subclass฀of฀autism.฀Biochim.฀
Biophys.฀ Acta฀ 1500:291,฀ 2000.฀ Page,฀ T.฀ e฀ Moseley,฀ C.฀
Metabolic฀ treatment฀ of฀ hyperuricosuric฀ autism.฀ Prog.฀
Neuro-Psychopharmacol.฀ Biol.฀ Psychiatry฀ 26:397,฀
2002.
etapas.฀Hidrólise฀de฀ATP฀(ou฀equivalente)฀é฀necessária฀
para฀direcionar฀diversas฀etapas฀da฀via.
Síntese฀de฀Pirimidina฀Nucleotídeos
Em฀contraste฀com฀a฀síntese฀de฀novo฀de฀purina฀nucle-
otídeos,฀nem฀todas฀as฀enzimas฀para฀a฀síntese฀de฀novo฀
de฀pirimidina฀nucleotídeos฀são฀citosólicas.฀Reações฀que฀
levam฀à฀formação฀de฀UMP฀são฀apresentadas฀na฀Figura฀
20.13.฀Aspectos฀importantes฀da฀via฀devem฀ser฀observa-
dos.฀O฀anel฀pirimidina฀é฀formado฀primeiro,฀e฀depois฀ri-
bose฀5-fosfato฀é฀adicionada฀com฀PRPP,฀sendo฀o฀doador฀
22.01.07 18:22:20
 CAPÍTULO฀20฀฀METABOLISMO฀DE฀PURINA฀E฀PIRIMIDINA฀NUCLEOTÍDEOS฀฀฀|฀฀฀791
O฀ pool฀ de฀ desoxirribonucleotídeos฀ é฀ extremamen-
te฀pequeno฀em฀células฀“em฀repouso”฀(inferior฀a฀1฀μM).฀
Como฀resultado฀do฀aumento฀de฀atividade฀de฀ribonucleo-
tídeo฀redutase,฀as฀concentrações฀de฀desoxirribonucleo-
tídeos฀alcançam฀10-20฀μM฀durante฀síntese฀de฀DNA.฀En-
tretanto,฀esta฀concentração฀suportaria฀síntese฀de฀DNA฀
por฀ alguns฀ minutos,฀ enquanto฀ a฀ replicação฀ completa฀
do฀DNA฀requer฀horas.฀Conseqüentemente,฀os฀níveis฀de฀
atividade฀ da฀ ribonucleotídeo฀ redutase฀ não฀ só฀ devem฀
aumentar,฀ mas฀ devem฀ ser฀ mantidos฀ durante฀ a฀ fase฀ S,฀
para฀ fornecerem฀ os฀ substratos฀ necessários฀ à฀ síntese฀
de฀ DNA.฀ Tecidos฀ em฀ crescimento,฀ como฀ o฀ fígado฀ em฀
regeneração,฀ tecidos฀ embrionários,฀ células฀ da฀ mucosa฀
intestinal฀e฀células฀eritropoiéticas฀estão฀inclinados฀em฀
direção฀à฀replicação฀de฀DNA฀e฀à฀síntese฀de฀RNA.฀Estes฀
tecidos฀apresentarão฀níveis฀elevados฀das฀enzimas-cha-
ves฀envolvidas฀com฀síntese฀e฀interconversões฀de฀purina฀
e฀pirimidina฀nucleotídeos,฀juntamente฀com฀diminuição฀
complementar฀na฀quantidade฀de฀enzimas฀que฀catalisam฀
reações฀ nas฀ quais฀ estes฀ precursores฀ são฀ degradados.฀
Estas฀ mudanças฀ refletem฀ a฀ proporção฀ de฀ células฀ que฀
estão฀na฀fase฀S.
Um฀ padrão฀ ordenado฀ de฀ alterações฀ bioquímicas฀
ocorre฀ em฀ células฀ tumorais.฀ A฀ partir฀ de฀ uma฀ série฀ de฀
tumores฀de฀fígado,฀cólon฀e฀rim,฀com฀diferentes฀velocida-
des฀de฀crescimento,฀estas฀alterações฀foram฀identificadas฀
como:฀(1)฀ligadas฀à฀transformação฀(significando฀que฀to-
dos฀ os฀ tumores,฀ independentemente฀ da฀ velocidade฀ de฀
crescimento,฀ apresentam฀ quantidades฀ de฀ certas฀ enzi-
mas฀aumentadas฀e,฀de฀certas฀enzimas,฀diminuídas),฀(2)฀
ligadas฀à฀progressão฀(alterações฀que฀se฀correlacionam฀
com฀ a฀ velocidade฀ de฀ crescimento฀ dos฀ tumores)฀ e฀ (3)฀
alterações฀ coincidentes฀ (não฀ ligadas฀ ao฀ estado฀ malig-
no).฀ Os฀ níveis฀ de฀ ribonucleotídeo฀ redutase,฀ timidilato฀
sintase฀e฀IMP฀desidrogenase฀aumentam฀em฀função฀da฀
velocidade฀de฀crescimento฀do฀tumor.฀PRPP฀amidotrans-
ferase,฀UDP฀quinase฀e฀uridina฀quinase฀estão฀aumenta-
das฀em฀todos฀os฀tumores,฀independentemente฀de฀serem฀
de฀crescimento฀lento฀ou฀rápido.
Alterações฀de฀expressão฀gênica฀em฀células฀tumorais฀
não฀são฀apenas฀alterações฀quantitativas฀em฀níveis฀enzi-
máticos,฀ mas฀ também฀ alterações฀ qualitativas฀ (troca฀ de฀
isozimas,฀ isozyme฀ shifts).฀ Enquanto฀ algumas฀ enzimas฀
estão฀ aumentadas฀ em฀ tecido฀ normal฀ de฀ crescimento฀
rápido฀(p.฀ex.,฀embrionário฀e฀fígado฀em฀regeneração)฀e฀
em฀tumores,฀os฀padrões฀gerais฀quantitativo฀e฀qualitativo฀
para฀tecidos฀normal฀e฀tumoral฀podem฀ser฀diferenciados.
|
20.8฀ ฀SÍNTESE฀DE฀
COENZIMAS฀
NUCLEOTÍDEOS
Nicotinamida฀ adenina฀ nucleotídeo฀ (NAD+),฀ fla-
vina฀ adenina฀ nucleotídeo฀ (FAD+)฀ e฀ coenzima฀ A฀
(CoA)฀ são฀ importantes฀ coenzimas฀ ou฀ grupos฀ prostéti-
cos฀do฀metabolismo฀intermediário.฀Embora฀todas฀essas฀
BioQ.20 791
coenzimas฀tenham฀um฀resíduo฀de฀AMP฀como฀parte฀de฀
sua฀estrutura,฀o฀resíduo฀de฀AMP฀não฀está฀diretamente฀
envolvido฀nas฀reações฀em฀que฀cada฀uma฀delas฀funciona.฀
Em฀ NAD฀ e฀ NADP,฀ é฀ o฀ anel฀ de฀ nicotinamida฀ que฀ está฀
envolvido฀na฀função฀de฀oxidação/redução;฀em฀FMN฀ou฀
FAD,฀é฀o฀anel฀flavina฀que฀está฀envolvido฀na฀função฀de฀
oxidação/redução;฀ na฀ coenzima฀ A,฀ é฀ o฀ grupo฀ sulfidri-
la฀que฀é฀parte฀funcional฀da฀molécula.฀São฀sintetizadas฀
por฀ uma฀ variedade฀ de฀ tipos฀ de฀ células฀ de฀ mamíferos.฀
Figuras฀20.27,฀20.28฀e฀20.29฀apresentam฀as฀vias฀biossin-
téticas฀para฀cada฀uma.฀Síntese฀de฀NAD฀requer฀niacina,฀
síntese฀de฀FAD฀requer฀riboflavina,฀e฀CoA฀requer฀ácido฀
pantotênico.฀NAD฀é฀sintetizado฀por฀três฀vias฀diferentes,฀
começando฀ com฀ triptofano฀ (ver฀ p.฀ 754),฀ nicotinato฀ ou฀
nicotinamida,฀respectivamente.฀Quando฀triptofano฀está฀
em฀ excesso,฀ em฀ relação฀ à฀ quantidade฀ necessária฀ para฀
síntese฀ de฀ proteínas฀ e฀ de฀ serotonina฀ (ver฀ p.฀ 773),฀ ele฀
pode฀ser฀usado฀para฀síntese฀de฀NAD.฀Esta฀situação฀não฀
é฀provável฀na฀maioria฀das฀dietas฀normais;฀conseqüente-
mente,฀niacina฀é฀necessária฀na฀dieta.
Síntese฀de฀NAD+฀por฀qualquer฀uma฀das฀três฀vias฀re-
quer฀PRPP฀como฀doador฀de฀ribose฀5-fosfato.฀Nicotina-
mida฀adenina฀dinucleotídeo฀fosfato฀(NADP+)฀é฀deriva-
do฀por฀fosforilação฀do฀NAD +.฀NAD+฀é฀usado฀não฀só฀como฀
cofator฀em฀reações฀de฀oxidação-redução,฀mas฀também฀
como฀um฀substrato฀em฀reações฀de฀ADP-ribosilação฀(p.฀
ex.,฀ reparo฀ de฀ DNA฀ e฀ envenenamento฀ por฀ toxina฀ per-
tussis;฀ver฀p.฀514).฀Estas฀reações฀levam฀ao฀turnover฀de฀
NAD+.฀O฀produto฀final฀da฀degradação฀de฀NAD +฀é฀2-piri-
dona-5-carboxamida,฀que฀é฀excretado฀na฀urina.
Síntese฀ de฀ coenzimas฀ nucleotídeos฀ é฀ regulada฀ de฀
maneira฀ que฀ existam฀ concentrações฀ essencialmente฀
constantes฀destas฀coenzimas฀na฀célula.฀Quando฀se฀diz฀
que฀uma฀certa฀condição฀metabólica฀é฀favorecida฀quan-
do฀a฀concentração฀de฀NAD +฀é฀baixa,฀a฀concentração฀de฀
NADH฀é฀correspondentemente฀alta.฀Como฀um฀exemplo,฀
para฀que฀a฀glicólise฀continue฀em฀condições฀anaeróbicas,฀
NAD+฀deve฀ser฀continuamente฀regenerado฀por฀redução฀
de฀piruvato฀a฀lactato,฀catalisado฀pela฀lactato฀desidroge-
nase฀(ver฀p.฀582).
|
20.9฀ ฀SÍNTESE฀E฀UTILIZAÇÃO฀
DE฀5-FOSFORRIBOSIL-
1-PIROFOSFATO
5-Fosforribosil-1-pirofosfato฀ (PRPP)฀ é฀ uma฀ molé-
cula฀chave฀na฀síntese฀de฀novo฀de฀purina฀e฀pirimidina฀
nucleotídeos,฀ na฀ recuperação฀ de฀ bases฀ púricas฀ e฀ piri-
mídicas,฀e฀na฀síntese฀de฀NAD+.฀PRPP฀sintetase฀catalisa฀
a฀reação฀apresentada฀na฀Figura฀20.30.฀Ribose-5-fosfato฀
usada฀ nesta฀ reação฀ é฀ gerada฀ a฀ partir฀ do฀ metabolismo฀
de฀glicose฀6-fosfato,฀pela฀via฀das฀pentoses฀fosfato,฀ou฀da฀
ribose฀1-fosfato฀gerada฀por฀fosforólise฀de฀nucleosídeos,฀
via฀nucleosídeo฀fosforilase.฀PRPP฀sintetase฀tem฀uma฀ne-
cessidade฀absoluta฀de฀fosfato฀inorgânico฀e฀é฀fortemente฀
regulada.฀ A฀ curva฀ de฀ velocidade฀ versus฀ concentração฀
22.01.07 18:22:30
 CAPÍTULO฀20฀฀METABOLISMO฀DE฀PURINA฀E฀PIRIMIDINA฀NUCLEOTÍDEOS฀฀฀|฀฀฀793

H H H FIGURA฀20.28
Síntese฀de฀flavina฀adenina฀
CH2 C C C CH2OH dinucleotídeo.
OH OH OH

N N
O
H3 C
Riboflavina
H3 C NH
N
O

ATP
riboflavina quinase
ADP

H H H O
CH2 C C C CH2 O P O–

OH OH OH O–

N N
O
H3 C
Riboflavins fosfato (flavina mononucleotídeo, FMN)

H3 C NH
N
O

ATP
FAD - pirofosforilase
PPi
NH2
N
N

N N

H H H O O
Flavins adenina dinucleotídeo (FAD)
CH2 C C C CH2 O P O P O CH2 O
OH OH OH –O –O

N N
O
H3 C HO OH

H3 C NH
N
O

|
5.฀Síntese฀de฀NAD +
20.10฀ ฀ AGENTES฀QUIMIOTE-
PRPP + nicotinato 
 nicotinato mononucleotídeo + PPi
RÁPICOS฀QUE฀INTER-
PRPP + nicotinamida 
FEREM฀COM฀META-
 nicotinamida mononucleotídeo + PPi BOLISMO฀DE฀PURINA฀
PRPP + quinolinato 
 nicotinato mononucleotídeo + PPi
E฀PIRIMIDINA฀NUCLE-
OTÍDEOS
Deve-se฀lembrar฀que฀os฀níveis฀celulares฀de฀pirofos-
fatase฀são฀muito฀altos฀em฀células,฀levando฀à฀hidrólise฀ Síntese฀ de฀ novo฀ de฀ purina฀ e฀ pirimidina฀ nucleotídeos฀
de฀pirofosfato฀a฀fosfato,฀e฀tornando฀as฀reações฀irrever- é฀crítica฀para฀replicação,฀manutenção฀e฀função฀da฀cé-
síveis. lula฀normal.฀Regulação฀destas฀vias฀é฀importante,฀uma฀
vez฀ que฀ foram฀ identificadas฀ doenças฀ que฀ surgem฀ de฀
defeitos฀ nas฀ enzimas฀ regulatórias.฀ Compostos฀ sintéti-
cos฀ e฀ produtos฀ naturais฀ de฀ plantas,฀ bactérias฀ ou฀ fun-
gos,฀ que฀ são฀ análogos฀ estruturais฀ das฀ nucleobases฀ ou฀
dos฀ nucleosídeos฀ usados฀ em฀ reações฀ metabólicas,฀ têm฀

BioQ.20 793 22.01.07 18:22:33

 CAPÍTULO฀21฀฀METABOLISMO฀DO฀HEME฀E฀DO฀FERRO฀฀฀|฀฀฀803
PARTE฀4฀VIAS฀METABÓLICAS฀E฀SEU฀CONTROLE
21
M V
� �
N
M M
N Fe N
P V
N
� �
P M
Heme
METABOLISMO฀DO฀HEME฀
E฀DO฀FERRO
William฀M.฀Awad,฀Jr.
21.1฀ METABOLISMO฀DO฀FERRO:฀VISÃO฀GERAL,฀
804
21.2฀ PROTEÍNAS฀QUE฀CONTÊM฀FERRO,฀804
฀ Transferrina฀transporta฀ferro฀no฀soro,฀804
฀ Lactoferrina฀liga฀ferro฀no฀leite,฀805
฀ Ferritina฀é฀uma฀proteína฀envolvida฀no฀armazena-฀
฀ mento฀de฀ferro,฀805
฀ Proteínas฀que฀contêm฀ferro฀não-hemínico฀estão฀฀
฀ envolvidas฀em฀processos฀enzimáticos,฀806
21.3฀ ABSORÇÃO฀INTESTINAL฀DE฀FERRO,฀807
21.4฀ REGULAÇÃO฀MOLECULAR฀DA฀UTILIZAÇÃO฀
DE฀FERRO,฀808
21.5฀ DISTRIBUIÇÃO฀E฀CINÉTICA฀DO฀FERRO,฀811
21.6฀ BIOSSÍNTESE฀DO฀HEME,฀813
฀ Enzimas฀da฀biossíntese฀do฀heme฀ocorrem฀em฀฀
฀ mitocôndrias฀e฀citosol,฀818
฀ ฀ Ácido฀δ-aminolevulínico฀sintase,฀818
฀ ฀ Ácido฀aminolevulínico฀desidratase,฀818
฀ ฀ Porfobilinogênio฀deaminase฀e฀uroporfirinogê-฀
฀ ฀ nio฀III฀sintase,฀818
฀ ฀ Uroporfirinogênio฀descarboxilase,฀819
฀ ฀ Coproporfirinogênio฀oxidase,฀820
฀ ฀ Protoporfirinogênio฀oxidase,฀820
฀ ฀ Ferroquelatase,฀820
฀ ALA฀sintase฀catalisa฀a฀etapa฀limitante฀da฀veloci-฀
฀ dade฀da฀biossíntese฀do฀heme,฀821
BioQ.21 803
21.7฀ CATABOLISMO฀DO฀HEME,฀821
฀ Bilirrubina฀é฀conjugada฀para฀formar฀bilirrubina฀฀
฀ diglucuronídeo฀no฀fígado,฀821
฀ Hemólise฀intravascular฀requer฀remoção฀de฀ferro,฀฀
฀ 823
BIBLIOGRAFIA,฀826
QUESTÕES฀E฀RESPOSTAS,฀827
CORRELAÇÕES฀CLÍNICAS
฀ 21.1฀ Sobrecarga฀de฀Ferro฀e฀Infecção,฀805
฀ 21.2฀ Patogenicidade฀Microbiana฀e฀Ferro,฀805
฀ 21.3฀ Síntese฀do฀Grupo฀Ferro-Enxofre฀e฀Doença฀฀
฀ Humana,฀807
฀ 21.4฀ Ataxia฀de฀Friedreich,฀807
฀ 21.5฀ Absorção฀Duodenal฀de฀Ferro,฀809
฀ 21.6฀ Elementos฀de฀Resposta฀ao฀Ferro฀Mutante,฀
฀ 811
฀ 21.7฀ Deficiência฀de฀Ceruloplasmina,฀812
฀ 21.8฀ Anemia฀por฀Deficiência฀de฀Ferro,฀812
฀ 21.9฀ Hemocromatose฀Tipo฀I:฀Genética฀Mole-฀
฀ cular฀e฀a฀Questão฀das฀Dietas฀Enriquecidas฀฀
฀ em฀Ferro,฀814
฀ 21.10฀ Hemocromatose฀Tipo฀III,฀814
฀ 21.11฀ Porfiria฀Intermitente฀Aguda,฀817
฀ 21.12฀ Papel฀Citoprotetor฀de฀Heme฀Oxigenase,฀
฀ 822
฀ 21.13฀ Hemólise฀Isoimune฀Neonatal,฀824
฀ 21.14฀ Deficiência฀de฀Bilirrubina฀UDP-Glucurono-฀
฀ siltransferase,฀824
฀ 21.15฀ Elevação฀de฀Bilirrubina฀Conjugada฀no฀฀
฀ Soro,฀825
22.01.07 18:25:39
 CAPÍTULO฀21฀฀METABOLISMO฀DO฀HEME฀E฀DO฀FERRO฀฀฀|฀฀฀811

CORRELAÇÃO฀CLÍNICA฀21.6
Elemento฀de฀Resposta฀ao฀Ferro฀Mutante
Mutações฀ simples฀ foram฀ descritas฀ no฀ segmento฀ de฀
alça฀do฀elemento฀de฀resposta฀ao฀ferro฀do฀mRNA฀da฀
cadeia฀ leve฀ da฀ ferritina,฀ com฀ uma฀ quantidade฀ au-
mentada฀de฀apoferritina฀sendo฀sintetizada,฀mas฀sem฀
um฀aumento฀no฀ferro฀total฀do฀corpo.฀Esta฀mutação฀
leva฀a฀uma฀afinidade฀28฀vezes฀menor฀para฀IRP-1,฀em฀
um฀ caso.฀ O฀ conteúdo฀ de฀ L-ferritina฀ do฀ cristalino฀
pode฀aumentar฀nove฀vezes฀em฀comparação฀ao฀con-
teúdo฀ no฀ cristalino฀ de฀ indivíduos฀ controles.฀ Como฀
conseqüência,฀cristais฀de฀cadeias฀leves฀puras฀de฀fer-
ritina฀aparecem฀no฀cristalino,฀levando฀a฀catarata.฀A฀
síntese฀ muito฀ aumentada฀ de฀ ferritina฀ no฀ cristalino฀
pode฀levar฀a฀uma฀quantidade฀aumentada฀de฀reações฀
catalisadas฀por฀ferro,฀com฀dano฀lenticular฀oxidativo฀
muito฀bem฀descrito.฀Uma฀mutação฀numa฀família฀ja-
ponesa฀ocorre฀no฀IRE฀do฀mRNA฀da฀cadeia฀H฀da฀fer-
ritina,฀ com฀ um฀ marcado฀ aumento฀ na฀ afinidade฀ por฀
IRP.฀ O฀ seqüestro฀ de฀ IRPs฀ leva฀ à฀ síntese฀ diminuída฀
de฀cadeia฀H฀e฀síntese฀aumentada฀de฀cadeia฀L.฀Esta฀
condição฀ está฀ associada฀ com฀ aumento฀ significativo฀
no฀conteúdo฀de฀ferro฀do฀corpo,฀mas฀aparentemente฀
sem฀evidência฀de฀catarata.

Fonte:฀Girelli,฀D.,฀Corrocher,฀R.,฀Bisceglia,฀L.,฀et฀al.฀Molecular฀basis฀for฀the฀recently฀described฀hereditary฀hyperferriti-
nemia-cataract฀syndrome:฀a฀mutation฀in฀the฀iron-responsive฀elements฀of฀ferritin฀L-subunit฀gene฀(the฀“Verona฀mutation”).฀
Blood฀86:฀4050,฀1995.฀Beaumont,฀C.,฀Leneuve,฀P.,฀Devaux,฀I.,฀Scoazec,฀J.Y.,฀et฀al.฀Mutation฀in฀the฀iron฀responsive฀element฀of฀
the฀L฀ferritin฀mRNA฀in฀a฀family฀with฀dominant฀hyperferritinaemia฀and฀cataract.฀Nature฀Genet.฀11:฀444,฀1995.฀Mumford,฀
A.฀D.,฀Cree,฀I.฀A.,฀Arnold,฀J.฀D.,฀et฀al.฀The฀lens฀in฀hereditary฀hyperferritinemia฀cataract฀syndrome฀contains฀crystalline฀
deposits฀of฀L-ferritin.฀Br.฀J.฀Ophthalmol.฀84:697,฀2000.฀Kato,฀J.,฀Fujikawa,฀K.,฀Kanda,฀M.,฀et฀al.฀A฀mutation฀in฀the฀iron-
responsive฀element฀of฀H-ferritin฀mRNA,฀causing฀autosomal฀dominant฀iron฀overload.฀Am.฀J.฀Hum.฀Genet.฀69:191,฀2001.

TABELA฀21.2฀Síndromes฀de฀Sobrecarga฀de฀Ferro
Nome Gene Cromossomo Herança Ocorrência Proteína

Síndrome฀GRACILE BCS1L 2q33 Recessiva Muito฀rara Chaperone฀mitocondrial

Hemocromatose฀juvenil HFE2 1q21 Recessiva Incomum Hemojuvelina

Hemocromatose฀juvenil HFE2B 19q13 Recessiva Incomum Hepcidina

Hemocromatose HFE1 6p21 Recessiva Comum Proteína฀HFE

Hemocromatose HFE3 7q22 Recessiva Incomum Receptor฀2฀de฀transferrina

Hemocromatose HFE4 2q32 Dominante Rara Ferroportina

Sobrecarga฀de฀ferro FTH1 11q13 Dominante Muito฀rara Ferritina฀H

Aceruloplasminemia CP 3q23 Recessiva Rara Ceruloplasmina

Fonte:฀Fellman,฀V.฀The฀GRACILE฀syndrome,฀a฀neonatal฀lethal฀metabolic฀disorder฀with฀iron฀overload.฀Blood฀Cells฀Mol.฀Dis.฀29:444,฀2002.฀
Ver฀Corr.฀Clín.฀21.6,฀21.7,฀21.9฀e฀21.10฀para฀maiores฀detalhes.

|
21.5฀ ฀ DISTRIBUIÇÃO฀E฀ TABELA฀21.3฀Distribuição฀Aproximada฀de฀Ferro:฀
Homem฀de฀70฀kg
CINÉTICA฀DO฀FERRO ฀฀g %

Hemoglobina 2,5 ฀฀68

Um฀homem฀normal฀de฀70฀kg฀contém฀3-4฀g฀de฀ferro,฀dos฀
Mioglobina 0,15 ฀฀฀฀4
quais฀ apenas฀ 0,1%฀ (3,5฀ mg)฀ no฀ plasma.฀ Aproximada-
mente฀ 2,5฀ g฀ estão฀ na฀ hemoglobina.฀ Tabela฀ 21.3฀ lista฀ a฀ Transferrina 0,003 ฀฀฀฀0,1
distribuição฀de฀ferro฀no฀ser฀humano.฀
Ferritina,฀tecido 1,0 ฀฀27
Normalmente,฀cerca฀de฀33%฀dos฀sítios฀de฀transferri-
na฀contêm฀ferro.฀Ferro฀absorvido฀do฀intestino฀é฀entre- Ferritina,฀soro 0,0001 ฀฀฀฀0,004
gue฀primariamente฀à฀medula฀óssea,฀para฀incorporação฀ Enzimas 0,02 ฀฀฀฀0,6
em฀hemoglobina฀dos฀eritrócitos.฀
Total 3,7 100

BioQ.21 811 22.01.07 18:25:46

 CAPÍTULO฀21฀฀METABOLISMO฀DO฀HEME฀E฀DO฀FERRO฀฀฀|฀฀฀817
CORRELAÇÃO฀CLÍNICA฀21.11
Porfiria฀Intermitente฀Aguda฀
Uma฀mulher฀de฀40฀anos฀de฀idade฀procurou฀o฀pron-
to-socorro฀em฀um฀estado฀agitado,฀chorando฀e฀recla-
mando฀de฀intensa฀dor฀abdominal.฀Estava฀constipada฀
há฀vários฀dias฀e฀notou฀marcada฀fraqueza฀nos฀braços฀
e฀ nas฀ pernas฀ e฀ que฀ “as฀ coisas฀ não฀ parecem฀ estar฀
completamente฀corretas”.฀Exame฀físico฀revelou฀uma฀
velocidade฀de฀batimento฀cardíaco฀ligeiramente฀ace-
lerada฀(100/min)฀e฀hipertensão฀moderada฀(pressão฀
sangüínea฀de฀160/110฀mmHg).฀Episódios฀anteriores฀
de฀ dor฀ abdominal฀ severa฀ já฀ haviam฀ ocorrido;฀ ope-
rações฀ realizadas฀ em฀ duas฀ ocasiões฀ não฀ revelaram฀
nenhuma฀anormalidade.฀Os฀testes฀laboratoriais฀co-
muns฀são฀normais.฀As฀queixas฀neurológicas฀não฀são฀
localizadas฀ num฀ foco฀ anatômico.฀ Decide-se฀ que฀ os฀
sintomas฀presentes฀são฀amplamente฀de฀origem฀psi-
quiátrica฀e฀têm฀uma฀base฀funcional,฀e฀não฀orgânica.฀
A฀paciente฀é฀sedada฀com฀60฀mg฀de฀fenobarbital;฀um฀
psiquiatra฀consultado฀concorda,฀por฀telefone,฀em฀ver฀
a฀paciente฀em฀aproximadamente฀4฀h.฀O฀corpo฀clíni-
co฀percebe฀uma฀piora฀notável;฀fraqueza฀generalizada฀
surge฀rapidamente,฀progredindo฀para฀um฀comprome-
timento฀da฀função฀respiratória.฀Esta฀evolução฀ruim฀
leva฀à฀incorporação฀imediata฀de฀um฀regime฀de฀ven-
tilação฀assistida,฀com฀transferência฀para฀unidade฀de฀
terapia฀ intensiva฀ para฀ monitoração฀ fisiológica.฀ Sua฀
condição฀piora฀e฀ela฀morre฀48฀h฀depois.฀Uma฀amos-
tra฀de฀urina฀da฀paciente฀é฀relatada฀mais฀tarde฀como฀
apresentando฀ um฀ nível฀ muito฀ elevado฀ de฀ porfobili-
nogênio.฀ Esta฀ paciente฀ tinha฀ porfiria฀ intermitente฀
aguda,฀uma฀doença฀pouco฀entendida฀da฀biossíntese฀
de฀heme.฀Há฀um฀padrão฀de฀herança฀dominante฀as-
sociado฀a฀uma฀superprodução฀de฀ALA฀e฀porfobilino-
gênio,฀ os฀ precursores฀ de฀ porfirina.฀ Três฀ anomalias฀
enzimáticas฀foram฀observadas฀em฀casos฀que฀foram฀
estudados฀ cuidadosamente.฀ Estas฀ incluem:฀ (1)฀ um฀
grande฀aumento฀de฀ALA฀sintase,฀(2)฀uma฀redução฀à฀
metade฀da฀atividade฀de฀porfobilinogênio฀deaminase,฀
e฀(3)฀uma฀redução฀à฀metade฀da฀atividade฀da฀esterói-
de฀5α-redutase.฀A฀mudança฀no฀conteúdo฀da฀segunda฀
enzima฀é฀consoante฀com฀uma฀expressão฀dominante.฀
A฀mudança฀no฀conteúdo฀da฀terceira฀enzima฀é฀adqui-
Fonte:฀Meyer,฀U.A.,฀Strand,฀L.J.,฀Doss,฀M.,฀et฀al.฀Intermittent฀acute฀porphyria:฀demonstration฀of฀a฀genetic฀defect฀
in฀porphobilinogen฀metabolism.฀N.฀Engl.฀J.฀Med.฀286:฀1277,฀1972.฀Stein,฀J.A.฀e฀Tscudy,฀D.D.฀Acute฀intermittent฀por-
phyria:฀a฀clinical฀and฀biochemical฀study฀of฀46฀patients.฀Medicine฀(Baltimore)฀49:฀1,฀1970.
BioQ.21 817
rida,฀e฀aparentemente฀não฀existe฀expressão฀heredi-
tária฀ da฀ doença.฀ Acredita-se฀ que฀ uma฀ diminuição฀
na฀porfobilinogênio฀deaminase฀leve฀a฀uma฀pequena฀
diminuição฀no฀conteúdo฀de฀heme฀do฀fígado.฀A฀con-
centração฀ menor฀ de฀ heme฀ leva฀ a฀ uma฀ insuficiência฀
na฀ repressão฀ da฀ síntese฀ e฀ na฀ inibição฀ da฀ atividade฀
da฀ALA฀sintase.฀Quase฀nunca฀manifestada฀antes฀da฀
puberdade,฀ acredita-se฀ que฀ a฀ doença฀ apareça฀ ape-
nas฀com฀a฀indução฀da฀5β-redutase,฀na฀adolescência.฀
Sem฀ uma฀ quantidade฀ suficiente฀ de฀ 5α-redutase,฀ o฀
aumento฀observado฀nos฀5β-esteróides฀é฀devido฀a฀um฀
desvio฀de฀esteróides฀para฀a฀via฀da฀5β-redutase.฀A฀im-
portância฀de฀anomalias฀nesta฀última฀via฀metabólica฀
na฀patogênese฀da฀porfiria฀é฀controversa.฀A฀doença฀é฀
um฀grande฀enigma:฀o฀desarranjo฀do฀metabolismo฀da฀
porfirina฀é฀confinado฀ao฀fígado,฀que฀anatomicamen-
te฀parece฀normal,฀enquanto฀achados฀patológicos฀es-
tão฀restritos฀ao฀sistema฀nervoso.฀No฀presente฀caso,฀
envolvimento฀de฀(1)฀cérebro฀leva฀ao฀estado฀agitado฀e฀
confuso฀e฀ao฀colapso฀respiratório,฀(2)฀sistema฀autô-
nomo฀leva฀à฀hipertensão,฀aumento฀na฀velocidade฀de฀
batimentos฀cardíacos,฀constipação฀e฀dor฀abdominal,฀
e฀(3)฀sistema฀nervoso฀periférico฀e฀medula฀espinhal฀
levam฀à฀fraqueza฀e฀distúrbios฀sensoriais.
Experimentalmente,฀nenhum฀intermediário฀me-
tabólico฀ conhecido฀ da฀ biossíntese฀ do฀ heme฀ pode฀
causar฀ a฀ patologia฀ observada฀ na฀ porfiria฀ intermi-
tente฀aguda.฀Deveria฀ter฀havido฀uma฀suspeita฀maior฀
da฀possibilidade฀de฀porfiria,฀logo฀após฀a฀chegada฀da฀
paciente.฀O฀tratamento฀incluiria฀infusão฀de฀glicose,฀
exclusão฀de฀qualquer฀droga฀que฀pudesse฀causar฀au-
mento฀ de฀ ALA฀ sintase฀ (p.ex.,฀ barbituratos)฀ e,฀ se฀ a฀
doença฀ não฀ respondesse฀ satisfatoriamente฀ apesar฀
destas฀ medidas,฀ administração฀ de฀ hematina฀ intra-
venosa฀para฀inibir฀a฀síntese฀e฀a฀atividade฀de฀ALA฀sin-
tase.฀Porfiria฀hepática฀aguda฀é฀de฀interesse฀político฀
histórico.฀ A฀ doença฀ foi฀ diagnosticada฀ em฀ dois฀ des-
cendentes฀do฀rei฀George฀III,฀sugerindo฀que฀o฀último฀
tinha฀ uma฀ personalidade฀ alterada฀ antes฀ e฀ durante฀
a฀Revolução฀Americana,฀que฀poderia฀talvez฀ser฀atri-
buída฀à฀porfiria.
22.01.07 18:25:51
 CAPÍTULO฀21฀฀METABOLISMO฀DO฀HEME฀E฀DO฀FERRO฀฀฀|฀฀฀821

