Bacteriologia

Características Gerais das Bactérias

Morfologia - podem ter diferentes formatos

Parede Celular

Estrutura complexa externa à membrana plasmática

Mantém a forma característica da célula
Diferenças procariontes x eucariontes
Protege contra lise osmótica e mecânica
Ausência de membrana nuclear
Formada por monômeros de peptideoglicano
Dna circular sem histonas
estruturada a partir da ligação de dois derivados da
Dna disperso no citoplasma
glicose: n-acetilglicosamina (NAM) e ácido n-
Não possuem citoesqueleto
acetilmurâmico (NAG)
Possuem parede celular
Ribossomo 70s
Síntese de peptideoglicano
Também é composto pelos aminoácidos aminoácidos,
Membrana Plasmática
incluindo L-alanina, D-alanina, ácido D-glutâmico e, ou
Composta por uma camada bilipídica
L-lisina ou uma molécula estruturalmente similar,
Funções
ácido diaminopimélico (DAP).
Compartimentalização
Transporte de substâncias
As cadeias longas de peptideoglicanos são biossinteti-
Secreção
zadas adjacentes entre si, formando uma folha
Atividade bioquímicas e de síntese
circundando a célula.
São reforçadas por hopanóides (análogos do
As cadeias individuais são interligadas por meio de
colesterol)
ligações cruzadas dos aminoácidos
Sistema de transporte ABC
1. Modificação da glicose: uma amina no grupamento
proteína de ligação ao substrato
2 (NAG) ou sofre uma alteração no carbono 3
transportador integrado à membrana
(NAM). NAG e NAM são unidos por ligações β-1,4
proteína que hidrolisa ATP
glicosídica
 Transpeptidase associa ao NAM uma cadeia peptídica
2. Transferência de seus precursores para o folheto
externo da membrana célula - bactoprenol, reconhece
UDP e libera UMP.
Flipases - transporte de açúcar para a outra porção
da membrana
D-fosforilase - retira um fosfato do bactoprenol e o
libera

3. Monômeros de dissacarídeos são

unidos por transglicosilação e os peptídeos de uma
cadeia são unidos aos de outra (por pontes de
pentaglicina) pela atuação da transpeptidase PBP,
formando ligações cruzadas. -> quanto maior a
Gram-positivas
quantidade de ligações cruzadas, maior a rigidez.

90% da parede celular é composta por

Obs.: Lisozima - capaz de quebrar ligações B-1,4
peptideoglicano
glicosídicas. Forma poros na membrana - natureza
catiônica
Algumas apresentam ácidos teicóicos e alguns destes
são ligados covalentemente a lipídeos de
membrana, e esses são denominados ácidos
lipoteicoicos.

Os ácidos teicoicos são parcialmente responsáveis

pela carga elétrica negativa geral da superfície
celular.
facilitam a captação de íons carregados
positivamente como Ca2+ e Mg2+
Deleção - sensibilidade a temperatura e agregação
das bactérias

Coloração de Gram

Separa as bactérias em gram-positivas (coradas em

roxo) e gram-negativas (coradas em rosa).
Gram-negativas
A maior parte da parede celular é composta pela
membrana externa.
Membrana externa - Corresponde a uma segunda
bicamada lipídica.
Contém polissacarídeos
Polissacarídeos e lipídeos formam um complexo ->
LPS
LPS
São reconhecidos por antígenos
Partes: o-antigen, outer core, inner core e lipid A
Antígeno O - inibe fagocitose, proteção contra o
complemento
Lipídeo A - dispara cascata de complemento
Também são chamados de endotoxinas
Glicocálice
Camada adicional exterior a parede celular presente
em algumas bactérias.
Polímero viscoso e gelatinoso, formado
por polissacarídeo, polipeptídeo ou ambos.
Pode se apresentar como camada mucosa ou cálice
Camada Mucosa
Glicoproteínas associadas fracamente a parede
celular
Aderência da bactéria a superfícies bióticas e
abióticas
Prevenção contra o meio externo - principalmente
desidratação
Bactérias presas - pode formar biofilme
Cápsula
Substância organizada e fortemente aderida à
parede celular
Aderem a superfícies sólidas e aos nutrientes do
meio ambiente
Poder adesivo - fator de virulência
protege as bactérias de serem fagocitadas
Fímbrias
Proteínas filamentosas que se projetam a partir da
superfície da célula.
Capacidade de adesão à superfícies
Superfícies líquidas - formação de películas
Superfícies sólidas - biofilmes
Pili
Parecidos com as fímbrias,são estruturas mais longas.
Podem ser receptores de alguns vírus
Presentas apenas nas bactérias gram-negativas
Facilitam a troca genética entre as células -
conjugação
Impedem a adesão de patógenos
Endospóro
Quando os nutrientes essenciais se esgotam, certas
bactérias gram-positivas formam células
especializadas de “repouso”, denominadas endosporos.

Não apresenta metabolismo, podendo ser reativada

quando as condições ambientais voltam a ser
favoráveis.

Funções:
altamente diferenciadas
Motilidade- Quimiotáxis
extrema resistência - calor, agentes químicos e
Formação de biofilmes
radiação
Secreção de proteínas
permite a sobrevivência em condições adversar
Adesão a célula hospedeira
estágio latente do ciclo de vida bacteriano
Invasão do hospedeiro
são comumente encontrados no solo e na água.
Autoaglutinação
Processo de esporulação
São formados por 3 porções: Filamento, gancho e corpo
Começa quando um nutriente essencial torna-se
basal
limitado.
1. ativação
Filamento: Formado por flagelina (proteína contrátil),
2. germinação
que é secretada pelo sistema de secreção do
3. extrusão
flagelo.

Gancho: une o filamento ao corpo basal. Composto por

Flagelo
um único tipo de proteína e conecta o filamento à
porção motora do flagelo na base.
Apêndices longos e finos constituídos principalmente
por monômeros de flagelina.
Corpo basal: motor + sistema de secreção. A
porção motora do flagelo é ancorada na
São as organelas de locomoção de bactérias, estas
membrana citoplasmática e na parede celular. Varia
estruturas estendem-se desde o citoplasma para o
entre bactérias gram-negativas e gram-positivas.
exterior da célula.

