Machine Translated by Google

Proteção de Culturas 144 (2021) 105576

Listas de conteúdos disponíveis em ScienceDirect

Proteção de Cultivos

página inicial da revista: www.elsevier.com/locate/cropro

Influência de herbicidas de pré-emergência no desenvolvimento da soja,

nodulação radicular e fixação simbiótica de nitrogênio
a b a
Vítor Hugo Vidal Ribeiro , Lucas Silva Gontijo Maia , Nicolau John Arneson ,
a c b
Maxwell Coura Oliveira , Harry Wood Leia , Jean-Michel Ané , Jose Barbosa dos Santos d
,
Rodrigo Werle a,*
a
Departamento de Agronomia da Univ. de Wisconsin, 1575 Linden Dr., Madison, WI, 53706, EUA
b
Prédio de Ciências Microbianas da Univ. de Wisconsin, 1550 Linden Dr., Madison, WI, 53706, EUA
c
Departamento de Ciência do Solo da Univ. of Wisconsin, 1525 Observatory Dr., Madison, WI, 53706, EUA
d
Department of Agronomy at Univ. Fed. dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, Rod. MGT 367, Km 583, 5000 Alto da Jacuba, Diamantina, MG, Brazil

INFORMAÇÕES DO ARTIGO ABSTRATO

Palavras-chave: A ocorrência generalizada de ervas daninhas resistentes a herbicidas limitou ainda mais as opções eficazes de herbicidas de pós-
Herbicidas de pré-emergência
emergência na soja (Glycine max (L.) Merr.), levando a um aumento na adoção de herbicidas de pré-emergência. O objetivo deste
Bradyrhizobium japonicum
estudo foi investigar a influência de 11 herbicidas PRE comumente usados no desenvolvimento da soja, nodulação radicular e fixação
Nodulação da raiz
simbiótica de N. Plantas de soja foram cultivadas em casa de vegetação em vasos (10 L; 4 plantas por vaso) preenchidos com solo
Soja
Fixação de nitrogênio
argiloso e tratados um dia após o plantio com uma taxa de campo rotulada de imazetapir, clorimuron-etil, cloransulam-metil, metribuzin,
sulfentrazone, flumioxazina, saflufenacil, acetocloro, S-metolacloro, dimetenamida-P, piroxasulfona e nenhum herbicida (controle não
tratado).
Sulfentrazone reduziu a copa da soja no estádio de crescimento VC, mas nenhuma redução do dossel foi observada no estádio de
crescimento V2 de qualquer um dos tratamentos com herbicida. No estádio R2, os herbicidas não afetaram o desenvolvimento da
soja (biomassa radicular e aérea), nodulação radicular (# nódulo por planta, diâmetro do nódulo e biomassa do nódulo) e fixação
simbiótica de N (ensaio de redução de acetileno e abundância natural de 15N ) . De acordo com nossos resultados, embora os
herbicidas PRE possam afetar levemente o desenvolvimento da soja no início da safra, os impactos no crescimento da planta,
nodulação da raiz e fixação simbiótica de N foram insignificantes. Assim, quando pulverizado de acordo com o rótulo, os benefícios
dos herbicidas PRE para controle de ervas daninhas provavelmente superam qualquer preocupação potencial com relação ao
desenvolvimento da soja, nodulação da raiz e fixação de N.

1. Introdução
Herbicidas de PRÉ-emergência (PRE) são recomendados em sistemas de produção
de soja (Glycine max (L.) Merr.) para o manejo de espécies daninhas com janela de
emergência estendida. Além disso, o uso de herbicidas PRE é considerado um
componente crucial para o manejo de ervas daninhas resistentes ao glifosato (GR)
(Norsworthy et al., 2012). Herbicidas PRE eram comumente usados na produção de
soja; no entanto, as tendências de uso de herbicidas mudaram drasticamente devido à
adoção rápida e generalizada de cultivares de soja GR nos Estados Unidos (EUA) no
final da década de 1990, levando ao aumento da dependência apenas do glifosato para
pós-emergência
(POST) controle de ervas daninhas (Young, 2006; Benbrook, 2016; Kniss, 2017).
A dependência excessiva do glifosato resultou na rápida evolução de ervas daninhas GR
(Johnson et al., 2009), consequentemente, entre 1990 e 2020, 17 espécies diferentes de
ervas daninhas desenvolveram resistência ao glifosato somente nos EUA (Heap, 2020).
Devido à ampla prevalência de ervas daninhas GR e limitadas opções eficazes de
herbicidas POST na soja, o uso de herbicidas PRE tornou-se uma recomendação padrão
para o manejo de ervas daninhas nos EUA (Norsworthy et al., 2012). Como resultado, a
área total plantada com soja tratada com herbicidas aplicados PRE nos EUA aumentou
de 2006 a 2017, onde a área tratada com metribuzin [Photosystem II

Abreviaturas: ALS, acetolactato sintase; ARA, ensaio de redução de acetileno; DAT, dias após o tratamento; GR, resistente ao glifosato; N, nitrogênio; Ndfa, nitrogênio derivado da atmosfera;
MO, matéria orgânica; POST, POST-emergência; PPO, protoporfirinogênio oxidase; PRÉ, PRÉ-emergência; PSII, fotossistema II; SOA, local de ação; EUA, Estados Unidos; VLCFA, ácido graxo
de cadeia muito longa; 1×, taxa de etiqueta; 5×, cinco vezes a taxa da etiqueta.
* Autor correspondente.
Endereço de e-mail: rwerle@wisc.edu (R. Werle).

https://doi.org/10.1016/j.cropro.2021.105576 Recebido
em 20 de maio de 2020; Recebido no formulário revisado em 31 de janeiro de 2021; Aceito em 6 de fevereiro de
2021 Disponível online em 13 de fevereiro
de 2021 0261-2194/Publicado por Elsevier Ltd.
Machine Translated by Google

