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MANUAL DE MTODOS PARA DIAGNSTICO DAS

PARASITOSES INTESTINAIS E ESQUISTOSSOMOSE
MANSNICA
Contamos com esse material em nosso trabalho, para que as pessoas possam
ter uma idia dos mtodos usados pelos mdicos, ao diagnosticarem um
paciente. (estes mtodos de parasitoses so usados em pacientes com tenase)

INTRODUO:
Como acontece nas maiorias das doenas, nas parasitoses um diagnstico clinico definitivo raramente
uma condio com margem satisfatria de segurana, pois normalmente existem vrias patologias determinantes
de sintomatologia semelhante, ocorrendo ainda em muitos casos infeco concomitante por mais de uma
espcie de parasitas (pluriparasitismo). Portanto, a confirmao nvel laboratorial uma condio
importantssima para orientao teraputica precisa, avaliao de prognstico e estudos epidemiologicos.
Porm, para que sejam obtidos melhores resultados diagnsticos, importante a escolha do(s) mtodo(s) de
maior sensibilidade para deteco da etiologia da leso, se confirmando assim a(s) hiptese(s) diagnostica(s)
correta(s). Para tal fim, indispensvel que se tenha noes no s dos procedimentos tcnicos nos diversos
mtodos diagnsticos que podem ser utilizados em cada caso, como tambm, de seus fundamentos, correta
coleta de material para exame e suas possveis causas de erros em decorrncia das diferenas relativas s
diferentes formas parasitrias, para parmetros como a densidade da forma parasitria, tropismos e localizao
na amostra fecal ou no hospedeiro.

Alm das tcnicas tradicionais para copropesquisa parasitria, pode-se contar com outras, tais como o
enterotest, pesquisa de antgenos parasitrios em fezes atravs de anticorpos monoclonais e a pesquisa de
ADN do parasita que se suspeita ser a causa de agresso, neste caso utilizando-se principalmente a reao em
cadeia da polimerase (Polymerase Chain Reaction - PCR). Apesar da seduo tecnolgica e da inegvel margem
de segurana destas tcnicas importante que seja avaliada a realidade econmica de nosso pas e as limitaes
de estocagem de reagentes utilizados em tais provas. Portanto, ser dado nfase neste manual aos mtodos de
maior exequibilidade e baixo custo, mas que apresentam significativa sensibilidade diagnstica para as
enteroparasitoses ou de outras localizaes, mas que apresentem em seu ciclo elimitao de estruturas
parasitrias pelas fezes como o caso da esquistossomose mansnica e fasciolose heptica.

I. BOAS PRTICAS EM COPROPARASITOLOGIA

Em razo Das fezes serem um potencial veculo para vrios agentes infecciosos e a manipulao de
vidrarias e afins poder determinar acidentes com leses nos operadores destes materiais, devem ser observados
diversos cuidados gerais, no s no planejamento e execuo das instalaes, bem como na rotina de
trabalho dos integrantes destes laboratrios.

I.1 SINPSE DE BIOSSEGURANA EM COPROPARASITOLOGIA

A. NORMAS GERAIS:

Planejar/adequar as instalaes fsicas, para reduo de riscos operacionais;

Colocar manual de biossegurana e caixa de primeiros socorros, em local acessvel e de conhecimento geral;
Treinar todos os integrantes do laboratrio, nas normas contidas no manual e respectiva fiscalizao para sua
aplicao;
Nomear responsvel por turno de trabalho como responsvel pela fiscalizao e primeiros socorros;
Ao manipular o material fecal, trabalhar exclusivamente em bancada prpria, no se aceitando improvisaes
exceto em condies de campo;
Lavar sempre as mo antes e aps o termino parcial ou total das atividades;
Cortar regularmente as unhas, mantendo-as curtas;
Sempre utilizar luvas de manipulao, com sua regio distal cobrindo a ponta do jaleco;
Impedir a entrada de pessoas estranhas na rea operacional do laboratrio;
Proibir comer, beber, fumar e aplicar cosmticos no interior da rea de trabalho;
Limpar antes, aps o trabalho individual e toda vez que se tenha ocorrido contaminao local, o piso,
bancadas de trabalho e outras partes que possam sofrer contaminao, com substncias desinfetantes tais
como hipoclorito de sdio a 1 %, etanol a 70 %, etanol iodado a 70 % ou soluo de formaldeido a 3 %.
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B. MANUSEIO DE AMOSTRAS CLNICAS:

Nunca utilizar vidrarias danificadas (rachadas, lascadas ou estilhaadas);

Cubrir qualquer leso com curativos que impeam contado desta superfcie corporal com possveis materiais
que contenham agentes contaminantes;
Utilizar jaleco de manga longa, evitando rea cutnea do brao descoberta;
Empregar pipetas automticas ou peras de aspirao, nunca pipetar com a boca;
Em caso de contaminao da pele com sangue, por corte ou contato superficial, logo aps o acidente lave a
rea vrias vezes com gua e sabo neutro;
Caso ocorra contato de sangue com o globo ocular, lave vrias vezes com grandes quantidades de gua;
Sempre que ocorrer contaminao com fezes em superfcies do laboratrio, deve ser colocada no local soluo
hipoclorito de sdio a 1 % atravs de bomba de esguicho e aps alguns minutos, limpar a rea com gaze
embebida na mesma soluo, repetindo-se a operao se necessrio;
Incinerar ou colocar em soluo descontaminante as amostras clnicas e resduos fecais de exame;
Se possvel , implantar sistema de esgoto especfico para laboratrios que manipulam fezes;
Introduzir cuidadosamente em recipientes, um para cada tipo de material, contendo soluo de hipoclorito de
sdio a 1 %, ou formaldeido a 5 %, lminas de microscopia, pipetas descartveis e vidrarias contendo as
amostras clnicas.

II. PESQUISA COPROPARASITOLGICA

A. COLETA DO MATERIAL FECAL

Para obteno de melhores resultados, devem ser sempre que possvel utilizadas fezes recentemente
emitidas ou preservadas por conservadores apropriados, isentas de contaminantes tais como urina, terra,
enemas e outros. O fornecedor da amostra fecal, deve ser instrudo coletar o material ou diretamente no
recipiente, ou no caso de impossibilidade, para utilizar plstico ou papel, isento de impurezas para tal coleta e
posterior transferencia da amostra fecal par o mesmo, com o auxlio de esptulas.

A.1 ACONDICIONAMENTO

Dependendo da disponibilidade de material, objetivos e outras peculiaridades da pesquisa tais como

distncia e transporte, poderemos utilizar vrios tipos de acondicionantes que variam desde embalagens plsticas
de filmes fotogrficos, frascos plsticos vendidos para tal fim, potes de boca larga como os de comida
industrializada de crianas at sacos plsticos (P.e. trabalhos de campo), os ltimos de enorme utilidade em
pesquisa quando o nmero de amostras coletadas for grande, pois eliminam o espao morto entre as diversas
amostras. conveniente tambm, o fornecimento de duas esptulas descartveis, para facilitar a colocao da
amostra fecal no recipiente.

O uso de substncias de ao purgativa como o sulfato de sdio deve se restringir aos casos de suspeita
de parasitismo por protozorios intestinais principalmente por Entamoeba histolytica. importante ressaltar que o
uso de leos vegetais pode determinar a formao de glbulos de gordura e o bismuto e o magnsio podem
acarretar formao de cristais e conseqente alterao da morfologia dos trofozotas nas dejees. Pacientes que
tenham sido submetidos a utilizao de contrastes para estudos radiolgicos de sistema digestivo at 7 dias aps
este procedimento, apresentam fezes imprprias para as tcnicas de coprodiagnstico parasitrio

A.2 QUANTIDADE MNIMA ACONSELHVEL

Como as tcnicas coproparasitologicas se baseiam na anlise de possveis estruturas parasitrias em

parte das fezes eliminadas, por isso denominada amostra, deve ser respeitada a quantidade mnima de 20 g
que possibilitar a feitura de vrias tcnicas ou em caso de dvida a repetio dos exames o que determinar uma
maior margem de segurana diagnostica.