Forma e comprimento - são determinados pela

estrutura da flagelina e direção de rotação do
filamento.

Tipos de flagelo
Monotríquio (um flagelo polarizado)
Lofotriquio (vários flagelos polarizados)
Peritriquio (flagelos ao redor da célula toda)
Anfitriquio (2 flagelos, um em cada polo)
Axial (flagelo envolve a célula toda, dentro do
espaço periplasmático
 Motor: formado por um bastão central que passa
por meio de uma série de anéis.
gram-negativas:
Anel L (externo) - ancorado na camada
lipopolissacarídica
Anel P - ancorado na camada de peptideoglicano.
Anel MS - dentro da membrana citoplasmática
Anel C - dentro do citoplasma
Ganho e filamento são formado em seguida
Sistema de secreção tipo III - desdobra monômeros
de flagelina para dentro do canal. Cada mon^mero
adicionado desloca o próximo para o final do
filamento.
Bomba de secreção - fornece força motriz para
translocar as flagelinas

gram-positivas
Mais simples - apresentam apenas MS e C

Movimentação do flagelo

Motor do flagelo: constituído pelo rotor e estator.

Rotor - bastão central e anéis
Estator - proteínas Mot

Movimento de rotação -> corpo basal

Motor: formado por um bastão central que passa
Fonte de energia: força próton-motiva
por meio de uma série de anéis.
Movimento de prótons através da membrana
gram-negativas:
Prótons são deslocados a cada rotação flagelar
Anel L (externo) - ancorado na camada
Fluxo de prótons -> forças eletroestáticas sobre as
lipopolissacarídica
cargas nas proteínas do rotor
Anel P - ancorado na camada de peptideoglicano.
Atrações entre cargas positivas e negativas
Anel MS - dentro da membrana citoplasmática
rotacionam o corpo basal conforme os próton
Anel C - dentro do citoplasma
passa entre as proteínas Mot
gram-positivas
Mais simples - apresentam apenas MS e C

Ao redor do anel interior e ancorado na membrana

citoplasmática, está uma série de proteínas
denominadas proteínas Mot.

Fli - conjunto de proteínas, inverte a direção da

rotação dos flagelos em reposta a sinais.

Montagem do flagelo
corpo basal e sistema de exportação são formados
primeiro
Quimiotaxia
Os procariotos encontram gradientes de agentes
físicos ou químicos na natureza, tendo desenvolvido
mecanismos para responder a esses gradientes,
aproximando-se ou afastando-se do agente. Este tipo
de movimento direcionado é denominado taxia.
Ausência do gradiente
Movem-se de maneira aleatória
Corridas - pra frente de forma aleatória, motor
flagelar em sentido anti-horário
Oscilações - bactéria fica “bamboleando”, sentido
horário
Após uma oscilação, a direção da próxima corrida é
aleatória
Quando CheY não está fosforilada, perde a
capacidade de se ligar ao motor flagelar, fazendo
com que o flagelo conti-nue rodando no sentido
anti-horário
CheB-P - metilesterase que medeia a adaptação em
conjunto com a quimiotaxia metiltransferase CheR
CheZ é uma fosfatase específica que desfosforila CheY-
P, permitindo a terminação rápida do sinal.
CheA- quinase
CheW- acpolador entre o receptor e a quinase
CheY- transmite o sinal aos motores do flagelo
CheB e CheR- MCPs- controlam a metilação dos
receptores
Proteínas sensoriais - MCP (protéinas quimiotáticas
aceptoras de metil)

Presença do gradiente
na presença de um gradiente químico de um agente
atrativo, esses movimentos aleatórios passam a ser
tendenciosos.
enquanto se movimenta, a célula monitora seu
ambiente, comparando seu estado químico àquele
percebido poucos momentos antes.
células bacterianas respondem a diferenças
temporais

Alteração no sentido da rotação - A quinase, CheA,

fosforila um regulador de resposta, CheY, na sua forma
ativada CheY-P, que se liga a parte basal dos flagelos.

Os agentes atrativos e repelentes são percebidos por

uma série de proteínas de membrana, denominadas
quimiorreceptores - transdução sensorial do flagelo
sinalizam através de CheW para a quimiotaxia
histidina proteína quinase, CheA

Diminuição do gradiente
quimiorreceptores ativam a autofosforilação de
CheA

Estímulo
CheA fosforilada fosforila qualquer um de seus
reguladores de resposta cognatos, CheB e CheY.
CheY-P liga-se ao motor flagelar e promove uma
mudança no sentido de rotação do anti-horário
para o horário -> oscilações
 Metabolismo microbiano

Metabolismo varia com o ambiente.

Fatores que influenciam

fixação de CO2
luz solar
oxidação orgânica
oxidação inorgância Tipos de fermentação
homofermentativa - origina um único produto de
Fotoautotróficos fermentação, o ácido láctico.
Fixa carbono e utiliza luz solar heterofermentativa - origina produtos além do
Luz é fonte de energia lactato, principalmente etanol e CO2 .

Quimioautótrofo Vias fermentativas

Energia de fonte inorgânica
Ex.: utilizam nitrato para fixação de CO2
Fotoheterótrofos
ausência de luz - fontes carbonadas
presença de luz - luz como fonte de energia
Quimioheterótrofo
aeróbicos - precisam de O2
anaeróbicos - oxidam compostos orgânicos
Vía de Embden-Meyerhof-Parnas
enzima chave: Frutose 1,6 difosfato
G-3-P (intermediário) usado como aceptor de
elétrons
Piruvato: não é formado diretamente
Gera metade do ATP da via glicolítica
Destinos do piruvato: Lactato (enzima LDH), Etanol
(enzima alcool desidorgenase)
Fermentação homolática
Ácido lático é o único produto
Etanol - produto da ação de leveduras
Enzima chave: frutose 1,6 difosfato Aldolase

Via heterolática
Enzima chave: fosfocetolase
Ausência de enzimas da fase preparatória da
glicólise
Primeira fase: igual à fase preparatória das
pentoses fosfato
Produtos: Glyceraldeído-3-fosfato -> ácido lático,
Acetilfosfato -> etanol