VHV Ribeiro et al. Proteção de Culturas 144 (2021) 105576

(PSII)-inibidor], sulfentrazona [Protoporfirinogênio oxidase (PPO)-in hibitor] e S-metolacloro
[Very-long-chain grey fat (VLCFA)-inibidor] aumentou de 2 para 18%, 1–22% e 1 –16%,
respectivamente (USDA, 2020).
Os benefícios da incorporação de herbicidas PRE em programas de manejo de ervas
daninhas incluem a redução da competição com ervas daninhas no início da estação e o
atraso no tempo crítico para remoção de ervas daninhas, otimizando as estratégias de
controle de ervas daninhas e minimizando a perda potencial de rendimento da cultura
(Oliveira et al., 2017a; Kne zevic et al., 2019 ) . Herbicidas PRE podem atrasar a primeira
aplicação POST em 2 a 5 semanas, reduzindo a necessidade de aplicações repetidas de
herbicidas POST (Knezevic et al., 2019). Oliveira e cols. (2017b) relataram o uso eficaz de
herbicidas PRE para o controle de várias espécies anuais de folhas largas e gramíneas em
Nebraska. Além disso, o uso de herbicidas PRE é considerado uma base para o manejo
de ervas daninhas problemáticas, como kochia (Bassia scoparia (L.) AJ Scott) e Amaranthus
spp. (Whitaker et al., 2011; Kumar e Jha, 2015).
Por outro lado, danos à soja no início da safra devido a aplicações de herbicidas PRE
são uma preocupação comum entre os produtores (Mahoney et al., 2014a, 2014b). Por
exemplo, danos à soja por aplicações de metribuzin, sulfen trazona, flumioxazin, saflufenacil
e S-metolacloro foram documentados em pesquisas anteriores (Miller et al., 2012; Mahoney
et al., 2014b; Belfry et al., 2015). O nível de dano à soja pode estar relacionado tanto com
a tolerância da cultivar quanto com as condições ambientais. Condições ambientais frias e
úmidas aumentam a probabilidade de danos à soja, pois esses herbicidas estão prontamente
disponíveis no solo para a absorção das plantas e as temperaturas baixas diminuem a
capacidade da cultura de metabolizar os herbicidas (Hulting et al., 2001; Poston et al.,
2008 ; Miller e outros, 2012).
A inoculação de sementes de soja com a bactéria Rhizobia Bra dyrhizobium japonicum
(Kirchner) Jordan, é uma prática comum na produção de soja, pois essas bactérias
colonizam simbioticamente as raízes da soja e fixam o nitrogênio (N) atmosférico,
fornecendo uma fonte renovável de N para as plantas de soja . Mohammadi et al., 2012;
Zimmer et al., 2016). Por exemplo, Salvagiotti et al. (2008) documentaram que a fixação
simbiótica de N na soja variou de 0 a 337 kg N ha- e 50-60% da demanda de N da soja
1
veio do processo de fixação de N2 atmosférico . Comparativamente, Mastrodomenico e
Purcell (2012) observaram uma contribuição maior, onde aproximadamente 90% do
conteúdo de N da semente e 97% da absorção total de N pela planta vieram da fixação
simbiótica de N. Há pesquisas limitadas investigando o impacto dos herbicidas PRE nessa
relação simbiótica (Chikoye et al., 2014; Aliverdi e Ahmadvand, 2018). Se os herbicidas
PRE impactarem negativamente o desenvolvimento da soja e a nodulação das raízes, a
fixação simbiótica de N pode ser diminuída e afetar negativamente o rendimento de grãos
de soja e a disponibilidade de N no solo para culturas subsequentes. Como os herbicidas
PRE continuam a ser parte integrante do controle de ervas daninhas nos sistemas de
produção de soja, pesquisas avaliando seu impacto no desenvolvimento da soja, nodulação
radicular e fixação simbiótica de N são necessárias, pois essas informações não estão
prontamente disponíveis na literatura. Assim, o objetivo deste estudo foi investigar a
influência de 11 herbicidas PRE comumente usados no desenvolvimento da soja, nodulação
radicular e fixação simbiótica de N. Nossa hipótese era que os herbicidas PRE, aplicados
seguindo as recomendações do rótulo, não afetariam o desenvolvimento da soja, a
nodulação radicular e a fixação simbiótica de N. Esta pesquisa consistiu em uma lista
abrangente de herbicidas PRE de quatro locais de ação (SOAs) comumente usados na
produção de soja nos Estados Unidos e além.
de um campo orgânico certificado (sem histórico de uso de herbicida sintético) na Estação
de Pesquisa Agrícola de Arlington (43,301890ÿ N, 89,344900ÿ W).
A unidade experimental consistiu de um vaso de 10 L (29 e 28 cm de diâmetro e altura,
respectivamente) preenchido com a terra do campo. O solo não foi adubado durante o
experimento em casa de vegetação. Sementes de soja, cultivar AG24X7 (Bayer Crop
Science, St. Louis, MO), foram inoculadas com B. japonicum (Cell-Tech Liquid, Bayer Crop
Science, St. Louis, MO) na taxa de 1,4 mL de inoculante por 500 g de sementes . Seis
sementes foram semeadas por unidade experimental (a 5 cm de profundidade) após a
inoculação com B. japonicum. Para padronizar as comparações entre os tratamentos, as
unidades experimentais foram desbastadas até uma densidade final de 4 plantas por
unidade experimental, 7 dias após o plantio (as plantas desbastadas foram selecionadas
aleatoriamente). Os tratamentos consistiram de 11 herbicidas PRÉ mais um controle não
tratado (Tabela 1).
Os herbicidas foram aplicados um dia após o plantio das sementes de soja usando um
pulverizador de trilha de pesquisa (DeVries Manufacturing, Geração 3, Hollandale, MN)
equipado com um bico TP8002E (Teejet, Springfield, IL) 1 calibrado para fornecer 140 L ha-
. Unidades experimentais foram
regadas até a capacidade de campo imediatamente após a aplicação do herbicida e
repetidas diariamente durante o restante do experimento. O experimento foi conduzido em
um delineamento de blocos ao acaso com seis repetições e replicado duas vezes ao longo
do tempo (14 dias de intervalo). As condições da estufa ( mínimo de 21 ÿC, média de 26
ÿC, máxima de 32 ÿC com umidade relativa média de 45%) foram monitoradas com um
registrador WatchDog A150 Temp/RH (Spectrum Technologies, Aurora, IL). Iluminação
artificial 2 ÿ 1 ) para garantir 15 s
foi fornecido usando lâmpadas de iodetos metálicos (fotoperíodo de
600 ÿmol mÿ h.
2.2. Desenvolvimento da soja e nodulação radicular
Para investigar possíveis danos causados por herbicidas no desenvolvimento da soja
no início da safra, o dossel da soja foi avaliado nos estádios de crescimento VC (estádio
vegetativo cotilédone) e V2 (dois trifólios abertos), 10 e 20 dias após o tratamento (DAT),
respectivamente, por meio de fotos tiradas de cada unidade experimental aproximadamente
30 cm acima do dossel da planta usando uma câmera Apple iPhone 8 plus (Apple Inc.,
Cupertino, CA) no modo quadrado. As fotos foram processadas usando o Software Canopeo
(Canopeo App, Oklahoma State University, Stillwater, Oklahoma) que foi desenvolvido na
linguagem de programação Matlab (Mathworks, Inc., Natick, MA) para avaliar a cobertura
verde fracionada do dossel. No Software Canopeo, a cobertura verde do dossel é estimada
em uma faixa de 0 (sem cobertura verde do dossel) a 1 (100% cobertura verde do dossel)
(Patrignani e Ochsner, 2015).
Para avaliar a biomassa radicular e aérea da soja e a nodulação radicular, foram
amostradas plantas no estádio R2 (45 DAT). Plantas inteiras foram cuidadosamente
coletadas de cada unidade experimental, parte aérea e raízes foram separadas, as raízes
foram lavadas suavemente em um balde com água para remover o excesso de terra e os
nódulos foram removidos manualmente das raízes.
Os nódulos foram enumerados e o diâmetro de 20 nódulos selecionados aleatoriamente de
cada unidade experimental foi medido usando um
Tabela 1
Ingredientes ativos de herbicidas de pré-emergência, local de ação, família de herbicidas e
taxa usada no experimento em casa de vegetação.
1
Tratamento Local de Ação Herbicida Família Taxa (g ai haÿ )

