ndice

Pag.
Introduo ........................................................................
................................................. 2
Objectivos ........................................................................
................................................. 5
Material
experimental ......................................................................
................................. 6
Instrumentos ......................................................................
............................................... 6
Solues:..........................................................................
................................................. 6
Equipamento: ......................................................................
.............................................. 6
Material
biolgico: ........................................................................
................................... 6
Procedimento
experimental ......................................................................
........................ 7
Resultados.........................................................................
................................................ 8
Discusso .........................................................................
............................................... 10
Limitaes ........................................................................
.............................................. 11
Concluso .........................................................................
.............................................. 12
Referncias .......................................................................
.............................................. 13
Anexos ............................................................................
................................................ 14

1
Introduo
A gua corresponde cerca 80 - 90% dos tecidos vegetais. Para a planta a gua
absorvida
do solo, movimenta-se atravs da planta e boa parte perdida para a atmosfera na
forma
de vapor. Sendo a gua o componente mais abundante na clula vegetal, perceber como
ela se movimenta permite-nos conhecer as diversidades fisiolgicas e funes
ecolgicas
que ela exerce (Kerbauy, 2004).
As membranas das clulas vegetais so selectivamente permeveis, elas permitem o
movimento de gua e de outras substncias pequenas, sem carga, atravs delas mais
prontamente do que o movimento de solutos maiores e de substncias com carga (Taiz
&
Zeiger, 2004).
A osmose ocorre espontaneamente em resposta a uma fora propulsora. Em difuso
simples a gua se movimenta a favor do gradiente de concentrao; no fluxo de massa
por presso; na osmose os dois gradientes influenciam o transporte, portanto a
direco e
o fluxo de gua atravs de uma membrana so determinadas pelas foras propulsoras
dos
dois gradientes (Taiz & Zeiger, 2004).
O potencial hdrico (w) representa a expresso quantitativa das foras
propulsoras. Este
dependente do potencial osmtico (s), potencial gravitacional (g) e do
potencial de
presso (p). Quando se lida com o transporte a nvel celular o g e desprezvel
assim
fica simplificada a equao do potencial qumico da gua w = s + p (Taiz &
Zeiger,
2004).
Quando colocamos um tecido vegetal em gua, esta entra nas clulas porque o seu
potencial hdrico maior que no interior da clula devido existncia de solutos
dissolvidos. medida que a gua entra na clula aumenta o valor do potencial
hdrico,
atingindo-se o equilbrio quando este for zero, tal como na gua. Uma clula nestas
condies diz-se trgida. Pelo contrrio, se um tecido vegetal for colocado numa
soluo
muito concentrada (w muito negativo) tender a perder gua, atravs do abaixamento
da p e, consequentemente do w. Nestas condies as clulas dizem-se plasmolizadas
(Correia, 2014).
O murchamento celular, devido a sada de gua da clula, quando inicia- se a
separao
do protoplasma da parede celular em pelo menos 50% das clulas chamado de
plasmlise incipiente.

2
Admite-se que uma soluo capaz de promover plasmlise em 50% das clulas de um
pedao de tecido vegetal, isotnica em relao concentrao da soluo em que o
tecido est imerso (Vendemiatti, 2010).

Fonte: Carrapio, 2006

Fig1: clulas em situao de plasmlise.

Neste experimento determinar-se- o potencial osmtico com base na plasmlise

incipiente nas clulas epidrmicas da folha da Rhoeo discolor.
A Rhoeo discolor (abacaxi-roxo) uma planta da famlia comelinaceae, herbcea,
rizomatosa, de folhagem perene e colorida, cultivada em diferentes regies
tropicais do
mundo por suas qualidades como ornamental. Ela forma rosetas densas e simtricas,
com
suas folhas erectas, cncavas e lanceoladas. Tipicamente, as folhas apresentam a
pgina
superior verde oliva e a inferior violcea. A medida que a planta vai crescendo e
as folhas
mais inferiores vo caindo, o caule curto revelado, mas dificilmente a planta
cresce alm
de um metro de altura (Patro, 2015)

3
Fonte: dawsonsgardenworld.com.au
Fig2: Rheo discolor (Abacaxi- roxo)
Esta espcie permite obter uma nica camada de epiderme utilizando determinadas
tcnicas, isto permite a observao de clulas em condio de plasmlise incipiente
causada pelo potencial osmtico, o que constitui o principal objectivo desta
experincia.

4
Objectivos
Geral
o Estudar o potencial osmtico na plasmlise incipiente da epiderme da Rhoeo
discolor.

Especfico
o Indicar as concentraes que originam a plasmlise;
o Relacionar a quantidade de clulas plasmolizadas com a concentrao;
o Mostrar a relao existente entre o potencial osmtico e a plasmlise incipiente;
o Mostrar o valor de potencial osmtico onde 50% das clulas se encontram
plasmolizadas.