A.3 IDENTIFICAO

Deve ser feita por preenchimento de etiquetas coladas aos recipientes acondicionantes com lpis ou
caneta esferogrfica colocando-se o nome, sexo, idade, data, hora da coleta, nmero do pronturio (caso
exista) e como complemento, outros possveis dados de importncia.

A.4 CONSERVAO
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Quando no for possvel a entrega do material no mximo, algumas horas aps sua eliminao, o
mesmo pode ser guardado temporariamente em refrigerador at por 12 h ou ento, podem ser utilizados
conservantes qumicos numa proporo de 2 a 3 partes para cada 1 de fezes. Quando o material fecal se
apresentar aquoso ou amolecido, existe a possibilidade de serem encontrados trofozoitas de amebdeos que
apresentam grande labilidade de conservao, representada pelos seguintes perodos: 2-5 h a 37 C; 6-16 h a
20-25 C e 48-96 h a 5 C, o que determina quando o material coletado na residncia, a utilizao de
fixador/conservador onde destacam-se: Soluo de Schaudinn, lcool polivinilico, SAF e soluo de Bouin.

Outros conservantes, para estruturas parasitrias que no sejam formas trofozoticas, so tambm
utilizados quando tentando aumentar a chance diagnostica, especialmente em fase crnica das infeces,
coletando-se de 2 a 4 amostras de preferencia em frascos individuais contendo conservante e uma ltima amostra
com fezes frescas (sem conservante) eliminada horas antes da chegada ao laboratrio, totalizando 3 a 5 amostras.
Esta estratgia importante pois tanto protozorios como helmintos podem no serem eliminados regularmente
nas fezes, ocorrendo assim perodos de baixa ou no eliminao de estruturas parasitrias, fenmeno que
pode determinar negatividade nas pesquisas em alguns dos dias de exame, como o caso das espcies do gnero
Taenia que podem ficar at 3 dias sem eliminar proglotes e de E. histolytica onde algumas vezes ocorre pico de
eliminao de cistos de 7 em 7 at 10 em 10 dias. A maioria das solues conservantes tem em sua formula o
formol, de forma isolada ou associada a outros produtos qumicos. So mais utilizadas no Brasil o MIF, soluo
de Railliet & Henry, diversas solues de formol e SAF.

A.4.1 PRINCIPAIS CONSERVANTES:

a. FORMOL 5 a 10 %, tendo com diluente, gua destilada deionizada ou soluo fisiolgica (NaCl a 0.89 %
em gua destilada deionizada).

b. FORMOL TAMPONADO (NEUTRO) 5 % Fosfato monobsico de sdio 0,15 g, fosfato dibsico de sdio
6,1 g, formol 400 ml e gua destilada deionizada 7200 ml.

c. MIF (MODIFICADO) Soluo A: gua destilada deionizada - 250 ml; Mertiolato n. 99 a 1:1000 ou
Mercrio cromo 2:1000 - 200 ml 40 %, Formol comercial bruto - 25 ml e Glicerina 5 ml.
Soluo B: Soluo parasitolgica de Lugol a 5 % (preparada no mximo a 12 dias e conservada em frasco
mbar). No dia da entrega dos potes, preparar soluo final com 94 % da soluo A e 6 % da soluo B.

d. RAILLIET & HENRY gua destilada deionizada 92 %, Formaldeido comercial 5 % e cido actico
glacial 3 %.

e. FIXADOR DE SCHAUDINN (MODIFICADO) Soluo saturada de bicloreto de mercrio (preparar em

banho Maria) 20 ml, lcool a 95 % p/v 10ml. Acrescentar 1,5 ml de cido actico glacial pouco antes de ser
introduzida a amostra fecal.

f. FIXADOR DE SCHAUDINN (MODIFICADO) Soluo aquosa de Bicloreto de mercrio (preparar em

banho Maria) : Bicloreto de mercrio 110 g em 1.000 ml de gua destilada deionizada, lcool a 95 % p/v 10ml.
Soluo Estoque: Soluo aquosa de bicloreto de mercrio 600 ml, lcool etlico a 95 % e 15 ml de glicerina.
Fixador: Soluo estoque 100 ml e 5 ml de cido actico glacial. A soluo fixadora deve ser feita pouco antes
de ser introduzida a amostra fecal.

g. LCOOL POLIVINILICO (APV) - APV 5,0 g, fixador de Schaudinn 93,5 ml, glicerina 1,5 ml, cido
actico glacial 10 ml, lcool etlico a 95 % 31 ml e gua destilada deionizada 62,5 ml. Homogeneizar em Beacker
os componentes lquidos. Colocar lentamente o APV em p, deixando a mistura em repouso por 24 h no prprio
Beacker. Aquecer a mistura lentamente em banho-maria at chegar em 750 a 800 C, quando for atingida
temperatura nesta faixa, retirar do aquecimento e misturar at a completa homogeneizao. Estocar em frasco de
boca esmerilhada ou de rosca.

h. LCOOL POLIVINILICO (APV) modificado - Soluo A - Dissolver completamente 5 g de APV em 31

ml de lcool etlico a 95 % em balo ou Erlenmeyer com tampa. Adicionar ento, 5 ml de cido actico,
homogenizando em agitador magntico. Conservar a soluo tampada at o uso.
Soluo B - Dissolver 4,5 g de bicloreto de mercrio em 31 ml de glicerina, em Becker de pequena capacidade,
misturando com agitador magntico at que todas as partculas estejam recobertas por glicerina. Introduzir a
mistura em balo de 150 ml, adicionando em seguida 62,5 ml de gua destilada deionizada. Tampar deixando
em repouso por 3 a 24 h, se possvel agitando-se a mistura de quando em quando. Aps repouso, submeter a
mistura com a tampa frouxa banho-maria em temperatura constante na faixa entre 70 a 800 C por 10 min,
agitando algumas vezes at completa homogeneizao.
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Misturar as duas solues no frasco que contm a soluo A, agitando a nova mistura. Submeter banho-maria
por 2 a 3 min, at obter soluo transparente. Deixar esfriar e estocar em frasco de boca esmerilhada ou de rosca.
Obs. A proporo de fixador no mnimo 1 da amostra para 3 do fixador. Os fixadores/conservantes referidos em
g e h, tambm podem ser utilizadas em amostras teciduais obtidas por retossigmoidoscopia

A.5 LAUDO (RESULTADO DA PESQUISA COPROPARASITOLOGICA)

Deve constar o nome, sexo, idade, aspecto da amostra e mtodo(s) utilizado(s) para a pesquisa
coproparasitologica e quaisquer outras informaes que sejam de importncia. Caso positivo deve constar o
nome(s) do parasito(s) encontrado(s) e respectivas formas parasitrias, sendo que alguns laboratrios ainda
informam a concentrao relativa atravs de: cruzes (1 a 4 ou 5) ou dos vocbulos raras, moderadas ou
numerosas. Caso negativo, por se tratar de pesquisa amostral, no se pode afirmar que o hospedeiro no est
parasitado, mas sim deve-se registrar que: No foram evidenciadas formas parasitrias na(s) amostra(s)
analisada(s).

A.6 MEDIO DE ESTRUTURAS PARASITRIAS

Em algumas situaes diagnsticas a medio de estruturas parasitrias elemento importante ou

mesmo indispensvel para a identificao etiolgica do parasita.

FUNDAMENTO: Medio da estrutura parasitria em questo, com escala micromtrica em lente ocular,
multiplicada por constante previamente aferida para cada objetiva do microscpio em questo.

INDICAO: Principalmente para diferenciao ovos de ancilostomdeos e outros estrongildeos ou

trofozotas de amebdeos onde se destaca o diagnstico diferencial entre Entamoeba histolytica e E. hartmanni.