|
21.7฀ ฀ CATABOLISMO฀DE฀
sensível฀ aos฀ efeitos฀ de฀ metais฀ pesados,฀ especialmente฀
chumbo,฀e,฀é฀claro,฀à฀deprivação฀de฀ferro.฀Nestes฀últi-
mos฀casos,฀zinco฀é฀incorporado฀em฀lugar฀do฀ferro,฀for- HEME
mando฀um฀complexo฀zinco-protoporfirina฀IX.฀Em฀con-
traste฀com฀heme,฀o฀complexo฀zinco-protoporfirina฀IX฀é฀
Catabolismo฀ de฀ proteínas฀ contendo฀ heme฀ apresenta฀
muito฀fluorescente฀e฀facilmente฀detectável฀em฀pequenas฀
duas฀necessidades฀para฀o฀mamífero฀hospedeiro:฀(a)฀um฀
quantidades.฀ Ferroquelatase฀ procariótica฀ não฀ contém฀
meio฀para฀processar฀os฀produtos฀hidrofóbicos฀de฀cliva-
um฀grupo฀prostético;฀enquanto฀a฀enzima฀de฀mamíferos฀
gem฀ do฀ anel฀ porfirínico฀ e฀ (b)฀ retenção฀ e฀ mobilização฀
contém฀um฀grupo฀Fe2S2.
do฀ ferro฀ contido,฀ de฀ forma฀ que฀ possa฀ ser฀ reutilizado.฀
Eritrócitos฀têm฀um฀tempo฀de฀vida฀de฀aproximadamente฀
ALA฀Sintase฀Catalisa฀a฀Etapa฀ 120฀dias.฀Células฀senescentes฀são฀reconhecidas฀por฀al-
Limitante฀da฀Velocidade฀da฀ terações฀em฀suas฀membranas,฀e฀removidas฀pelo฀sistema฀
retículoendotelial฀em฀locais฀extravasculares.฀As฀cadeias฀
Biossíntese฀do฀Heme de฀globina฀desnaturam,฀liberando฀heme฀no฀citoplasma.฀
A฀globina฀é฀degradada฀até฀seus฀aminoácidos฀constituin-
ALA฀sintase฀controla฀a฀etapa฀limitante฀da฀velocidade฀
tes,฀que฀são฀reutilizados฀para฀suprir฀necessidades฀me-
de฀síntese฀de฀heme฀em฀todos฀os฀tecidos.฀Succinil-CoA฀e฀
tabólicas฀gerais.
glicina฀são฀substratos฀para฀uma฀variedade฀de฀reações.฀
Figura฀21.12฀mostra฀os฀eventos฀do฀catabolismo฀de฀
A฀modulação฀da฀atividade฀de฀ALA฀sintase฀determina฀a฀
heme.฀Heme฀é฀degradado฀primariamente฀por฀um฀siste-
quantidade฀de฀substratos฀que฀será฀desviada฀para฀bios-
ma฀de฀enzimas฀do฀retículo฀endoplasmático฀em฀células฀
síntese฀de฀heme.฀Heme฀e฀hematina฀agem฀como฀repres-
retículoendoteliais,฀que฀requerem฀oxigênio฀molecular฀
sores฀da฀síntese฀de฀ALA฀sintase฀e฀como฀inibidores฀de฀
e฀NADPH.฀Heme฀oxigenase฀tem฀dois฀isômeros;฀tipo฀I฀
sua฀atividade.฀Como฀heme฀não฀se฀assemelha฀nem฀com฀
é฀induzido฀por฀substrato฀e฀tipo฀II฀é฀constitutivo.฀A฀en-
os฀substratos฀nem฀com฀o฀produto฀da฀ação฀da฀enzima,฀é฀
zima฀catalisa฀clivagem฀da฀ponte฀α-meteno,฀que฀une฀os฀
provável฀que฀atue฀sobre฀um฀sítio฀alostérico.฀Quase฀100฀
dois฀ resíduos฀ pirrólicos฀ contendo฀ substituintes฀ vinil.฀
drogas฀e฀metabólitos฀diferentes฀podem฀causar฀indução฀
O฀carbono฀α-meteno฀é฀convertido,฀quantitativamente,฀
de฀ALA฀sintase;฀por฀exemplo,฀um฀aumento฀de฀40฀vezes฀
em฀monóxido฀de฀carbono.฀Esta฀é฀a฀única฀fonte฀endóge-
é฀ observado฀ em฀ rato฀ após฀ tratamento฀ com฀ 3,5-dicar-
na฀de฀monóxido฀de฀carbono฀no฀homem.฀Uma฀fração฀
betoxi-1,4-di-hidrocolidina.฀ O฀ efeito฀ dos฀ agentes฀ far-
do฀ monóxido฀ de฀ carbono฀ é฀ liberada฀ pelo฀ trato฀ respi-
macológicos฀levou฀a฀uma฀característica฀clínica฀impor-
ratório.฀Assim,฀a฀medida฀de฀monóxido฀de฀carbono฀na฀
tante:฀ alguns฀ pacientes฀ com฀ certos฀ tipos฀ de฀ porfiria฀
respiração฀ exalada฀ fornece฀ um฀ índice฀ da฀ quantidade฀
tiveram฀ exacerbação฀ de฀ sua฀ condição฀ após฀ adminis-
de฀heme฀que฀é฀degradada฀em฀um฀indivíduo.฀O฀oxigênio฀
tração฀inadequada฀de฀certas฀drogas฀(p.฀ex.,฀barbitu-
presente฀no฀monóxido฀de฀carbono฀e฀nos฀anéis฀lactâmi-
ratos).฀ALA฀desidratase฀é฀também฀inibida฀por฀heme;฀
cos฀ recém-derivados฀ é฀ gerado฀ totalmente฀ a฀ partir฀ de฀
mas฀ isto฀ tem฀ poucas฀ conseqüências฀ fisiológicas,฀ uma฀
oxigênio฀molecular.฀A฀estequiometria฀da฀reação฀requer฀
vez฀que฀a฀atividade฀de฀ALA฀desidratase฀é฀cerca฀de฀80฀
3฀moles฀de฀oxigênio฀para฀cada฀clivagem฀de฀anel.฀Heme฀
vezes฀maior฀do฀que฀a฀de฀ALA฀sintase฀e,฀portanto,฀efei-
oxigenase฀só฀usará฀heme฀como฀substrato,฀com฀o฀ferro฀
tos฀inibitórios฀do฀heme฀refletem-se฀primeiro฀na฀ativi-
possivelmente฀ participando฀ no฀ mecanismo฀ de฀ cliva-
dade฀de฀ALA฀sintase.
gem.฀Assim,฀protoporfirina฀IX฀livre฀não฀é฀substrato.฀O฀
Glicose฀ou฀um฀de฀seus฀metabólitos฀proximais฀inibe฀
tetrapirrol฀linear฀biliverdina฀IX฀é฀formado฀por฀heme฀
biossíntese฀de฀heme฀por฀um฀mecanismo฀desconhecido.฀
oxigenase.฀Biliverdina฀IX฀é฀reduzida฀por฀biliverdina฀
Isto฀ é฀ de฀ relevância฀ clínica,฀ uma฀ vez฀ que฀ alguns฀ pa-
redutase฀a฀bilirrubina฀IX.฀Descobriu-se฀que฀os฀pro-
cientes฀ manifestam฀ seu฀ estado฀ porfírico฀ pela฀ primei-
dutos฀ de฀ ação฀ da฀ heme฀ oxigenase฀ são฀ citoprotetores฀
ra฀ vez฀ quando฀ colocados฀ em฀ dieta฀ muito฀ hipocalórica฀
(ver฀Corr.฀Clín.฀21.12).
(e,฀portanto,฀de฀pouca฀glicose).฀Outros฀reguladores฀do฀
metabolismo฀ de฀ porfirinas฀ incluem฀ certos฀ esteróides.฀
Hormônios฀esteróides฀(p.฀ex.,฀pílulas฀contraceptivas฀ Bilirrubina฀É฀Conjugada฀para฀Formar฀
orais)฀com฀uma฀dupla฀ligação฀no฀anel฀A฀entre฀os฀áto- Bilirrubina฀Diglucuronídeo฀no฀Fígado
mos฀C4฀e฀C5฀podem฀ser฀reduzidos฀por฀duas฀redutases฀
diferentes.฀O฀produto฀da฀redução฀de฀5α฀tem฀pouco฀efei- Bilirrubina฀ é฀ derivada฀ de฀ glóbulos฀ vermelhos฀ senes-
to฀ sobre฀ a฀ biossíntese฀ de฀ heme;฀ entretanto,฀ o฀ produto฀ centes,฀mas฀também฀do฀turnover฀de฀outras฀proteínas฀
da฀5β-redução฀serve฀com฀um฀estímulo฀para฀síntese฀de฀ que฀ contêm฀ heme,฀ como฀ os฀ citocromos.฀ Estudos,฀ com฀
ALA฀sintase. glicina฀marcada฀como฀um฀precursor,฀revelaram฀que฀uma฀
bilirrubina฀marcada฀precocemente,฀com฀um฀pico฀em฀1-3฀
h,฀aparece฀muito฀rapidamente฀após฀uma฀administração฀
em฀pulso฀do฀precursor฀marcado.฀Uma฀quantidade฀maior฀
de฀bilirrubina฀aparece฀muito฀mais฀tarde,฀em฀aproxima-
damente฀ 120฀ dias,฀ refletindo฀ o฀ turnover฀ do฀ heme฀ em฀

BioQ.21 821 22.01.07 18:25:56

 CAPÍTULO฀22฀฀INTER-RELAÇÕES฀METABÓLICAS฀฀฀|฀฀฀829

PARTE฀4฀VIAS฀METABÓLICAS฀E฀SEU฀CONTROLE

22
Fígado
Glicose Glicogênio
Amino-
ácidos
Uréia
Piruvato
Síntese
protéica
Gordura
Lactato Cérebro
Síntese
protéica CO2 + H2O
(todos os
tecidos)

INTER-RELAÇÕES
METABÓLICAS
Robert฀A.฀Harris฀e฀David฀W.฀Crabb

22.1฀ VISÃO฀GERAL,฀830 ฀ Obesidade,฀853

฀ Fazendo฀dieta,฀853
22.2฀CICLO฀JEJUM-ALIMENTAÇÃO,฀830 ฀ Diabetes฀mellitus฀tipo฀2,฀855
฀ No฀estado฀bem฀alimentado฀a฀dieta฀supre฀as฀ne-฀ ฀ Diabetes฀mellitus฀tipo฀1,฀856
฀ cessidades฀energéticas,฀830 ฀ Câncer฀,฀858
฀ No฀estado฀de฀jejum฀inicial,฀glicogenólise฀hepática฀฀ ฀ Exercícios฀aeróbico฀e฀anaeróbico,฀858
฀ é฀uma฀importante฀fonte฀de฀glicose฀sangüínea,฀฀ ฀ Gravidez,฀860
฀ 834 ฀ Lactação,฀860
฀ O฀estado฀de฀jejum฀requer฀gluconeogênese฀a฀partir฀฀ ฀ Estresse฀e฀trauma,฀861
฀ de฀aminoácidos฀e฀glicerol,฀835 ฀ Doença฀hepática,฀862
฀ No฀estado฀de฀realimentação฀inicial,฀glicogênio฀é฀฀ ฀ Doença฀renal,฀863
฀ formado฀por฀uma฀via฀indireta,฀837 ฀ Álcool,฀863
฀ Importantes฀interações฀metabólicas฀interórgãos,฀฀ ฀ Equilíbrio฀ácido-base,฀864
฀ 838 ฀ Cólon,฀866
฀ Necessidades฀energéticas,฀reservas฀e฀homeostase฀฀
฀ calórica,฀839 BIBLIOGRAFIA,฀866
฀ Homeostase฀da฀glicose฀tem฀cinco฀fases,฀842
QUESTÕES฀E฀RESPOSTAS,฀868
22.3฀MECANISMOS฀ENVOLVIDOS฀NA฀MUDANÇA฀
DO฀METABOLISMO฀HEPÁTICO฀ENTRE฀OS฀ES- CORRELAÇÕES฀CLÍNICAS
TADOS฀BEM-ALIMENTADO฀E฀DE฀JEJUM,฀843 ฀ 22.1฀ Obesidade,฀831
฀ Disponibilidade฀de฀substratos฀controla฀muitas฀฀ ฀ 22.2฀ Subnutrição฀Protéica,฀832
฀ vias฀metabólicas,฀843 ฀ 22.3฀ Jejum,฀833
฀ Efetores฀alostéricos฀regulam฀enzimas-chaves,฀843 ฀ 22.4฀ Síndrome฀de฀Reye,฀837
฀ Modificação฀covalente฀regula฀enzimas-chaves,฀฀ ฀ 22.5฀ Coma฀Hiperglicêmico,฀Hiperosmolar,฀841
฀ 845 ฀ 22.6฀ Hiperglicemia฀e฀Glicação฀de฀Proteínas,฀841
฀ Mudanças฀nas฀quantidades฀de฀enzimas-chaves฀฀ ฀ 22.7฀ Diabetes฀Mellitus฀Tipo฀2,฀855
฀ fornecem฀adaptação฀de฀longo฀prazo,฀849 ฀ 22.8฀ Diabetes฀Mellitus฀Tipo฀1,฀857
฀ 22.9฀ Via฀do฀Poliol฀e฀Complicações฀do฀Diabetes,฀฀
22.4฀INTER-RELAÇÕES฀ METABÓLICAS฀ DE฀ TECIDOS฀ ฀ 857
EM฀ VÁRIOS฀ ESTADOS฀ NUTRICIONAIS฀ E฀ HOR- ฀ 22.10฀ Caquexia฀do฀Câncer,฀858
MONAIS฀ 852

BioQ.22 829 22.01.07 18:27:18


corpos฀ cetônicos฀ se฀ acumularam฀ até฀ concentrações฀
suficientemente฀ elevadas฀ para฀ que฀ entrem฀ no฀ cérebro฀
e฀supram฀parte฀de฀suas฀necessidades฀energéticas.฀Glu-
coneogênese฀renal฀também฀se฀torna฀significativa฀nesta฀
fase.฀Fase฀V฀ocorre฀após฀jejum฀muito฀prolongado฀de฀in-
divíduos฀ extremamente฀ obesos,฀ e฀ é฀ caracterizada฀ por฀
dependência฀ ainda฀ menor฀ da฀ gluconeogênese.฀ Nesta฀
fase,฀as฀necessidades฀energéticas฀de฀quase฀todos฀os฀te-
cidos฀ são฀ supridas,฀ em฀ grande฀ parte,฀ por฀ oxidação฀ de฀
ácidos฀graxos฀ou฀de฀corpos฀cetônicos.
Enquanto฀as฀concentrações฀de฀corpos฀cetônicos฀es-
tiverem฀elevadas฀e฀os฀níveis฀de฀glicose฀mantidos,฀prote-
ólise฀será฀um฀tanto฀restrita,฀talvez฀por฀pequenas฀quan-
tidades฀de฀insulina฀ainda฀produzidas฀pelo฀pâncreas,฀e฀
preservação฀ de฀ proteínas฀ musculares฀ e฀ enzimas฀ ocor-
rerá.฀Isto฀continua฀até฀que฀praticamente฀toda฀a฀gordura฀
tenha฀sido฀consumida,฀e฀os฀níveis฀de฀corpos฀cetônicos฀
caem.฀ Depois฀ que฀ toda฀ a฀ gordura฀ se฀ esgotou,฀ o฀ corpo฀
precisa฀ usar฀ proteína฀ muscular฀ para฀ manter฀ a฀ glicose฀
sangüínea.฀Antes฀que฀ela฀se฀acabe,฀você฀se฀acabou฀(ver฀
Corr.฀Clín.฀22.3).
|
22.3฀ ฀MECANISMOS฀ENVOL-
VIDOS฀NA฀MUDANÇA฀
DO฀METABOLISMO฀
HEPÁTICO฀ENTRE฀OS฀
ESTADOS฀BEM-ALI-
MENTADO฀E฀DE฀JEJUM
O฀ fígado฀ de฀ pessoas฀ bem-alimentadas฀ sintetiza฀ ativa-
mente฀glicogênio฀e฀triacilglicerol;฀tal฀fígado฀é฀glicogê-
nico,฀ glicolítico฀ e฀ lipogênico.฀ Em฀ contraste,฀ o฀ de฀ uma฀
pessoa฀em฀jejum฀é฀glicogenolítico,฀gluconeogênico,฀ce-
togênico฀e฀proteolítico.฀A฀estratégia฀empregada฀é฀arma-
zenar฀calorias฀quando฀alimento฀está฀disponível,฀e฀mobi-
lizá-las฀quando฀o฀resto฀do฀corpo฀estiver฀precisando.฀O฀
fígado฀muda฀entre฀estes฀extremos฀metabólicos฀por฀uma฀
variedade฀de฀mecanismos฀regulatórios:฀suprimento฀de฀
substratos,฀efetores฀alostéricos,฀modificação฀covalente฀
e฀indução-repressão฀de฀enzimas.
Disponibilidade฀de฀Substratos฀
Controla฀Muitas฀Vias฀Metabólicas
Este฀mecanismo฀de฀controle฀é฀freqüentemente฀ignora-
do.฀Entretanto,฀a฀concentração฀de฀ácidos฀graxos฀no฀san-
gue฀que฀entra฀no฀fígado฀é฀um฀importante฀determinante฀
da฀taxa฀de฀cetogênese.฀Síntese฀de฀glicose฀pelo฀fígado฀é฀
afetada฀pela฀velocidade฀com฀que฀substratos฀gluconeogê-
nicos฀fluem฀para฀o฀fígado.฀Entrega฀de฀aminoácidos฀para฀
o฀fígado฀no฀diabetes,฀em฀virtude฀de฀proteólise฀acelerada฀
e฀ descontrolada,฀ estimula฀ gluconeogênese฀ e฀ exacerba฀
hiperglicemia.฀ Por฀ outro฀ lado,฀ incapacidade฀ de฀ suprir฀
o฀ fígado฀ adequadamente฀ com฀ substratos฀ glucogênicos฀
BioQ.22 843
CAPÍTULO฀22฀฀INTER-RELAÇÕES฀METABÓLICAS฀฀฀|฀฀฀843
explica฀ alguns฀ tipos฀ de฀ hipoglicemia,฀ como฀ as฀ obser-
vadas฀durante฀gravidez฀ou฀jejum฀avançado.฀Síntese฀de฀
uréia฀também฀é฀regulada฀por฀suprimento฀de฀substratos.฀
Metabolismo฀de฀aminoácidos฀no฀intestino฀fornece฀uma฀
fração฀ substancial฀ da฀ amônia฀ usada฀ pelo฀ fígado฀ para฀
produção฀ de฀ uréia.฀ O฀ intestino฀ libera฀ citrulina,฀ como฀
discutido฀ acima,฀ o฀ precursor฀ metabólico฀ de฀ ornitina.฀
Um฀pool฀maior฀de฀ornitina฀permite฀síntese฀aumentada฀
de฀uréia฀após฀uma฀refeição฀rica฀em฀proteínas.฀Na฀defi-
ciência฀de฀proteínas,฀a฀velocidade฀de฀formação฀de฀uréia฀
diminui.
Podemos฀concluir฀que฀suprimento฀de฀substratos฀é฀
um฀ importante฀ determinante฀ da฀ velocidade฀ em฀ que฀
operam฀ virtualmente฀ todos฀ os฀ processos฀ metabóli-
cos฀do฀corpo.฀Entretanto,฀variações฀no฀suprimento฀de฀
substratos฀não฀são฀suficientes฀para฀explicar฀as฀mudan-
ças฀marcantes฀no฀metabolismo,฀que฀devem฀ocorrer฀no฀
ciclo฀ jejum-alimentação.฀ Ajuste฀ mais฀ fino฀ das฀ vias฀ é฀
necessário.
Efetores฀Alostéricos฀Regulam฀
Enzimas-Chaves
Figuras฀ 22.10฀ e฀ 22.11฀ resumem฀ os฀ efeitos฀ de฀ efetores฀
alostéricos฀no฀fígado,฀em฀estados฀bem-alimentado฀e฀je-
jum,฀respectivamente.฀Como฀mostra฀a฀Figura฀22.10,฀gli-
cose฀ ativa฀ glucoquinase฀ [indiretamente฀ por฀ promover฀
seu฀deslocamento฀do฀núcleo฀para฀o฀citoplasma฀(p.฀590)],฀
promovendo฀assim฀fosforilação฀da฀glicose.฀Glicose฀tam-
bém฀inativa฀glicogênio฀fosforilase฀e฀ativa฀glicogênio฀sin-
tase฀indiretamente,฀dessa฀forma฀impedindo฀degradação฀
e฀promovendo฀síntese฀de฀glicogênio.฀Frutose฀2,6-bisfos-
fato฀estimula฀6-fosfofruto-1-quinase฀e฀inibe฀frutose฀
1,6-bisfosfatase,฀desta฀forma฀estimulando฀glicólise฀e฀
inibindo฀gluconeogênese.฀
Frutose฀1,6-bisfosfato฀ativa฀piruvato฀quinase,฀desta฀
forma฀estimulando฀glicólise,฀e฀piruvato฀ativa฀o฀comple-
xo฀piruvato฀desidrogenase฀[indiretamente,฀por฀inibição฀
da฀piruvato฀desidrogenase฀quinase฀(ver฀p.฀628)].฀Citra-
to฀ ativa฀ acetil-CoA฀ carboxilase,฀ desta฀ forma฀ esti-
mulando฀síntese฀de฀ácidos฀graxos,฀e฀malonil-CoA฀inibe฀
carnitina฀ palmitoiltransferase฀ I,฀ desta฀ forma฀ inibindo฀
oxidação฀de฀ácidos฀graxos.฀Como฀mostra฀a฀Figura฀22.11,฀
acetil-CoA฀ estimula฀ gluconeogênese฀ em฀ estado฀ de฀ je-
jum฀por฀ativar฀piruvato฀carboxilase฀e฀inibir฀o฀complexo฀
piruvato฀ desidrogenase฀ [diretamente฀ por฀ estímulo฀ da฀
piruvato฀ desidrogenase฀ quinase฀ (ver฀ p.฀ 531)].฀ Ésteres฀
de฀acil-CoA฀de฀cadeia฀longa฀inibem฀acetil-CoA฀carboxi-
lase,฀o฀que฀diminui฀o฀nível฀de฀malonil-CoA฀e฀aumenta฀
atividade฀de฀carnitina฀palmitoiltransferase฀I฀e฀oxi-
dação฀de฀ácidos฀graxos.฀Frutose฀6-fosfato฀inibe฀gluco-
quinase฀[indiretamente฀por฀promover฀seu฀deslocamen-
to฀do฀citoplasma฀para฀o฀núcleo฀(ver฀p.฀590)].฀Citrato,฀que฀
está฀ aumentado฀ em฀ concentração฀ como฀ conseqüência฀
de฀maior฀oxidação฀de฀ácidos฀graxos,฀inibe฀6-fosfofruto-
1-quinase฀ e฀ 6-fosfofruto-2-quinase฀ (não฀ mostrado);฀ e฀
NADH,฀produzido฀pela฀oxidação฀de฀ácidos฀graxos,฀inibe฀
o฀ciclo฀dos฀ácidos฀tricarboxílicos.
22.01.07 18:27:34
 852฀฀฀|฀฀฀PARTE฀4฀฀VIAS฀METABÓLICAS฀E฀SEU฀CONTROLE
22.22).฀Insulina฀se฀opõe฀a฀esta฀ação฀do฀glucagon.฀Vários฀
mecanismos฀ estão฀ envolvidos,฀ mas฀ o฀ mais฀ importante฀
envolve฀inibição฀da฀atividade฀de฀fatores฀de฀transcrição฀
forkhead฀ que฀ são฀ necessários฀ para฀ a฀ transcrição฀ dos฀
genes฀contendo฀elementos฀de฀resposta฀à฀insulina฀(IRE)฀
e฀codificando฀enzimas฀gluconeogênicas฀(Figura฀22.21).
Deficiência฀de฀energia฀leva฀à฀inibição฀de฀síntese฀de฀
gordura,฀colesterol฀e฀glicose฀pelas฀células฀do฀fígado.฀Ati-
vação฀de฀AMPK฀por฀AMP฀reduz฀a฀transcrição฀de฀SREBP฀
e฀inibe฀sua฀atividade฀transcripcional฀e,฀portanto,฀inibe฀
síntese฀de฀gordura฀e฀de฀colesterol฀(Figura฀22.21).฀Ativa-
ção฀de฀AMPK฀também฀inibe฀a฀atividade฀transcripcional฀
de฀ fator฀ nuclear฀ hepático฀ 4α฀ (HNF-4α),฀ que฀ é฀ neces-
sário฀para฀transcrição฀de฀genes฀que฀codificam฀enzimas฀
gluconeogênicas.
Receptor฀ de฀ peroxissomos฀ proliferador-ativa-
do฀ α฀ (PPARα),฀ um฀ membro฀ da฀ família฀ de฀ receptores฀
nucleares,฀é฀um฀receptor฀de฀ácidos฀graxos,฀e฀é฀expresso฀
em฀altos฀níveis฀em฀tecidos฀que฀oxidam฀ácidos฀graxos฀(fí-
gado,฀rim฀e฀coração).฀Ácidos฀graxos฀poliinsaturados฀es-
timulam฀o฀receptor฀para฀ativar฀transcrição฀de฀genes฀en-
volvidos฀em฀utilização฀de฀ácidos฀graxos฀(Figura฀22.23),฀
que฀ contém฀ um฀ elemento฀ de฀ resposta฀ a฀ prolifera-
dor฀ de฀ peroxissomo฀ (PPRE)฀ em฀ seus฀ promotores,฀
incluindo฀aqueles฀para฀enzimas฀dos฀sistemas฀de฀pero-
xissomos,฀microssomos฀e฀mitocôndrias฀para฀oxidação฀
de฀ ácidos฀ graxos฀ (FOX),฀ genes฀ de฀ apolipoproteínas฀
necessárias฀ para฀ exportação฀ de฀ triacilgliceróis฀ hepá-
ticos฀como฀VLDL,฀e฀enzimas฀da฀cetogênese.฀No฀tecido฀
adiposo,฀a฀isoforma฀PPARγ฀é฀expressa.฀Quando฀ativada฀
(talvez฀ por฀ derivados฀ de฀ ácidos฀ graxos,฀ como฀ prosta-
glandinas),฀orquestra฀a฀diferenciação฀de฀pré-adipócitos฀
em฀adipócitos,฀aumentando฀a฀capacidade฀de฀armazenar฀
triacilglicerol.฀A฀atividade฀de฀ambas฀as฀formas฀de฀PPAR฀
é฀ aumentada฀ pelo฀ PPARγ-coativador฀ 1฀ (PGC-1),฀ que฀ é฀
induzido฀por฀cAMP.
Estas฀mudanças฀adaptativas฀também฀influenciam฀a฀
eficiência฀ dos฀ mecanismos฀ regulatórios฀ de฀ curto฀ pra-
Ácidos graxos
+ graxos฀(FOX)฀e฀cetogênese.
PPAR�
+ + +
PPRE PPRE PPRE
Mitocôndria Peroxissomo Genes de
genes FOX genes FOX cetogênese
Oxidação de ácidos graxos Cetogênese
BioQ.22 852
zo.฀ Por฀ exemplo,฀ no฀ jejum฀ prolongado฀ ou฀ no฀ diabetes฀
não-controlado,฀mudança฀na฀concentração฀de฀efetores฀
alostéricos฀de฀acetil-CoA฀carboxilase฀terá฀pouco฀efeito฀
quando฀a฀enzima฀estiver฀virtualmente฀ausente,฀devido฀à฀
regulação฀negativa฀da฀expressão฀do฀seu฀gene.฀Uma฀pes-
soa฀em฀jejum฀crônico฀não฀pode฀utilizar฀eficientemente฀
uma฀ carga฀ de฀ glicose฀ devido฀ à฀ ausência฀ de฀ enzimas-
chaves฀necessárias฀ao฀metabolismo฀de฀glicose.฀Isto฀é฀a฀
intolerância฀ a฀ glicose฀ do฀ jejum.฀ Uma฀ carga฀ de฀ glicose,฀
entretanto,฀colocará฀em฀ação฀as฀adaptações฀necessárias฀
e฀ o฀ restabelecimento฀ dos฀ mecanismos฀ regulatórios฀ de฀
curto฀prazo.
|
22.4฀ ฀INTER-RELAÇÕES฀
METABÓLICAS฀
DE฀TECIDOS฀EM฀
VÁRIOS฀ESTADOS฀
NUTRICIONAIS฀E฀
HORMONAIS
Muitas฀ mudanças฀ que฀ ocorrem฀ nos฀ diferentes฀ estados฀
nutricionais฀e฀hormonais฀são฀variações฀do฀ciclo฀jejum-
alimentação.฀ Alguns฀ exemplos฀ são฀ dados฀ na฀ Figura฀
22.24.฀Outros฀são฀óbvios฀–฀por฀exemplo,฀o฀rápido฀cres-
cimento฀de฀uma฀criança,฀quando฀aminoácidos฀são฀dire-
cionados฀do฀catabolismo฀para฀síntese฀de฀proteínas.฀As฀
mudanças฀ que฀ ocorrem฀ em฀ algumas฀ situações฀ fisiolo-
gicamente฀importantes,฀entretanto,฀são฀bastante฀sutis฀
e฀ pouco฀ conhecidas.฀ Por฀ exemplo,฀ no฀ envelhecimento฀
parece฀ haver฀ uma฀ sensibilidade฀ diminuída฀ dos฀ prin-
cipais฀ tecidos฀ do฀ corpo฀ a฀ hormônios,฀ com฀ capacidade฀
diminuída฀ dos฀ tecidos฀ de฀ responderem฀ normalmente฀
durante฀ o฀ ciclo฀ jejum-alimentação.฀ Se฀ isso฀ é฀ um฀ fator฀
que฀contribui฀ou฀uma฀conseqüência฀do฀processo฀de฀en-
velhecimento,฀não฀se฀sabe.
FIGURA฀22.23
Ativação฀de฀PPAR฀por฀ácidos฀graxos฀promove฀
transcrição฀de฀genes฀de฀oxidação฀de฀ácidos฀
22.01.07 18:27:50
 858฀฀฀|฀฀฀PARTE฀4฀฀VIAS฀METABÓLICAS฀E฀SEU฀CONTROLE
excesso,฀de฀combustíveis฀provenientes฀do฀intestino.฀De฀
fato,฀pacientes฀com฀diabetes฀tipo฀I฀ficam฀presos฀ao฀es-
tado฀ de฀ jejum,฀ sem฀ o฀ benefício฀ da฀ parada฀ geralmente฀
imposta,฀ durante฀ o฀ jejum,฀ pela฀ baixa,฀ mas฀ constante,฀
produção฀de฀insulina฀pelo฀pâncreas.฀Isto฀leva฀a฀severo฀
desgaste฀dos฀tecidos฀do฀corpo฀e,฀no฀final,฀à฀morte,฀a฀me-
nos฀que฀insulina฀seja฀administrada.
Câncer
Tumores฀ são฀ compostos฀ de฀ células฀ cancerosas,฀ que฀
precisam฀ se฀ alimentar฀ como฀ todas฀ as฀ células,฀ mas฀ ao฀
contrário฀da฀maioria฀dos฀tecidos฀normais,฀tumores฀fun-
cionam฀independentemente฀do฀ciclo฀jejum-alimentação฀
(ver฀Corr.฀Clín.฀22.10).฀Sua฀demanda฀por฀glicose฀como฀
fonte฀de฀energia฀e฀aminoácidos฀para฀síntese฀protéica฀é฀
incessante.฀Geralmente,฀preferem฀glicose฀e฀raramente฀
se฀adaptam,฀na฀fase฀de฀jejum฀do฀ciclo฀jejum-alimenta-
ção,฀ ao฀ uso฀ de฀ ácidos฀ graxos฀ e฀ corpos฀ cetônicos฀ para฀
minimizar฀seu฀uso฀de฀glicose,฀para฀benefício฀do฀resto฀do฀
corpo.฀A฀maioria฀dos฀tumores฀não฀responde฀a฀mudan-
ças฀ hormonais฀ que฀ alteram฀ os฀ processos฀ metabólicos฀
em฀tecidos฀normais.฀Estabelecem฀um฀ciclo฀de฀Cory฀com฀
o฀fígado,฀mas฀ainda฀assim฀podem฀oxidar฀completamen-
te฀ quantidades฀ substanciais฀ de฀ glicose,฀ contanto฀ que฀
oxigênio฀esteja฀disponível฀(Figura฀22.24e).฀Células฀do฀
centro฀de฀um฀tumor฀estão฀freqüentemente฀em฀hipóxia฀
porque฀cânceres฀muitas฀vezes฀ultrapassam฀o฀desenvol-
vimento฀de฀vasos฀sangüíneos,฀que฀trazem฀oxigênio.฀Fal-
ta฀de฀oxigênio฀em฀qualquer฀célula,฀normal฀ou฀cancero-
sa,฀leva฀a฀um฀aumento฀em฀fator฀1฀hipóxia฀induzidoα฀
(HIF-1α),฀ um฀ fator฀ de฀ transcrição฀ excepcionalmente฀
potente฀ para฀ ativação฀ de฀ genes฀ que฀ codificam฀ trans-
portadores฀de฀glicose฀e฀as฀enzimas฀da฀glicólise.฀HIF-1α฀
também฀ se฀ torna฀ constitutivamente฀ ativo฀ em฀ algumas฀
células฀cancerosas฀devido฀a฀mutações฀que฀ativam฀certos฀
oncogenes.฀Como฀uma฀conseqüência฀da฀ação฀de฀HIF-1α,฀
a฀maioria฀dos฀tumores฀de฀câncer฀tem฀excepcional฀capa-
cidade฀ de฀ gerar฀ ATP฀ por฀ glicólise.฀ Glicólise฀ não฀ é฀ um฀
processo฀eficiente,฀em฀comparação฀com฀oxidação฀com-
pleta฀ de฀ glicose,฀ mas฀ utilização฀ eficiente฀ dos฀ recursos฀
do฀corpo฀não฀é฀característica฀de฀um฀câncer.฀Capacidade฀
excepcional฀de฀gerar฀ATP฀por฀glicólise฀permite฀às฀célu-
las฀cancerosas฀sobreviverem฀e฀crescerem฀enquanto฀se฀
espalham฀e฀dão฀metástases฀em฀regiões฀de฀baixa฀tensão฀
de฀oxigênio.
Exercícios฀Aeróbico฀e฀Anaeróbico
Exercício฀aeróbico฀é฀exemplificado฀por฀corrida฀de฀longa฀
distância,฀exercício฀anaeróbico฀por฀corrida฀de฀velocida-
de฀ou฀levantamento฀de฀peso.฀Durante฀exercício฀anaeró-
bico,฀existe฀pouca฀cooperação฀interórgãos.฀
Os฀ vasos฀ sangüíneos฀ do฀ interior฀ dos฀ músculos฀ são฀
comprimidos฀durante฀o฀pico฀de฀contração,฀de฀modo฀que฀
suas฀células฀ficam฀isoladas฀do฀resto฀do฀corpo฀e฀depen-
dem฀ muito฀ de฀ seu฀ próprio฀ glicogênio฀ e฀ fosfocreatina.฀
Fosfocreatina฀ é฀ uma฀ fonte฀ de฀ fosfato฀ de฀ alta฀ energia฀
BioQ.22 858
CORRELAÇÃO฀CLÍNICA฀22.10
Caquexia฀do฀Câncer
Perda฀de฀peso฀sem฀explicação฀pode฀ser฀um฀sinal฀
de฀malignidade,฀e฀perda฀de฀peso฀é฀comum฀no฀cân-
cer฀avançado.฀Isto฀não฀é฀completamente฀explica-
do฀por฀perda฀de฀apetite฀e฀diminuição฀na฀ingestão฀
de฀alimentos.฀A฀perda฀de฀peso฀deve-se฀principal-
mente฀ a฀ músculo฀ esquelético฀ e฀ tecido฀ adiposo,฀
sendo฀ relativamente฀ poupadas฀ as฀ proteínas฀ vis-
cerais฀(i.é,฀fígado,฀rim฀e฀coração).฀Embora฀tumo-
res฀comumente฀apresentem฀velocidades฀altas฀de฀
glicólise,฀a฀necessidade฀energética฀do฀tumor฀pro-
vavelmente฀não฀explica฀a฀perda฀de฀peso,฀uma฀vez฀
que฀ pode฀ ocorrer฀ mesmo฀ com฀ tumores฀ peque-
nos.฀ Anomalias฀ endócrinas฀ foram฀ identificadas฀
em฀ pacientes฀ com฀ câncer.฀ Os฀ pacientes฀ tendem฀
a฀ser฀resistentes฀à฀insulina,฀têm฀níveis฀elevados฀
de฀cortisol,฀e฀têm฀alta฀taxa฀de฀metabolismo฀basal.฀
Alguns฀tumores฀sintetizam฀e฀secretam฀peptídeos฀
biologicamente฀ativos฀como฀ACTH,฀fator฀de฀cres-
cimento฀neural,฀e฀fator฀de฀crescimento฀tipo-insu-
lina,฀ que฀ podem฀ modificar฀ o฀ metabolismo฀ ener-
gético.฀A฀resposta฀do฀hospedeiro฀a฀um฀tumor,฀por฀
analogia฀ com฀ infecção฀ crônica,฀ inclui฀ liberação฀
de฀ interleucina-1฀ (IL-1),฀ interleucina-6฀ (IL-6)฀ e฀
fator฀de฀necrose฀tumoral฀α฀(TNF-α)฀por฀células฀
imunes.฀ TNF-α฀ é฀ também฀ chamado฀ caquexina,฀
porque฀ produz฀ depauperamento.฀ TNF-α฀ e฀ IL-1฀
podem฀ atuar฀ de฀ modo฀ parácrino,฀ uma฀ vez฀ que฀
seus฀ níveis฀ plasmáticos฀ não฀ ficam฀ elevados.฀ Es-
tas฀citocinas฀estimulam฀febre,฀proteólise,฀lipólise฀
e฀secreção฀de฀reagentes฀de฀fase฀aguda฀pelo฀fíga-
do.฀ Estudos฀ mais฀ recentes฀ identificaram฀ o฀ fator฀
indutor฀de฀proteólise฀(PIF)฀e฀o฀fator฀mobilizador฀
de฀lipídeo฀(LMF)฀como฀produtos฀de฀tumores฀que฀
estimulam฀catabolismo฀de฀proteína฀esquelética฀e฀
consumo฀do฀tecido฀adiposo,฀respectivamente.
Fonte:฀Beutler,฀B.฀e฀Cerami,฀A.฀Tumor฀necrosis,฀ca-
chexia,฀shock,฀and฀inflammation:฀a฀common฀mediator.฀
Annu.฀Rev.฀Biochem.฀57:1505,฀1988.฀Tracey,฀K.฀J.฀e฀Ce-
rami,฀ A.฀ Tumor฀ necrosis฀ factor:฀ A฀ pleitropic฀ cytokine฀
and฀therapeutic฀target.฀Annu.฀Rev.฀Med.฀45:491,฀1994.฀
Nitenberg,฀G.฀e฀Raynard,฀B.฀Nutritional฀support฀of฀the฀
cancer฀ patients:฀ issues฀ and฀ dilemmas.฀ Crit.฀ Rev.฀ On-
col.฀Hematol.฀34:137,฀2000.฀Tisdale,฀M.฀J.฀Cancer฀ano-
rexia฀and฀cachexia.฀Nutrition฀17:438,฀2001.฀Wray,฀C.฀J.,฀
Mammen,฀J.฀M.฀e฀Hasselgren,฀P.฀O.฀Catabolic฀response฀
to฀ stress฀ and฀ potential฀ benefits฀ of฀ nutrition฀ support.฀
Nutrition฀18:971,฀2002.
para฀síntese฀de฀ATP฀(Figura฀22.6),฀até฀que฀glicogenó-
lise฀ e฀ glicólise฀ sejam฀ estimuladas.฀ Por฀ falta฀ de฀ oxigê-
nio,฀glicólise฀torna-se฀a฀fonte฀primária฀de฀ATP.฀Durante฀
22.01.07 18:27:58
 870฀฀฀|฀฀฀PARTE฀5฀฀PROCESSOS฀FISIOLÓGICOS

