Fermentação: Tipicamente o nº de células vivas varia com o tempo

Estudo Cinético: análise da evolução dos componentes x tempo (biomas-

sa, metabólitos e substratos)
Biomassa: X = x(t) Tangentes das curvas;
Produto: P=p(t) Variam com o tempo Velocidades instantâneas x tempo:
Substrato: S=s(t) Crescimento, Consumo substrato, formação de produto
Quando trabalhamos com processos fermentativos o número das Velocidades volumétricas: m.x (comp)-3 x (tempo)-1
células vivas (X) vai variar em função do tempo, não é uma medida
estática. Se está variando a concentração de células testamos variando
a concentração do agente transformador. Nas enzimas, elas são consumo
biocatalisadores do sistema, nesse caso, no processo fermentativo nós Produtividade de biomassa
temos um sistema válido porque temos a presença dos microrganismo.
Se eles variam em função do tempo, estão crescendo, naturalmente irá
variar todas as demais cinéticas, se X está crescendo o S está sendo
consumido numa velocidade também maior e o P está sendo gerado em É uma medida instantânea pois é em função do tempo, temos uma velocidade
uma concentração também maior. Uma cinética mais acelerada. chamada de velocidade volumétrica porque é uma massa (de células por
Traçado ponto a ponto: forma matemática exemplo) em função do volume de operação daquele sistema pelo tempo,
Dificuldade de medir as transformações: Enzimas, meio externo, então temos 3 vairáveis envolvidas. Estamos colocando uma concentração
cultura mista, medidas indiretas (DBO/DOO) que varia no tempo.
Px é uma medida de produto gerado pelo tempo. A velocidade instantânea
Temos que ter um controle pode ser medida pela tangente de uma curva. Podemos avaliar o crescimento
matemático, um controle das do microrganismo, o consumo de substrato ou a formação de produto.
velocidades cinéticas. Por ser um rx é a velocidade instantânea de crescimento celular, temos como a concen-
sistema biológico e multicomponen- tração de células (X) , massa pelo volume, varia em função do tempo.
te, temos dificuldade de calcular rs é a velocidade instantânea de consumo de substrato, temos a variação da
essas transformações em função concentração de substrato em função do tempo.
do tempo. A velocidade instantâna de geração de produto rp é medida pela derivada de
produto gerado pelo tempo.
Valores experimentais: Curvas;
Ponto inicial para a descrição de
um processo: X e P max:
Permite transposição de escala; {microbiana}: aumenta durante o cultivo
Comparação quantitativa entre Aumenta complexo S->P
as condições de cultivo; pH e T Padronização: Avaliação em relação a {X} em um dado instante

Velocidade de transformação
Fatores de conversão
taxa instantânea dividida
pela concentração celular
No gráfico de X temos uma fase de
adaptação, uma fase de cresci- Podemos junto a concentração microbiana aumentar as demais velocidades,
mento até uma fase de estacioná- pois estamos aumentando uma velocidade de geração de células, mas também
ria. estamos aumentando a velocidade de consumo de substrato e geração de
O substrato durante a fase de adaptação microbiana tende a não ser produto. O que essa velocidade impõe é basicamente em um dado instante de
consumido, passa a ser consumido até um ponto onde o microrganismo análise pegamos a concentração celular daquele ponto e vamos dividir pela
pode ter parado de crescer. Enquanto o microrganismo cresce e conso- concentração celular que temos naquele instante, pois é uma forma de
me substrato ele irá produzir o nosso produto de interesse. Traçar um padronizar a medida instantânea pela concentração de células que temos
procedimento cinético é exatamente isso, colocar vários pontos nessa naquele dado instante.
escala para ter um entendimento das 3 vairáveis de forma independen-
te no sistema
X, S, P: relacionados entre si (em um intervalo de tempo). Fase 1: "Lag" ou Laten-
cia;
Fase 2: Transição:
Fase 3: Logaritmica ou
Considerando dos fatores constantes (X=Xm, P=Pm, S=0) exponencial:
X0,erros experi- Fase 4: Linear
mentais mais Fase 5: Desaceleração;
elevados Fase 6: Estacionária;
Se não forem constantes - Valores instantâneos em consideração: Fase 7: Declinio ou lise.

Fator de conversão é uma medição entre duas grandezas quantificá-

veis do sistema. Vamos relacionar entre si em um dado instante de
tempo, não é mais em função do tempo. Não estamos correlacionando
a eficiência do processo pelo tempo de análise, como é em produtivida-
de e velocidade instantânea. Num dado instante de tempo estamos
convertendo e relacionando duas unidades para que aí sim termos uma
base quantitativa do processo.
São parâmetros cinéticos, com base em medidas instantâneas ou
específicas nós vamos medir o fator de conversão. Se tivermos um
gráfico de rx por rs o coeficiente angular nada mais vai ser do que
calcular o fator de conversão.

Na engenharia bioquímica as fases com maior importância são a F1 e a F3.