PROCEDIMENTO TCNICO:

01. Introduzir na ocular a escala centesimal, retirando-se a parte superior da lente e inserindo no seu interior o
disco de escala ou j ter reservada, a ocular contendo permanentemente tal dispositivo;
02. Coloque a lmina com escala micromtrica (calibradora) na mesa do microscpio e a focalize em cada uma das
objetivas, observando para cada ampliao a relao entre as duas escalas;
03. Registre a proporo em micrmetros (m) para cada objetiva e guarde tal proporo para futuras medies
neste microscpio, retirando a lmina calibradora em seguida;
04. Coloque a lmina contendo a amostra clnica, mantendo a ocular micromtrica no microscpio;
05. Proceda a medio pela escala da ocular e multiplique pela constante obtida para aquela objetiva.
Obs. Em posteriores medies neste microscpio, inicie a operao pela etapa 04, utilizando-se a constante
registrada anteriormente para a objetiva em uso.

B. TCNICAS COPROPARASITOLGICAS

A opo por uma ou mais tcnicas para pesquisa de estruturas parasitrias em fezes, decorrente de
vrios fatores, tais como as peculiaridades biolgicas dos agentes etiolgicos suspeitados, pluriparasitismo,
disponibilidade de equipamentos e reagentes e at mesmo da experincia ou no do pessoal tcnico disponvel
para execuo das mesmas. Por esta razo, muito importante ter uma rotina, que possa ser alterada em
decorrncia dos fatores acima destacados, muitas vezes se utilizando para tal duas ou mais tcnicas para
aumentar a sensibilidade diagnostica.

B.1 NVEIS DE ESTUDO

B.1.1 EXAME MACROSCPICO

Antes da realizao de qualquer tcnica coproparasitologica, deve-se sempre proceder visualizao

pormenorizada da amostra coletada pois na mesma podem ser evidenciados odor, colorao, se os alimentos
foram ou no satisfatoriamente digeridos, helmintos inteiros/fragmentos, presena provvel de sangue, pus,
muco, gordura entre outros elementos de relevncia. Nas fezes recm-emitidas, sem que se tenha utilizado
conservantes, pode-se classificar sua consistncia em: moldadas, pastosas ou lquidas.

B.1.2 EXAME MICROSCPICO

Alm da pesquisa de estruturas parasitrias, o exame microscpico do material fecal deve assinalar a
presena de possveis elementos indicadores de anormalidades intestinais como exemplificado pelo achado de
clulas epiteliais em grande nmero associadas com hemcias, o que pode indicar processo ulcerativo intestinal.
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Outro elemento de relevncia o encontro de numerosos leuccitos que sugere processo infeccioso,
possivelmente de origem bacteriana.

B.1.3 CUIDADOS QUE DEVE TER O MANIPULADOR

Pelo risco potencial da ocorrncia de transmisso de vrios patgenos pela manipulao fecal,
fundamental que se use obrigatoriamente luvas para procedimentos durante toda sequencia diagnstica,
trocando-a ou o seu par se ocorrer suspeita ou rompimento, grande contaminao da mesma ou quando se for
examinar microscopicamente as preparaes em lmina. O uso de recipiente tipo borrifador com lcool iodado
a 70 %, lcool a 70 % ou hipoclorito a 1 %, outro elemento fundamental para limpeza do meio ambiente de
trabalho em caso de possvel contaminao deste.

B.2 MTODOS COPRO-PARASITOLGICOS

B. 2. 1 EXAME DIRETO

As fezes devem ser coletadas no tempo mais prximo possvel da execuo do exame, sendo
conveniente que se faa a coleta no prprio laboratrio, ou no mximo de 20 a 30 min aps sua eliminao, para
que se possa pesquisar trofozotas de amebdeos, flagelados e ciliados ainda apresentando mobilidade, sendo os
primeiros os mais sensveis aos fenmenos ps-mortem. Em fezes moldadas este cuidado no se torna necessrio,
pois praticamente no so evidenciados trofozotas.

FUNDAMENTO: Retirada direta e posterior estudo de pequenas amostras fecais.

INDICAO PRINCIPAL : Fezes diarreicas, pela possibilidade de encontro de formas trofozoticas

principalmente de amebdeos que se submetidos a tcnicas de concentrao normalmente seriam destrudos.

PROCEDIMENTO TCNICO

01. Coletar com palito pequena quantidade de fezes (aproximadamente 0,5 g), coletadas de pontos diferentes e
quando existente, do local que contenha muco, colocando em 2 pontos distintos de uma lmina. Pode-se
acrescentar em um dos locais pequena quantidade de soluo fisiolgica aquecida a aproximadamente 370 C,
sendo no outro ponto adicionada pequena quantidade de soluo parasitolgica de Lugol ou de azul de metileno
tamponada, cobrindo-se em seguida com lamnulas 22 x 22 mm. No caso de fezes moldadas s necessria uma
coleta podendo-se utilizar a soluo parasitolgica de Lugol;

02. Examinar em objetiva de pequeno aumento (aproximadamente 10 X) e em caso de campo suspeito utilizar
objetiva de mdio aumento (aproximadamente 40 X). Caso sejam encontrados trofozotas de amebdeos,
obrigatoriamente deve se proceder coloraco pela hematoxilina frrica, tricrmico ou outras coloraes menos
utilizadas.

OBS. recomendvel a retirada de material de pontos diferentes da amostra fecal, principalmente nas que
apresentarem muco, j que as estruturas parasitrias se concentram desproporcionalmente em diferentes locais nas
fezes.

SOLUES PARA COLORAO TEMPORRIA DE ESTRUTURAS PARASITRIAS

IODO DE LUGOL ( SOLUO PARASITOLOGICA DE LUGOL, modificada por Doblel & OCannor):

Misturar 1 g de iodo ressublimado (metlico) com 2 g de iodeto de potssio, acrescentando-se em seguida ml gua
destilada deionizada , 100 ml q.s.p.

SOLUO TAMPONADA DE AZUL DE METILENO

PAG. 96 (CAMILA ?????)

B. 2.2 MTODOS PARA COLORAO PERMANENTE DE PROTOZORIOS

B. 2.2.1 HEMATOXINA FRRICA

FUNDAMENTO: Afinidade tintorial intracelular de protozorios intestinais pela hematoxilina, permitindo

uma melhor identificao de suas estruturas internas.
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INDICAO PRINCIPAL: Apesar da mesma poder ser utilizada para qualquer destes protozorios, seja na
forma de trofozota ou cisto, em termos prticos ela somente indispensvel para distino dos trofozotas de
amebdeos presentes em amostras fecais ou para confirmao de etiologia amebiana de leses teciduais, tendo
como material de exame, o aspirado proveniente de ulceraes intestinais ou de leses extraintestinais.

PROCEDIMENTO TCNICO

01. Fazer esfregao do material em lamnula;

02. Sol. de Schaudinn * (face do esfregao voltada para baixo)....................... 10 min
03. lcool 70 % iodado (inverter a face da laminula).................................... 2 min
04. lcool 70 %............................................................................................ 2 min
05. lcool 70 %............................................................................................ 2 min
06. lcool 50 %............................................................................................ 2 min
07. Lavar em gua corrente.............................................................................. 2 min
08. Sol. de almem a 2 % *..............................................................................10 min
09. Lavar em gua corrente............................................................................. 3 min
10.Corar com sol. de hematoxilina 5 %............................................................ 5min
11.Lavar em gua corrente.............................................................................. 3min
12.Sol.de almem a 2 % *................................................................................varivel
13.Lavar em gua........................................................................................... .10 min
14.Alcool 50 %................................................................................................. 2 min
15.Alcool 70 %................................................................................................. 2 min
16.Alcool 90 %................................................................................................ 2 min
17. lcool 95 %................................................................................................ 2 min
18.Alcool absoluto........................................................................................... 2 min
19. Creosoto de Faia aquecido........................................................................ mnimo de 2 min.
20. Montar em Blsamo
* Preparar pouco antes de usar

OBS. Quando as fezes j vierem fixadas por utilizao prvia da soluo de Schaudinn, proceda centrifugao a
1500 r.p.m. de aproximadamente 4 ml do material, decantando o sobrenadante e adicione 3 gotas de soro
previamente inativado a 56 C por 30 min. Homogeneizar este material procedendo normalmente em seguida sem
a necessidade de fixao em laboratrio (etapa 2).

