Prova teórica 1 - 2003

1) Cite os postulados Koch. Postulados ainda são válidos hoje? Explique

Postulados de Koch: 1: um microrg específico pd smpr estar associado a uma doença; 2: o
microg pd ser isolado e cultivado em cultura pura, em condições laboratoriais; 3: a cultura pura
do microg produzirá a doença qd inoculada em animal susceptível; 4: é possível recuperar o
microg inoculado do animal infectado experimentalmente. (experimento do rato doente, isola
microrganismo, inocula em rato sadio e tb fica doente – microrganismo idêntico). Exceções ao
postulado: 1: nem td microrg cresce em meio de cultura (sífilis, lepra, vírus (só em cel viva)); 2:
conjunto de sinais e sintomas podem ser os mesmos em diferentes doenças; 3: um
microrganismo pode causar várias doenças. Importancia dos postulados: isolar e identificar os
agentes etiológicos das doenças.

2) Explique os sistemas de classificação de 3 reinos. Classifique vírus, procarioto termófilo, e

coli, fungo, filamentoso, alga levedura, cianófita, protozoa ciliado heterotrófico e flagelado
autotrófico.
- Reino Monera: procariotos, unicelulares, estrutura interna simples; reprodução normalmente
assexuada, por divisão simples, e pode apresentar troca de material genético (pelos sexuais);
crescem em meio de cultura artificial; algumas são patogênicas. São as bactérias.
- Reino Protista: eucarióticos, unicelulares, alguns coloniais, alguns parasitas intracelulares,
alguns patogenicos; reprodução sexuada ou assexuada; ocorrem em ambiente aquático. São os
protozoários e as algas.
- Reino Funghi: eucariotos, uni ou multicelulares; características estruturais distintas;
reprodução sexuada ou assexuada; crescem em meio artificial; alguns patogênicos; muito
usados na indústria (produção de bebidas e fármacos); papel fundamental na decomposição.
São os fungos filamentosos e as leveduras.
- Classificação: vírus (sem reino específico); procarioto termófilo (Monera); E. coli (Monera);
Fungo filamentoso (Funghi); alga (Protista); Levedura (Funghi); cianofita (Protista); protozoário
ciliado heterotrófigo e flagelado autotrófico (Protista).

4) Cite pelo menos 10 diferenças entre célula procariótica e eucariótica.

Procariótica x Eucariótica: 10 caracteristicas: núcleo sem, com; cromossomo circular e único,
linear e mais que 1; divisão celular binária, mitose e meiose; reprodução assexuada, assex e
sexuada; organelas (mitocôndria, retículos, c. golgi, lisossomos) ausentes; presentes; pili ou
pelos presentes, ausentes; esporos termoresistentes (endósporos) em alguns, ausente; genes
com íntrons(regiões não codificadoras) raro, comum; histonas ausentes, presentes; pinacitose
ausente, presente; pseudópodes ausente, em algumas; cílios ausentes, presentes em alguns;
flagelos (qd tem) 0,01-0,02 µm de diametro;0,2 µm de diâmetro.

5) Qual a função de flagelo, pelo, cápsula, parede celular, membrana citoplasmática,