Imediatamente após inoculação;

Periodo de adaptação;
Vallores encontrados Não há reprodução celular:
pelo ponto final e inicial
das retas tangentes,
seus valores no eixo X e Duração:
no eixo Y. {} inóculo (X.0)
Tempo da pré-cultura x ativa ou não
Para as velocidades específicas temos: Estado fisiológico
(sendo X = 3,5g/L) Composição do meio
Temos um inóculo a uma determinada concentração, a concentração celular
que colocamos no tempo 0 é invariável, ela não muda. É uma fase morta
,pode ser uma fase muito longa sme que efetivamente você tenha a cinética
Dividimos todas as velocidades por 3,5 para então ter uma velocidade acontecendo, se não temos crescimento celular, quer dizer que a minha
específica. velocidade de crescimento instantâneo ou específico é igual a 0. Não temos
então uma tangente para analisar. Mas por que então é importante?Pois
para os bioprocessos é necessário que aconteça da forma mais curta
possível.
A duração dessa fase vai depender da concentração X0, se o micror-
ganismo já estava bem ativo, se era cultura nova e da composição do Velocidade de reprodução cte
meio. Sem fase exponencial prévia: Fungos
Vesp de crescimento: decresce com o aumento na concentração celular e
Início da reprodução: Gradual t de cultivo
Aumento das velocidades Crescimento linear: Limitação no transporte de nutrientes (OD).
Toda a população começa a se dividir em um intervalo regular médio de Aqui a velocidade começa a decrescer. Aqui começamos a ter uma limitação do
tempo. processo. Tendo então um declínio gradual da velocidade.
Se começamos a ter uma reprodução o X tá crescendo quer dizer que
temos uma velocidade cinética de crescimento, consumo e geração de Esgotamento de nutrientes
produto. Acúmulo de metabólitos inibidores
Velocidades diminuem
Fase mais importante Temos um decréscimo significante nas velocidades, isso porque os nutrientes
Multiplicação: Espaço regular de t podem ter acabado, ou há outros metabólitos, limitação de oxigênio.
É a fase mais importante, pois é uma fase em que o MO está se
multiplicando em um espaço regular de tempo, com máxima eficiência.
A tangente então vai ter sua maior inclinação, logo, as maiores veloci-
dades instantâneas. Balanço entre : Velocidade de crescimento x velocidade de morte
Crescimento exponencial Ponto onde a velocidade realmente decai, a velocidade de crescimento já é igual
a velocidade de morte.

Velocidade de crescimento é diretamente proporcional a concen- {celular} diminui a uma velocidade que excede a produção de novas molécu-
tração de X. las
Lise celular, autólise ou rompimento (enzimas intracelulares).
A velocidade de morte celular já é superior a velocidade de crescimento.

Como tempo de geração = contante

Variação das Veles para 3 tipos característicos de fermentações

intervalo de tempo necessá-
rio para dobrar o valor da
µs (consumo de açúcar) e µp (prod. etanol): perfis semelhantes
concentração celular µx apresenta o crescimento das outras curvas
Metabolito primário produto associado crescimento

Na fase log a velocidade específica de crescimento celular vai ser

máxima e é constante, a taxa de variação de concentração celular em
função do tempovai levar em consideração que estamos tendo a
máxima velocidade de reprodução celular. As demais velocidades
também vão culminar nas máximas velocidades (espera-se). O tempo
de geração celular também será constante. Temos então uma veloci-
dade logarítimica. As velocidades são muito aceleradas nessa fase. Se
ela é máxima, a tangente começará então a reduzir as suas velocida- Exemplos: Vitaminas e aminoácidos.
des.
Gaden classificou todos os processos fermentativos em 3 classes que
são basicamente divididas em função do comportamento das velocida-
des específicas dentro de um processo fermentativo.
O caso 1 de Gaden há um perfil cinético semelhante ao longo de todo o
processo fermentativo para as três velocidades específicas que
estamos analisando. A velocidade de consumo acelerou, chegou a um
máximo e caiu, a de produção também acelerou e decaiu e a de cresci-
mento também acelerou e decaiu. O caso 1 de Gaden nos diz que há um
perfil semelhante ao longo do processo fermentativo entre o µs e o
µpe também entre o µx . Todo produto que vai cair na classificação do
caso 1 de gaden, vai ser chamado de metabólito primário, pois é um
produto que está diretamente associado ao crescimento celular.
substrato, mas só para sua metabolização, sem gerar produto e a partir
de um ponto do processo aí sim ele começou a gerar esse produto e ter
um perfil semelhante para as 3 velocidades.
Lidamos com o caso 1 de Gaden.
·Fermentações complexas (penicilina, antibióticos e toxinas):
Máxima µp: quando as demais sofreram redução significativa:
Não há associação entre as µ: sem relação cinética definida
Metabólito secundário

Não temos um perfil semelhante ao longo do processo, geralmente são

fermentações complexas, a máxima velocidade específica de geração de
produto se dá quando as outras velocidades são mínimas. Não há uma
associação cinética aqui.
O microrganismo enquanto não tinha velocidade cinética ele não
cresceu, X0 =Xfinal, quando passou para uma fase de aceleração e
passou a ter cinética de crescimento, se o produto está diretamente
associado ao crescimento, segue a mesma inclinação, as mesmas
velocidades.

Duas fases distintas:

A: µsrelacionada a µx -> sem formação de produto (ac. cit.)
B: Semelhança nos perfis das 3 velocidades: boa correlação
Formação de produto parcialmente associada ao crescimento
A partir daqui temos comportamentos A concentração de produto começa a aumentar quando a velocidade de
semelhantes crescimento já está diminuindo, a máxima velocidade de produto acontece
quando a de X já está em 0. São conhecidos como metabólitos secundários.

Exemplo: Ácido Lático

O consumo está bem relacionado ao microrganismo e não tem uma
adequação com a produção. a partir de determinado ponto temos uma
boa associação cinética. Os produtos são parcialmente associodos ao
crescimento. Significa que o microrganismo consumiu um pouco de