OBS. Para facilitar a manipulao das lamnulas, pode-se fazer garra de borracha por corte parcial de metade ou
um quarto de tampa emborrachada para frasco penicilnico.

SOLUO DE SCHAUDINN :
lcool etlico 95 ml ou absoluto....................................................................... 10 ml
Soluo saturada de bicloreto de mercrio........................................................ 20 ml
cido actico glacial glacial.................................................................................1,5 ml

SOLUO DE SCHAUDINN (MODIFICADA) :

Fixador de Schaudinn.......................................................................................... 93,5 ml

Acido actico glacial............................................................................................ 5,0 ml
Glicerol................................................................................................................. 1,5 ml

OBS. de escolha para coleta domiciliar de amostras fecais.

SOLUO SATURADA DE BICLORETO DE MERCRIO:

Dissolver 70 g de bicloreto de mercrio balo volumtrico de 1000 ml com gua destilada (q.s.p.), por
aquecimento em banho Maria agitando-se de tempos em tempos para homogeneizar a soluo. Aps aquecimento
e completa dissoluo, deixar temperatura ambiente para precipitao do excesso de bicloreto de mercrio.
Decantar a soluo sobrenadante em frasco para utilizao posterior.

SOLUO ESTOQUE DE HEMATOXILINA ( maturar por 6 semanas ) :

Hematoxilina (cristais )........................................................................................ 10 g
lcool absoluto q.s.p............................................................................................ 100 ml

Colocar a hematoxilina em balo volumtrico de 100 ml em contato com pequena quantidade de lcool,
homogeneizar at dissolver totalmente os cristais, introduzindo paulatinamente o restante do lcool, misturando
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bem a soluo at completar o volume total. Aps perodo de oxidao da soluo por exposio luz ambiente
por 6 semanas, guard-la em frasco mbar, acrescentando-se mesma 0,2 g de cido ctrico.

SOLUO DE HEMATOXILINA A 0,5 %

Preparar a soluo no mesmo dia em que ser feita a colorao, pois a mesma instvel, utilizando-se 1 parte da
soluo estoque (hematoxilina a 10 %) para 19 partes de gua destilada deionizada, obtendo-se diluio
equivalente a uma soluo de 0,5 % do corante.

PREPARO DAS SOLUES DE ALCOOL

LCOOL a 70 % - 67,6 ml de lcool absoluto e 32,4 de gua destilada deionizada.

LCOOL a 50 % - 45,2 ml de lcool absoluto e 54,8 de gua destilada deionizada.

LCOOL a 90 % - 92,6 ml de lcool absoluto e 7,4 de gua destilada deionizada.

ALCOOL IODADO
Homogeneizar soluo de tintura de iodo a 2 % em lcool a 70 %.

TINTURA DE IODO
Dissolver 1 g de iodo ressublimado em 50 ml de lcool a 95 %, adicionando-se em seguida 0,1 g de iodeto de
potssio.

B.2.2.2 CORANTE TRICRMICO (Brooke, 1960)

Cromotropo 2R....................................................................................................... 0,6 g

Verde Luz (Light Green)........................................................................................ 0,15 g
Verde Rpido......................................................................................................... 0,15 g
cido Fosfotngstico.............................................................................................. 0,7 g
cido actico glacial.............................................................................................. 1,0 g
gua destilada deionizada...................................................................................100,0 ml

Misturar os componentes em p em Beacker ou similar, misturando-os bem. Introduzir gradualmente o cido

actico glacial, agitando vigorosamente os componentes. Deixar por 30 a 60 min em repouso. Em seguida misturar
gradualmente a gua.

B.2.2.2 CORANTE TRICRMICO (Garcia & Bruckerner, 1993)

Cromotropo 2R..................................................................................................... 0,6 g

Verde Luz (Light Green)...................................................................................... 0,3 g
cido Fosfotngstico............................................................................................ 0,7 g
cido actico glacial............................................................................................ 1,0 g
gua destilada deionizada...................................................................................100,0 ml

Misturar os componentes em p em Beacker ou similar, misturando-os bem. Introduzir gradualmente o cido

actico glacial, agitando vigorosamente os componentes. Deixar por 30 a 60 min em repouso. m seguida misturar
gradualmente a gua.

B.2.3. TCNICAS DE CONCENTRAO (ENRIQUECIMENTO)

A. MTODO DE FAUST E COLABORADORES

FUNDAMENTO: Centrfugo-flutuao de possveis estruturas parasitrias pelo sulfato de zinco com densidade
de 1.180 a 1.200.

INDICAO PRINCIPAL: Estruturas leves de protozorios (cistos) e de helmintos (ovos leves).

PROCEDIMENTO TCNICO:
01. Homogeneizar as fezes com aproximadamente5 a 10 volumes de gua;
02. Filtrar passando por gaze dobrada 4 vezes em funil pequeno sobre tubo de centrifuga;
03. Centrifugar por 1 minuto a 2.500 R.P.M., decantar o sobrenadante e ento adicionar gua misturando-a bem
com o sedimento;
04. Efetuar novas centrifugaes, decantaes e lavagens, at que o sobrenadante se apresente relativamente
transparente;
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05.Decantar o sobrenadante da ltima lavagem colocando em seguida 2 a 3 ml de sulfato de zinco de densidade
de 1.180 a 2.000 (esta ltima densidade deve ser usada obrigatoriamente quando o material esta conservado em
solues que contenham formol ), homogeneizar;
06. Centrifugar a 2500 r.p.m. por 1 min;
07. Retirar com cuidado a pelcula superficial com ala de platina;
08. Colocar 4 a 5 pores acima em lmina com uma gota de soluo parasitolgica de Lugol;
09. Examinar em objetiva de pequeno aumento (aproximadamente10 X) e em caso de campo suspeito utilizar
objetiva de mdio aumento (aproximadamente 40 X).
OBS. Se paralelamente o mtodo de Lutz for utilizado, possvel substituir as etapas O1. e 02., pela utilizao
de parte do homogeneizado filtrado no clice de sedimentao. Utilizar a densidade de 1.200 sempre que as fezes
estiverem conservadas em soluo conservante que contenha formol.

B. MTODO DE WILLIS

FUNDAMENTO: Flutuao em soluo saturada de cloreto de sdio de estruturas parasitrias leves.

INDICAO PRINCIPAL: Estruturas leves de protozorios (cistos) e ovos leves de helmintos onde se destaca
os de ancilostomdeos.

PROCEDIMENTOS TCNICO
01. Homogeneizar aproximadamente 1 g de fazes com soluo saturada de cloreto de sdio;
02. Aps Filtrar em gaze dobrada 4 vezes, colocar em frasco de pequena capacidade com aproximadamente 3 cm
ou tubo de centrfuga, adicionando a soluo at formao de menisco positivo;
03. Colocar uma lmina (ou lamnula no caso de tubo de centrfuga) sobre a soluo, e aguardar 10 a 15 min;
04. Retirar a lmina ou lamnula, desvirando-a rapidamente;
05. Colocar lamnula sobre o material (no caso de frasco) ou vice-versa, no caso de tubo de centrfuga;
06. Examinar em objetiva de pequeno aumento (aproximadamente 10 X) e em caso de campo suspeito utilizar
objetiva de mdio aumento (aproximadamente 40 X).

C. MTODO DE SHEATHER ( MODIFICADO)

FUNDAMENTO: Centrfugo - flutuao de possveis estruturas parasitrias por soluo de glicose de

densidade de 1.235 a 1.500.

INDICAO PRINCIPAL: Ovos leves, larvas e cistos onde se destaca a grande sensibilidade para cistos
extremamente leves como os de Cryptosporidium parvum.