PARTE฀5฀PROCESSOS฀FISIOLÓGICOS

23
ACTH

AC

2
Proteína G cAMP
ATP
PKA
PKAi

BIOQUÍMICA
DE฀HORMÔNIOS
Thomas฀J.฀Schmidt฀e฀Gerald฀Litwack

23.1฀ VISÃO฀GERAL,฀871 ฀ Sistemas฀hormonai฀s฀cíclicos,฀887

23.2฀ HORMÔNIOS฀E฀O฀SISTEMA฀DE฀CASCATA฀
HORMONAL,฀872
฀ Sistema฀de฀cascata฀amplifica฀sinais฀específicos,฀฀
฀ 872
฀ Principais฀hormônios฀polipeptídicos฀e฀suas฀ações,฀฀
฀ 874
฀ ฀ Hormônios฀polipeptídicos฀e฀pituitária฀฀ ฀
฀ anterior,฀874
23.3฀ SÍNTESE฀DE฀HORMÔNIOS฀POLIPEPTÍDICOS฀E฀
HORMÔNIOS฀DERIVADOS฀DE฀AMINOÁCIDOS,฀
875
฀ Hormônios฀polipeptídicos:฀codificação฀gênica,฀875
฀ ฀ Pró-opiomelanocortina฀é฀precursor฀de฀oito฀฀
฀ ฀ hormônios,฀875
฀ ฀ Genes฀de฀hormônios฀polipeptídicos฀podem฀฀
฀ ฀ codificar฀peptídeos฀adicionais,฀880
฀ ฀ Um฀gene฀pode฀codificar฀múltiplas฀cópias฀฀
฀ ฀ de฀um฀hormônio,฀881
฀ Hormônios฀derivados฀de฀aminoácidos,฀882฀
฀ ฀ Epinefrina฀é฀sintetizada฀a฀partir฀de฀tirosina,฀฀
฀ ฀ 882
฀ ฀ Síntese฀de฀hormônio฀da฀tireóide฀requer฀incor-฀
฀ ฀ poração฀de฀iodo฀em฀tirosinas฀da฀tireoglo-฀
฀ ฀ bulina,฀883
฀ Inativação฀e฀degradação฀de฀hormônios฀derivados฀฀
฀ de฀aminoácidos,฀883
฀ ฀ Síntese฀de฀melatonina฀e฀serotonina฀é฀con-฀
฀ ฀ trolada฀por฀ciclos฀claro/escuro,฀887
฀ Ciclo฀ovariano฀é฀controlado฀por฀secreção฀pulsátil฀฀
฀ e฀cíclica฀de฀hormônio฀liberador฀de฀gonadotro-฀
฀ pina,฀888
฀ ฀ Ausência฀de฀fertilização,฀888
฀ ฀ Fertilização,฀889
23.5฀ RECEPTORES฀DE฀HORMÔNIOS฀DE฀MEMBRA-
NA,฀891
฀ Algumas฀interações฀hormônio-receptor฀envolvem฀฀
฀ múltiplas฀subunidades฀hormonais,฀891
฀ ฀ Receptor฀β-adrenérgico,฀892
฀ Internalização฀de฀receptores,฀893
฀ ฀ Clatrina฀direciona฀internalização฀de฀฀ ฀
฀ ฀ complexos฀hormônio-receptor฀da฀membra-฀
฀ ฀ na฀plasmática,฀894
23.6฀ CASCATA฀HORMONAL฀INTRACELULAR:฀PRO-
TEÍNAS฀QUINASES,฀894
฀ Receptor฀de฀insulina:฀transdução฀por฀tirosina฀฀
฀ quinase,฀895
฀ Atividade฀de฀vasopressina:฀proteína฀quinase฀A,฀฀
฀ 897
฀ Hormônio฀liberador฀de฀gonadotropina฀(GnRH):฀฀
฀ proteína฀quinase฀C,฀898
฀ Atividade฀do฀fator฀natriurético฀atrial฀(ANF):฀฀
฀ proteína฀quinase฀G,฀900

23.4฀ PROTEÍNAS฀DE฀SINALIZAÇÃO฀HORMONAL,฀ 23.7฀ HORMÔNIOS฀ESTERÓIDES,฀902

883 ฀ Estruturas฀e฀funções฀de฀hormônios฀esteróides,฀
฀ Visão฀geral฀da฀sinalização,฀883 902
฀ ฀ Receptores฀de฀membrana,฀883 ฀ Biossíntese฀de฀hormônios฀esteróides,฀902
฀ ฀ Cascata฀de฀sinalização฀intracelular:฀se-฀ ฀ ฀ Metabolismo฀de฀hormônios฀esteróides,฀905
฀ gundos฀mensageiros,฀885 ฀ Regulação฀da฀síntese฀de฀hormônios฀esteróides,฀907

BioQ.23 870 22.01.07 18:32:35


CORRELAÇÃO฀CLÍNICA฀23.1
Testando฀a฀Atividade฀da฀
Pituitária฀Anterior
Hormônios฀liberadores฀e฀análogos฀químicos,฀par-
ticularmente฀ dos฀ peptídeos฀ menores,฀ são฀ hoje฀
sintetizados฀ rotineiramente.฀ O฀ hormônio฀ libe-
rador฀ de฀ gonadotropina,฀ um฀ decapeptídeo,฀ está฀
disponível฀ para฀ uso฀ na฀ avaliação฀ da฀ função฀ da฀
pituitária฀ anterior.฀ Isto฀ é฀ de฀ importância฀ quan-
do฀uma฀situação฀de฀doença฀puder฀envolver฀o฀hi-
potálamo,฀ a฀ pituitária฀ anterior฀ ou฀ o฀ órgão฀ final.฀
Esterilidade฀é฀um฀exemplo฀de฀tal฀situação.฀O฀que฀
precisa฀ser฀avaliado฀é฀qual฀o฀órgão฀defeituoso฀na฀
cascata฀hormonal.฀Isto฀pode฀ser฀conseguido฀por฀
injeção฀do฀hormônio฀da฀pituitária฀anterior฀LH฀ou฀
FSH.฀ Se฀ a฀ secreção฀ de฀ hormônio฀ sexual฀ foi฀ de-
sencadeada,฀então฀a฀glândula฀final฀parece฀estar฀
funcionando฀adequadamente.฀A฀seguir,฀a฀pituitá-
ria฀anterior฀deveria฀ser฀analisada.฀Isto฀pode฀ser฀
feito฀ por฀ administração฀ i.v.฀ de฀ GnRH฀ sintético;฀
por฀esta฀via,฀GnRH฀pode฀chegar฀às฀células฀gona-
dotrópicas฀ da฀ pituitária฀ anterior฀ e฀ desencadear฀
secreção฀de฀LH฀e฀FSH.฀Rotineiramente,฀os฀níveis฀
de฀LH฀são฀medidos฀no฀sangue฀como฀uma฀função฀
do฀tempo฀após฀a฀injeção.฀Estes฀níveis฀são฀medi-
dos฀por฀radioimunoensaio฀(RIA),฀no฀qual฀LH฀ou฀
hCG฀é฀deslocado฀da฀ligação฀com฀uma฀proteína฀de฀
ligação฀ao฀LH฀na฀amostra฀de฀soro.฀A฀extensão฀da฀
competição฀ é฀ proporcional฀ à฀ quantidade฀ de฀ LH฀
no฀soro.฀Deste฀modo,฀uma฀progressão฀da฀respos-
ta฀é฀medida฀e฀estará฀dentro฀dos฀limites฀normais฀
ou฀claramente฀deficientes.฀Se฀a฀resposta฀for฀de-
ficiente,฀as฀células฀da฀pituitária฀anterior฀não฀es-
tão฀ funcionando฀ normalmente฀ e฀ são฀ a฀ causa฀ da฀
síndrome.฀Por฀outro฀lado,฀resposta฀normal฀da฀pi-
tuitária฀a฀GnRH฀indicaria฀que฀o฀hipotálamo฀não฀
está฀ funcional.฀ Tal฀ descoberta฀ sugeriria฀ exame฀
do฀hipotálamo,฀quanto฀a฀condições฀que฀levam฀à฀
disponibilidade/produção฀insuficiente฀de฀hormô-
nios฀liberadores.฀Obviamente,฀o฀conhecimento฀da฀
estrutura฀do฀hormônio฀e฀a฀capacidade฀de฀sinteti-
zar฀hormônios฀específicos฀permite฀o฀diagnóstico฀
destas฀doenças.
Fonte:฀Marshall,฀J.฀C.฀e฀Barkan,฀A.฀L.฀Disorders฀of฀the฀
hypothalamus฀and฀anterior฀pituitary.฀Em:฀W.฀N.฀Kelley฀
(Ed.),฀Internal฀Medicine.฀New฀York:฀Lippincott,฀1989,฀
p.฀2159.฀Conn,฀P.฀M.฀The฀molecular฀basis฀of฀gonadotro-
pin-releasing฀hormone฀action.฀Endocr.฀Rev.฀7:฀3,฀1986.
BioQ.23 875
CAPÍTULO฀23฀฀BIOQUÍMICA฀DE฀HORMÔNIOS฀฀฀|฀฀฀875
dia),฀ prolactina฀ (PRL),฀ hormônio฀ folículo-estimulante฀
(FSH)฀e฀hormônio฀luteinizante฀(LH).฀Todos฀são฀cadeias฀
polipeptídicas฀únicas,฀exceto฀TSH,฀FSH฀e฀LH,฀que฀são฀
dímeros฀ que฀ compartilham฀ uma฀ subunidade฀ α฀ seme-
lhante฀ou฀idêntica.฀Como฀o฀lóbulo฀intermediário฀no฀ho-
mem฀é฀rudimentar,฀os฀níveis฀circulantes฀de฀α฀e฀β-MSH฀
livres฀ são฀ relativamente฀ baixos.฀ É฀ de฀ interesse,฀ parti-
cularmente฀ no฀ homem,฀ o฀ fato฀ dos฀ receptores฀ de฀ MSH฀
reconhecerem฀ e฀ serem฀ ativados฀ por฀ ACTH,฀ já฀ que฀ os฀
13฀ primeiros฀ aminoácidos฀ do฀ ACTH฀ contêm฀ a฀ seqüên-
cia฀do฀α-MSH.฀Por฀esta฀razão,฀ACTH฀pode฀ser฀um฀fator฀
contribuinte฀importante฀para฀a฀pigmentação฀da฀pele฀e฀
pode฀exceder฀a฀importância฀de฀MSH,฀especialmente฀em฀
condições฀em฀que฀o฀nível฀circulante฀de฀ACTH฀é฀alto.฀As฀
conseqüências฀ clínicas฀ do฀ hipopituitarismo฀ são฀ apre-
sentadas฀na฀Correlação฀Clínica฀23.2.
|
23.3฀ ฀SÍNTESE฀DE฀HORMÔ-
NIOS฀POLIPEPTÍDICOS฀
E฀HORMÔNIOS฀DERI-
VADOS฀DE฀AMINOÁCI-
DOS
Hormônios฀Polipeptídicos:฀
Codificação฀Gênica
Genes฀de฀hormônios฀polipeptídicos฀contêm฀a฀seqüência฀
codificadora฀do฀hormônio฀e฀os฀elementos฀de฀controles฀
a฀montante฀(upstream)฀do฀gene฀estrutural.฀Em฀alguns฀
casos,฀mais฀de฀um฀hormônio฀é฀codificado฀em฀um฀gene.฀
Por฀ exemplo,฀ pró-opiomelanocortina฀ gera฀ pelo฀ menos฀
oito฀ hormônios฀ a฀ partir฀ de฀ um฀ único฀ produto฀ gênico.฀
Ocitocina฀e฀vasopressina฀são฀codificados฀por฀genes฀se-
parados,฀ juntamente฀ com฀ suas฀ respectivas฀ proteínas฀
neurofisinas.฀ Neurofisinas฀ são฀ co-secretadas฀ com฀
seus฀ respectivos฀ hormônios,฀ mas฀ não฀ têm฀ ação฀ endó-
crina฀conhecida.
Pró-opiomelanocortina฀É฀Precursor฀de฀
Oito฀Hormônios
Pró-opiomelanocortina฀é฀um฀precursor฀de฀hormônios฀
para฀os฀seguintes฀hormônios:฀ACTH,฀β-lipotropina,฀γ-li-
potropina,฀ γ-MSH,฀ α-MSH,฀ CLIP,฀ β-endorfina฀ e฀ poten-
cialmente฀β-MSH฀e฀encefalinas฀(Figura฀23.5).฀Nem฀to-
dos฀estes฀produtos฀são฀expressos฀simultaneamente฀em฀
um฀ único฀ tipo฀ celular,฀ mas฀ são฀ produzidos฀ em฀ células฀
separadas฀com฀base฀em฀seu฀conteúdo฀de฀proteases฀es-
pecíficas฀necessárias,฀controles฀metabólicos฀específicos฀
e฀a฀presença฀de฀reguladores.฀Assim,฀enquanto฀pró-opio-
melacortina฀ é฀ expressa฀ em฀ corticotropos฀ da฀ pituitária฀
anterior฀e฀em฀células฀da฀pars฀intermedia,฀o฀estímulo฀
e฀os฀produtos฀são฀diferentes฀(Tabela฀23.3).฀Pars฀inter-
media฀é฀uma฀estrutura฀anatômica฀discreta,฀localizada฀
22.01.07 18:32:42

