UNIVERSIDADE FEDERAL DE GOIS

EECA LABORATRIO DE SANEAMENTO

ENGENHARIA AMBIENTAL E SANITRIA

PREPARO DE MATERIAIS E VIDRARIAS PARA

ESTERILIZAO EM AUTOCLAVE
Prof. Dr. Nora Katia Saavedra del Aguila

3 PERODO
GABRIEL MARINHO E SILVA
TALES EMANUEL SILVA BERNARDINO
VERUSKA WYS REGIS DE SOUZA

GOINIA-GO
SETEMBRO, 2016

1. INTRODUO E OBJETIVOS

Em um laboratrio de microbiologia, como se espera, so realizadas atividades que

envolvem o manuseio de microrganismos. Sendo constitudo de equipamentos e vidraria
especficos, que so reutilizados por inmeras vezes, isto , , porm, para tanto, necessrio que
estes aps serem submetidos a um dado processo, os citados objetos, depois de limpos sero
reusado em novos processos passem por algum processo de esterilizao, pois como outrora
mencionado, a presena de microrganismos no laboratrio certa, e estes podem contaminar os
objetos de anlise e assim prejudicar os resultados a serem obtidos, alterando-os ou at mesmo
invalidando-os, o que implica perdas de tempo e financeira.
Uma vez que, os microrganismos so invisveis a olho nu, necessrio que o procedimento
de descontaminao seja minucioso e eficiente, sendo um destes processos a autoclavagem, a qual
feita atravs de um aparelho denominado autoclave, este processo de esterilizao se d por meio
do uso de calor mido, na forma de vapor saturado sob presso, o que deixa o material submetido
ao processo biologicamente estril, isto , isento de qualquer microrganismo vivo, sendo
considerado por diversos autores, como o mais rpido, eficiente e econmico meio de esterilizao
disponvel para instrumentos resistentes altas temperaturas.
Assim sendo, a aula prtica ministrada objetiva elucidar o correto preparo de materiais que
compem o laboratrio de microbiologia para sua adequada esterilizao mediante o uso de
autoclave, bem como, demonstrar o funcionamento desta.

2. METODOLOGIA

2.1. Materiais
Papel Kraft
Tesoura
Algodo
Pipetas graduadas
Bquer
Erlenmayer
Fita crepe e fita para autoclave
Tubos de ensaio

2.2. Mtodos
Para preparar as vidrarias que seriam autoclavadas, tampou-se a abertura do Bquer e do
Erlenmayer com o papel kraft, prendendo as pontas com fita crepe e no final adicionando a fita
para autoclave, cujo papel indica se as vidrarias esto esterilizadas. Para os tubos de ensaio e
pipetas graduadas, necessitou-se adicionar o algodo em sua abertura de forma que estas no se
danifiquem. Logo aps, envolveu-se as mesmas com o papel kraft, prendo-as com fita de forma
que o papel no se soltasse. Assim, com todas vidrarias prontas, levou -se autoclave.
Na autoclave, necessitou-se verificar o nvel de gua, de forma que no ficasse nem acima
e nem muito abaixo cruzeta. Com isso, colocou-se a cesta da autoclave, na qual adicionou-se todo
o material devidamente embalado, e em seguida, fechou-se a tampa, apertando os manpulos em
forma de cruz. Inicialmente, ligou-se a autoclave em potncia mxima, liberando a vlvula de
escape para que o vapor pudesse sair durante 3 a 5 minutos. Aps esse perodo, fechou-se a vlvula
e aguardou-se at que sua temperatura chegasse ao 121C, sendo que, em seguida, reduzia-se a
chave para posio mdia e aguardando o processo de esterilizao, com tempo de 15 a 30 minutos.
No final do procedimento, necessitou-se aguardar - em um perodo de duas horas no mnimo -, at
que a autoclave esfriasse a fim de evitar acidentes. Logo aps, as vidrarias so removidas da cesta
da autoclave e levadas a estufa a 100C durante 30 minutos.