Via de Entner-Doudoroff
Enzima chave: KDPG aldolase
Metabolismo Heterotrófico - tipo de fermentação Produtos: ácido piruvico -> etanol, gliceraldeído-3-
fosfato -> etanol
Dependendo do microrganismo, os produtos finais são
diferentes -> enzimas chaves são diferentes
Fermentação mista
Três diferentes ácidos são formados em
quantidades significativas a partir da fermentação
da glicose ou de outros açúcares – acético, láctico e
succínico
São também formadas quantidades variáveis de
etanol, CO2 e H2 .
Aceptores finais de elétron
Respiração aeróbia, respiração anaeróbia e
fermentação tem diferentes aceptores finais de
elétrons.
Crescimento Bacteriano
O crescimento é definido como um aumento no número
de células.
À medida que as macromoléculas acumulam-se no
citoplas-ma de uma célula, elas são agrupadas em
importantes estru-turas, como parede celular,
membrana citoplasmática, flage-los, ribossomos,
complexos enzimáticos e assim por diante,
eventualmente levando à divisão celular.
Fissão binária
as células alongam-se até aproximadamente duas
vezes o seu tamanho original e, então, formam
uma partição que divide a célula em duas células-
filhas
Essa partição é chamada de septo e resulta de uma
invaginação da membrana citoplasmática e da
parede celular de direções opostas; formação do
septo continua até a individualização das duas
células-filhas.
Quando uma célula eventualmente separa-se para
formar duas células, dizemos que ocorreu uma
geração, e o tempo requerido para esse processo é
chamado de tempo de geração.
O tempo de geração em uma dada espécie de
bactéria é altamente variável, sendo dependente
de fatores nutricionais e genéticos e da
temperatura.
Dividissomo
Complexo de proteínas que promovem a geração, tendo
papel de citoesqueleto na divisão.
Proteíns Fts: essenciais para a divisão celular
FtsZ: crucial no processo de fissão binária
Formação do dividissomo
Moléculas de FtsZ se ligam formando um anel ao
redor do centro da célula
 Anel: plano de divisão da célula
FtsZ se polimerizam para formar o anel, atraindo
outras proteínas como a FtsA e ZipA.
ZipA: âncora que conecta o anel FtsZ à Proteínas Min: garantem a
membrana,estabilização. formação do divisomo somente no
FtsA: proteína relacionada a actina, também atua centro celular, e não nos polos da
recrutando outras proteína dos dividissomo. célula
O divisomo forma-se após três quartos do ciclo de FtsZ: homologa a tubulina, forma
divisão celular terem transcorrido. um anel atraves de sua
FtsL - necessária para a sínte de peptídeo glicano polimerização
ZipA: ancora na membrana o anel
que esta sendo formado
FtsI: forma peptidoglicano
MinC e MinD: atrapalham o
ancoramento, impedindo a
formação do anel durante
processo de replicação.
MinE: se posiciona no centro da
célula afeta MinC e MinD que vão
para a periferia, permitindo o
ancoramento do anel.

Regulação e divisão celular

O anel é formado no espaço entre os nucleoides

duplicados; antes da segregação dos nucleoides, eles
bloqueiam efetivamente a formação do anel FtsZ.

As proteínas MinC, MinD e MinE interagem para guiar

FtsZ à porção central da célula.

MinD - forma uma estrutura em espiral na

superfície interna da membrana citoplasmática e
auxilia o posicionamento de MinC na membrana
citoplasmática. Atua inibindo a divisão celular,
uma vez que evita a formação do anel FtsZ
Min E - também oscila de um polo ao outro e, à
medida que o faz, desloca MinC e MinD.
O centro celular torna-se o local mais permis-sivo
para a ligação de FtsZ
Formação do peptídeoglicano
O peptideoglicano pre-existente deve ser cortado
temporariamente para permitir que o peptideoglicano
recém-sintetizado seja inserido durante o processo de
crescimento. A nova parede celular cresce a partir de
várias localizações ao longo do comprimento da célula.
A síntese do novo peptideoglicano durante o
crescimento envolve a clivagem controlada do
peptideoglicano preexistente, com a inserção
simultânea dos precursores de peptideoglicano.
Bactoprenol: transporta os precursores do
peptideoglicano através da membrana citoplasmática,
tornando-os suficientemente hidrofóbicos para
atravessarem o interior da membrana
o bactoprenol interage com enzi-mas denominadas
transglicolases, que inserem os precursores no
ponto de crescimento da parede celular e catalisam
a formação da ligação glicosídica.
porção hidrofóbica: permite que ele passe pela
membrana.
Autolisinas: fazem as pequenas aberturas existentes
no peptideoglicano.
hidrolisa as ligações que conectam a N-
acetilglicosamina e o ácido N-acetilmurâmico no
esqueleto do peptideoglicano.
Transpeptidação: etapa final na síntese da parede
celular
forma as ligações peptídicas cruzadas entre os
resíduos de ácido murâmico em cadeias adjacentes
de glicano
Ftsl: proteína funciona como uma transpeptidase
Ciclos do Crescimento Bacteriano
Crescimento exponencial: número de células é
duplicado a um intervalo de tempo constante
Fase lag
Muito nutriente disponível
Período de tempo anterior ao crescimento
esponencial
Fase exponencial
a população celular duplica-se a intervalos
regulares por um período curto ou longo,
dependendo dos recursos disponíveis e de outros
fatores.
As taxas de crescimento exponencial variam
amplamente, sendo influenciadas pelas condições
ambientais (temperatura, composição do meio de
cultura), bem como pelas características genéticas
do próprio organismo
Fase estacionária
Crescimento exponencial cessa - não se observa
aumento ou diminuição líquidos no número de
células, portanto a taxa de crescimento da
população corresponde a zero
Crescimento torna-se limitado porque ou um
nutriente essencial no meio de cultura é depletado
ou os produtos de excreção do organismo
acumulam-se.
o metabolismo energético e os processos
biossintéticos podem continuar em células na fase
estacionária, mas normalmente a uma taxa muito
reduzida
Fatores determinantes para o crescimento bacteriano
Temperatura
À medida que a temperatura aumenta, as reações
químicas e enzimáticas da célula passam a ocorrer
com maior velocidade e o crescimento é acelerado.
Para cada organismo temos as temperaturas cardeais:
temperatura mínima: abaixo dela o crescimento
não é possível
temperatura ótima: crescimento ocorre
rapidamente
temperatura máxima: acima dela o crescimento é
impossível.

