Biologia - 12º ano

Unidade dois
Fundamentos de engenharia
genética

ESAB – Biologia Teresa Fonseca

 Fundamentos de Engenharia Genética

 O que é a Biotecnologia?

Bio + Tecnologia
O uso de organismos vivos para
resolver problemas e fazer
produtos úteis ao ser humano.

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 Fundamentos de Engenharia Genética

"Nenhum de nós vive um único dia sem experimentar os efeitos

da Biotecnologia"

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 Fundamentos de Engenharia Genética

 Biotecnologia…

If he weren’t in the computer field, he’d be working in biotechnology.

Bill Gates

In the years to come, the contributions of the biotechnology industry will help us
to win the war on terror, will help us fight hunger around the world and will help
us to save countless lives with new medicines.
George W. Bush

In our view, gene therapy may ameliorate some human genetic diseases, in the
future…
T. Friedmann, Science, 1972

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 Fundamentos de Engenharia Genética

 Biotecnologia … antes de 1970

Processamento de materiais por agentes biológicos;

Engenharias de fermentação;

Eficiência no local de trabalho (Ergonomia)

Microbiologia aplicada e fermentação industrial – 1961

(…)

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 Biotecnologia …hoje  Novas biotecnologias

Aplicação dos conceitos de funcionamento molecular das

células (Biologia Celular) e das tecnologias do DNA recombinante
(Engenharia genética) para obtenção de produtos e/ou serviços
úteis ao ser humano;

Optimização dos processos industriais.

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 Os primeiros passos da Engenharia Genética…

... Pág. 165 do manual escolar

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 Engenharia Genética
Transferir
genes de
um genoma
Isolar genes no para outro…
genoma…

Clonar Alterar o
genes… genoma…

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 Fundamentos de Engenharia Genética

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 Fundamentos de Engenharia Genética

 Engenharia Genética
Como se introduz
um gene
estranho dentro
O que é a tecnologia de uma
do DNA bactéria?…
recombinante?

Não será
Quais as
perigoso?
utilidades
desta
técnica?

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 Bacteriófago a infectar uma bactéria

As primeiras enzimas de restrição foram obtidas a partir de microrganismos e têm

um papel de defesa contra a invasão de DNA estranho (ex: vírico).

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 Enzimas de restrição

Reconhecimento da sequência 5’ GAA TTC 3’ pela enzima EcoRI.

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 Características das enzimas de restrição

Enzimas chave no processo de clonagem de genes ou fragmentos de DNA, nome

tem origem no nome do organismo do qual foi isolada;
ex. EcoRI Escherichia coli, R – estirpe RY13, I – ordem de identificação

Foram obtidas a partir de microrganismos, nos quais fazem parte de um sistema

de defesa à invasão de DNA estranho (ex: Vírus).

Reconhecem sequências específicas de DNA em cadeia dupla

(tipicamente sequências de 4 ou 6 nucleótidos).

Cortam o DNA em locais específicos, inactivando-o mas não digerindo o DNA

endógeno que se encontra modificado em certas sequências.

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 Enzimas de restrição

sistema que protege o DNA do

Enzima de restrição + metilase hospedeiro e destrói DNA
estranho
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 Enzimas de restrição e ligases

As enzimas de restrição fragmentam o DNA em locais específicos;

muitos locais de restrição são repetições invertidas – a sequência das duas

cadeias é igual quando lida de 5’ para 3’ ----- sequências palindrómicas;

muitas cortam o DNA em ziguezague deixando extremidades de cadeia única –

extremidades coesivas …

- permite o emparelhamento de “caudas” de diferentes

fragmentos de DNA cortados com a mesma enzima
- os dois fragmentos emparelhados podem depois ser
unidos pela enzima DNA ligase com consumo de ATP

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 Enzimas de restrição e ligases

Extremidade coesiva

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 Enzimas de restrição - exemplos

• Corte a direito; extremidades de cadeia dupla

(Hpa I)

• Corte em ziguezague; extremidades de cadeia

simples e protuberantes - extremidades coesivas
(Sticky ends)

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 Ação da EcoR1

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 Importância das enzimas de restrição…

... Pág. 168 e 169 do manual escolar

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 Vectores

Plasmídeos

Vírus
Transportam genes de um
genoma para outro

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 Características dos vectores

Contêm uma origem de replicação que lhes permitem dividirem-se no
hospedeiro.