mesosomo, esporo, inclusões, mat cel (?), glicocálix e faça um em uma célula bacteriana.
Flagelo: locomoção; movimento do flagelo leva em direção a algo (vão em direção a luz e
nutrientes, se afastam de calor e sal.
Pelo: adesão celular: importante na patogenicidade de bactérias (adesão a superfície); vários
tipos: Tipo IV: único relaciono a movimentação; pelo F : pelo sexual, faz a transferência de
plasmídeos entre bactérias.
Cápsula: é o glicocálix com organização definida, e firmemente acoplado a PC; sua função é de
proteção da célula, evitando lise por bacteriófagos.
Parede Celular: previne rompimento da célula (meios hipotônicos), e protege de pressões e
condições físicas adversas; barreira a substancias (deixa entrar nutrientes líquidos, evita vazar
substancias), previne influxo de outras substancias (ex: corantes, antibióticos, metais pesados).
Membrana Citoplasmatica: retem constituintes citoplasmáticos; alta seletividade de moléculas
(mais que a PC); transporte de moléculas; produção da energia (sitio de respiração); síntese da
PC, flagelos e lipídeos; possui receptores químicos (quimiotaxia).
Mesossomo: antigamente eram considerados estruturas celulares, associadas a funções
metabolicas; hoje sabe-se que são artefatos de técnica.
Esporo: Endósporo: sobrevivencia em condições desfavoráveis
Inclusoes: deposito de substancias insolúveis (orgânicas ou inorgânicas), que podem servir de
reserva de energia.
Glicocálix: adesão, impede dessecamento, reserva de alimento, evita lise por bacteriófagos;
protege bactérias patogênicas de serem fagocitadas.

6) Descreva os 4 maiores tipos nutricionais de bactéria, quanto a fonte de energia e de carbono

para o crescimento.
Qt a fonte de carbono pode ser: autótrofos (usam carbono inorgânico – CO2) ou heterótrofos
(moléculas orgânicas reduzidas); quanto a fonte de energia: fototróficos (usam luz);
quimiotróficos (oxidam compostos orgânicos e inorgânicos). Assim, podem ser de 4 tipos:
autofototróficos; autoquimiotroficos; heterofototróficos; e heteroquimiotroficos.

7) Explique sinteticamente a técnica de coloração diferencial de Gram e como ela funciona.

As etapas básicas das colorações são: fazer esfregaço (fina camada de microrg espalhada na
lamina), deixa secar, fixa (preservando as estruturas internas e externas; p ex, calor fixa);
coloração. Na coloração diferencial de Gram, primeiramente, : aplicação de cristal violeta (cels
coradas em gram + e -); solução de iodo (mordente)(forma complexo CV-I no interior das
células, q permanecem violetas (+ e -)); álcool (gram+: desidrata a PC, diminui porosidade,
complexo CV-I não sai, cel permanece violeta; gram-:extração dos lipídeos da PC, aumenta
porosidade, complexo CV-I sai da cel); safranina (contracorante) (gra+: nada acontece, continua
violeta (baixa porosidade); gram-: cels se coram de vermelho).

8) Explica as diferenças entra a parede celular de Gram+ e – faça um esquema.

Gram +: grossas (25nm), menos complexa que gram-, camada mais grossa de peptideoglicano
(acido teicóico(transporte de ions, armazenamento de fosforo), sem membrana externa na PC;
sem espaço periplasmático, sem textura externa rugosa; baixo teor em lipídeos (1-4%); mais
sensíveis a penicilina; mais inibidas por corante básico; exigências nutricionais complexas; mais
resistentes a desintegração mecânica.
Gram -: finas (10-15nm), mais complexas,menos peptideoglicano, com membrana externa a PC
(barreira seletiva – bicamada de fosfolipídeos, ancorada ao peptídeoglicano por lipoproteínas;
lipopolissacarideos (LPS) típicos, compostos por 3 parte: lipídeo A (ácidos graxos saturados,
reações em doenças (febre, diarreia, destruição de hemaceas, e choque fatal), cerne do
polissacarídeo, e antígeno O (polissacarídeos com estrutura semelhante a pelos; local de
reconhecimento e absorção de bacteriófagos.. ), com textura externa rugosa; alto teor de
lipídeo (11-22%); menos sensíveis à penicilina; menos inibidas por corante básico; exigências
nutricionais simples; menos resistentes a desintegração mecânica.
9) Diferencie cultura pura de mista e como as culturas podem ser obtidas e preservadas.
Cultura pura: é a cultura originada a partir de uma única célula, formada, portanto, por uma
única cepa; a cultura mista contém mais de uma cepa. Elas podem ser obtidas por técnicas em
que se dilui o inóculo para obter uma única célula, que vai originar a cultura. Pode ser por
esgotamento por estrias, semeadura em superfície (espalhamento em placa), e pour plate;
precisa repicar várias vezes as para obter cultura pura. Preservação: pode ser por refrigeração
(dias ou meses), e em nitrogênio líquido, ultrafreezer, e liofilização (longos períodos).