tas฀seqüências฀de฀aminoácidos฀em฀torno฀de฀um฀resíduo฀
de฀ fosfotirosina.฀ Várias฀ vias฀ diferentes฀ são฀ ativadas,฀ e฀
estas฀incluem฀ativação฀de฀PI3฀quinase฀(fosfatidilinositol฀
3´-OH฀quinase),฀Ras฀(proteína฀pequena฀que฀liga฀GTP),฀a฀
cascata฀da฀MAP฀quinase฀(proteína฀quinase฀ativada฀por฀
mitose)฀e฀TC10฀(proteína฀pequena฀que฀liga฀GTP).฀Uma฀
vez฀ativada฀por฀troca฀de฀GTP฀por฀GDP,฀TC10฀promove฀
translocação฀de฀vesículas฀de฀GLUT4฀para฀a฀membrana฀
plasmática,฀ talvez฀ por฀ estabilização฀ de฀ filamentos฀ de฀
actina฀corticais.฀Estas฀vias฀atuam฀de฀modo฀orquestra-
do฀para฀coordenar฀a฀regulação฀do฀tráfego฀de฀vesículas฀
[incorporação฀de฀transportador฀4฀de฀glicose฀(GLUT4)฀à฀
membrana฀plasmática],฀síntese฀de฀proteínas,฀ativação฀e฀
inativação฀de฀enzimas฀e฀expressão฀gênica.฀O฀resultado฀
final฀ destas฀ diversas฀ vias฀ é฀ regulação฀ do฀ metabolismo฀
de฀glicose,฀lipídeos฀e฀proteínas,฀bem฀como฀crescimento฀
e฀diferenciação฀celular.฀A฀importância฀da฀atividade฀da฀
quinase฀do฀receptor฀de฀insulina฀e฀da฀via฀geral฀de฀trans-
dução฀de฀sinal฀da฀insulina฀é฀enfatizada฀na฀Correlação฀
Clínica฀23.3.
CORRELAÇÃO฀CLÍNICA฀23.3
Atividade฀Reduzida฀do฀Receptor฀de฀Insulina฀Quinase฀no฀Diabetes฀
Mellitus฀Gestacional
Durante฀a฀gravidez,฀uma฀importante฀adaptação฀me-
tabólica฀materna฀é฀uma฀redução฀na฀sensibilidade฀à฀
insulina.฀ Esta฀ adaptação฀ ajuda฀ a฀ fornecer฀ glicose฀
adequadamente฀ para฀ o฀ feto฀ em฀ desenvolvimento.฀
Entretanto,฀ em฀ 3-5%฀ das฀ mulheres฀ grávidas,฀ de-
senvolve-se฀intolerância฀a฀glicose.฀Diabetes฀mellitus฀
gestacional฀(GDM)฀é฀caracterizada฀por฀um฀decrés-
cimo฀adicional฀na฀sensibilidade฀a฀insulina฀e฀uma฀in-
capacidade฀de฀compensar฀com฀secreção฀aumentada฀
de฀ insulina.฀ Embora฀ ambos฀ resistência฀ à฀ insulina฀
induzida฀pela฀gravidez฀e฀GDM฀sejam฀geralmente฀re-
versíveis฀após฀a฀gravidez,฀aproximadamente฀30-50%฀
das฀ mulheres฀ com฀ história฀ de฀ GDM฀ desenvolvem฀
diabetes฀ tipo฀ 2฀ mais฀ tarde฀ na฀ vida,฀ especialmente฀
se฀ forem฀ obesas.฀ Embora฀ os฀ mecanismos฀ celulares฀
responsáveis฀ pela฀ resistência฀ à฀ insulina฀ em฀ GDM฀
não฀ sejam฀ totalmente฀ conhecidos,฀ a฀ resistência฀ ao฀
transporte฀ de฀ glicose฀ mediado฀ por฀ insulina฀ pare-
ce฀ser฀maior฀em฀músculo฀esquelético฀de฀indivíduos฀
com฀GDM฀do฀que฀em฀mulheres฀grávidas฀que฀não฀têm฀
Fonte:฀Shao,฀J.,฀Catalono,฀P.฀M.,฀Hiroshi,฀Y.,฀Ruyter,฀I.,฀Smith,฀S.,฀Youngreen,฀J.฀e฀Friedman,฀J.฀E.฀Decreased฀insulin฀
receptor฀tyrosine฀kinase฀activity฀and฀plasma฀cell฀membrane฀glycoprotein-1฀overexpression฀in฀skeletal฀muscle฀from฀
obese฀women฀with฀gestational฀diabetes฀mellitus฀(GDM).฀Diabetes฀49(4):฀603,฀2000.฀Maddux,฀B.฀A.฀e฀Goldfine,฀I.฀D.฀
Membrane฀glycoprotein฀PC-1฀inhibition฀of฀insulin฀receptor฀function฀occurs฀via฀direct฀interaction฀with฀the฀receptor฀
alpha-subunit.฀Diabetes฀49(1):฀13,฀2000.
BioQ.23 897
CAPÍTULO฀23฀฀BIOQUÍMICA฀DE฀HORMÔNIOS฀฀฀|฀฀฀897
Atividade฀de฀Vasopressina:฀Proteína฀
Quinase฀A
Arginina฀angiotensina฀(AVP),฀ou฀hormônio฀antidiu-
rético,฀ causa฀ reabsorção฀ de฀ água฀ aumentada฀ da฀ urina฀
no฀rim฀distal.฀Um฀mecanismo฀para฀este฀sistema฀é฀apre-
sentado฀na฀Figura฀23.30.฀Neurônios฀que฀sintetizam฀AVP฀
(neurônios฀ vasopressinérgicos)฀ liberam฀ AVP฀ em฀ res-
posta฀a฀estímulos฀de฀barorreceptores฀que฀respondem฀
a฀uma฀queda฀na฀pressão฀do฀sangue฀ou฀de฀osmorrecep-
tores฀que฀respondem฀a฀um฀aumento฀na฀concentração฀
extracelular฀de฀sal.฀VP฀liga-se฀a฀seu฀receptor฀de฀mem-
brana฀cognato฀no฀rim฀distal,฀na฀pituitária฀anterior,฀em฀
hepatócitos฀e,฀talvez,฀em฀outros฀tipos฀celulares,฀No฀rim,฀
a฀ligação฀de฀AVP฀a฀seu฀receptor฀acoplado฀a฀proteína฀G฀
estimula฀a฀atividade฀de฀adenilato฀ciclase฀e฀ativa฀proteí-
na฀quinase฀A,฀que฀fosforila฀subunidades฀que฀se฀agregam฀
para฀formar฀canais฀aquosos฀específicos,฀ou฀aquapori-
nas฀(ver฀p.฀459).฀
Água฀atravessa฀a฀célula฀do฀rim฀para฀o฀lado฀basolate-
ral฀e฀depois฀entra฀na฀circulação฀geral,฀onde฀dilui฀a฀con-
centração฀de฀sal.฀Mutações฀específicas฀nas฀seqüências฀
GDM.฀Dados฀recentes฀indicam฀que฀defeitos฀na฀ação฀
da฀insulina,฀e฀não฀diminuição฀na฀afinidade฀da฀insuli-
na฀pelo฀receptor,฀podem฀contribuir฀para฀a฀patogêne-
se฀de฀GDM.฀Mais฀especificamente,฀células฀de฀múscu-
lo฀esquelético฀de฀sujeitos฀com฀GDM฀aparentemente฀
expressam฀excesso฀de฀glicoproteína-1฀de฀membrana฀
plasmática฀(PC-1),฀que฀se฀verificou฀inibir฀a฀atividade฀
de฀tirosina฀quinase฀do฀receptor฀de฀insulina,฀por฀inte-
ragir฀diretamente฀com฀as฀subunidades฀α฀e฀bloquear฀
a฀ mudança฀ conformacional฀ induzida฀ por฀ insulina.฀
Além฀disso,฀excessiva฀fosforilação฀de฀resíduos฀de฀se-
rina/treonina฀localizados฀nos฀receptores฀de฀insulina฀
do฀ músculo฀ parece฀ regular฀ negativamente฀ (down-
regulate)฀a฀atividade฀de฀tirosina฀quinase฀em฀GDM.฀
Assim,฀ uma฀ superexpressão฀ de฀ PC-1฀ e฀ um฀ decrés-
cimo฀ na฀ atividade฀ quinase฀ do฀ receptor,฀ acoplados฀
com฀expressão฀e฀fosforilação฀(resíduos฀de฀tirosina)฀
diminuídas฀ do฀ substrato฀ 1฀ do฀ receptor฀ de฀ insulina฀
(IRS-1;฀ver฀Figura฀20.29),฀podem฀estar฀por฀trás฀da฀
resistência฀à฀insulina฀em฀GDM.
22.01.07 18:33:26
 914฀฀฀|฀฀฀PARTE฀5฀฀PROCESSOS฀FISIOLÓGICOS
Transporte฀de฀Hormônios฀
Esteróides:฀Proteínas฀de฀Ligação
Quatro฀ proteínas฀ plasmáticas฀ principais฀ respondem฀
pela฀ligação฀dos฀hormônios฀esteróides฀no฀sangue.฀Elas฀
são฀ globulina฀ de฀ ligação฀ a฀ corticoesteróides,฀ proteína฀
de฀ ligação฀ a฀ hormônios฀ sexuais,฀ proteína฀ de฀ ligação฀ a฀
andrógenos฀e฀albumina.฀A฀maior฀parte฀do฀cortisol฀cir-
culante฀(75-80%)฀ocorre฀ligado฀a฀uma฀α2 -globulina฀de฀
ligação฀a฀corticosteróide฀(CBG)฀específica,฀também฀
conhecida฀ como฀ transcortina.฀ Cada฀ molécula฀ desta฀
glicoproteína฀liga฀uma฀única฀molécula฀de฀cortisol,฀com฀
Ka฀de฀2,4฀฀107฀M-1.฀A฀concentração฀normal฀de฀transcor-
tina฀no฀plasma฀é฀3฀mg/dl,฀e฀sua฀capacidade฀de฀ligação฀é฀
20฀μg฀de฀cortisol/dl.฀Cerca฀de฀15%฀do฀cortisol฀do฀plas-
ma฀ocorre฀ligado฀a฀albumina,฀com฀uma฀afinidade฀muito฀
mais฀baixa฀(Ka฀=฀103฀M-1).฀Portanto,฀embora฀albumina฀
esteja฀ presente฀ em฀ concentração฀ 1.000฀ vezes฀ superior฀
à฀ de฀ CBG,฀ cortisol฀ vai฀ preencher฀ primeiro฀ os฀ sítios฀ de฀
ligação฀em฀CBG.฀A฀concentração฀de฀transcortina,฀e฀por-
tanto฀de฀cortisol,฀está฀aumentada฀durante฀a฀gravidez฀e฀
administração฀de฀estrógeno.฀Durante฀o฀estresse,฀quan-
do฀os฀níveis฀de฀cortisol฀são฀altos,฀os฀sítios฀de฀ligação฀de฀
CBG฀estarão฀saturados,฀e฀o฀excesso฀de฀cortisol฀se฀ligará฀
a฀albumina.฀Apenas฀5-10%฀do฀cortisol฀plasmático฀está฀
normalmente฀livre฀(não-ligado).฀Cortisol฀livre฀difunde-
se฀através฀da฀membrana฀plasmática,฀liga-se฀aos฀recep-
tores฀intracelulares฀de฀cortisol,฀e฀medeia฀uma฀resposta฀
biológica.฀Em฀contraste฀com฀cortisol,฀apenas฀50-70%฀da฀
aldosterona฀circulante฀fica฀ligada฀com฀baixa฀afinidade฀
a฀ albumina฀ e฀ transcortina.฀ Portanto,฀ aldosterona฀ tem฀
uma฀meia-vida฀mais฀curta฀no฀plasma฀(20฀minutos)฀em฀
comparação฀com฀cortisol฀(70฀minutos).
Globulina฀ de฀ ligação฀ a฀ hormônios฀ sexuais฀
(SHBG)฀liga฀andrógenos฀com฀uma฀constante฀de฀afini-
dade฀de฀cerca฀de฀109฀M-1.฀Cerca฀de฀65%฀da฀testostero-
na฀são฀ligados฀a฀esta฀glicoproteína฀derivada฀do฀fígado.฀
Apenas฀1-2%฀da฀testosterona฀circulante฀está฀na฀forma฀
livre,฀e฀o฀andrógeno฀restante฀está฀ligado฀a฀albumina฀e฀
a฀outras฀proteínas.฀As฀frações฀ligadas฀a฀SHBG฀servem,฀
portanto,฀ como฀ reservatórios฀ circulantes฀ de฀ testoste-
rona.฀Cerca฀de฀60%฀dos฀estrógenos฀são฀transportados฀
ligados฀a฀SHBG,฀20%฀são฀ligados฀a฀albumina฀,฀e฀20%฀na฀
forma฀ livre.฀ Entretanto,฀ estradiol฀ liga-se฀ a฀ SHBG฀ com฀
uma฀ afinidade฀ muito฀ mais฀ baixa฀ do฀ que฀ testosterona.฀
Assim,฀estradiol฀ligado฀a฀SHBG฀dissocia-se฀muito฀rapi-
damente฀ e฀ é฀ captado฀ pelos฀ tecidos฀ alvos.฀ Por฀ esta฀ ra-
zão,฀ mudanças฀ nos฀ níveis฀ de฀ SHBG฀ no฀ homem฀ podem฀
alterar฀a฀razão฀de฀andrógenos฀para฀estrógenos฀livres.฀A฀
concentração฀plasmática฀de฀SHBG฀antes฀da฀puberdade฀
é฀ aproximadamente฀ a฀ mesma฀ em฀ homens฀ e฀ mulheres.฀
Entretanto,฀na฀puberdade,฀há฀um฀pequeno฀decréscimo฀
em฀ mulheres฀ e฀ um฀ decréscimo฀ maior฀ em฀ homens,฀ ga-
rantindo฀ uma฀ quantidade฀ relativamente฀ maior฀ de฀ tes-
tosterona฀ circulante฀ não-ligada฀ em฀ homens.฀ Homens฀
adultos฀ têm฀ cerca฀ da฀ metade฀ da฀ SHBG฀ circulante฀ de฀
mulheres,฀de฀modo฀que฀testosterona฀livre฀é฀cerca฀de฀20฀
vezes฀mais฀alta฀em฀homens฀do฀que฀em฀mulheres.฀Além฀
BioQ.23 914
disso,฀ a฀ concentração฀ total฀ (ligada฀ mais฀ não-ligada)฀
de฀testosterona฀é฀cerca฀de฀40฀vezes฀maior฀em฀homens.฀
A฀ própria฀ testosterona฀ reduz฀ os฀ níveis฀ de฀ SHBG฀ (au-
menta฀a฀porcentagem฀de฀testosterona฀livre)฀no฀sangue,฀
enquanto฀17β-estradiol฀e฀hormônio฀da฀tireóide฀elevam฀
os฀níveis฀de฀SHBG฀no฀sangue.฀Durante฀a฀gravidez฀e฀no฀
hipertireoidismo,฀as฀porcentagens฀de฀testosterona฀e฀de฀
17β-estradiol฀não-ligados฀estariam฀reduzidas.
Proteína฀de฀ligação฀a฀andrógeno฀(ABP)฀é฀produ-
zida฀pelas฀células฀de฀Sertoli฀em฀resposta฀a฀testosterona฀
e฀FSH,฀que฀estimulam฀síntese฀de฀proteínas฀nessas฀cé-
lulas.฀ABP฀é฀também฀chamada฀globulina฀de฀ligação฀
a฀ testosterona-estrógeno฀ (TeBG).฀ Esta฀ proteína฀ é฀
semelhante฀a฀SHBG,฀exceto฀que฀se฀localiza฀no฀testículo฀
e฀ajuda฀a฀manter฀níveis฀locais฀elevados฀de฀andrógeno฀no฀
testículo฀e฀no฀líquido฀seminal.฀Estes฀níveis฀locais฀de฀an-
drógeno฀elevados฀são฀importantes฀no฀desenvolvimento฀
e฀maturação฀dos฀espermatozóides.฀Progesterona฀liga-se฀
fracamente฀a฀transcortina฀e฀albumina,฀e฀sua฀meia-vida฀
circulante฀é฀apenas฀cerca฀de฀5฀minutos.
|
23.8฀ ฀RECEPTORES฀DE฀
HORMÔNIOS฀
ESTERÓIDES
Hormônios฀Esteróides฀Ligam-se฀a฀
Proteínas฀Receptores฀Intracelulares
Receptores฀ de฀ hormônios฀ esteróides฀ e฀ receptores฀ de฀
não-esteróides฀(i.฀é,฀hormônio฀da฀tireóide,฀ácido฀retinói-
co,฀vitamina฀D3)฀localizam-se฀intracelularmente.฀O฀re-
ceptor฀de฀glucocorticóide฀não-ligado฀e,฀possivelmente,฀
o฀receptor฀de฀aldosterona฀parecem฀residir฀no฀citoplas-
ma,฀ enquanto฀ os฀ outros฀ receptores฀ não-ligados฀ locali-
zam-se฀dentro฀do฀núcleo,฀provavelmente฀em฀associação฀
com฀ a฀ cromatina.฀ Na฀ Figura฀ 23.48,฀ a฀ Etapa฀ 1฀ mostra฀
um฀hormônio฀esteróide฀se฀dissociando฀de฀uma฀proteína฀
plasmática฀ transportadora.฀ O฀ esteróide฀ livre฀ entra฀ na฀
célula฀por฀difusão,฀através฀da฀bicamada฀lipídica฀(Etapa฀
2).฀Cortisol฀liga-se฀a฀seu฀receptor฀com฀uma฀constante฀
de฀ afinidade฀ de฀ 109฀ M-1,฀ comparada฀ a฀ uma฀ constante฀
de฀afinidade฀de฀cerca฀de฀107฀M-1฀para฀CBG.฀O฀receptor฀
não-ligado฀ (neste฀ caso,฀ receptor฀ de฀ glucocorticóide)฀ é฀
um฀complexo฀(~300฀kDa)฀que฀contém฀outras฀proteínas฀
associadas,฀incluindo฀um฀dímero฀de฀uma฀proteína฀de฀
choque฀térmico฀90฀kDa,฀que฀mascara฀o฀domínio฀de฀li-
gação฀ao฀DNA฀do฀receptor฀(Figura฀23.49),฀e฀outra฀prote-
ína฀de฀choque฀térmico฀designada฀por฀Hsp56,฀que฀é฀uma฀
imunofilina฀que฀liga฀várias฀drogas฀imunossupressoras.฀
Ligação฀do฀ligante฀esteróide฀(Etapa฀3)฀causa฀uma฀mu-
dança฀conformacional,฀chamada฀“ativação”,฀da฀própria฀
proteína฀do฀receptor,฀resultando฀em฀liberação฀das฀prote-
ínas฀associadas,฀incluindo฀o฀dímero฀Hsp90,฀e฀exposição฀
dos฀resíduos฀de฀aminoácidos฀carregados฀positivamente฀
localizados฀ no฀ domínio฀ de฀ ligação฀ ao฀ DNA฀ (Etapa฀ 4).฀
22.01.07 18:34:18
 CAPÍTULO฀24฀฀BIOLOGIA฀MOLECULAR฀DAS฀CÉLULAS฀฀฀|฀฀฀925

PARTE฀5฀PROCESSOS฀FISIOLÓGICOS

�� �
���
��
����

24
��

BIOLOGIA฀MOLECULAR
DAS฀CÉLULAS
Thomas฀E.฀Smith

24.1฀ VISÃO฀GERAL,฀926 ฀ Estrutura฀e฀caracterização฀de฀algumas฀proteínas฀฀

฀ envolvidas฀nos฀processos฀contráteis,฀956
24.2฀ TECIDO฀NERVOSO:฀METABOLISMO฀E฀FUN- ฀ ฀ Miosina฀forma฀filamentos฀grossos฀do฀múscu-฀
ÇÃO,฀926 ฀ ฀ lo,฀956
฀ ATP฀e฀potencial฀elétrico฀transmembrânico฀em฀฀ ฀ ฀ Actina,฀tropomiosina฀e฀troponina฀são฀proteí-฀
฀ neurônios,฀928 ฀ ฀ nas฀de฀filamentos฀finos,฀957
฀ Interação฀neurônio-neurônio฀ocorre฀por฀meio฀de฀฀ ฀ Contração฀muscular฀requer฀Ca 2+,฀961
฀ sinapses,฀929 ฀ Reservatórios฀de฀energia฀para฀contração฀muscu-฀
฀ Síntese,฀armazenamento฀e฀liberação฀de฀neuro-฀ ฀ lar,฀961
฀ transmissores,฀930 ฀ Modelo฀de฀contração฀do฀músculo฀esquelético:฀o฀฀
฀ Terminação฀de฀sinais฀em฀junções฀sinápticas,฀934 ฀ golpe฀de฀força,฀963
฀ ฀ Acetilcolina,฀934 ฀ Cálcio฀Regula฀a฀Contração฀do฀Músculo฀Liso,฀
฀ ฀ Catecolaminas,฀935 ฀ ฀ 963
฀ ฀ 5-Hidroxitriptamina฀(serotonina),฀936 ฀ Envolvimento฀de฀óxido฀nítrico฀e฀monóxido฀de฀฀
γ-Aminobutirato฀(GABA),฀936 ฀ carbono฀na฀contração฀muscular,฀฀964
฀ Neuropeptídeos฀são฀derivados฀de฀proteínas฀pre-฀ ฀ Outras฀classes฀de฀miosinas฀e฀motores฀molecula-฀
฀ cursoras,฀937 ฀ res,฀965
฀ ฀ Miosinas฀não-convencionais฀e฀suas฀funções,฀฀
24.3฀ OLHO:฀METABOLISMO฀E฀VISÃO,฀938 ฀ ฀ 965
฀ Córnea฀deriva฀ATP฀de฀metabolismo฀aeróbico,฀938 ฀ ฀ Cinesinas,฀966
฀ Cristalino฀consiste฀principalmente฀de฀água฀e฀฀ ฀ ฀ Dineína,฀967
฀ proteína,฀939
฀ Retina฀deriva฀ATP฀de฀glicólise฀anaeróbica,฀941 24.5฀ MECANISMO฀DA฀COAGULAÇÃO฀DO฀SANGUE,฀
฀ Transdução฀visual฀envolve฀eventos฀fotoquímicos,฀฀ 967
฀ bioquímicos฀e฀elétricos,฀941 ฀ Processos฀bioquímicos฀da฀hemostasia,฀967
฀ Bastonetes฀e฀cones฀são฀células฀fotorreceptoras,฀943 ฀ Fase฀pró-coagulante฀da฀hemostasia฀(fase฀1),฀฀
฀ Visão฀de฀cores฀origina-se฀nos฀cones,฀951 ฀ 969
฀ ฀ Visão฀de฀cores฀é฀tricromática,฀951 ฀ ฀ Via฀extrínseca฀e฀início฀da฀coagulação,฀969
฀ Outras฀diferenças฀entre฀bastonetes฀e฀cones,฀952 ฀ ฀ Formação฀de฀trombina,฀970
฀ ฀ Reações฀da฀via฀intrínseca,฀970
24.4฀ MOTORES฀MOLECULARES฀E฀PROTEÍNAS฀AS- ฀ ฀ Algumas฀propriedades฀das฀proteínas฀envolvi-฀
SOCIADAS,฀952 ฀ ฀ das฀na฀formação฀do฀coágulo,฀971
฀ Contração฀muscular,฀953 ฀ ฀ Formação฀da฀rolha฀de฀plaquetas,฀975
฀ Contração฀do฀músculo฀esquelético,฀953 ฀ Fase฀anticoagulante฀da฀hemostasia฀(fase฀2),฀975
฀ ฀ Organização฀estrutural฀dos฀componentes฀do฀฀ ฀ ฀ Inibição฀da฀via฀extrínseca,฀975
฀ ฀ músculo฀esquelético,฀953 ฀ ฀ Inativação฀de฀FVa฀e฀FVIIIa,฀978

BioQ.24 925 22.01.07 19:35:10

 938฀฀฀|฀฀฀PARTE฀5฀฀PROCESSOS฀FISIOLÓGICOS
TABELA฀24.3฀ Peptídeos฀Encontrados฀no฀Tecido฀Cerebrala
Peptídeo Estrutura

β-Endorfina Y฀G฀G฀F฀M฀T฀S฀E฀K฀S฀Q฀T฀P฀L฀V฀T฀L฀F฀K฀N฀A฀I฀I฀K฀N฀A฀Y฀K฀K฀G฀E

Met-encefalina Y฀G฀G฀F฀M

Leu-encefalina Y฀G฀G฀F฀L

Somatostatina A฀G฀C฀K฀N฀F฀F฀W
฀฀฀฀฀฀฀฀|฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀฀ ฀฀|฀
฀฀฀฀฀฀฀C฀S฀T฀F฀T฀K

Hormônio฀liberador฀de฀hormônio฀luteinizante ฀฀฀฀฀฀฀฀p-E฀H฀W฀S฀Y฀G฀L฀R฀P฀G฀NH2

Hormônio฀liberador฀de฀tirotropina ฀฀฀฀฀฀฀฀p-E฀H฀P-NH2

Substância฀P ฀฀฀฀฀฀฀฀R฀P฀K฀P฀E฀E฀F฀F฀G฀L฀M-NH2

Neurotensina ฀฀฀฀฀฀฀฀p-E฀L฀Y฀E฀N฀K฀P฀R฀R฀P฀Y฀I฀L

Angiotensina฀I ฀฀฀฀฀฀฀฀D฀R฀V฀Y฀I฀H฀P฀F฀H฀L

Angiotensina฀II ฀฀฀฀฀฀฀฀D฀R฀V฀Y฀I฀H฀P฀F฀฀฀฀฀฀฀฀

Peptídeo฀intestinal฀vasoativo ฀฀฀฀฀฀฀฀H฀S฀D฀A฀V฀F฀T฀D฀N฀Y฀T฀R฀L฀R฀K฀E฀M฀A฀V฀K฀K฀Y฀L฀N฀S฀I฀L฀N-NH2

a฀
Peptídeos฀com฀“p”฀precedendo฀a฀estrutura฀indicam฀que฀o฀N-terminal฀é฀piroglutamato.฀Aqueles฀com฀NH2฀na฀extremidade฀indicam฀
que฀o฀C-terminal฀é฀uma฀amida.

Cinesinas฀ e฀ miosinas,฀ proteínas฀ motores฀ molecula-
res฀(ver฀p.฀966),฀facilitam฀este฀processo฀de฀transporte.
Neuropeptídeos฀são฀mediadores฀de฀respostas฀senso-
riais฀e฀emocionais,฀tais฀como฀as฀associadas฀com฀fome,฀
sede,฀sexo,฀prazer,฀dor฀e฀assim฀por฀diante.฀Incluídas฀nes-
ta฀categoria฀estão฀encefalinas,฀endorfinas฀e฀substân-
cia฀P.฀Substância฀P฀é฀um฀neurotransmissor฀excitatório฀
que฀ desempenha฀ um฀ papel฀ na฀ percepção฀ de฀ dor.฀ Está฀
em฀uma฀classe฀de฀neuropeptídeos฀chamados฀neuroci-
ninas.฀ Seu฀ receptor,฀ NK-1฀ (ou฀ neurocinina-1),฀ é฀ uma฀
proteína฀tipo-G฀consistindo฀de฀sete฀elementos฀de฀héli-
ces฀transmembrânicas.฀Endorfinas฀e฀opióides฀ligam-se฀
a฀receptores฀que฀também฀têm฀sete฀elementos฀de฀hélices฀
transmembrânicas.฀ Endorfinas฀ desempenham฀ papéis฀
na฀ eliminação฀ da฀ sensação฀ de฀ dor.฀ Alguns฀ dos฀ peptí-
deos฀encontrados฀no฀tecido฀cerebral฀são฀apresentados฀
na฀Tabela฀24.3.฀Note฀que฀Met-encefalina฀é฀derivada฀da฀
região฀ N-terminal฀ da฀ β-endorfina.฀ Os฀ aminoácidos฀ da฀
extremidade฀N-terminal฀ou฀de฀ambas฀as฀extremidades฀
N-฀e฀C-terminal฀de฀muitos฀neuropeptídeos฀transmisso-
res฀são฀modificados.
rem฀ nutrição฀ contínua฀ obtida฀ pelo฀ uso฀ de฀ metabólicas฀
convencionais฀ apropriadas฀ a฀ suas฀ necessidades฀ espe-
cíficas.฀ Estruturas฀ pigmentadas,฀ como฀ citocromos฀ e฀
mitocôndrias,฀ ou฀ não฀ estão฀ presentes฀ em฀ algumas฀ es-
truturas฀ou฀estão฀arranjadas฀e฀distribuídas฀de฀modo฀a฀
não฀interferirem฀com฀o฀processo฀visual.฀Além฀disso,฀o฀
cérebro฀desenvolveu฀um฀sistema฀de฀filtro฀enormemente฀
eficiente฀que฀torna฀objetos฀dentro฀do฀olho฀invisíveis,฀os฀
quais฀poderiam฀levar฀a฀distorção฀visual.฀Um฀diagrama฀
esquemático฀de฀um฀corte฀transversal฀do฀olho฀é฀apresen-
tado฀na฀Figura฀24.16.
A฀luz฀que฀entra฀no฀olho฀passa฀progressivamente฀por฀
(a)฀ a฀ córnea,฀ a฀ câmara฀ anterior฀ que฀ contém฀ humor฀
aquoso,฀(b)฀o฀cristalino,฀e฀(c)฀o฀corpo฀vítreo,฀que฀con-
tém฀ humor฀ vítreo;฀ finalmente฀ focaliza฀ na฀ retina,฀ que฀
contém฀ o฀ aparelho฀ sensor฀ visual.฀ Lágrimas฀ banham฀ o฀
exterior฀da฀córnea,฀enquanto฀o฀interior฀é฀banhado฀pelo฀
humor฀aquoso,฀um฀fluido฀isosmótico฀contendo฀sais,฀al-
bumina,฀globulina,฀glicose฀e฀outros฀constituintes.
O฀humor฀aquoso฀traz฀nutrientes฀para฀a฀córnea฀e฀para฀
o฀ cristalino,฀ e฀ remove฀ produtos฀ finais฀ do฀ metabolismo฀
deles.฀O฀humor฀vítreo฀é฀uma฀massa฀gelatinosa฀que฀ajuda฀

|
24.3฀ ฀OLHO:฀METABOLISMO฀
E฀VISÃO
O฀olho,฀nossa฀janela฀para฀o฀mundo฀exterior,฀nos฀permite฀
ver฀as฀belezas฀da฀natureza,฀as฀belezas฀da฀vida฀e,฀consi-
derando฀o฀conteúdo฀deste฀livro,฀as฀belezas฀da฀bioquími-
ca.฀Uma฀vista฀através฀de฀qualquer฀janela฀ou฀de฀qualquer฀
lente฀de฀câmera฀é฀mais฀clara฀quando฀não฀obstruída.฀O฀
olho฀ evoluiu฀ de฀ tal฀ modo฀ que฀ um฀ objetivo฀ semelhante฀
foi฀alcançado.฀É฀composto฀de฀tecidos฀vivos฀que฀reque-
a฀manter฀a฀forma฀do฀olho,฀enquanto฀o฀mantém฀um฀tanto฀
flexível.
Córnea฀Deriva฀ATP฀de฀Metabolismo฀
Aeróbico
O฀olho฀é฀uma฀extensão฀do฀sistema฀nervoso฀e,฀como฀ou-
tros฀ tecidos฀ do฀ sistema฀ nervoso฀ central,฀ seu฀ principal฀
combustível฀ metabólico฀ é฀ glicose.฀ A฀ córnea฀ não฀ é฀ um฀
tecido฀homogêneo฀e฀obtém฀uma฀porcentagem฀relativa-
mente฀ alta฀ do฀ seu฀ ATP฀ de฀ metabolismo฀ aeróbico.฀ Cer-