PROCEDIMENTO TCNICO:
01. Homogeneizar as fezes com aproximadamente10 volumes de gua;
02. Filtrar passando por gaze dobrada 4 vezes em funil pequeno sobre tubo de centrifuga at pouco menos da
metade do tubo, completando com gua;
03. Centrifugar a 2500 R.P.M. por 2 min e decantar;
04. Desprender o material do fundo do tubo por batidas com a lateral dos dedos e colocar at aproximadamente o
meio do tubo, soluo de glicose de densidade entre 1.235 -1.500;
05. Centrifugar a 2000 a 2.500 R.P.M. por 1 minuto;
06. Retirar com cuidado a pelcula superficial com ala de platina;
07. Colocar 4 a 5 pores da pelcula em lmina;
08. Examinar em objetiva de pequeno aumento ( aproximadamente 10 X ) e em caso de campo suspeito utilizar a
de mdio aumento (aproximadamente 40 X ).

D. MTODO RITCHIE

FUNDAMENTO: Centrfugo-sedimentao de estruturas parasitrias e utilizao de formol-ter.

INDICAO PRINCIPAL: Ovos de helmintos (leves e pesados) e cistos de protozorios.

PROCEDIMENTO TCNICO

01. Homogeneizar as fezes com aproximadamente10 volumes de gua;

02. Filtrar passando por gaze dobrada 4 vezes em funil pequeno sobre tubo de centrifuga;
03. Centrifugar por 1 min a 2.000 a 2.5000 R.P.M., decantar o sobrenadante;
04. Efetuar novas centrifugaes, decantaes e lavagens, at que o sobrenadante se apresente relativamente
transparente;
05. Misturar ao sedimento 10 ml de soluo de formol a 7,5 %, deixando em repouso por 25 min;
 9
06. Colocar 3 ml de ter sulfrico, tampar o tubo e agitar vigorosamente;
07. Centrifugar a 2.000 R.P.M. durante 1 min. Ficaro formadas 4 camadas: a inferior pelo sedimento, a segunda
pelo formol, a terceira por debris e a quarta por ter;
09. Remover auxiliado por bastonete com ponta de algodo, os detritos superficiais da parede do tubo;
10. Decantar o sobrenadante cuidadosamente, homogenizando o material;
11. Colocar parte do sedimento em lmina contendo gota de soluo parasitolgica de Lugol;
12. Examinar em objetiva de pequeno aumento (aproximadamente 10 X) e em caso de campo suspeito utilizar
objetiva de mdio aumento (aproximadamente 40 X).

E. MTODO DE LUTZ (ERRADAMENTE CHAMADO DE HOFFMAN, PONS E JANER)

FUNDAMENTO: Sedimentao espontnea de possveis estruturas parasitrias.

PRINCIPAL INDICAO: Estruturas parasitrias pesadas, tais como: ovos de mdia e grande densidade e
larvas.

PROCEDIMENTO TCNICO:

1. Homogeneizar as fezes em gua;

2.Filtrar em gaze dobrada 4 vezes ou tamis metlico/plstico de 150 a 180 malhas por cm quadrado, passando a
soluo para um clice de fundo cnico de sedimentao;
3.Completar o volume com gua ou soluo fisiolgica e aguardar cerca de 2 a 24 horas para obteno de
sobrenadante relativamente lmpido;
4. Se aps este perodo o sobrenadante estiver muito turvo aconselhvel a decantao do mesmo novamente
completar o volume como no procedimento 03 e aguardar por mais 1 hora;
05.Coletar, com pipeta de Pasteur, poro do sedimento, colocando-a entre lmina e laminula;
06.Examinar em objetiva de pequeno aumento (aproximadamente 10 X ) e em caso de campo suspeito utilizar
objetiva de mdio aumento (aproximadamente 40 X ).

OBS. Para reduo do tempo de sedimentao podem ser utilizadas solues detergentes como o Lubrol PX M.R.,
Triton M.R ou at mesmo as de detergentes domsticos neutros. Caso seja utilizada gua encanada ou de outra
fonte, deve ser lembrada a possibilidade da existncia de protozorios ou helmintos de vida livre na mesma,
principalmente espcies do gnero Paramecium.

F. MTODO DE BAERMANN

FUNDAMENTO: Atrao das larvas de nematides por gua aquecida (termo-hidrotropismo larvar ) e
posterior sedimentao espontnea das mesmas.

INDICAO NICA: Pesquisa de larvas de nematelmintos.

PROCEDIMENTO TCNICO:

01. Montar um aparelho de Baermann (funil preso em suporte, contendo cnula de borracha na extremidade mais
fina, fechada por pina de Mohr);
02. Colocar gua aquecida na faixa de 40 a 45 C, no interior do funil (dimetro mnimo de 10 cm) e cnula,
retirando-se possveis bolhas de ar por retirada de gua pela abertura da pina;
03. Colocar a amostra fecal sobre gaze dobrada 4 vezes, estando esta sobre tamis (peneira) de preferencia de
fundo reto;
04. Colocar o tamis contendo a amostra sobre o funil descrito acima, de maneira que a gua somente toque o fundo
do mesmo, sem deixar o material fecal imerso;
06. Aps 60 min, coletar amostra abrindo-se a pina sobre vidro de relgio. Examinar em microscpio
estereoscpio, e em caso de encontro de larvas, corar o material por soluo parasitolgica de Lugol transferindo-
se o mesmo para lmina que ser observada com objetiva de mdio aumento (aproximadamente 40 X) para
distino entre larvas de Strongyloides stercoralis e ancilostomdeos.

B. 9 MTODO DE RUGAI, MATTOS E BRISOLA

FUNDAMENTO: Atrao das larvas de nematides por gua aquecida (termo-hidrotropismo larvar).

INDICAO NICA: Pesquisa de larvas de nematelmintos.

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PROCEDIMENTO TCNICO:

01. Estender sobre um recipiente metlico, plstico ou de vidro de dimetro entre 3,5 e 6 cm que pode ser o que
foi utilizado para coleta, caso atenda a estas medidas, gaze dobrada 4 vezes sobre sua abertura, tensionando as
pontas e amarrando-as para trs;
02. Inverter o recipiente, colocando a face do recipiente que recebeu camada de gaze em contato com clice
cnico, normalmente de Lutz (Hoffman ) de 125 a 400 ml fixando-o em posio pouco inclinada;
03. Colocar gua a temperatura entre 38 a 42 C, deixando-a escorrer lentamente na parede do clice pelo orifcio
deixado por inclinao do recipiente at o nvel da gua alcanar a margem de contato com o recipiente, que ser
ento posicionado em plano de imerso parcial na gua;
04. Esperar por 60 a 90 min e com pipeta de Pasteur aspirar o material encontrado no fundo do clice;
05. Coletar amostra abrindo-se a pina sobre vidro de relgio. Examinar em microscpio estereoscpio, e em caso
de encontro de larvas, corar o material pela soluo parasitolgica de Lugol transferindo-se o mesmo para lmina
que ser observada com objetiva de mdio aumento (aproximadamente 40 X) para distino entre Strongyloides
stercoralis e ancilostomdeos.

B. 10 MTODO DE STOLL - HAUSHEER

FUNDAMENTO: Contagem de ovos por amostragem e posterior multiplicao por fator de correo para
clculo de seu nmero em 1 g de fezes (Ovos Por Grama - OPG).

INDICAO: Contagem de ovos em fezes, especialmente os de ancilostomdeos, Trichuris trichiura e Ascaris

lumbricoides em razo de apresentarem os mesmos uma produo de ovos diria de nmero mais constante.

PROCEDIMENTO TCNICO:

01.Em um frasco tipo Erlenmeyer que apresente graduao entre 56 e 60 ml, colocar hidrxido de sdio
decinormal ( N/10 ) at atingir a marca de 56 ml;
02.Colocar fezes ate que o nvel atinja 60 ml e em seguida colocar aproximadamente 10 prolas de vidro;
03.Fechar bem a abertura com rolha de borracha, envolver a parte superior em papel aluminizado ou selador;
04.Agitar at obter soluo homognea, colocando em geladeira por 12 a 24 h;
05.Homogenizar a soluo, colocar seguida 0.15 ml da suspenso em lmina cobrindo cuidadosamente o material
com lamnula de 40 X 22 mm;
05.Contar o nmero total de ovos especficos de cada helminto para preparao com objetiva de 10 X e em seguida
multiplicar o mesmo pelo fator 24 que ento determinar o numero de ovos de cada helminto por grama de fezes.