11) Quais as principais formas e arranjos bacterianos.

- Formas: cocos, bacilos,espiroqueta (flexicel) espirilos (rígidos), vibriões;
- Arranjos: cocos: diplo, estrepto, estafilo, tétrades, sarcinas.

12) Quais as formas de nitrogênio q as bactérias podem utilizar.

Parte essencial dos aminoacdiso, proteínas e ácidos nucleicos. Usam na forma de N2 (N gasoso
atm); composotos inorgânicos nitrogenados (nitrato, nitrito, ion amônio); compostos orgânicos
nitrogenados (aminoácidos e peptídeos).

Prova teórica 1 - 2004

1) Explique como o sistema de classificação de vivos evolui de Linnaeus até os dias atuais.
Historico do sistema de classificação:
Linnaeus (1753: Reino Plantae e Animalia);
Ernst Haeckel (1866 – reinos plantae, animalia, protista (caract planta e animal);
Quando avança microscopia eletronica (1940), distingue procarioto e eucarioto:
Lynn Margulis e Copeland (1956 – Plantae, Animalia, Monera (bact e ciano), Protoctista (algas,
fungos e protozoários) – teoria da endossimbiose);
Wittaker (1969 – baseado em alimentação (fotossint, absorção, ingestão) e organização celular
(uni ou multicel) – 5 reinos: plantae (multicel fotossint), Animalia (ingestão multicel); protisca
(eucarionte unicel: alga+protoz), Fungi (parede cel e não clorofila – absorção), Monera
(procariotos) – todas as bactérias estariam no reino Monera e originariam os outros reinos);
Carl Woese (1977: pesquisas com RNAr: 3 dominios: Archaea, Bacteria, Eukarya – “arvore da
vida”)

2) Koch e Pasteur foram importantes. Cite 3 contribuições de cada um.

Pasteur: refutou a teoria da Abiogênese; autoclave; pasteurização; teoria microbiana da
doença; vacinas (cólera, carbúnculo, raiva).
Koch: Postulados; técnicas de micro (placas de Petri, ágar, cultura pura, meios de cultura);
isolamento de microrg patogênicos (tuberculosa, cólera, difteria, tétano); diagnostico de
tuberculose (tuberculina) (Nobel em 1905).

4) Defina: temperaturas cardinais, tempo de geração, quimiostato, liofilização, quimiterótrofos.

Temperaturas cardinais: 3 temperaturas importantes para cd microrg: Minima e máxima (que
podem suportar) e ótima (melhor desempenho);
tempo de geração = tempo/numero de gerações (g=n/t) – intervalo de tempo necessário para
que cada microrg se divida ou a pop duplique de tamanho; depende da sp e das condições de
cultivo; calculado quando em condições ótimas de cultivo ou com crescimento exponencial
Quimiostato: é um biorreator, para manutenção de cultura contínua. Nele, os nutrientes
essenciais são limitados; tx de diluição cte; sem fotosensor; funciona melhor a baixas tx de
diluição; permite estudar o crescimento microbiano a txas muito baixas, semelhantes às do
ambiente natural (menor qtid nutrientes);
Liofilização: método de controle do crescimento microbiano, a frio; diminue as reações
químicas; servem para alimentos,c ulturas e medicamentos. É mais efetivo para longos
períodos de estocagem de culturas; agua removida por vácuo a baixas temperaturas
Quimioheterotrofos = heteroquimiotrofos: usam moléculas orgânicas reduzidas, quanto a
fonte de carbono, e oxidam compostos orgânicos e inorgânicos, quanto a fonte de energia.

