Clonagem do DNA

Introdução
Clonagem de DNA é o processo de fazer várias cópias idênticas de um pedaço
específico de DNA. Num procedimento típico de clonagem de DNA, o gene ou outro
fragmento de DNA de interesse (talvez um gene para uma proteína humana de
interesse médico) é primeiramente inserido numa peça circular de DNA
chamada plasmídeo
A inserção é feita utilizando-se enzimas que “cortam e colam” DNA, e
produz uma molécula de DNA recombinante, ou seja, DNA montado a
partir de fragmentos de várias fontes.
 Pontos principais da clonagem do DNA
•Clonagem de DNA é uma técnica da biologia molecular para fazer muitas cópias
idênticas de um pedaço de DNA, tal como um gene.

•Num experimento típico de clonagem, um gene alvo é inserido num pedaço circular
de DNA chamado do plasmídeo.

•O plasmídeo é introduzido em bactérias através de um processo

chamado transformação, e bactérias portadoras do plasmídeo são selecionadas
utilizando-se antibióticos.

•As bactérias com o plasmídeo correto são utilizadas para produzirem mais DNA do
plasmídeo ou, em alguns casos, induzidas a expressar o gene e produzir proteína.
 Etapas da clonagem do DNA

1.Cortar e abrir o plasmídeo e "inserir" o gene. Esse

processo baseia-se em enzimas de restrição (que cortam o
DNA) e na DNA ligase (que une/cola o DNA).

2.Inserir o plasmídeo na bactéria. Utilizar a seleção por

antibiótico para identificar as bactérias que pegaram o
plasmídeo.

3.Cultivar lotes de bactérias portadoras de plasmídeo e usá-

las como "fábricas" para fazer a proteína. Colher a proteína
das bactérias e purificá-la.
 Produção de proteína

Uma vez que encontramos uma colonia de bactérias com o plasmídeo certo,
podemos cultivar uma grande cultura de bactérias portadoras do plasmídeo. Nesse
momento, damos às bactérias um sinal químico que as instrui a produzir a proteína
alvo.
As bactérias servem como mini "fábricas”, produzindo grandes quantidades de
proteína. Por exemplo, se nosso plasmídeo continha o gene da insulina humana,
as bactérias começariam a transcrição do gene e a tradução do RNAm para
produzir muitas moléculas da proteína insulina humana.
 DNA transgênicos
Transgênico é sinônimo para a expressão "Organismo Geneticamente
Modificado" (OGM). É um organismo que recebeu um gene de outro
organismo doador. Essa alteração no seu DNA permite que mostre
uma característica que não tinha antes. Na natureza, sempre ocorreram
(e ainda ocorrem) alterações ou mutações naturais.

Os genes contêm as informações que definem as características

naturais dos organismos, como a cor dos olhos de uma pessoa ou o
perfume de uma flor. Ao receber um ou mais genes de outro
organismo, um vegetal pode se tornar resistente a pragas ou mais
nutritivo, por exemplo.
 Genoma humano

O genoma humano é o conjunto completo

de sequências de ácido nucleico codificado
como DNA dentro dos 23 pares
de cromossomos nos núcleos das células e
em uma pequena molécula de DNA
encontrada nas mitocôndrias individuais.
Usualmente, o genoma mitocondrial é
tratado separadamente do genoma nuclear.
Os genomas humanos são compostos tanto
por genes de DNA codificadores de
proteínas quanto por DNAs não
codificadores.
 Projeto genoma humano

O Projeto Genoma Humano foi um

projeto de pesquisa científica
internacional com o objetivo de
determinar os pares de bases que
compõem o DNA humano e de
identificar, mapear e sequenciar todos os
genes do genoma humano do ponto de
vista físico e funcional.
Muito obrigado.
 Sites consultados

https://pt.khanacademy.org/science/ap-biology/gene-
expression-and-regulation/biotechnology/a/overview-dna-
cloning

https://www.embrapa.br/tema-transgenicos

https://pt.m.wikipedia.org/wiki/Genoma_humano

https://pt.m.wikipedia.org/wiki/Projeto_Genoma_Humano