BIOTECNOLOGIA

Professora: Ana Paula

Disciplina: Biologia
 A biotecnologia é uma área que visa desenvolver produtos e processos
biológicos com a ajuda da ciência e da tecnologia. A Organização das
Nações Unidas (ONU) classifica biotecnologia como “qualquer aplicação
tecnológica que utiliza sistemas biológicos, organismos vivos, ou seres
derivados, para fabricar ou modificar produtos ou processos para
utilização específica”.
As aplicações mais importantes da biotecnologia estão relacionadas com
a área da medicina, além da agricultura e produção de alimentos e
também no meio ambiente.

Embora o ser humano utilize a biotecnologia há milhares de anos, os

conhecimentos em diversas áreas científicas (microbiologia, bioquímica,
genética, biologia molecular, nanotecnologia, engenharia de processos,
etc), e em especial os relacionados à molécula de DNA, revolucionaram
o modo de manipular os organismos, a fim de obter certos produtos e
processos. Atualmente, a biotecnologia apoia-se em grande parte
nas técnicas de DNA recombinante.
Aplicabilidade da biotecnologia:

• Indústria farmacêutica: desenvolvimento de novas drogas, produção e

melhoramento de antibióticos, vacinas, estabelecimentos de terapias
gênicas e demais projetos para tratamentos de doenças em animais e
plantas;

• Indústrias de análises: desenvolvimento de testes de diagnósticos

clínicos. Alimentícios agrícolas e ambientais;

• Indústria da agricultura: desenvolvimento de uma gama de variedades

de remédios para plantas, sementes mais resistentes a pragas e
condições climáticas, pesticidas menos impactantes para a saúde
humana e ambiental etc;

• Indústria alimentícia: produção, controle e melhoramento de

alimentos e bebidas;

• Indústria química: produção de insumos

químicos, enzimas e proteínas recombinantes.
 FERRAMENTAS DA GENÉTICA
MOLECULAR
•Plasmídeos

•Enzimas de restrição

•PCR (reação em cadeia da polimerase)

•Tecnologia do DNA recombinante

 PLASMÍDEOS BACTERIANOS
O plasmídeo é o material
genético circular não
ligado ao cromossomo
que fica espalhado pelo
hialoplasma das
bactérias. Ele sofre o
mesmo processo do DNA
cromossomal de
transcrição e tradução,
além de, se multiplicar a
cada divisão celular,
passando uma cópia para
cada célula “filha”.
O plasmídeo é retirado
das células bacterianas
para que se possa inserir
o gene de estudo, para
depois recolocá-lo na
bactéria.
 A partir da década de 1970,
ficou mais fácil analisar a ENZIMAS DE RESTRIÇÃO
molécula de DNA com o
isolamento da enzimas de
restrição. Estas enzimas
são endonucleases, ou seja,
no interior (daí o prefixo endo-
dentro) das moléculas de DNA,
cortando-as em locais bem
definidos.
São enzimas produzidas
normalmente por bactérias e
que possuem a propriedade de
defendê-las de vírus invasores.
Essas substâncias “picotam” a
molécula de DNA sempre em
determinados pontos, levando
a produção de fragmentos
contendo pontas adesivas, que
podem se ligar a outras pontas
de moléculas de DNA que
tenham sido cortadas com a
mesma enzima. 
PCR (Reação em cadeia da polimerase)

Ocorrendo a fragmentação das moléculas de DNA, com o uso das

enzimas de restrição, e o seu reconhecimento pela técnica de
eletroforese em gel, o próximo passo é multiplicar (clonar) o fragmento
obtido e submetê-los à tecnologia do DNA recombinante.

A técnica de multiplicação da fita de DNA é chamada de PCR (reação

em cadeia da polimerase).

Na década de 1980, passou-se a utilizar a técnica do PCR para fazer

milhares de cópias de um único pedaço de DNA. Essa técnica é usada
em tubos de ensaio contendo o DNA e mais alguns compostos
necessários, como primers (DNAs iniciadores) e a enzima DNA
polimerase (enzima que faz a replicação do DNA).

O objetivo da PCR é a obtenção de muitas cópias de uma sequência

específica de ácido nucleico, a partir de uma fita molde, ou seja,
consiste na produção de DNA in vitro (no laboratório).
 TECNOLOGIA
DO DNA
RECOMBINANTE
• Os pesquisadores querem estudar um gene humano que produz uma
proteína que não se sabe a função.

• Os pesquisadores “recortam” (utilizando enzimas de restrição), do DNA

humano, o gene de interesse.

• Esse fragmento de DNA contendo o gene é multiplicado por PCR para

obtermos várias cópias do mesmo fragmento (ou da mesma informação).
A mesma enzima que clivou o gene do DNA humano é utilizada para
clivar o plasmídio bacteriano. Lembre-se que o fragmento de DNA, ao
ser clivado, gera pontas adesivas que são complementares ao plasmídio
se este for clivado com a mesma enzima.

• A seguir o plasmídio clivado é misturado com os fragmentos de DNA

(contendo o gene) e uma enzima chamada ligase “cola” os fragmentos
ao plasmídio, produzindo o chamado DNA recombinante. Isso feito, o
DNA recombinante é introduzido em uma bactéria hospedeira.

• A bactéria hospedeira é colocada em um meio nutritivo seletivo,

apenas aquelas que possuem o DNA recombinante crescem, formando
colônias. Após muitas gerações de bactérias, o produto da expressão dos
genes, as proteínas humanas, são purificadas das bactérias (são
separadas das proteínas das bactérias).