5
Material experimental
Instrumentos:
o 2 Pipetas graduadas de 10ml;
o 9 Tubos de ensaio com tampas;
o Suporte para tubos de ensaio;
o 9 Lminas e lamelas;
o Marcador;
o 2 copos plsticos com capacidade para cerca de 250 ml;
o Bisturi.

Solues:
o Sacarose a concentrao 1M;
o gua destilada.

Equipamento:
o Microscpio ptico.

Material biolgico:
o Folhas de Rhoeo discolor.

6
Procedimento experimental
1. Enumerou-se os tubos de ensaio de 1 9 com o marcador;
2. Utilizou-se os copos plsticos para introduzir os volumes das concentraes de
sacarose a 1M e gua destilada, com a pipeta diluiu-se nos tubos de ensaio
enumerados de 1 9 para perfazer um volume total de 10ml a concentrao de
sacarose a 1M e gua destilada para obter-se as seguintes concentraes: 0.10,
0.15, 0.20, 0.25, 0.30, 0.35, 0.40, 0.45 e 0.50 molares de sacarose e o restante
gua
destilada. As solues foram homogeneizadas com as pipetas graduadas;
3. Com o bisturi, cortou-se peas quadradas de 1cm das folhas da Rhoeo discolor;
4. De seguida introduziu-se 5 peas das folhas em cada tubo de ensaio e colocou-se
as tampas nos tubos. Incubou-se por 30 minutos temperatura ambiente;
5. Depois da incubao, removeu-se com cuidado as epidermes inferiores (a mais
rosada na Rhoeo discolor) de 3 peas da folha de cada tubo de ensaio;
6. Efectuou-se preparaes temporrias das 3 epidermes de cada soluo dos tubos
de ensaio nas respectivas lminas;
7. Colocou-se as epidermes viradas para cima na lmina, de seguida colocou-se uma
gota da soluo em que esteve incubada e foram cobertas com lamelas;
8. As lminas foram levadas a observar nos microscpios pticos partindo da
ampliao de 40X. Com a ampliao de 100X foram seleccionados campos e
foram contadas 20 clulas de cada epiderme para verificar as clulas
plasmolizadas;
9. A mdia das clulas plasmolizadas foi calculada atravs do somatrio das clulas
plasmolizadas verificadas nas 3 epidermes de cada lmina, divido por 3 e depois
foram calculadas as percentagens;
10. O potencial osmtico foi retirado da tabela da molaridade versus presso
osmtica
em Bar e convertido em Mpa atravs da proporo de 1Bar = -0.1Mpa

7
Resultados
Aps a realizao da experincia foi possvel observar que quanto maior a
concentrao
de sacarose maior o nmero de clulas plasmolizadas. As concentraes de 0.10M,
0.15M
e 0.20M no causam plasmlise, conforme mostra a tabela a seguir.
Concentrao

de Potencial osmtico Nr. Total de clulas % Mdia de clulas

sacarose (M)

(Mpa)

plasmolizadas

plasmolizadas

0.10

-0.26

0.15

-0.41

0.20

-0.54

0.25

-0.68

11

18.33333333

0.30

-0.82

13

21.66666667

0.35
-0.97

19

31.66666667

0.40

-1.12

30

50

0.45

-1.29

33

55

0.50

-1.45

39

65

Tabela nr. 1. Concentraes de sacarose, potencial osmtico correspondente, nmero

de
clulas plasmolizadas e a percentagem.

Ao calcular o potencial osmtico comparou-se com a percentagem das clulas

plasmolizadas e este aumenta a medida que o potencial osmtico diminui. A figura
nr. 1.
mostra essa relao. Quando 50% das clulas esto plasmolizadas o potencial
osmtico
igual a -1.12Mpa.

8
PERCENTAGEM DAS CLULAS
PLASMOLIZADAS (%)

Relao entre a percentagem das

celulas plasmolizadas e o potencial
osmtico

-1.6

70
60
50
40
30
20
10
0

-1.4

-1.2

-1

-0.8

-0.6

-0.4

-0.2

-10 0

Figura Nr. 1. Variao da percentagem das clulas plasmolizadas em funo do

potencial
osmtico nas clulas epidrmicas da Rhoeo discolor.

