Exerccios sobre cintica enzimtica:

1. A enzima urease aumenta a velocidade da hidrlise da uria em pH 8,0 e 20 C por um fator de

1014. Se uma dada quantidade de urease pode hidrolisar completamente uma certa quantidade de
uria em 5 minutos a 20 C e pH 8,0, quanto tempo (em anos) levaria para que essa mesma
quantidade de uria fosse hidrolisada sob as mesmas condies na ausncia da urease?

Se a enzima aumenta a velocidade da reao de hidrlise da uria em um fator de 1014, o tempo

para que a reao se complete tambm acelerado nesta mesma ordem de grandeza. Se a
reao no for catalisada pela enzima (ausncia da enzima), o tempo necessrio para a reao se
completar ser 1014 vezes maior.

Portanto, na ausncia da enzima o tempo para a reao se completar ser igual :

t = 5 min x 1014

Transformando isto em horas:

t = 5 x 1014 min / 60 = 0,083 x 1014 horas

Transformando em dias:

t = 0,083 x 1014 horas / 24 = 0,00347 x 1014 dias

Transformando em anos:

t= 0,00347 x 1014 dias/365 = 9,5 x 108 anos.

2. Utilize a equao de Michaelis-Menten para responder as questes abaixo:

a) Qual a concentrao de substrato para que uma enzima com k cat de 30,0 s-1 e Km de 0,005 M
opere com um quarto da velocidade mxima?
s utilizar a equao de Michaelis-Menten e substituir, o valor de Vo por Vmx/4:

. []
=
+ []

Substituindo:

. []
=
4 + []

Resolvendo a equao:

[S] = 0,00166 M ou 1,7 mM

b) Determine a frao de Vmx que seria obtida nas seguintes concentraes de substrato: 1/2Km;
2Km e 10Km.
i) [S] = Km ou 0,5Km s substituir este valor na equao :
.[] .0,5 0,5 .
= = =
+[] +0,5 1,5

Resposta: = 0,33.
 ii) [S] = 2 Km
Seguir o mesmo raciocnio acima
Resposta: = 0,66.

iii) [S] = 10 Km
Resposta: = 0,9.

c) Enzimas que catalisam a reao XY so isoladas de 2 espcies de bactrias. As enzimas

possuem a mesma Vmx, mas diferentes valores de Km. A enzima A tem Km=2 M e a enzima B
tem Km=0,5 M. Qual destas enzimas possui maior afinidade pelo substrato?

A enzima B, devido ao seu menor valor de Km.

3. Um grupo de pesquisadores descobriu uma nova enzima, que catalisa a reao abaixo, e que eles
nomearam de felicidase:
FELICIDADE TRISTEZA
Os pesquisadores iniciaram a caracterizao da enzima.
(a) No primeiro experimento, com [Et] de 4 nM, eles observaram que a Vmx 1,6 M.s-1 Com base
nesse experimento, qual o kcat da felicidase? (coloque as unidades apropriadas)

Para isto, precisamos utilizar a equao da Kcat:

1,6.106 . 1
= =
[] 4.109

Portanto:

= 400 1

(b) Em outro experimento, com [Et] de 1 nM e concentrao do substrato FELICIDADE de 30M,

os pesquisadores observaram que Vo= 300 nM.s-1. Qual o valor de Km medido para a
felicidase para o substrato FELICIDADE?

Para este exerccio, precisamos utilizar o valor de Kcat obtido no exerccio anterior (b).

Com este valor, e utilizando a frmula da Kcat, podemos calcular o novo valor de Vmx, com
[Et] = 1 nM:

= []
400 1 = 109
Vmx = 0,4 . 10-6 M.s-1ou 0,4 M.s-1

Agora s utilizar a equao de Michaelis-Menten e calcular Km (cuidado com as unidades,

para resolver este exerccio, vou deixar tudo em mol ou M):

. []
=
+ []

0,4 . 1 . 30
0,3 . 1 =
+ 30

Km = 10 M
 (c) Pesquisas posteriores indicaram que a felicidase isolada no primeiro experimento estava
contaminada com um inibidor reversvel, denominado RAIVA. Quando RAIVA foi totalmente
removida da preparao de felicidase e os dois experimentos foram repetidos, observou-se que
a Vmx no foi alterada, mas o valor de Km passou a 20 M. Com base nestas informaes,
qual o tipo de inibio realizada por RAIVA?

Inibidor reversvel, do tipo competitivo.

4. Embora haja disponibilidade de mtodos grficos precisos para determinao de Vmx e Km de uma
reao catalisada por enzimas, algumas vezes estes parmetros podem ser rapidamente
estimados pelo exame dos valores de Vo aumentando a [S]. Estime os valores de Vmx e Km da
reao catalisada por uma enzima na qual foram obtidos os seguintes dados:

[S] (M) Vo (M/min)

2,5 x 10-6 28
4 x 10-6 40
1 X 10-5 70
2 x 10-5 95
4 x 10-5 112
1 x 10-4 128
2 x 10-3 139
1 x 10-2 140
2 x 10 -1 140

Vmx = 140 M.min-1

Km = 1x10-5 M

5. A anidrase carbnica de eritrcitos (PM: 30.000 g/mol) tem um dos nmeros de renovao mais
altos conhecidos. Ela catalisa a hidratao reversvel do CO2.

H2O + CO2 H2CO3

Se 10 g de anidrase carbnica pura catalisam a hidratao de 0,3 g de CO2 em 1 min em Vmx,

qual o nmero de renovao (Kcat) da anidrase carbnica (em unidades de min-1)?

- Primeiro, calcular o nmero de mols de CO2 e da enzima (anidrase carbnica) presente nas
massas dadas no enunciado.

0,3 g de CO2:

Massa molar CO2: 46g/mol

46g 1 mol
0,3g x

x= 0,00652 mols de CO2

10 g de anidrase carbnica:

Massa molar da enzima: 30.000 g/mol

30.000 g 1 mol

10.10-6 g x x= 3,33 .10-10 de anidrase carbnica

 - A velocidade mxima atingida pela enzima igual a 0,00652 mols/min, j que, segundo o
enunciado, esta a quantidade de molculas de CO2 transformadas pela enzima por minuto, quando ela
atinge a velocidade mxima.

- Agora, s substituir os valores de Vmx e concentrao total da enzima (em mols, [Et]) na
equao da Kcat:

=
[]

0,00652 /
=
3,3. 1010

Kcat 2x107 min-1