3. RESULTADOS E DISCUSSO

Passados duas horas aps desligado a autoclave, espera-se obter vidrarias altamente
esterilizadas, ou seja, sem nenhum microrganismo presente em seu interior e exterior. Para FolmerJohnson (1977), a esterilizao pelo vapor saturado sob presso, realizado em autoclaves, destri
microrganismo pela ao combinada da temperatura, presso e umidade que promovem a
termocoagulao e a desnaturao das protenas. A eficincia deste processo est principalmente
na alta temperatura (120C), uma vez que, segundo Motta (2005), os valores de temperatura tima
para o metabolismo enzimtico e proteico situam-se entre 40 e 45 C.
A ABNT NBR ISO 17665-1:2010 especifica os requisitos para o uso do calor mido no
desenvolvimento do processo, na validao e no controle da rotina de esterilizao (RIGHETTI &
VIEIRA, 2012). De acordo com a norma, a temperatura de 120C a ideal e a que garante a
eliminao dos microrganismos.
Por ser um equipamento com alto nvel de periculosidade - e que pode levar a bito -,
alguns cuidados devem-se ter ao se manusear uma autoclave, tais como: verificar se todas as
vlvulas esto corretamente fechadas; manter a temperatura no mdio ao se atingir 121C e manter-

se na sala durante o processo de esterilizao (15min), para no aumentar a presso em seu interior
e ocasionar uma exploso; ao abrir a tampa, posicionar-se sempre do lado oposto da abertura, para
no haver riscos de queimaduras. Alm disso, cuidados com o estado do equipamento tambm so
importantes e indispensveis, principalmente no que diz respeito a presena de danos e estado das
borrachas da tampa, as vlvulas de segurana e a fissuras no metal, pois podem representar riscos
ainda maiores.

4. CONCLUSO

A autoclave um equipamento para laboratrio indispensvel em qualquer segmento,

promovendo a esterilizao, exterminando qualquer fonte de vida microbiana existente,
impossibilitando sua reproduo no material. Portanto, saber lidar com o equipamento de
autoclave - que muitas vezes pode causar acidentes - fundamental. Sua orientao em laboratrio
de extrema importncia e preconizada pela RDC/ANVISA n15/2002, a fim de que o processo
de esterilizao ocorra da maneira mais segura possvel.

5. REFERNCIAS
ABNT NBR ISO 17665-1:2010. Esterilizao de produtos para sade Vapor. Associao
Brasileira de Normas Tcnicas. [Citado em 20 abril 2011] http://www.abntcatalogo.com.br/
norma.aspx?ID=57658.
Folmer-Johnson TNO. Introduo termologia. So Paulo: Nobel; 1977. p. 67.
MOTTA, V. T. Bioqumica Bsica. Laboratrio Autolab LTDA, 2005.
RIGHETTI, C.; VIEIRA, P. C. G. Autoclave: aspectos de estrutura, funcionamento e validao.
Resbcal, So Paulo, v.1 n.2, p. 185-189, abr./maio/jun. 2012.

QUESTES

1.

Por qu se deve esperar que a autoclave escoe todo o vapor (posio zero de

manmetro) antes de se proceder abertura da tampa?

Por que a sada de todo vapor formado acarreta na diminuio da presso sob a qual o
contedo interno da autoclave est, somente deste modo a abertura da tampa daquela possvel
sem que haja acidentes.

2.

Como o processo de funcionamento de uma autoclave?

O procedimento de esterilizao em autoclave se d por meio do uso de calor mido, na

forma de vapor saturado sob presso, isto , semelhantemente uma panela de presso, com o
aquecimento da gua colocada na autoclave e ao fechar a vlvula de escape impedindo que o vapor
seja liberado, o contedo interno do aparelho estar sob alta presso e consequentemente a uma
elevadssima temperatura, o que o faz isento de microrganismos vivos. Assim, a autoclave
funciona mediante o balanceamento entre temperatura, presso e tempo.