BIOTECNOLOGIA

Parte de três descobertas

1970: Descoberta da Transformação

de E. coli
1972: Descoberta de plasmídeos
1973: Descoberta das enzimas de
restrição
Infecção Natural por Agrobacterium tumefaciens
TECNOLOGIA DO
DNA
RECOMBINANTE

PLASMÍDEOS
“Desarmados” e
com sítio
“polylinker”
 BIOTECNOLOGIA MODERNA
Tecnologia do DNA Recombinante – GENE
Transgênicos

Obtidos por uma técnica que se baseia na

inserção (colocação) ou “retirada” de genes

Troca de material genético é uma forma de

PROPAGAÇÃO SEXUADA
 Gregor Mendel
(1822-1884)
 É hoje considerado o “pai da genética” pelos
cruzamentos que realizou com ervilhas. No entanto,
quando Mendel apresentou seu trabalho em 1866, na
Sociedade de História Natural de Brünn, foi ignorado.
Somente por volta de 1900 seu trabalho foi
reconhecido, quando os cientistas Hugo De Vries, Carl
Correns e Erich Tschermak, com trabalhos distintos,
chegaram às mesmas conclusões de Mendel
Antes mesmo do homem compreender os processos
biológicos (hereditariedade, DNA, genes,
proteínas), os recursos naturais já eram explorados
e artificialmente selecionados.
 Início:Mecanismos desconhecidos. Cruzamentos experimentais →
híbridos instáveis. Resultados imprevisíveis e instáveis.
 Mendel:Resultados previsíveis e estáveis. Manipulação de
cruzamentos e melhoramento genético.
 As plantas possuem “fatores” hereditários;
 Os fatores são transmitidos de uma geração a outra;
 Os fatores podem ser representados por letras: maiúscula (A) para o dominante
e minúscula (a) para o recessivo;
 As plantas híbridas (F1) possuem os dois fatores (Aa), só assim podem produzir
dois tipos de descendentes (F2);
 Os fatores na planta híbrida não se misturam;
 Os fatores na planta híbrida devem se separar na formação dos gametas, de
modo que cada gameta possua apenas um dos fatores.
 Obs.: Nessa época, nada se sabia sobre cromossomos e meiose.
O que é um organismo
geneticamente modificado (OGM)?
São aqueles que recebem um ou mais genes de
outro organismo e passam assim a expressar
uma nova característica de interesse
OGMs = melhoramento genético clássico.
cruzamentos naturais ou forçados com seleção
humana
OGMs= tão antigos quanto a agricultura (mas
não são produzidos por transformação).
 TODO OGM É UM
TRANSGÊNICO?
COMO OS TRANSGÊNICOS
SÃO PRODUZIDOS???
O QUE É UM TRANSGÊNICO?

2. Métodos Biológicos
e Físicos

1. Projetos Genoma; Projetos Proteoma, etc.

ANTES: Como que o gene se “expressa”, ou seja, como o gene
transmite a informação que está contida nele?
SÍNTESE DE PROTEÍNA = EXPRESSÃO GÊNICA
Era da Genômica (Sequenciamento DNA)
Código Genético – UNIVERSAL!!!

Gene GFP (green fluorescent protein)

Genes Eucarióticos x Genes Procarióticos
 CONCEITOS IMPORTANTES
O processo de introdução de genes de
interesse em organismos chama-se
transformação genética
O gene sendo transferido para o organismo é
chamado de transgene
Organismos com modificações genéticas são
denominados de transformados ou
transgênicos
ETAPAS PARA A TRANSFORMAÇÃO
GENÉTICA DE PLANTAS
 Seleção de tecido vegetal competente para propagação ou
regeneração;
 Método de transferência do gene de interesse (biológico ou
físico),
 Identificação de células transformadas por seleção;
 Regeneração de plantas a partir de células transformadas;
 Plantas transgênicas analisadas para confirmar presença do
transgene - herança e estabilidade;
 Plantas transgênicas avaliadas para performance no campo.
MÉTODOS DE INTRODUÇÃO DE
DNA NA CÉLULA
TRANSFERÊNCIA INDIRETA DE GENES:
Intermediada por bactérias como
Agrobacterium tumefaciens (afeta mais
dicotiledôneas) e Agrobacterium rhyzogenes
(monocotiledôneas) – DNA recombinante
TRANSFERÊNCIA DIRETA DE GENES:
Baseada em métodos físicos/químicos
(microinjeção, eletroporação e
biobalística).
GENÉTICA MOLECULAR MOLÉCULA DE DNA
Tecnologia do DNA Recombinante

O gene não é mais uma “entidade hipotética”

Manter fragmento “vivo” Veículo/Vetor

Vetor + inserto (Fragmento de DNA) = molécula

de DNA recombinante

Plasmídeos (8kb), fagos (20-25kb), cosmídeos

(50kb), YACs (acima 100kb)
 “Gene gun”,
Bombardeamento ou
Biobalística
Eletroporação e Fusão de
Protoplastos
Microinjeção
de DNA
Aplicações na pesquisa básica e aplicada
Conhecer o padrão temporal de
expressão de um gene
Conhecer o padrão espacial de
expressão de um gene
Conhecer a resposta de um gene a
diferentes estímulos
Estudar os genes envolvidos nos
diferentes processos fisiológicos (ex.
resistência a patógenos, floração, etc.)
 MITOSES
SUCESSIVAS