Medidas de crescimento bacteriano

Contagem miscroscópicas das células:

amostras secas: podem ser coradas a fim de
aumentar o contraste entre as células e o fundo
amostras líquidas: maras de contagem consistindo
de uma grade quadriculada (grid), onde os
quadrados têm área conhecida marcada sobre a
superfície de uma lâmina de vidro, são utilizadas. Classes térmicas
Câmara de neubauer e citometria de fluxo psicrófilos, com o ponto ótimo situado em baixas
temperatura
Contagem de células viáveis: mesófilos, com o ponto ótimo em temperaturas
célula viável é definida como aquela capaz de medianas;
dividir-se, originando células-filhas termófilos, com o ponto ótimo em altas
procedimento de contagem de células viáveis temperaturas;
pressupõe que cada célula viável é capaz de crescer hipertermófilos, com o ponto ótimo
e dividir-se, originando uma colônia. Assim, o correspondendo a temperaturas muito elevadas
número de colônias e o número de células são
proporcionais.

Espectrofotometria
Quanto maior o número de células presentes ->
maior a quantidade de luz dispersa -> mais turva a
suspensão
Controle do crescimento
Agentes antimicrobianos - Classificação
Métodos físicos
Natureza da síntese
Descontaminação – remover possíveis
Natural - produzidos bactérias e fungos
contaminantes
filamentosos. Geralmente correspondem a
Desinfeção – remover o agende infectante
produtos do metabolismo secundário.
(química)
Sintéticos – compostos químicos.
Esterilização – física – calor, radiação e filtração
Semi-sintéticos - são antibióticos naturais,
modificados pela adição de grupamentos químicos,
Métodos químicos
tornando-os menos suscetíveis à inativação pelos
Agente antimicrobiano é um produto químico natural
microrganismos
ou sintético que mata ou inibe o crescimento de
microrganismos.
Espectro de ação:
Espectro restrito – atuam em um tipo ou grupo
Antibióticos
limitado de bactérias.
fármacos antimicrobianos que matam ou
Espectro ampliado – eficazes contra gram-
controlam o crescimento de microrganismos no
positivos e um significativo número de gram-
hospedeiro
negativas.
toxicidade seletiva: inibem ou matam os patógenos,
Espectro amplo – afetam ampla variedade de
sem afetar adversamente o hospedeiro.
espécies bacterianas.
Agentes bacteriostáticos:
Mecanismos de ação
São geralmente inibidores de algum importante
Inibição da formação da parede celular bacteriana
processo bioquímico, como a síntese proteica, e a
Inibição da fabricação de proteínas
ligação é relativamente fraca; se o agente é
Inibição da multiplicação do DNA (replicação) e da
removido, as células podem retomar seu
formação de RNA (transcrição)
crescimento.
Danos à membrana plasmática
Inibição de reações de vias metabólicas específicas
Agentes Bactericidas
Se ligam fortemente a seus alvos celulares e, por
definição, matam a célula
 Interação microorganismo-hospedeiro
A microbiota normal desenvolveu uma relação
simbiótica com seu hospedeiro mamífero. A microbiota
contribui para a saúde e o bem-estar do hospedeiro por
meio da geração de produtos microbianos e inibindo o
crescimento de microrganismos perigosos. Em
contrapartida, o hospedeiro disponibiliza diversos
microambientes que permitem o crescimento
microbiano.
A microbiota normal é, inicialmente, introduzida a seu
hospedeiro durante o nascimento. É influenciada por
herança genômica e colonização inicial.
Colonização
Presença permanente ou transitória de qualquer
microrganismo aderido à pele ou às
mucosas do hospedeiro, sem expressão clínica ou
imunológica.
A colonização, o crescimento de um microrganismo
após o acesso aos tecidos hospedeiros, inicia-se à
medida que os animais são expostos aos
microrganismos a partir do nascimento.
A cavidade oral e o trato gastrintestinal adquirem
microrganismos por meio da alimentação e exposição
ao corpo materno.
Simbiose: Dois organismos (geralmente de espécies
diferentes) vivendo juntos em
íntima associação.
Microbiota residente: Microrganismos encontrados
com regularidade em determinada área, quase sempre
em altos números, ou seja, não produzem
doença em condições normais.
Funções:
Barreira contra instalação de microrganismos
patogênicos;
Metabolização de componentes tóxicos
Modulação do sistema imunológico;
Produção de substâncias utilizáveis pelo
hospedeiro
Podem se comportar como patógenos oportunistas
Situações de desequilíbrio ou ao serem
introduzidos em sítios não específicos.
Infecções hospitalares.
Microbiota modificada.
Características do tecido determinam a microbiota
pH
umidade
presença/ausência de O2
secreção hormonal
Microbiota transitória
A microbiota transitória é composta por
microrganismos não patogênicos ou
potencialmente patogênicos que residem
temporariamente no hospedeiro, permanecendo
por horas ou dias. Esse delicado equilíbrio entre o
organismo e esses microrganismos é fundamental
para a saúde.
No entanto, se ocorrerem alterações nesse
equilíbrio, seja devido a fatores ambientais,
medicamentos ou outros fatores, os
microrganismos transitórios podem encontrar
oportunidades para proliferar-se
descontroladamente, potencialmente
desencadeando doenças
Interação entre organismos
Competição: Relação na qual uma espécie compete com
outra no ecossistema por espaço e nutrientes, que pode
ser atingida por diferentes estratégias.
Produção de substâncias antagonistas
Competição propriamente dita;
Consórcio: Coexistência de diferentes populações
microbianas em comunidades estáveis.
Teorias 1 º contato com a microbiota