G. TAMISAO DAS FEZES

G.1 TAMISAO EM PENEIRA LARGA

FUNDAMENTO: Reteno na parte superior de tamis dos proglotes, adultos ntegros ou partes de
nematelmintos.

INDICAO PRINCIPAL: Pesquisa de proglotes do Gnero Taenia.

PROCEDIMENTO TCNICO:

01. Instruir coleta do mximo possvel da evacuao do suspeito (normalmente todos os dejetos do dia por 03
dias) em potes de boca larga com capacidade de aproximadamente 500 ml ou mais;
02. Diluir o material no prprio recipiente de coleta;
03. Filtrar o material em tamis em cuba de pia, empregando um jato de gua de pequena potencia para completar a
lavagem do material ;
04. Coletar possveis proglotes, helmintos adultos ntegros ou partes de nematelmintos adultos para posterior
identificao.

IDENTIFICAO

Para identificao de proglotes de cestides, deve-se submeter o(s) mesmo(s) a clarificao pelo cido
actico glacial por 10 a 20 min, na dependncia do tamanho dos mesmos e em seguida comprimi-lo(s) entre duas
 11
lminas, Observando-o(s) diretamente por transiluminao sem que seja necessrio o uso de microscpio. Para
nematides de pequeno porte, quando no conseguimos sua identificao sem o auxlio de anlise de suas
caractersticas microscpicas, devem os mesmos serem submetidos a clarificao pelo creosoto de Faia e posterior
observao entre lmina e lamnula sob objetivas de pequeno aumento (4 X e/ou 10 X).

G.2 MTODO DE KATO-KATZ

FUNDAMENTO: Passagem por tamis fino com posterior clarificao fecal e possvel contagem por
amostragem associada a multiplicao pelo fator de correo para clculo de Ovos Por 1 Grama de fezes (OPG).

INDICAO: Pesquisa e contagem de ovos em fezes, principalmente de S. mansoni.

PROCEDIMENTO TCNICO:

01. Pressionar tela de 200 m de malha cortada em pedaos de 4 X 4 mm, em moldura ou tela metlica (No 120,
de fios ardume e trama de 0,09 mm) sobre as fezes, se possvel no prprio recipiente de coleta com palito de
sorvete ou similar de plstico;
02.Raspar o material que passou pela tela com o palito ou similar, at se conseguir quantidade suficiente para
encher o orifcio de 6 mm de dimetro, da placa plstica perfurada ou carto, colocada sobre lmina de
microscopia, at que este orifcio se apresente totalmente cheio, raspando a parte superior da mesma para retirar o
excesso;
03.Retirar a placa plstica, colocando em seguida um pedao de celofane, como se fosse uma lamnula, umidecida
em soluo de verde malaquita*;
04. Inverter a preparao em superfcie lisa, protegida por papel absorvente, espalhando por compresso suave, as
fezes de forma uniforme, no deixando que ocorra extravasamento para fora do papel celofane;
04. Aps deixar a preparao em repouso durante aproximadamente 60 min, contar o nmero total especfico de
ovos para cada helminto, na preparao com objetiva de 10 X e em seguida multiplicar o nmero achado pelo
fator 24 que ento determinar o nmero de ovos por parasita em 1 grama de fezes (OPG).

OBS. Este mtodo apresenta maior margem de erro para clculo de OPG que o de Stoll.
* SOLUO DE VERDE MALAQUITA: Glicerina - 100 partes; Soluo aquosa de fenol a 6 % - 100 partes;
soluo aquosa de verde malaquita a 3 % - 1 parte. Mergulhar os fragmentos de papel celofane (aproximadamente
24 X 32 mm) na soluo por no mnimo 24 h, aps este perodo, retirar o excesso do corante dos corantes e
guarda-los apenas midos, em recipiente de boca larga bem fechado at o momento de uso.

III. MTODOS QUE UTILIZAM MATERIAIS NO FECAIS PARA EXAME

A. MTODO DE GRAHAN ( FITA ADESIVA, FITA CELOFANE OU ANAL SWAB)

FUNDAMENTO: Retirada de ovos, helmintos e/ou fragmentos dos mesmos em localizao anal e peri-anal
atravs de fita adesiva.

INDICAO: Pesquisa de Enterobius vermicularis e com bem menor sensibilidade ovos do gnero Taenia.

PROCEDIMENTO TCNICO:

01. Colar em lmina limpa e desengordurada fita adesiva de celofane (tipo durex ) com cerca de 10 cm de
comprimento e 0,12 cm de largura: nas extremidades que excedem a lmina, aderir pequenas tiras de papel para
anotar nome, data e resultado do exame;
02. Instruir ou executar a retirada da fita logo aps o suspeito da infeco acordar na parte da manh pelas tiras de
papel tomando o cuidado de esticar a mesma para a no enrol-la fazendo com que a contorne tubo de ensaio,
abaixador de lngua ou objeto similar com a face colante voltada para fora;
03. Efetuar a coleta do material mantendo os extremos das tiras preso a objeto citado por meio dos dedos polegar e
indicador, estabelecendo vrios contatos com regio anal e peri-anal da pessoa suspeita do possvel parasitismo;
04. Esticar o mximo possvel a fita e em seguida col-la novamente na lmina sem formao de pregas e bolhas
interpostas, sem comprimi-la fortemente contra lmina;
05. Examinar a preparao com objetiva de pequeno aumento (aproximadamente10 X).

B. BIPSIA RETAL
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FUNDAMENTO: Retirada de fragmentos de tecido retal, que potencialmente pode conter ovos ou
fragmentos de adultos de Schistosoma mansoni.

INDICAO: Pesquisa de ovos ou mais raramente de fragmentos de adultos de Schistosoma mansoni.

PROCEDIMENTO TCNICO:

01. Aps lavagem intestinal, atravs de retossigmoidoscopia, retirar por giro suave e coordenado com pina mdia,
1 a 2 fragmentos de tamanho aproximado de gro de arroz cru, de cada uma das 3 vlvulas retais (vlvulas de
Houston) ou as pregas intervalvulares de mucosa, por serem estes locais menos vascularizados e
consequentemente de menor risco hemorrgico;.
02. Colocar o material coletado em tubo de gua destilada deionizada, pois solues de hidrxido de potssio ou
sdio, podem destruir em alguns casos estruturas parasitrias inviabilizando assim o diagnstico. Sob refrigerao
podem ficar por vrias horas sem perderem sua condio diagnostica;
03. Comprimir o material em papel absorvente ou mata borro e em seguida, coloca-lo entre 2 lminas, selando a
preparao com fita adesiva nas duas extremidade;
04. Examinar a preparao com objetiva de pequeno aumento (aproximadamente 10 X) e se necessrio para
confirmao das estruturas parasitrias, utilizar objetiva de mdio aumento (aproximadamente 40 X).

OBS. O oograma obtido ser designado quantitativo, quando em seu resultado constar a contagem de ovos para
cada estagio de desenvolvimento, necessitando para tal da pesagem prvia dos fragmentos biopsiados. Ser
qualitativo se somente apresentar os estgios especficos sem o nmero relativo dos mesmos.

CLASSIFICAO DOS TIPOS DE OVOS DE S. mansoni EM BIPSIAS RETAIS

1. OVOS COM ESTRUTURAS INTERNAS VIVEIS:

1.1 Imaturos em I, II, III ou IV estgio.
1.2 Maturo (presena de miracdio no seu interior )

1. OVOS COM ESTRUTURAS INTERNAS MORTAS OU REABSORVIDAS

1.1 Recentemente morto
1.2 Calcificados
1.3 Cercados por granuloma
1.4 Fragmento(s) de casca do ovo aps absoro/destruio do contedo

APNDICE:

A. PESQUISA DE SANGUE OCULTO NAS FEZES

FUNDAMENTO: Reao bioqumica do oxignio liberado pela hemoglobina com o perxido de hidrognio e
posterior reao com aminofenazona (aminopirina), gerando com a reao colorao azul.

