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Precipitação simples de DNA

Materiais necessários:

- Fruta (banana, kiwi, morango funcionam bem)

- 5g de detergente;

- 2g de sal;

- 100 mL de água;

- 100 mL de álcool gelado (preferencialmente isopropanol, mas etanol 100% também funciona. Acho
que dá pra achar isopropanol em farmácia. Colocar no freezer por pelo menos 30 min antes de fazer
a prática);

- Banho maria a 60°C ou água quente para fazer um banho improvisado;

- Gaze ou filtro de café;

- 2 béquers ou outro recipiente de vidro;

- Recipientes para amassar as frutas e para fazer o banho maria;

- Gancho de vidro, alça de repicagem ou clip de papel;

Procedimento:

1) Amassar a fruta de escolha até conseguir uma pasta bem homogênea;


2) Num recipiente separado, misturar a água, o detergente e o sal. Evitar formar muitas bolhas.
Esse é o tampão de extração;
3) Adicionar a fruta ao tampão de extração e misturar gentilmente, mas bem, novamente
evitando formar bolhas;
4) Preparar o banho-maria a 60°C e colocar a mistura para incubar por 15 min. A mistura deve
estar em um recipiente que conduza bem o calor. Prato, béquer grande, saco plástico tipo
ziploc, etc.
5) Filtrar a mistura usando gaze ou filtro de café (talvez o filtro de café seja muito fino, mas
cabe testar), transferindo para um béquer. A ideia é retirar o material sólido e ficar apenas
com um líquido mais ou menos claro. O líquido pode ficar turvo e da cor da fruta usada.
6) Colocar o álcool lentamente, escorrendo pela lateral do béquer para formar duas fases
separadas: uma de álcool em cima, e uma do extrato da fruta no fundo. Na interface entre
os dois, vai se formar uma “nuvem” esbranquiçada, que é o DNA precipitado.

Questões que podem ser trabalhadas:

- Qual o papel de cada reagente no protocolo? Como isso se relaciona com as propriedades do DNA?

- Como foi possível ver o DNA?

- O DNA precipitado está puro?

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