imazethapyr SE imidazolinona 70
2. Materiais e métodos
clorimuron-etil SE Sulfonilureia 53
cloransulam-metil ALS metribuzin Triazolopirimidina 35
2.1. Plano de fundo do experimento PSII Triazinona 563
sulfentrazona PPO Aril triazinona 280
flumioxazin PPO N-fenilftalimida 107
Um experimento em casa de vegetação foi conduzido em 2019 para investigar a
saflufenacil PPO pirimidinadiona 25
influência de 11 herbicidas PRE de quatro SOAs diferentes no desenvolvimento da soja, acetocloro VLCFA Cloroacetamida 1260
nodulação radicular e fixação simbiótica de N. O experimento foi conduzido na Walnut S-metolacloro VLCFA Cloroacetamida 1787
Street Greenhouse (43ÿ04ÿ 33ÿÿ N, 89ÿ25ÿ 27ÿÿ W), University of Wisconsin-Madison, dimetenamida-P VLCFA Cloroacetamida 945
piroxasulfona VLCFA Pirazol 179
Madison, WI, EUA. O solo utilizado neste experimento [argalo siltoso (16% areia, 61% silte
a
e 23% argila), pH 6,9 (H2O) e 6,4% matéria orgânica (MO)] foi coletado Acetolactato sintase (ALS)-, fotossistema II (PSII)-, protoporfirinogênio
oxidase (PPO) e herbicidas inibidores de ácidos graxos de cadeia muito longa (VLCFA).