INDICAO: Suspeita de presena de sangue em fezes, acarretada por sangramento digestivo em pequena
quantidade, como pode ser feito por parasitas que determinam leses teciduais intestinais.

PREPARO PARA O EXAME: O indivduo a ser pesquisado no poder ingerir carne, alimentos que
contenham sangue e medicamentos que contenham ferro nos trs dias anteriores ao exame, bem como no
escovar os dentes de forma mais vigorosa para evitar sangramentos de mucosa oral.

CUIDADOS COM VIDRARIA: Todos as vidrarias Devem ser rigorosamente limpos para evitar qualquer
possvel contaminao com sangue e/ou ferro.

PROCEDIMENTO TCNICO:

01. Preparar pouco antes de incio da prova soluo de aminofenazona *;

02. Colocar aproximadamente 4 cm3 de fezes em tubo de centrifugao;
03. Introduzir no tubo 7 ml de gua destilada, homogenizando as fezes;
04. Centrifugar a entre 500 e 1000 rpm durante 5 min;
05. Decantar o sobrenadante para outro tubo de centrfuga;
06. Acrescentar no tubo contendo o sobrenadante 10 gotas de cido actico glacial, agitando a mistura;
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07. Colocar suavemente na parede do tubo apoiado em bancada 5 ml de soluo de aminofenazona, tomando-se
o cuidado de no misturar as duas fases;
08. Introduzir cuidadosamente 10 gotas de perxido de hidrognio a 10 volumes;
09. Aps 1 min observar se ocorreu desenvolvimento de colorao azul e caso positivo sua intensidade de tom,
classificando-a quanto a tabela abaixo.

GRAUS DE POSITIVIDADE DA REAO:

Azul claro: Reao fraco positiva (+)

Azul escuro: Reao forte positiva (++)
Azul marinho: Reao fortssima positiva (+++)

* PREPARO DA SOLUO DE AMINOFENAZONA

Introduzir 0,25 g de Aminofenazona em tubo ou Becker, colocando em seguida 5 ml de lcool a 95 %.

Obs. Submeter um tubo contendo gua para controle negativo e um tubo contendo sangue a 1 % em gua
destilada para controle positivo, s etapas 3 a 9.

IV. CARACTERSTICAS MORFOLGICAS DAS PRINCIPAIS ESTRUTURAS

PARASITRIAS ENCONTRADAS EM MATERIAL FECAL

A. PROTOZORIOS

A.1 AMEBDEOS

A.1.1 E. histolytica

a. Trofozota: Forma indefinida, em razo do padro de movimentao por pseudpodes, dimenso de seu maior
eixo variando entre 12 e 60 m, com mdia entre 20 a 30 m. Ncleo com cromatina fina, cariossoma puntiforme
e central. Citoplasma muitas vezes apresentando ectoplasma hialino e em contraste, endoplasma finamente
granulado de padro quase uniforme.

b. Cisto: De 10 a 18 m, membrana cstica fina e refringente, podendo apresentar-se com 1 a 4 ncleos na

dependncia do seu tempo de evoluo. Nos primeiros momentos principalmente, se apresenta com vacolo de
glicognio e corpos cromatides em forma de charuto.

A.1.2 E. hartmanni

Apresenta-se com caractersticas morfolgicas semelhantes a E. histolytica, exceto no que se refere a tamanho:
Trofozota de 4 a 8 m (maior eixo) e Cisto com 2 a 2,5 m.

A.1.3 E. coli
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a. Trofozota: Forma indefinida, em razo do padro de movimentao por pseudpodes, dimenso de seu
maior eixo variando entre 15e 60 m, mdia entre 25 a 35 m, ncleo vesiculoso, de grandes dimenses,
excntrico e grnulos de cromatina grosseiros, citoplasma vacuolizado conferindo aspecto sujo ao citoplasma,
representando fagocitose bacteriana.

b. Cisto: De 15 a 30 m, esfricos, membrana cstica fina e refringente, na dependncia do seu tempo de evoluo
pode apresentar-se com 1 a 8 ncleos. Inicialmente principalmente, se apresenta com corpos cromatides em
forma de agulha.

A.2 Iodamoeba butschlii

a. Trofozota: Forma indefinida, em razo do padro de movimentao por pseudpodes, dimenso de seu maior
eixo variando entre 10 e 20 m, ncleo distinto com grande cariossoma central ocupando quase todo o ncleo.
Ecto e endoplasma pouco diferenciados e pequenos vacolos digestivos.

b. Cisto: De 10 a 20 m, presena de somente 1 ncleo, idntico a forma trofozotica, no citoplasma pode ocorrer
presena de vacolo de glicognio.

A.3 Endolimax nana

a. Trofozota: Forma indefinida, em razo do padro de movimentao por pseudpodes, dimenso de seu maior
eixo variando entre 6 e 12 m, ncleo distinto com grande cariossoma central ocupando quase todo o ncleo,
central ou excntrico. Ecto e endoplasma pouco diferenciados normalmente sendo encontrados pequenos vacolos
digestivos.
b. Cisto: De 8 a 10 m, esfricos ou elptico, membrana cstica fina e refringente, dependendo do seu tempo de
evoluo 1 a 4 ncleos.

B. FLAGELADOS

B.1 Giardia lamblia

a. Trofozota: De 12 a 20 m de altura por 8 a 12 m de largura, piriforme (formato de raquete) em viso frontal e
em formato de colher (depresso na face mais larga) quando vista lateralmente, 2 ncleos idnticos dipostos
simtricamente na regio mais larga, grande cariossoma central. Citoplasma hialino, corpos parabasais, axonemas
no centro do maior eixo citoplasmatico e axonemas em posio transversa aos corpos parabasais, 8 flagelos
emergindo simtricamente nas faces laterais anteriores (2), mediana (2) e tero posterior (2) e 2 na regio caudal
(posterior).
OBS. Raramente so visualizados os flagelos, em funo de sua destruio pelos processos de fixao e/ou
colorao.
b. Cisto: De 8 a 12 m de altura por 5 a 8 m de largura, membrana cstica espessa e refringente, elptico,
esfrico ou levemente ovide, 1 a 4 ncleos idnticos a forma trofozotica, axonemas e corpos parabasais limitados
por membrana cstica dupla e refringente.

B.2 Pentratrichomonas hominis (Trichomonas hominis)

a. Trofozota: De 7 a 15 m de altura por 4 a 7 m de largura, piriforme (formato de raquete) em viso frontal,

presena de nico ncleo, disposto na regio anterior com grande cariossoma central. Citoplasma vesiculoso,
apresentando costa e penta.
OBS 1: Raramente so visualizados os flagelos, em funo de sua destruio pelos processos de fixao e/ou
colorao.
OBS 2: No foram encontrados at o momento, cistos em seu ciclo vital.

B.3 Chilomastix mesnili

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a. Trofozota: De 12 a 14 m de altura por 5 a 6 m de largura, piriforme (formato de raquete), nico ncleo
disposto na regio mais larga, cariossoma puntiforme. Citoplasma hialino apresentando citstoma e presena de 3
flagelos anteriores e 1 exteriorizado na regio onde encontrado o citstoma. OBS. Raramente so visualizados
os flagelos, em funo de sua destruio pelos processos de fixao e/ou colorao.
b. Cisto: De 7 a 9 m de altura por 6 a 8 m de largura, ovides, 1 ncleo idntico a forma trofozotica,
citoplasma hialino limitado por membrana cstica dupla.

B.4 Enteromonas hominis

a. Trofozota: De 5 a 7 m quando esfrico e De 6 a 9 m de altura por 5 a 6 m de largura na forma piriforme

(formato de raquete), nico ncleo disposto na regio mais larga, cariossoma volumoso e disforme. Citoplasma
alveolado, flagelo recorrente posterior e 2 flagelos anteriores.