Ventre estéril: Útero é estéril e o feto desenvolve
microbiota através do parto
Colonização no útero: bebê já nasce com microbiota ao
interagir com a microbiota da placenta
Microbiota da pele
Vários fatores ambientais e do hospedeiro podem
influenciar a composição da microbiota normal da
pele. Por exemplo, o clima pode provocar um
aumento na temperatura e umidade da pele,
aumentando a densidade da microbiota.
Higiene pessoal interfere na microbiota residente;
indivíduos pouco asseados geralmente apresentam
maior densidade populacional microbiana na pele
Microbiota intestinal
Vive em simbiose com o hospedeiro. Funções:
Metabolismo e síntese de nutrientes, como
vitaminas K e do complexo B, e aminoácidos
essenciais;
Metabolismo de drogas e toxinas;
Funcionam como barreira protegendo de
microrganismos patogênicos;
Degradação de polissacarídeos dietéticos
indigeríveis em ácidos graxos de cadeia curta
(SCFAs) por enzimas fermentativas.
Enterotipos
Firmicutes
São bactérias gram-positivas, com alta capacidade
de fermentação de carboidratos e produção de
ácidos graxos de cadeia curta
Tem forma de cocos ou bastonete
Formam esporo
São responsáveis pela produção de butirato, um
ácido graxo de cadeia curta que tem efeito anti-
inflamatório e protetor da mucosa intestinal.
Contribuem para a digestão de proteínas e
gorduras
São anaeróbias obrigatórias
Bacteriodetes
São bactérias gram-negativas, que degradam
polissacarídeos complexos e produzem ácidos
graxos de cadeia curta (SCFAS)
São importantes para a manutenção da
integridade da barreira intestinal e para a
regulação do sistema imunológico.
Contribuem para a digestão de carboidratos
indigeríveis e a absorção de nutrientes.
Actinobactérias
São bactérias gram-positivas, que incluem o
gênero Bifidobacterium, que é um dos probióticos
mais conhecidos e estudados.
São importantes para a manutenção da
integridade da barreira intestinal e para a
regulação do sistema imunológico.
Proteobactérias:
Proteobactérias: possui 5 subtipos (alfa, beta,
gama, delta e epsilon) onde as bactérias que as
compõem possuem estilos de vida diferentes
Disbiose
Quando o ecossistema bacteriano é perturbado,
levando a redução dos benefícios deste órgão
metabólico, podendo até prejudicar o hospedeiro.
Uma alteração na composição da microbiota
intestinal que pode afetar a digestão, o sistema
imunológico e a absorção de nutrientes.
Pode estar associada a diversas doenças, como
diabetes, doenças autoimunes, hipertensão,
depressão e doença de Alzheimer
A disbiose pode ser causada por diversos fatores,
como dieta inadequada, uso de antibióticos,
estresse, entre outros.
O tratamento da disbiose pode incluir mudanças
na dieta, uso de probióticos e prebióticos, além de
outras terapias.
Probióticos e prebióticos
Probióticos
Culturas vivas de bactérias intestinais que, quando
administradas ao hospedeiro, podem promover
benefícios à saúde.
Sugerido para restauração da microbiota em
disbiose e manutenção do equilíbrio do microbioma
intestinal
Ocupa o tecido do hospedeiro, protegendo da
colonização de patógenos bacterianos
Prebióticos
Utilizado seletivamente por microorganismos
hospedeiros conferindo um benefício a saúde.
Usualmente utilizados para modular linhagens de
Bifidobacterium and Lactobacillus (que
producemácidolácticoeacetato).
Métodos de estudo do microbioma
Biomarcadores e metagenõmica - análise de
composição
Metabolômica - função
Metatrasncriptoma e metaproteômica - produtividade
Patogênese
Patogênese microbiana é o processo pelo qual os
microrganismos causam doença. A patogênese
microbiana se inicia com a exposição e aderência dos
microrganismos às células hospedeiras seguida pela
invasão, infecção e, finalmente, a doença.
Definições
Infecção: : crescimento de microrganismos que não
estão normalmente presentes dentro do hospedeiro
Hospedeiro: organismo que abriga um patógeno
Patógeno: outro organismo que vive sobre ou dentro do
hospedeiro e provoca a doença
Doença: dano ou lesão tecidual que prejudica as
funções do hospedeiro.
Patogenicidade: capacidade de um microrganismos de
fazer alterações fisiológicas no hospedeiro, produzir
uma doença. Relacionada a propriedades únicas de
cada patógeno.
Virulência: medida da patogenicidade. Resultado de
interações patógeno-hospedeiro, uma relação
dinâmica entre os dois organismos, influenciada pelas
constantes alterações do patógeno do hospedeiro e do
ambiente.
A capacidade de um agente infeccioso em causar
efeitos severos ou fatais está associada às suas
propriedades bioquímicas, à produção de toxinas e à
sua habilidade de multiplicação no organismo
hospedeiro. Essa medida pode ser avaliada utilizando a
DL50, que representa o número de células necessárias
para provocar a morte de 50% dos animais injetados.
Exposição: patógeno deve encontrar uma porta de
Porta de entrada: Rota característica que segue
uma bactéria para entrar nos tecidos do
organismo.
Agente exógeno: Originários do exterior do
organismo
 Agente endógeno: Existem já no organismo
(microbiota normal). Convertem em oportunistas.
Adesão: capacidade de um microrganismo de se ligar a
uma célula ou superfície.
Mecanismo: A produção de adesina estimulada por
contato superficial ocorre em diversas bactérias e pode
ser desencadeada pela detecção de superfície através
do envelope celular ou de apêndices extracelulares.

Acontece por meio da interação entre moléculas de

superfície do patógeno – adesinas ou ligantes – e
receptores complementares da superfície das células
teciduais do hospedeiro.