2
Machine Translated by Google
VHV Ribeiro et al.
paquímetro (IP54, EAGems, Palmdale, CA). A atividade do nódulo foi avaliada a partir
desses mesmos 20 nódulos cortando-os ao meio e considerando aqueles com coloração
rosa interna como nódulos de fixação e aqueles não rosados como nódulos não-fixantes
(Somasegaran e Hoben, 1985). A parte aérea, as raízes e os nódulos de soja foram
secos à força ao ar (70 ÿC) até peso constante e suas respectivas biomassas registradas.
2.3. Fixação simbiótica de nitrogênio
2.3.1. Ensaio de redução de acetileno
A fixação simbiótica de N foi estimada usando o ensaio de redução de acetileno
(ARA), que é uma técnica que mede a atividade da nitrogenase através da redução de
acetileno (C2H2) a etileno (C2H4) (Dilworth, 1966; Hardy e Knight, 1967; Stewart et
al. , 1967). A metodologia ARA específica usada neste experimento foi adaptada de
David et al.
(1980). A ARA foi realizada utilizando amostras de raiz de 10 cm com aproximadamente
10 nódulos aderidos e amostras de raiz não nodulada de 10 cm (servindo como controle
negativo) coletadas de cada unidade experimental no estádio de crescimento R2. As
raízes não noduladas foram usadas para medir o etileno produzido naturalmente pela
planta em resposta ao dano tecidual durante a amostragem. As amostras de raízes
foram colocadas em um recipiente de vidro hermético de 10 mL com 1 mL de água
estéril e selado com uma tampa de septo de borracha. Um mL de ar foi coletado de
cada recipiente e substituído por 1 mL de Absorção Atômica 2,6 Grau Acetileno (Airgas
#AC AA4). Após 24 h de incubação à temperatura ambiente (22 ÿC), 1 mL de amostra
de gás foi coletado por um HS-10 Headspace Gas Chromatography Sampler (Shimadzu,
Columbia, MD) e injetado em um cromatógrafo a gás GC-2010 (Shimadzu, Columbia,
MD) equipado com coluna Rt®-Alumina BOND/KCL 50m, 0,53mmID, 10 ÿm RESTEK
(CAT#19760) ajustada a 100 ÿC para análise. Os gases metano, acetileno e etileno
presentes nas amostras foram reconhecidos através do software LabSolutions (Shi
madzu, versão 5.82, Columbia, MD) nos picos de retenção de 1,853, 2,082 e 3,015 min
após a injeção da amostra, respectivamente. A área do pico de etileno produzida por
amostra foi convertida usando uma curva padrão de diluições de etileno em 10% de
acetileno para estimar a concentração de etileno em cada amostra (Hardy et al., 1968).
A produção de etileno das amostras de raiz não nodulada (controle negativo; com
média de 5 0,00013 e erro de 1,4 × 10ÿ
ÿmol de etileno) foi subtraído de cada leitura,
e a atividade da nitrogenase foi estimada como ÿmol
1
nódulo de etilenoÿ 1 1 hora- . O cromatógrafo a gás foi configurado com fluxo total
SPL1 a 200 ÿC, 73,5 kPa com 171
mL minÿ 1 minÿ 1 com 30 mL minÿ e 3 mL
de fluxo de purga. O detector (ionização por chama) foi ajustado para 200 ÿC,
1
de fluxo de reposição, 40 mL min- de H2 e 400 mL de
1 minÿ fluxo de ar (Ye et al., 2013). Como as amostras de raízes noduladas e não
noduladas usadas para realizar a análise de ARA foram coletadas de plantas específicas
usadas para estimar o crescimento de raiz e parte aérea e a nodulação da raiz, sua
biomassa seca final, contagem de nódulos e peso de nódulos foram adicionados às
medições correspondentes antes análise estatística.
2.3.2. Abundância natural 15N O
método da abundância natural 15N baseia-se na proporção de isótopos N estáveis
no tecido da planta, que pode vir da atmosfera ( N2 atmosférico) ou do solo (N mineral
do solo) (Amarger et al., 1979; Mariotti, 1983 ; Unkovich e outros, 2008). Para realizar
esta análise, uma amostra de tecido da folha trifoliada mais nova totalmente
desenvolvida foi coletada de uma planta de soja aleatória de cada unidade experimental
no estádio de crescimento R2 (Shearer e Kohl, 1986). Amostras de folhas de soja
foram colocadas em tubos de microcentrífuga de 2 mL (Fisherbrand, Pittsburgh, PA),
secas a 70 ÿC por 48 h e moídas em um pó fino usando uma conta de vidro por tubo e
processadas em um Mixer Mill MM 400 (Retsch, Haan , Alemanha) por 2 min agitando
30 vezes por segundo. Aproximadamente 2,0–2,2 mg do pó foram pesados em cápsulas
de estanho para análise do conteúdo de N e abundância de 15N . A abundância natural
de 15N foi estimada como:
3
Proteção de Culturas 144 (2021) 105576
atom%15Nsample – atom%15Natmosphere
ÿ15N (‰) = x 1000 1
atom%15Natmosphere
onde a amostra de % de átomos de 15N é a abundância de átomos de 15N expressa
como uma porcentagem do N total presente ( 15N/(14N + 15N)) x 100; e a % atômica
15N da atmosfera é a abundância de 15N do N2 atmosférico que, para o padrão, é
0,3663 (Shearer e Kohl, 1986; Unkovich et al., 2008).
Adicionalmente, a abundância natural de 15N no solo foi avaliada a partir de 4 amostras
compostas de solo obtidas de testemunhos coletados de 4 unidades experimentais
aleatórias em cada repetição do estudo. As amostras foram colocadas em tubos Falcon
de 50 mL e armazenadas em freezer (ÿ 20 ÿC). As amostras de solo foram secas ao
ar, moídas em almofariz e pilão e pesadas (38 mg) em cápsulas de estanho. As
amostras de solo e planta foram analisadas para N total e ÿ15N usando um analisador
elementar PDZ-Europa ANCA ligado a um espectrômetro de massa de isótopos
estáveis PDZ-Europa 20-20 (Sercon, Ltd., Crewe, Reino Unido). A porcentagem de N
vegetal derivado da atmosfera (%Ndfa) foi estimada como:
ÿ15N de N do solo – ÿ15N de leguminosa fixadora de N2
% Ndfa = x 100 2
ÿ15N de solo N ÿ ÿ15N de N2
onde ÿ15N de N do solo reflete a abundância de 15N do solo que era /00; ÿ15N da
0
para uma abundância leguminosa fixadora de N2 é o 15N natural encontrado
média de 7,07 na leguminosa; e ÿ15N de N2 é a abundância 15N 0 acima do solo , que
é0 /00 assumindo que a planta está usando N2 atmosférico
como a única fonte de N para crescimento (Shearer e Kohl, 1986; Unkovich et al.,
2008).
2.4. análise estatística
As análises estatísticas foram realizadas usando o software estatístico R (versão
3.5.1; R Core Team, 2018). O teste de Shapiro-Wilk foi realizado para testar a
normalidade e o teste de Levene avaliou a homogeneidade da variância residual do
conjunto de dados. A biomassa da raiz por planta, biomassa da parte aérea por planta,
biomassa de nódulos por planta, número de nódulos por planta, diâmetro do nódulo,
ARA, ÿ15N e %Ndfa foram submetidos a ANOVA usando um modelo de efeito misto.
Nenhuma análise estatística foi realizada para a atividade do nódulo, pois todos os
nódulos foram determinados como ativos. Nos modelos, os tratamentos com herbicidas
foram considerados como efeito fixo e as repetições aninhadas dentro das execuções
experimentais foram tratadas como efeito aleatório. Os dados ARA foram transformados
em raiz quadrada para atender aos pressupostos de normalidade e homogeneidade da
variância residual da ANOVA antes da análise; os dados retransformados são aqui
apresentados para facilitar a interpretação dos resultados. Os dados da copa da soja
(0–100%) nos estádios de crescimento VC e V2 foram submetidos à ANOVA usando a
distribuição beta (família logit); os tratamentos com herbicidas foram considerados
como efeito fixo e as repetições aninhadas nas corridas experimentais foram tratadas
como efeito aleatório. Para todas as variáveis de resposta aqui avaliadas, se ANOVA
indicou efeitos de tratamento significativos (P < 0,05), as médias foram separadas
usando o teste LSD protegido de Fisher.
3. Resultados
3.1. Desenvolvimento da soja e nodulação radicular
Os herbicidas PRE testados neste estudo tiveram pouca ou nenhuma influência no
desenvolvimento do dossel da soja no início da estação. A copa da soja foi afetada
apenas durante a avaliação do estágio de crescimento VC (P < 0,001; Tabela 2),
quando o tratamento com sulfentrazone reduziu a copa da soja em 27% em comparação
com o controle não tratado. Os tratamentos com herbicidas PRÉ não tiveram impacto
no desenvolvimento do dossel da soja na avaliação do estágio de crescimento V2
quando comparados ao tratamento controle não tratado (P = 0,096; Tabela 2). Além
disso, não houve impacto de nenhum herbicida PRE testado neste estudo na biomassa
da raiz (P = 0,207) e da parte aérea (P = 0,454) da soja por planta no estádio de
crescimento R2 (Tabela 3 ) . Os herbicidas PRE testados neste estudo também não
tiveram impacto na nodulação da raiz, incluindo o número de
Machine Translated by Google