5) Curva de crescimento (log, lag e talz) a) Explique o que acontece em cada parte da curva b)
Qual substrato forneceu melhor condição de crescimento. Como você chegou e esta
conclusão? 9) Descreva as fases de crescimento bacteriano em meio liquido. Essas mesmas
fases ocorrem em uma colônia cresce em meio sólido? Explique a resposta.
Essas fases servem para uma cultura crescendo em sistema fechado.
-Fase LAG: sem crescimento; cels individuais podem aumentar de tamanho;
-Fase LOG ou exponencial: crescimento máximo e constante; as condições são balanceadas –
crescimento exponencial;
-Fase estacionária: o crescimento é zero (o tanto que nasce=tanto que morre);
-Fase de declínio ou morte celular (crescimento é negativo e constante).
existe a produção de metabólitos primários (curva junto da linha de crescimento) e secundário
(começa dps da se log ser completada).
A curva que tem melhor condição de crescimento deve ser a que tem fase log e/ou
estacionaria por maior periodo de tempo.
Para ocorrer esse crescimento, o sistema deve ser fechado – não há entrada de nutrientes,
nem retirada de metabólitos. Caso o meio sólido consiga se adentrar a essas características...
(não sei).

6) Defina: meio diferencial, meio redutor, de enriquecimento, seletivo, definido, indefinido e

complexo. O complexo é quimicamente definido, dê exemplo de ao mesmo tempo seletivo e
diferencial.
Meio diferencial: diferenciar as colônias do org de interesse das dos de outros – possue
substancias que causa mudança observável. Ex: MacConkey: distinção entre bactérias
fermentadores e não – indicador de pH no meio (vermelho em pH ácido); ex: ágar sangue:
bactérias produtores de hemolisinas formam halos de degradação (hemólise) em volta da
colônia.
Meio redutor: crescimento de anaeróbicos obrigatórios; não tem O2 na composição;
preparação especial, esterilização em autoclave e possuem substancia redutora (remove O2.
De enriquecimento: semelhante ao seletivo, mas aumenta o crescimento da de interesse -
cultivo de enriquecimento: usada para amostras ambientais (gde diversidade de sp, mas cd
uma em pouca qtidade = difícil isolamento); contém nutrientes (ou ausência deles) que
estimula o crescimento de um dado microrg, mas não inibe do outro.semelhante ao seletivo,
mas aumenta o crescimento do microrganismo de interesse.
Seletivo: impede crescimento de microrg não desejados, favorece os de interesse.
Ex:MacConkey – inibem Gram+.
Definido: composição precisa e definida; para microrganismos específicos (espécie);
crescimento de quimioautotróficos e autotróficos e permite analise microbiológica;
Complexo: composição química indefinida, a partir de produtos naturais; ricos e usados para
crescimento de amplo espectro de microrg; escolhido qd não se conhece a necessidade
nutricional do organismo a ser isolado; crescimento da maioria dos organismos
quimio-heterotroficos.
O meio complexo é quimicamente indefinido. O meio MacConkey pode ser ao mesmo tempo
seletivo (impede o crescimento de Gram+), e diferencial (faz a distinção entre bactérias
fermentadoras e não-fermentadoras; dá indicação do pH no meio (pH vermelho = ácido –
bactérias fermentadoras).

8) O que é endósporo e qual a função, explique o processo de esporulação e germinação em

célula bacteriana.
São esporos que se formam no interior da célula, exclusivos de Eubacteria. Cada célula produz
apenas um endósporo, sendo assim, ele não é associado a reprodução – ele tem função de
resistência às condições controversas do meio, como altas temperaturas e dessecamento, até
que o ambiente volte a se estabilizar. Podem durar pouco ou até milhões de anos.
Esporulação: há uma replicação do DNA, e formação de um septo do esporo, que irá separar o
DNA recém replicado e uma pequena porção do citoplasma; a membrana plasmática começa a
circundar o que foi isolado na primeira etapa (DNA, citoplasma e membrana), e o septo do
esporo circunda a porção isolada, formando um pré esporo (2 membranas); uma camada de
peptideoglicana se forma entre as membranas; forma-se um revestimento do esporo, e o
endósporo é liberado da célula.
Germinação: se dá por estímulos químicos e físicos do ambiente; enzimas do endósporo
rompem a camada externa, e o metabolismo se reestabelece quando a agua penetra,e há
síntese de RNA, proteinas e DNA

