Implementação de Boas Práticas de Laboratório

-NIT DICLA 035-

no Núcleo de Plataformas Tecnológicas
do Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães
Fiocruz-Pernambuco

Cássia Docena
Tecnologista
O Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães

● 1950: Instituição com foco em pesquisas nas

enfermidades endêmicas regionais.
O Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães
● Na década de 1970, por ações do Governo Federal, foi
integrado à Fiocruz.

● Desde 1986 funciona no campus da Universidade Federal

de Pernambuco (UFPE).

● É referência no controle de culicídeos vetores,

esquistossomose, filarioses, leishmaniose, doença de chagas,
peste e hantavirose para o Ministério da Saúde.

● Desenvolve e valida testes diagnósticos moleculares e

imunológicos para esquistossomose, malária, leishmaniose e
tuberculose.

● Tem como missão o enfrentamento dos problemas socio-

sanitários do nordeste, canalizando esforços para ampliar
seus compromissos enquanto suporte ao Sistema Único de
Saúde e para a produção e disseminação de conhecimento,
inovação e referência na região.
O Núcleo de Plataformas Tecnológicas

● Inaugurado em setembro de 2005: Núcleo Integrado de

Tecnologias (NIT). Planejado para servir como base
tecnológica para os projetos de pesquisas em saúde pública,
apoiar a execução de projetos acadêmicos e dar suporte à
comunidade científica do CPqAM em uma condição
operacional que permite acesso de usuários múltiplos.

● 2007: o NIT passou a ser subordinado à Vice-diretoria de

Pesquisa, Desenvolvimento Tecnológico e Serviços de
Referência quando passou a ser denominado de Núcleo de
Plataformas Tecnológicas.

Colaboradores:
Cássia Docena: Tecnologista em Saúde Pública
Viviane de Carvalho: Técnica em Saúde Pública
Raimundo Pimentel: Técnico em Saúde Pública
 O Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães

Organograma

Fonte: Comunicação-CPqAM, 2010

O Núcleo de Plataformas Tecnológicas

● 2008: passou a integrar a Rede de Plataformas Tecnológicas

do PDTIS

Fonte: Souza, R.A. et al, 2011.

O Núcleo de Plataformas Tecnológicas
2008:Equipamentos ligados à Rede de Plataformas
Tecnológicas-PDTIS

● RPT01C: Plataforma de Sequenciamento de DNA

ABI3100-16 capilares

● RPT09C: Plataforma de PCR em Tempo Real

ABI7000
ABI7500

● RPT08F: Plataforma de Citometria de Fluxo

BD FACSCalibur

● RPT07B: Plataforma de Microscopia Confocal

Leica SPII com lasers 488, 543 e 633 nm
 O Núcleo de Plataformas Tecnológicas
2008:Projeto Piloto para Implantação de
Boas Práticas de Laboratório-NIT DICLA035-BPL
“a versão brasileira dos Princípios das BPLs está subdividida em
dez grandes itens. Estes itens, quando avaliados de forma
conjunta, definem um sistema de qualidade que abrange o
processo organizacional e as condições nas quais estudos não-
clínicos de saúde e de segurança ao meio ambiente são
planejados, desenvolvidos, monitorados, registrados,
arquivados e relatados.” (Souza et al., 2011)

Fonte: Souza, R.A. et al, 2011.

Implementação de BPL
Plano de Ação Para Implementação do Projeto
Etapas
Programa de Capacitação
Interna
Avaliação das
Plataformas para
Implantação do Projeto
Piloto
Organização e Definição
dos Cargos BPL
Modelagem e elaboração
da documentação
pertinente
Estruturação da Garantia
da Qualidade
Estruturação do Núcleo
de Plataformas
Tecnológicas
Avaliação através de
Inspeções Internas e
Programa de Melhoria
Fonte: Adaptação de Souza, R.A. et al, 2011.
Principais Ações
Realização de cursos:
BPL- Introdução a Norma NIT-DICLA-035 e seus
documentos complementares;
Boas Práticas de Laboratório para Gestores da Qualidade;
Boas Práticas de Laboratório para Diretores de Estudo;
BPL- Introdução a Norma NIT-DICLA-035 e seus
documentos complementares, 2008, Recife.
Avaliar complexidade e demanda de análises, organização
interna das plataformas e disponibilidade dos profissionais
existentes.
Definir profissionais de acordo com os cargos descritos
nas BPLs.
Estabelecer de acordo com os requisitos da norma quais
documentos deveriam ser construídos incluindo os
gerenciais e os técnicos.
Definir profissionais envolvidos e atividades relacionadas à
GQ.
Inventariar os equipamentos existentes, capacitar o
Núcleo para a demanda de análises e criar Programas de
Manutenção e Calibração dos Equipamentos.
Realizar Inspeções Internas e estabelecer Programas de
Melhorias.
Instalações
Instalações