OBS. Raramente so visualizados os flagelos, em funo de sua destruio pelos processos de fixao e/ou
colorao.

b. Cisto: De 6 a 8 m de altura por 3 a 4 m de largura, ovides ou elptico, 1 a 4 ncleos idnticos a forma

trofozotica que quando se apresentam em 2 ou 4, se dispe divididos em plos opostos em nmero semelhante,
citoplasma hialino limitado por membrana cstica nica.

B.5 Retortamonas intestinalis (Embadomonas intestinalis)

a. Trofozota: De 4 a 9 m de altura por 3 a 5 m de largura, piriforme (formato de raquete) ou ovide, nico

ncleo disposto na regio mais larga, cariossoma puntiforme. Citoplasma pouco vacuolizado, apresentando
citstoma pouco ntido e presena de 2 flagelos anteriores.
OBS. Raramente so visualizados os flagelos, em funo de sua destruio pelos processos de fixao e/ou
colorao.

b. Cisto: De 5 a 7 m de altura por 4 a 6 m de largura, ovides, 1 ncleo idntico a forma trofozotica,

citoplasma hialino ou pouco vacuolizado limitado por membrana cstica dupla.

B.6 Dientamoeba fragilis

a. Trofozoita: De 5 a 12 m, ncleo normalmente duplo (provavelmente em diviso), membrana nuclear sem

grnulos de cromatina, cariossoma central grande em formao de cruz, crculo ou quadro, citoplasma com aspecto
vacuolizado.
Obs. No foram encontrados cistos em seu ciclo vital.

C. CILIADOS

C.1 Balantidium coli

a. Trofozota: De 40 a 90 m de altura por 30 a 60 m de largura, ovide ou elptico, presena de 2 ncleos,

sendo um nitidamente de maior dimenso (macroncleo) riniforme e outro prximo a este, de difcil visualizao
(microncleo). Citoplasma contendo grandes vacolos contrteis em nmero varivel, citstoma em um dos plos
e citoprcto (citopgio) no plo oposto e membrana plasmtica apresentando numerosas fileiras de clios.
Obs. Quando corados pela hematoxilina frrica ou similares, raramente so visualizados os clios, em razo de sua
destruio pelos processos de fixao e/ou colorao.
b. Cisto: De 40 a 60 m de dimetro, esfricos ou pouco ovides, 2 ncleo idnticos a forma trofozotica,
citoplasma hialino apresentando vacolos e membrana cstica relativamente grossa.

D. COCCDEOS

D.1 Sarcocystis suihominis

Oocisto: De 40 a 60 m de altura por 10 a 20 m de largura, sendo uma das extremidades mais delgada que a
outra. Pode se apresentar em 3 estgios:
Imaturo: Com uma estrutura esfrica denominada esporoblasto;
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Imaturo com dois esporoblastos; e
Maduro: Com dois esporocistos (estagio posterior ao esporoblasto) cada um destes com quatro
espororozotas em forma de meia lua.

D.1 Isospora belli

Oocisto: De 20 a 33 m de altura por 10 a 19 m de largura, sendo de conformao oval. Pode se apresentar em

vrios estgios: Imaturo com um esporoblasto, Imaturo com dois esporoblastos e maduro contendo dois
esporocistos cada um destes com quatro espororozoitas em forma de meia lua, porm normalmente se apresentam
em fezes frescas exclusivamente sob forma de oocisto com um esporoblasto.

II. HELMINTOS

II. 1 OVOS

A. 1 Ancilostomdeos (Necator americanus e Ancylostoma duodenale) - De 60 a 90 m de altura por 30 a 45 m

de largura, so elipsides de casca fina e transparente, massa embrionria fracamente acizentada com 4 a 8 clulas
no incio de sua formao e espao entre si e a casca nesta fase largo, porm, sofrendo reduo de acordo com o
desenvolvimento embrionrio, culminando com formao de larva.

A. 2 Ascaris lumbricides - Se apresenta sob as formas abaixo relacionadas:

A.2.1 Frtil corticado - Ovo esfrico ou elipside, casca espessa corada em marrom pelos pigmentos fecais e de
projees mamilonadas grosseiras externas com massa embrionria de nica clula.
A.2.2 Frtil descorticado - Ovo esfrico ou elipside, casca espessa sem a membrana externa e em consequncia
de superfcie externa lisa e transparente, e com massa embrionria de nica clula.
A.2.3 Infrtil corticado - Mais alongado que o frtil, com mamilos mais grosseiros e sem massa embrionria.
A.2.4 Infrtil descorticado - Mais alongado que o frtil, porm, transparente e sem membrana externa
mamilonada.

A.3 Enterobius vermicularis - Ovo lado mais convexo que outro (em forma de D), casca de mdia espessura e
transparente, no seu interior normalmente encontramos larva j formada ou mais raramente massa embrionria.

A. 4 Trichuris trichiura - De 50 a 60 m de altura por 20 a 30 m de largura Ovos em forma de barril (bola de

futebol americano), casca de mdia espessura corada em marrom pelos pigmentos fecais contendo projees
mucides bipolares, e massa embrionria no seu interior.

A. 5 Gnero Taenia - Ovos esfricos com dupla membrana, casca corada em marrom pelos pigmentos fecais
contendo elementos prismticos que conferem aparncia radiadas e massa embrionria com seis acleos(embrio
hexacanto).

A. 6 Hymenolepis nana - Ovos esfricos, maiores que os de Taenia, com casca fina e transparente, apresentado
massa embrionria com seis acleos e de cada um dos dois plos se projetam mameles com filamentos (tufos
polares) entre as duas membranas da casca.

A. 7 H. diminuta - Ovos semelhantes a H. nana, porm, normalmente subesfricos, de menor tamanho e ausncia
dos filamentos polares.

A. 8 Schistosoma mansoni - Ovos elipsides afilados na ponta, com casca fina, transparente e com espculo
lateral, larva ciliada (miracidio) no seu interior apresentando movimento ciliar externo quando observada a mdio
aumento.

A.9 Fasciola hepatica - Ovos operculados, cor castanha e clulas vitelinicas bem evidenciadas no interior,
limitadas por casca lisa e fina.

B. LARVAS

b.1 S. stercoralis - Larvas rabditides com 200-300 m de comprimento e 15-18 m de largura, vestbulo oral
curto (4 m), esfago com duas protuberncias (rabdiforme), com limite final aproximado de
1/3 do corpo, e primrdio genital bem desenvolvido (18-23 m).
Larvas filariides sem bainha, comprimento de 500 m e largura de 14-20 m, esfago
sem protuberncias (filariforme), com limite final na metade do corpo, e cauda entalhada ou
terminando abruptamente.
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b.2 Ancilostomdeos - Larvas rabditides com 100-150 m de comprimento e 15-17 m de largura,
vestbulo oral longo (13-16 m), esfago com duas protuberncias (rabdiforme), com limite
final aproximado em 1/3 do corpo, e primrdio genital pouco desenvolvido (5-7 m).
Larvas filariides com bainha, comprimento de 500 m e largura de 14-20 m, esfago sem
protuberncias (filariforme), com limite final aproximado em 1/3 do corpo, e cauda afilada.

C. PROGLOTES GRVIDOS

C. 1 Taenia saginata - Aspecto retangular, esbranquiado, poros genitais unilaterais, aps clarificao notamos o
grande nmero de ramificaes uterinas (15 a 20), de aspecto dicotmico.

C. 2 T. solium - Aspecto retangular, esbranquiado, poros genitais unilaterais, aps clarificao notamos menor
nmero de ramificaes uterinas (8 a 14), de aspecto dendrtico.

C. 3 Dipilidium caninum - Mais longos que largos, apresentando bordas convexas, poros genitais duplos, laterais
e simtricos e tero transformado em cpsulas ovgeras.

D. CAPSULAS OVGERAS

D.1 D. caninum - Elpticas apresentando em seu interior dezenas de ovos com embrio hexacanto.