Adesinas: As adesinas localizam-se no glicocálice ou

em outras estruturas da superfície microbiana, como
pili, fímbrias e flagelos.
constituídas por glicoproteínas ou lipoproteínas
interações: proteína-proteína ou proteína-
carboidrato
Tanto os pili quanto as fímbrias atuam na ligação
às glicoproteínas da superfície da célula
hospedeira, iniciando o processo de aderência. Os
flagelos também podem aumentar a adesão às
células hospedeiras.
Além da aderência, As cápsulas são
particularmente importantes para proteger as
bactérias patogênicas dos mecanismos de defesa
do hospedeiro
Invasão: é a capacidade de um patógeno entrar nas
Receptores do hospedeiro: células ou tecidos hospedeiros, propagar-se e causar
Proteínas de membrana, doença.
Imunoglobulina de superfície
Glicolipídeos e glicoproteínas Na maioria dos casos, as infecções microbianas
Proteínas da matriz extracelular (como iniciam-se a partir de rupturas, ou feridas na pele ou
fibronectina e colágeno) nas membranas mucosas dos tratos respiratório e
digestivo, ou trato geniturinário, superfícies que
são normalmente barreiras microbianas. Em alguns
casos, o crescimento pode também iniciar em
superfícies mucosas intactas, especialmente se a
microbiota normal foi alterada ou eliminada, como,
por exemplo, por terapia antibiótica.

Invasão extracelular: ocorre quando à quebra das

barreiras de um tecido para disseminar-se no
hospedeiro enquanto permanece fora das células
hospedeiras.
Enzimas
quinase: dissolve coágulos de fibrina formados
pelo hospedeiro no local da invasão
hialuronidase: degrada ácido hialurônico, um
polissacarídeo presente particularmente em
tecidos conjuntivos
colagenase: rompe a rede de coágulos que sustenta
os tecidos, permitindo a disseminação do patógeno
pelo corpo.
coagulase: provoca a deposição de fibrina sobre os
cocos, protegendo-os da fagocitose.
Há também proteases, nucleases e lipases, que
degradam as proteínas, os ácidos nucleicos e os
lipídeos do hospedeiro, respectivamente
Invasão intracelular: ocorre quando um micróbio
realmente penetra as células de um tecido hospedeiro.
Trigger: células não fagocíticas
A bactéria se fixa à membrana celular e, através da
secreção de moléculas, desencadeia a mobilização
dos filamentos de actina que a envolvem e a
internalizam na célula.
Zipper
Liberação de proteínas que interagem com
receptores que levam a alteração no citoesqueleto,
intergaindo com túbulos que formam bundles que
“enrolam” a bactéria.
Infecção: Infecção refere-se a qualquer situação em
que um microrganismo e não um membro da
microbiota local se estabelece e se desenvolve em um
hospedeiro, independente se o hospedeiro encontra-se
prejudicado.
A infecção requer o crescimento de
microrganismos após a sua ligação a superfícies.
Isso requer que o meio ambiente do hospedeiro
forneça nutrientes adequados para suportar o
crescimento.
Toxicidade e Invasividade
Toxicidade: consiste na capacidade de um organismo
causar uma doença, por meio de uma toxina pré-
formada que inibe a função ou mata as células
hospedeiras.
Efeitos das toxinas pode ser locais ou sistêmicos
Invasividade: Crescimento adicional no sítio original e
em sítios distante.
Dano a célula do hospedeiro
direto: Multiplicação e o metabolismo do patógeno
liberação de toxinas
Toxinas: substância tóxicas produzidas por alguns
microrganismos.
Exotoxinas: são proteínas tóxicas liberadas pela
célula do patógeno, à medida que ele cresce. Essas
toxinas deslocam-se de um sítio de infecção e
causam danos em regiões afastadas.
Endotoxinas: são os lipopolissacárides tóxicos
encontrados na maioria das bactérias gram-
negativas. Estas são componentes estruturais da
membrana externa gram-negativa
Citoxinas
Também chamadas de toxinas citolíticas, são
proteínas extracelulares solúveis, secretadas,
produzidas por uma variedade de patógenos. As
toxinas citolíticas danificam a membrana
citoplasmática do hospedeiro, provocando lise
e morte celular.

Toxina diftérica - C. diphtheriae

Exotoxina AB
Fator de virulência
Subunidade B, liga-se especificamente a uma
proteína celular de células eucarióticas, o fator de
crescimento epidermal de ligação a heparina. ->
clivagem entre subunidade A e B libera a
subunidade A -> A subunidade A, então, interrompe
a síntese proteica, bloqueando a transferência de
um aminoácido de um RNAt à cadeia polipeptídica
em crescimento.
Toxina Botulínica e Tetânica

As toxinas botulínica e tetânica bloqueiam a liberação

de neurotrans-missores envolvidos no controle
muscular, porém a forma de atuação de cada uma e os
sintomas das doenças são bastante distintos.

Botulínica: A toxina botulínica atua na placa motora

terminal, impedindo a liberação de acetilcolina (A)
pelas vesículas, resultando em uma ausência de
estímulo às fibras musculares, relaxamento
irreversível dos músculos e paralisia flácida.