Laboratório de Apoio
Instalações

RPT01C: Sequenciamento de DNA

ABI 3100
Instalações

RPT09C: PCR em Tempo Real

ABI7000
ABI7500
Instalações

RPT07B: Microscopia Confocal

Leica SPII: lasers 488, 543, 633
Instalações

RPT08F: Citometria de Fluxo

BD FACsCalibur
Organização e Pessoal da
instalação Teste

Programa da Garantia da
Qualidade
Organização e Pessoal das Instalações Teste
Programa da Garantia da Qualidade

Patrocinador
Responsabilidades
Gerente:
● Disponibilidade de pessoal qualificado, instalações,
equipamentos e reagentes apropriados;
● Registro atualizado das qualificações e treinamentos;
● Aprovação de POPs;
● Designação do Diretor de Estudo e substituição conforme
POPs;
● Assegura a aprovação do Plano de Estudo pelo Diretor
de Estudo;
● Assegura a disponibilização pelo Diretor de Estudo do plano
de Estudo para a UGQ;
● Arquivo histórico de POPs e Nomeação do Responsável
pelos arquivos;
●Manutenção agenda-mestre;
● Suprimentos apropriados para o desenvolvimento do
Estudo;
● Treinamento do Diretor de Estudo documentado.
Responsabilidades
Diretor de Estudo
“O Diretor de estudo representa o ponto único de controle do
estudo e tem a responsabilidade da condução do estudo em
toda a sua extensão e do seu relatório final.”
● aprova o plano de Estudo e emendas
disponibiliza plano de estudo, emendas e POPs;
● assegura que POPs especificados no plano de estudo sejam
seguidos;
● avalia e documenta o impacto de qualquer desvio em relação ao
plano de estudo na qualidade e integridade do estudo e desenvolve
ações corretivas quando necessário; conhece os desvios em relação a
POPs durante a condução do estudo;
● assegura que todos os dados brutos gerados sejam registrados
e documentados integralmente;
● assina e data o relatório final, indicando a aceitação da
responsabilidade pela validade dos dados e a medida na qual o estudo
é conforme às BPL;
● assegura que, após o término do estudo, o plano de estudo, o
relatório final, os dados brutos sejam arquivados e o material de
suporte armazenado;
Responsabilidades
Garantia da Qualidade
● Mantém Cópias de todos os planos de estudo e POPs.
● Tem Acesso à agenda-mestre atualizada.
● Verifica que o plano de estudo contém as informações
requeridas
pelas BPL. Esta verificação deve ser documentada.
● Realiza auditorias para determinar se :
– todos os estudos são conduzidos conforme os princípios
de BPL;
– Os planos de estudo e os POPs são disponíveis para o
pessoal de estudo e se são obedecidos.
● Mantém registros de todas as auditorias.
● Inspecionar o relatório final para confirmar que :
– Os métodos, procedimentos e observações são precisa e
completamente descritos;
– Os resultados relatados refletem precisa e completamente
os dados brutos do estudo.
● Relata os resultados de auditoria para o Gerente e para o
Diretor de Estudo.
Responsabilidades
Patrocinador:

● Entende os requisitos das BPL;

● Assegura-se que a unidade operacional é capaz conduzir um
estudo conforme BPL e está consciente que o estudo deve
ser conduzido conforme BPL;
● Assegura que uma comunicação adequada existe entre os
seus representantes e todas as partes condutoras do estudo

● Identifica o artigo-teste;
● Informa a unidade operacional dos riscos potenciais do
artigo-teste em relação a saúde humana ou meio ambiente
assim como de quaisquer medidas protetoras;
● Assina o Plano de Estudo;

● Entrega e preenche a folha de amostras.