9
Discusso
As membranas celulares permitem a passagem de gua, mas por outro lado, impedem a
passagem da maioria das substncias, essas membranas so conhecidas como
membranas semipermeveis (Raven et al, 1996). De acordo com a experincia, nos
tubos 1,2 e 3, as clulas da epiderme da Rhoeo discolor no sofreram plasmlise.
Duas
solues que tenham o mesmo potencial hdrico ou igual nmero de partculas
dissolvidas so chamadas isotnicas, onde h um equilbrio entre a gua absorvida e
libertada pela clula, pensase que este o motivo pelo qual no h variao nos
tubos
1,2 e 3, pois nestas solues nenhum meio esta mais concentrado que o outro,
encontrando-se num meio isotnico.
Nos tubos 4 a 9 as clulas da epiderme da Rhoeo discolor, ocorreu uma alterao na
morfologia das clulas conhecida por plasmlise, onde verificase a separao da
membrana a parede celular. Segundo (Raven et al, 1996) se uma clula vegetal
colocada em uma soluo com potencial hdrico relativamente baixo, a gua ento
sair
da clula por osmose, o vacolo e o protoplasto iro se retrair, desse modo a
membrana
ser afastada da parede celular esse fenmeno conhecido como plasmlise, o que
aconteceu na experiencia do tubo 4 a 9, pois o meio extracelular se encontrava mais
concentrada em relao ao meio intracelular o que culminou com a deslocao da gua
do meio intracelular para o meio extracelular. O ponto em que no se verificou a
alterao morfolgica das clulas de Rhoeo discolor, foi na primeira, segunda e
terceira
lmina. A plasmlise incipiente indica que a turgescncia igual a zero (Kerbauy,
2006).
De acordo com Taiz e Zeiger, (2004) no era de se esperar a flacidez nas clulas
imersas numa soluo abaixo de 0.3M de sacarose o que se verificou nas clulas
imersas numa soluo a 0.20M e 0.25M de sacarose, pensase que pode ter havido
erros
durante a medio das solues e tambm durante a visualizao microscpica das
lminas visto que o mtodo usado para retirar a camada das clulas no muito
eficiente.

10
Limitaes
Falta de Pra para poder pipetar. Propem-se que deve adquirir o material.
Poucos Microscpios disponveis para a visualizao das clulas em estudo. Isso
influenciou na rpida contagem das clulas. Propem-se o aumento do nmero de
microscpios disponveis.
Tambm a falta de objectos adequados para a remoo da epiderme inferior na Rhoeo
discolor. Propem-se que deve-se adquirir o equipamento adequado.

11
Concluso
Em solues de concentrao de sacarose iguais e superiores 0.4M originam a
plasmlise
e nas concentraes inferiores a 0.4 no origina a plasmlise.
Quando o potencial osmtico inferior a -0.68Mpa, o nmero de clulas
plasmolizadas
aumenta, e quando o potencial inferior a -1.12Mpa portanto considera-se que as
clulas
atingiram a plasmlise incipiente, pois 50 das clulas encontram-se plasmolizadas.
O
potencial osmtico e a percentagem das clulas plasmolizadas so inversamente
proporcionais.
Quando se aumenta o valor da concentrao de sacarose no meio, a percentagem das
clulas plasmolizadas aumenta.
Portanto, quanto maior a concentrao do meio externo, maior ser o movimento
osmtico, e maior ser a ocorrncia da plasmlise nas clulas.

12
Referncias
Carrapio. F. (2006). Plasmlise e Deplasmlise.
Correia, S. (2014). O potencial hdrico. Revista de Cincia Elementar, 1, 1-2.
Kerbauy, G. B. (2004). Fisiologia Vegetal (1 ed.). Rio de Janeiro: Guanabara
Koogan.
Taiz, L., & Zeiger, E. (2004). Fisiologia Vegetal (3 ed.). poto alegre: artmed.
Vendemiatti, A. (2010). Capacitao em Ecofisiologia Florestal I. Piracicaba:
Universida de de So Paulo.
Raven, P. H.; Evert, R. F.; Eichhorn, S. E. (1996). Biologia vegetal. 5.ed. Rio de
Janeiro:
Guanabara Koogan S.A.

13
Anexos
Para calcular o potencial osmtico utilizou-se a frmula 1 0.1 .

Concentrao Potencial

Nr. Total Nr. De clulas Nr. Total de Nr.

Mdio % Mdia de

de

de clulas plasmolizadas

clulas

de

clulas clulas

visualiza-

plasmoliza-

plasmolisa-

plasmoliza-

das

das

das

das

(M)

sacarose osmtico
(Mpa)

0.10

-0.26

60

0.15
-0.41

60

0.20

-0.54

60

0.25

-0.68

60

11

0.30

-0.82

60

10

3
0

13

0.35

-0.97

60

19

0.40

-1.12

60

17

30

3.66666666
7
4.33333333
3
6.33333333
3
10

18.3333333
3
21.6666666
7
31.6666666
7
50

0.45

-1.29

60

12

10

11
33

11

55

0.50

-1.45

60

10

17

12

39

13

65

14