BioQ.24 938 22.01.07 19:35:53

 956฀฀฀|฀฀฀PARTE฀5฀฀PROCESSOS฀FISIOLÓGICOS
Estrutura฀e฀Caracterização฀de฀
Algumas฀Proteínas฀Envolvidas฀nos฀
Processos฀Contráteis
Miosina฀Forma฀Filamentos฀Grossos฀do฀
Músculo
Miosina,฀uma฀molécula฀fibrosa฀longa฀com฀duas฀cabe-
ças฀globulares฀em฀uma฀extremidade,฀consiste฀de฀duas฀
cadeias฀pesadas฀de฀cerca฀de฀230฀kDa฀cada.฀Ligada฀perto฀
de฀cada฀grupo฀de฀cabeça฀está฀um฀par฀não-semelhante฀
de฀ cadeias฀ leves,฀ cada฀ uma฀ das฀ quais฀ com฀ aproxima-
damente฀20฀kDa.฀As฀cadeias฀leves฀são฀proteínas฀“tipo-
calmodulina”฀e฀estão฀envolvidas฀em฀vários฀aspectos฀da฀
regulação฀do฀processo,฀sendo฀que฀nem฀todos฀foram฀de-
finidos฀com฀clareza.฀Elas฀ligam฀motivos฀IQ฀em฀miosinas,฀
que฀estão฀localizados฀próximos฀dos฀grupos฀de฀cabeça฀e฀
têm฀a฀seqüência฀consenso฀IQXXXRGXXXR.
A฀ extremidade฀ carboxila฀ de฀ cada฀ cadeia฀ de฀ miosi-
na฀localiza-se฀na฀região฀da฀cauda,฀onde฀as฀duas฀cadeias฀
pesadas฀são฀enroladas฀uma฀na฀outra,฀num฀ arranjo฀es-
piral-espiral฀(Figura฀24.29m).฀Tripsina฀cliva฀a฀cauda฀
em฀cerca฀de฀um฀terço฀do฀seu฀comprimento฀a฀partir฀da฀
cabeça฀para฀produzir฀meromiosina฀pesada฀(o฀grupo฀
da฀cabeça฀e฀uma฀cauda฀curta)฀e฀meromiosina฀leve฀(o฀
restante฀ da฀ região฀ da฀ cauda).฀ Só฀ a฀ meromiosina฀ leve฀
pode฀agregar฀em฀condições฀fisiológicas฀in฀vitro,฀suge-
rindo฀que฀agregação฀seja฀um฀dos฀seus฀papéis฀na฀forma-
ção฀da฀cadeia฀pesada฀in฀vivo.฀A฀região฀da฀cabeça฀pode฀
ser฀clivada฀do฀restante฀da฀região฀de฀cauda฀por฀papaí-
na฀ (Figura฀ 24.29n),฀ resultando฀ em฀ um฀ fragmento฀ do฀
grupo฀de฀cabeça฀chamado฀Subfragmento฀1฀ou฀S-1.฀A฀
ação฀destas฀proteases฀também฀demonstra฀que฀a฀molé-
cula฀tem฀pelo฀menos฀duas฀regiões฀de฀articulação,฀perto฀
da฀junção฀cabeça-cauda.
Análise฀de฀cDNAs฀de฀miosinas฀de฀muitas฀espécies฀
diferentes฀ e฀ tipos฀ diferentes฀ de฀ músculos฀ indicam฀
que฀ existe฀ um฀ grau฀ muito฀ alto฀ de฀ homologia฀ entre฀
miosinas฀de฀diferentes฀fontes,฀particularmente฀na฀re-
gião฀da฀cabeça.฀Existe฀um฀pouco฀menos฀de฀homologia฀
de฀seqüência฀na฀região฀da฀cauda,฀mas฀homologia฀fun-
cional฀ existe฀ em฀ um฀ grau฀ extraordinariamente฀ alto,฀
independentemente฀do฀comprimento,฀que฀vai฀de฀cer-
ca฀de฀86฀a฀cerca฀de฀150฀nm฀para฀espécies฀diferentes.฀
A฀cabeça฀da฀miosina฀contém฀quase฀metade฀(cerca฀de฀
839฀a฀cerca฀de฀850)฀dos฀resíduos฀de฀aminoácidos฀da฀
molécula฀inteira,฀em฀mamíferos฀(ver฀Corr.฀Clín.฀24.7).฀
Miosina฀forma฀um฀agregado฀simétrico฀cauda-cau-
da฀ em฀ torno฀ da฀ linha฀ M฀ da฀ zona฀ H฀ dos฀ sarcômeros.฀
Regiões฀de฀cauda฀são฀alinhadas฀de฀modo฀paralelo฀em฀
ambos฀os฀lados฀da฀linha฀M,฀com฀os฀grupos฀de฀cabeça฀
apontando฀para฀a฀linha฀Z.฀Cada฀filamento฀grosso฀con-
tém฀ cerca฀ de฀ 400฀ moléculas฀ de฀ miosina.฀ A฀ proteína฀
C฀(Tabela฀24.7)฀está฀envolvida฀em฀sua฀montagem.฀A฀
proteína฀ M฀ também฀ está฀ envolvida,฀ presumivelmen-
te,฀na฀manutenção฀das฀regiões฀de฀cauda฀juntas฀e฀em฀
sua฀ancoragem฀na฀linha฀M.
BioQ.24 956
CORRELAÇÃO฀CLÍNICA฀24.7
Glicação฀e฀Estrutura฀e฀Função฀
de฀Miosina
Hiperglicemia฀prolongada฀afeta฀a฀função฀de฀mui-
tos฀sistemas.฀Glicose฀pode฀formar฀bases฀de฀Schiff฀
com฀amino฀grupos฀livres฀em฀proteínas฀e฀alterar฀
sua฀ função.฀ Experimentos฀ in฀ vitro฀ usando฀ es-
pectroscopia฀de฀massa฀demonstram฀que฀miosina฀
também฀poderia฀ser฀glicada.฀A฀importância฀desta฀
observação฀em฀envelhecimento฀e฀diabetes฀ainda฀
não฀foi฀determinada.
Fonte:฀ Ramamurthy,฀ B.,฀ Hook,฀ P.,฀ Jones,฀ A.฀ D.฀ e฀
Larsson,฀L.฀Changes฀in฀myosin฀structure฀and฀function฀
in฀response฀to฀glycation.฀FASEB฀J.฀15:2415,฀2001.
A฀cabeça฀da฀miosina฀contém฀atividade฀de฀ATPase,฀
que฀fornece฀energia฀para฀contração,฀e฀sítios฀de฀ligação฀
de฀ actina.฀O฀fragmento฀S-1฀também฀contém฀sítios฀de฀
ligação฀para฀a฀cadeia฀leve฀essencial฀e฀a฀cadeia฀leve฀
regulatória฀que฀se฀liga฀nos฀motivos฀IQ,฀como฀mencio-
nado฀anteriormente.฀Um฀modelo฀da฀estrutura฀tridimen-
sional฀ do฀ fragmento฀ S-1฀ da฀ miosina฀ é฀ apresentado฀ na฀
Figura฀24.31.฀A฀região฀de฀ligação฀à฀actina฀localiza-se฀no฀
canto฀inferior฀direito,฀na฀região฀da฀fenda฀visível.฀
O฀fragmento฀S-1฀tem฀várias฀regiões฀estruturais฀tipo-
domínio฀com฀massas฀de฀25,฀50฀e฀20฀kDa,฀coloridos฀em฀
verde,฀vermelho฀e฀azul,฀respectivamente.฀A฀cadeia฀leve฀
essencial฀(ELC)฀e฀a฀cadeia฀leve฀regulatória฀(RLC)฀são฀
mostradas฀ em฀ amarelo฀ e฀ lilás,฀ respectivamente฀ (ver฀
Corr.฀Clín.฀24.8).
O฀sítio฀de฀ligação฀ao฀ATP,฀logo฀acima฀da฀fenda฀visível,฀
também฀é฀uma฀fenda฀aberta฀de฀cerca฀de฀13฀Å฀de฀profun-
didade฀e฀13฀Å฀de฀largura.฀É฀separada฀do฀sítio฀de฀ligação฀
FIGURA฀24.31
Um฀modelo฀de฀preenchimento฀de฀espaço฀dos฀resíduos฀de฀
aminoácidos฀no฀fragmento฀S-1฀da฀miosina.฀
Os฀domínios฀de฀25,฀50฀e฀20฀kDa฀da฀cadeia฀pesada฀são฀cinza-
escuro,฀cinza฀e฀cinza฀quase฀preto,฀respectivamente.฀As฀cadeias฀
leves฀essencial฀e฀regulatória฀são฀cinza-claro฀e฀cinza-médio,฀
respectivamente.
Reimpresso฀com฀permissão฀de฀Rayment,฀I.,฀Rypniewski,฀W.฀R.,฀
Schmidt-Base,฀K.,฀Smith,฀R.,฀et฀al.฀Science฀261:50,฀1993.฀Direitos฀
autorais฀(1993)฀AAAS.
22.01.07 19:36:31
 CAPÍTULO฀24฀฀BIOLOGIA฀MOLECULAR฀DAS฀CÉLULAS฀฀฀|฀฀฀967
Cinesina-13฀também฀é฀uma฀cinesina฀cromossômica฀
e฀está฀provavelmente฀envolvida฀no฀movimento฀mitótico฀
dos฀cromossomos.
Cinesina-14฀está฀entre฀os฀motores฀de฀extremidade-
menos฀ como฀ a฀ cinesina฀ mitótica฀ Ncd฀ em฀ Drosophila,฀
que฀funciona฀nos฀estágios฀iniciais฀da฀mitose.฀Localiza-
se฀nos฀fusos฀de฀oócitos.
Cinesinas-1฀e฀-2฀estão฀mais฀relacionadas฀com฀o฀ma-
terial฀discutido฀neste฀capítulo,฀embora฀as฀outras฀este-
jam฀associadas฀com฀aspectos฀mais฀gerais฀da฀divisão฀ce-
lular฀e฀do฀movimento฀associado฀de฀vários฀componentes฀
associados฀com฀este฀processo.
Dineína
Existem฀duas฀classes฀de฀motores฀dineínas:฀(a)฀axonê-
mica,฀que฀funciona฀na฀realização฀do฀movimento฀de฀fla-
gelos฀e฀cílios,฀e฀(b)฀citoplasmática,฀que฀efetua฀a฀distri-
buição฀ e฀ a฀ organização฀ de฀ estruturas฀ citoplasmáticas.฀
Estas฀funções฀incluem฀seleção฀e฀movimento฀de฀prote-
ínas;฀organização฀dos฀cromossomos฀durante฀vários฀es-
tágios฀ de฀ sua฀ função;฀ distribuição฀ e/ou฀ redistribuição฀
de฀ organelas฀ como฀ endossomos,฀ lisossomos฀ e฀ outros;฀
e฀transporte฀axonal฀retrógrado฀–฀isto฀é,฀transporte฀de฀
carga฀na฀direção฀oposta฀à฀da฀maioria฀das฀cinesinas.
A฀ estrutura฀ da฀ dineína฀ é฀ muito฀ mais฀ complexa฀ do฀
que฀as฀das฀outras฀duas฀classes฀de฀motores.฀Dineína฀tem฀
uma฀estrutura฀em฀anel฀plano฀de฀seis฀membros฀que฀tem,฀
no฀total,฀aproximadamente฀10฀vezes฀a฀massa฀molecular฀
das฀cinesinas.฀Uma฀representação฀esquemática฀de฀sua฀
estrutura฀é฀mostrada฀na฀Figura฀24.39.
ATP฀liga฀com฀um฀motivo฀AAA฀no฀domínio฀1.฀Sua฀liga-
ção฀e฀hidrólise฀induz฀mudanças฀conformacionais฀que฀são฀
transmitidas฀pelos฀domínios฀2-4฀para฀a฀haste฀que฀intera-
ge฀com฀microtúbulos฀e฀causa฀movimentos฀de฀passos฀de฀
24-32฀nm฀para฀uma฀dineína฀descarregada.฀O฀movimento฀
de฀dineína฀responde฀à฀carga฀de฀modo฀parecido฀com฀mu-
dança฀para฀marcha฀mais฀lenta฀e,฀com฀carga฀pesada,฀dá฀
passos฀de฀aproximadamente฀8฀nm.฀Essa฀mudança฀pare-
ce฀ estar฀ associada฀ com฀ mudanças฀ conformacionais฀ em฀
vários฀de฀seus฀outros฀domínios฀e฀com฀a฀disponibilidade฀
de฀ATP.฀Em฀condições฀de฀carga฀pesada,฀ATP฀também฀pa-
rece฀ligar฀motivos฀AAA฀no฀domínio฀3.฀Motivos฀AAA฀são฀
regiões฀conservadas฀de฀220-230฀resíduos฀de฀aminoácidos฀
que฀existem฀em฀uma฀família฀de฀proteínas฀que฀participam฀
em฀várias฀atividades฀celulares฀diferentes,฀que฀dependem฀
de฀ energia฀ de฀ hidrólise฀ de฀ ATP฀ para฀ afetar฀ suas฀ fun-
ções,฀ que฀ podem฀ incluir฀ proteólise,฀ dobramento฀ e฀ des-
dobramento฀de฀proteínas,฀metabolismo฀de฀íon฀de฀metal,฀
e฀outras฀atividades,฀além฀das฀associadas฀com฀dineína.฀O฀
nome฀do฀motivo฀AAA฀refere-se฀a฀“ATPase฀Associada฀com฀
diversas฀Atividades฀celulares”.
Note฀que฀(1)฀dineínas฀como฀motores฀são฀estrutural-
mente฀mais฀complexas฀do฀que฀miosinas฀ou฀cinesinas,฀(2)฀
estão฀ geralmente฀ envolvidas฀ em฀ movimento฀ retrógrado฀
de฀material฀celular,฀(3)฀estão฀envolvidas฀em฀vários฀outros฀
aspectos฀de฀organização฀estrutural,฀e฀(4)฀seu฀movimento฀
de฀passo฀ao฀longo฀dos฀microtúbulos฀é฀carga-dependente.
BioQ.24 967
(+) Microtúbulo (–) �1
5 4
6 Golpe de força
3
(sem carga)
2
1
ADP + Pi
ATP
Carga
ATP or ADP
�2
A
Golpe de força
A
A (sob carga)
ATP
ADP + Pi
FIGURA฀24.39
Dineína฀funciona฀como฀uma฀molécula฀motora.฀
Redesenhado฀de฀Mallik,฀R.,฀Carter,฀B.฀C.,฀Lex,฀S.฀A.,฀King,฀S.฀J.฀e฀
Gross,฀S.฀P.฀Cytoplasmic฀dynein฀functions฀as฀a฀gear฀in฀response฀
to฀load.฀Nature฀427:649,฀2004.
|
24.5฀ ฀MECANISMO฀DA฀
COAGULAÇÃO฀DO฀
SANGUE
A฀ circulação฀ do฀ sangue฀ ocorre฀ em฀ um฀ tipo฀ muito฀ es-
pecializado฀de฀sistema฀fechado฀no฀qual฀o฀volume฀do฀lí-
quido฀circulante฀é฀mantido฀quase฀constante.฀Múltiplas฀
funções฀ do฀ sistema฀ tornam฀ a฀ transferência฀ de฀ solutos฀
através฀ de฀ seus฀ limites฀ uma฀ função฀ necessária.฀ Como฀
em฀qualquer฀sistema฀de฀canos฀e฀tubos,฀vazamentos฀po-
dem฀ ocorrer฀ como฀ resultado฀ de฀ vários฀ tipos฀ de฀ agres-
sões฀e฀devem฀ser฀reparados฀para฀manter฀um฀estado฀de฀
hemostasia,฀isto฀é,฀sem฀sangramento.
Processos฀Bioquímicos฀da฀
Hemostasia
Hemostasia฀ implica฀ em฀ que฀ o฀ processo฀ de฀ formação฀
do฀ coágulo฀ (pró-coagulação,฀ designada฀ como฀ Fase฀
1)฀ esteja฀ em฀ equilíbrio฀ com฀ processos฀ de฀ parada฀ de฀
formação฀ do฀ coágulo฀ (anticoagulação,฀ Fase฀ 2)฀ e฀ de฀
dissolução฀ do฀ coágulo฀ (fibrinólise,฀ Fase฀ 3).฀ Pró-co-
agulação฀leva฀à฀produção฀de฀fibrina฀a฀partir฀de฀fibrino-
gênio฀e฀agregação฀em฀uma฀rede฀insolúvel,฀ou฀coágulo,฀
que฀recobre฀a฀área฀da฀ruptura฀e฀impede฀maior฀perda฀de฀
sangue.฀Concomitantemente,฀agregação฀de฀plaquetas฀do฀
sangue฀ocorre฀no฀local฀da฀lesão.฀Agregação฀plaquetária฀
forma฀uma฀rolha฀física฀para฀ajudar฀a฀parar฀o฀vazamento.฀
Plaquetas฀ também฀ sofrem฀ alterações฀ morfológicas฀ que฀
liberam฀(a)฀alguns฀compostos฀químicos฀que฀ajudam฀em฀
outros฀aspectos฀do฀processo฀todo,฀como฀vasoconstrição฀
para฀ reduzir฀ o฀ fluxo฀ de฀ sangue฀ para฀ a฀ área฀ e฀ (b)฀ enzi-
22.01.07 19:37:01
 CAPÍTULO฀25฀฀CICLO฀CELULAR,฀MORTE฀CELULAR฀PROGRAMADA฀E฀CÂNCER฀฀฀|฀฀฀987

PARTE฀5฀PROCESSOS฀FISIOLÓGICOS

25
(Separação de cromátides e divisão celular)
M

G2 G1 G0

S
(Duplicação do DNA)

CICLO฀CELULAR,฀MORTE฀
CELULAR฀PROGRAMADA฀E฀
CÂNCER
Richard฀M.฀Schultz

25.1฀ VISÃO฀GERAL,฀988 ฀ Metástase฀de฀células฀de฀câncer,฀999

฀ Angiogênese฀induzida฀por฀células฀de฀câncer,฀฀
25.2฀ CICLO฀CELULAR,฀988 ฀ 1000
฀ Regulação฀do฀ciclo฀celular,฀989 ฀ Múltiplas฀mutações฀são฀necessárias฀para฀formar฀฀
฀ ฀ Regulação฀de฀Rb,฀990 ฀ um฀câncer,฀1001
฀ ฀ Regulação฀de฀p53,฀991 ฀ Heterogeneidade฀genética฀e฀bioquímica฀de฀cân-฀
฀ Transdução฀de฀sinal฀de฀fator฀de฀crescimento,฀฀ ฀ ceres,฀1001
฀ 991 ฀ Agentes฀mutagênicos฀e฀promotores฀causam฀cân-฀
฀ cer,฀1004
25.3฀ APOPTOSE:฀MORTE฀CELULAR฀ ฀ Análise฀bioquímica฀de฀cânceres,฀1004
฀ PROGRAMADA,฀993
฀ Principais฀vias,฀994 BIBLIOGRAFIA,฀1005
฀ ฀ Via฀do฀receptor฀de฀morte,฀994
฀ ฀ Vias฀mitocondriais,฀995 QUESTÕES฀E฀RESPOSTAS,฀1007
฀ Apoptose฀induzida฀por฀p53,฀996
฀ Regulação฀de฀apoptose฀por฀MAPK,฀996 CORRELAÇÕES฀CLÍNICAS
฀ 25.1฀ Vírus฀Oncogênicos฀de฀DNA,฀999
25.4฀ CÂNCER,฀997 ฀ 25.2฀ Droga฀Anti-Câncer฀Molecularmente฀Dirigi-฀
฀ Oncogenes฀e฀genes฀supressores฀de฀tumor,฀997 ฀ da,฀1002
฀ Propriedades฀de฀células฀de฀câncer,฀998 ฀ 25.3฀ Causa฀Ambiental฀de฀Cânceres฀Humanos,฀฀
฀ Imortalidade฀das฀células฀de฀câncer,฀999 ฀ 1003

BioQ.25 987 22.01.07 18:41:43

 CAPÍTULO฀25฀฀CICLO฀CELULAR,฀MORTE฀CELULAR฀PROGRAMADA฀E฀CÂNCER฀฀฀|฀฀฀993
te฀um฀sinal฀por฀meio฀de฀uma฀mudança฀conformacional฀e฀
associações฀proteína-proteína.
Grb2฀contém฀ambos฀os฀domínios฀SH2฀e฀SH3.฀Liga-
ção฀de฀Grb2฀ao฀receptor฀de฀PDGF฀por฀seu฀domínio฀SH2฀
induz฀uma฀mudança฀conformacional฀que฀abre฀seus฀do-
mínios฀SH3฀para฀ligar฀uma฀região฀de฀hélice฀poliprolina฀
na฀proteína฀GEF Ras,฀que฀depois฀se฀liga฀a฀Ras฀e฀catali-
sa฀a฀troca฀de฀seu฀GDP฀ligado฀por฀GTP฀(Figura฀25.8).฀
GPT-Ras฀ é฀ a฀ forma฀ ativa฀ de฀ Ras.฀ Ras฀ é฀ uma฀ enzima฀
GTPase฀ e฀ se฀ inativa฀ por฀ catalisar฀ a฀ hidrólise฀ do฀ GTP฀
ligado฀em฀GDP.
Mutações฀no฀gene฀Ras฀que฀resultam฀em฀Ras฀consti-
tutivamente฀ ativo฀ ocorrem฀ em฀ aproximadamente฀ 30%฀
dos฀ cânceres฀ humanos.฀ As฀ mutações฀ comumente฀ en-
contradas฀são฀nos฀resíduos฀de฀aminoácidos฀12,฀13฀e฀61,฀
que฀ participam฀ da฀ atividade฀ de฀ Ras฀ GTPase,฀ de฀ modo฀
que฀Ras฀mutado฀não฀pode฀se฀desativar฀e฀permanece฀em฀
uma฀conformação฀GTP-Ras฀ativa.
No฀Ras฀normal,฀a฀atividade฀de฀Ras฀GTPase฀é฀aumen-
tada฀ 100฀ a฀ 1000฀ vezes฀ pela฀ ligação฀ de฀ Ras฀ a฀ GAPRas฀
(GAP,฀proteína฀ativadora฀de฀GTPase).฀Entretanto,฀a฀li-
gação฀de฀GAPRas฀ao฀Ras฀mutado฀cataliticamente฀inerte฀
não฀ tem฀ efeito,฀ porque฀ sua฀ atividade฀ de฀ GTPase฀ está฀
ausente.
Ras฀ também฀ precisa฀ se฀ associar฀ com฀ a฀ membra-
na฀ plasmática฀ para฀ ser฀ ativado.฀ Isto฀ é฀ conseguido฀ por฀
modificações฀ pós-tradução฀ que฀ incluem฀ remoção฀ por฀
uma฀ protease฀ do฀ tetrapeptídeo฀ C-terminal,฀ metilação฀
do฀novo฀grupo฀ácido฀carboxílico฀C-terminal฀e฀adição฀de฀
um฀grupo฀ácido฀graxo฀farnesil฀a฀uma฀cadeia฀lateral฀de฀
cisteína฀na฀extremidade฀COOH-terminal.฀Em฀algumas฀
isoformas฀de฀Ras,฀um฀segundo฀grupo฀acil฀graxo฀é฀adi-
cionado,฀perto฀da฀extremidade฀COOH-terminal.
Três฀genes฀Ras฀diferentes฀existem฀no฀homem฀–฀H-
ras,฀N-ras฀e฀K-ras฀–฀que฀produzem฀proteínas฀homólo-
gas฀de฀21฀kDa.฀As฀seqüências฀de฀aminoácidos฀de฀seus฀
primeiros฀ 85฀ resíduos฀ são฀ idênticas,฀ e฀ os฀ seguintes฀
80฀ resíduos฀ mostram฀ 85%฀ de฀ homologia,฀ mas฀ as฀ ex-
tremidades฀C-terminais฀diferem฀mais฀dramaticamen-
te.฀ Embora฀ existam฀ diferenças฀ em฀ alguns฀ dos฀ sinais฀
posteriores฀ entre฀ as฀ isoformas฀ de฀ Ras,฀ em฀ geral฀ seus฀
sinais฀ se฀ sobrepõem.฀ Estas฀ isoformas฀ são฀ caracteris-
ticamente฀ expressas฀ em฀ diferentes฀ tipos฀ celulares,฀ e฀
mutações฀nos฀resíduos฀12,฀13฀e฀61฀ativam฀constitutiva-
mente฀todas฀elas.
Como฀ ativação฀ da฀ atividade฀ de฀ Ras฀ promove฀ o฀ fe-
nótipo฀câncer,฀genes฀Ras฀são฀conhecidos฀como฀proto-
oncogenes.฀ Proto-oncogenes฀ são฀ transformados฀ em฀
oncogenes฀por฀uma฀mutação฀ativadora฀que฀promove฀
ou฀mantém฀uma฀célula฀cancerosa.฀O฀oncogene฀ras฀dá฀
continuamente฀um฀sinal฀de฀fator฀de฀crescimento฀que฀
promove฀divisão฀celular,฀em฀ausência฀de฀ativação฀an-
terior.
GTP-Ras฀transmite฀seu฀sinal฀de฀divisão฀celular฀por฀
ativação฀de฀MAP฀quinase฀quinase฀quinase฀(MAPKKK)฀
(Figura฀25.9).฀MAPKKK฀inicia฀uma฀cascata฀de฀quina-
ses฀que฀inclui฀MAPKK฀e฀MAPK.฀MAPK฀ativada฀(fosfo-
rilada)฀se฀desloca฀para฀o฀núcleo,฀onde฀fosforila฀e฀ativa฀
BioQ.25 993
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FIGURA฀25.9
GTP-Ras฀ativa฀uma฀cascata฀de฀quinases.฀
Ras-GTP฀ativa฀uma฀cascata฀de฀quinases฀resultando฀na฀
fosforilação฀e฀ativação฀da฀quinase฀terminal฀MAPK.฀MAPK฀
ativada฀entra฀no฀núcleo฀e฀fosforila฀fatores฀de฀transcrição฀que฀
regulam฀a฀expressão฀de฀proteínas฀envolvidas฀na฀fase฀S.฀MAPK฀
é฀mitógeno-ativada฀proteína฀quinase,฀MAPKK฀é฀MAP฀quinase฀
quinase,฀e฀MAPKKK฀é฀MAP฀quinase฀quinase฀quinase.
fatores฀de฀transcrição,฀como฀Jun฀e฀Fos,฀aumentando฀as-
sim฀a฀transcrição฀de฀genes฀como฀o฀fator฀de฀transcrição฀
Myc฀ e฀ as฀ ciclinas฀ de฀ G1฀ envolvidas฀ na฀ divisão฀ celular.฀
Myc฀ aumenta฀ a฀ expressão฀ de฀ muitos฀ genes฀ envolvidos฀
na฀fase฀S,฀incluindo฀as฀S-ciclinas฀e฀o฀fator฀de฀transcri-
ção฀ E2F฀ (ver฀ p.฀ 211).฀ Entretanto,฀ se฀ as฀ condições฀ não฀
forem฀adequadas฀para฀divisão฀celular,฀Myc฀pode฀iniciar฀
um฀processo฀levando฀à฀morte฀celular.
|
25.3฀ ฀APOPTOSE:฀
MORTE฀CELULAR฀
PROGRAMADA
Apoptose฀é฀a฀palavra฀grega฀para฀“folhas฀que฀caem”,฀
e฀apoptose฀descreve฀um฀processo฀bioquímico฀freqüente฀
natural฀ de฀ morte฀ celular.฀ Morte฀ apoptótica฀ é฀ necessá-
ria฀ durante฀ processos฀ de฀ desenvolvimento,฀ bem฀ como฀
para฀manter฀a฀homeostase฀de฀um฀organismo฀inteiro.฀À฀
medida฀que฀novas฀células฀são฀geradas฀no฀homem,฀mor-
te฀ de฀ um฀ número฀ semelhante฀ de฀ células฀ é฀ necessária฀
na฀mesma฀escala฀de฀tempo฀para฀manter฀um฀estado฀es-
tacionário.฀ Morte฀ apoptótica฀ difere฀ da฀ morte฀ celular฀
necrótica.฀ Na฀ última,฀ lise฀ de฀ uma฀ membrana฀ celular฀
leva฀à฀liberação฀dos฀conteúdos฀celulares฀no฀espaço฀ex-
tracelular฀e฀a฀uma฀resposta฀inflamatória,฀como฀freqüen-
temente฀acontece฀em฀infecções฀bacterianas฀ou฀virais฀e฀
em฀trauma.฀Em฀contraste,฀apoptose฀é฀freqüentemente฀
22.01.07 18:42:05
 CAPÍTULO฀25฀฀CICLO฀CELULAR,฀MORTE฀CELULAR฀PROGRAMADA฀E฀CÂNCER฀฀฀|฀฀฀997

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FIGURA฀25.14
Múltiplas฀vias฀podem฀ser฀reguladas฀por฀Ras.฀
MAPKKK฀são฀MAPK฀quinase฀quinases.฀MAPKs,฀após฀ativação฀
por฀uma฀MAPKK,฀podem฀se฀deslocar฀para฀o฀núcleo฀para฀
fosforilar฀fatores฀de฀transcrição.฀As฀quinases฀também฀podem฀
fosforilar฀proteínas฀outras,฀além฀dos฀fatores฀de฀transcrição.฀
Alvos฀alternativos฀para฀as฀quinases฀incluem฀proteínas฀
tipo-Bcl-2฀e฀p53.
sobrevivência.฀Os฀resultados฀dos฀sinais฀são฀dependen-
tes฀ do฀ tipo฀ celular.฀ Em฀ algumas฀ circunstâncias,฀ JNK฀
promove฀ morte฀ por฀ fosforilação฀ de฀ Bcl-2฀ para฀ promo-
ver฀sua฀dissociação฀da฀membrana฀mitocondrial฀(Figura฀
25.15),฀o฀que฀aumenta฀as฀concentrações฀mitocondriais฀
de฀Bak฀e฀Bax฀livres฀e฀promove฀morte฀celular.฀JNK฀tam-
bém฀ pode฀ fosforilar฀ p53,฀ tornando-a฀ mais฀ resistente฀ a฀
Mdm-2,฀resultando฀em฀um฀aumento฀na฀concentração฀de฀
p53฀e฀morte฀celular.฀Também฀a฀MAPK฀ERK,฀a฀MAPKKK฀
Raf,฀ e฀ a฀ quinase฀ Akt฀ promovem฀ sobrevivência฀ celular฀
por฀fosforilação฀da฀proteína฀facilitadora฀pró-apoptótica฀
Bad฀ou฀por฀ativação฀da฀expressão฀dos฀genes฀anti-apop-
tóticos฀ tipo-Bcl-2฀ (Figura฀ 25.15).฀ Portanto,฀ diferentes฀
quinases฀ativadas฀por฀Ras฀transmitem฀sinais฀opostos฀de฀
vida฀e฀morte,฀e฀o฀resultado฀depende฀do฀contexto฀celular฀
e฀do฀tipo฀de฀célula.
�������
25.4฀|฀CÂNCER
������
Oncogenes฀e฀Genes฀Supressores฀de฀
Tumor
�����
O฀ciclo฀celular฀e฀a฀apoptose฀são฀críticos฀para฀um฀enten-
dimento฀do฀câncer.฀Genes฀que฀codificam฀proteínas฀que฀
promovem฀ divisão฀ celular฀ ou฀ que฀ promovem฀ resistên-
�������฀��฀����������� cia฀a฀apoptose฀são฀proto-oncogenes฀(Tabela฀25.2).฀Suas฀
mutações฀ ativadoras฀ ou฀ super-expressão฀ resultam฀ em฀
atividade฀aumentada,฀o฀que฀leva฀a฀divisão฀celular฀des-
regulada฀ ou฀ resistência฀ a฀ apoptose.฀ Mutações฀ em฀ um฀
proto-oncogene฀ podem฀ convertê-lo฀ em฀ um฀ oncogene.฀
Duas฀cópias฀(ou฀alelos)฀de฀cada฀gene฀autossômico฀(i.é,฀
aqueles฀em฀cromossomos฀que฀não฀os฀cromossomos฀X฀e฀
Y)฀estão฀presentes฀no฀genoma฀de฀toda฀célula฀somática฀
[cada฀célula฀somática฀tem฀um฀alelo฀derivado฀da฀mãe฀e฀
outro฀do฀pai฀para฀cada฀gene฀autossômico].฀Uma฀muta-
ção฀ativadora฀em฀um฀único฀alelo฀de฀um฀proto-oncoge-
ne฀é฀suficiente฀para฀causar฀um฀efeito฀pró-proliferativo฀
ou฀ anti-apoptótico฀ em฀ uma฀ célula.฀ Tais฀ mutações฀ são฀
portanto฀autossômicas฀dominantes฀para฀progressão฀do฀
câncer.
Proto-oncogenes,฀ cujos฀ produtos฀ promovem฀ di-
visão฀ celular฀ ou฀ resistência฀ a฀ apoptose฀ incluem฀ genes฀
de฀ fatores฀ de฀ crescimento,฀ receptores฀ de฀ fatores฀ de฀
crescimento,฀ moléculas฀ adaptadoras฀ tipo-Grb,฀ tirosina฀
quinases฀tipo-Src,฀quinases฀das฀cascatas฀MAPK,฀Cdks,฀
ciclinas,฀CAKs,฀Cdc25,฀e฀fatores฀de฀transcrição฀(como฀
Jun,฀ Fos,฀ Myc฀ e฀ E2F)฀ que฀ aumentam฀ a฀ expressão฀ de฀

FIGURA฀25.15
��������฀������������ ��� Interação฀de฀quinases฀ativadas฀por฀Ras฀com฀proteínas฀que฀
������� ��� regulam฀apoptose.฀
S,฀sobrevive฀(via฀promove฀sobrevivência฀celular);฀D,฀morre฀(die)฀
����� (via฀promove฀morte฀celular฀apoptótica).฀ERK,฀JNK,฀Raf฀e฀Akt฀
são฀quinases฀Pi3K,฀1-fosfatidilinositol-3฀quinase.

������������
���
������
�����฀��฀��������฀������������

���
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�����฀��฀��������฀������������ ������������฀��฀�������฀��
�����������฀��฀������

BioQ.25 997 22.01.07 18:42:10

 CAPÍTULO฀25฀฀CICLO฀CELULAR,฀MORTE฀CELULAR฀PROGRAMADA฀E฀CÂNCER฀฀฀|฀฀฀1003

CORRELAÇÃO฀CLÍNICA฀25.3
Causa฀Ambiental฀de฀Cânceres฀Humanos

Fatores฀ambientais฀e฀culturais฀são฀as฀causas฀predomi-
nantes฀do฀câncer฀humano.฀Se฀estes฀fatores฀puderem฀
ser฀regulados,฀a฀incidência฀de฀câncer฀pode฀ser฀redu-
zida฀em฀mais฀de฀75%.฀Fumar฀cigarros฀é฀responsável฀
por฀ aproximadamente฀ 30%฀ das฀ mortes฀ por฀ câncer฀
nos฀EUA฀Além฀disso,฀estima-se฀que฀dieta฀pode฀pre-
venir฀o฀desenvolvimento฀de฀aproximadamente฀30%฀
dos฀cânceres฀nos฀EUA฀(estimativas฀variam฀entre฀10฀
e฀70%).฀Estes฀números฀são฀baseados฀primariamente฀
em฀dados฀epidemiológicos฀da฀incidência฀de฀tipos฀de฀
câncer฀em฀diferentes฀localizações฀geográficas,฀cultu-
ras฀e฀ambientes฀(ver฀tabela฀anexa).฀Na฀migração฀de฀
uma฀cultura฀ou฀localização฀para฀outra,฀a฀incidência฀
de฀um฀tipo฀de฀câncer฀freqüentemente฀se฀aproxima฀
à฀da฀população฀na฀nova฀cultura,฀à฀medida฀que฀os฀in-
divíduos฀ou฀seus฀descendentes฀assimilam.฀Também฀
rápidas฀mudanças฀de฀dieta฀ou฀estilo฀de฀vida฀ao฀longo฀
do฀tempo฀em฀um฀país฀mostram฀a฀importância฀destes฀
fatores฀na฀incidência฀de฀câncer.
A฀quarta฀parte฀da฀população฀americana฀que฀tem฀
maior฀quantidade฀de฀frutas฀e฀vegetais฀na฀dieta฀tem฀
uma฀ incidência฀ 30-40%฀ menor฀ de฀ muitos฀ tipos฀ de฀
câncer.฀Entretanto,฀os฀constituintes฀destes฀alimen-
tos฀que฀inibem฀a฀formação฀do฀câncer฀não฀foram฀de-
terminados.฀ Níveis฀ inadequados฀ de฀ ácido฀ fólico฀ na฀
dieta฀americana฀foram฀implicados฀como฀um฀fator฀de฀
risco฀ para฀ cânceres฀ de฀ cólon฀ e฀ de฀ mama.฀ A฀ inges-
tão฀de฀ácido฀fólico฀pode฀ser฀particularmente฀crítica฀
em฀indivíduos฀com฀um฀polimorfismo฀em฀seu฀gene฀da฀
metilenotetra-hidrofolato฀redutase,฀uma฀enzima฀en-
volvida฀no฀metabolismo฀de฀ácido฀fólico,฀que฀resulta฀
em฀atividade฀diminuída.฀Deficiência฀de฀folato฀causa฀
incorporação฀excessiva฀de฀uracil฀no฀DNA฀e฀quebras฀
cromossômicas.฀ Deficiência฀ de฀ folato฀ é฀ comum฀ em฀
alcoólatras฀e฀pode฀ser฀a฀razão฀para฀um฀aumento฀na฀
incidência฀de฀certos฀cânceres฀com฀álcool.฀A฀dieta฀e฀o฀
estilo฀de฀vida฀de฀pré-adolescentes฀afetam฀o฀início฀da฀
menarca,฀e฀início฀precoce฀de฀menarca฀e฀extensão฀do฀
período฀de฀tempo฀entre฀menarca฀e฀menopausa฀estão฀
associados฀com฀risco฀aumentado฀de฀câncer฀de฀mama฀
em฀ mulheres.฀ Obesidade฀ correlaciona-se฀ inversa-
mente฀ com฀ risco฀ de฀ câncer฀ de฀ mama฀ em฀ mulheres฀
pré-menopausa,฀e฀correlaciona-se฀positivamente฀na฀
pós-menopausa.฀ Muita฀ gordura฀ animal฀ na฀ dieta฀ foi฀
associada฀ com฀ risco฀ aumentado฀ de฀ câncer฀ de฀ có-
lon,฀ mas฀ os฀ dados฀ são฀ inconsistentes.฀ Ao฀ contrário฀
da฀ gordura฀ animal฀ total฀ na฀ dieta,฀ os฀ dados฀ podem฀
sugerir฀que฀é฀a฀razão฀entre฀gordura฀poliinsaturada฀
e฀saturada฀que฀se฀correlaciona฀com฀risco฀de฀câncer฀
cólon-retal.฀A฀incidência฀de฀câncer฀de฀cólon฀também฀
tem฀sido฀inversamente฀correlacionada฀com฀falta฀de฀
atividade฀ou฀exercício.
Estudos฀ambientais฀e฀dietéticos฀são฀difíceis,฀uma฀vez฀
que฀grandes฀populações฀devem฀ser฀estudadas฀ao฀longo฀
do฀tempo฀de฀uma฀geração,฀e฀múltiplas฀variáveis฀devem฀
ser฀ controladas.฀ Entretanto,฀ avanços฀ no฀ nosso฀ conhe-
cimento฀e฀controle฀destes฀fatores฀podem฀ter฀enormes฀
efeitos฀na฀diminuição฀da฀incidência฀de฀câncer.