Organização e Pessoal das Instalações Teste
Programa da Garantia da Qualidade
Gerente da Instalação Teste: Cássia Docena
Suplente: Christian Reis
● RPT01C: Plataforma de Sequenciamento de DNA
Diretor do Estudo: Viviane Vasconcelos de Carvalho

● RPT09C: Plataforma de PCR em Tempo Real

Diretor do Estudo: Carlos Gustavo Regis

● RPT08F: Plataforma de Citometria de Fluxo

Diretor do Estudo: Valéria Rego Alves Pereira
Diretor do Estudo: Virgínia Lorena

Gerente da Instalação Teste: Regina Bressan

● RPT07B: Plataforma de Microscopia Confocal
Diretor do Estudo: Cássia Docena

GQ do CPqAM: Patrícia Silva

RPT01C: Plataforma de Sequenciamento de DNA

Cássia Docena

Patrícia Silva

Viviane Vasconcelos de Carvalho

Suplente: Christian Reis

RPT0C9: Plataforma de PCR em tempo real

Cássia Docena

Patrícia Silva

Cássia Docena
Carlos Gustavo Regis
RPT07B: Plataforma de Microscopia Confocal

Regina Bressan de Figueiredo

Patrícia Silva

Cássia Docena

Suplente: Viviane Carvalho

Equipamentos
Materiais
Reagentes

Substâncias de
Referência
Instalações
Equipamentos, Materiais e Reagentes

Instalações

Registros
Equipamentos
Utilização
Manutenção
Manutenção
Calibração
Calibração
Instalações
Equipamentos, Materiais e Reagentes

Instalações:
● Dimensões, construção e localização adequadas para :
– necessidades do estudo
– minimizar interferências, que possam comprometer a
validade do estudo.
● Separação das diferentes atividades para assegurar a
condução apropriada do estudo.

Suprimentos:
● Áreas para armazenamento devem ser separadas
daquelas para sistemas teste e devem prover uma
proteção contra, contaminação e deterioração.
Instalações
Equipamentos, Materiais e Reagentes

Artigos Teste e Referência:

● Recebimento e armazenamento de artigos-teste
● Salas adequadas para preservar identidade,
concentração, pureza e estabilidade.
● Artigos de Referência (prevenir contaminação ou
mistura involuntária);

Equipamentos:
● Equipamentos periodicamente inspecionados, limpos,
mantidos e calibrados conforme POPs.
● Devem ser mantidos registros destas atividades.
● registros de inspeção, limpeza, manutenção e
calibração periódicas.
●LOG BOOK
● POP
Sequenciamento de DNA
Equipamentos

●LOG BOOK
Registros de utilização
Limpeza Blocos
Troca de capilares
Calibração espacial
Manutenção Preventiva
Calibração espectral
Manutenção corretiva
Problemas Ocorridos

Desfragmentação Disco
Arquivamento dos Resultados

● POPs
 Execução do
Estudo

Procedimentos
Operacionais
Padrão
Substância Teste

Substância teste

Instalações
Reagentes e soluções
Equipamentos Registros
Manutenção Utilização
Substância de Calibração Manutenção
Referência Calibração

Dados Brutos

Tratamento

Resultados
Execução do Estudo

Protocolo de Entrada de
material Agenda Mestra

Plano de Estudo

Dado Bruto
Procedimento
Operacional Padrão-
POP
Registro dos dados

Relatório Final

Arquivo
Sequenciamento de DNA: Fluxograma de análise

Obtenção do
DNA

Solicitação da
análise pelo site ID

Patrocinador
da plataforma

Aprovação da
solicitação? Agendamento

Protocolo de
Entrega das
entrada de
amostras
material

Agenda Mestra

Plataforma
SUPL-Plano de Reação de
Estudo-ID Sequenciamento

Resultados Eletroforese

SUPL-Relatório Liberação arquivos.abi e

Final-ID fasta aos usuários-RPT
PCR em tempo real: Fluxograma de análise

Obtenção do
RNA, cDNA, DNA

Solicitação da
análise pelo site ID

Patrocinador
da plataforma

Aprovação da
solicitação? Agendamento

Protocolo de
entrada de
material

Agenda Mestra

SUPL-Plano de
Reação de qPCR

Plataforma
Estudo-ID

Resultados

SUPL-Relatório Liberação arquivos.sds

Final-ID aos usuários-RPT
Microscopia Confocal: Fluxograma de análise

Preparo das
amostras

Solicitação da
análise pelo site ID

Patrocinador
da plataforma

Aprovação da
solicitação? Agendamento

Protocolo de
entrada de
material

Agenda Mestra

SUPL-Plano de
Microscopia

Plataforma
Estudo-ID

Fotos

SUPL-Relatório Liberação da análise

Final-ID aos usuários-RPT
Sequenciamento de DNA: Protocolo de Entrada de Material
Agenda Mestra
Uma planilha descritiva de todos os estudos
conduzidos segundo os princípios das BPL com os
seguintes dados :
● substância-teste;
● sistema-teste;
● natureza do estudo;
● data do início e término do estudo;
● Identidade do patrocinador;
● nome do Diretor de estudo;
Plano de Estudo
Natureza do Estudo
Neste item deve estar descrito a natureza do estudo
(químico, físico, biológico ou físico-químico).