Hemolisinas ex.: Estreptococus

afeta os esteróis da membrana citoplasmática do
hospedeiro
A a-toxina estafilocóccica provoca a morte de
células nucleadas e lise de eritrócitos.
as subunidades da toxina ligam-se à bicamada
lipídica. Em seguida, as subunidades formam
oligômeros heptaméricos não líticos, agora
associados à membrana. Após a oligomerização,
cada heptâmero sofre alterações conformacionais,
originando poros transmembrânicos. Os poros
liberam o conteúdo citoplasmático e permitem o
influxo de compostos extracelulares, promovendo
a morte da célula
Toxina tetânica: A toxina tetânica liga-se ao
interneurônio e impede a liberação de glicina pelas
vesículas, resultando em uma ausência de sinais
inibidores para os neurônios motores, liberação
constante de acetilcolina nas fibras musculares,
contração irreversível dos músculos e paralisia
espástica. O interneurônio inibidor está localizado, na
verdade, na medula espinal.
Toxina colérica
enterotoxina do tipo AB produzida por V. Cholerae
A toxina colérica é uma enterotoxina AB
termoestável que ativa uma via de segundo
mensageiro, interrompendo o fluxo iônico normal
no intestino, resultando em uma diarreia
potencialmente fatal.
A atividade tóxica encontra-se na cadeia A, que
atravessa a membrana citoplasmática e ativa a
adenilato-ciclase, a enzima que converte ATP em
adenosina monofosfato cíclico (AMPc). -> Os níveis
aumentados de AMPc, induzidos pela enterotoxina
colérica, induzem a secreção de íons de cloro e
bicarbonato no lúmen intestinal.
Fatores do hospedeiro
Resistência inata à infecção
A presença da microbiota normal é um mecanismo
criticamente importante na resistência à infecção
patogênica, especialmente na pele e no intestino. A
microbiota normal limita os nutrientes
microbianos disponíveis e os locais para infecção.
Barreiras físicas e químicas: A integridade estrutural
das superfícies teciduais constitui uma barreira contra
a penetração dos microrganismos.
junções entre as células epiteliais
na pele e nos tecidos mucosos, os patógenos em
potencial devem primeiro aderir à superfície do
tecido
células epiteliais contêm cílios que expulsam
patógenos suspensos e os impedem de aderir aos
tecidos
a resistência à infecção e invasão é reforçada por
peptídeos antibacterianos denominados
defensinas, produzidos na pele, pulmões e
intestino.
As glândulas sebáceas presentes na pele secretam
ácidos graxos e ácido láctico, reduzindo a acidez da
pele a um pH 5, inibindo a colonização de muitas
bactérias patogênicas
Fatores de risco
idade - muito jovens ou muito idosos
dieta
estresse
comprometimento do hospedeiro - Um hospedeiro
comprometido é aquele no qual um ou mais
mecanismos de defesa estão inativos e a
probabilidade de infecção é, por esta razão,
aumentada
Sobrevivência a defesa do hospedeiro
Cápsula Polissacarídica
Evita a fagocitose
Pode aumentar a virulência de certas bactérias
(capacidade de se proliferar em macrófagos)
Componentes da parede celular
proteína M (medeia a adesão, evita fagocitose e
morte por ação de neutrófilo)
ácido micólico (resistente a digestão por fagócitos)
O resultado da relação bactéria-hospedeiro depende da
patogenicidade do microrganismo (fatores de
virulência)
resistência do hospedeiro (mecanismo de defesa)
Biofilmes
Aglomerados de bactérias aderidas a uma superfície
(biótica ou abiótica) e/ou umas às outras incorporado
em uma matriz produzida pelas próprias bactérias.
Os biofilmes aprisionam os nutrientes necessários ao
crescimento microbiano e ajudam a impedir o
destacamento das células de superfícies dinâmicas,
como em sistemas de fluxo corrente.
Matriz: composta por proteínas, polissacarídeos e
ácidos nucleicos
fornece proteção
estratégia de sobrevivência para escapar de
defesas do hospedeiro
Por quê superfícies? As superfícies são importantes
hábitats microbianos, normalmente oferecem maior
acesso aos nutrientes, proteção contra predadores e
perturbações físico-químicas, e um local para que
as células permaneçam em um hábitat favorável sem
serem removidas. Além disto, o fluxo através da
superfície colonizada aumenta o transporte de
nutrientes para a superfície providenciando maiores
recursos do que aqueles disponíveis às células
planctônicas.
Proteção contra:
Radiação ultravioleta (UV);
pH extremo;
temperatura extrema;
alta salinidade
alta pressão;
Desnutrição
Antibióticos
Formação de Biofilmes
Ocorre de maneira contínua, dinâmica e complexa,
dependendo da matriz, meio de cultura, características
intrínsecas das células, moléculas de sinalização,
metabolismo celular e controle genético.
A colisão aleatória de células com uma superfície
causa uma fixação inicial das células, com a aderência
promovida pela interação entre uma ou mais
estruturas celulares e a superfície.
A adesão de uma célula a uma superfície é um sinal
para a expressão de genes específicos do biofilme.
Esses incluem genes codificadores de proteínas que
sintetizam moléculas de sinalização intercelular e
produção de polissacarídeos extracelulares que
iniciam a formação da matriz
A modificação do crescimento de planctônico para
biofilme é desencadeado pela síntese de
diguanosina dimérica monofosfato cíclico. a
sinalização c-di-GMP é operada em múltiplos níveis
para modular a expressão de genes e a atividade
enzimática tal como se ligando a reguladores
transcricionais RNAm.
Adesão inicial
Diante de estímulos ambientais, como alteração de pH,
disponibilidade de nutrientes, temperatura, interações
com células imunes do hospedeiro, etc. Os
microrganismos planctônicos iniciam um processo
reversível de adesão a superfícies. Esse processo
impulsionado por apêndices locomotores (flagelos).
Ligação semi-irreversível: é impulsionado por uma
variedade de mecanismos complexos que
envolvem proteínas âncoras de superfície bacteriana e
conjuntos de macromoléculas, como pili.
Adesão irreversível: produção de uma matriz externa
composta por substâncias poliméricas extracelulares
(EPS), como polissacarídeos, DNA extracelular (eDNA),
lipídios e proteínas (limo).
Crescimento exponencial de células e a formação
da matriz, que estimula o processo de
intercomunicação celular, formando as
microcolônias.
Maturação
Formação de macrocolônias, a partir da agregação das
microcolônias, formando torres ou pilares de biofilmes
maduros em forma de cogumelos.
Muitos pilares de cogumelos juntos resultar em
uma arquitetura com canais de água entre os
aglomerados bacterianos
Matriz forma canais de água, aumenta a
estabilidade e confere proteção
Biofilmes maduro: Extratificação na atividade
