Roteiro de Aula Prática de Parasitologia

Técnica de Willis-Molay

Em um Laboratório de Parasitologia Clínica com manipulação de fezes, temos os seguintes riscos:

• Ingestão de ovos de helmintos ou cistos de protozoários
• Penetração cutânea de larvas
• Contaminação com outros agentes infecciosos presentes

Por isso, adotaremos as regras de biossegurança NB-2:

• Utilização de jaleco e luvas de látex
• Evitar comer, beber, fumar, utilizar cosméticos e manipular lentes de contato
• Descontaminar a superfície de trabalho

1. EXAME MACROSCÓPICO
a) Observar a consistência da amostra.
Fezes moles ou líquidas sugerem a possível presença de trofozoítos de protozoários intestinais. Cistos
de protozoários são encontrados com mais freqüência em fezes formadas. Ovos e larvas de helmintos podem
ser encontrados tanto em fezes líquidas quanto em fezes formadas .

b) Examinar a superfície da amostra para observar a presença de proglotes de tênias, ancilostomídeos

ou oxiúros adultos, por exemplo.
Os vermes adultos, quando encontrados, devem ser imediatamente examinados e identificados.

c) Examinar a amostra fecal com auxílio de um palito de madeira ou bastão de vidro para verificar a
presença de outros helmintos adultos.

d) Examinar as fezes quanto à presença de sangue e/ou muco.

Sangue fresco (vermelho vivo) indica hemorragia aguda no trato intestinal.
Muco sanguinolento sugere ulcerações e uma porção desse material deve, de preferência, ser
examinada, ao microscópio, para a procura de trofozoitos.

Escala de Bristol para análise macroscópica de fezes.

2. EXAME MICROSCÓPICO
Permite a visualização de trofozoitos, cistos e oocistos de protozoários e de ovos e larvas de helmintos.
É recomendável, quando se trata de fezes diarréicas ou disentéricas, o emprego do exame direto a fresco
para observação dos movimentos dos trofozoitos, seguido de feitura de esfregaço de fezes com
coloração permanente para observação morfológica dos trofozoítos, especialmente, de amebas.

Os métodos qualitativos são os mais utilizados para a demonstração da presença das formas
parasitárias. Freqüentemente o número das formas parasitárias é pequeno, assim é necessário recorrer
a processos de enriquecimento dessas formas para concentrá-las. Hoje faremos o método de Willis-
Molay ou flutuação espontânea para concentração de amostra. Este método é utilizado para pesquisa
de ovos menos densos de helmintos, principalmente ancilostomídeos.

Materiais necessários:
- Amostra fecal do paciente
- Solução salina saturada (35,9g de NaCl para 100ml de água destilada)
- Gaze
- Palito de madeira ou bastão de vidro
- Frasco de borrel ou Becker de vidro (250 ml)
- Tubo de ensaio
- Lâmina e lamínula
- Centrífuga
- Microscópio

Técnica:
1) Com o auxílio do bastão de vidro ou palito de madeira, você pegará uma porção (cerca de 5g) da amostra
de fezes, colocando-a no becker ou frasco de borrel.
2) Homogeneize as fezes com um pouco de solução saturada de sal (NaCl)
3) Utilizando uma gaze dobrada e um novo becker, você filtrará a amostra, retendo as porções sólidas
4) Coloque a amostra filtrada em um tubo de ensaio e complete o volume até a borda do frasco, formando
um menisco positivo
5) Coloque na boca do frasco uma lamínula, que deverá estar em contato com o líquido
6) Deixe em repouso por pelo menos 15 minutos
7) Após esse tempo, retire cuidadosamente a lamínula, e a coloque sobre uma lâmina
8) Examine ao microscópio, em objetiva de 10x ou 40x
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Relatório de Aula Prática de Parasitologia

Técnica de Willis-Molay

Para fixar seu aprendizado, utilize a próxima folha para elaborar um relatório da aula prática. Com suas
palavras, faça um resumo da técnica realizada, citando duas vantagens: uma em relação ao método de Faust
e outra em relação ao método de Hoffman. (1,0 ponto)

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