VHV Ribeiro et al. Proteção de Culturas 144 (2021) 105576

Tabela 2 entre uma planta leguminosa e uma fonte de amostra de referência, uma planta
1
Dossel da soja (% de cobertura verde do dossel da planta- ) avaliado no VC (10 DAT) vizinha não fixadora de nitrogênio ou solo. A abundância natural média de ÿ15N no
e estádios de crescimento V2 (20 DAT) da soja no experimento de casa de vegetação. 0
solo de campo usado neste experimento foi de 7,07 /00, maior do que nas folhas
Tratamento % copa (LCI - UCI)a
de soja amostradas 0 , 4,79 /00, o que reflete a contribuição relativa do N2
atmosférico fixo (Tabela 3) (Unkovich et al ., 2008).
VC (10 DAT)b V2 (20 DAT)
De acordo com nossos resultados, uma média de 32,4% (%Ndfa; Tabela 3) do N
controle não tratado 3,34 (2,87–3,90) abc 3,56 6,45 (5,70–7,29)
foi derivado da atmosfera em todos os tratamentos.
imazetapir (3,07–4,13) ab 2,87 6,53 (5,77–7,37)
clorimuron-etil (2,43–3,37) cd 3,19 5,20 (4,54–5,95)
4. Discussão
cloransulam-metil (2,73–3,73) abc 3,17 6,75 (5,98–7,60)
metribuzina (2,71–3,70) bc 2,41 6,08 (5,36–6,89)
sulfentrazona (2,02–2,87) d 2,76 6,23 (5,49–7,05) Os 11 herbicidas PRE aplicados em suas respectivas taxas de marcação a um
flumioxazina (2,34–3,33) (2,86–3,89) 5,65 (4,96–6,44)
solo franco-siltosos não influenciaram o crescimento da soja, a nodulação radicular
saflufenacil abc 3,86 (3,30–4,51) a 6,16 (5,74–6,9) 5,73–
acetocloro 3,63 (3,13–4,21) ab 7,33) 6,10 (5,38–
e a fixação de N no estágio de crescimento R2 neste experimento em casa de
Valor p de S- 2,86 (2,43–3,37) cd 3,58 6,92) 5,59 (4,90– vegetação. O único impacto observado foi uma leve redução na copa da soja pelo
metolacloro (3,09–4,16) ab <0,001 6,37) 6,42 (5,68– sulfen trazone no estádio de crescimento VC. A lesão da soja no início da safra é
dimetenamida-P 7,26) 0,096
uma preocupação comum entre os produtores que adotam herbicidas PRE (Walsh
piroxasulfona
et al., 2015). A lesão do sulfentrazone no início da estação na soja foi documentada
a
As médias dentro de uma coluna seguidas pela mesma letra não são diferentes no por Arsenijevic et al. (2020); no entanto, a soja superou a lesão e nenhuma perda
nível de 5% de acordo com o teste LSD de Fisher. Intervalo de confiança inferior (LCI) e de rendimento foi observada em seu estudo de campo. Taylor-Lovell et al. (2001)
intervalo de confiança superior (UCI) a 95%.
b
também relataram que 15 variedades de soja foram sensíveis ao sulfentrazone
VC, folhas unifoliadas; V2, dois trifólios; DAT, dias após o tratamento.
aplicado em três doses (112, 224 e 446 g ia ha- aumentadas com o 1) e lesão
aumento da taxa. Contrastando nossos resultados, metribuzin (450 g ia 1 ha-
nódulos por planta (P = 0,154), diâmetro do nódulo (P = 0,362), atividade do nódulo ) e trifluralina (120 g ia haÿ 1
) afetaram negativamente a biomassa
(todos os nódulos avaliados eram de cor rosa, portanto, considerados nódulos de da parte aérea e da raiz da soja em um Cambissolo Eutrico (24% areia, 47% silte,
fixação; dados não mostrados) e biomassa de nódulos por planta (P = 0,203) no R2 29% argila, 0,7% OM) sob diferentes níveis de pH (6,4, 7,8 e 8,0) (Aliverdi e
estádio de desenvolvimento da soja (Tabela 3). Ahmadvand, 2018 ). Alternativamente, Mallik e Tesfai (1985) observaram que
alacloro e trifluralina aplicados a 1,7 (1 × ) 1 (5 × ), e 0,56 (1 × ) e 2,8 kg haÿ (5 × ),
1
e 8,5 kg haÿ
3.2. Ensaio de redução de acetileno e abundância natural de 15N
respectivamente, não tiveram impacto no crescimento da soja em solo franco-
arenoso (79% areia, 14% silte, 7% argila, pH = 6,1 e 1,2% MO), exceto para
Corroborando com os achados de nodulação radicular, os herbicidas PRE
trifluralina na dose mais alta que reduziu a soja biomassa de tiro.
também não influenciaram a fixação de N na soja pelas avaliações ARA (P = 0,254),
A presença apenas de nódulos de fixação de N no estádio de crescimento R2 neste
ÿ15N (P = 0,215) e %Ndfa (P = 0,215) (Tabela 3). O método de abundância natural
estudo indicou que nenhum herbicida afetou adversamente a atividade dos nódulos de soja.
de 15N depende da diferença de conteúdo de 15N

Tabela
1
3 Raiz de soja, parte aérea, biomassa de nódulos e número de nódulos , diâmetro do nódulo, ARA, ÿ15N e %Ndfa avaliados na fase de crescimento R2 (45 DAT) no
experimento planta-estufa.
1 a
Biomassa (g planta- ) Nodulea fixação de nitrogênioa
Tratamento 1 0
Raiz Atirar Nódulo # Plantaÿ Diâmetro ARA (ÿmol de nódulo de etileno ÿ15N ( /00) %Ndfa
1
(mm) hÿ )

