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Neste ms abordaremos o tema Antibiograma, teste que verifica a sensibilidade ou resistncia das bactrias a diferentes antibiticos. um teste de
grande importncia, visto que interpretado e utilizado para auxiliar no tratamento de infeces bacterianas.
Ed. #24

Informativo Tcnico - cientfico - Maio de 2009
Antibiograma
O Antibiograma uma tcnica microbiolgica que determina a Em seguida, semear de forma suave a suspenso
por toda a superfcie da placa.
sensibilidade ou resistncia bacteriana a um ou mais agentes
antimicrobianos. O seu objetivo no apenas analisar o espectro de
sensibilidade e resistncia das bactrias s drogas, mas tambm
determinar a concentrao mnima inibitria, ou seja, a concentrao
mnima do antimicrobiano necessria para inibir a multiplicao de um
isolado bacteriano.
O gar Mueller Hinton o meio recomendado pelo FDA (U.S.
Food and Drug Administration) e pela OMS (Organizao Mundial da
Sade) para o teste de sensibilidade/resistncia a antibiticos, de
bactrias Gram positivas e Gram negativas, aerbicas ou anaerbicas

facultativas, comumente encontradas em espcimes clnicos. O teste

Aguardar a superfcie da placa secar, por aproximadamente 10 minutos.
realizado utilizando-se discos de difuso antibiticos depositados sobre a

Utilizando uma pina, flambada e resfriada, colocar superfcie do meio onde se inoculou, por espalhamento, uma amostra da
os discos sobre a superfcie do meio.
cultura bacteriana.
A metodologia mais difundida e utilizada nos laboratrios
microbiolgicos para realizao do antibiograma a de Kirby & Bauer. Esta
metodologia, alm de apresentar baixo custo, apresenta um procedimento
muito prtico. Mas importante ressaltar que, mesmo sendo simples, a
tcnica de Kirby & Bauer deve ser realizada seguindo rigorosamente as
instrues para que os resultados apresentados sejam reais e confiveis.
Segue abaixo um esquema geral do procedimento:
Retirar os discos e as placas da geladeira, cerca de
20 a 30 minutos antes do incio do procedimento.

Retirar as placas, com as bactrias a

Incubar a placa em estufa bacteriolgica a 37C por 18-24 hrs.
serem analisadas, da estufa.

Medir o dimetro dos halos inibitrios de cada disco

Com uma ala bacteriolgica, flambada e resfriada,
e consultar a tabela apropriada para determinar se a
tocar 4 ou 5 colnias da bactria.
bactria semeada sensvel ou no a cada antibitico testado.

Suspender as colnias em soluo fisiolgica estril

importante que cada laboratrio padronize e desenvolva o seu prprio
at obter uma turvao grau 0,5 da escala Mac Farland.
protocolo de procedimento para a tcnica de antibiograma, seguindo as

referncias tcnicas e metodolgicas do National Committee for Clinical

Embeber um swab estril na suspenso bacteriana preparada
Laboratory Standards (NCCLS).
anteriormente, retirando o excesso na parede do prprio tubo.
Fonte: Manual para antibiograma. Tcnica de difuso por disco Laborclin.
Fonte: Manual para antibiograma. Tcnica de difuso por disco Laborclin.
Fonte: Manual para antibiograma. Tcnica de difuso por disco Laborclin.
Fonte: http://www.ioc.fiocruz.br
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Antibiograma
proibida a cpia, divulgao ou reproduo deste contedo sem autorizao prvia e formal da equipe de Assessoria Cientfica - Centerlab-MG.
O pH, a composio qumica, a qualidade e a espessura do meio,
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inculos padronizados na escala Mac Farland, nmero de discos
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compatveis com o tamanho da placa, temperatura adequada do material a
confiabilidade e segurana na liberao dos resultados!
ser utilizado e o controle da temperatura de incubao, so algumas, das
muitas precaues que podem ser tomadas para se obter um antibiograma
de qualidade.
Para facilitar e orientar a escolha dos discos antimicrobianos a
serem utilizados em cada bactria ou em cada famlia de bactrias, o
NCCLS/CLSI recomenda a escolha cuidadosa dos antibiticos a serem
utilizados, a partir de uma classificao prvia dos mesmos em 3 grupos
(A, B e C).
O grupo A deve ser o primeiro grupo a ser testado, caso o
microrganismo em anlise seja sensvel maioria dos antibiticos, apenas
estes resultados so liberados. Enquanto que, se for verificado um alto
ndice de resistncia, as drogas do grupo B devem ser testadas. O mesmo
procedimento aplicado ao grupo C em relao ao B.
Por ltimo, deve haver bastante critrio ao avaliar o tamanho do
halo inibitrio de cada disco de antimicrobiano. Com o auxlio de uma
rgua, deve-se medir o dimetro dos halos inibitrios de cada disco, e
consultando uma tabela apropriada, determinar se a bactria em anlise
sensvel ou no ao antibitico testado. No laudo do antibiograma, a
bactria pode estar classificada como resistente, intermedirio ou sensvel
a cada antimicrobiano.
Referncias:
Carlos Augusto PIASKOWSKI, C. A.; YAMANAKA, E. H. U; ROMANEL, M.
Manual para antibiograma. Tcnica de difuso por disco. Laborclin produtos para
laboratrios ltda. Pinhais PR. Maio de 2007.
Clinical and Laboratory Standards Institute CLSI. Site: .
Acesso em: 04/2009.
Manual Prtico de Microbiologia (Cap.5) - Instituto Superior de Cincias da
Sade - Sul. Site: . Acesso em: 04/2009.
Site: . Acesso em: 04/2009.
Site: . Acesso em: 04/2009.
Site: . Acesso em: 04/2009.
Site: . Acesso em: 04/2009.
Elaborao: Assessoria Cientfica Centerlab MG
http://www.clsi.org/
http://www.egasmoniz.edu.pt
http://www.laborclin.com.br/
http://www.unb.br
http://www.infectologia.org.br
http://www.anvisa.gov.br
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