Têm locais onde cortam enzimas de restrição e é possível introduzir (clonar)

fragmentos de DNA.

Possuem marcas de selecção (como um gene que codifica resistência a um

antibiótico que permite seleccionar hospedeiros que contêm o vector).

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 Vectores - Plasmídeos

Os plasmídeos são:

moléculas circulares de DNA que

estão separadas do DNA
cromossómico;

contêm geralmente um ou dois

genes.

podem replicar-se
independentemente do DNA
cromossómico.

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 Vectores - Bacteriófagos

Os bacteriófagos são:

muitas vezes denominados por

Fagos;

vírus que infectam

exclusivamente bactérias;

podem apresentar um ciclo lítico

ou lisogénico.
Adsorção do bacteriófago ao seu hospedeiro

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 Bacteriófagos - ciclo de vida em células procariontes

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 Existem outros vectores

(para vos atormentar no vosso futuro universitário!!!)

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Enzimas de
restrição

Ligases

Vectores

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 Inserção do DNA recombinante num organismo…

... Pág. 169 e 170 do manual escolar

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 Tecnologia do DNA
recombinante

DNA recombinante

DNA que resulta da junção

(não natural) de DNA
proveniente de duas fontes
diferentes

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 Biblioteca de genes

O gene com interesse é

clonado permitindo a sua
conservação em diversas
cópias para posteriores
utilizações -bibliotecas de
genes.

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 DNA complementar…

... Pág. 172 do manual escolar

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 cDNA

Em que medida se pode

afirmar que a produção de cDNA
limita o dogma central da
biologia?

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 Aplicações da tecnologia do DNA recombinante

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 Clonagem de genes humanos em bactérias…

... Pág. 179 do manual escolar

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 Biblioteca de genes

Bibliotecas genómicas Bibliotecas de cDNA

Material genético DNA mRNA

manipulado

Condição do DNA Natural Artificial

Fragmentos de DNA Genes isolados

Material a clonar (Intrões e Exões) (Exões)

Replicação
Replicação
Função da biblioteca Armazenamento
Armazenamento
Síntese proteica

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 Técnica do DNA fingerprint (Impressões digitais genéticas)

Separação dos fragmentos de DNA por electroforese

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 Técnica do DNA fingerprint (Impressões digitais genéticas)

Testes de paternidade – DNA fingerprint

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 Técnica do DNA fingerprint (Impressões digitais genéticas)

Aplicação forense do DNA fingerprint

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 Reacção de polimerização em cadeia (PCR)

É uma das técnicas para

clonar DNA de modo a obter
grandes quantidades a partir de
uma pequena amostra.

PCR

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 O PCR no quotidiano da sociedade…

... Pág. 177 e 178 do manual escolar

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 Aplicações da Engenharia Genética - OGM

Designam-se organismos geneticamente

modificados (OGM) aqueles cujo material
genético foi alterado de tal maneira que não
ocorre naturalmente por acasalamento ou
recombinação.

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 Aplicações da Engenharia Genética - OGM

A manipulação genética permite obter, de forma rápida, organismos com

características vantajosas (plantas resistentes a doenças…).

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 Fundamentos de Engenharia Genética

 O papel dos média na divulgação científica.

... Pág. 180 e 181 do manual escolar

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 Fundamentos de Engenharia Genética

 Estudo de caso: a polémica do arroz dourado.

... Pág. 183 e 184 do manual escolar

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?
 Transgénicos...

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 Fundamentos de Engenharia Genética

 Aplicações da Engenharia Genética – Terapia génica somática

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 Fundamentos de Engenharia Genética

 Aplicações da Engenharia Genética – Terapia génica somática

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 Aplicações da Engenharia Genética – Terapia génica somática

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 Aplicações da Engenharia Genética – Clonagem

Frequentemente com anomalias congénitas dos órgãos

que inviabilizam o nascimento ou o desenvolvimento.

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 Aplicações da Engenharia Genética - …

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