média (LCI – UCI)b

controle não tratado 0,83 5,0 0,14 51 2,9 (2,7–2,9) 0,04 (0,01–0,07) 5.21 26.3
(0,65–1,00) (4,3–5,6) (0,10–0,18) (38–62) (4,16–6,26) (11,4–41,2)
imazetapir 0,94 4,8 0,14 49 2,8 (2,6–2,8) 0,05 (0,01–0,09) 4,33 38,8
(0,77–1,11) (4,1–5,4) (0,10–0,18) (37–60) (3,27–5,38) (23,9–53,7)
clorimuron-etil 0,89 4,2 0,08 35 2,7 (2,6–2,8) 0,01 (0,01–0,04) 5,85 17,2 (2,3–32,1)
(0,71–1,06) (3,6–4,8) (0,03–0,11) (23–46) (4,80–6,91)
cloransulam 0,96 4,8 0,14 48 2,8 (2,7–2,9) 0,04 (0,01–0,08) 4,43 37,4
metil (0,78–1,13) (4,1–5,3) (0,10–0,18) (36–59) (3,38–5,48) (22,4–52,3)
metribuzina 0,73 4,5 0,10 55 2,7 (2,6–2,8) 0,02 (0,01–0,05) 4,82 31,8
(0,55–0,90) (3,9–5,1) (0,05–0,13) (43–66) (3,77–5,88) (16,9–46,7)
sulfentrazona 0,90 4.7 0,11 47 2,7 (2,6–2,8) 0,05 (0,01–0,09) 4,55 35,7
(0,72–1,07) (4.1–5.3) (0,07–0,15) (35–58) (3,49–5,60) (20,7–50,6)
flumioxazina 0,98 5.2 0,12 50 2,7 (2,5–2,8) 0,04 (0,01–0,07) 4.38 38.1
(0,80–1,15) (4,5–5,8) (0,08–0,16) (38–61) (3,32–5,43) (23,2–53,0)
saflufenacil 0,80 5,0 0,11 47 2,7 (2,6–2,8) 0,04 (0,01–0,07) 4,51 36,2
(0,62–0,97) (4,3–5,6) (0,07–0,15) (35–58) (3,46–5,56) (21,3–51,1)
acetocloro 0,81 4,7 0,12 44 2,8 (2,7–2,9) 0,03 (0,01–0,05) 4,96 29,8
(0,63–0,98) (4,0–5,3) (0,07–0,15) (32–55) (3,91–6,01) (14,9–44,7)
S-metolacloro 0,85 4,5 0,10 41 2,8 (2,6–2,8) 0,05 (0,01–0,08) 4,08 42,3
(0,67–1,02) (3,8–5,1) (0,05–0,13) (28–52) (3,03–5,13) (27,4–57,2)
dimetenamida-P 0,78 4,6 0,11 44 2,7 (2,6–2,8) 0,06 (0,02–0,1) 5,80 18,0
(0,60–0,95) (3,9–5,2) (0,06–0,14) (32–55) (4,70–6,89) (2,53–33,5)
piroxasulfona 0,85 4,6 0,12 50 2,8 (2,6–2,9) 0,02 (0,01–0,04) 4,39 37,9
(0,67–1,02) (3,9–5,2) (0,08–0,16) (38–61) (3,25–5,53) (21,7–54,1)
valor-p 0,207 0,454 0,203 0,154 0,362 0,254 0,215 0,215

a 1 1
# plantaÿ , número de nódulos planta- ; ARA, ensaio de redução de acetileno; ÿ15N, abundância natural em relação ao N2 atmosférico; %Ndfa, porcentagem de N vegetal derivado
da atmosfera.
b
Intervalo de confiança inferior (LCI) e intervalo de confiança superior (UCI) a 95%.