Variação฀na฀Incidência฀de฀Tipo฀de฀Câncer฀em฀uma฀Comparação฀de฀Dois฀Locais
Comparação฀de฀Localização Incidência฀na฀ Incidência฀na฀ Diferença฀em฀
Localização฀1 Localização฀2 Vezes฀a฀Incidência

Pulmão New฀Orleans฀(negros)฀–฀Madras฀(Índia) 110 5,8 19

Mama Hawaii฀(havaianos)฀–฀Israel฀(não-judeus) 94 14฀ 7

Próstata Atlanta฀(negros)฀-฀China฀(Tianjin) 91 1,3 70

Colo฀uterino Brasil฀(Recife)฀–฀Israel฀(não-judeus) 83 3,0 18

Fígado China฀(Xangai)฀–฀Canadá฀(Nova฀Escócia) 34 0,7 49

Cólon Estados฀Unidos฀(Connecticut,฀brancos)฀ 34 1,8 19

–฀Índia฀(Madras)

Melanoma Austrália฀(Queensland)฀–฀Japão฀(Osaka) 31 0,2 155

*฀Incidência฀em฀número฀de฀novos฀casos฀por฀ano฀por฀100.000฀pessoas,฀ajustado฀para฀variação฀de฀idade฀com฀a฀população฀
específica.฀Dados฀retirados฀de฀Alberts,฀B.,฀Johnson,฀A.,.฀Lewis,฀J.,฀Raff,฀M.,฀Roberts,฀K.,฀e฀Watson,฀J.฀D.฀Molecular฀Biology฀of฀the฀
Cell,฀4th฀ed.฀New฀York:฀Garland,฀2002,฀Tabela฀24-2,฀que฀foi฀adaptada฀de฀DeVita,฀V.฀T.,฀Hellman,฀S.,฀e฀Rosenberg,฀S.฀A.฀(Eds.).฀
Cancer:฀Principles฀and฀Practice฀of฀Oncology,฀4th฀ed.฀Philadelphia:฀Lippincott,฀1993;฀baseado฀em฀dados฀de฀C.฀Muir฀et฀al.฀Cancer฀
Incidence฀in฀Five฀Continents,฀Vol.฀5,฀Lyon:฀International฀Agency฀for฀Research฀on฀Cancer,฀1987.฀Referências฀Gerais:฀Shibuya,฀K.,฀
Mathers,฀C.฀D.,฀Boschi-Pinto,฀C.,฀Lopez,฀A.฀D.,฀e฀Murray,฀C.฀J.฀L.฀Global฀and฀regional฀estimates฀of฀cancer฀mortality฀and฀incidence฀
by฀site:฀II.฀Results฀for฀the฀global฀burden฀of฀disease฀2000.฀BMC฀Cancer฀2:37,฀2002.฀Pisani,฀P.,฀Parkin,฀D.฀M.,฀Bray,฀F.฀e฀Ferlay,฀J.฀
Estimates฀of฀the฀worldwide฀mortality฀from฀25฀cancers฀in฀1990.฀Int.฀J.฀Cancer฀93:18,฀1999.
(continua฀na฀página฀seguinte)

BioQ.25 1003 22.01.07 18:42:17

 CAPÍTULO฀26฀฀DIGESTÃO฀E฀ABSORÇÃO฀DE฀CONSTITUINTES฀NUTRICIONAIS฀BÁSICOS฀฀฀|฀฀฀1009

PARTE฀5฀PROCESSOS฀FISIOLÓGICOS

26
2Na+
Galactose
SGLT1

Glicose

GLUT5
Frutose

DIGESTÃO฀E฀ABSORÇÃO฀DE฀
CONSTITUINTES฀
NUTRICIONAIS฀BÁSICOS
Ulrich฀Hopfer

26.1฀VISÃO฀GERAL,฀1010 ฀ Dissacarídeos฀e฀polissacarídeos฀requerem฀hidróli-฀
฀ Vários฀órgãos฀gastrointestinais฀contribuem฀para฀a฀฀ ฀ se,฀1028
฀ digestão฀de฀alimentos,฀1010 ฀ Transportadores฀de฀monossacarídeos,฀1030

26.2฀CONSIDERAÇÕES฀GERAIS,฀1012
฀ Diferentes฀locais฀de฀digestão฀intestinal,฀1012
฀ Enzimas฀digestivas฀são฀secretadas฀como฀pró-en-฀
฀ zimas,฀1013
฀ Secreção฀é฀regulada฀por฀muitos฀secretagogos,฀1014
26.3฀TRANSPORTE฀EPITELIAL,฀1016
฀ Transporte฀de฀solutos฀pode฀ser฀transcelular฀ou฀฀
฀ paracelular,฀1016
฀ Absorção฀de฀NaCl฀tem฀componentes฀ativos฀e฀pas-฀
฀ sivos,฀1017
฀ Secreção฀de฀NaCl฀depende฀da฀ATPase฀trocadora฀฀
฀ de฀Na+/K+฀contraluminal,฀1019
฀ Gradientes฀de฀concentração฀ou฀potenciais฀elétri-฀
฀ cos฀dirigem฀transporte฀de฀nutrientes,฀1021
฀ Células฀gástricas฀parietais฀secretam฀HCl,฀1023
26.4฀DIGESTÃO฀E฀ABSORÇÃO฀DE฀PROTEÍNAS,฀1024
฀ Peptidases฀garantem฀digestão฀eficiente฀de฀proteí-฀
฀ nas,฀1024
฀ Pepsinas฀catalisam฀digestão฀gástrica฀de฀proteí-฀
฀ nas,฀1024
฀ Zimogênios฀pancreáticos฀são฀ativados฀no฀intesti-฀
฀ no฀฀delgado,฀1024
฀ Peptidases฀da฀borda฀em฀escova฀e฀citoplasmáticas฀฀
฀ digerem฀peptídeos฀pequenos,฀1025
฀ Transportadores฀de฀aminoácidos฀e฀di฀e฀tripeptí-฀
฀ deos,฀1026
26.5฀DIGESTÃO฀E฀ABSORÇÃO฀DE฀CARBOIDRATOS,฀
1028
26.6฀DIGESTÃO฀E฀ABSORÇÃO฀DE฀LIPÍDEOS,฀1031
฀ Digestão฀de฀lipídeos฀requer฀vencer฀sua฀solubilida-฀
฀ de฀limitada฀em฀água,฀1031
฀ Lipídeos฀são฀digeridos฀por฀lipases฀gástrica฀e฀pan-฀
฀ creática,฀1031
฀ Micelas฀de฀ácidos฀biliares฀solubilizam฀lipídeos฀฀
฀ durante฀a฀digestão,฀1032
฀ A฀maior฀parte฀dos฀lipídeos฀absorvidos฀é฀incorpo-฀
฀ rada฀a฀quilomícrons,฀1037
26.7฀METABOLISMO฀DE฀ÁCIDOS฀BILIARES,฀1037
฀ Química฀e฀síntese฀de฀ácidos฀biliares,฀1037
฀ Transporte฀de฀ácidos฀biliares,฀1038
BIBLIOGRAFIA,฀1040
QUESTÕES฀E฀RESPOSTAS,฀1040
CORRELAÇÕES฀CLÍNICAS
฀ 26.1฀ Cloridorréia฀Familiar฀Causa฀Alcalose฀Meta-฀
฀ bólica,฀1017
฀ 26.2฀ Fibrose฀Cística,฀1020
฀ 26.3฀ Diarréias฀Toxigênicas฀Bacterianas฀e฀Terapia฀฀
฀ de฀Reposição฀de฀Eletrólitos,฀1021
฀ 26.4฀ Aminoacidúria฀Neutra:฀Doença฀de฀Hartnup,฀฀
฀ 1026
฀ 26.5฀ Deficiência฀de฀Dissacaridases,฀1030
฀ 26.6฀ Intervenções฀Farmacológicas฀para฀Evitar฀฀
฀ Absorção฀de฀Gordura฀e฀Obesidade,฀1033
฀ 26.7฀ Cálculos฀de฀Colesterol,฀1036
฀ 26.8฀ A-β-Lipoproteinemia,฀1038

BioQ.26 1009 22.01.07 18:43:16

 1012฀฀฀|฀฀฀PARTE฀5฀฀PROCESSOS฀FISIOLÓGICOS
funções,฀o฀trato฀gastrointestinal฀contém฀glândulas฀es-
pecializadas฀e฀superfícies฀epiteliais:
Órgão Função฀Principal฀em฀Digestão฀e฀
Absorção
Glândulas฀salivares Elaboração฀de฀fluido฀e฀enzimas฀
digestivas
Estômago Elaboração฀de฀HCl฀e฀enzimas฀
digestivas
Pâncreas Elaboração฀de฀NaHCO3฀e฀enzimas฀para฀
a฀digestão฀intraluminal
Fígado Elaboração฀dos฀ácidos฀biliares
Vesícula฀biliar Armazenamento฀e฀concentração฀da฀
bile
Intestino฀delgado Digestão฀terminal฀dos฀alimentos,฀
absorção฀de฀nutrientes฀e฀eletrólitos
Intestino฀grosso Absorção฀de฀eletrólitos
O฀pâncreas฀e฀o฀intestino฀delgado฀são฀essenciais฀
para฀digestão฀e฀absorção฀de฀todos฀os฀nutrientes฀básicos.฀
Felizmente,฀ambos฀os฀órgãos฀têm฀grandes฀capacidades฀
de฀ reserva.฀ Assim,฀ má฀ digestão฀ devido฀ a฀ insuficiência฀
pancreática฀ torna-se฀ um฀ problema฀ clínico฀ só฀ quando฀
a฀ taxa฀ de฀ secreção฀ pancreática฀ de฀ enzimas฀ digestivas฀
cai฀abaixo฀de฀um฀décimo฀da฀taxa฀normal.฀Secreção฀de฀
bile฀pelo฀fígado฀é฀importante฀para฀digestão฀e฀absorção฀
eficientes฀de฀lipídeos,฀que฀dependem฀de฀ácidos฀biliares.฀
Em฀contraste,฀a฀digestão฀gástrica฀de฀alimentos฀é฀não-
essencial฀para฀nutrição฀adequada,฀e฀perda฀desta฀função฀
pode฀ ser฀ compensada฀ pelo฀ pâncreas฀ e฀ pelo฀ intestino฀
delgado.฀No฀entanto,฀digestão฀gástrica฀normal฀aumenta฀
muito฀a฀facilidade฀e฀a฀eficiência฀do฀processo฀digestivo฀
total.฀O฀estômago฀ajuda฀a฀digestão฀por฀sua฀função฀de฀re-
servatório,฀sua฀capacidade฀de฀misturar,฀e฀pelo฀início฀da฀
hidrólise฀de฀proteínas฀e฀lipídeos฀que,฀embora฀pequena,฀
é฀ importante฀ para฀ estimular฀ a฀ secreção฀ pancreática฀ e฀
biliar.฀Peptídeos,฀aminoácidos฀e฀ácidos฀graxos฀liberados฀
no฀estômago฀estimulam฀a฀liberação฀coordenada฀do฀suco฀
pancreático฀e฀da฀bile฀no฀lúmen฀do฀intestino฀delgado,฀as-
segurando฀assim฀digestão฀eficiente฀dos฀alimentos.
gam฀ a฀ 30฀ g฀ de฀ proteínas฀ por฀ dia,฀ pelo฀ menos,฀ em฀ um฀
adulto฀ saudável.฀ Enzimas฀ pancreáticas,฀ juntamente฀
com฀a฀bile,฀são฀derramadas฀no฀lúmen฀da฀segunda฀parte฀
(descendente)฀do฀duodeno,฀de฀modo฀que฀a฀maior฀parte฀
da฀digestão฀intraluminal฀ocorre฀na฀porção฀distal,฀em฀
relação฀a฀este฀ponto.฀Entretanto,฀mesmo฀após฀exausti-
vo฀contato฀com฀enzimas฀gástricas฀e฀pancreáticas,฀uma฀
parte฀substancial฀dos฀carboidratos฀e฀aminoácidos฀per-
manece฀ como฀ dímeros฀ e฀ oligômeros,฀ e฀ depende,฀ para฀
continuar฀a฀quebra,฀de฀enzimas฀digestivas฀das฀células฀
epiteliais฀intestinais฀(enterócitos).
A฀ membrana฀ plasmática฀ luminal฀ dos฀ enterócitos฀ é฀
aumentada฀ por฀ uma฀ matriz฀ organizada฀ de฀ projeções,฀
chamadas฀ microvilosidades,฀ o฀ que฀ lhe฀ confere฀ a฀ apa-
rência฀de฀uma฀escova฀e฀que฀levou฀ao฀nome฀borda฀em฀
escova.฀ Esta฀ borda฀ em฀ escova฀ fornece฀ uma฀ grande฀
área,฀que฀é฀coberta฀em฀sua฀superfície฀mais฀externa฀por฀
muitas฀di-฀e฀oligossacaridases,฀amino-฀e฀dipeptida-
ses,฀e฀esterases฀(Tabela฀26.2).฀Muitas฀destas฀enzimas฀
projetam-se฀a฀até฀100฀Å฀em฀direção฀ao฀lúmen,฀ligadas฀
à฀membrana฀plasmática฀por฀um฀polipeptídeo฀de฀anco-
ragem.฀ Este฀ arranjo฀ permite฀ eficiente฀ digestão฀ na฀ su-
perfície,฀ gerando฀ moléculas฀ nutrientes฀ que฀ podem฀ ser฀
absorvidas฀pelos฀enterócitos.฀Uma฀questão฀interessante฀
é฀como฀as฀enzimas฀de฀superfície,฀que฀são฀elas฀próprias฀
proteínas,฀escapam฀da฀digestão฀por฀proteases฀solúveis.฀
Parece฀que฀sua฀grande฀glicosilação฀confere฀alguma฀pro-
teção,฀impedindo฀o฀acesso฀de฀proteases฀a฀ligações฀pep-
tídicas฀relevantes.
TABELA฀26.2฀Enzimas฀Digestivas฀da฀Superfície฀do฀
Intestino฀Delgado
Enzima฀(Nome฀Comum) Substrato
Maltase Maltose
Sacarase/isomaltase Sacarose/dextrina฀α-limite
Glucoamilase Amilose
Trealase Trealose
β-Glucosidase Glucosilceramida
Lactase Lactose
Endopeptidase Proteína฀(clivagem฀de฀
aminoácidos฀hidrofóbicos฀
internos)

|
26.2฀ ฀CONSIDERAÇÕES฀ Aminopeptidase฀A Oligopeptídeo฀com฀NH2฀
terminal฀acídico
GERAIS Aminopeptidase฀N Oligopeptídeo฀com฀NH2฀
terminal฀neutro
Dipeptidil฀aminopeptidase฀ Oligopeptídeo฀com฀X-Pro฀ou฀
Diferentes฀Locais฀de฀Digestão฀ IV X-Ala฀na฀extremidade฀NH2฀
terminal
Intestinal Leucina฀aminopeptidase Peptídeos฀com฀aminoácido฀
neutro฀na฀extremidade฀NH2฀
As฀primeiras฀etapas฀da฀quebra฀dos฀alimentos฀são฀catali- terminal
sadas฀por฀enzimas฀solúveis฀e฀ocorrem฀dentro฀do฀lúmen฀ γ-Glutamiltransferase Glutationa฀+฀aminoácido
do฀estômago฀e฀do฀intestino฀delgado.฀Enzimas฀digestivas฀
Enteropeptidase฀ Tripsinogênio
são฀ secretadas฀ pelas฀ glândulas฀ salivares,฀ estômago฀ e฀ (enteroquinase)
pâncreas,฀ sendo฀ que฀ o฀ pâncreas฀ faz฀ as฀ contribuições฀
Fosfatase฀alcalina Fosfatos฀orgânicos
maiores฀e฀mais฀importantes.฀Enzimas฀secretadas฀che-