metabólica, devido às diferentes concentrações de
nutrientes e oxigênio
As interações sociais em biofilmes envolvem
cooperação ou competição entre células e pode
resultar na remodelação dinâmica da comunidade
de biofilme.
Dispersão: uma subpopulação bacteriana pode
dispersar do biofilme e colonizar outras regiões.
pode ocorrer antes ou após a maturação
As condições que desencadeiam o processo de
dispersão envolvem a presença de gradientes
químicos, como o gradiente de oxigênio, por
exemplo, e concentrações reduzidas de c-di-GMP,
que, em níveis baixos, estimulam a motilidade e
diminuem a adesão.
Mecanismos patogênicos
Permite adesão a superfícies sólidas
Cooperação aumentando eficiência metabólica da
comunidade
Evasão do sistema imunológico
Obtenção de alta densidade de microrganismos
Troca de genes que podem resultar em amostras
mais virulentas
Produção de grande concentração de toxina
Proteção contra agentes antimicrobianos
Dispersão de agregados de microrganismos para
outros sítios
Quorum sensing
Mecanismo pelo qual as bactérias avaliam sua
densidade populacional.
Garante a presença de um número suficiente de
células de uma determinada espécie, antes de
iniciar uma resposta que requer determinada
densidade celular para exibir seu efeito.
Cada espécie que realiza o quorum sensing sintetiza
uma molécula sinalizadora específica, denominada
autoindutor.
Autoindutor: se difunde livremente através do
envoltório celular nas duas direções
o autoindutor se liga a uma proteína ativadora
específica ou a uma cinase sensorial, desen-
cadeando a transcrição de genes específicos
O quorum sensing desencadeia a ex-pressão de um
subgrupo de genes necessários para a formação do
biofilme.
Em muitas bactérias a formação do biofilme é
desenca-deada pelo acúmulo do c-di-GMP na célula.
Moléculas sinalizadoras
HSL
AIPS - peptídeos autoindutores
AI - autoindutor
DPD
Gram-negativas
o auto indutor acyl-HSL é sintetizado por uma
enzima do tipo LuxI, presente no citoplasma
Assim que a acyl-HSL atingir sua concentração
estimulatória, ela se ligará à proteína LuxR
formando o complexo LuxR-HSL, o qual se acopla a
promotores de genes específicos regulados pelo
Quorum Sensing, ativando a transcrição.
Gram-positiva
O sistema baseado na sinalização peptídica,
encontrado em bactérias Gram-positivas, geralmente
envolve a produção de pequenos peptídeos lineares ou
circulares, os quais serão traduzidos posteriormente
em grandes pró-peptídeos dentro das células.
Os receptores de oligopeptídeos estão ligados a
membrana bacteriana e a transdução do sinal ocorre
por meio de cascatas de fosforilação de uma proteína
regulatória tendo como resposta a ligação ao DNA e
regulação da transcrição dos genes alvos (xyz)
Arqueias
Extremamente diverso com relação a: morfologia,
fisiologia, reprodução e ecologia.
Conhecido por crescer em ambientes que extremos,
como hipersalino, com pH extremo, altas
temperaturas, baixa disponibilidade de O2 (mas pode
ser encontrado em temperaturas muita baixas e até
tropicais também).
Diferenças entre Archeas e Bactérias
Lipídeos: os lipídeos de arqueias apresentam ligações
éter entre o glicerol e suas cadeias hidrofóbicas
laterais.
Membrana: membrana lipídica em monocamada,
membranas com uma mistura de características de
bicamada e monocamada também são possíveis, com
alguns dos grupos hidrofóbicos opostos
covalentemente ligados e outros não.
Apesar das diferenças químicas entre as membranas
citoplasmáticas de arqueias e organismos em outros
domínios, a construção fundamental da membrana
citoplasmática de arqueias – superfícies hidrofílicas
internas e externas e um interior hidrofóbico – é a
mesma das membranas de bactérias e
eucariotos.
RNA polimerase: As RNA-polimerases de arqueias e
eucariotos são mais similares e estruturalmente mais
complexas do que as de bactérias.
Parede celular:
Ausência de peptideoglicanos nas paredes
celulares;
Ausência de membrana externa
Apresentam parede celular contendo:
polissacarídeos, proteínas ou glicoproteínas.
Pseudomureínas: O esqueleto da pseudomureína é
composto por repetições alternadas de N-
acetilglicosamina (também encontrada no
peptideoglicano) e ácido N-acetiltalosaminurônico.
as ligações glicosídicas entre os derivados de
açúcares serem do tipo b-1,3
Camada S: camada superficial paracristalina.
Consistem em moléculas entrelaçadas de proteínas
ou glicoproteínas. Atua como barreira seletiva e
retenção de proteínas.
Methanosarcina: espessas paredes
polissacarídicas constituídas por polímeros de
glicose, ácido glicurônico, ácido urônico
galactosamina e acetato
Flagelos: Diversas espécies de arquea apresentam
motilidade flagelar natatória;
São mais delgados
diversas flagelinas com sequências de aminoácidos
e genes diferentes dos presentes nas bactérias
Halobacterium, ATP alimenta diretamente a
atividade dos flagelos
Archeas Metalogênicas
produzem metano (CH4) como parte integral de seu
metabolismo energético (a produção de metano é
denominada metanogênese). Energia combustível e
aumento do efeito estufa.
pode oxidar ferro
Arqueias extremamente halófilas
Organismos que vivem em ambientes com altas
concentrações de sais.
Possuem concentração maior de íons para manter
equilíbrio hídrico
Algumas espécies de haloarqueias são capazes de
realizar a síntese de ATP dirigida pela luz sem a
presença de cloroplasto.
Tem morfologia variada.
Estabilidade de proteína e DNA
Composição de amino ácidos similar as bactérias
mesofílicas mas podem enovelar de forma
diferente para serem mais estáveis
Tendem a ter mais chaperonas que reenovelam as
proteínas desnaturadas;
DNA-girase única que faz supercoils para
estabilizar o DNA
Euryarchea tem histonas como nos eucariontes
para compactar o DNA e aumentar a temperatura
de melting
O citoplasma tem substancias que inibem dano
químico ao DNA
Resistência a antibióticos
redução da permeabilidade da membrana, seja
diminuindo a expressão de porinas ou alterando a
conformação dos canais, dificultando assim a
entrada do antibiótico. Isso pode ser alcançado por
meio da downregulation de porinas ou mutações
que afetam sua regulação.
sistemas de efluxo que bombeiam ativamente o
antibiótico para fora da célula, evitando que ele
atinja seu alvo.
produzem enzimas que são capazes de degradar
ou inativar o antibiótico.
O aumento da prevalência de bactérias Gram-
negativas com resistência múltipla a antibióticos
representa um desafio significativo no tratamento
de infecções, uma vez que essas estratégias de
resistência podem levar à falha no tratamento com
antibióticos convencionais.