Prova teórica 1 - 2005

2) Explique a teoria endossimbiotica e ela foi proposta por quem e cite uma evidência.
Segundo essa teoria, uma “célula pré-eucariótica”, por meio de invaginações na membrana
citoplasmática, “englobou” uma bactéria, que permaneceu no local, e se integrou à célula
pré-eucariotica, se tornando uma bactéria simbionte. Depois de muito tempo, essa célula
evoluiu para a célula eucariotica, e a bactéria simbionte originou as organelas; quando essa
bactéria era um procarioto fotossintético, originou um cloroplasto; quando era um procarioro
não-fotossintetico, originou uma mitocôndria. Ela foi proposta por Lynn Margulis. Uma
evidencia da teoria endossimbiotica é a presença de genes e ribossomos próprios em tais
organelas (cloroplastos e mitocôndrias) – o DNA dessas organelas é tem várias características
de procariotos, como DNA circular, sem histonas; e os ribossomos são do tipo 70S.

5) Explique como ocorre o movimento em bactérias que tem flagelos polares peretriquis e
periplasmáticos.
- Os flagelos periplasmáticos estão presentes em espiroquetas, em gram-. Os flagelos se
originam nos polos das células, e o movimento se dá girando em torno do corpo celular,
girando para frente e para trás – o giro no sentido anti-horário leva a célula para frente, e no
sentido horário leva para trás; ele se posiciona abaixo da membrana externa da PC.
- Já os peretriquis são vários flagelos espalhados ao longo do corpo. Eles se movimentam em
sincronia, formando um feixe, e rotando no sentido anti-horario, indo para frente. Ao
perderem a sincronia, os flagelos se separam, fazem rotação horária, fazendo uma cambalhota
e mudam de direção; ao intercalarem esses dois movimentos (corrida (para frente) e giro
(cambalhota), fazem um caminho tridimensional ao acaso, indo em direção ou se afastando de
algo.

6) Quais os tipos de microscopias são mais indicados para estudo de microrganismos vivos.
Microscópio óptico: vejo estruturas simples, morfologia: tamanho, forma, arranjo.

Microscópio eletrônico: vejo ultra-estruturas:flagelos, pelos, fimbrias, glicocalice, parede

celular (externas) ; membrana citoplasmática; ribossomos, citoplasma, nucleoide, plasmídeos
(internas).

7) Para que se utiliza óleo de imersão no aumento de 1000x?

O óleo de imersão funciona como uma ponte entre o vidro da lamina e da objetiva. Isso
concentra o trajeto da luz e aumenta a definição da imagem.

8) Qual o interesse de obter culturas contínuas e culturas sincrônicas?

Cultura contínua: cultivo em sistema aberto. A cultura é mantida em determinada fase para
produção máxima de metabolitos de interesse - usado em industrias, em fase log; tx de
produção e perda de cels é igual; adição de meio novo e estéril e remoção de meio utilizado,
continuamente; uso de quimiostatos e turbidiostatos.
- quimiostato: os nutrientes essenciais são limitados; tx de diluição cte; sem fotosensor;
funciona melhor a baixas tx de diluição; permite estudar o crescimento microbiano a txas muito
baixas, semelhantes às do ambiente natural (menor qtid nutrientes);
- turbidiostato: nutrientes em excesso; tx de diluição varia; com fotosensor (mede absorbância
ou turbidez); funciona melhor a altas tx de diluição;
Fermentador industrial: meio de cultivo recente é introduzido e meio contendo o produto
(metabólito) de interesse é retirado, continuamente.
Cultivo sincrônico: todas as cels se dividem ao mesmo tempo; permite estudar o crescimento
microbiano, organização e morfogênese, e susceptilidade a antimicrobianos nas diferentes
etapas do ciclo celular; a sincronia dura apenas algumas gerações. Metodologias: inicia-se o
crescimento em condições abaixo das ideias, e repentinamente passa para as ótimas; por
centrifugação ou filtração, seleciona cels q estão na msm fase.