BioQ.26 1012 22.01.07 18:43:19

 1026฀฀฀|฀฀฀PARTE฀5฀฀PROCESSOS฀FISIOLÓGICOS
duz฀aminoácidos฀livres฀e฀di฀e฀tripeptídeos,฀que฀são฀ab-
sorvidos฀ por฀ sistemas฀ transportadores฀ específicos฀
de฀ aminoácidos฀ e฀ peptídeos,฀ respectivamente.฀ Di฀ e฀
tripeptídeos฀transportados฀são฀geralmente฀hidrolisados฀
dentro฀da฀célula฀epitelial฀intestinal,฀antes฀de฀saírem฀da฀
célula.฀Isto฀explica฀por฀que฀praticamente฀só฀aminoáci-
dos฀livres฀são฀encontrados฀no฀sangue฀portal฀após฀uma฀
refeição.฀A฀ausência฀virtual฀de฀peptídeos฀era฀tida฀como฀
evidência฀de฀que฀a฀digestão฀luminal฀de฀proteínas฀pros-
seguia฀ até฀ aminoácidos฀ livres฀ antes฀ de฀ ocorrer฀ absor-
ção.฀Entretanto,฀agora฀está฀estabelecido฀que฀uma฀gran-
de฀ parte฀ do฀ nitrogênio฀ amino฀ da฀ dieta฀ é฀ absorvida฀ na฀
forma฀de฀pequenos฀peptídeos,฀com฀subseqüente฀hidróli-
se฀intracelular.฀Exceções฀são฀di฀e฀tripeptídeos฀contendo฀
prolina,฀hidroxiprolina฀ou฀aminoácidos฀incomuns,฀como฀
β-alanina฀na฀carnosina฀(β-alanil-histidina)฀ou฀anserina฀
(β-alanil-1-metil-histidina).฀Estes฀peptídeos฀são฀absor-
vidos฀e฀liberados฀intactos฀no฀sangue฀portal,฀Embora฀in-
comum,฀β-alanina฀é฀parte฀da฀dieta,฀porque฀está฀presen-
te,฀por฀exemplo,฀em฀carne฀de฀frango.
Transportadores฀de฀Aminoácidos฀e฀
Di฀e฀Tripeptídeos
O฀intestino฀delgado฀tem฀uma฀alta฀capacidade฀de฀absor-
ver฀aminoácidos฀livres฀e฀di฀e฀tripeptídeos.฀A฀maior฀par-
te฀dos฀L-aminoácidos฀pode฀ser฀transportada฀através฀do฀
epitélio฀contra฀um฀gradiente฀de฀concentração,฀embora฀
a฀necessidade฀de฀transporte฀concentrador฀in฀vivo฀não฀
seja฀óbvia,฀uma฀vez฀que฀as฀concentrações฀luminais฀são฀
geralmente฀mais฀altas฀do฀que฀os฀níveis฀plasmáticos฀de฀
0,1-0,2฀mM.฀A฀captação฀para฀dentro฀das฀células฀é฀media-
da฀por฀vários฀transportadores฀diferentes฀na฀membrana฀
luminal,฀enquanto฀a฀liberação฀no฀sangue฀é฀mediada฀por฀
vários฀transportadores฀adicionais,฀diferentes,฀na฀mem-
brana฀contraluminal฀(Tabela฀26.7).
É฀notável฀que฀várias฀mutações฀com฀perda฀de฀função฀
em฀transportadores฀de฀aminoácidos฀foram฀descobertas,฀
porque฀o฀intestino฀delgado฀e฀os฀túbulos฀proximais฀renais฀
compartilham฀ tipos฀ de฀ transportadores,฀ e฀ perda฀ renal฀
de฀qualquer฀transportador฀de฀aminoácidos฀em฀particu-
lar฀produz฀um฀resultado฀facilmente฀detectável,฀a฀saber,฀
a฀excreção฀do฀aminoácido฀na฀urina฀(aminoacidúria).฀De฀
mesma฀forma,฀a฀importância฀da฀absorção฀de฀di฀e฀tripeptí-
deos฀para฀a฀nutrição฀foi฀descoberta฀quando฀uma฀mutação฀
com฀perda฀de฀função฀no฀principal฀transportador฀de฀ami-
noácidos฀neutros฀(aminoacidúria฀neutra)฀não฀foi฀acom-
panhada฀por฀uma฀deficiência฀esperada฀nos฀aminoácidos฀
correspondentes,฀sugerindo฀pelo฀menos฀um฀transporta-
dor฀adicional฀mediando฀captação฀(ver฀Corr.฀Clín.฀26.4).
O฀mecanismo฀de฀absorção฀ativa฀de฀aminoácidos฀neu-
tros฀parece฀ser฀semelhante฀à฀discutida฀para฀a฀D-glicose฀
(ver฀ Figura฀ 26.18).฀ Um฀ co-transportador฀ Na+ -depen-
dente฀ da฀ família฀ SLC6฀ (também฀ chamado฀ NBB฀ para฀
aminoácido฀ neutro฀ da฀ borda฀ em฀ escova฀ ou฀ B0AT),฀ e฀
transportador฀facilitador,฀Na+ -independente฀(SLC3A2/
SLC7A8฀ou฀sistema฀L฀para฀preferência฀a฀leucina)฀foram฀
BioQ.26 1026
CORRELAÇÃO฀CLÍNICA฀26.4
Aminoacidúria฀Neutra:฀
Doença฀de฀Hartnup
Doença฀ de฀ Hartnup฀ é฀ um฀ defeito฀ genético฀ no฀
transportador฀ Na+ -acoplado฀ que฀ normalmen-
te฀ medeia฀ absorção฀ de฀ aminoácidos฀ neutros฀ do฀
lúmen฀do฀intestino฀delgado฀e฀dos฀túbulos฀proxi-
mais.฀Foi฀assim฀denominada฀pela฀família฀na฀qual฀
a฀ anomalia฀ foi฀ identificada฀ pela฀ primeira฀ vez,฀ e฀
o฀ homólogo฀ em฀ camundongo฀ foi฀ recentemente฀
clonado฀ (família฀ gênica฀ SLC6).฀ No฀ rim,฀ a฀ inca-
pacidade฀de฀reabsorver฀aminoácidos฀neutros฀do฀
ultrafiltrado฀leva฀à฀sua฀excreção฀na฀urina฀(ami-
noacidúria฀ neutra).฀ No฀ intestinal,฀ o฀ defeito฀ re-
sulta฀em฀má฀absorção฀de฀aminoácidos฀neutros฀da฀
dieta.฀ Os฀ sintomas฀ clínicos฀ são฀ os฀ que฀ se฀ espe-
rariam฀ para฀ uma฀ deficiência฀ de฀ triptofano,฀ com฀
características฀semelhantes฀às฀da฀pelagra฀(ver฀p.฀
1074),฀ que฀ é฀ uma฀ expressão฀ da฀ disponibilidade฀
diminuída฀de฀triptofano฀para฀conversão฀em฀nico-
tinamida.฀ Entretanto,฀ os฀ sintomas฀ são฀ variáveis฀
e฀mais฀brandos฀do฀que฀os฀esperados฀no฀bloqueio฀
total฀de฀reabsorção฀de฀aminoácidos฀neutros.฀In-
vestigações฀ de฀ pacientes฀ com฀ doença฀ de฀ Hart-
nup฀ revelaram฀ a฀ existência฀ de฀ transportadores฀
intestinais฀para฀di฀ou฀tripeptídeos,฀que฀são฀dife-
rentes฀daqueles฀para฀aminoácidos฀livres.฀PEPT1฀
(SLC5A1)฀é฀o฀principal฀transportador฀intestinais฀
para฀absorção฀de฀produtos฀peptídicos฀pequenos฀
da฀digestão.
Fonte:฀Broer,฀A.,฀Klingel,฀K.,฀Kowalczuk,฀S.,฀Rasko,฀J.฀
E.,฀Cavanaugh,฀J.฀e฀Broer,฀S.,฀Molecular฀cloning฀of฀mou-
se฀amino฀acid฀transport฀system฀B0,฀a฀neutral฀amino฀acid฀
transporter฀related฀to฀Hartnup฀disease.฀J.฀Biol.฀Chem.฀
279:24467,฀ 2004.฀ Daniel,฀ H.฀ Molecular฀ and฀ integrative฀
physiology฀of฀intestinal฀peptide฀transport.฀Annu.฀Rev.฀
Physiol.฀66:361,฀2004.฀
http://www.emedicine.com/derm/topic713.htm
funcionalmente฀caracterizados฀nas฀membranas฀luminal฀
e฀contraluminal,฀respectivamente.
O฀ transporte฀ da฀ borda฀ em฀ escova฀ para฀ outros฀ ami-
noácidos,฀ não฀ os฀ neutros,฀ é฀ energizado฀ de฀ modos฀ mais฀
complicados.฀ Por฀ exemplo,฀ aminoácidos฀ ácidos฀ podem฀
ser฀ concentrados฀ por฀ co-transporte฀ com฀ 2฀ íons฀ Na+฀ e฀
contra-transporte฀ com฀ 1฀ íon฀ K+฀ (SLC12A1),฀ enquanto฀
aminoácidos฀básicos฀dependem฀do฀co-transporte฀de฀uma฀
carga฀positiva฀e฀do฀potencial฀negativo฀do฀interior฀da฀célu-
la฀(SLC3A1/SLC7A9).฀Conclusões฀sobre฀transportadores฀
envolvidos฀em฀absorção฀dos฀aminoácidos฀alanina,฀serina฀
e฀cisteína฀estão฀associadas฀com฀alguma฀incerteza฀porque฀
estes฀aminoácidos฀são฀substratos฀de฀vários฀transporta-
dores,฀um฀dos฀quais฀parece฀catalisar฀uma฀troca฀obrigató-
ria฀aminoácido/aminoácido฀(SLC1A5).
22.01.07 18:44:07
 CAPÍTULO฀26฀฀DIGESTÃO฀E฀ABSORÇÃO฀DE฀CONSTITUINTES฀NUTRICIONAIS฀BÁSICOS฀฀฀|฀฀฀1037
Micelas฀de฀ácidos฀biliares฀contornam฀este฀problema฀
para฀os฀lipídeos,฀por฀aumentarem฀sua฀concentração฀efe-
tiva฀ na฀ camada฀ não-misturada.฀ O฀ aumento฀ na฀ veloci-
dade฀ de฀ transporte฀ é฀ quase฀ proporcional฀ ao฀ aumento฀
na฀concentração฀efetiva฀e฀pode฀ser฀1000฀vezes฀superior฀
à฀de฀ácidos฀graxos฀individuais฀solubilizados,฀de฀acordo฀
com฀as฀diferentes฀solubilidades฀em฀água฀dos฀ácidos฀gra-
xos฀ como฀ micelas฀ e฀ como฀ moléculas฀ individuais.฀ Esta฀
relação฀entre฀fluxo฀e฀concentração฀efetiva฀permanece,฀
porque฀ a฀ constante฀ de฀ difusão฀ é฀ só฀ um฀ pouco฀ menor฀
para฀micelas฀do฀que฀para฀moléculas฀de฀lipídeos฀em฀solu-
ção.฀Em฀ausência฀de฀ácidos฀biliares,฀a฀absorção฀de฀tria-
cilgliceróis฀ não฀ pára฀ completamente,฀ mas฀ a฀ eficiência฀
é฀ drasticamente฀ reduzida.฀ Absorção฀ residual฀ depende฀
da฀ baixa฀ solubilidade฀ em฀ água฀ dos฀ ácidos฀ graxos฀ li-
vres฀e฀dos฀monoacilgliceróis.฀Lipídeos฀não-absorvidos฀
chegam฀ao฀intestino฀inferior,฀onde฀uma฀pequena฀par-
te฀pode฀ser฀metabolizada฀por฀bactérias.฀A฀maior฀parte฀
dos฀ lipídeos฀ não-absorvidos,฀ entretanto,฀ é฀ excretada฀
nas฀fezes฀(esteatorréia).
Micelas฀ também฀ transportam฀ colesterol฀ e฀ as฀ vita-
minas฀lipossolúveis฀A,฀D,฀E฀e฀K฀através฀das฀camadas฀
fluidas฀ não-misturadas.฀ Secreção฀ de฀ ácidos฀ biliares฀ é฀
essencial฀para฀sua฀absorção.
A฀Maior฀Parte฀dos฀Lipídeos฀
Absorvidos฀É฀Incorporada฀a฀
Quilomícrons
Captação฀ de฀ lipídeos฀ por฀ células฀ epiteliais฀ intestinais฀
ocorre฀ por฀ difusão฀ através฀ da฀ membrana฀ plasmática.฀
Além฀disso,฀captação฀de฀ácidos฀graxos฀de฀cadeia฀longa฀é฀
aumentada฀por฀um฀transportador฀(FATP4฀ou฀SLC27A4)฀
e฀de฀colesterol฀por฀um฀canal฀(proteína฀tipoC1฀de฀Nie-
mann-Pick฀ou฀NPC1L1)฀na฀membrana฀luminal.฀Esteróis฀
também฀ podem฀ ser฀ bombeados฀ de฀ volta฀ para฀ fora฀ por฀
um฀transportador฀ABC฀(ver฀p.฀479)฀consistindo฀de฀dois฀
meios-transportadores฀(ABCG5฀e฀ABCG8)฀e฀uma฀parte฀
do฀colesterol฀é฀realmente฀devolvida฀ao฀compartimento฀
luminal.฀Exportação฀de฀esteróis฀por฀transportador฀ABC฀
é฀particularmente฀importante฀para฀rejeitar฀esteróis฀de฀
plantas;฀normalmente,฀esteróis฀de฀plantas฀não฀são฀en-
contrados฀no฀soro.฀Mutações฀com฀perda฀de฀função฀em฀
qualquer฀ dos฀ meios-transportadores฀ estão฀ associadas฀
com฀uma฀elevação฀no฀soro฀do฀esterol฀de฀planta฀sintoste-
rol฀(fitosterolemia฀ou฀sitosterolemia).
Absorção฀é฀virtualmente฀completa฀para฀ácidos฀gra-
xos฀ e฀ monoacilgliceróis,฀ que฀ são฀ ligeiramente฀ solúveis฀
em฀água.฀É฀menos฀eficiente฀para฀lipídeos฀insolúveis฀em฀
água.฀Por฀exemplo,฀apenas฀30-40%฀do฀colesterol฀da฀die-
ta฀é฀geralmente฀absorvido.
Dentro฀ das฀ células฀ epiteliais฀ que฀ fazem฀ absorção,฀ o฀
destino฀dos฀ácidos฀graxos฀absorvidos฀depende฀do฀com-
primento฀da฀cadeia.฀Ácidos฀graxos฀de฀cadeias฀curtas฀
ou฀médias฀(≤10฀átomos฀de฀carbono)฀ou฀seus฀monoacil-
gliceróis฀ são฀ ligados฀ a฀ uma฀ proteína฀ citosólica฀ que฀ liga฀
ácido฀graxo฀(FAB฀intestinal฀o฀I-FABP)฀e฀são฀transporta-
BioQ.26 1037
dos฀ para฀ o฀ retículo฀ endoplasmático,฀ onde฀ são฀ converti-
dos฀em฀triacilgliceróis.฀Glicerol฀para฀este฀processo฀é฀de-
rivado฀ dos฀ 2-monoacilgliceróis฀ absorvidos฀ e,฀ em฀ menor฀
grau,฀da฀glicose.฀Colesterol฀é฀esterificado฀pela฀colesterol฀
aciltransferase.฀ Os฀ triacilgliceróis฀ recém-sintetizados฀ e฀
os฀colesteril฀ésteres฀formam฀glóbulos฀lipídicos฀aos฀quais฀
fosfolipídeos฀ e฀ apolipoproteínas฀ adsorvem.฀ Os฀ glóbu-
los฀são฀chamados฀quilomícrons฀porque฀podem฀crescer฀
até฀ vários฀ micrômetros฀ e฀ diâmetro,฀ e฀ deixam฀ o฀ intesti-
no฀ pelos฀ vasos฀ linfáticos฀ (quilo฀ =฀ linfa฀ leitosa฀ derivada฀
do฀grego฀chylos,฀que฀significa฀suco).฀passam฀através฀da฀
célula฀ para฀ o฀ sangue฀ portal,฀ sem฀ modificação.฀ Ácidos฀
graxos฀de฀cadeia฀longa฀(>12฀átomos฀de฀carbono)฀são฀
ligados฀a฀uma฀proteína฀citoplasmática฀de฀ligação฀a฀ácidos฀
graxos฀(FABP฀intestinal฀ou฀I-FABP,฀intestinal฀fatty-acid฀
binding฀ protein)฀ e฀ são฀ transportados฀ para฀ o฀ retículo฀
endoplasmático,฀ onde฀ são฀ convertidos฀ novamente฀ em฀
triacilgliceróis.฀Quilomícrons฀são฀sintetizados฀no฀lúmen฀
do฀retículo฀endoplasmático,฀de฀onde฀migram฀pelo฀Golgi฀e฀
depois฀para฀vesículas฀e฀para฀a฀membrana฀contraluminal.฀
São฀liberados฀no฀espaço฀intercelular฀por฀fusão฀destas฀ve-
sículas฀com฀a฀membrana฀plasmática.฀É฀interessante฀que฀
quilomícrons฀não฀entram฀no฀espaço฀capilar฀e฀na฀veia฀por-
ta,฀mas฀sim฀viajam฀pelos฀vasos฀linfáticos฀intestinais฀(ou฀
lacteals)฀e฀o฀ducto฀torácico฀para฀o฀sistema฀venoso฀sistê-
mico.฀As฀apolipoproteínas฀intestinais฀são฀designadas฀por฀
A-1฀e฀B48฀(ver฀Corr.฀Clín.฀26.8);฀são฀diferentes฀daquelas฀
do฀fígado,฀com฀funções฀semelhantes฀(ver฀p.฀698).
Enquanto฀ ácidos฀ graxos฀ de฀ cadeia฀ média฀ da฀ dieta฀
chegam฀ao฀fígado฀diretamente฀com฀o฀sangue฀portal,฀áci-
dos฀graxos฀de฀cadeia฀longa฀chegam฀primeiro฀ao฀tecido฀
adiposo฀e฀ao฀músculo฀via฀circulação฀sistêmica,฀antes฀de฀
entrarem฀em฀contato฀com฀o฀fígado.฀Células฀adiposas฀e฀
musculares฀captam฀grandes฀quantidades฀de฀lipídeos฀da฀
dieta฀para฀armazenamento฀ou฀metabolismo.฀Um฀atalho฀
sem฀passar฀pelo฀fígado฀pode฀ter฀evoluído฀para฀proteger฀
este฀órgão฀da฀sobrecarga฀lipídica฀após฀uma฀refeição.
O฀ manuseio฀ diferencial฀ de฀ ácidos฀ graxos฀ de฀ cadeia฀
média฀e฀longa฀por฀células฀intestinais฀pode฀ser฀explorado฀
para฀fornecer฀ao฀fígado฀nutrientes฀altamente฀calóricos,฀
na฀forma฀de฀ácidos฀graxos.฀Ácidos฀graxos฀de฀cadeia฀cur-
ta฀e฀média฀têm฀cheiro฀e฀gosto฀rançoso,฀e฀não฀são฀muito฀
palatáveis;฀entretanto,฀triacilgliceróis฀que฀contêm฀estes฀
ácidos฀graxos฀são฀bastante฀palatáveis฀e฀podem฀ser฀usa-
dos฀como฀parte฀da฀dieta.฀Ácidos฀graxos฀de฀cadeia฀curta฀
são฀ produzidos฀ fisiologicamente,฀ particularmente฀ no฀
cólon,฀por฀bactérias,฀a฀partir฀de฀carboidratos฀residuais.฀
Estes฀ácidos฀graxos฀são฀absorvidos฀no฀sangue฀portal.
|
26.7฀ ฀METABOLISMO฀DE฀
ÁCIDOS฀BILIARES
Química฀e฀Síntese฀de฀Ácidos฀Biliares
Ácidos฀ biliares฀ são฀ sintetizados฀ em฀ células฀ do฀ fígado฀
(hepatócitos)฀a฀partir฀de฀colesterol,฀secretados฀na฀bile฀
juntamente฀ com฀ fosfolipídeos,฀ e฀ modificados฀ por฀ enzi-
mas฀bacterianas฀no฀lúmen฀intestinal.
22.01.07 18:44:59
 CAPÍTULO฀27฀฀PRINCÍPIOS฀DE฀NUTRIÇÃO฀I:฀MACRONUTRIENTES฀฀฀|฀฀฀1043
PARTE฀5฀PROCESSOS฀FISIOLÓGICOS
27
PRINCÍPIOS฀DE฀NUTRIÇÃO฀I:
MACRONUTRIENTES
Stephen฀G.฀Chaney
27.1฀ VISÃO฀GERAL,฀1044
27.2฀ METABOLISMO฀ENERGÉTICO,฀1044
฀ Conteúdo฀energético฀dos฀alimentos฀é฀medido฀em฀฀
฀ quilocalorias,฀1044
฀ Gasto฀energético฀é฀influenciado฀por฀quatro฀fato-฀
฀ res,฀1044
27.3฀ METABOLISMO฀DE฀PROTEÍNAS,฀1045
฀ Proteínas฀da฀dieta฀cumprem฀muitas฀funções฀฀
฀ incluindo฀produção฀de฀energia,฀1045
฀ Balanço฀de฀nitrogênio฀relaciona฀ingestão฀com฀฀
฀ excreção฀de฀nitrogênio,฀1045
฀ Aminoácidos฀essenciais฀devem฀estar฀presentes฀฀
฀ na฀dieta,฀1045
฀ Economia฀de฀proteínas฀está฀relacionada฀com฀o฀฀
฀ conteúdo฀de฀carboidratos฀e฀gorduras,฀1046
฀ Necessidades฀de฀proteína฀para฀adulto฀normal,฀฀
฀ 1046
฀ Necessidades฀de฀proteína฀aumentam฀durante฀฀
฀ crescimento฀e฀doenças,฀1047
27.4฀ DESNUTRIÇÃO฀PROTÉICO-ENERGÉTICA,฀1048
27.5฀ EXCESSIVA฀INGESTÃO฀PROTÉICO-
ENERGÉTICA,฀1050
฀ Obesidade฀tem฀componentes฀dietéticos฀e฀genéti-฀
฀ cos,฀1050
฀ Obesidade฀tem฀implicações฀significativas฀para฀a฀฀
฀ saúde,฀1050
27.6฀ CARBOIDRATOS,฀1051
27.7฀ GORDURAS,฀1051
BioQ.27 1043
27.8฀ FIBRAS,฀1052
27.9฀ COMPOSIÇÃO฀DOS฀MACRONUTRIENTES฀DA฀
DIETA,฀1054
฀ Composição฀da฀dieta฀afeta฀colesterol฀do฀soro,฀฀
฀ 1054
฀ Carboidratos,฀índice฀glicêmico฀e฀carga฀glicêmica,฀฀
฀ 1056
฀ Mistura฀de฀proteínas฀vegetais฀e฀animais฀satisfaz฀฀
฀ as฀necessidades฀nutricionais฀de฀proteína,฀1056
฀ Fibra฀de฀fontes฀variadas฀é฀desejável,฀1057
฀ Recomendações฀dietéticas,฀1057
BIBLIOGRAFIA,฀1059
QUESTÕES฀E฀RESPOSTAS,฀1060
CORRELAÇÕES฀CLÍNICAS
฀ 27.1฀ Dietas฀Vegetarianas฀e฀Necessidades฀Protéi-฀
฀ co-Energéticas฀para฀Crianças,฀1047
฀ 27.2฀ Ingestão฀de฀Proteínas฀na฀Dieta฀e฀Doença฀฀
฀ Renal,฀1048
฀ 27.3฀ Oferecendo฀Proteínas฀e฀Calorias฀Adequadas฀฀
฀ a฀Pacientes฀Hospitalizados,฀1049
฀ 27.4฀ Carga฀de฀Carboidratos฀e฀Resistência฀Atléti-฀
฀ ca,฀1052
฀ 27.5฀ Dietas฀Ricas฀em฀Carboidratos฀Versus฀Dietas฀฀
฀ Ricas฀em฀Gorduras฀para฀Diabéticos,฀1053
฀ 27.6฀ Ácidos฀Graxos฀Poliinsaturados฀e฀Fatores฀de฀฀
฀ Risco฀para฀Doença฀Cardíaca,฀1055
฀ 27.7฀ Adaptação฀Metabólica:฀Relação฀entre฀In-฀
฀ gestão฀de฀Carboidratos฀e฀Triacilgliceróis฀no฀฀
฀ Soro,฀1059
22.01.07 18:46:45
 CAPÍTULO฀27฀฀PRINCÍPIOS฀DE฀NUTRIÇÃO฀I:฀MACRONUTRIENTES฀฀฀|฀฀฀1045
correr฀mais฀de฀uma฀hora฀para฀queimar฀as฀calorias฀pre-
sentes฀em฀um฀pedaço฀de฀torta฀de฀maçã.
Exercício฀regular฀aumenta฀a฀taxa฀de฀metabolismo฀
basal,฀ permitindo฀ que฀ calorias฀ sejam฀ queimadas฀ mais฀
rapidamente,฀24฀horas฀por฀dia.฀Um฀programa฀de฀exer-
cícios฀ regulares฀ deve฀ ser฀ planejado฀ para฀ aumentar฀ a฀
massa฀muscular฀magra฀e฀deve฀ser฀repetido฀3-5฀dias฀por฀
semana,฀mas฀não฀precisa฀ser฀exercício฀aeróbico฀para฀ter฀
efeito฀sobre฀a฀taxa฀de฀metabolismo฀basal.฀Para฀um฀indi-
víduo฀idoso฀ou฀enfermo,฀mesmo฀caminhada฀diária฀pode฀
ajudar฀a฀aumentar฀a฀um฀pouco฀a฀taxa฀de฀metabolismo฀
basal.
Níveis฀hormonais฀também฀são฀importantes,฀uma฀vez฀
que฀ tiroxina,฀ hormônios฀ sexuais,฀ hormônio฀ de฀ cresci-
mento฀e,฀em฀menor฀grau,฀epinefrina฀e฀cortisol฀aumen-
tam฀BMR.฀Os฀efeitos฀da฀epinefrina฀e฀do฀cortisol฀prova-
velmente฀ explicam,฀ em฀ parte,฀ porque฀ estresse฀ severo฀
e฀ trauma฀ importante฀ aumentam฀ significativamente฀ as฀
necessidades฀energéticas.฀Finalmente,฀a฀própria฀inges-
tão฀ energética฀ tem฀ uma฀ relação฀ inversa฀ com฀ o฀ gasto,฀
porque฀durante฀períodos฀de฀jejum฀ou฀semijejum,฀BMR฀
pode฀cair฀a฀até฀50%.฀Isto฀é฀de฀grande฀valor฀para฀sobrevi-
vência฀em฀casos฀de฀genuína฀falta฀de฀alimento,฀mas฀não฀
ajuda฀ muito฀ a฀ pessoa฀ que฀ quer฀ perder฀ peso฀ com฀ uma฀
dieta฀de฀restrição฀calórica.
|
27.3฀ ฀ METABOLISMO฀DE฀
PROTEÍNAS
Proteínas฀da฀Dieta฀Cumprem฀Muitas฀
Funções฀Incluindo฀Produção฀de฀
Energia
Proteína฀ carrega฀ certa฀ mística฀ como฀ alimento฀ de฀
“construção฀ do฀ corpo”.฀ Embora฀ seja฀ componente฀ es-
trutural฀ essencial฀ de฀ todas฀ as฀ células,฀ é฀ também฀ im-
portante฀ para฀ manutenção฀ de฀ secreções฀ essenciais,฀
como฀enzimas฀digestivas฀e฀hormônios฀peptídicos฀e฀pro-
téicos.฀ Proteína฀ também฀ é฀ necessária฀ para฀ síntese฀ de฀
proteínas฀plasmáticas,฀que฀são฀essenciais฀para฀manter฀
equilíbrio฀osmótico,฀transporte฀de฀substâncias฀no฀san-
gue฀e฀manutenção฀da฀imunidade.฀Entretanto,฀o฀adulto฀
norte-americano฀ médio฀ consome฀ muito฀ mais฀ proteína฀
do฀ que฀ o฀ necessário฀ para฀ desempenhar฀ estas฀ funções฀
essenciais.฀O฀excesso฀de฀proteína฀é฀tratado฀como฀uma฀
fonte฀de฀energia,฀com฀aminoácidos฀glucogênicos฀sendo฀
convertidos฀em฀glicose฀e฀aminoácidos฀cetogênicos,฀em฀
ácidos฀graxos฀e฀cetoácidos.฀Ambos฀os฀tipos฀de฀aminoá-
cidos฀são฀eventualmente฀convertidos฀em฀triacilglicerol฀
no฀tecido฀adiposo,฀se฀os฀suprimentos฀de฀gordura฀e฀car-
boidratos฀já฀forem฀adequados฀para฀suprir฀as฀necessida-
des฀energéticas.฀Assim,฀para฀a฀maioria฀de฀nós,฀a฀única฀
construção฀corporal฀obtida฀com฀dietas฀ricas฀em฀proteí-
nas฀é฀no฀tecido฀adiposo.
Tem฀sido฀comum฀dizer฀que฀o฀corpo฀não฀tem฀depósitos฀
para฀armazenamento฀de฀proteína฀e,฀portanto,฀proteína฀
BioQ.27 1045
adequada฀na฀dieta฀deve฀ser฀fornecida฀em฀todas฀as฀refei-
ções.฀Entretanto,฀na฀realidade,฀isto฀não฀é฀muito฀correto.฀
Embora฀não฀exista฀uma฀classe฀separada฀de฀proteínas฀de฀
“armazenamento”,฀existe฀certa฀percentagem฀da฀proteí-
na฀do฀corpo฀que฀sofre฀um฀processo฀constante฀de฀quebra฀
e฀síntese.฀No฀estado฀de฀jejum,฀a฀quebra฀desta฀proteína฀
aumenta,฀ e฀ os฀ aminoácidos฀ resultantes฀ são฀ utilizados฀
para฀produção฀de฀glicose,฀síntese฀de฀outros฀compostos฀
nitrogenados฀ não-proteínas,฀ e฀ das฀ proteínas฀ plasmáti-
cas฀ e฀ secretórias฀ essenciais฀ mencionadas฀ acima.฀ Mes-
mo฀no฀estado฀alimentado,฀parte฀destes฀aminoácidos฀é฀
utilizada฀para฀produção฀de฀energia฀e฀como฀precursores฀
biossintéticos.฀Assim,฀o฀turnover฀de฀proteínas฀do฀corpo฀
é฀um฀processo฀normal฀–฀e฀uma฀característica฀essencial฀
do฀assim฀chamado฀balanço฀de฀nitrogênio.
Balanço฀de฀Nitrogênio฀Relaciona฀
Ingestão฀com฀Excreção฀de฀
Nitrogênio
Balanço฀ de฀ nitrogênio฀ (Figura฀ 27.2)฀ é฀ uma฀ relação฀
entre฀ingestão฀de฀nitrogênio฀(principalmente฀na฀forma฀
de฀proteínas)฀e฀excreção฀de฀nitrogênio฀(principalmen-
te฀na฀forma฀de฀proteína฀não-digerida฀nas฀fezes฀e฀uréia฀e฀
amônia฀na฀urina).฀Um฀adulto฀normal฀está฀em฀equilíbrio฀
de฀nitrogênio,฀com฀perdas฀exatamente฀equilibradas฀por฀
ingestão.฀Balanço฀de฀nitrogênio฀negativo฀resulta฀de฀in-
gestão฀inadequada฀de฀proteína,฀uma฀vez฀que฀os฀amino-
ácidos฀ utilizados฀ para฀ energia฀ e฀ reações฀ de฀ biossínte-
se฀ não฀ são฀ substituídos.฀ Isto฀ também฀ ocorre฀ em฀ lesão฀
quando฀há฀destruição฀dos฀tecidos,฀e฀em฀traumas฀graves฀
ou฀doenças,฀quando฀resposta฀adaptativa฀do฀corpo฀causa฀
catabolismo฀aumentado฀de฀proteína.฀Balanço฀de฀nitro-
gênio฀ positivo฀ ocorre฀ quando฀ há฀ um฀ aumento฀ final฀ na฀
proteína฀do฀corpo,฀como฀em฀crianças฀em฀crescimento,฀
mulheres฀grávidas฀ou฀adultos฀convalescentes.
Aminoácidos฀Essenciais฀Devem฀Estar฀
Presentes฀na฀Dieta
Vários฀ fatores฀ devem฀ ser฀ considerados,฀ além฀ da฀ quan-
tidade฀ de฀ proteína฀ na฀ dieta.฀ Um฀ é฀ o฀ complemento฀ de฀
aminoácidos฀ essenciais฀ ingeridos.฀ Aminoácidos฀ es-
senciais฀são฀aminoácidos฀que฀não฀podem฀ser฀sintetiza-
dos฀pelo฀corpo฀(Tabela฀27.2).฀Se฀apenas฀um฀destes฀ami-
noácidos฀ essenciais฀ estiver฀ faltando฀ na฀ dieta,฀ o฀ corpo฀
não฀poderá฀sintetizar฀novas฀proteínas฀para฀substituir฀a฀
perdida฀ no฀ turnover฀ normal,฀ e฀ balanço฀ de฀ nitrogênio฀
negativo฀resulta฀(Figura฀27.2).
Obviamente,฀o฀complemento฀de฀aminoácidos฀essen-
ciais฀na฀proteína฀da฀dieta฀determina฀o฀quanto฀ela฀pode฀
ser฀usada฀pelo฀corpo.
A฀ maioria฀ das฀ proteínas฀ animais฀ contém฀ todos฀ os฀
aminoácidos฀ essenciais,฀ mais฀ ou฀ menos฀ nas฀ quantida-
des฀ necessárias฀ ao฀ corpo฀ humano.฀ Proteínas฀ vegetais,฀
por฀ outro฀ lado,฀ freqüentemente฀ não฀ têm฀ um฀ ou฀ mais฀
aminoácidos฀essenciais฀e฀podem,฀em฀alguns฀casos,฀ser฀
22.01.07 18:46:50
 1052฀฀฀|฀฀฀PARTE฀5฀฀PROCESSOS฀FISIOLÓGICOS
CORRELAÇÃO฀CLÍNICA฀27.4
Carga฀de฀Carboidratos฀e฀Resistência฀Atlética
A฀ prática฀ de฀ dar฀ uma฀ carga฀ de฀ carboidratos฀ vem฀
de฀observações฀feitas฀no฀início฀da฀década฀de฀1960฀
de฀que฀a฀resistência฀durante฀exercício฀vigoroso฀era฀
limitada฀primariamente฀pelos฀estoques฀de฀glicogê-
nio฀ muscular.฀ Claro,฀ glicogênio฀ não฀ é฀ a฀ única฀ fon-
te฀de฀energia฀para฀o฀músculo.฀Ácidos฀graxos฀livres฀
aumentam฀no฀sangue฀durante฀exercício฀vigoroso฀e฀
são฀utilizados฀pelo฀músculo,฀juntamente฀com฀seus฀
estoques฀ de฀ glicogênio.฀ Uma฀ vez฀ que฀ o฀ glicogênio฀
tenha฀se฀esgotado,฀entretanto,฀o฀músculo฀não฀pode฀
depender฀inteiramente฀de฀ácidos฀graxos฀livres฀sem฀
se฀ cansar฀ rapidamente,฀ provavelmente฀ porque฀ o฀
músculo฀fica฀cada฀vez฀mais฀hipóxico฀durante฀exer-
cício฀vigoroso.฀Enquanto฀glicogênio฀é฀utilizado฀ae-
robicamente฀ e฀ anaerobicamente,฀ ácidos฀ graxos฀ só฀
podem฀ser฀utilizados฀aerobicamente.฀Em฀condições฀
anaeróbicas,฀ ácidos฀ graxos฀ não฀ podem฀ fornecer฀
ATP฀em฀velocidade฀suficiente฀para฀servir฀como฀úni-
ca฀fonte฀de฀energia.
A฀prática฀de฀dar฀uma฀carga฀de฀carboidratos฀para฀
aumentar฀ as฀ reservas฀ de฀ glicogênio฀ foi฀ introduzida฀
para฀atletas฀de฀enduro฀e฀outras฀provas฀de฀resistên-
cia.฀O฀regime฀de฀carga฀de฀carboidratos฀original฀con-
sistia฀de฀um฀período฀de฀3฀a฀4฀dias฀de฀exercício฀pesa-
do฀com฀uma฀dieta฀pobre฀em฀carboidratos,฀seguidos฀
por฀ 1-2฀ dias฀ de฀ exercício฀ leve฀ com฀ dieta฀ rica฀ em฀
carboidratos.฀ O฀ período฀ inicial฀ de฀ baixo฀ carboidra-
to฀e฀alta฀demanda฀energética฀causava฀uma฀depleção฀
das฀reservas฀musculares฀de฀glicogênio.฀A฀mudança฀
subseqüente฀ para฀ uma฀ dieta฀ rica฀ em฀ carboidratos฀
resultava฀na฀produção฀de฀níveis฀acima฀do฀normal฀de฀
Fonte:฀Lambert,฀E.฀V.฀e฀Goedecke,฀J.฀H.฀The฀role฀of฀dietary฀micronutrients฀in฀optimizing฀endurance฀performance.฀
Curr.฀Sports฀Med.฀Rep.฀2:194,฀2003.฀Hargreaves,฀M.,฀Hawley,฀J.฀A.฀e฀Jeukendrup,฀A.฀Pre-exercise฀carbohydrate฀and฀
fat฀ingestion:฀Effects฀on฀metabolism฀and฀performance.฀J.฀Sports฀Sci.฀22:31,฀2004.฀Burke,฀L.฀M.,฀Kiens,฀B.฀e฀Ivey,฀J.฀L.฀
Carbohydrates฀and฀fat฀for฀training฀and฀recovery.฀J.฀Sports฀Sci.฀22:15,฀2004.
de฀ácidos฀graxos฀essenciais฀é฀uma฀dermatite฀com฀des-
camação.฀Deficiência฀de฀EFAs฀é฀muito฀rara฀nos฀Estados฀
Unidos,฀ocorrendo฀primariamente฀em฀bebês฀prematuros฀
em฀peso฀alimentados฀com฀fórmulas฀artificiais฀desprovi-
das฀de฀EFA฀e฀em฀pacientes฀hospitalizados฀mantidos฀em฀
alimentação฀totalmente฀parenteral฀por฀longos฀períodos.฀
Na฀outra฀extremidade,฀há฀preocupação฀de฀que฀excesso฀
de฀gordura฀na฀dieta฀cause฀elevação฀de฀lipídeos฀do฀soro฀
e,฀assim,฀risco฀aumentado฀de฀doença฀cardíaca.
Estudos฀recentes฀sugerem฀que฀dietas฀ricas฀em฀gor-
dura฀estejam฀associadas฀com฀risco฀aumentado฀de฀cân-
cer฀de฀cólon,฀mama฀e฀próstata,฀mas฀não฀está฀claro฀se฀o฀
risco฀de฀câncer฀está฀associado฀com฀ingestão฀de฀gordura฀
per฀ se฀ ou฀ com฀ o฀ excesso฀ de฀ calorias฀ associado฀ a฀ uma฀
dieta฀ rica฀ em฀ gorduras.฀ Estudos฀ em฀ animais฀ sugerem฀
BioQ.27 1052
insulina฀ e฀ hormônio฀ de฀ crescimento,฀ e฀ as฀ reservas฀
de฀glicogênio฀chegavam฀a฀quase฀duas฀vezes฀as฀quan-
tidades฀normais.฀Esta฀prática฀realmente฀aumentava฀
significativamente฀a฀resistência.฀Em฀um฀estudo,฀in-
divíduos฀em฀teste฀com฀dieta฀rica฀em฀gordura฀e฀prote-
ína฀tinham฀menos฀do฀que฀1,6฀g฀de฀glicogênio฀por฀100฀
g฀ de฀ músculo฀ e฀ conseguiam฀ realizar฀ uma฀ carga฀ de฀
trabalho฀padronizado฀por฀apenas฀60฀min.฀Quando฀os฀
mesmos฀indivíduos฀consumiram฀uma฀dieta฀rica฀em฀
carboidratos฀por฀3฀dias,฀suas฀reservas฀de฀glicogênio฀
aumentaram฀para฀4฀g฀por฀100฀g฀de฀músculo,฀e฀a฀mes-
ma฀carga฀de฀trabalho฀pôde฀ser฀realizada฀por฀até฀4฀h.
Embora฀ a฀ técnica฀ evidentemente฀ funcionasse,฀
os฀ atletas฀ freqüentemente฀ se฀ sentiam฀ letárgicos฀ e฀
irritáveis฀durante฀a฀fase฀pobre฀em฀carboidratos฀do฀
regime,฀e฀a฀dieta฀rica฀em฀gordura฀estava฀em฀desa-
cordo฀ com฀ as฀ recomendações฀ atuais฀ para฀ saúde.฀
Estudos฀ recentes฀ indicam฀ que฀ o฀ consumo฀ regular฀
de฀uma฀dieta฀rica฀em฀carboidratos฀complexos฀e฀po-
bre฀em฀gordura฀durante฀o฀treinamento฀aumenta฀as฀
reservas฀ de฀ glicogênio,฀ sem฀ mudanças฀ súbitas฀ de฀
dieta.฀Recomendações฀atuais฀são฀de฀que฀atletas฀de฀
provas฀de฀resistência฀consumam฀uma฀dieta฀rica฀em฀
carboidratos฀(com฀ênfase฀em฀carboidratos฀comple-
xos)฀durante฀o฀treinamento.฀Depois,฀a฀ingestão฀de฀
carboidratos฀ é฀ aumentada฀ ainda฀ mais฀ (para฀ 70%฀
das฀calorias)฀e฀o฀exercício฀é฀diminuído฀durante฀os฀
2-3฀dias฀que฀antecedem฀um฀evento฀atlético.฀Isto฀au-
menta฀as฀reservas฀de฀glicogênio฀muscular฀até฀níveis฀
comparáveis฀aos฀descritos฀anteriormente฀no฀regime฀
de฀carga฀de฀carboidratos.
que฀ácidos฀graxos฀poliinsaturados฀da฀série฀ω-6฀possam฀
ser฀mais฀tumorigênicos฀do฀que฀outros฀ácidos฀graxos฀in-
saturados.฀A฀razão฀para฀isso฀é฀desconhecida,฀mas฀suge-
riu-se฀que฀prostaglandinas฀derivadas฀de฀ácidos฀graxos฀
ω-6฀possam฀estimular฀progressão฀de฀tumores.
27.8฀|฀ FIBRAS
Fibras฀ da฀ dieta฀ compreendem฀ os฀ componentes฀ do฀ ali-
mento฀ que฀ não฀ podem฀ ser฀ quebrados฀ por฀ enzimas฀ di-
gestivas฀humanas.฀É฀incorreto,฀entretanto,฀assumir฀que฀
fibras฀ são฀ não-digeridas,฀ uma฀ vez฀ que฀ algumas฀ fibras฀
são,฀de฀fato,฀quebradas,฀pelo฀menos฀parcialmente,฀por฀
bactérias฀ intestinais.฀ Nosso฀ conhecimento฀ atual฀ das฀
22.01.07 18:46:56
 CAPÍTULO฀27฀฀PRINCÍPIOS฀DE฀NUTRIÇÃO฀I:฀MACRONUTRIENTES฀฀฀|฀฀฀1059
CORRELAÇÃO฀CLÍNICA฀27.7
Adaptação฀Metabólica:฀Relação฀entre฀Ingestão฀de฀Carboidratos฀e฀
Triacilgliceróis฀no฀Soro
Quando฀se฀avalia฀a฀literatura฀de฀nutrição,฀é฀importante฀
lembrar฀que฀a฀maioria฀dos฀testes฀clínicos฀é฀de฀duração฀re-
lativamente฀curta฀(2-6฀semanas),฀enquanto฀algumas฀adap-
tações฀ metabólicas฀ podem฀ ser฀ consideravelmente฀ mais฀
demoradas.฀ Portanto,฀ mesmo฀ estudos฀ clínicos฀ aparente-
mente฀bem฀projetados฀podem฀levar฀a฀conclusões฀erradas,฀
que฀serão฀repetidas฀na฀literatura฀popular฀por฀anos฀a฀fio.฀Por฀
exemplo,฀vários฀estudos฀realizados฀nas฀décadas฀de฀1960฀e฀
1970฀ tentaram฀ verificar฀ os฀ efeitos฀ de฀ ingestão฀ de฀ carboi-
dratos฀sobre฀os฀níveis฀de฀triacilglicerol฀no฀soro.฀Tipicamen-
te,฀ jovens฀ estudantes฀ do฀ sexo฀ masculino฀ receberam฀ uma฀
dieta฀na฀qual฀até฀50%฀de฀suas฀calorias฀em฀gordura฀foram฀
substituídas฀por฀sacarose฀ou฀outro฀açúcar฀simples฀por฀um฀
período฀de฀2-3฀semanas.฀Na฀maioria฀dos฀casos,฀os฀níveis฀de฀
triacilglicerol฀ no฀ soro฀ aumentaram฀ muito฀ (até฀ 50%).฀ Isto฀
levou฀ à฀ conclusão฀ de฀ que฀ alta฀ ingestão฀ de฀ açúcares฀ sim-
ples,฀particularmente฀sacarose,฀poderia฀aumentar฀o฀risco฀
Fonte:฀Leahy,฀P.,฀Croniger,฀C.฀e฀Hanson,฀R.W.฀Molecular฀and฀cellular฀adaptations฀to฀carbohydrate฀and฀fat฀intake.฀
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BioQ.27 1059
de฀doença฀cardíaca,฀uma฀noção฀que฀se฀popularizou฀por฀
meio฀ de฀ best฀ sellers฀ nutricionais฀ como฀ “Sugar฀ Blues”฀
e฀ “Sweet฀ and฀ Dangerous”.฀ Infelizmente,฀ enquanto฀ as฀
conclusões฀originais฀eram฀promovidas฀na฀imprensa฀lei-
ga,฀os฀experimentos฀propriamente฀ditos฀eram฀questio-
nados.฀Estudos฀subseqüentes฀demonstraram฀que฀se฀es-
tes฀testes฀fossem฀continuados฀por฀períodos฀mais฀longos฀
(3-6฀ meses),฀ os฀ níveis฀ de฀ triacilglicerol฀ geralmente฀ se฀
normalizavam.฀A฀natureza฀desta฀adaptação฀metabólica฀
lenta฀é฀desconhecida.฀Também฀é฀importante฀considerar฀
o฀tipo฀de฀carboidrato฀da฀dieta.฀Para฀muitos฀americanos,฀
uma฀dieta฀rica฀em฀carboidratos฀significa฀uma฀dieta฀que฀
é฀rica฀em฀açúcares฀simples.฀Os฀níveis฀de฀triacilgliceróis฀
nestes฀indivíduos฀respondem฀dramaticamente฀a฀dietas฀
que฀substituem฀alimentos฀contendo฀ou฀gordura฀ou฀car-
boidratos฀ complexos฀ e฀ fibras฀ por฀ alimentos฀ contendo฀
açúcares฀simples฀como฀fonte฀de฀carboidrato.
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22.01.07 18:47:02
 CAPÍTULO฀28฀฀PRINCÍPIOS฀DE฀NUTRIÇÃO฀II:฀MICRONUTRIENTES฀฀฀|฀฀฀1063