Propósito do Estudo
Propósito do estudo no contexto da plataforma, ou seja, os
objetivos inerentes a utilização daquela técnica ou ensaio.

Documentos Complementares
Neste capítulo devem ser relacionados todos os POPs
exigíveis à perfeita aplicação do PE. Neste caso, devem ser
incluídos os POPs de equipamento, solução e reagentes e os
POPs analíticos para a execução daquele estudo

Definições
A redação de definições deve estar baseada em conceitos já
firmados e/ou termos definidos em normas nacionais e
internacionais além de ter caráter qualificativo (o que é) e/ou
funcional (para que serve).

Siglas
Neste capítulo devem ser relacionadas, as siglas utilizadas no
texto com o seu devido significado.
Plano de Estudo
Substância de Referência (controles positivo e negativo,
quando houver)
A substância de referência pode ser o próprio padrão
analítico ou pode ser o material não exposto à substância
teste. Quando aplicável também devem ser descritos
Controles Positivo e Negativo.

Unidade Operacional
Neste capítulo, devem ser indicados nome e endereço da UO
envolvida.

Diretor de Estudo
Neste capítulo, devem ser indicados nome e endereço do DE.

Projeto Experimental
-Descrição do procedimento cronológico do estudo
-Métodos, materiais e condições do estudo

Referências Bibliográficas
Neste capítulo devem ser relacionados todos os documentos
utilizados para a confecção do PE, incluindo normas, manuais,
artigos científicos, livros e outros.
Sequenciamento de DNA: Plano de Estudo
Plano de Estudo
Plano de Estudo
Plano de Estudo
Estudo de Curta
Duração

Demanda de Análises
Demanda de Análises
Demanda de Análises
Mês a Mês
Suplemento do Plano de Estudo
Simplificação do Plano de Estudo
Existência de um plano de estudo geral acompanhado de
um suplemento específico.

Sendo que ;
o plano geral é aprovado com antecedência pelo Gerente e
pela UGQ;

O Plano de estudo é o documento combinado:

o plano de estudo geral
suplemento específico

O suplemento específico é comunicado imediatamente ao

Gerente e à UGQ.
Suplemento do Plano de Estudo
Suplemento do Plano de Estudo
Relatório de
Resultados
Suplemento do Relatório Final
Simplificação do Relatório Final
Para cada estudo, redigido após o término do estudo;

● deve ser assinado e datado pelo Diretor de Estudo para

indicar a aceitação da responsabilidade pela validade dos dados.
● Correções e aditamentos a um relatório final devem ser
feitos na forma de emendas.
● Emendas devem especificar claramente o motivo da correção
ou aditamento e devem ser assinadas e datadas pelo Diretor de
Estudo.

Para estudos de curta duração :

Pode ser utilizado um relatório final padronizado
acompanhado de um suplemento específico.
Suplemento do Relatório Final
● Identificação do estudo, do artigo-teste e do artigo de
referência :
● Informações referentes ao Patrocinador e à Unidade
Operacional : nome e endereço do patrocinador, da
unidade operacional, do Diretor de estudo
● Datas de início e término experimental.
● Descrição dos resultados :
– Todas as informações e dados requeridos pelo plano de
estudo;
– A apresentação dos resultados, incluindo os cálculos e
determinações relevantes estatisticamente.
– A avaliação e discussão dos resultados e, quando
apropriado,conclusões.
● A localização do material arquivado;
● Os desvios em relação ao plano de estudo, com
discussões se necessário.
Suplemento do Relatório Final
Suplemento do Relatório Final
Armazenamento e
retenção de
registros
 Arquivos
Os itens seguintes precisam ser guardados pelo
período
especificado:
– plano de estudo, dados brutos, amostras de
artigos-teste, artigos de referência, e o relatório
final de cada estudo;
– registros de todas as auditorias realizadas pelo
programa de garantia da qualidade;
- agendas-mestre;
– registros das qualificações, treinamento,
experiência e
descrições de cargo do pessoal;
– registros e relatórios de manutenção e calibração
de
equipamentos;
– documentação de validação de sistemas
computadorizados;
– arquivo histórico de POPs;
 Obrigada!!

Agradecimentos
Renata Souza
Eliane Campagnucci
Cássia Pereira
Win Degrave
Ana Paula Brum
PDTIS