11) Diferenciar microrganismos: psicrófilos, psicrótrofos, anaeróbios obrigatórios e facultativos.

Psicrófilo: cresce melhor em baixas temperaturas (abaixo de 0°C), e morrem quando a
temperatura aumenta;
Psicrótrofos: crescem a 0°C, mas a temperatura ótima fica entre 20-30°C. Normalmente
contaminam material em geladeira.
Anaeróbios: não requerem oxigênio no seu metabolismo. Os obrigatórios não toleram
oxigênio, morrendo na presença deste; os facultativos podem crescer na presença de oxigênio,
porém não utilizam o gás no seu metabolismo, para produção de energia.

12) Verdadeiro ou falso

V- meios quimicamente definidos são mais utilizado por microrganismos com maior exigência
nutricionais (acho que é verdadeiro, pq é específico para determinada sp)
F - capnófilos são microrganismos que vivem em ambiente com alta pressão hidro
(CAPNOFILOS – precisam de alta concentração de CO2)
V - peptídeoglicana é uma substância encontrada só em eubactérias (Archaea tem
pseudo-mureina)
F - termófilos extremos conseguem viver em temperatura próximo de 50ºC – tem o ótimo
entre 80-113°C
F - agentes inibidores são utilizados em meio de enriquecimento (enriquecimento: favorece o
crescimento de um, mas não inibe de outro)
- bactérias anaeróbicas obrigatórias não possuem as enzimas sod, peróxido dismutase e cat
V - bactérias com menor número de enzimas possuem necessidades nutricionais mais
complexas (se tem mais enzima, sintetiza qse td q precisa)
F - endósporos são estruturas reprodutivas em bactérias (não reprodutivas)
F - fungos saprófitos são causadores de doenças (decomposição)
F - do ponto de vista de RNA as arqueobactérias e eubactérias estão mais intimamente
relacionadas entre si do que com eucariotos

15- Quem é mais eficiente para controle microbiano, o calor úmido ou seco? Pq? Descreva um
método que utiliza cd um, indicando aplicações e limitações:
Calor seco x úmido: úmido é mais eficiente pq causa desnaturação e coagulação (irreversível)
de proteínas, em menores temperaturas e tempos de exposição que os necessários para
ocorrer oxidação (alteração nas moléculas) = isso devido a agua ser melhor condutora de calor
que o ar.
Úmido: autoclave; serve para esterilização de vidrarias de laboratório, e meios de cultura que
suportem altas pressões e temperaturas. Limitação: meios que não suportem altas pressões e
temperaturas não podem ser esterilizados.
Seco: Estufa, serve para esterilização de vidrarias de laboratório e instrumentos metálicos.
Também são limitados a objetos que suportem altas temperaturas, pois permanece a altas
temperaturas por um período maior de tempo que a autoclave (2h).

Prova teórica 2019

1.Compare a classificação de 5 reinos (Witakke) e a classificação por 3 domínios (Woese), na

questão evolutiva, em que elas se diferenciam?

2.Cite 5 diferenças entre células eucarióticas e procarióticas

3. Cite 4 cientistas importantes para o desenvolvimento da microbiologia e pelo menos um de

seus feitos.

4. (gráfico de crescimento pra analisar oq tinha acontecido) Foram colocadas duas fontes de
carbono (?) no meio, o gráfico tinha uma fase lag uma log uma lag e uma log dnv

5. Que tipo de diferenciação os organismos psicróficos e os termófilos tem para suportarem

ambientes extremos?

6.Como e em que organismos ocorre a formação de endósporo.Diferencie de acordo com com

composição, estrutura.