PARTE฀5฀PROCESSOS฀FISIOLÓGICOS

28
Necessidades
nutricionais Má-absorção
aumentadas

Ingestão
inadequada
da dieta

PRINCÍPIOS฀DE฀NUTRIÇÃO฀II:
MICRONUTRIENTES
Stephen฀G.฀Chaney

28.1฀ VISÃO฀GERAL,฀1064 28.8฀ OUTRAS฀VITAMINAS฀HIDROSSOLÚVEIS,฀฀

1082
28.2฀ AVALIAÇÃO฀DE฀MÁ฀NUTRIÇÃO,฀1064 ฀ Ácido฀ascórbico฀funciona฀em฀reações฀de฀redu-฀
฀ ção฀e฀hidroxilação,฀1082
28.3฀ INGESTÃO฀DIETÉTICAS฀DE฀REFERÊNCIAS,฀ ฀ Colina฀e฀carnitina฀desempenham฀várias฀fun-฀
1064 ฀ ções,฀1083

28.4฀ VITAMINAS฀LIPOSSOLÚVEIS,฀1066 28.9฀ MACROMINERAIS,฀1084

฀ Vitamina฀A฀é฀derivada฀de฀carotenóides฀de฀plan-฀
฀ tas,฀1066
฀ Síntese฀de฀vitamina฀D฀requer฀luz฀do฀sol,฀1068
฀ Vitamina฀E฀é฀uma฀mistura฀de฀tocoferóis฀e฀toco-฀
฀ trienóis,฀1071
฀ Vitamina฀K฀É฀um฀derivado฀de฀quinona,฀1072
28.5฀ VITAMINAS฀HIDROSSOLÚVEIS,฀1073
28.6฀ VITAMINAS฀HIDROSSOLÚVEIS฀LIBERADO-
RAS฀DE฀ENERGIA,฀1074
฀ Tiamina฀forma฀a฀coenzima฀tiamina฀pirofosfato,฀฀
฀ 1074
฀ Riboflavina฀forma฀as฀coenzimas฀FAD฀e฀FMN,฀฀
฀ 1075
฀ Niacina฀forma฀as฀coenzimas฀NAD฀e฀NADP,฀1075
฀ Piridoxina฀(vitamina฀B6)฀forma฀a฀coenzima฀฀
฀ piridoxal฀fosfato,฀1076
฀ Ácido฀pantotênico฀e฀biotina฀formam฀coenzimas฀฀
฀ envolvidas฀no฀metabolismo฀energético,฀1079
฀ Cálcio฀tem฀muitas฀funções฀fisiológicas,฀1084
฀ Magnésio฀é฀requerido฀por฀muitas฀enzimas,฀1084
28.10฀ MINERAIS฀TRAÇOS,฀1084
฀ Deficiência฀de฀ferro฀causa฀anemia฀e฀imunocom-฀
฀ petência฀diminuída,฀1084
฀ Iodo฀é฀incorporado฀a฀hormônios฀da฀tireóide,฀฀
฀ 1086
฀ Zinco฀é฀requerido฀por฀muitas฀proteínas,฀1086
฀ Cobre฀é฀um฀cofator฀de฀enzimas฀importantes,฀฀
฀ 1086
฀ Cromo฀é฀um฀componente฀da฀cromodulina,฀1086
฀ Selênio฀é฀encontrado฀em฀selenoproteínas,฀1087
฀ Manganês,฀molibdênio,฀fluoreto฀e฀boro฀são฀ele-฀
฀ mentos฀traços฀essenciais,฀1087
28.11฀ DIETA฀AMERICANA:฀FATO฀E฀FALÁCIA,฀1087
28.12฀ AVALIAÇÃO฀DO฀ESTADO฀NUTRICIONAL฀NA฀
PRÁTICA฀CLÍNICA,฀1087

28.7฀ VITAMINAS฀HIDROSSOLÚVEIS฀HEMATOPOI- BIBLIOGRAFIA,฀1089

ÉTICAS฀ 1079
฀ Ácido฀fólico฀(folacina)฀funciona฀como฀tetra-hi-฀ QUESTÕES฀E฀RESPOSTAS,฀1091
฀ drofolato฀no฀metabolismo฀de฀um฀carbono,฀฀
฀ ฀ 1079 CORRELAÇÕES฀CLÍNICAS
฀ Vitamina฀B12฀(cobalamina)฀contém฀cobalto฀em฀฀ ฀ 28.1฀ Considerações฀Nutricionais฀na฀Fibrose฀฀
฀ um฀anel฀tetrapirrólico,฀1080 ฀ Cística,฀1068

BioQ.28 1063 22.01.07 18:48:29

 CAPÍTULO฀28฀฀PRINCÍPIOS฀DE฀NUTRIÇÃO฀II:฀MICRONUTRIENTES฀฀฀|฀฀฀1073
CORRELAÇÃO฀CLÍNICA฀28.3
Considerações฀Nutricionais฀em฀Recém-Nascidos
Bebês฀recém-nascidos฀correm฀risco฀nutricional฀es-
pecial฀ devido฀ ao฀ crescimento฀ muito฀ rápido฀ e฀ por-
que฀as฀necessidades฀de฀muitos฀nutrientes฀são฀altas.฀
Alguns฀ micronutrientes฀ (tais฀ como฀ vitaminas฀ E฀ e฀
K)฀ não฀ atravessam฀ bem฀ a฀ membrana฀ placentária฀
e฀ as฀ reservas฀ teciduais฀ são฀ baixas฀ no฀ recém-nas-
cido.฀ O฀ trato฀ gastrointestinal฀ (GI)฀ pode฀ não฀ estar฀
completamente฀desenvolvido,฀levando฀a฀problemas฀
de฀má฀absorção฀(particularmente฀com฀respeito฀às฀
vitaminas฀lipossolúveis).฀O฀trato฀GI฀também฀é฀esté-
ril฀ao฀nascer,฀e฀a฀flora฀intestinal,฀que฀normalmente฀
fornece฀ quantidades฀ significativas฀ de฀ certas฀ vita-
minas฀(especialmente฀vitamina฀K),฀demora฀vários฀
dias฀para฀se฀estabelecer.฀Se฀o฀bebê฀for฀prematuro,฀
o฀risco฀nutricional฀é฀um฀pouco฀maior,฀uma฀vez฀que฀
o฀ trato฀ GI฀ será฀ menos฀ desenvolvido฀ e฀ as฀ reservas฀
teciduais฀serão฀ainda฀menores.
A฀complicação฀nutricional฀mais฀séria฀parece฀ser฀
doença฀hemorrágica.฀Recém-nascidos,฀especialmen-
te฀bebês฀prematuros,฀têm฀baixas฀reservas฀teciduais฀
de฀vitamina฀K฀e฀não฀têm฀a฀flora฀intestinal฀necessá-
ria฀para฀sintetizar฀a฀vitamina.฀Leite฀materno฀é฀uma฀
fonte฀relativamente฀pobre฀de฀vitamina฀K.฀Aproxima-
damente฀1฀em฀cada฀400฀nascidos฀vivos฀apresentam฀
alguns฀sinais฀de฀doença฀hemorrágica,฀que฀pode฀ser฀
evitada฀por฀0,5฀a฀1฀mg฀da฀vitamina,฀dada฀ao฀nascer.
Fonte:฀Mueller,฀D.฀P.฀R.฀Vitamin฀E฀therapy฀in฀retinopathy฀of฀prematurity.฀Eye฀6:฀221,฀1992.฀Morin,฀K.฀H.฀Current฀
thoughts฀on฀healthy฀term฀infant฀nutrition,฀MCN.฀Am.฀J.฀Matern.฀Child฀Nurs.฀29:312,฀2004.฀Collier,฀S.,฀Fulhan,฀J.฀e฀
Duggan,฀C.฀Nutrition฀for฀the฀pediatric฀office:฀Update฀on฀vitamins,฀infant฀feeding฀and฀food฀allergies.฀Curr.฀Opin.฀Pe-
diatr.฀16:314,฀2004.
|
28.5฀ ฀VITAMINAS฀
HIDROSSOLÚVEIS
Vitaminas฀ solúveis฀ em฀ água฀ diferem฀ das฀ vitaminas฀ li-
possolúveis฀em฀vários฀aspectos.฀A฀maioria฀é฀facilmente฀
excretada,฀uma฀vez฀que฀sua฀concentração฀ultrapasse฀o฀
limite฀ renal,฀ de฀ modo฀ que฀ toxicidade฀ é฀ rara.฀ Suas฀ re-
servas฀metabólicas฀são฀lábeis,฀e฀depleção฀pode฀ocorrer฀
freqüentemente฀em฀questão฀de฀semanas฀ou฀meses,฀de฀
modo฀ que฀ deficiências฀ ocorrem฀ relativamente฀ rápido,฀
com฀uma฀dieta฀inadequada.฀Como฀vitaminas฀hidrosso-
lúveis฀são฀coenzimas฀para฀muitas฀reações฀bioquímicas฀
comuns,฀ freqüentemente฀ é฀ possível฀ ensaiar฀ o฀ estado฀
vitamínico฀ medindo-se฀ uma฀ ou฀ mais฀ atividades฀ enzi-
máticas฀ em฀ eritrócitos฀ isolados.฀ Estes฀ ensaios฀ são฀ es-
pecialmente฀úteis฀se฀se฀medir฀a฀atividade฀endógena฀e฀o฀
estímulo฀desta฀atividade฀por฀adição฀da฀coenzima฀ativa฀
derivada฀da฀vitamina.
BioQ.28 1073
A฀maioria฀dos฀bebês฀recém-nascidos฀tem฀reser-
vas฀de฀ferro฀suficientes฀para฀durar฀3-4฀meses.฀Como฀
leite฀ de฀ vaca฀ e฀ leite฀ materno฀ contêm฀ pouco฀ ferro,฀
suplementação฀com฀ferro฀geralmente฀é฀iniciada฀em฀
idade฀ relativamente฀ precoce,฀ pela฀ introdução฀ de฀
cereal฀enriquecido฀com฀ferro.฀Níveis฀de฀vitamina฀D฀
também฀ são฀ baixos฀ no฀ leite฀ materno,฀ e฀ suplemen-
tação฀com฀200฀UI/dia฀de฀vitamina฀D฀é฀geralmente฀
recomendada.฀ Quando฀ bebês฀ precisam฀ ser฀ manti-
dos฀ em฀ ventilação฀ assistida฀ com฀ altas฀ concentra-
ções฀ de฀ oxigênio,฀ suplementação฀ com฀ vitamina฀ E฀
pode฀reduzir฀o฀risco฀de฀displasia฀broncopulmonar฀e฀
fibroplasia฀ retrolental,฀ complicações฀ em฀ potencial฀
da฀terapia฀por฀oxigênio.฀A฀anemia฀da฀prematurida-
de฀ pode฀ responder฀ a฀ suplementação฀ com฀ folato฀ e฀
vitamina฀B12.
Em฀ resumo,฀ vitamina฀ K฀ suplementar฀ é฀ dada฀
ao฀ nascer฀ para฀ evitar฀ doença฀ hemorrágica.฀ Bebês฀
amamentados฀ pela฀ mãe฀ geralmente฀ recebem฀ um฀
suplemento฀de฀vitamina฀D,฀com฀ferro฀sendo฀intro-
duzido฀ juntamente฀ com฀ alimentos฀ sólidos.฀ Bebês฀
alimentados฀ com฀ mamadeira฀ recebem฀ uma฀ suple-
mentação฀ de฀ ferro.฀ Se฀ o฀ bebê฀ precisar฀ ser฀ manti-
do฀em฀oxigênio,฀vitamina฀E฀suplementar฀pode฀ser฀
benéfica.
A฀maior฀parte฀das฀vitaminas฀hidrossolúveis฀é฀conver-
tida฀em฀coenzimas,฀que฀são฀usadas฀em฀vias฀de฀geração฀
de฀energia฀ou฀hematopoiese.฀Deficiências฀das฀vitaminas฀
que฀ liberam฀ energia฀ produzem฀ vários฀ sintomas฀ sobre-
postos฀e฀aparecem฀primeiro฀em฀tecidos฀de฀crescimento฀
rápido.฀Sintomas฀típicos฀incluem฀dermatite,฀glossite฀
(edema฀e฀vermelhidão฀da฀língua),฀queilite฀dos฀cantos฀
dos฀ lábios฀ e฀ diarréia.฀ Em฀ muitos฀ casos,฀ o฀ tecido฀ ner-
voso฀também฀está฀envolvido฀devido฀à฀sua฀alta฀demanda฀
energética฀ou฀efeitos฀específicos฀da฀vitamina.฀Sintomas฀
neurológicos฀ comuns฀ incluem฀ neuropatia฀ periférica฀
(formigamento฀dos฀nervos฀nas฀extremidades),฀depres-
são,฀confusão฀mental,฀falta฀de฀coordenação฀motora฀e฀in-
disposição.฀Desmielinização฀e฀degeneração฀do฀tecido฀
nervoso฀também฀podem฀ocorrer.฀Estes฀sintomas฀de฀de-
ficiências฀são฀tão฀comuns฀e฀sobrepostos฀que฀podem฀ser฀
considerados฀como฀propriedades฀das฀vitaminas฀libera-
doras฀ de฀ energia฀ como฀ uma฀ classe,฀ e฀ não฀ como฀ sendo฀
específicos฀para฀cada฀uma.
22.01.07 18:48:39
 CAPÍTULO฀28฀฀PRINCÍPIOS฀DE฀NUTRIÇÃO฀II:฀MICRONUTRIENTES฀฀฀|฀฀฀1081

CORRELAÇÃO฀CLÍNICA฀28.7
Polimorfismos฀Genéticos฀e฀Necessidades฀de฀Ácido฀Fólico

Suplementação฀com฀ácido฀fólico฀reduz฀o฀risco฀de฀
defeitos฀ no฀ tubo฀ neural฀ e฀ diminui฀ os฀ níveis฀ de฀
homocisteína฀no฀soro,฀o฀que฀pode฀baixar฀o฀risco฀
de฀ doença฀ cardíaca.฀ Estes฀ dados฀ levaram฀ a฀ um฀
aumento฀na฀RDA฀para฀ácido฀fólico฀e฀ao฀enriqueci-
mento฀de฀produtos฀de฀grãos฀com฀ácido฀fólico.฀En-
tretanto,฀ mesmo฀ com฀ uma฀ dieta฀ marginal,฀ nem฀
todos฀os฀adultos฀têm฀níveis฀elevados฀de฀homocis-
teína฀e฀nem฀todas฀as฀mães฀dão฀à฀luz฀bebês฀com฀
defeitos฀ de฀ tubo฀ neural.฀ O฀ que฀ determina฀ estas฀
respostas฀ individuais฀ à฀ ingestão฀ inadequada฀ de฀
folato?฀Existe฀um฀polimorfismo฀genético฀comum฀
no฀ gene฀ da฀ 5,10-metilenotetra-hidrofolato฀ redu-
tase฀(MTHFR)฀que฀produz฀o฀5-metiltetra-hidro-
folato฀ necessário฀ à฀ conversão฀ de฀ homocisteína฀
em฀metionina฀(ver฀Figura฀28.15).฀Uma฀substitui-
ção฀C→T฀no฀bp฀677฀resulta฀em฀uma฀substituição฀
de฀ valina฀ por฀ alanina฀ que฀ baixa฀ a฀ atividade฀ es-
pecífica฀e฀reduz฀a฀estabilidade฀da฀enzima.฀Apro-
ximadamente฀ 12%฀ dos฀ caucasianos฀ e฀ asiáticos฀
são฀homozigotos฀(T/T)฀e฀50%฀são฀heterozigotos฀
(C/T)฀para฀este฀polimorfismo.฀As฀concentrações฀
plasmáticas฀de฀folato฀são฀significativamente฀mais฀
baixas฀ e฀ os฀ níveis฀ de฀ homocisteína฀ plasmática฀
são฀significativamente฀mais฀altos฀em฀indivíduos฀
T/T฀consumindo฀dietas฀pobres฀em฀folato.฀Quando฀
acoplado฀com฀baixa฀ingestão฀de฀folato,฀o฀genótipo฀
T/T฀pode฀responder฀por฀15%฀dos฀defeitos฀de฀tubo฀
neural.฀Além฀disso,฀indivíduos฀mais฀velhos฀com฀o฀
genótipo฀T/T฀e฀baixa฀ingestão฀de฀folato฀parecem฀
ter฀risco฀aumentado฀de฀câncer฀de฀cólon.
Uma฀investigação฀ativa฀de฀polimorfismos฀ge-
néticos฀nos฀outros฀genes฀envolvidos฀no฀metabolis-
mo฀de฀folato฀está฀em฀andamento.฀Polimorfismos฀
foram฀descritos฀em฀metionina฀sintetase฀e฀recep-
tor฀alfa฀de฀folato,฀que฀é฀necessário฀para฀captação฀
de฀ 5-metiltetra-hidrofolato.฀ Ambos฀ parecem฀ ser฀
benignos.฀ Entretanto,฀ a฀ absorção฀ de฀ folato฀ pelo฀
intestino฀pode฀ser฀mais฀baixa฀em฀mães฀com฀uma฀
história฀de฀gestações฀com฀defeito฀no฀tubo฀neural฀
do฀que฀em฀mães฀controles.฀A฀genética฀deste฀de-
feito฀ainda฀não฀foi฀determinada.

Fonte:฀Bailey,฀L.฀B.฀e฀Gregory,฀J.฀F.฀Polymorphisms฀and฀methylenetetrahydrofolate฀reductase฀and฀other฀enzymes:฀
metabolic฀significance,฀risks,฀and฀impact฀on฀folate฀requirement.฀J.฀Nutr.฀129:919,฀1999.฀Barber,฀R.฀C.,฀Lammer,฀E.฀J.,฀
Shaw,฀G.฀M.,฀Greer,฀K.฀A.฀e฀Finnell,฀R.฀H.฀The฀role฀of฀folate฀transport฀and฀metabolism฀in฀neural฀tube฀defect฀risk.฀Mol.฀
Genet.฀Metab.฀66:1,฀1999.฀Fang,฀J.฀Y.฀e฀Xiao,฀S.฀D.฀Folic฀acid,฀polymorphism฀of฀methyl-group฀metabolism฀genes,฀and฀
DNA฀methylation฀in฀relation฀to฀GI฀carcinogenesis.฀J.฀Gastroenterol.฀38:821,฀2003.

um฀dentre฀vários฀ligantes฀diferentes฀(Figura฀28.15).฀As฀
formas฀cristalinas฀de฀B12฀usadas฀em฀suplementação฀são฀
geralmente฀hidroxicobalamina฀ou฀cianocobalamina.฀B12฀
em฀alimentos฀geralmente฀ocorre฀ligada฀a฀proteína,฀em฀ R2 CH3
R1 CH3 R1
forma฀metil฀ou฀5’-desoxiadenosil.฀Para฀ser฀utilizada,฀B12฀ R2
CH3
deve฀ser฀liberada฀da฀proteína฀por฀hidrólise฀ácida฀no฀es- X
tômago,฀ou฀por฀digestão฀por฀tripsina฀no฀intestino.฀Em฀ CH3 N N
seguida,฀ combina฀ com฀ fator฀ intrínseco,฀ uma฀ proteína฀ Co
secretada฀ pelo฀ estômago,฀ que฀ a฀ transporta฀ até฀ o฀ íleo฀ N N
para฀absorção.
CH3
Vitamina฀B12฀só฀participa฀de฀duas฀reações฀no฀homem฀
R1 CH3
(Figura฀28.16).฀O฀metil฀derivado฀de฀B12฀é฀requerido฀pela฀ HNOCCH2CH2 CH3 CH3 R2
metionina฀ sintase,฀ na฀ qual฀ homocisteína฀ é฀ metilada฀ a฀
CH2
metionina.฀ O฀ 5-desoxiadenosil฀ derivado฀ é฀ requerido฀
CH CH3 N
pela฀metilmalonil-CoA฀mutase,฀que฀converte฀metilma- CH3
lonil-CoA฀ em฀ succinil-CoA,฀ uma฀ reação-chave฀ no฀ ca- O O–
P CH3
tabolismo฀ de฀ valina,฀ isoleucina,฀ metionina,฀ treonina,฀ O O OH N
ácidos฀graxos฀de฀cadeia฀ímpar,฀timina฀e฀a฀cadeia฀lateral฀ H
do฀colesterol.฀Como฀poderia฀ser฀esperado,฀deficiência฀
de฀ B12฀ causa฀ acúmulo฀ de฀ homocisteína฀ e฀ ácido฀ metil- HOCH2 N H

malônico.
FIGURA฀28.15
Estrutura฀da฀vitamina฀B12฀(cobalamina).

BioQ.28 1081 22.01.07 18:48:47

 CAPÍTULO฀28฀฀PRINCÍPIOS฀DE฀NUTRIÇÃO฀II:฀MICRONUTRIENTES฀฀฀|฀฀฀1089

CORRELAÇÃO฀CLÍNICA฀28.9
Necessidades฀Nutricionais฀de฀Idosos

Se฀as฀tendências฀atuais฀continuarem,฀um฀a฀cada฀cin- de฀ 7-desidrocolesterol฀ em฀ vitamina฀ D฀ na฀ pele฀ e฀ de฀

co฀ americanos฀ terá฀ mais฀ de฀ 65฀ anos฀ no฀ ano฀ 2030.฀
Com฀ este฀ envelhecimento฀ projetado฀ da฀ população฀
americana,฀ tem฀ havido฀ interesse฀ crescente฀ na฀ de-
finição฀ das฀ necessidades฀ nutricionais฀ dos฀ idosos.฀
Pesquisa฀recente฀demonstra฀necessidades฀alteradas฀
de฀pessoas฀idosas฀para฀vários฀nutrientes฀essenciais.฀
Por฀ exemplo,฀ absorção฀ e฀ utilização฀ de฀ vitamina฀ B6฀
diminuem฀ com฀ a฀ idade.฀ Levantamentos฀ dietéticos฀
mostraram฀ consistentemente฀ que฀ B6฀ é฀ um฀ proble-
ma฀nutricional฀para฀muitos฀americanos,฀e฀os฀idosos฀
não฀ são฀ exceções.฀ Muitos฀ americanos฀ mais฀ velhos฀
obtêm฀ menos฀ de฀ 50%฀ da฀ RDA฀ para฀ B6฀ em฀ sua฀ die-
ta.฀Deficiência฀de฀vitamina฀B12฀também฀é฀mais฀pre-
valente฀entre฀os฀idosos.฀Muitos฀adultos฀mais฀velhos฀
desenvolvem฀gastrite฀atrófica฀(produção฀diminuída฀
de฀ácido฀no฀estômago)฀e฀produção฀diminuída฀de฀fa-
tor฀ intrínseco,฀ o฀ que฀ leva฀ a฀ pouca฀ absorção฀ de฀ B12.฀
O฀nível฀sangüíneo฀de฀homocisteína,฀um฀possível฀fa-
tor฀de฀risco฀de฀aterosclerose,฀demência฀e฀doença฀de฀
Alzheimer,฀ está฀ freqüentemente฀ elevado฀ no฀ idoso.฀
Homocisteína฀ é฀ um฀ produto฀ colateral฀ da฀ metilação฀
do฀DNA฀e฀é฀normalmente฀metabolizada฀a฀metionina฀
ou฀ cisteína฀ em฀ reações฀ que฀ requerem฀ ácido฀ fólico,฀
B12฀e฀B6฀(ver฀Figura฀28.14).฀Suplementação฀simples฀
com฀estas฀vitaminas฀B฀é฀geralmente฀suficiente฀para฀
normalizar฀ os฀ níveis฀ de฀ homocisteína.฀ Vitamina฀ D฀
pode฀ ser฀ um฀ problema฀ também.฀ Muitos฀ idosos฀ não฀
passam฀muito฀tempo฀expostos฀ao฀sol,฀e฀a฀conversão฀
1,25-(OH)D฀em฀1,25-(OH)2D฀no฀rim฀diminui฀com฀a฀
idade.฀Estes฀fatores฀levam฀a฀deficiências฀significati-
vas฀de฀1,25-(OH)2D฀no฀idoso,฀o฀que฀pode฀causar฀um฀
balanço฀negativo฀de฀cálcio.฀Estas฀alterações฀podem฀
contribuir฀para฀osteoporose.
Existe฀alguma฀evidência฀de฀necessidade฀aumen-
tada฀de฀cromo฀e฀zinco฀também.฀Muitos฀idosos฀pare-
cem฀ter฀dificuldade฀em฀converter฀o฀cromo฀da฀dieta฀
em฀ cromodulina฀ biologicamente฀ ativa.฀ Deficiência฀
de฀ cromo฀ pode฀ contribuir฀ para฀ diabetes฀ tipo฀ 2.฀ De฀
modo฀semelhante,฀a฀maioria฀dos฀idosos฀consome฀en-
tre฀metade฀e฀dois฀terços฀da฀RDA฀para฀zinco,฀e฀con-
dições฀como฀gastrite฀atrófica฀podem฀interferir฀com฀
absorção฀de฀zinco.฀Sintomas฀de฀deficiência฀de฀zinco฀
incluem฀perda฀de฀acuidade฀do฀paladar,฀dermatite฀e฀
sistema฀imune฀enfraquecido.฀Todos฀estes฀sintomas฀
são฀comuns฀na฀população฀idosa,฀e฀deficiência฀de฀zin-
co฀pode฀contribuir.
Nem฀ todas฀ as฀ notícias฀ são฀ más,฀ entretanto.฀ Ab-
sorção฀de฀vitamina฀A฀aumenta฀com฀a฀idade฀e฀sua฀re-
moção฀pelo฀fígado฀diminui,฀de฀modo฀que฀vitamina฀A฀
permanece฀em฀circulação฀por฀um฀tempo฀maior.฀Não฀
apenas฀a฀necessidade฀de฀vitamina฀A฀diminui฀com฀a฀
idade,฀ mas฀ o฀ idoso฀ também฀ precisa฀ ser฀ particular-
mente฀cuidadoso฀para฀evitar฀toxicidade฀de฀vitamina฀
A.฀Embora฀isto฀não฀restrinja฀sua฀escolha฀de฀alimen-
tos฀ou฀de฀suplementos฀multivitamínicos,฀geralmente฀
devem฀evitar฀suplementos฀de฀vitamina฀A฀isolada.

Fonte:฀Russell,฀R.฀M.฀e฀Suter,฀P.฀M.฀Vitamin฀requirements฀of฀elderly฀people:฀An฀update.฀Am.฀J.฀Clin.฀Nutr.฀58:4,฀
1993.฀Ubbink,฀J.฀B.,฀Vermoak,฀W.฀J.,฀van฀der฀Merne,฀A.฀e฀Becker,฀P.฀J.฀Vitamin฀B12,฀vitamin฀B6฀and฀folate฀nutritional฀
status฀in฀men฀with฀hyperhomocysteinemia.฀Am.฀J.฀Clin.฀Nutr.฀57:47,฀1993.฀Joosten,฀E.,฀van฀der฀Berg.฀A.,฀Riezler,฀R.฀
Neurath,฀H.฀J.,฀Linderbaum,฀J.,฀Stabler,฀S.฀P.฀e฀Allen,฀R.฀H.฀Metabolic฀evidence฀that฀deficiencies฀of฀vitamin฀B12,฀folate฀
and฀vitamin฀B6฀occur฀commonly฀in฀elderly฀people.฀Am.฀J.฀Clin.฀Nutr.฀58:468,1993.฀Wood,฀R.฀J.,฀Suter,฀P.฀M.฀e฀Russell,฀
R.฀M.฀Mineral฀requirements฀of฀elderly฀people.฀Am.฀J.฀Clin.฀Nutr.฀62:493,฀1995.฀Johnson,฀K.฀A.,฀Bernard,฀M.฀A.฀e฀Fun-
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BioQ.28 1089 22.01.07 18:48:54

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