4
Machine Translated by Google
VHV Ribeiro et al.
1
Bolich et ai. (1985) demonstraram que o metribuzin (0,3 kg ha- ) reduzido
peso seco do nódulo em um solo com textura grossa (57% areia, 37% silte e
6% argila) e baixo teor de MO (0,6%). no peso dos nódulos nos outros tipos
de solo testados em seu estudo, que eram de textura mais fina e tinham maior
teor de matéria orgânica (Bollich et al., 1985). Além disso, o número de
nódulos não foi influenciado por nenhum herbicida PRE testado em seu estudo
(Bollich et al., 1985). Por outro lado, Chikoye et al. (2014) relataram que a soja
cultivada em solo grosso (areia 56%, argila 10%, silte 34%, pH = 5,9 e 0,53%
OM) tratada com quatro doses de pendimetalina (1,0, 2,0, 4,0 e 8,0 kg ia 1 haÿ
) apresentou menor número de nódulos e massa seca dos nódulos nas
duas maiores doses. Da mesma forma, os achados de Aliverdi e Ahmadvand
(2018) mostraram diminuição do número de nódulos e peso dos nódulos por
1 1
(450 g ia ha- ) e trifluralina (120 g ia haÿ metribuzin ) em um
Cambissolo Eutrício sob diferentes níveis de pH (6,4, 7,8 e 8,0). Essas
descobertas anteriores indicam que, sob certas condições ambientais, alguns
herbicidas PRE podem afetar a fixação simbiótica de N.
A falta de impacto do herbicida PRE na fixação de N da soja (estimada
pelas metodologias ARA, ÿ15N e %Ndfa) corrobora a falta de efeito do
tratamento no desenvolvimento de nódulos e avaliações de atividade neste
estudo. Apesar dos requisitos de trabalho intensivo, contagem de nódulos,
diâmetro, atividade e medições de biomassa foram mostrados como variáveis
de resposta valiosas neste estudo para avaliar a nodulação da raiz e o
potencial impacto do herbicida na fixação de N. Medições analíticas da fixação
de N na soja pelas metodologias ARA, ÿ15N e %Ndfa foram importantes para
validar os resultados das avaliações dos nódulos; no entanto, essas avaliações
dependem do equipamento e são caras.
5. Conclusão
Neste experimento em casa de vegetação usando um solo argiloso, a taxa
marcada de 11 herbicidas PRE não afetou o desenvolvimento da soja, a
nodulação da raiz e a fixação de N, além da redução do dossel no início da
estação (estágio de crescimento VC) com sulfentrazone. Assim, sob condições
ambientais e de solo semelhantes, e quando pulverizados de acordo com
seus respectivos rótulos, os benefícios dos herbicidas PRE em termos de
controle de ervas daninhas residuais provavelmente superam as preocupações
potenciais com relação ao desenvolvimento da soja, nodulação radicular e
fixação simbiótica de N. Esses resultados são relevantes para os produtores
de soja, indicando que várias opções de herbicidas PRE com impacto mínimo
ou nenhum no desenvolvimento da soja, nodulação da raiz e fixação de N
estão disponíveis. No entanto, pesquisas futuras são necessárias para validar
essas descobertas em condições de campo em vários ambientes. Além disso,
seria benéfico investigar a influência de pré-misturas de herbicidas, que
contêm ingredientes ativos de vários SOA em diferentes concentrações, pois
essas pré-misturas de herbicidas se tornaram mais comumente recomendadas
e adotadas por produtores de soja nos EUA e além ( Norsworthy e outros, 2012).
Financiamento
O ensaio de redução de acetileno foi financiado por uma concessão do
Departamento de Energia (DE-SC0018247) para JMA. O restante da pesquisa
não recebeu nenhuma concessão específica de agências de financiamento
nos setores público, comercial ou sem fins lucrativos.
Declaração de interesse concorrente
Os autores declaram que não têm interesses financeiros concorrentes
conhecidos ou relacionamentos pessoais que possam parecer influenciar o
trabalho relatado neste artigo.
Agradecimentos
Gostaríamos de agradecer aos membros do Wisconsin Cropping
Systems Weed Science e os laboratórios Plant-Microbe Symbioses, e o
Departamento de Ciência do Solo da Universidade de Wisconsin-Madison
5
Proteção de Culturas 144 (2021) 105576
pelo suporte técnico durante este projeto.
Referências
Aliverdi, A., Ahmadvand, G., 2018. Toxicidade de herbicida para a simbiose soja-rizóbio afetada pelo pH
do solo. Touro. Ambiente. Contam. Tóxico. 101, 434–438. https://doi. org/10.1007/s00128-018-2417-2.
Amarger, N., Mariotti, A., Mariotti, F., Durr, JC, Bourguignon, C., Lagacherie, B., 1979.
Estimativa de nitrogênio fixado simbioticamente em soja cultivada no campo usando variações na
abundância natural de 15N . Plant Soil 52, 269–280. http://www.jstor.org/stable/ 42934908.
Arsenijevic, N., Avellar, M., Butts, LE, Arneson, NJ, Werle, R., 2020. Influência de
sulfentrazone e metribuzin aplicados em pré-emergência no desenvolvimento e produtividade da
soja. Weed Technol. 1, 1–6. https://doi.org/10.1017/wet.2020.99.
Belfry, KD, Soltani, N., Brown, LR, Sikkema, PH, 2015. Tolerância de identidade
cultivares de soja preservados a herbicidas de pré-emergência. Pode. J. Plant Sci. 95, 719–726.
https://doi.org/10.4141/CJPS-2014-351.
Benbrook, CM, 2016. Tendências no uso do herbicida glifosato nos Estados Unidos. Ambiente.
ciência EUR. 28, 1–15. https://doi.org/10.1186/s12302-016-0070-0.
Bollich, PK, Dunigan, EP, Jadi, AWD, 1985. Efeitos de sete herbicidas na fixação de N2 (C2H2) pela soja.
Weed Sci. 33, 427-430. https://www.jstor.org/stable/ 4044122.
Chikoye, D., Abaidoo, R., Fontem, LA, 2014. Resposta de ervas daninhas e solo
microrganismos ao imazaquin e pendimetalina em feijão-caupi e soja. Proteção de Cultura. 65,
168–172. https://doi.org/10.1016/j.cropro.2014.07.004.
David, KA, Apte, SK, Banerji, A., Thomas, J., 1980. Ensaio de redução de acetileno para
atividade da nitrogenase: determinação por cromatografia gasosa de etileno por amostra em menos
de um minuto. Appl. Ambiente. Microbiol. 39, 1078-1080. https://doi.org/10.1128/
aem.39.5.1078-1080.1980 .
Dilworth, MJ, 1966. Redução de acetileno por preparações de fixação de nitrogênio de
Clostridium pasteurianum. Bioquim. Biophys. Acta 127, 285–294. https://doi.org/
10.1016/0304-4165(66)90383-7.
Hardy, RWF, Knight Jr., E., 1967. Redução dependente de ATP de azida e HCN por enzimas de fixação de
N2 de Azobacter vinelandii e Clostridium pasteurianum. Bioquim.
Biophys. Acta 139, 69-90. https://doi.org/10.1016/0005-2744(67)90114-3.
Hardy, RW, Holsten, RD, Jackson, EK, Burns, RC, 1968. O acetileno-etileno
ensaio de fixação de N2: avaliação laboratorial e de campo. Plant Physiol. 43, 1185–1207. https://
doi.org/10.1104/pp.43.8.1185.
Heap, I., 2020. A pesquisa internacional de ervas daninhas resistentes a herbicidas. www.weedscience.
org. (Acessado em 12 de setembro de 2020) acessado.
Hulting, AG, Wax, LM, Nelson, RL, Simmons, FW, 2001. Soja (Glycine max (L.)
Merr.) cultivar tolerante ao sulfentrazone. Proteção de Cultura. 20, 679-683. https://doi. org/10.1016/
