Prof. Dr. Leandro P.

Felício
 São técnicas que permitem ao homem
utilizar organismos para obter produtos de
interesse.
 Primeira Geração: 6.000 /2000 a.C.
 Fatos:
 cruzamento de espécies animais e plantas
 leveduras para fermentação de pão e álcool
  Segunda Geração: Fim do século
XIX Teoria de Louis Pasteur
 Fatos:
 microrganismos causam
enfermidades humanas
 Ação dos microrganismos
anaeróbios nas fermentações láctea,
alcoólica....

1822 - 1895
 Terceira Geração: Início de 1970. Biologia
Molecular
 Fatos:
 1o – isolamento e manipulação de genes
 2o – fusão e multiplicação de células
Técnicas para a manipulação do DNA
para:

identificar, isolar e multiplicar os genes

dos mais diversos organismos.
 PCR;
 c-dna
 DNA fingerprinting
 Clonagem
 Transgenia
 Terapia gênica.
 Enzima de Restrição –
Corta DNA em
Palíndromos
 DNA Ligase – Une o DNA
 Transcriptase Reversa –
Realiza a produção de DNA
com molde de RNA.
 Plasmídios – DNA extra
cromossômico bacteriano.
 Taq Polimerase
 Sequências circulares de DNA. Reproduzem-se de
forma autônoma;
 Encontram-se no citoplasma de certas bactérias.
 Elementos genéticos extracromossômico.
 1-TDR TÉCNICA DE
DNA RECOMBINANTE
 Recebem e manifestam genes de outros
organismos;
Desafio atual – Realizar
essa degradação de
forma eficiente
 Manipulação da herança genética com fins eugênicos
(depuração da espécie);

 Obtenção de microrganismos com características antes

inexistentes (resistência a antibióticos; produção de
toxinas, doenças).

 Foi enxertado no milho, gene de bactéria Bacillus

thuringiensis (Bt), com instruções para fabricar substância
tóxica para insetos, mas não para o homem. A planta
tornou-se um inseticida;
 Em 1999 foi feita experiência com pólen de milho transgênico e
44% das borboletas monarca (não alvo) morreram.
 Colocou-se gene da castanha-do-pará no feijão para
corrigir a proteína, pobre em Metionina (aminoácido
essencial).

 O novo feijão (PGM), acabou fugindo do controle e, ao

assumir mais metionina, assumiu também as substâncias
alergênicas presentes na castanha-do-pará.

 Falta de competitividade do pequeno produtor.

 Em alguns casos pode aumentar o uso de agrotóxicos.

2- PCR (reação em
cadeia da
polimerase)
2- PCR (reação em
cadeia da
polimerase)
 Polymerase Chain Reaction (Reação em cadeia da
polimerase;
 Permite amplificar seletivamente uma porção de DNA.
 Permite a amplificação de uma porção de DNA
específica
 Técnica que permite separar amostras de
moléculas carregadas eletricamente, através de
uma diferença de potencial
 Fragmentos migram inversamente proporcional
ao seu tamanho.
 Teste de paternidade;

 Identificação de autores de crimes;

 Prova de laços de parentesco;

 Identificação de cadáveres e fósseis.

 Clone (grego:klon, broto, ramo)
 População de geneticamente idênticos, produzidos
assexuadamente ou a partir de progenitor comum;
 Cópia idêntica de moléculas, células, tecidos e organismos
adultos.
 Ex: população de bactérias, plantas.
 Aumentar a chances de gravidez em
pessoas submetidas à fertilização in vitro;
 Adulto ter gêmeo idêntico como seu
próprio filho;
 “Vida eterna” – A ilha, O 8º dia.
 A cada divisão celular, a
extremidade dos
cromossomos, os telômeros,
encurtam-se;
 A redução do tamanho do
telômero está associada à
senescência
(envelhecimento).
 O tamanho do telômero
forma um relógio biológico
para nossas células.
 Vítimas de infarto receberiam implante de
células musculares cardíacas;
 Pessoas com mal de Parkinson ou mal de
Alzheimer receberiam neurônios sadios;
 Desafio: É preciso conhecer o processo de
diferenciação, depois reproduzir toda a delicada
operação físico-química em laboratório.
 Introdução de genes sadios para tratamento ou cura
de doenças genéticas;
 Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic
Repeats (CRISPR)
 Repetições Palindrômicas Curtas Agrupadas e
Regularmente Interespaçadas
 Mecanismo originalmente isolado à partir de
bactérias.
 Proteção contra ataque de bacteriófagos.
 Seu uso permite a edição seletiva de genes.
 Edição de DNA;
 Cura de doenças genéticas – Anemia falciforme,
câncer, fibrose cística...
 Prevenção de doenças – Câncer, infarto, Doença
de Huntington...
 Eliminação de infecções virais – HIV, Hepatite...
 Escolha de características do embrião – DILEMA
ÉTICO
 Chineses modificaram
o gene que causa a
talassemia beta
 Anemia genética grave e
potencialmente fatal
 86 embriões
modificados – 71
sobreviveram – 28
foram alterados.
 Implicações éticas: Bebê encomendado
 Doença letal
 Gene presente em
DNA mitocondrial.
 Mitocôndria:
 Respiração celular
 Mitocôndria  DNA matrilinear (exclusivamente
materno)

+ =
 Mitocôndria  DNA matrilinear (exclusivamente
materno)

+
MUTAÇÃO

40 anos ou +
 Mitocôndria  DNA matrilinear (exclusivamente
materno)

+ =

40 anos ou +
40 anos ou +
 Localização nos cromossomos humanos
de todos os genes responsáveis pelas
características normais e patológicas;

 Mapeamento e sequenciamento de 3 bilhões de

pares de bases que formam o genoma humano;

 Doenças genéticas conhecidas: seis mil.

Maia, L.C.
Disponível em : http://www.nytimes.com/2013/05/14/opinion/my-
medical-choice.html?_r=0
 Baratemento e rapidez nos
sequenciamentos.
 O projeto Genoma Humano custou $3
bilhões e demorou 12 anos (1991-2003).
 O sequenciamento do genoma do
James Watson’s em 2007 custou $2
milhões e demorou 2 meses
 Hoje, o sequenciamento de um genoma
humano custa algo em todo de
$100.000 e leva um mês para ser
concluido.
 O Archon X prize: $10 milhões se
sequenciar 100 genomas humanos em
10 dias, com um custo de $10.000 por
genoma.