S0261-2194(01)00035-7.
Johnson, WG, Davis, VM, Kruger, GR, Weller, SC, 2009. Influência de sistemas de cultivo resistentes ao
glifosato na mudança de espécies de ervas daninhas e populações de ervas daninhas resistentes
ao glifosato. EUR. J. Agron. 31, 162–172. https://doi.org/10.1016/j. eja.2009.03.008.
Knezevic, SZ, Pavlovic, P., Osipitan, OA, Barnes, ER, Beiermann, C., Oliveira, MC, Lawrence, N., Scott,
JE, Jhala, A., 2019. Tempo crítico para remoção de ervas daninhas em glifosato- soja
resistente influenciada por herbicidas de pré-emergência. Weed Technol. 33, 393–399. https://
doi.org/10.1017/wet.2019.18.
Kniss, AR, 2017. Culturas e herbicidas resistentes a herbicidas geneticamente modificados
evolução de plantas daninhas resistentes nos Estados Unidos. Weed Sci. 66, 260–273. https://doi.
org/10.1017/wsc.2017.70.
Kumar, AV, Jha, P., 2015. Herbicida eficaz em pré-emergência e pós-emergência
programas para controle de kochia. Weed Technol. 29, 24–34. https://doi.org/10.1614/ WT-
D-14-00026.1.
Mahoney, KJ, Shropshire, C., Sikkema, PH, 2014a. Manejo de ervas daninhas em
soja convencional e plantio direto usando flumioxazin/pyroxasulfone. Weed Technol. 28, 298–306.
https://doi.org/10.1614/WT-D-13-00128.1.
Mahoney, KJ, Tardif, FJ, Robinson, DE, Nurse, RE, Sikkema, PH, 2014b. Tolerância da soja (Glycine max
L.) aos inibidores da protoporfirinogênio oxidase e aos inibidores da síntese de ácidos graxos de
cadeia muito longa aplicados em pré-emergência. Sou. J. Plant Sci. 5, 1117–1124. https://doi.org/
10.4236/ajps.2014.58124.
Mallik, MAB, Tesfai, K., 1985. Efeito pesticida na simbiose soja-rizóbio. Plant Solo 85, 33–41. https://
doi.org/10.1007/BF02197798.
Mariotti, A., 1983. O nitrogênio atmosférico é um padrão confiável para medições de abundância natural de
15N . Natureza 303, 685-687. https://doi.org/10.1038/303685a0.
Mastrodomenico, AT, Purcell, LC, 2012. Fixação de nitrogênio em soja e nitrogênio
remobilização durante o desenvolvimento reprodutivo. Crop Sci. 52, 1281-1289. https://doi.org/10.2135/
cropsci2011.08.0414 .
Miller, RT, Soltani, N., Robinson, DE, Kraus, TE, Sikkema, PH, 2012. Soja
(Glycine max) cultivar tolerante ao saflufenacil. Pode. J. Plant Sci. 92, 1319–1328. https://doi.org/
10.4141/cjps-2014-351.
Mohammadi, K., Sohrabi, Y., Heidari, G., Khalesro, S., Majidi, M., 2012. Fatores efetivos na fixação biológica
de nitrogênio. Afr. J. Agric. Res. 72, 38–46. https://doi.org/10.5897/AJARX11.034 , 1782-1788.
Norsworthy, JK, Ward, S., Shaw, DR, Llewellyn, RS, Nichols, RL, Webster, TM,
Bradley, KW, Frisvold, G., Powles, SB, Burgos, NB, Witt, WW, Barret, M., 2012.
Reduzindo os riscos de resistência a herbicidas: melhores práticas de manejo e
recomendações. Weed Sci. 60, 31–62. https://doi.org/10.1614/WS-D-11-00155.1 .
Oliveira, MC, Jhala, AJ, Gaines, T., Irmak, S., Amundsen, K., Scott, JE, Knezevic, SZ, 2017a. Confirmação
e controle de cânhamo resistente a herbicidas inibidores de HPPD
Machine Translated by Google
VHV Ribeiro et al.
(Amaranthus tuberculatus) em Nebraska. Weed Technol. 31, 67–79. https://doi.org/ 10.1017/
wet.2016.4.
Oliveira, MC, Feist, D., Eskelsen, S., Scott, JE, Knezevic, SZ, 2017b. Controle de plantas daninhas em
soja com herbicidas de pré-emergência e pós-emergência. Crop Forage Turfgrass Manag. 3, 1–7.
https://doi.org/10.2134/cftm2016.05.0040.
Patrignani, A., Ochsner, TE, 2015. Canopeo: uma nova ferramenta poderosa para medir
cobertura de copa verde fracionada. Agron. J. 107, 2312–2320. https://doi.org/10.2134/
agronj15.0150 .
Poston, DH, Nandula, VK, Koger, CH, Griffin, RM, 2008. Efeito de herbicidas de pré-emergência no
crescimento e rendimento da soja do Mississippi plantada precocemente. Gestão de Colheita.
7, 1–14. https://doi.org/10.1094/CM-2008-0218-02-RS.
R Core Team, 2018. R: Uma Linguagem e Ambiente para Computação Estatística. R
Fundação para Computação Estatística, Viena, Áustria. URL. https://www.R-project. org/.
Salvagiotti, F., Cassman, KG, Specht, JE, Walters, DT, Weiss, A., Dobermann, A.,
2008. Absorção de nitrogênio, fixação e resposta ao fertilizante N na soja: uma revisão.
Colheita de Campo. Res. 108, 1–13. https://doi.org/10.1016/j.fcr.2008.03.001.
Shearer, G., Kohl, DH, 1986. N2-fixação em ambientes de campo: estimativas baseadas na abundância
natural de 15N . Aust. J. Plant Physiol. 13, 699-756. https://doi.org/10.1071/
PP9860699.
Somasegaran, P., Hoben, HJ, 1985. Methods in Legume–Rhizobium Technology.
Projeto NIFTAL e MIRCEN, University of Hawaii, Paia.
Stewart, WDP, Fitzgerald, GP, Burris, RH, 1967. Estudos in situ sobre fixação de N2 usando a técnica
de redução de acetileno. Proc. Nacional Acad. ciência EUA 58, 2071–2078. https://doi.org/
10.1073/pnas.58.5.2071.
Taylor-Lovell, S., Wax, LM, Nelson, R., 2001. Resposta fitotóxica e rendimento de variedades de soja
(Glycine max) tratadas com sulfentrazone e flumioxazin. Weed Technol.
Proteção de Culturas 144 (2021) 105576
15, 95–102. https://doi.org/10.1614/0890-037X(2001)015[0095:PRAYOS]2.0.CO; 2.
Unkovich, M., Herridge, D., Peoples, M., Cadisch, G., Boddey, B., Giller, K., Alves, B.,
Chalk, P., 2008. Medindo a fixação de nitrogênio associada a plantas em sistemas agrícolas.
Centro Australiano para Pesquisa Agrícola Internacional 3–258.
Departamento de Agricultura dos Estados Unidos (USDA), 2020. Serviço Nacional de Estatísticas
Agrícolas 1990-2017. https://quickstats.nass.usda.gov/. (Acessado em 12 de setembro de
2020) acessado.
Walsh, KD, Soltani, N., Hooker, DC, Nurse, RE, Sikkema, PH, 2015. Biologicamente
dose efetiva de sulfentrazone aplicada em pré-emergência em soja. Pode. J. Plant Sci. 95, 339–
344. https://doi.org/10.4141/CJPS-2014-264.
Whitaker, JR, York, AC, Jordan, DL, Culpepper, AS, Sosnoskie, M., 2011. Herbicidas residuais para o
controle do amaranto Palmer. J. Cotton Sci. 15, 89–99.
Ye, H., Gemperline, E., Venkateshwaran, M., Chen, R., Delaux, PM, Podoll, MH, Ane, J.
M., Li, L., 2013. Imagens moleculares assistidas por espectrometria de massa MALDI
de metabólitos durante a fixação de nitrogênio na simbiose Medicago truncatula Sinorhizobium
meliloti . Plant J. 75, 130–145. https://doi.org/10.1111/tpj.12191.
Young, BG, 2006. Mudanças nos padrões de uso de herbicidas e práticas de produção resultantes de
culturas resistentes ao glifosato. Weed Technol. 20, 301–307. https://doi.org/ 10.1614/
WT-04-189.1.
Zimmer, S., Messmer, M., Haase, T., Piepho, H., Mindermann, A., Schulz, H.,
Habekuß, A., Ordon, F., Wilbois, K., Heß, J., 2016. Efeitos da variedade de soja e cepas de
Bradyrhizobium na produção, teor de proteína e fixação biológica de nitrogênio sob condições
de crescimento frio na Alemanha. EUR. J. Agron. 72, 38–46. https://doi. org/10.1016/
j.eja.2015.09.008.